CN117802012B

CN117802012B - 一株嗜氨菌及其菌剂与应用

Info

Publication number: CN117802012B
Application number: CN202410226115.6A
Authority: CN
Inventors: 石灏; 朱靖菲; 陈嘉美; 李铭刚; 杨佩文; 赵江源; 普特; 唐蜀昆; 施竹凤
Original assignee: Yunnan University YNU; Institute of Agricultural Environment and Resources of Yunnan Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Yunnan University YNU; Institute of Agricultural Environment and Resources of Yunnan Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2024-02-29
Filing date: 2024-02-29
Publication date: 2024-04-26
Anticipated expiration: 2044-02-29
Also published as: CN117802012A

Abstract

本发明涉及一株嗜氨菌及其菌剂与应用，嗜氨菌（Ammoniphilus sp.）的保藏编号为CGMCC No.29361，嗜氨菌和含有嗜氨菌的菌剂可用于解钾、产吲哚乙酸和产铁载体，本发明的嗜氨菌和含有嗜氨菌的菌剂还可以用于促进番茄种子萌发和促进番茄植株生长。

Description

一株嗜氨菌及其菌剂与应用

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体的说，涉及一株嗜氨菌及其菌剂与应用。

背景技术

现代农业生产中存在不合理或过量施用化学肥料的现象，进而导致严重的生态环境、农业面源污染和农产品质量安全问题，因此化肥替代技术和产品日益引起广泛重视。针对以上问题，在农业领域，生物治理是解决化肥不合理、过量使用的重要手段之一。在各种生物治理方法中，功能微生物菌剂是现阶段可替代化肥最有希望的手段也是开展作物营养及作物病虫害生物防治的重要技术措施。

植物根际促生菌（Plant growth promoting rhizobacteria，PGPR）具有有效减少化肥施用带来的土壤污染问题和促进植物生长的功能，其主要包括但不限于解有机磷、解无机磷、固氮、解钾、产铁载体、酚酸降解、产IAA、产ACC脱氨酶等农用活性功能，因此筛选及利用PGPR进行功能微生物菌剂的利用可以充分满足现代农业可持续发展的需求。

微生物菌肥属于第三代农业肥料，天然无污染，富含微生物菌，能维持土壤养分平衡和酸碱平衡，但是不同农作物对微生物菌肥的需求不同，需要根据生产需求调整菌肥的特性，因此对于微生物菌肥所选用的菌株具有很强的特异性。除此之外，施用复合微生物菌肥有利于土壤团粒结构的形成，降低土壤腐败菌和致病菌数量，提高化肥利用率，从而减少化肥施用量；也有实验结果表明在施用微生物菌肥的土壤中可以提高土壤中的细菌多样性，丰富有益菌的种类，提升农作物的产量、质量、口感和商品率；在轻度盐碱地中施用微生物菌肥还可以降低含盐量效果达到7%-35%，但是目前阻碍微生物肥料发展的原因是缺乏着地区特色的微生物肥料的特色菌株资源。

基于此，本申请提供一株嗜氨菌，其具有较好解钾和产IAA功能的同时具有微弱的产铁载体能力，能够有效促进作物生长。其分离自番茄作物基地对于农田作物环境适应能力强，对于番茄具有良好的促萌发和促生长效果。

发明内容

为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一株嗜氨菌及其菌剂与应用，所述的嗜氨菌及其菌剂具有较好的解钾和产IAA功能同时具有微弱的产铁载体能力，能够有效促进作物生长。嗜氨菌及其菌剂对于番茄具有良好的促萌发和促生长效果。

为实现上述目的，本发明第一方面提供一株嗜氨菌（Ammoniphilussp.），该菌株于2023年12月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.29361。

本发明第二方面提供上述嗜氨菌在解钾、产吲哚乙酸或产铁载体中的应用。

本发明第三方面提供一种制备铁载体的方法，所述方法包括对上述的嗜氨菌进行培养，并收集培养产物。

本发明第四方面提供一种菌剂，所述菌剂中的活性成分包含上述的嗜氨菌。

本发明第五方面提供上述的嗜氨菌和上述菌剂在促进植物生长和植物种子萌发中的应用。

本发明第六方面提供促进植物种子萌发和生长的方法。

本发明的有益效果：

一、通过分子生物学手段鉴定，本发明所提供的嗜氨菌YIM B11669属于嗜氨菌属的新物种，其对于丰富目前仅有3个有效种的嗜氨菌属具有重要意义。同时该属中的菌株并未有应用于微生物菌剂的研究先例，为科学研究和生产应用提供了良好的研究对象。

二、本发明所提供的嗜氨菌YIM B11669具有解钾、产IAA和微弱的产铁载体能力。经过种子萌发和盆栽实验发现，该菌株对于以番茄为代表的农作物具有良好的促萌发和促生长效果，对于科学可持续农业发展有积极的建设作用。

附图说明

图1为嗜氨菌YIM B11669以Neighbor-Joining法绘制的系统发育树。

图2为嗜氨菌YIM B11669在NA培养基上的菌落形态图。

图3为嗜氨菌YIM B11669产铁载体能力结果图。

图4中图A和图B分别为嗜氨菌YIM B11669产IAA能力定性和定量结果图。

图5中图A和图B分别为嗜氨菌YIM B11669促萌发实验结果图和数据统计图。

图6为嗜氨菌YIM B11669促生长实验结果图。

生物保藏

本发明提供的嗜氨菌（Ammoniphilussp.），菌株命名为：YIM B11669，已于2023年12月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.29361。

具体实施方式

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

本发明中，嗜氨菌YIM B11669和嗜氨菌（Ammoniphilussp.）CGMCC No.29361是同一菌株，其二者意义相同，其名称（编号）可以互换使用。

本发明的发明人于云南省大理白族自治州祥云县刘厂镇土碱地分离获得一株嗜氨菌，命名为：嗜氨菌YIM B11669，经鉴定其属于嗜氨菌属的一个新种。

基于此，本发明第一方面提供一株嗜氨菌（Ammoniphilussp.），该菌株于2023年12月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.29361。

通过对上述嗜氨菌进行农用活性研究发现其具有解钾、产IAA和微弱的产铁载体的功能活性，上述功能在对于嗜氨菌菌株的研究中未见报道。

基于此，本发明第二方面提供上述嗜氨菌在解钾、产吲哚乙酸或产铁载体中的应用；本发明第三方面提供获取铁载体的方法，所述方法包括对上述的嗜氨菌进行培养，并收集培养产物。

本发明第四方面提供一种菌剂，所述菌剂的活性成分包含上述的嗜氨菌。

本发明中，对于所述菌剂的具体剂型没有特别限制，任意本领域常用的菌剂类型均可适用于本发明。例如可以为固体菌剂、液体菌剂或是半固体（浓缩）菌剂等常见的菌剂类型。

优选的，所述菌剂中嗜氨菌的有效活菌数为：1×10⁶~1×10¹¹CFU/g（固体菌剂）或1×10⁶~1×10¹¹CFU/mL（液体菌剂或浓缩菌剂），更为优选为：1×10⁸~1×10¹⁰CFU/g（固体菌剂）或1×10⁶~1×10¹¹CFU/mL（液体菌剂或浓缩菌剂）。

本发明第五方面提供上述的嗜氨菌或菌剂在促进植物生长和植物种子萌发中的应用。

本发明第六方面提供使用上述的嗜氨菌或菌剂促进植物生长和植物种子萌发的方法。

上述的方法包含两种方式：

（1）单独使用嗜氨菌促进植物生长、植物种子萌发；

（2）混合使用嗜氨菌和菌剂促进植物生长、植物种子萌发。

上述的方式中，单独使用嗜氨菌或混合使用嗜氨菌和菌剂促进植物生长的方法为：施用于植物根际土壤中，使得嗜氨菌的施用量不低于1×10⁸CFU/株/次。

上述方式中，单独使用嗜氨菌或混合使用嗜氨菌和菌剂促进植物种子萌发的方法为：将植物种子浸泡于包含上述菌剂，和/或，上述嗜氨菌的菌液中，所述菌液中嗜氨菌的有效活菌数为1×10⁵CFU/mL-1×10⁶CFU/mL。

优选的，上述植物为番茄。

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。

实施例一嗜氨菌YIM B11669的获得、鉴定和保藏

1. 菌株的获得

菌株分离纯化等操作中均采用BG11培养基、光合细菌培养基以及平板计数肉汤培养基（PCB培养基）按照1:1:1的重量比混合后添加20g/L琼脂，121℃灭菌20min所获得的培养基。其中，BG11培养基、光合细菌培养基和PCB培养基均购自海博生物技术有限公司（产品编号分别为HB8793、HB8882、HB8756）。

采用稀释涂布平板法和平板划线法从云南省大理白族自治州祥云县刘厂镇番茄作物基地番茄根际土样中取土壤样品1g于装有100mL无菌水的300mL锥形瓶中，放入适量玻璃珠，于30℃，150r/min进行振荡培养24-48h，吸取200μL溶液以10-4、10-5浓度于NA培养基上进行稀释涂板，挑选出不同颜色、形态的菌株于斜面上。通过上述步骤从中获得一株细菌，将其命名为嗜氨菌YIM B11669。

2. 菌种鉴定

2.1分子鉴定

采用Chelex提取法提取菌株的总DNA作为模板，采用27F：27F（5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’）和1492R（5’-TACGACTTAACCCCAATCGC-3’）为引物，采用表1中的反应体系和条件进行16S rRNA基因扩增。

表1 PCR体系和条件

扩增产物经1％琼脂糖凝胶电泳（采用广州美基生物科技有限公司生产的胶回收纯化试剂盒）纯化（https://www.ezbiocloud.net/）比对分析。采用系统发育学分析方法，选用同源性较高的模式菌株16S rRNA序列作为参比对象，用Clustal X 1 .8软件进行多序列比对（嗜氨菌YIM B11669的序列如SEQ ID 1所示），计算供试菌株与参比菌株序列的相似性。系统发育分析时排除碱基缺失位点，采用邻接法（NeighborJoining analysis）用MEGA7.0构建供试菌株与参比菌株之间的系统发育树。其中，Bootstrap值设定为1000，其余均为默认值。

图1示出了绘制的嗜氨菌YIM B11669的系统发育树，从中可以看出，嗜氨菌YIMB11669与树脂嗜氨菌Ammoniphilus resinae同源性最高，但同源率为98.15%，低于98.7％，根据Jongsik Chun在2018年发表的为原核生物分类使用基因组数据提出的最低标准，可以判断菌株为嗜氨菌属的新种。

2.2菌株形态特征及生理生化特征鉴定。

参照《伯杰细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对嗜氨菌YIM B11669进行生理生化测定，菌落形态特征。

菌落及细胞形态：图2示出了嗜氨菌YIM B11669在NA培养基上的菌落形态，从图中可以看出，该菌株菌落为近似圆形形状，边缘不整，白色，菌落中间平整或略凸，湿润、无光泽；细胞形态为杆状。

生理生化特征：菌株革兰氏染色为革兰氏可变性，培养的前72h为革兰氏阴性。盐耐受范围为0~2％(w/v)，pH耐受范围为5~9，具有一定的耐盐性和耐酸碱性。过氧化氢酶阳性，氧化酶活性为阴性，兼性厌氧。进一步将菌株与参考标准菌株Ammoniphilus resinae的表型特征进行比较，结果如下表2所示。根据比较结果可以看出，菌株与参考菌株Ammoniphilusresinae都具有硝酸盐还原、吲哚产生、D-葡萄糖同化、D-甘露糖同化、葡萄糖酸盐同化、苹果酸同化、产生碱性磷酸盐酶、酯酶（C4）、类脂酯酶（C8）、亮氨酸芳胺酶的能力，但是嗜氨菌YIM B11669在革兰氏转变时间、培养温度、七叶苷水解、L-阿拉伯糖同化、D-甘露醇同化、N-乙酰葡糖胺同化、D-麦芽糖同化、已二酸同化、柠檬酸同化、苯乙酸同化、细胞色素氧化酶、胱氨酸芳胺酶、胰蛋白酶、酸性磷酸酶、萘酚-AS-BI-磷酸水解酶、α-半乳糖甙酶、N-乙酰-葡萄糖胺酶等生理指标上有所区别。

表2 嗜氨菌YIM B11669与Ammoniphilus resinae的表型特征比较结果

2.3鉴定结果

结合嗜氨菌YIM B11669的分子生物学检测结果和细菌形态及生理生化特征检测结果，鉴定该菌株为嗜氨菌属（Ammoniphilus）的一个新种菌株Ammoniphilussp.

实施例二嗜氨菌的解钾效果与产铁载体和产吲哚乙酸效果

（一）解钾效果评价

1、解钾培养基

解钾培养基（g/L）：钾长石粉1.0；蔗糖 5.0；MgSO₄·7H₂O 0.2；Na₂HPO₄2.0；CaCO₃0.1；FeCl₃0.05；琼脂20；ddH₂O 1000；pH 7.0 - 7.5。

2、评价方法

采用透明圈（晕圈）法利用解钾培养基对嗜氨菌解钾能力的定性检测。采用四点接种法将嗜氨菌YIM B11669接种于解钾菌培养基置于30 ℃恒温培养箱中培养5d，置于光源下观察透明圈（晕圈）的大小情况，并记录透明圈（晕圈）直径（D）与菌落直径（d）的比值。

3、解钾结果

嗜氨菌YIM B11669在解钾培养基培养5d后的透明圈情况，其透明圈直径于菌落直径比为D/d=3.5/2.0可见其具有解钾能力。

（二）产铁载体评价

1、评价方法

采用CAS法嗜氨菌YIM B11669进行铁载体产生能力的定性检测。采用四点接种法将嗜氨菌YIM B11669接种于双层平板上（上层为LB培养基，下层为水琼脂显色剂）置于30℃恒温培养箱中培养5 d，观察下层透明圈的大小情况，并记录透明圈（晕圈）直径（D）与菌落直径（d）的比值。

2、显色剂组成

CAS显色剂配制：将60.5mg铬天青S（Chrome Azurol S，CAS）溶于50mL去离子水中，后与10mL的Fe³⁺溶液（1mM FeCl₃·6H₂O，10mM HCl）混合，混匀后使用0.22 μm滤膜过滤除菌。水琼脂显色液的配制：在100mL蒸馏水中加入2.0 g琼脂，121 ℃高压灭菌20 min，即得水琼脂；待水琼脂冷却至不烫手时，在100mL水琼脂中加入10mL的CAS显色剂，即得水琼脂显色剂。

3、产铁载体结果评价

图3显示了嗜氨菌YIM B11669在双层平板上5d后的透明圈情况，其透明圈直径于菌落直径比D/d为5.5/3.5可见其具有产铁载体能力。

（三）产吲哚乙酸评价

1、定性检测方法

1.1、方法

挑取实施例1中获得的嗜氨菌YIM B11669单菌落接入KB培养基中，30℃ 180 rpm/min震荡培养24 h，无菌条件吸取1 mL发酵液于离心管中，快速与4mL Sackowcki’s显色剂混合，常温下避光静置显色40 min，观察并记录颜色变化，若出现粉红色则为阳性，说明菌株能够分泌IAA。

1.2、培养基

KB培养基：蛋白胨20g/L，甘油15ml/L，K₂HPO₄1.5g/L，MgS0₄·7H₂O 1.5g/L，色氨酸0.1g/L，pH7.2±0.2。Sackowcki’s显色剂：将150mL的浓硫酸缓缓加入到250mL的去离子水中，边加边搅拌，待溶液冷却后加入7.5mL 0.5mol/L的FeCl₃·6H₂O溶液。

1.3、定性结果

图4中图A中显示出嗜氨菌YIM B11669显色情况，其显色为粉红色说明有IAA产生。

2、定量检测

2.1方法

标准曲线的绘制：称取10mg IAA标准品溶解于少量乙醇，蒸馏水定容至100mL（浓度为100(g/mL），梯度稀释至0、4、8、12、16、20、24(g/mL，各取1mL，加入4mL显色剂，40℃避光静置显色40min，于OD₅₃₀下测定OD值，并绘制标准曲线。通过上述步骤绘制所得标准曲线为y=0.0092x + 0.1298 ，R²=0.9938，其中x为IAA含量（mg/L），y为此时对应的吸光度值。

利用NB培养基培养菌液，接种嗜氨菌YIM B11669后将菌悬浮液和空白NB培养液作为对照，10000 r/min离心10min后取上清液4mL，并加入4mL比色液，在黑暗中静置40min，用分光光度计测定其OD₅₃₀值，重复3次，空白NB培养基调零，对比绘制的标准曲线，连续测定5d，记录不同发酵时间颜色变化，并计算各时间段菌株的IAA产量，以得出菌株产IAA最佳发酵时间。

2.2、定量检测结果

图4中图B中示出了YIM B11669发酵液中IAA含量随着培养时间延长的变化情况。从图中可以看出，培养24h时，YIM B11669的发酵液开始含有较少量的IAA（含量约为3.544mg/L），随着培养时间的延长，发酵液中的IAA含量逐步增高，48h和72h的IAA含量分别约为10.867mg/L和19.657mg/L，培养96h时发酵液中的IAA含量约为22.690mg/L。培养120h时，发酵液中IAA含量达到最大值（约为25.565mg/L）。

实施例三嗜氨菌对番茄种子的促萌发和番茄植株的促生长效果

（一）嗜氨菌对番茄种子的促萌发效果

1、方法

1.1实验组设置

CK1：NB空白培养基；CK2：无菌水；T3：1.0×10⁸CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液（由实施例1中获得的嗜氨菌YIM B11669接种于经NB培养基发酵24 h离心后，12000rpm离心5min后取上清获得）；T2：1.0×10⁶CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液；T1：1.0×10⁵CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液。

1.2发芽模型构建

将较多的番茄种子放入水中，取沉淀到水下的种子在水中常温浸泡12h后，取各组种子置于铺垫2-3层灭菌滤纸的9cm透明培养皿中。后取用各组别液体处理以湿润滤纸，置于25±1℃的正常光照条件下培养，其后每天需定时加入等量无菌水将滤纸润湿。7d后，测定发芽情况和根长及整株长。

2、促萌发实验结果

图5中图A和图B显示出处理后第7d各实验组种子萌发情况。其中对照组1使用NB空白培养基处理后第7d，种子出芽但未见子叶；对照组2使用无菌水处理后第七天种子未发芽；实验组1使用1.0×10⁵CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液润湿滤纸处理7d后种子明显萌发，该组根长1.23±0.08cm，整株长2.56±0.52cm；实验组2使用1.0×10⁶CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液润湿滤纸处理后7d种子明显萌发，该组根长1.78±0.12cm，整株长2.41±0.56cm；实验组3使用1.0×10⁸CFU/mL的嗜氨菌发酵上清液润湿滤纸处理后7d部分种子萌发，该组根长0.84±0.29cm，整株长0.96±0.49cm，具体结果见于表3。由此可见1.0×10⁵-1.0×10⁶CFU/mL嗜氨菌发酵上清液对种子萌发的促进效果较好。实验说明嗜氨菌YIM B11669的施用对于番茄的种子的萌发具有显著促进作用，而这也是首次发现的嗜氨菌属细菌对于植物具有促种子萌发作用的效果。

表3 种子萌发数据结果表

注：表中上标小写字母代表显著性差异（P<0.05），数据为平均值 ± 标准误

（二）嗜氨菌对于番茄植株生长促进效果

1、方法

1.1菌剂准备

将实施例1中获得的嗜氨菌YIM B11669接种于含300mL的NB（1%的接种量），30℃、180r/min摇床中培养72h，培养至活菌数约为1×10¹⁰CFU/mL。

1.2土壤及番茄幼苗准备

在每个的花盆中加入相同重量的土壤，按照每个处理3盆随机分组，每盆中栽种3株长势相近的番茄幼苗。

1.3实验组设置

CK1：灭菌NB液体培养基；CK2：灭菌水；T1：浓度约为1×10¹⁰CFU/mL的嗜氨菌YIMB11669菌液；T2：浓度约为1×10⁹CFU/mL的嗜氨菌YIM B11669菌液；T3：浓度约为1×10⁸CFU/mL的嗜氨菌YIM B11669菌液。

1.4促生效果验证

在番茄幼苗移栽到花盆后第7d用100mL/株的上述YIM B11669菌剂对番茄幼苗进行灌根处理，同时采用等量在相同的培养条件下震荡培养72h的无菌水和NB培养基对番茄幼苗进行相同处理作为对照组(CK1和CK2)。置于室外自然生长，期间保持土壤水分的充足。每周对番茄植株叶片数、地径大小、株高进行测量持续进行4周。第4周时附加测量番茄植株的根长，植株地上干重和地下干重。

1.5测量方法

叶片数：对已分化正常状态的叶片进行计数，不包括脱落、枯萎的叶片。

株高：利用直尺测量每株番茄植株顶端到花盆土壤表层的高度，数据取平均值±标准差即为番茄植株的株高。

地径：在离花盆土壤表面1-1.5cm处用游标卡尺测量每株番茄茎的直径大小，各数据取平均值±标准差即为该组番茄植株的地径。

根长：将每株番茄植株地下部分挖出后，用直尺测量从根端到根尖顶端的距离，各组数据取平均值±标准差即为该组番茄植株的根长。

地上干重：将每株番茄植株的地上部分剪下，放入烘箱，190±10℃烘干至恒重，各组数据取平均值±标准差即为该组番茄植株地上部分的干重。

地下干重：将每株番茄植株的地下部分完整挖出，清洗后放入烘箱，190±10℃烘干至恒重，各组数据取平均值±标准差即为该组番茄植株地下部分的干重。

2、结果

结果对比详见图6，从左至右依次为CK1：灭菌NB液体培养基；CK2：灭菌水；T1：浓度约为1×10¹⁰CFU/mL的嗜氨菌YIM B11669菌液；T2：浓度约为1×10⁹CFU/mL的嗜氨菌YIMB11669菌液；T3：浓度约为1×10⁸CFU/mL的嗜氨菌YIM B11669菌液。由图中可明显看出使用YIM B11669菌株菌液处理的实验组根长、株高、生长情况明显优于对照组，T2和T3处理组已经出现开花的现象。

表4与表5分别列出处理14 d和28 d，对照组和实验组番茄幼苗的各项参数测量结果。经计算，灌根处理14 d后，实验组株高均值均大于对照组，其中以T2、T3处理组较为为显著分别高出对照组CK1 54%和51%，高出对照组CK2 32%和30%；地径T2处理组高出对照组CK125%，高出对照组CK2 21%。

灌根处理28d后，实验组地径、株高、根长、地下干重、地上干重均值均大于对照组。其中T2处理组地径分别高出对照组CK1和CK2 25%和23%，T2处理组株高分别高出对照组CK1和CK2 39%和23%，T2处理组根长分别高出对照组CK1和CK2 85%和48%，T2处理组地上干重分别高出对照组CK1和CK2 98%和56%，T2处理组地下干重分别高出对照组CK1和CK2 38%和29%。可见是否施加菌液进行处理对植物的生长有显著效果，证明嗜氨菌YIM B11669的施用对于番茄的生长具有显著促进作用，而这也是首次发现的嗜氨菌属细菌对于植物具有促生作用的效果。

表4 处理14 d后各项参数测量结果表

表5 处理28 d后各项参数测量结果表

注：表中上标小写字母代表显著性差异（P<0.05），数据为平均值 ± 标准误。

最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims

1.一株嗜氨菌（Ammoniphilus sp.），其特征在于，所述嗜氨菌（Ammoniphilus sp.）命名为：嗜氨菌YIM B11669，该菌株保藏编号为CGMCC No.29361。

2.权利要求1所述的嗜氨菌在解钾、产吲哚乙酸、产铁载体中的应用。

3.一种制备铁载体的方法，其特征在于：所述方法包括对权利要求1所述的嗜氨菌进行培养，并收集培养产物。

4.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分包含如权利要求1所述的嗜氨菌。

5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂中嗜氨菌的有效活菌数为1×10⁶~1×10¹¹CFU/g。

6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂中嗜氨菌的有效活菌数为1×10⁸~1×10¹⁰CFU/g。

7.权利要求4-6任一项所述的菌剂或者权利要求1所述的嗜氨菌在促进植物生长和植物种子萌发中的应用。

8.一种促进植物种子萌发的方法，其特征在于：所述方法为：将植物种子浸泡于包含如权利要求4-6任一项所述的菌剂，和/或，权利要求1所述的嗜氨菌的菌液中，所述菌液中嗜氨菌的有效活菌数为1×10⁵CFU/mL-1×10⁶CFU/mL。

9.一种促进植物生长的方法，其特征在于：将权利要求4-6任一项所述的菌剂或者权利要求1所述的嗜氨菌施用于植物根际土壤中，所述嗜氨菌的施用量不低于1×10⁸ CFU/株/次。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述植物为番茄。