CN115025124B - 一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分及其应用,属于营养保健品技术领域。本发明所述的造血抗衰活性组分,是将鸡胚蛋去除蛋黄、蛋清后的鸡胚组织,先匀浆后经角蛋白酶酶解,过滤去除残渣后得到的。鸡胚蛋中含有多种激素,其中雌酮、孕酮、雌二醇在鸡胚蛋中的含量较高。本发明首次发现了15天以内胚龄的鸡胚组织中不含激素残留,激素在蛋黄中含量分布最高,蛋清次之,去除鸡胚蛋中含有激素的蛋黄、蛋清部分,即得不含激素成分的鸡胚组织。采用本发明的造血抗衰活性组分制备口腔崩解片,服用后迅速崩解,表面积增大,溶解速度也增加,可加快其吸收,并且可减轻肝脏首关效应和消化酶的降解作用,显著提高了生物利用度。

Description

一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分及其应用
技术领域:
本发明涉及营养保健品技术领域,具体涉及一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分及其应用。
背景技术:
鸡胚蛋,又叫“活珠子”、“毛蛋”、“喜蛋”等,有助于补血益精,活血理虚,可令人身体强壮延缓衰老,被认为是高级补品。《本草纲目》记载:“鸡胚蛋有治头痛、偏头痛、头风病及四肢疯瘴之功能”。在我国及日本、韩国和东南亚一直有食用鸡胚蛋的习俗[1]。研究表明鸡胚蛋中含有多种营养成分如蛋白质、氨基酸、碳水化合物、脂类、脂肪酸、维生素A、维生素E、维生素C、微量元素Fe、Zn、Cu等,另外还含有球蛋白、干扰素、溶菌酶、胎儿蛋白等抗感染成分,胰岛素样生长因子Ⅰ、促红细胞生成素、生长分化因子11、血管内皮生长因子、脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶等生物活性物质[2]。外泌体为细胞分泌的纳米囊泡,其含有蛋白质、非编码RNA(miRNA、lncRNA等)、mRNA、脂质等功能物质,在细胞间通讯、免疫调节、及代谢调控等方面发挥重要作用[3,4]。研究发现鸡胚组织外泌体富含miRNAs,这些miRNAs会影响24个与机体生长发育和免疫调节有关的生物学通路,为进一步将鸡胚蛋作为功能性食疗佳品提供证据[5,6]。鸡胚蛋加工而成的产品通过动物试验表现出显著的营养学特性,具有延缓衰老、抗疲劳、增强抵抗力等功效[7]。经角蛋白酶酶解后的鸡胚蛋营养更丰富、易于吸收、口感也更好[8]
虽然鸡胚蛋中营养丰富,但鸡胚蛋中含有多种激素[9-11]。正常情况下,机体内的激素分泌和存在往往处于一种高度的平衡状态。但长期食用有激素残留的食品对身体会造成一定的危害,包括:(1)导致自身激素分泌失调:当残留在食物中的性激素进入人体后,使体内的含量迅速增加,超过人体正常水平时,通过负反馈使下丘脑产生的促性腺释放激素、垂体前叶产生的卵泡刺激素和黄体生成素减少,从而破坏机体的正常生理平衡而呈现不良后果;(2)变态反应:经常食用一些含激素残留的食品能使易感的人群出现变态反应,这些激素包括雌激素及雌激素类药物等,它们可以导致儿童性早熟、男性女性化等严重症状;(3)内分泌及其它影响:激素进入人体,会产生一系列影响健康的效应,如导致内分泌相关肿瘤、生长发育障碍、出生缺陷和生育缺陷等,给人体健康带来不良影响。某些激素的生理效应,种属性不强,对于动物和人体都可以产生相应的调节控制[12]。若长期食用鸡胚,其中的激素成分可能会对食用者身体造成一定的危害。
另外,以往开发的鸡胚产品一般经过高温处理,致使其中不耐高温的部分生物活性物质失活而不能发挥作用,另外,之前产品剂型普通,多是些胶囊、普通片剂、粉剂,存在不易口服、营养物质生物利用度有限或不易储存的缺点。
发明内容:
针对现有技术的不足,本发明提供了一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分及其应用。
本发明的技术方案如下:
一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分,是将鸡胚蛋去除蛋黄、蛋清后的鸡胚组织,先匀浆后经角蛋白酶酶解,过滤去除残渣后得到的。
根据本发明优选的,所述鸡胚组织为15天以内胚龄的鸡胚组织,进一步优选的,所述鸡胚组织为10-12天胚龄的鸡胚组织。
本发明发现,在15天以内胚龄的鸡胚蛋的三大部分蛋清、蛋黄、鸡胚组织中,激素主要集中分布在蛋清和蛋黄中,而在鸡胚组织中未检测到有激素残留。本发明的造血抗衰活性成分是直接从鸡胚组织中提取得到,提取到的产物中不含激素。
根据本发明优选的,所述造血抗衰活性组分的提取方法,具体步骤如下:
取15天以内胚龄的鸡胚蛋,去除蛋黄、蛋清,单独取出鸡胚组织,按照鸡胚组织和5%葡萄糖溶液1:1-6的比例,单位g/mL,在鸡胚组织中加入预冷的5%葡萄糖,匀浆,所得匀浆液中加入角蛋白酶,角蛋白酶的加入量与鸡胚组织匀浆液的质量体积百分比为1-5%,单位g/mL,室温下酶解4-8h,得到酶解产物,酶解产物依次通过40目、100目、200目尼龙网布过滤去掉残渣,即得鸡胚组织的造血抗衰活性组分。
进一步优选的,所述鸡胚蛋的胚龄为12天。
进一步优选的,所述鸡胚组织和5%葡萄糖溶液的比例为1:2,g/mL。
进一步优选的,所述角蛋白酶的加入量与鸡胚组织匀浆液的质量体积百分比为2.5%,单位g/mL。
进一步优选的,所述室温下酶解6h。
本发明采用角蛋白酶进行酶解,角蛋白酶的作用是酶解富含角蛋白的爪、喙、骨头等,角蛋白经角蛋白酶酶解,过滤后,酶解产物会保留在提取的造血抗衰活性组分中,使其营养更丰富,因角蛋白中含有丰富的呈味氨基酸,口感也会更好。
上述造血抗衰活性组分在制备具有造血抗衰功能的药品或保健品中的应用。
根据本发明优选的,所述药品或保健品的剂型为口腔崩解片。
一种含有上述造血抗衰活性组分的口腔崩解片。
根据本发明优选的,所述口腔崩解片除含有上述造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括填充剂D-甘露醇0%~10%,矫味剂罗汉果甜苷0%~0.5%、柠檬酸0%~0.5%、生姜提取物0%~1.0%、薄荷粉0%~0.5%,明胶0%-2%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL,橘子油0%~0.5%,体积百分比,其中,橘子油需提前45℃水浴溶解,明胶需提前65℃水浴溶解;将以上组分搅拌混匀,脱气,注入模具,送入冻干机,经预冻、升华干燥、解析干燥冻干,塑封,制成口腔崩解片。
根据本发明优选的,所述口腔崩解片除含有上述造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括矫味剂罗汉果甜苷0.3%、生姜提取物0.6%、薄荷粉0.3%,明胶0.5%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL。
根据本发明优选的,所述口腔崩解片除含有上述造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括填充剂D-甘露醇1%,矫味剂罗汉果甜苷0.3%、柠檬酸0.3%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL,橘子油0.3%,体积百分比。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
1、鸡胚蛋中含有多种激素,其中雌酮、孕酮、雌二醇在鸡胚蛋中的含量较高。本发明首次发现了15天以内胚龄的鸡胚组织中不含激素残留,激素在蛋黄中含量分布最高,蛋清次之,去除鸡胚蛋中含有激素的蛋黄、蛋清部分,即得不含激素成分的鸡胚组织。
2、本发明优选使用10-12天胚龄的鸡胚组织,其造血、抗衰活性组分更为丰富,另外富含鸡胚外泌体,这些外泌体富含多种生物活性成分,具有调节机体生长发育、免疫、造血等多种功能,且生物膜结构易吸收。
3、本发明的造血抗衰活性组分是将鸡胚组织经角蛋白酶酶解后获得,营养更为丰富、便于吸收、口感更好。
4、本发明的造血抗衰活性组分中不含激素残留,避免长期食用含有激素残留的食品对身体造成潜在危害。
5、本发明造血抗衰活性组分的提取全程采用低温处理工艺,防止经过高温处理,致使其中不耐高温的生物活性成分失活。
6、口腔崩解片是一新型固体速释制剂,服用方便、不必用水送服,在口中迅速崩解,表面积增大,溶解速度也增加,有相当部分经口腔吸收,减轻了肝脏的首关效应和消化酶的降解作用,显著提高了生物利用度。对食管、胃肠道黏膜无刺激性,副作用也随之降低。
附图说明
图1为不同胚龄鸡胚组织中各基因的相对表达情况,其中,各个基因的各组间均与表达量最高组比较,#:P<0.05,##:P<0.01。
图2为实施例4口腔崩解片制备过程中的冻干曲线。
图3为实施例4制备的口腔崩解片的形貌图片。
图4为不同浓度鸡胚组织造血抗衰活性组分对造血干细胞集落形态的影响,图中,A为空白对照组,B为稀释100倍的过滤原液组,C为稀释10倍的过滤原液组,D为过滤原液组。
图5为不同浓度鸡胚组织造血抗衰活性组分下造血干细胞集落CFU数量柱状图,其中,**:P<0.01。
图6为定位航行训练过程中各组小鼠的逃避潜伏期柱状图,其中,*:与正常组相比差异显著,P<0.05;#:与模型组相比差异显著,P<0.05;##:与模型组相比差异卓著P<0.01。
图7为定位航行训练过程中各组小鼠的游泳轨迹图。
图8为空间探索实验过程中各组小鼠在原平台象限停留时间占比柱状图,其中,*:与正常组相比差异显著,P<0.05;#:与模型组相比差异显著,P<0.05。
图9为各组小鼠四肢抓力柱状图,其中,*与正常组相比差异显著,P<0.05;##:与模型组相比差异卓著,P<0.01。
图10为各组小鼠掉落次数柱状图,其中,*:与正常组相比差异显著,P<0.05;#:与模型组相比差异显著,P<0.05。
图11为各组小鼠血清炎症因子(TNF-α和IL-1β)浓度柱状图,其中,*:与正常组相比差异显著,P<0.05。
具体实施方式:
下面将结合具体实施例来详细说明本发明的技术方案,以下实施例仅用来解释本发明,并不作为对本发明保护范围的限定。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:鸡胚蛋中的激素分布
鸡胚蛋中含有多种激素,其中雌酮、孕酮、雌二醇在鸡胚蛋中的含量较高。为确定鸡胚蛋中激素的分布情况,根据GB/T21981-2008,采用液相色谱-质谱/质谱仪测定鸡胚蛋中不同部位的雌酮、孕酮、雌二醇含量。
分别将不同胚龄鸡胚蛋中的鸡胚蛋清、鸡胚蛋黄、鸡胚组织,采用机械匀浆的方式制备匀浆液,测定雌酮、孕酮、雌二醇含量,结果如表1所示:
表1.不同胚龄鸡胚蛋的蛋清、蛋黄、组织中的激素含量
注:1、ND:未检出
2、TRACE:微量检出但低于定量限(仪器有峰值但无法给出数值)。
由上表可知,在15天以内胚龄的鸡胚蛋中,孕酮的含量最高;在鸡胚蛋的不同部位,激素在蛋黄中含量分布最高,蛋清次之,鸡胚组织不含有激素。因此,去除鸡胚蛋中含有激素的蛋黄、蛋清部分,即得不含有激素成分的鸡胚组织。
实施例2:鸡胚组织中造血抗衰活性组分测定
选取10-13天胚龄的鸡胚蛋,去除蛋黄、蛋清,单独取出不含激素成分的鸡胚组织,采用荧光定量PCR技术,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(GAPDH)为内参,检测鸡胚组织中抗衰老基因、造血相关基因的相对表达量。抗衰老基因有生长分化因子11(GDF11)基因,造血相关基因有促红细胞生成素(EPO)基因、血管内皮生长因子(VEGF)基因、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因、干细胞因子(SCF)基因、肝细胞生长因子(HGF)基因。
定量结果如图1所示,11天胚龄的鸡胚组织中GDF-11基因的相对表达量最高,10天胚龄组、12天胚龄组分别与11天胚龄组比较均无明显差异(P>0.05),13天胚龄组与11天组比较有显著性差异(P<0.05);
12天胚龄组的鸡胚组织中EPO基因的相对表达量最高,11天胚龄组与12天胚龄组比较有显著性差异(P<0.05),10天胚龄组、13天胚龄组分别与12天胚龄组比较有卓著性差异(P<0.01);
10天胚龄组、11天胚龄组、12天胚龄组、13天胚龄组之间鸡胚组织中VEGF基因的相对表达量均无明显差异(P>0.05);
10天胚龄组、11天胚龄组、12天胚龄组、13天胚龄组之间鸡胚组织中G-CSF基因的相对表达量均无明显差异(P>0.05);
12天胚龄组的鸡胚组织中SCF基因的相对表达量最高,10天胚龄组、11天胚龄组分别与12天胚龄组比较无明显差异(P>0.05),13天胚龄组与12天胚龄组比较有显著性差异(P<0.05);
10天胚龄组、11天胚龄组、12天胚龄组、13天胚龄组之间鸡胚组织中HGF基因的相对表达量均无明显差异(P>0.05)。
综合以上结果,10-13天胚龄的鸡胚组织中,抗衰老基因和造血相关基因均显著高表达,其中,12天胚龄鸡胚组织中各基因表达量均很高,且与各基因表达量最高组比较均无明显差异(P>0.05),另外10-13天胚龄的鸡胚组织也较大,所以选取10-13天胚龄,尤其是12天胚龄的鸡胚组织用于后续造血抗衰活性组分的提取。
实施例3:鸡胚组织中造血抗衰活性组分的提取
选取12天胚龄的鸡胚蛋,去除蛋黄、蛋清,单独取出不含激素成分的鸡胚组织,按照鸡胚组织(g):5%葡萄糖溶液(mL)=1:2的比例,加入预冷的5%葡萄糖,匀浆,匀浆液加入角蛋白酶,角蛋白酶的加入量为鸡胚组织质量的2.5%,室温下酶解6h,得到酶解产物,酶解产物依次通过40目、100目、200目尼龙网布过滤去掉杂质,即得鸡胚组织中造血抗衰活性组分。
角蛋白酶的作用是酶解富含角蛋白的爪、喙、骨头等,角蛋白经角蛋白酶酶解,过滤后,酶解产物会保留在提取的造血抗衰活性组分中,使其营养更丰富。因角蛋白中含有丰富的呈味氨基酸,口感也会更好。
实施例4:含有造血抗衰组分的口腔崩解片的制备
在实施例3提取的造血抗衰活性组分中,以造血抗衰活性组分计,按比例加入填充剂D-甘露醇1%,矫味剂罗汉果甜苷0.3%、柠檬酸0.3%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL,橘子油0.3%(需提前45℃水浴溶解),体积百分比,搅拌混匀,脱气,注入模具,送入冻干机,经预冻、升华干燥、解析干燥冻干(冻干曲线见图2),塑封,制成含有鸡胚组织造血抗衰组分的口腔崩解片。
根据口腔崩解片的质量要求,对制备的口腔崩解片进行外观、口感、崩解时限、再分散性指标检测,结果见表2,结果显示,口腔崩解片质量良好。制备的口腔崩解片见图3。
表2.口腔崩解片质量检测结果
实施例5:口腔崩解片的造血抗衰功能验证
1、通过半固体培养方法,体外检测鸡胚组织口腔崩解片是否可以促进造血干细胞的增殖与集落形成,来研究其造血支持能力。
将口腔崩解片再分散后,经粗滤纸、0.22μm滤膜过滤,将过滤原液分别稀释10倍、100倍;分离脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),每5mL MethoCultTM H4434Classic培养基中加入250μL的MNCs混悬液(MNCs终浓度为5×103/mL)、250μL的过滤原液/稀释10倍的过滤原液/稀释100倍的过滤原液,以5%的葡萄糖溶液为空白对照;混匀,接种于6孔板,每孔1.1mL,放入37℃、5%CO2培养箱中培养14天后观察集落形态并拍照、计数。结果见图4与图5,与空白对照组相比,鸡胚组织口腔崩解片组的集落体积更大,集落CFU数量极显著增多(P<0.01),说明鸡胚组织口腔崩解片在体外具有促进造血的功能。
2、建立衰老模型小鼠并灌胃鸡胚组织口腔崩解片,观察抗衰老指标的变化,验证其具有抗衰老的功效。
选KM小鼠,雌性,24只,体重18-22g,SPF级,适应性喂养1周后,分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组4组,各组以0.1mL/10gBW容积给药,每天称重一次,按体重调整给药剂量,实验周期为8周。
正常组:每日给予小鼠颈背部皮下同一部位注射0.9%的生理盐水;
模型组(Model Group):每日给予小鼠颈背部皮下同一部位注射200mg/kg的D-半乳糖溶液;
低剂量组:每日给予小鼠颈背部皮下同一部位注射200mg/kg的D-半乳糖溶液,同时灌胃鸡胚组织口腔崩解片10mg/kg;
高剂量组:每日给予小鼠颈背部皮下同一部位注射200mg/kg的D-半乳糖溶液,同时灌胃鸡胚组织口腔崩解片20mg/kg。
研究各组小鼠衰老体征、小鼠空间学习及记忆能力(Morris水迷宫实验)、肌肉力量(四肢拉力仪)、抗疲劳能力(轮转式疲劳仪)、体内炎症水平来验证鸡胚组织口腔崩解片的抗衰老功能。
1)实验结束后,正常组小鼠毛发顺滑有光泽且皮肤弹性好,精神状态好,爱动,饮食饮水及大小便正常;模型组小鼠毛发有些稀疏、无光泽且易掉,精神不振,活动量明显减少,饮食量增加,大小便次数减少。模型组小鼠肝脏指数、肾脏指数与正常组相比均显著升高,模型组胸腺指数与正常组相比显著降低。以上结果提示D-半乳糖致衰模型造模成功。
2)由图6可知,随着训练天数的增加,除模型组以外的其余各组间逃避潜伏期大致呈下降趋势,而模型组逃避潜伏期忽高忽低,说明D-半乳糖致衰小鼠的空间学习、记忆能力受到一定损害。定位航行训练的第2天,与正常组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长,鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无明显差异;与模型组相比,鸡胚组织口腔崩解片低剂量组小鼠逃避潜伏期极显著缩短(P<0.01),鸡胚组织口腔崩解片高剂量组小鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.05)。定位航行训练的第4天,与正常组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无显著性差异;与模型组相比,鸡胚口腔崩解片高剂量组小鼠逃避潜伏期极显著缩短(P<0.01)。定位航行训练最后1天,与正常组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无显著差异。
由图7可知,模型组小鼠的游泳轨迹最为复杂,正常组小鼠游泳轨迹最短,鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组小鼠游泳轨迹介于两者之间。
由图8可知,在空间探索试验中,与正常组相比,模型组小鼠在原平台象限停留时间显著减少(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组无显著性差异;与模型组相比,鸡胚组织口腔崩解片高剂量组小鼠在原平台停留时间显著增加(P<0.05)。
以上结果说明,D-半乳糖致衰小鼠空间学习能力、记忆能力受损,鸡胚组织口腔崩解片一定程度上具有改善D-半乳糖致衰小鼠的空间学习能力、记忆能力的功效。
3)由图9可知,与正常组相比,模型组小鼠四肢抓力显著降低(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无显著性差异;与模型组相比,鸡胚组织口腔崩解片高剂量组小鼠四肢抓力极显著升高(P<0.01)。以上结果提示,鸡胚组织口腔崩解片能在一定程度上增加D-半乳糖致衰小鼠的肌肉力量。
4)由图10可知,与正常组相比,模型组小鼠掉落次数显著增加(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无显著性差异;与模型组相比,鸡胚组织口腔崩解片高剂量组小鼠掉落次数显著减少(P<0.05)。以上结果提示,鸡胚组织口腔崩解片能够增强D-半乳糖致衰小鼠的运动耐力。
5)衰老进程往往伴随着炎症反应的发生,慢性炎症又会加剧机体的衰老。TNF-α作为炎症因子,可以调节免疫功能,介导炎症反应的发生;IL-1β可以破坏细胞外液,改变血管的通透性,损伤机体;血清中TNF-α、IL-1β可以很客观的、准确的判断机体的炎症程度。由图11的A图可知,与正常组相比,模型组小鼠血清TNF-α浓度显著升高(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片低、高剂量组均无显著性差异。由图11的B图可知,与正常组相比,模型组与鸡胚组织口腔崩解片低剂量组小鼠血清IL-1β浓度均显著升高(P<0.05),鸡胚组织口腔崩解片高剂量组无显著性差异。实验结果提示,鸡胚组织口腔崩解片能通过降低体内炎症因子水平,来延缓机体的衰老。
综上可知,鸡胚组织口腔崩解片确实具有延缓小鼠衰老体征、延缓器官衰老,改善致衰小鼠空间学习及记忆能力、增加肌肉力量、增强运动耐力,降低体内炎症的功能。
参考文献:
[1]范亮.孵化期间鸡胚蛋营养成分变化的研究[D].大连工业大学,2012.
[2]李利东,袁建兴,宓晓黎,等.鸡胚蛋孵化期间氨基酸含量的测定[J].氨基酸和生物资源,2004,26(1):38-39.
[3]HESSVIK N P,LLORENTE A.Current knowledge on exosome biogenesis andrelease[J].Cellular Molecular Life Sciences,2018,75(2):193-208.
[4]GAO F,JIAO F,ZHANG Y,et al.Advances in separation techniques forexosomes and their clinical applications[J].Chinese Journal ofchromatography,2019,37(10):1071-1083.
[5]李莹,王艳,王劫等.鸡胚外泌体miRNAs功能分析[J].畜牧兽医学报,2020,5l(6):1260-1270.
[6]Trakooljul N,Hicks J A,Liu H C.Characterization of miR-10amediated gene regulation in avian splenocytes.Gene.2012,500(1):107-114.
[7]杜光辉,武莉英,杨征刚.新型食品“活珠子”[J].中国家禽,2001,23(17):40.
[8]蒋少龙,蔡俊.角蛋白酶及其应用研究进展[J].食品工业科技,2019,40(6):348-354.
[9]何玉琴,刘英,崔胜.鸡胚垂体生长激素细胞的发生及其变化[J].中国农业大学学报,2004,9(3):1-4.
[10]何玉琴,刘英,崔胜.鸡胚胎腺垂体促甲状腺激素细胞的发生及其变化[J].甘肃农业大学学报,2004,3(39):266~269.
[11]何玉琴,刘英,崔胜.鸡胚胎腺垂体促肾上腺皮质激素细胞的发生及其变化[J].中国兽医科技,2004,34(7):36-39.
[12]王亚兰.鸡雌雄胚蛋孵化期间甾体激素的变化及差异研究[D].华中农业大学,2019。

Claims (11)

1.一种从鸡胚组织中提取的造血抗衰活性组分,其特征在于,所述造血抗衰活性组分的提取方法,具体步骤如下:
取10-12天胚龄的鸡胚蛋,去除蛋黄、蛋清,单独取出鸡胚组织,按照鸡胚组织和5%葡萄糖溶液1:1-6的比例,单位g/mL,在鸡胚组织中加入预冷的5%葡萄糖,匀浆,所得匀浆液中加入角蛋白酶,角蛋白酶的加入量与鸡胚组织匀浆液的质量体积百分比为1-5%,单位g/mL,室温下酶解4-8h,得到酶解产物,酶解产物依次通过40目、100目、200目尼龙网布过滤去掉残渣,即得鸡胚组织的造血抗衰活性组分。
2.如权利要求1所述的造血抗衰活性组分,其特征在于,所述鸡胚蛋的胚龄为12天。
3.如权利要求1所述的造血抗衰活性组分,其特征在于,所述鸡胚组织和5%葡萄糖溶液的比例为1:2,g/mL。
4.如权利要求1所述的造血抗衰活性组分,其特征在于,所述角蛋白酶的加入量与鸡胚组织匀浆液的质量体积百分比为2.5%,单位g/mL。
5.如权利要求1所述的造血抗衰活性组分,其特征在于,所述室温下酶解6h。
6.权利要求1所述的造血抗衰活性组分在制备具有造血抗衰功能的药品中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述药品的剂型为口腔崩解片。
8.一种含有权利要求1所述的造血抗衰活性组分的口腔崩解片。
9.如权利要求8所述的口腔崩解片,其特征在于,所述口腔崩解片除含有权利要求1所述的造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括填充剂D-甘露醇0%~10%,矫味剂罗汉果甜苷0%~0.5%、柠檬酸0%~0.5%、生姜提取物0%~1.0%、薄荷粉0%~0.5%,明胶0.5%-2%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL,橘子油0.3%~0.5%,体积百分比,其中,橘子油需提前45℃水浴溶解,明胶需提前65℃水浴溶解;将以上组分搅拌混匀,脱气,注入模具,送入冻干机,经预冻、升华干燥、解析干燥冻干,塑封,制成口腔崩解片。
10.如权利要求9所述的口腔崩解片,其特征在于,所述口腔崩解片除含有权利要求1所述的造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括矫味剂罗汉果甜苷0.3%、生姜提取物0.6%、薄荷粉0.3%,明胶0.5%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL。
11.如权利要求9所述的口腔崩解片,其特征在于,所述口腔崩解片除含有权利要求1所述的造血抗衰活性组分外,以造血抗衰活性组分计,还包括填充剂D-甘露醇1%,矫味剂罗汉果甜苷0.3%、柠檬酸0.3%,以上均为质量体积百分比,单位g/mL,橘子油0.3%,体积百分比。
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Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1593233A (zh) * 2004-07-14 2005-03-16 江西神飞九保健品有限公司 一种鸡胚蛋保健食品
CN1748713A (zh) * 2005-09-13 2006-03-22 陈正跃 鸡胚胎素的制备方法
CN102028199A (zh) * 2010-11-08 2011-04-27 河南科技大学 鸡胚蛋保健胶囊及其加工工艺
CN102525867A (zh) * 2012-01-16 2012-07-04 上海得高实业有限公司 鸡胚精华液冻干粉及其制备方法和应用
CN102871146A (zh) * 2012-10-22 2013-01-16 江南大学 一种易消化鸡胚蛋保健品的生产工艺
CN102908366A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 天津泽世德生物医药有限公司 一种鸡胚活性成分的制备方法
CN102908365A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 天津泽世德生物医药有限公司 一种胚胎素的制备方法
RU2014109555A (ru) * 2014-03-13 2015-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологий имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ) Способ повышения и синхронизации вывода цыплят посредством профилактики оксидативного стресса у эмбрионов кур
CN105380818A (zh) * 2015-12-30 2016-03-09 耿威 鸡胚活性肽在制备保护细胞活力的产品中的应用
CN105646647A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 耿威 一种鸡胚多肽及其制备方法与应用
CN106511387A (zh) * 2016-10-26 2017-03-22 谢培增 鸡胚胎素制备方法及应用
CN107982280A (zh) * 2017-11-16 2018-05-04 吴文国 延缓衰老的营养组合物及应用
AU2019204868A1 (en) * 2019-01-10 2020-07-30 Yuntongbencao (Beijing) Biotechnology Co., Ltd. Production method of high bioactivity whole egg fermentation, and products and applications thereof
CN111513173A (zh) * 2020-04-15 2020-08-11 河南工业大学 麦胚球蛋白在改善衰老造成认知功能障碍中的应用

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1593233A (zh) * 2004-07-14 2005-03-16 江西神飞九保健品有限公司 一种鸡胚蛋保健食品
CN1748713A (zh) * 2005-09-13 2006-03-22 陈正跃 鸡胚胎素的制备方法
CN102028199A (zh) * 2010-11-08 2011-04-27 河南科技大学 鸡胚蛋保健胶囊及其加工工艺
CN102908366A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 天津泽世德生物医药有限公司 一种鸡胚活性成分的制备方法
CN102908365A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 天津泽世德生物医药有限公司 一种胚胎素的制备方法
CN102525867A (zh) * 2012-01-16 2012-07-04 上海得高实业有限公司 鸡胚精华液冻干粉及其制备方法和应用
CN102871146A (zh) * 2012-10-22 2013-01-16 江南大学 一种易消化鸡胚蛋保健品的生产工艺
RU2014109555A (ru) * 2014-03-13 2015-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологий имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ) Способ повышения и синхронизации вывода цыплят посредством профилактики оксидативного стресса у эмбрионов кур
CN105380818A (zh) * 2015-12-30 2016-03-09 耿威 鸡胚活性肽在制备保护细胞活力的产品中的应用
CN105646647A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 耿威 一种鸡胚多肽及其制备方法与应用
CN106511387A (zh) * 2016-10-26 2017-03-22 谢培增 鸡胚胎素制备方法及应用
CN107982280A (zh) * 2017-11-16 2018-05-04 吴文国 延缓衰老的营养组合物及应用
AU2019204868A1 (en) * 2019-01-10 2020-07-30 Yuntongbencao (Beijing) Biotechnology Co., Ltd. Production method of high bioactivity whole egg fermentation, and products and applications thereof
CN111513173A (zh) * 2020-04-15 2020-08-11 河南工业大学 麦胚球蛋白在改善衰老造成认知功能障碍中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
利用鸡骨泥经角蛋白酶水解制备多肽及对其保鲜效果的研究;何永聚等;动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会论文集;第250页 *

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