CN115011510B - 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 - Google Patents
一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115011510B CN115011510B CN202210550115.2A CN202210550115A CN115011510B CN 115011510 B CN115011510 B CN 115011510B CN 202210550115 A CN202210550115 A CN 202210550115A CN 115011510 B CN115011510 B CN 115011510B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- salt
- stenotrophomonas maltophilia
- microbial agent
- strain
- growth
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000122973 Stenotrophomonas maltophilia Species 0.000 title claims abstract description 60
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title claims abstract description 37
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 50
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 32
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims abstract description 30
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 20
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims abstract description 15
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 claims abstract description 10
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 27
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 23
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 18
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 11
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 3
- 241000122971 Stenotrophomonas Species 0.000 claims description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 claims 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 29
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 21
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 abstract description 16
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 abstract description 12
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 11
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 abstract description 11
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 abstract description 11
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract description 9
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 abstract description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 abstract description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 44
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 24
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 22
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 14
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 10
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- 240000008574 Capsicum frutescens Species 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 3
- 241000722363 Piper Species 0.000 description 3
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 3
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 3
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001390 capsicum minimum Substances 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- LAXBNTIAOJWAOP-UHFFFAOYSA-N 2-chlorobiphenyl Chemical group ClC1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 LAXBNTIAOJWAOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 2
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 2
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- CFRPSFYHXJZSBI-DHZHZOJOSA-N (E)-nitenpyram Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(\NC)N(CC)CC1=CC=C(Cl)N=C1 CFRPSFYHXJZSBI-DHZHZOJOSA-N 0.000 description 1
- JWBMZIJMSBFBIY-UHFFFAOYSA-N 1-(3-chloro-2,6-dihydroxy-4-methoxyphenyl)hexan-1-one Chemical compound CCCCCC(=O)C1=C(O)C=C(OC)C(Cl)=C1O JWBMZIJMSBFBIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102100024409 Gametogenetin-binding protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000833430 Homo sapiens Gametogenetin-binding protein 2 Proteins 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- 239000012880 LB liquid culture medium Substances 0.000 description 1
- 108010048581 Lysine decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001633954 Microbacterium oxydans Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005925 Pymetrozine Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000589634 Xanthomonas Species 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- DLHONNLASJQAHX-UHFFFAOYSA-N aluminum;potassium;oxygen(2-);silicon(4+) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Si+4].[Si+4].[Si+4].[K+] DLHONNLASJQAHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011325 biochemical measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 230000037237 body shape Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000008280 chlorinated hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000012272 crop production Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000013095 identification testing Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079888 nitenpyram Drugs 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003071 polychlorinated biphenyls Chemical group 0.000 description 1
- 238000004382 potting Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- QHMTXANCGGJZRX-WUXMJOGZSA-N pymetrozine Chemical compound C1C(C)=NNC(=O)N1\N=C\C1=CC=CN=C1 QHMTXANCGGJZRX-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- -1 salt ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003516 soil conditioner Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000004562 water dispersible granule Substances 0.000 description 1
- 239000004563 wettable powder Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
- A01C1/00—Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G7/00—Botany in general
- A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
- A01P21/00—Plant growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
- C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
- C05G3/80—Soil conditioners
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
- C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Forests & Forestry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明公开了一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用，该菌被命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4，在2022年4月18日，被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No 24710。微生物菌剂的活性成分包括上述嗜麦芽寡养单胞菌。该菌株是从盐碱地土壤中筛选到的高效稳定的多功能菌种，具有优异的耐盐能力，同时还具有降盐、解有机磷、解钾和固氮等多种促生特性，利用该菌制备的微生物菌剂能在盐胁迫下显著提高植物的耐盐能力，减缓盐害现象，增加生物量，提高其种子萌发率，促进番茄与辣椒生长的作用，提高植物的耐盐性，减少化学肥料的使用，基于其优异的综合生物学特性，菌株43B4及其微生物菌剂具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用。
背景技术
目前，全球盐碱地的累计覆盖面积已经高达9.5亿hm2，占世界平均地表所含覆盖总面积的10％左右，并且每年仍以125万hm2左右的速度在持续增加，因此，土壤盐碱化问题已成为当下全球最严重的环境问题之一。就我国而言，现在我国盐渍土的面积约为9913万hm2，主要分布在我国的23个省、市、自治区的平原、盆地和沿海地区，其中我国滨海地区、东北地区、长江以北以及黄河中下游拥有超过14亿亩的盐碱土壤，土地盐碱化严重影响着这些地区的农业生产。
盐碱地土壤的物理化学性质一般都比较差，且土壤肥力偏低，这很大程度上限制了植物的生长和农作物生产。过量的盐分离子也会对植物生长有显著的胁迫和抑制作用，土壤中盐分过多，会导致土壤渗透压急剧增大，打破植物根系的内外渗透压平衡，从而影响植物水分吸收；同时，盐胁迫还会改变细胞内抗氧化酶的结构和功能，损伤细胞的结构，影响细胞的渗透压；盐胁迫除了影响植物的吸水和细胞的抗氧化酶外，还会降低植物的净光合速率，最后导致植物减产甚至绝产。
微生物菌剂是一种新兴的生物改良方式，与传统方式相比具有明显的安全、高效、环保的优势。微生物菌剂通过发挥耐盐性土壤微生物的多种功能直接改善植物在盐碱地中的根际不良生长环境，有效缓解土壤盐渍化胁迫对作物生长的不良影响，大大改善盐碱盐渍化土壤肥力。其中微生物菌肥改良作为一种新兴的生物改良措施，因其环保、生态效益高等优点而极具潜力。
但目前用于研发微生物菌肥的菌种存在着效果不稳定、功能单一、资源有限等问题，筛选出高效稳定的多功能菌种并研发出一款耐盐促生微生物菌肥具有重要的意义与应用价值。
目前，虽然已有嗜麦芽寡养单胞菌(或称为嗜麦芽窄食单胞菌)的相关报道，但是主要是发现该种微生物对污染物的降解能力，应用集中在环境污染物的治理方面，如公开号为CN111254091A的专利公开了一种嗜麦芽寡养单胞菌GYH及其在降解氯代烃类污染物中的应用；公开号为CN110951643A的专利公开了一株嗜麦芽寡养单胞菌DIF3，具有较强的异化还原Fe(III)的还原功能，可以高效的还原可溶性Fe(III)和固态Fe(III)，为异化铁还原菌在环境污染物的治理方面提供了新的材料；公开号为IN202141053272A的专利公开了一株嗜麦芽寡养单胞菌GS-108bph b基因增强降解2-氯联苯(CB)(多氯联苯同源物)。其上述公开的嗜麦芽寡养单胞菌也存在功能单一的问题。
目前还未发现具有耐盐、降盐、促进植物在盐碱环境下生长能力的嗜麦芽寡养单胞菌，因此，现有技术还有待进一步改进。
发明内容
针对上述问题，本发明提供了一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用，该嗜麦芽寡养单胞菌43B4是一株高效稳定的多功能菌种，具有解磷、解钾、固氮、降盐、促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长等综合性能，可作为微生物菌剂(或微生物菌肥)在农作物生产中进行实际应用。
为解决上述问题，本发明提供以下技术方案：
第一方面，本发明提供一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌，其被命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4，保藏号为：CGMCC No24710。该菌株是申请人从东营市盐碱地土壤采集土样中分离的促生细菌，其丰富了耐盐促生的菌种资源，为研究开发促生菌菌剂奠定基础。
该嗜麦芽寡养单胞菌43B4的形态特征为：菌落呈现湿润，光滑，边缘整齐，颜色为淡黄色，显微镜下显示为杆状菌，革兰氏染色结果显示为浅红色，属于革兰氏阴性菌，直径为1～2mm。综合各项生理生化试验结果和分子生物学分析，该菌鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌。
该嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4是属于黄单胞菌目的黄单胞菌科，黄单胞菌属，嗜麦芽寡养单胞菌种。在2022年4月18日，被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No 24710，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
经过实验发现，该菌株具有优异的解磷、解钾、固氮、降盐的作用；进一步研究盐胁迫下嗜麦芽寡养单胞菌43B4对番茄萌发与生长及辣椒生长和幼苗生长过程中生理生化的影响，发现：嗜麦芽寡养单胞菌43B4具有较好的促生特性，能够稳定促进作物生长。
第二方面，本发明提供一种微生物菌剂，其活性成分包括上述的嗜麦芽寡养单胞菌。基于嗜麦芽寡养单胞菌43B4的前述优异的解磷、解钾、固氮、降盐和促生等综合生物学特性，可将其作为活性成分，用于制备微生物菌剂，作为生物菌肥或者土壤改良剂进行使用，提高植物的耐盐性，减少化学肥料的使用，提高植物的生物量。
优选地，所述微生物菌剂中，嗜麦芽寡养单胞菌43B4的有效活菌数不低于0.5亿/g。
优选地，所述微生物菌剂的活性成分为前述嗜麦芽寡养单胞菌43B4的菌液、菌体或发酵上清液。
优选地，所述微生物菌剂的剂型为片剂、种衣剂、干悬浮剂、水分散粒剂或可湿性粉剂。此外，所述微生物菌剂还包括载体，还可进一步的包括各种助剂，用以延长其持效期和稳定性。
第三方面，本发明提供前述的微生物菌剂的制备方法，其包括以下步骤：
从固体培养基平板上挑取耐盐促生菌菌的单菌落到液体培养基中，制备种子液，再将种子液接种于液体培养基中，在温度25～29℃、转速120～190r/min的摇瓶中培养，待菌株生长至对数生长期时，使用无菌水稀释菌液，获得所述微生物菌剂。
可选地，所述固体培养基为LB固体培养基，固体LB培养基由以下成分制备而成：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L、质量百分浓度为2.5％琼脂；而所述液体培养基为LB液体培养基，而所述液体LB培养基由以下成分制备而成：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L。
第四方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在解磷、解钾、固氮中的应用。
现有技术中并未公开嗜麦芽寡养单胞菌应用于降盐、解钾、固氮、解磷和促进植物生长，该菌嗜麦芽寡养单胞菌43B4不同于公开的氧化微杆菌。通过功能性鉴定试验可以看出，嗜麦芽寡养单胞菌43B4能够降低环境盐度、溶有机磷、难溶性钾和固氮。
第五方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在降低环境中盐含量中的应用。
所述嗜麦芽寡养单胞菌43B4具有优异的耐盐能力，对NaCl有较宽的适应范围，在NaCl浓度达到8％情况下仍然可保持较高的菌体浓度，0～10％的盐浓度下均可生长，菌株43B4的耐盐性最高可达10％。并且，该菌株也具有降盐能力，当外界盐浓度为3％时，耐盐菌株43B4的相对降盐率达到8.57％。
第六方面，本发明提供前述嗜麦芽寡养单胞菌或前述的微生物菌剂在促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长中的应用。
该菌株43B4在NaCl的盐胁迫下能够提高番茄与辣椒的叶长、叶宽、叶片数及株高，表明菌株43B4可以缓解盐胁迫对植物幼苗造成的氧化胁迫，也为本发明的耐盐促生菌菌株在促生耐盐方面的作用提供了依据。
优选地，所述植物包括番茄和辣椒。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明提供了一株耐盐促生嗜麦芽寡养单胞菌43B4及其应用，该菌株是从盐碱地土壤中筛选到的高效稳定的多功能菌种，具有优异的耐盐能力，该菌株耐盐度为0～10％，最适耐盐度为3～5％；同时，该菌还具有降盐、解有机磷、解钾和固氮等多种促生特性，利用嗜麦芽寡养单胞菌43B4制备的菌液(微生物菌剂的一种形式)能在盐胁迫下显著提高番茄与辣椒的耐盐能力，减缓盐害现象，增加生物量，提高其种子萌发率，促进番茄与辣椒生长的作用，有助于提高番茄与辣椒的耐盐性，减少化学肥料的使用，基于其优异的综合生物学特性，该耐盐促生菌菌株及其微生物菌剂具有广泛的应用前景。
2、上述微生物菌剂的制备方法简单，培养条件要求低，发酵成本低，周期短，适合工业化大批量生产的需要，便于推广使用。
附图说明
图1为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的菌落形态图；
图2为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的功能性鉴定结果；
图3为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的耐盐性分析结果；图3A为不同盐浓度平板培养结果；图3B为耐盐度柱状图结果；
图4为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的降盐性分析；
图5为嗜麦芽寡养单胞菌43B4的基于16SrDNA基因序列构建的系统发育树；图5A为16SrDNA序列扩展产物的电泳结果；图5B为菌43B4的基于16SrDNA基因序列构建的系统发育树；
图6为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下番茄种子萌发的发芽率及发芽势的影响；
图7为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下番茄生长的促进作用；
图8为嗜麦芽寡养单胞菌43B4对盐胁迫下辣椒生长的促进作用。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。在本发明中，若非特指，所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
实施例1菌株43B4的分离筛选
1、实验方法：
从东营市盐碱地土壤采集土样，从中分离出不同的微生物，并将菌株通过平板划线保存于LB固体培养基平板上，待用。LB成品培养基中加入不同含量的氯化钠，将其配制成NaCl质量百分浓度分别为1％、2％、4％、6％、8％、10％等不同浓度的LB固体培养基，再将活化24h的菌株分别稀释成1x10-5、1x10-6的菌液，各吸取200μL，用涂布棒均匀的涂抹在制备好的前述LB固体培养基上，通过菌落计数鉴定分析菌株耐盐性，并对筛选出的生长良好的菌株进行反复平板划线纯化。
2、实验结果及分析：
经过筛选和纯化后，得到单一菌落的耐盐菌株，将该单一菌落命名为菌株43B4，其菌落和菌体形态具体见图1。
实施例2菌株43B4的鉴定
1.形态学鉴定
如图1所示，43B4菌落的呈现湿润且光滑，边缘整齐，颜色为淡黄色，显微镜下显示43B4为杆状菌，革兰氏染色结果显示菌43B4为浅红色，属于革兰氏阴性菌，直径为1～2mm，好氧，化能异养。
2.生理生化鉴定
参考《常见细菌系统鉴定手册》，通过对耐盐促生菌菌株进行生理生化测定进行初步鉴定，鉴定结果显示：菌43B4产生长素，接触酶、赖氨酸脱羧酶阳性，硝酸盐还原反应阳性，明胶水解、淀粉水解阳性，L-阿拉伯糖、果糖发酵为阳性，与单胞菌属微生物的生理生化特征相似。
3.分子生物学鉴定
在前述形态学鉴定和生理生化鉴定的基础上，进一步对菌43B4进行分子生物学鉴定。
(1)实验方法：
提取菌株43B4的DNA并将其作为模板，采用16SrDNA通用上游引物27F和下游引物1492R对16S rDNA核苷酸片段进行扩增，扩增体系见表1，将扩增得到的产物送至生工公司进行测序。
引物序列如下：
上游引物27F:5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；
下游引物1492R:5′-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3′。
表1 16S rDNA的PCR体系
(2)实验结果及分析
测序结果显示，菌株43B4的16SrDNA的长度为1483bp，测序结果见序列表中SEQ IDN0:1。将测序得到的序列提交到NCBI进行BLAST比对，选择相似度较高的菌株序列进行下载。利用软件MEGA 6.0构建系统发育进化树，具体见图5。16SrDNA的序列比对结果显示，43B4与Stenotrophomas的相似度最高。
因此，结合该菌的形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析结果可确定，该菌株为嗜麦芽寡养单胞菌，将其命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)43B4。
实施例3菌株43B4的功能定性鉴定
本实验目的在于研究耐盐促生菌菌株43B4在增加可溶性钾、可溶磷含量及固氮的应用，确定所述耐盐促生菌菌株43B4能够溶有机磷、难溶性钾和固氮。
1、本实验采用的培养基及其配方：
有机磷培养基：葡萄糖10.0g/L，硫酸铵0.5g/L，酵母浸粉0.5g/L，氯化0.3g/L，氯化钾0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸亚铁0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，卵磷脂0.2g/L，碳酸钙1.0g/L，琼脂15g/L，pH 7.0。
无机磷培养基：葡萄糖10.0g/L硫酸铵0.5g/L，酵母浸粉0.5g/L，氯化钠0.3g/L，氯化钾0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸亚铁0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，磷酸钙5.0g/L，琼脂15.0g/L，pH 7.0。
阿须贝氏培养基：磷酸二氢钾0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠0.2g/L，碳酸钙5.0g/L，甘露醇10.0g/L，硫酸钙0.1g/L，琼脂15g/L，pH 7.0。
解钾培养基：葡萄糖10g/L，磷酸氢二钠0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠0.2g/L，硫酸钙0.2g/L，碳酸钙5g/L，钾长石粉25g/L，琼脂20g/L，pH7.2。
2、实验方法：
将43B4进行摇瓶培养，活化扩繁，分别按照上述配方分别配制解钾、解磷及固氮固体培养基，准备好灭好菌的平板，培养基灭好菌之后倒板，待凝固之后，吸取菌液1μL点到各种平板上，封好板放置27℃倒置培养，待有透明水解圈或者菌落时，观察实验结果。
解钾解磷评估标准：直径比＝透明圈直径/菌斑直径*100％
固氮评估标准：测定菌落直径。
表2菌株43B4的解钾解钾固氮性能分析
3、实验结果及分析
从表2的结果可知，所述菌株具有一定的解钾、解有机磷、固氮的促生特性，其中对于解钾的能力较强，其溶解指数可以达到7。
实施例4菌株43B4的耐盐性测定
1、实验方法：
将菌株43B4的菌液分别转接相同量到不同盐浓度的LB液体培养基中，本实施例中，液体培养基中NaCl的质量浓度分别为2％、4％、6％、8％和10％，于温度27～29℃、转速120～180r/min条件下摇床培养24h后，观察不同盐浓度下菌株43B4的生长情况，测试菌的生物量，从而确定耐盐促生菌菌株的耐盐度。24h后测其菌浓度(OD600)，以确定该菌株的耐盐程度，得到如图3B所示的耐盐度柱状图。
2、实验结果及分析
图3A和3B的结果显示，耐盐促生菌菌株43B4对NaCl有较大的适应范围，其在1～10％的盐浓度下均可生长；尤其是在盐浓度达到10％情况下，该菌株仍然能够生长且保持较高的菌体浓度，这说明菌株43B4的耐盐性最高可达10％。
实施例5菌株43B4的降盐测定
1、实验方法
为了研究菌株43B4的降盐能力，配制3％-6％的不同盐浓度的LB液体培养基，27℃培养24h后，使用盐度计测定培养基电导率。
相对降盐率＝(1-培养后盐度)/培养前盐度×100％
2、实验结果及分析
如图4的结果显示，在NaCl的质量浓度为3-6％范围内，耐盐菌株43B4的降盐能力呈现出差异：相对比其他盐浓度，环境中NaCl浓度为3％时，耐盐菌株43B4的降盐能力最高，其相对降盐率达到8.57％。
实施例6菌株43B4对盐胁迫下番茄种子萌发的影响
1、实验方法：
将菌株43B接种于培养基中，于28℃条件下振荡培养24h。挑选颗粒饱满无霉变、大小一致无损的番茄种子，无菌水洗涤后置于70％酒精溶液内表面消毒20s，后用5％次氯酸钠消毒2min，无菌水洗涤5～6次。每个培养皿铺上两层滤纸，各放置50粒番茄种子，设置空白对照组、0.6‰NaCl处理组1与43B4+NaCl处理组2，并且进行三次重复；其中，处理组1加入2mL的0.6‰NaCl，处理组2中加入2mL的0.6‰NaCl和2mL的43B稀释菌液，对照组仅加入2mL蒸馏水。25℃恒温培养3d，测定番茄种子的发芽率及发芽势。
发芽率＝(发芽种子粒数÷供试种子粒数)×100％。
发芽势＝发芽总粒数÷试验总粒数×100％。
2、实验结果及分析
图6为三组不同处理的番茄种子发芽结果，统计番茄种子萌发率，得到表3的实验结果，其显示：空白对照组中，番茄种子萌发率达到94.23％；经过NaCl处理后的番茄种子的萌发率仅为4.71％，而NaCl胁迫下经过43B4处理的种子萌发率提升至14％，其相对处理组1，其种子萌发率提高了9.29％。
表3不同处理的番茄种子的发芽率和发芽势
实施例7菌株43B4对盐胁迫下番茄与辣椒生长的影响
1、实验方法：
将草炭土与珍珠岩按照9:1的比例进行混合得到育苗基质。取番茄和辣椒的种子分别放置于育苗穴盘中在28℃黑暗条件下萌发，萌发1周后移栽于花盆中放置于28℃，4h/10h光周期，光强为1200Lux的温室中进行培养2周。分别选取长势一致的材料进行如下的盆栽实验。
对辣椒和番茄分别设置以下四个处理组：
①空白对照组(不做任何处理)；
②盐胁迫处理组(150mmol/L NaCl盐水)；
③43B4菌液单独处理；
④盐水(150mmol/L的NaCl)和43B4菌液共同处理(27℃，培养24h后的菌液稀释10倍使用)。
对以上各个处理的番茄和辣椒幼苗每5-7天进行按水土质量比1：10固定用量灌根，番茄处理两次，辣椒处理三次。期间使用吡蚜酮和烯啶虫胺进行喷洒，防止病虫害。待番茄生长2周、辣椒生长3周后分别对其进行生长指标的测量。
2、实验结果及分析
(1)从图7A和表4可知，盐胁迫条件下耐盐菌株43B4能够有效促进番茄的生长；从图7B-7E的结果可知，相对于盐胁迫处理组，盐胁迫下进行43B4菌液处理组的番茄的株高及叶片数显著增加，分别依次提高了26.51％和27.78％。同时发现，与空白对照组相比，单独施加耐盐菌株43B4能够促进番茄的生长。
(2)从图8A和表5的结果可知，盐胁迫条件下耐盐菌株43B4能够有效促进辣椒的生长；从图8B-8E的结果可知，相对于盐胁迫处理组，盐胁迫下进行43B4菌液处理组的辣椒的株高、叶长、叶片数和叶宽都显著提升，其中，株高和叶片数分别提高了26.72％和21.62％。
上述实验结果说明，耐盐菌株43B4能够有效缓解盐胁迫对植物生长的影响，且对植物生长具有促进作用。
表4 43B4对番茄生长的影响
表5 43B4对辣椒生长的影响
可以理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案及本发明构思加以等同替换或改变，而所有这些改变或替换都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。
序列表
<110> 青岛农业大学
<120> 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1483
<212> DNA
<213> 嗜麦芽寡养单胞菌43B4的16S rDNA (16S rDNA of Stenotrophomonasmaltophilia 43B4)
<400> 1
agtgaacgct ggcggtaggc ctaacacatg caagtcgaac ggcagcacag gagagcttgc 60
tctctgggtg gcgagtggcg gacgggtgag gaatacatcg gaatctacct tttcgtgggg 120
gataacgtag ggaaacttac gctaataccg catacgacct acgggtgaaa gcaggggacc 180
ttcggacctt gcgcgattga atgagccgat gtcggattag ctagttggcg gggtaaaggc 240
ccaccaaggc gacgatccgt agctggtctg agaggatgat cagccacact ggaactgaga 300
cacggtccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tggacaatgg gcgcaagcct 360
gatccagcca taccgcgtgg gtgaagaagg ccttcgggtt gtaaagccct tttgttggga 420
aagaaaacca gctggttaat acccggttgg gttgacggta cccaaagaat aagcaccggc 480
taacttcgtg ccagcagccg cggtaatacg aagggtgcaa gcgttactcg gaattactgg 540
gcgtaaagcg tgcgtaggtg gtcgtttaag tccgttgtga aagccctggg ctcaacctgg 600
gaactgcagt ggatactggg cgactagagt gtggtagagg gtagcggaat tcctggtgta 660
gcagtgaaat gcgtagagat caggaggaac atccatggcg aaggcagcta cctggaccaa 720
cactgacact gaggcacgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
cgccctaaac gatgcgaact ggatgttggg tgcaatttgg cacgcagtat cgaagctaac 840
gcgttaagtt cgccgcctgg ggagtacggt cgcaagactg aaactcaaag gaattgacgg 900
gggcccgcac aagcggtgga gtatgtggtt taattcgatg caacgcgaag aaccttacct 960
ggccttgaca tgtcgagaac tttccagaga tggattggtg ccttcgggaa ctcgaacaca 1020
ggtgctgcat ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080
cgcaaccctt gtccttagtt gccagcacgt aatggtggga actctaagga gaccgccggt 1140
gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc aagtcatcat ggcccttacg gccagggcta 1200
cacacgtact acaatggtag ggacagaggg ctgcaagccg gcgacggtaa gccaatccca 1260
gaaaccctat ctcagtccgg attggagtct gcaactcgac tccatgaagt cggaatcgct 1320
agtaatcgca gatcagcatt gctgcggtga atacgttccc gggccttgta cacaccgccc 1380
gtcacaccat gggagtttgt tgcaccagaa gcaggtagct taaccttcgg gagggcgctt 1440
gccacggtgt ggccgatgac tggggtgaag tcgtaacaag gta 1483
Claims (9)
1.一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌，其特征在于，被命名为嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）43B4，其保藏号为CGMCC No 24710。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌。
3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的活性成分为所述嗜麦芽寡养单胞菌的菌液或菌体。
4.如权利要求2所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
从固体培养基平板上挑取如权利要求1所述的耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌的单菌落到液体培养基中，制备种子液，再将种子液接种于液体培养基中，在温度25～29℃、转速120～190r/min 的摇瓶中培养，待菌株生长至对数生长期时，使用无菌水稀释菌液，获得所述微生物菌剂。
5.根据权利要求4的制备方法，其特征在于，所述固体培养基为LB固体培养基，所述液体培养基为LB液体培养基。
6.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在解磷、解钾、固氮中的应用。
7.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在降低环境中盐含量中的应用。
8.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌或如权利要求2或3所述的微生物菌剂在促进植物在盐胁迫下的种子萌发以及植株生长中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述植物包括番茄和辣椒。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210550115.2A CN115011510B (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210550115.2A CN115011510B (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115011510A CN115011510A (zh) | 2022-09-06 |
| CN115011510B true CN115011510B (zh) | 2023-04-28 |
Family
ID=83069735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210550115.2A Active CN115011510B (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115011510B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115895954B (zh) * | 2022-11-15 | 2023-07-07 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一株嗜月桂硫酸假单胞菌cnbg-pgpr-8及其应用 |
| CN116555127B (zh) * | 2023-07-06 | 2023-11-14 | 北京建工环境修复股份有限公司 | 一种微生物复合菌剂及其制备方法与应用 |
| CN117467575B (zh) * | 2023-11-06 | 2024-05-14 | 山东省农业科学院 | 一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6及其应用 |
| CN117887612B (zh) * | 2023-11-30 | 2024-07-05 | 甘肃省科学院生物研究所 | 一种复合微生物菌剂及其在贝母提质中的应用 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101781628A (zh) * | 2009-11-11 | 2010-07-21 | 广西大学 | 固氮嗜麦芽窄食单胞菌株c4y41及其应用 |
| CN103205457A (zh) * | 2013-03-18 | 2013-07-17 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 利用微生物抗逆基因增加植物耐盐性的方法 |
| CN103484405A (zh) * | 2013-09-22 | 2014-01-01 | 长治学院 | 一种南方红豆杉根际高效解磷嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 |
| CN106434472A (zh) * | 2016-10-18 | 2017-02-22 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种寡养单胞菌及其应用 |
| CN111690559A (zh) * | 2020-06-04 | 2020-09-22 | 江南大学 | 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌 |
| CN113046263A (zh) * | 2021-03-16 | 2021-06-29 | 青岛农业大学 | 一株耐盐解钾促生氧化微杆菌41-c8、菌剂及其应用 |
| CN113604397A (zh) * | 2021-08-24 | 2021-11-05 | 天俱时工程科技集团有限公司 | 一种耐高盐降解废水cod菌株及筛选方法和应用 |
-
2022
- 2022-05-20 CN CN202210550115.2A patent/CN115011510B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101781628A (zh) * | 2009-11-11 | 2010-07-21 | 广西大学 | 固氮嗜麦芽窄食单胞菌株c4y41及其应用 |
| CN103205457A (zh) * | 2013-03-18 | 2013-07-17 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 利用微生物抗逆基因增加植物耐盐性的方法 |
| CN103484405A (zh) * | 2013-09-22 | 2014-01-01 | 长治学院 | 一种南方红豆杉根际高效解磷嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 |
| CN106434472A (zh) * | 2016-10-18 | 2017-02-22 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种寡养单胞菌及其应用 |
| CN111690559A (zh) * | 2020-06-04 | 2020-09-22 | 江南大学 | 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌 |
| CN113046263A (zh) * | 2021-03-16 | 2021-06-29 | 青岛农业大学 | 一株耐盐解钾促生氧化微杆菌41-c8、菌剂及其应用 |
| CN113604397A (zh) * | 2021-08-24 | 2021-11-05 | 天俱时工程科技集团有限公司 | 一种耐高盐降解废水cod菌株及筛选方法和应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Screening for endophytic nitrogen-fixing bacteria in Brazilian sugar cane varieties used in organic farming and description of Stenotrophomonas pavanii sp. nov.;Patrıcia L. Ramos 等;International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology;926-931 * |
| Stenotrophomonas pavanii strain ICB 89 16S ribosomal RNA, partial sequence;Ramos,P.L.等;NCBI Reference Sequence: NR_116793.1;序列 * |
| 菌株 C8 和 B4 的分离鉴定及其耐盐促生效果和机制;车永梅 等;生物技术通报;1-11 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115011510A (zh) | 2022-09-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115011510B (zh) | 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用 | |
| CN106947725B (zh) | 微生物菌剂及其在盐碱地土壤改良中的应用 | |
| CN110846249B (zh) | 一种可用于改良盐碱土壤的微生物、微生物菌剂及盐碱地土壤微生物改良剂 | |
| CN113755382B (zh) | 一株阿氏芽孢杆菌ndfy-1及其应用 | |
| CN110521323B (zh) | 一种在页岩裸露岩壁上喷播刺槐高效快速复绿并改良土壤pH值的方法 | |
| CN106635903A (zh) | 一种提高中重度盐碱地作物耐盐性的促生菌组合 | |
| CN113416675A (zh) | 一种耐盐碱的根际促生菌及其应用 | |
| CN116925979A (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在促进植物生长中的应用 | |
| CN115612649A (zh) | 一株植物的耐盐促生及抗病害芽孢杆菌及其应用 | |
| CN109957535B (zh) | 简单芽胞杆菌、利用其制备的微生物菌剂、生物肥及应用 | |
| CN109576177B (zh) | 一种中华微杆菌株sm8及其在耐盐促生中的应用 | |
| CN107841480B (zh) | 一株分散泛菌及其在制备微生物肥料中的应用 | |
| CN114836348A (zh) | 一种改善土壤盐碱化的微生物菌剂及其应用 | |
| CN116333937B (zh) | 一株具有温室气体氧化亚氮减排功能的植物根际益生菌株及其应用 | |
| CN111187740B (zh) | 一种盐碱地改良微生物及其应用 | |
| CN117106614B (zh) | 一株根际细菌青岛假单胞菌yim b08402和其微生物菌剂及应用 | |
| CN107325980A (zh) | 一种耐辐射类芽孢杆菌kh9及其在生物抗蒸腾剂中的应用 | |
| CN116904361A (zh) | 一种具有解磷能力的贪铜菌属菌株及其应用 | |
| CN114934000B (zh) | 耐盐性解淀粉芽孢杆菌及其筛选与应用 | |
| CN114164140B (zh) | 一株高效溶磷菌mqr6及其发酵产物与应用 | |
| CN117802012B (zh) | 一株嗜氨菌及其菌剂与应用 | |
| CN117229983B (zh) | 固氮解磷的食异生素副伯克霍尔德氏菌px-418及其菌剂、应用 | |
| CN116286461B (zh) | 具有土壤改良作用的喜盐芽胞杆菌、筛选方法及其应用 | |
| CN112624877B (zh) | 一种茄科类果菜和单子叶作物叶面菌肥及制备方法与应用 | |
| CN116590195B (zh) | 假黄单胞菌、微生物制剂以及它们的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240902 Address after: 102400, 1st to 5th floors, Building 1, Courtyard 1, No. 6 Shagang Street, Fangshan District, Beijing, China. 101, 5th floor, 505 Patentee after: Beijing Wonongyuan Agricultural Biotechnology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 266109 No. 700, the Great Wall Road, Chengyang District, Shandong, Qingdao Patentee before: Qingdao Agricultural University Country or region before: China |
|
| TR01 | Transfer of patent right |