CN115043898A - 生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 - Google Patents
生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115043898A CN115043898A CN202110250322.1A CN202110250322A CN115043898A CN 115043898 A CN115043898 A CN 115043898A CN 202110250322 A CN202110250322 A CN 202110250322A CN 115043898 A CN115043898 A CN 115043898A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antigen
- biotinylated antigen
- biotinylated
- kit
- biotin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 66
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 64
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 64
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims abstract description 38
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims abstract description 22
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-Glutamic acid Natural products OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 10
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N glutamic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 7
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 7
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 5
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 claims description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N Aspartic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229930182847 D-glutamic acid Natural products 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OYIFNHCXNCRBQI-SCSAIBSYSA-N D-2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 2
- OYIFNHCXNCRBQI-BYPYZUCNSA-N L-2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 2
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001279 adipic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 2
- 150000002311 glutaric acids Chemical class 0.000 claims description 2
- RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N phenyl 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC1=CC=CC=C1 RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003444 succinic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 19
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 13
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 5
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- YLKUQAFDYMLBCK-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;ethyl acetate Chemical compound CCCCO.CCOC(C)=O YLKUQAFDYMLBCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N Dioxetane Chemical compound C1COO1 BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 206010036697 Primary hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 101001064468 Pseudozyma aphidis (strain ATCC 32657 / CBS 517.83 / DSM 70725 / JCM 10318 / NBRC 10182 / NRRL Y-7954 / St-0401) Lipase A Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-O acridine;hydron Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3[NH+]=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 208000037920 primary disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/78—Thyroid gland hormones, e.g. T3, T4, TBH, TBG or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/575—Hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
本发明涉及一种生物素化抗原衍生物，所述生物素化抗原衍生物具有式B‑L‑(Ag)2的结构，其中，B源自于生物素PEG活性酯，L表示连接臂，Ag源自于抗原，其中，所述连接臂L通过酰胺键与1分子生物素PEG活性酯和2分子抗原连接。本发明的生物素化抗原衍生物因其特定的结构，提高抗原衍生物与标记抗体的结合竞争力，从而提高检测试剂盒的灵敏度。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测试剂领域。具体地，本发明涉及生物素化抗原衍生物，尤其涉及生物素化反三碘甲状腺原氨酸及相关试剂盒和用途。
背景技术
目前，针对小分子物质的测定通常采用生物素-链霉亲和素放大技术。其中生物素-亲和素系统是20世纪70年代末发展起来的新型生物反应放大系统，其基于生物素与亲和素既能偶联抗原(或抗体)分子，又能偶联一系列示踪物质，且可桥联抗原抗体系统和示踪物质系统。从而，由于其多级放大效应，赋予了传统标记免疫分析更高的检测灵敏度。
在传统标记免疫分析中，化学发光技术占据着重要的地位。在化学发光技术中，测定小分子物质的方式多采用竞争法。通常，先将生物素化抗原包被至磁珠上形成固相抗原，待测的抗原与固相抗原竞争性地与标记抗体结合。从而，通过与样本中所含抗原的量呈负相关的显色强度或测定信号值强度来确定样本中所含抗原的量。
周知，人体内的许多激素，如反三碘甲状腺原氨酸(reverse triiodothyronine，rT3)的正常含量为皮克(pg)级别。但是这些微量激素在相关疾病的诊疗中有着重要的意义。诸如，rT3的生物转化特征使其在甲状腺功能减退(简称甲减)相关疾病，尤其是原发性甲减和正常甲状腺病态综合征(euthyroid sick syndrome，ESS)的鉴别诊断中具有很高的临床价值，可避免已罹患原发疾病，如肝脏疾病、肾脏疾病、心脏疾病、肿瘤、糖尿病等患者在甲状腺功能异常时的非必要治疗。
在检测这些体内微量的小分子物质时，一旦含量在检测限以下，难以从所制备抗体的角度来解决该问题。这是因为：第一，小分子抗体制备较为困难，研发新的抗体费时且成本巨大；第二，在化学发光的检测中，试剂的灵敏度随着稀释度的增大而增大，但是稀释度过大会导致试剂稳定性下降，精密度变差；第三，对于体内微量的小分子物质，其生物素标记抗原的量无法进行调整，使得在灵敏度的研究上受到限制。
因此，这就需要从系统灵敏度的角度出发，开发出一种在保证效价的情况下，提高检测灵敏度的试验工艺。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明旨在提供一种新型生物素化抗原衍生物，其包括1分子生物素和2分子抗原(例如，rT3)，从而增强抗原与标记抗体的结合竞争力，进而提高检测试剂盒的灵敏度。
因此，本发明涉及一种生物素化抗原衍生物，具有式B-L-(Ag)2的结构。其中，B表示生物素PEG活性酯，L表示连接臂，Ag表示抗原；其中，所述连接臂L通过酰胺键与1分子生物素PEG活性酯和2分子抗原连接。在一些实施方式，该连接臂具有1个氨基端和2个羧基端，从而通过所述氨基端与所述生物素PEG活性酯连接，并且通过所述羧基端与两分子所述抗原连接。在一些实施方式中，抗原可具有至少一个氨基。
优选地，本发明的生物素化抗原衍生物具有下式I所示的结构：
其中，在式I中，n为3-6，优选为4；
连接臂L衍生自α-氨基二元酸或β-氨基二元酸，其中所述二元酸选自丁二酸、戊二酸和己二酸；
所述Ag表示具有氨基的抗原，优选为反三碘甲状腺原氨酸。
优选地，所述连接臂可衍生自DL-氨基丁二酸、L-氨基丁二酸、D-氨基丁二酸、DL-谷氨酸、L-谷氨酸、D-谷氨酸、DL-α-氨基己二酸、L-α-氨基己二酸和D-α-氨基己二酸；优选衍生自DL-谷氨酸、L-谷氨酸和D-谷氨酸；更优选衍生自L-谷氨酸。
在尤其优选的实施方式中，本发明的生物素化抗原衍生物采用含有2个羧基端、1个氨基端的谷氨酸来与生物素-PEG4活化酯连接，形成接头，再与两分子抗原(rT3)偶联，形成生物素化抗原衍生物，具有式II所示的结构：
进一步地，本发明涉及一种试剂盒，所述试剂盒包括：
试剂1，免疫磁微粒—链酶亲和素磁微粒；
试剂2，生物素端—根据上文所述的生物素化抗原衍生物；以及
试剂3，标记物端—与生物素端抗原衍生物相应的标记物标记的单克隆抗体。
优选地，试剂盒中，磁微粒的浓度可为0.01mg/mL～1.00mg/mL，所述磁微粒具有超顺磁性并且表面含有亲和素基团。
优选地，试剂盒中，标记物标记的单克隆抗体的浓度可为0.01μg/mL～1.00μg/mL，并且所使用的标记物可包括酶(如HRP、β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶等)、生物素、地高辛、胶态金属(如胶体金等)、荧光染料(如荧光素、罗丹明、德克萨斯红等)、化学发光化合物或生物发光化合物(如二氧杂环丁烷、鲁米诺或吖啶鎓等)。并且，可以使用任何本领域众所周知的标记步骤，如酶或生物素基团的共价偶联、碘化、磷酸化、生物素化等来得到该标记物端。优选地，在一些实施方式中，标记物标记的单克隆抗体可为吖啶酯标记的鼠抗反三碘甲状腺原氨酸单克隆抗体；生物素化抗原衍生物的浓度可为0.2ng/mL～200ng/mL，并且优选为生物素化反三碘甲状腺原氨酸。
试剂盒中的各试剂可以包括本领域常规使用的添加剂，诸如缓冲剂、无机盐离子、表面活性剂等，以及常规使用的溶剂，诸如纯化水。例如，试剂1中可进一步包括缓冲液(约0.5g/L～20g/L)、无机盐离子(约5.0g/L～20.0g/L)、表面活性剂(约0.01mL～5mL/L)、稳定剂(约5g/L～40g/L)、防腐剂(约0.4mL/L～5mL/L)和消泡剂(约0.01μL/L～1μL/L)等，并且以纯化水作为溶剂。试剂2除了相应的生物素化抗原之外，可进一步包括例如缓冲液(约0.5g/L～20g/L)、无机盐离子(约5.0g/L～20.0g/L)、表面活性剂(约0.01mL/L～5mL/L)、稳定剂(约5g/L～40g/L)和防腐剂(约0.4mL/L～5mL/L)等，并且以纯化水作为溶剂。试剂3除了相应的抗体之外，可进一步包括例如缓冲液(约0.5g/L～20g/L)、无机盐离子(约5.0g/L～20.0g/L)、表面活性剂(约0.01mL～5.0mL/L)、稳定剂(约10g/L～30g/L)、解离剂(约0.1μg/mL～10μg/mL)和防腐剂(约0.4mL/L～5mL/L)，并且以纯化水作为溶剂。
上述试剂盒进一步可包括相应抗原的校准品、质控品等。对于校准品和质控品等，可例如根据本领域常规技术来配制。例如，除了相应的抗原外，校准品中可包括缓冲液(约2.00g/L～20.00g/L)、无机盐离子(约1.00g/L～10.00g/L)、pH调节剂(约3.00mL/L～20.00mL/L)、稳定剂(约3.00g/L～300.00g/L)、表面活性剂(约0.10mL/L～10.00ml/L)和防腐剂(约0.30mL/L～30.00mL/L)等。
对于上述添加剂的具体选择，本领域技术人员可根据需要进行确定，在此不再赘述。
进一步地，本发明涉及上文所述的生物素化抗原衍生物在提高检测相应抗原灵敏度中的用途。本发明的生物素化抗原衍生物通过含有1：2的生物素部分和抗原分子，提高抗原衍生物与抗体的结合竞争力，从而提高检测试剂盒的灵敏度。
通过设计用于将生物素与抗原连接起来的连接臂，本发明能够在不影响试剂效价的情况下，大大增加了检测体系的灵敏度。从而针对于目前市场上的用于检测微量(pg级别)激素的产品因灵敏度较低而无法满足市场需求的情况，通过采用磁微粒化学发光技术，利用竞争法以灵敏度更高的方式对体内的微量激素进行测定。此外，也为小分子抗原的抗体的制备难度大、抗体亲和力差，但灵敏度要求高的小分子检测提供了解决方案。
附图说明
图1示出了本发明的测试例中，由试剂盒1的测定试剂得到的拟合曲线；
图2示出了本发明的测试例中，由试剂盒2的测定试剂得到的拟合曲线；以及
图3示出了本发明的测试例中，由试剂盒3的测定试剂得到的拟合曲线。
具体实施方式
下文将结合具体实施例和附图，来具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，所描述的实施例仅仅是本申请的部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，例如，对试剂盒中的常规试剂(如pH调节剂、无机盐离子、表面活性剂和稳定剂等)的成分选择及用量范围选择，都应当属于本申请保护的范围。
除非另有说明，否则以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。除非另有说明，否则以下实施例中所用的试剂均为常规生化试剂，商购可得。
实施例1.制备式II所示的生物素化抗原衍生物
具体地，依据下示反应路线1来制备式II所示的化合物。
反应路线1
其中，上述反应路线1中，化合物a、化合物b和基团R的结构如下所示：
步骤1：将3.6mg化合物1(0.024mmol)及14.4mg化合物a(0.024mmol)于10mL棕色硼硅玻璃瓶中溶解在2mL DMF(二甲基甲酰胺)中，随后将其置于滚轴混匀仪上于室温下混匀，充分反应24h。
步骤2：将20.2mg DCC(二环己基碳二亚胺)(0.097mmol)溶解在0.5mL DMF中，将11.28mg NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)(0.097mmol)溶于另一份0.5mL DMF中。然后，将溶有NHS、DCC的DMF溶液依次加入到步骤1中充分反应24h后的反应体系中，并将其置于滚轴混匀仪上混匀，充分反应24h。然后，向反应体系中加入溶解有40mg化合物b(0.061mmol)的2mL DMF溶液，充分反应24h。随后，通过层析柱分离纯化(洗脱剂：乙酸乙酯-正丁醇＝8:2)得到26mg浅黄色油状化合物，经鉴定为式II的化合物(0.014mol，反应产率46％)。
HRMS(ESI)：m/z 1886.8394(M+H)。
实施例2.以赖氨酸为连接臂来制备式III所示的生物素化抗原衍生物
具体地，依据下示反应路线2来制备式III所示的化合物。其中，化合物a、化合物b和基团R具有与实施例1中相同的限定。
反应路线2
步骤1：将3.45mg化合物4(0.023mmol)及27.8mg化合物a(0.047mmol)于10mL棕色硼硅玻璃瓶中溶解在2mLDMF中，随后将其置于滚轴混匀仪上于室温下混匀，充分反应24h。
步骤2：将9.7mg DCC(0.047mmol)溶解在0.5mL DMF中，将5.4mg NHS(0.047mmol)溶解在另一份0.5mL DMF中。然后，将溶有NHS、DCC的DMF溶液依次加入到步骤1中充分反应24h后的反应体系中，并将其置于滚轴混匀仪上混匀，充分反应24h。然后，向反应体系中加入溶解有20mg化合物b(0.03mmol)的2mL DMF溶液，充分反应24h。随后，通过层析柱分离纯化(洗脱剂：乙酸乙酯-正丁醇＝8:2)得到20mg浅黄色油状化合物，经鉴定为式III的化合物(0.012mol，反应产率40％)。
HRMS(ESI)：m/z 1726.3315(M+H)。
实施例3.制备无连接臂的式IV所示的生物素化抗原衍生物
具体地，依据下示反应路线3来制备式IV所示的化合物。
反应路线3
将40mg化合物b(0.061mmol)溶解在2mL DMF中，然后加入35.3mg化合物a(0.061mmol)，置于滚轴混匀仪上于室温下混匀，反应24h。随后，通过层析柱分离纯化(洗脱剂：乙酸乙酯-正丁醇＝8:2)得到44mg浅黄色油状化合物，经鉴定为式IV的化合物(0.044mol，反应产率72％)。
HRMS(ESI)：m/z 1125.0173(M+H)。
测试例
校准品的配制
首先，利用下表1中所示的组成和比例来配置校准品稀释液，然后在5份校准品稀释液中分别加入睾酮抗原来得到校准品A至校准品E。其中，校准品A至校准品E中抗原的浓度分别为：CalA：0.0ng/mL；CalB：0.2ng/mL；CalC：1ng/mL；CalD：5ng/mL；CalE：10ng/mL。
表1，校准品稀释液的配制
| 试剂名称 | 校准品稀释液 |
| Tris | 12.11g/L |
| 氯化钠 | 8.5g/L |
| 盐酸 | 约5-7mL/L |
| 海藻糖 | 20.00g/L |
| 牛血清白蛋白 | 10.00g/L |
| TWeen-20 | 0.55ml/L |
| 生物防腐剂PC-950 | 3.00mL/L |
| 纯化水 | 定容至1L |
试剂盒的配置
利用上述实施例1至实施例3所得的化合物依据下表2至表4的组成和比例来分别配置相应的试剂盒1至试剂盒3。
表2，试剂盒1的配制
表3，试剂盒2的配制
表4，试剂盒3的配制
测定方法
将所得的试剂R1至试剂R3分别作为相应试剂盒的生物素端，然后对校准品A-E进行测定。其中，使该生物素端的抗原与被测校准品的抗原竞争性地与标记物端的抗体结合，与抗体结合的样本中的抗原被洗掉。
使用全自动化学发光免疫分析仪(i3000)测定发光信号值，并由此计算均值(AVE)和变异系数(CV)。其中发光信号值与校准品的浓度成反比。
根据测量结果，得到上述试剂盒1至试剂盒3主校准品的测定数据，相应的具体数据示出在下表5中。
表5
灵敏度的评估
灵敏度(Sensitivity)是指某方法对单位浓度或单位量待测物质变化所致的响应量变化程度。根据表5中的数据可得知，试剂盒1的校准曲线梯度优于试剂盒2和3的校准曲线梯度，因此证实了试剂盒1具有较优异的灵敏度。
进一步地，用上述试剂盒1至试剂盒3连续测定试剂对应的零值校准品(即校准品A)20次，记录其信号值，计算信号值的均值
和标准差(SD)，并计算
信号值。根据零值校准品与相邻校准品(即，校准品B)之间的浓度-RLU值结果进行两点回归拟合得出一次方程，将
所对应的RLU值带入上述方程中，计算得出对应的浓度，此浓度即为该试剂盒的空白限(LoB)，并以此评价该试剂盒的灵敏度。
按照以上的计算方式计算结果可得，试剂盒1的灵敏度为0.034；试剂盒2的灵敏度为0.199；试剂盒3的灵敏度为0.072。具体数据见下表6。
表6
实际样本测定
使用如上得到的试剂盒1至试剂盒3，测定10例血清样本。通过使用全自动化学发光免疫分析仪(i3000)测定，得到发光信号值，并经相应的标准曲线得到样品中的抗原浓度(单位ng/mL)，结果示出在表7中。
同时，用高效液相色谱质谱联用仪(API5500-岛津30A)对这10例血清样本进行测定，所得结果作为比对结果示出在表7中。
表7
单位：ng/mL
将试剂盒1至3所得的结果分别于比对结果进行拟合，计算相关系数。如图1所示，试剂盒1比对拟合曲线为y＝0.0023+1.0441x，相关系数R2为0.9944。如图2所示，试剂盒2比对拟合曲线为y＝-0.0656+1.2445x，相关系数R2为0.9294。如图3所示，试剂盒3比对拟合曲线为y＝0.0059+1.1526x，相关系数R2为0.9834。由此可证实，使用试剂盒1测定样本，不影响测定的结果，且测定结果的相关系数较大，优于试剂盒2和试剂盒3。
Claims (9)
1.一种生物素化抗原衍生物，所述生物素化抗原衍生物具有式B-L-(Ag)2的结构，其中，B源自于生物素PEG活性酯，L表示连接臂，Ag源自于抗原；
其中，所述连接臂L通过酰胺键与1分子生物素PEG活性酯和2分子抗原连接。
2.根据权利要求1所述的生物素化抗原衍生物，其中，所述连接臂具有1个氨基端和2个羧基端，从而通过所述氨基端与所述生物素PEG活性酯连接，并且通过所述羧基端与两分子所述抗原连接。
3.根据权利要求1或2所述的生物素化抗原衍生物，其中，所述生物素化抗原衍生物具有下式I的结构：
其中，在式I中，n为3-6，优选为4；
所述连接臂衍生自α-氨基二元酸或β-氨基二元酸，其中所述二元酸选自丁二酸、戊二酸和己二酸；并且
所述Ag源自于反三碘甲状腺原氨酸。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的生物素化抗原衍生物，其中，所述连接臂衍生自DL-氨基丁二酸、L-氨基丁二酸、D-氨基丁二酸、DL-谷氨酸、L-谷氨酸、D-谷氨酸、DL-α-氨基己二酸、L-α-氨基己二酸和D-α-氨基己二酸；优选衍生自DL-谷氨酸、L-谷氨酸和D-谷氨酸；更优选衍生自L-谷氨酸。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的生物素化抗原衍生物，其中，所述生物素化抗原衍生物具有式II所示的结构：
6.一种试剂盒，所述试剂盒包括：
免疫磁微粒—链酶亲和素磁微粒；
生物素端—根据权利要求1至4中任一项所述的生物素化抗原衍生物；以及
标记物端—与生物素端抗原衍生物相应的标记物标记的单克隆抗体。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述磁微粒的浓度为0.01mg/mL至1.00mg/mL；所述生物素化抗原衍生物的浓度为0.2mg/mL至200ng/mL；所述标记物标记的单克隆抗体的浓度为0.01μg/mL至1.00μg/mL。
8.根据权利要求6或7所述的试剂盒，其中，所述生物素端为生物素化反三碘甲状腺原氨酸，所述标记物端为吖啶酯标记的鼠抗反三碘甲状腺原氨酸单克隆抗体。
9.根据权利要求1至5中任一项所述的生物素化抗原衍生物在提高检测相应抗原灵敏度中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110250322.1A CN115043898A (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110250322.1A CN115043898A (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115043898A true CN115043898A (zh) | 2022-09-13 |
Family
ID=83156412
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110250322.1A Pending CN115043898A (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115043898A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115656153A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 广东优尼德生物科技有限公司 | 一种基于吖啶酯化学发光的抗核抗体谱检测试剂盒 |
| CN115656154A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 广东优尼德生物科技有限公司 | 一种基于重组rnp多抗原的抗rnp抗体化学发光检测试剂盒 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100075435A1 (en) * | 2008-07-28 | 2010-03-25 | Kasagi Noriyuki | Biotinylated thyroxine |
| CN102083850A (zh) * | 2008-04-21 | 2011-06-01 | 加利福尼亚大学董事会 | 选择性高亲和力多齿配体及其制备方法 |
| WO2016127301A1 (zh) * | 2015-02-10 | 2016-08-18 | 深圳市新产业生物医学工程股份有限公司 | rT3化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法和应用 |
| CN108187061A (zh) * | 2018-01-18 | 2018-06-22 | 四川大学华西医院 | 靶向棕色脂肪组织的递药系统 |
| CN108776218A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-11-09 | 湖南远璟生物技术有限公司 | 一种总三碘甲状腺原氨酸磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法 |
| CN108802369A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-11-13 | 湖南远璟生物技术有限公司 | 一种游离三碘甲状腺原氨酸磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法 |
-
2021
- 2021-03-08 CN CN202110250322.1A patent/CN115043898A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102083850A (zh) * | 2008-04-21 | 2011-06-01 | 加利福尼亚大学董事会 | 选择性高亲和力多齿配体及其制备方法 |
| US20100075435A1 (en) * | 2008-07-28 | 2010-03-25 | Kasagi Noriyuki | Biotinylated thyroxine |
| WO2016127301A1 (zh) * | 2015-02-10 | 2016-08-18 | 深圳市新产业生物医学工程股份有限公司 | rT3化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法和应用 |
| CN108187061A (zh) * | 2018-01-18 | 2018-06-22 | 四川大学华西医院 | 靶向棕色脂肪组织的递药系统 |
| CN108776218A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-11-09 | 湖南远璟生物技术有限公司 | 一种总三碘甲状腺原氨酸磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法 |
| CN108802369A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-11-13 | 湖南远璟生物技术有限公司 | 一种游离三碘甲状腺原氨酸磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115656153A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 广东优尼德生物科技有限公司 | 一种基于吖啶酯化学发光的抗核抗体谱检测试剂盒 |
| CN115656154A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 广东优尼德生物科技有限公司 | 一种基于重组rnp多抗原的抗rnp抗体化学发光检测试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6184042B1 (en) | Method for reducing hook effect in an immunoassay | |
| US5332679A (en) | Method for specific binding assays using a releasable ligand | |
| CN112782156B (zh) | 一种壳多糖酶3样蛋白1试剂盒及其制备方法 | |
| CN115043898A (zh) | 生物素化抗原衍生物及相关试剂盒和用途 | |
| EP0656005B1 (en) | Biotinylated chemiluminescent label, conjugates, assays, assay kits | |
| CN113710365B (zh) | 用于在免疫测定中重复使用半抗原涂覆的探针的方法 | |
| KR20020033208A (ko) | 고감도 면역분석 | |
| US11535620B2 (en) | Folate derivatives, useful in particular in the context of the folate assay | |
| CN112067826A (zh) | 基于高比活力碱性磷酸酶构建的NT-proBNP检测试剂盒及其应用 | |
| JP2534989B2 (ja) | ポリヨ−ドチロニンアツセイに有用なグルコ−ス−６−リン酸デヒドロゲナ−ゼコンジユゲ−ト | |
| US20070054338A1 (en) | Single receptor assays for immunosuppressive drugs | |
| JP4213029B2 (ja) | 特異的標識化方法 | |
| CN110988368A (zh) | 一种游离甲状腺素发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| HUT69994A (en) | Method for the determination of the amount of a ligand in a biological fluid and kit for carrying out such a method | |
| US20020119497A1 (en) | Binding assays | |
| US6670159B1 (en) | Preparing monomeric metal ion chelator containing diacetyl glycine group linked to proteinaceous molecule | |
| EP2457916A1 (en) | Compound for the covalent attachment of the chemiluminescent probe N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol (ABEI) to target molecules and uses thereof | |
| CA2221306A1 (en) | Reagents for labeling sh groups, process for the preparation of them, and method for labeling with them | |
| CN112255419B (zh) | 一种中期因子Midkine生物分析方法及检测试剂盒 | |
| CN112763704A (zh) | 用于抗原检测的组合物、制备方法 | |
| CN116106559A (zh) | 一种生物素与抗体偶联比检测试剂盒及其应用 | |
| Térouanne et al. | Bioluminescent immunoassay for α-fetoprotein | |
| EP1184666A2 (en) | Auxiliary haptens and haptenylated agents in displacement immunoassays | |
| CN118011015B (zh) | 一种维生素k2发光免疫检测方法及维生素k2检测试剂盒 | |
| CN114878537A (zh) | 一种25羟基维生素d化学发光测定试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |