CN115177590A - 一种甲苯达唑类脂质体的制备方法及应用 - Google Patents
一种甲苯达唑类脂质体的制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种甲苯达唑类脂质体的制备方法及应用，通过以胆固醇和大豆蛋白为膜材，使用薄膜蒸发法制备得到了甲苯达唑脂质体。本发明优化了制备工艺，使用脂质体作为抗葡萄膜黑色素瘤药物的载体可以改善治疗效果，减少用药剂量，降低细胞毒性，减轻甚至避免变态和免疫反应，减轻病人痛苦。
Description
技术领域
本发明涉及甲苯达唑的新制剂技术领域，具体为一种甲苯达唑类脂质体的制备方法及应用。
背景技术
癌症是世界上威胁人类健康最重要的疾病之一。研究表明，葡萄膜黑色素瘤起源于眼内葡萄膜黑素细胞，通常由于GNAQ或GNA11突变引起，现已成为成年人中最常见的原发性眼内恶性肿瘤。葡萄膜黑色素瘤通常有50％以上的患者最终会发生血行转移，其中80％以上的患者会经血液转移至肝脏，虽然现在临床上有许多针对转移性葡萄膜黑色素瘤的治疗，如肝脏定向治疗、免疫治疗、系统性化疗等治疗方法，但总体缓解率不到10％，且没有任何一种药物能显著改善总生存率，这使得患者的中位生存期只有6～12月。本发明主要利用非肿瘤药物甲苯达唑开发出一种靶向治疗效果优异且副作用低的新型脂质体给药剂型，以提高葡萄膜黑色素瘤患者生存率及改善预后。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提出了一种甲苯达唑类脂质体的制备方法及应用，使用脂质体作为抗葡萄膜黑色素瘤药物的载体可以改善治疗效果，减少用药剂量，降低细胞毒性，减轻甚至避免变态和免疫反应，减轻病人痛苦。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种甲苯达唑类脂质体的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将2.790g甲苯达唑粉末充分溶解于25mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入9.45mL盐酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑盐酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑盐酸盐脂质体。
进一步地，包括以下步骤：
步骤S1：将3.100g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入0.683mL甲磺酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑甲磺酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑甲磺酸盐脂质体。
进一步地，包括以下步骤：
步骤S1：将3.000g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入10.15mL硫酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑硫酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑硫酸盐脂质体。
进一步地，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑盐酸盐最佳质量。
进一步地，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑甲磺酸盐最佳质量。
进一步地，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑硫酸盐最佳质量。
一种根据权利要求1-3所述的甲苯达唑类脂质体的应用，所述甲苯达唑类脂质体用于治疗乳腺癌。
本方法发明利用获得美国食品和药物管理局(FAD)批准的甲苯达唑类药物中进行体外抗葡萄膜黑色素瘤活性的测试。为提高药物的溶解度和生物利用度，首先将甲苯达唑药物制成盐酸盐、甲磺酸盐和硫酸盐等散剂，使用pH试纸法检测药盐溶液的pH值，并通过人工目视法观察药盐的形态及颜色，以评价药物的品质；利用紫外分光光度法测定甲苯达唑药物的溶解度，同时将甲苯达唑可溶性盐药物用于体外葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡实验，以考察甲苯达唑类药物及其盐类的体外抗癌活性。为制备具有优良性能的载药脂质体，基于传统薄膜蒸发法，于碱性条件中洗涤脂质体，然后通过正交实验确定载药脂质体的最佳配方；使用透射电镜观察脂质体的形态，于粒度分析仪中测定脂质体的粒度和Zeta电位，并使用紫外分光光度法检测脂质体的包封率，以分析本发明所制备的脂质体药物的性能。为考察甲苯达唑脂质体给药系统的抗葡萄膜黑色素瘤活性，将甲苯达唑脂质体给药系统用于体外葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡实验，同时结合甲苯达唑散剂的抗葡萄膜黑色素瘤活性，得到一种最佳的甲苯达唑类药物及其给药形式。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、新药从发现到临床应用花费的时间非常长，且需要消耗大量的人力和物力，严重限制了抗癌药物的发展，而本发明通过开发传统甲苯达唑药物的新用途可显著缩短抗癌药物的研发和审批周期，同时降低药物的研发成本及风险。
2、脂质体作为一种药物剂型有着悠久的发展历史，它经历了比其他任何药物递送系统都更严格的研究，这为开发脂质体类药物提供了一个极好的机会。
3、本发明制备的脂质体药物递送系统可提高药物的稳定性并降低其毒性，具有良好的靶向作用和缓释作用，同时还具有给药途径多样、药物分布可控等优势。
4、使用脂质体作为抗葡萄膜黑色素瘤药物的载体可以改善治疗效果，减少用药剂量，降低细胞毒性，减轻甚至避免变态和免疫反应，减轻病人痛苦。
附图说明
以下结合附图和实施例将本发明做进一步说明。
图1为400X显微镜下甲苯达唑脂质体的药物图像。
具体实施方式
下面通过对发明具体实施例的详细说明进一步阐述本发明，但实施例不是对本发明的限制。
实施例1
本发明提供一种技术方案：一种甲苯达唑类脂质体的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将2.790g甲苯达唑粉末充分溶解于25mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入9.45mL盐酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑盐酸盐；
甲苯达唑盐酸盐其活性筛选：
(1)pH检测
准确称取0.002g甲苯达唑盐酸盐，加入蒸馏水使其充分溶解，使用pH试纸测定。通过比较pH试纸的颜色确定甲苯达唑盐酸盐溶液的pH值。
(2)溶解度的测定
准确称取0.02g甲苯达唑盐酸盐，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，使用紫外分光光度计分别测定对应溶液的吸光度，分别以0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL溶液溶度为横坐标，其相应吸光度为纵坐标绘制甲苯达唑药物的标准曲线，计算其回归曲线；再称取相同量的药盐，加入20mL蒸馏水使其溶解，使用相应波长的紫外分光光度计测定其吸光度，计算得到甲苯达唑盐酸盐的溶解度。
(3)乳腺癌细胞凋亡检测
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中，加入2mL含10％FBS孵育24h；用PBS清洗细胞，吸去死细胞和代谢物，换不含血清的0.1％BSA酚红培养基；以不同的时间间隔培养和收获细胞，再次使用温热的PBS洗涤去除死细胞，并通过细胞计数器和台盼蓝染料测定处理后的活细胞数量；乳腺癌细胞处理3天后，用温热的PBS洗涤细胞，胰蛋白酶消化，并通过离心机离心收获；用0.4％台盼蓝溶液染去细胞核浓缩或破碎的凋亡细胞；使用自动细胞计数器对细胞计数，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑盐酸盐脂质体。
具体而言，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑盐酸盐最佳质量。
一种根据权利要求1-3所述的甲苯达唑类脂质体的应用，所述甲苯达唑类脂质体用于治疗乳腺癌。
(1)脂质体的形态观察
将适量的甲苯达唑盐酸盐脂质体滴于载玻片上，在透射电镜下观察其形态。
(2)脂质体粒度和Zeta电位的测定
取2mL甲苯达唑盐酸盐脂质体置于特殊的石英盘中，将石英盘放入粒度分析仪，测定脂质体的粒度和Zeta电位。
(3)脂质体包封率的测定
准确称取0.02g甲苯达唑盐酸盐脂质，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，用紫外分光光度计分别测定溶液浓度为0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL的吸光度，得到甲苯达唑标准曲线。取0.5mL药物脂质体混悬液放入专用离心管中，于4℃下密封3000r/min离心2h。取出上清液，加入0.8mL体积比DMSO：甲醇为1:3的混合液，混合均匀后加入0.2mL三氯甲烷，摇匀，下层沉淀物使用上述相同方法处理。使用紫外分光光度计分别测定上清液和沉淀物的吸光度，根据标准曲线方程计算甲苯达唑盐酸盐脂质以外的药物的含量。
甲苯达唑盐酸盐和脂质体给药对乳腺癌的体外抑制活性对比研究
(1)乳腺癌细胞活性测定
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中培养，加入2mL 10％FBS孵育24h。1天后，用PBS洗涤细胞，并更换培养基。3天后，以不同的时间间隔收获细胞，通过用温热的PBS温和洗涤去除死细胞，并通过自动细胞计数器计算活细胞数量，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
(2)MTT检测
将细胞以6×104个/mL的密度置于96孔培养板中，使用二氧化碳培养箱培养3天，培养温度为37℃，二氧化碳浓度为5％。样品浓度梯度分别为0、0.5、1、2、10、20μM，向每孔培养板中加入MTT试剂，使用ELISA计数器在540nm处测定光密度。
实施例2
本发明提供一种技术方案：一种甲苯达唑类脂质体的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将3.100g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入0.683mL甲磺酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑甲磺酸盐；
甲苯达唑甲磺酸盐其活性筛选：
(1)pH检测
准确称取0.002g甲苯达唑甲磺酸盐，加入蒸馏水使其充分溶解，使用pH试纸测定。通过比较pH试纸的颜色确定甲苯达唑甲磺酸盐溶液的pH值。
(2)溶解度的测定
准确称取0.02g甲苯达唑甲磺酸盐，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，使用紫外分光光度计分别测定对应溶液的吸光度，分别以0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL溶液溶度为横坐标，其相应吸光度为纵坐标绘制甲苯达唑药物的标准曲线，计算其回归曲线；再称取相同量的甲苯达唑甲磺酸盐，加入20mL蒸馏水使其溶解，使用相应波长的紫外分光光度计测定其吸光度，计算得到甲苯达唑甲磺酸盐的溶解度。
(3)乳腺癌细胞凋亡检测
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中，加入2mL含10％FBS孵育24h；用PBS清洗细胞，吸去死细胞和代谢物，换不含血清的0.1％BSA酚红培养基；以不同的时间间隔培养和收获细胞，再次使用温热的PBS洗涤去除死细胞，并通过细胞计数器和台盼蓝染料测定处理后的活细胞数量；乳腺癌细胞处理3天后，用温热的PBS洗涤细胞，胰蛋白酶消化，并通过离心机离心收获；用0.4％台盼蓝溶液染去细胞核浓缩或破碎的凋亡细胞；使用自动细胞计数器对细胞计数，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑甲磺酸盐脂质体。
具体而言，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑甲磺酸盐最佳质量。
一种根据权利要求1-3所述的甲苯达唑类脂质体的应用，所述甲苯达唑类脂质体用于治疗乳腺癌。
(1)脂质体的形态观察
将适量的甲苯达唑甲磺酸盐脂质体滴于载玻片上，在透射电镜下观察其形态。
(2)脂质体粒度和Zeta电位的测定
取2mL甲苯达唑甲磺酸盐脂质体置于特殊的石英盘中，将石英盘放入粒度分析仪，测定脂质体的粒度和Zeta电位。
(3)脂质体包封率的测定
准确称取0.02g甲苯达唑甲磺酸盐，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，用紫外分光光度计分别测定溶液浓度为0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL的吸光度，得到甲苯达唑标准曲线。取0.5mL甲苯达唑甲磺酸盐脂质体混悬液放入专用离心管中，于4℃下密封3000r/min离心2h。取出上清液，加入0.8mL体积比DMSO：甲醇为1:3的混合液，混合均匀后加入0.2mL三氯甲烷，摇匀，下层沉淀物使用上述相同方法处理。使用紫外分光光度计分别测定上清液和沉淀物的吸光度，根据标准曲线方程计算甲苯达唑甲磺酸盐脂质以外的药物的含量。
甲苯达唑甲磺酸盐和脂质体给药对乳腺癌的体外抑制活性对比研究
(1)乳腺癌细胞活性测定
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中培养，加入2mL 10％FBS孵育24h。1天后，用PBS洗涤细胞，并更换培养基。3天后，以不同的时间间隔收获细胞，通过用温热的PBS温和洗涤去除死细胞，并通过自动细胞计数器计算活细胞数量，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
(2)MTT检测
将细胞以6×104个/mL的密度置于96孔培养板中，使用二氧化碳培养箱培养3天，培养温度为37℃，二氧化碳浓度为5％。样品浓度梯度分别为0、0.5、1、2、10、20μM，向每孔培养板中加入MTT试剂，使用ELISA计数器在540nm处测定光密度。
实施例3
本发明提供一种技术方案：一种甲苯达唑类脂质体的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将3.000g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入10.15mL硫酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑硫酸盐；
甲苯达唑硫酸盐其活性筛选：
(1)pH检测
准确称取0.002g甲苯达唑硫酸盐，加入蒸馏水使其充分溶解，使用pH试纸测定。通过比较pH试纸的颜色确定甲苯达唑硫酸盐溶液的pH值。
(2)溶解度的测定
准确称取0.02g甲苯达唑硫酸盐，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，使用紫外分光光度计分别测定对应溶液的吸光度，分别以0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL溶液溶度为横坐标，其相应吸光度为纵坐标绘制甲苯达唑药物的标准曲线，计算其回归曲线；再称取相同量的甲苯达唑硫酸盐，加入20mL蒸馏水使其溶解，使用相应波长的紫外分光光度计测定其吸光度，计算得到甲苯达唑硫酸盐的溶解度。
(3)乳腺癌细胞凋亡检测
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中，加入2mL含10％FBS孵育24h；用PBS清洗细胞，吸去死细胞和代谢物，换不含血清的0.1％BSA酚红培养基；以不同的时间间隔培养和收获细胞，再次使用温热的PBS洗涤去除死细胞，并通过细胞计数器和台盼蓝染料测定处理后的活细胞数量；乳腺癌细胞处理3天后，用温热的PBS洗涤细胞，胰蛋白酶消化，并通过离心机离心收获；用0.4％台盼蓝溶液染去细胞核浓缩或破碎的凋亡细胞；使用自动细胞计数器对细胞计数，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑硫酸盐脂质体。
具体而言，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑硫酸盐最佳质量。
一种根据权利要求1-3所述的甲苯达唑类脂质体的应用，所述甲苯达唑类脂质体用于治疗乳腺癌。
(1)脂质体的形态观察
将适量的甲苯达唑硫酸盐脂质体滴于载玻片上，在透射电镜下观察其形态。
(2)脂质体粒度和Zeta电位的测定
取2mL甲苯达唑硫酸盐脂质体置于特殊的石英盘中，将石英盘放入粒度分析仪，测定脂质体的粒度和Zeta电位。
(3)脂质体包封率的测定
准确称取0.02g甲苯达唑硫酸盐，加1-2mL溶剂，加水至20mL，配制成1000μg/mL溶液，用紫外分光光度计分别测定溶液浓度为0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/mL的吸光度，得到甲苯达唑标准曲线。取0.5mL药物脂质体混悬液放入专用离心管中，于4℃下密封3000r/min离心2h。取出上清液，加入0.8mL体积比DMSO：甲醇为1:3的混合液，混合均匀后加入0.2mL三氯甲烷，摇匀，下层沉淀物使用上述相同方法处理。使用紫外分光光度计分别测定上清液和沉淀物的吸光度，根据标准曲线方程计算甲苯达唑硫酸盐脂质以外的药物的含量。
甲苯达唑硫酸盐和脂质体给药对乳腺癌的体外抑制活性对比研究
(1)乳腺癌细胞活性测定
将乳腺癌细胞以5×105个/孔的密度置于六孔培养皿中培养，加入2mL 10％FBS孵育24h。1天后，用PBS洗涤细胞，并更换培养基。3天后，以不同的时间间隔收获细胞，通过用温热的PBS温和洗涤去除死细胞，并通过自动细胞计数器计算活细胞数量，使用活细胞成像仪观察细胞形态。
(2)MTT检测
将细胞以6×104个/mL的密度置于96孔培养板中，使用二氧化碳培养箱培养3天，培养温度为37℃，二氧化碳浓度为5％。样品浓度梯度分别为0、0.5、1、2、10、20μM，向每孔培养板中加入MTT试剂，使用ELISA计数器在540nm处测定光密度。
Zata电位法测得粒径的大小见下表：
参见图1，图1为400倍显微镜下甲苯达唑脂质体的药物图像，图片中第一排最左侧为标号1，第三排最右侧为标号9，图1中的图片标号1、2、6和8是我们的理想结果，其中图片标号2和8粒径较小。图片标号3、4和7不溶性白色药物颗粒。图片标号5和9药球粒径较大。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (7)
1.一种甲苯达唑类脂质体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤S1：将2.790g甲苯达唑粉末充分溶解于25mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入9.45mL盐酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑盐酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑盐酸盐脂质体。
2.根据权利要求1所述的甲苯达唑类脂质体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤S1：将3.100g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入0.683mL甲磺酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑甲磺酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑甲磺酸盐脂质体。
3.根据权利要求1所述的甲苯达唑类脂质体的制备方法，，其特征在于：包括以下步骤：
步骤S1：将3.000g甲苯达唑粉末充分溶解于250mL四氢呋喃溶液中；
步骤S2：向步骤S1中加入10.15mL硫酸溶液，室温下使溶剂完全蒸发得到无定形、浅棕色物质；
步骤S3：将步骤S2得到的物质溶解于500mL乙醇中，在室温下蒸发乙醇，得到灰白色粉末，即得甲苯达唑硫酸盐；
步骤S4：取0.4g胆固醇和0.6g大豆蛋白溶解于50mL氯仿中，加入0.1mL荧光剂，于超声波振荡器中溶解；
步骤S5：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解；
步骤S6：将步骤S5中的溶液在40-50℃的水浴中旋转蒸发15分钟，直至溶剂完全蒸发；
步骤S7：用pH 9.0的碳酸钠缓冲溶液溶解脂质体膜并将步骤S6所得物质包封于脂质体膜中，即得甲苯达唑硫酸盐脂质体。
4.根据权利要求1所述的甲苯达唑类脂质体的制备方法，其特征是，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑盐酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑盐酸盐最佳质量。
5.根据权利要求2所述的甲苯达唑类脂质体的制备方法，其特征是，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑甲磺酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑甲磺酸盐最佳质量。
6.根据权利要求3所述的甲苯达唑类脂质体的制备方法，其特征是，所述步骤S5中的：向步骤S4中加入适量甲苯达唑硫酸盐，震荡数分钟使药物完全溶解，通过用正交实验确定甲苯达唑硫酸盐最佳质量。
7.一种根据权利要求1-3所述的甲苯达唑类脂质体的应用，其特征是，所述甲苯达唑类脂质体用于治疗乳腺癌。
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