CN114982951A - 一种天然银杏酵素的制备方法 - Google Patents
一种天然银杏酵素的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种天然银杏酵素，采用多种水果、蔬菜与银杏共混口感良好，且营养价值丰富；以改性麦芽糊精和结冷胶混合而成的壁材对银杏酵素进行包埋，保持了银杏酵素活性物质的稳定性，增加了酵素在体内的循坏时间；通过对麦芽糊精进行接枝改性，使麦芽糊精和结冷胶形成一种互穿网络结构，使得壁材的结构致密更加稳定，降低了壁材的破裂率；本发明制备得到的银杏酵素质量稳定，益生菌生存率高。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种天然银杏酵素的制备方法。
背景技术
银杏Ginkgo biloba L.为银杏科银杏属多年生落叶乔木，素有“活化石”的美称，在中国、日本、韩国、澳大利亚、英国、法国等均有分布，我国栽培种植银杏的数量占世界首位，约为全世界总量的75％。银杏入药历史悠久，其树叶、果实、花粉、种皮、种仁、果梗、根等部位均有不同程度的药用价值，是传统的活血化瘀中药。《中国药典》2015年版收载银杏叶，其味甘、苦、涩，性平，具有“活血化瘀、通络止痛、敛肺平喘、化浊降脂”之功；收载白果(银杏的干燥成熟种子)，味甘、苦、涩、平，具有“敛肺定喘、止带缩尿”之效。
酵素是公认的纯天然保健产品，酵素中微生物在发酵过程中不仅可产生多种功效酶、氨基酸、短链脂肪酸、醇类、酯类等次级代谢产物，还可能将发酵原材料的某些成分转化成高活性物质。益生菌在自身代谢的过程中，原材料发生复杂的中间代谢或交叉代谢，实现物质转化，产生高生理活性的物质和生物酶，既保留果实中原有的营养，又获得了新的活性物质，其中超氧化物歧化酶能够清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和过氧化氢等活性氧，是细胞防御系统中的主要抗氧化酶。大量研究表明，酵素具有抗疲劳、抗衰老、抑菌消炎、促进消化、提高机体免疫力、保肝护肝、降血脂、预防心血管疾病、抗氧化抗肿瘤、控制糖病、清除自由基、抗诱变突变等功能。
银杏酵素，一般是以银杏或多种新鲜的水果、蔬菜、谷类、菌菇类或其他药食两用草本类为发酵原料，通过微生物发酵后而得到的发酵类产品，富含黄酮类、内酯类、多糖类多种营养生物活性物质，但是在食用过程中，经过胃液的消化作用，银杏酵素中的活性物质会遭到破坏，活性受到抑制，导致保健功能丧失。
CN106213496A公开了一种银杏酵素发酵生产工艺，包括以下步骤：S1、取成熟的野生银杏果，进行脱皮脱壳，然后放入破碎机内进行破碎；S2、将破碎后的银杏果与粉状的低聚异麦芽糖按照9:1的比例混合，然后将混合物密封在桶内，在15-35度的常温下静置18-22天进行第一次厌氧发酵；S3、第一次厌氧发酵后取混合物的液体，与液体状态的低聚异麦芽糖按1:1的比例放入不锈钢搅拌罐，再加入多种益生菌进行搅拌，然后静置进行第二次厌氧发酵，发酵500-600天后取液体进行过滤，过滤掉残渣后得到银杏酵素。该发明利用先进微生物发酵，得取的银杏酵素，有益肺治咳，护血管，清血栓，降三高，滋阴养颜，促进血液循环。但是该发明存在所用原材料单一，产品营养价值不够丰富的缺点，另外单一的银杏果制成的酵素有种涩味，造成口感不佳的问题。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种口感良好、营养价值丰富且能增加在体内循环时间的一种天然银杏酵素。
为实现上述目的，本发明提供了一种天然银杏酵素的制备方法，采用多种水果、蔬菜与银杏共混，口感醇厚，且营养价值丰富；通过壁材对银杏酵素进行包埋，避免银杏酵素中活性物质被破坏的同时还保持了银杏酵素活性物质的稳定性，增加了酵素在体内的循坏时间，促进了人体对酵素的吸收。
为了实现上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂清净沥干，破碎打浆，得到混合果浆，酶解，过滤、灭菌得到酶解液；
S2将培养基经灭菌、冷却后将益生菌接种于培养基中得到活化菌株；
S3将酶解液、葡萄糖、水、活化菌株混合，进行发酵、过滤得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品用壁材进行包埋、冷冻干燥得到银杏酵素。
优选的，一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，并调节pH值为5-7；在40-60℃下酶解2-3h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射10-12h灭菌得到酶解液待用；
S2将固体活化培养基加热至110-130℃灭菌10-30min、冷却至20-40℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于30-40℃下无氧培养20-30h，接种量为2-4wt％，得到活化菌株；
S3将酶解液、葡萄糖、无菌水、活化菌株混合后，在25-35℃条件密封发酵，10-15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材混合，在温度为40-60℃、转速为40-100rpm条件下均质1-2h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.3-0.5μm无菌微滤孔膜除菌后，冷冻干燥后粉碎过10-40目筛，得到所述天然银杏酵素。
优选的，所述步骤S1中银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂的质量比为2-5:1-3:1-3:1-2:1-3:1-2。
优选的，所述步骤S1中果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5-1％。
优选的，所述步骤S2中固体活化培养基由以下质量百分比的成分混合而成：2-7wt％葡萄糖、0.5-1wt％NaCl、2-3wt％琼脂粉、余量为水。
优选的，所述步骤S3中酶解液、葡萄糖、无菌水、活化菌株的质量比为5-10:0.2-1:100-200:0.1-0.5。
优选的，所述步骤S4中酵素粗产品与壁材的质量比为200-300:1。
优选的，所述步骤S4中壁材为麦芽糊精、结冷胶、改性麦芽糊精中的一种或两种以上的混合；进一步优选的，所述壁材为质量比为1-3:1-2的改性麦芽糊精和结冷胶的混合；
进一步优选的，所述改性麦芽糊精的制备方法如下：
将胶原蛋白溶解在水中，加入复合风味蛋白酶进行酶解，灭酶后加入麦芽糊精，调节pH值，加热反应，冷却后经冷冻干燥得到改性麦芽糊精。
进一步优选的，所述改性麦芽糊精的制备方法如下：
将胶原蛋白与水混合后加热至40-70℃，待其溶解后，调节胶原蛋白水溶液pH值为6-8；加入中性蛋白酶在40-50℃下酶解0.5-1h，然后在90-100℃水浴中灭酶10-20min；加入麦芽糊精，调节溶液pH值为6-8，加热至70-80℃反应2-5h，反应完毕后冷却至20-40℃，在-25～-20℃下冷冻干燥20-24h得到改性麦芽糊精。
优选的，所述胶原蛋白、水、麦芽糊精的质量比为1-5：10-30：5-8。
优选的，所述中性蛋白酶的添加量为胶原蛋白水溶液质量的0.05-0.1％。
由于银杏酵素在食用过程中，经过胃液的消化作用，银杏酵素中的活性物质会遭到破坏，活性受到抑制，导致保健功能丧失，所以发明人用壁材对银杏酵素进行了包埋。本发明所用壁材为麦芽糊精和结冷胶的混合。麦芽糊精也称水溶性糊精或酶法糊精。它是以各类淀粉作原料，经酶法工艺低程度控制水解转化、提纯、干燥而成，主要成分为糊精、多聚糖、低聚糖，还含有少量的麦芽糖和葡萄糖，其无色、无异臭味、不甜或极弱的甜味，具有较低的热量和良好的流动性，是一种优良的壁材，但是麦芽糊精的成膜性较差，因此发明人将麦芽糊精和结冷胶联合使用做为壁材。
结冷胶主要成分由葡萄糖、葡萄糖醛酸，鼠李糖为重复结构单元所组成的线形多聚糖，在天然的高乙酰结构中有乙酰基和甘油酸基存在，它们都位于同一个葡萄糖基上，且平均每一个重复结构有一个甘油酸基，而每两个重复结构有一个乙酰基，麦芽糊精和结冷胶可以发生美拉德反应构成凝聚体系，对麦芽糊精的接枝改性，使麦芽糊精具有亲水亲油的性质，能用于结冷胶形成一种互穿网络结构，使得壁材的结构致密更加稳定，降低了壁材的破裂率。发明人将改性麦芽糊精和结冷胶联合使用做为壁材，能更好的对酵素的活性物质进行保护，并在体内进行缓慢释放，可以增加酵素的贮存时间和忍受人体胃肠道环境的能力，可以增加酵素在体内的循坏时间，促进人体对酵素的吸收，可以使肠道保持健康良好的状态。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果：
本发明采用多种水果、蔬菜与银杏共混用以中和银杏产生的涩味，提供了一种营养全面的酵素产品；通过壁材对银杏酵素进行包埋，避免银杏酵素中活性物质被破坏的同时还保持了银杏酵素活性物质的稳定性，增加了酵素在体内的循坏时间，促进了人体对酵素的吸收；通过对麦芽糊精接枝改性，使麦芽糊精和结冷胶形成一种互穿网络结构，使得壁材的结构致密更加稳定，降低了壁材的破裂率；本发明制备得到的银杏酵素质量稳定，益生菌生存率高，具有良好的市场前景。
具体实施方式
为免赘述，以下实施例中用到的物品若无特别说明则均市售产品，用到的方法若无特别说明则均为常规方法。
本发明所用部分原料来源如下：
银杏果，产地江苏泰兴。
苹果，产地陕西洛川。
胡萝卜，产地湖北武汉。
山药，产地河南焦作。
蓝莓，产地吉林长白山。
山楂，产地河北清河。
果胶酶，砷含量为0.001％，酶活力为30000U/g，酶活力保存率为99.99％，山东诺杰生物科技有限公司。
麦芽糊精，熔点为240℃，山东泉盛化工科技有限公司。
结冷胶，为高酰基结冷胶，河南中辰生物科技有限公司。
中性蛋白酶，酶活力为10万U/g，陕西源优生物科技有限公司。
胶原蛋白，含量为99％，分子量为800Da，西安优硕生物科技有限公司。
实施例1
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将300g银杏果、200g苹果、200g胡萝卜、100g山药、200g蓝莓、100g山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5％，并调节pH值为6；在50℃下酶解2h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射12h灭菌得到酶解液待用；S2将固体活化培养基加热至120℃灭菌10min、冷却至30℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于35℃下无氧培养30h，接种量为3wt％，得到活化菌株；所述固体活化培养基由5wt％葡萄糖、0.8wt％NaCl、3wt％琼脂粉、91.2wt％水组成；
S3将500g酶解液、30g葡萄糖、10000g无菌水、40g活化菌株混合后，在30℃条件密封发酵，15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材按质量比为200:1混合后，在温度为40℃、转速为80rpm条件下均质1h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.45μm无菌微滤孔膜除菌后，于-25℃下冷冻干燥48h后粉碎过20目筛，得到所述天然银杏酵素。
所述壁材为质量比为2:1改性麦芽糊精和结冷胶的混合；
所述改性麦芽糊精的制备方法如下：
将3g胶原蛋白与20g水混合后加热至60℃，待其溶解后，调节胶原蛋白水溶液pH值为7；加入中性蛋白酶在45℃下酶解1h，其添加量为胶原蛋白水溶液质量的0.1％；然后在100℃水浴中灭酶10min；加入6g麦芽糊精，调节溶液pH值为7，加热至80℃反应3h，反应完毕后冷却至30℃，在-25℃下冷冻干燥24h得到改性麦芽糊精。
实施例2
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将300g银杏果、200g苹果、200g胡萝卜、100g山药、200g蓝莓、100g山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5％，并调节pH值为6；在50℃下酶解2h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射12h灭菌得到酶解液待用；S2将固体活化培养基加热至120℃灭菌10min、冷却至30℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于35℃下无氧培养30h，接种量为3wt％，得到活化菌株；所述固体活化培养基由5wt％葡萄糖、0.8wt％NaCl、3wt％琼脂粉、91.2wt％水组成；
S3将500g酶解液、30g葡萄糖、10000g无菌水、40g活化菌株混合后，在30℃条件密封发酵，15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材按质量比为200:1混合后，在温度为40℃、转速为80rpm条件下均质1h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.45μm无菌微滤孔膜除菌后，于-25℃下冷冻干燥48h后粉碎过20目筛，得到所述天然银杏酵素。
所述壁材为改性麦芽糊精；
所述改性麦芽糊精的制备方法如下：
将3g胶原蛋白与20g水混合后加热至60℃，待其溶解后，调节胶原蛋白水溶液pH值为7；加入中性蛋白酶在45℃下酶解1h，其添加量为胶原蛋白水溶液质量的0.1％；然后在100℃水浴中灭酶10min；加入6g麦芽糊精，调节溶液pH值为7，加热至80℃反应3h，反应完毕后冷却至30℃，在-25℃下冷冻干燥24h得到改性麦芽糊精。
实施例3
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将300g银杏果、200g苹果、200g胡萝卜、100g山药、200g蓝莓、100g山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5％，并调节pH值为6；在50℃下酶解2h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射12h灭菌得到酶解液待用；S2将固体活化培养基加热至120℃灭菌10min、冷却至30℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于35℃下无氧培养30h，接种量为3wt％，得到活化菌株；所述固体活化培养基由5wt％葡萄糖、0.8wt％NaCl、3wt％琼脂粉、91.2wt％水组成；
S3将500g酶解液、30g葡萄糖、10000g无菌水、40g活化菌株混合后，在30℃条件密封发酵，15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材按质量比为200:1混合后，在温度为40℃、转速为80rpm条件下均质1h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.45μm无菌微滤孔膜除菌后，于-25℃下冷冻干燥48h后粉碎过20目筛，得到所述天然银杏酵素。
所述壁材为麦芽糊精。
实施例4
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将300g银杏果、200g苹果、200g胡萝卜、100g山药、200g蓝莓、100g山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5％，并调节pH值为6；在50℃下酶解2h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射12h灭菌得到酶解液待用；S2将固体活化培养基加热至120℃灭菌10min、冷却至30℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于35℃下无氧培养30h，接种量为3wt％，得到活化菌株；所述固体活化培养基由5wt％葡萄糖、0.8wt％NaCl、3wt％琼脂粉、91.2wt％水组成；
S3将500g酶解液、30g葡萄糖、10000g无菌水、40g活化菌株混合后，在30℃条件密封发酵，15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材按质量比为200:1混合后，在温度为40℃、转速为80rpm条件下均质1h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.45μm无菌微滤孔膜除菌后，于-25℃下冷冻干燥48h后粉碎过20目筛，得到所述天然银杏酵素。
所述壁材为结冷胶。
对比例1
一种天然银杏酵素的制备方法，包括如下步骤：
S1将300g银杏果、200g苹果、200g胡萝卜、100g山药、200g蓝莓、100g山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5％，并调节pH值为6；在50℃下酶解2h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射12h灭菌得到酶解液待用；S2将固体活化培养基加热至120℃灭菌10min、冷却至30℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于35℃下无氧培养30h，接种量为3wt％，得到活化菌株；所述固体活化培养基由5wt％葡萄糖、0.8wt％NaCl、3wt％琼脂粉、91.2wt％水组成；
S3将500g酶解液、30g葡萄糖、10000g无菌水、40g活化菌株混合后，在30℃条件密封发酵，15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品经过0.45μm无菌微滤孔膜除菌后，于-25℃下冷冻干燥48h后粉碎过20目筛，得到所述天然银杏酵素。
测试例1
缓释性能测试：
人体模拟肠液的配置：配置8.5g/L的氯化钠溶液，用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值为8.0，然后加热至37℃，加入猪胰蛋白酶，并调节胰蛋白酶的浓度为1g/L，过滤灭菌，即得人体模拟肠液。各称取实施例1-4、对比例1制得的天然银杏酵素1g分别均匀地分散到9mL人体模拟肠液中，在温度为37℃震荡培养2h，并分别在30min、60min、90min、120min取样，按照平板计数法进行稀释梯度技术，重复三次以上实验，取平均值，根据下式计算植物乳杆菌的释放率(％)，测试结果如表1所示：
释放率＝处理后活菌总数/处理前活菌总数×100
表1释放率测试结果
| 30min | 60min | 90min | 120min | |
| 实施例1 | 15％ | 18％ | 58％ | 85％ |
| 实施例2 | 18％ | 22％ | 60％ | 88％ |
| 实施例3 | 20％ | 25％ | 63％ | 91％ |
| 实施例4 | 23％ | 28％ | 66％ | 90％ |
| 对比例1 | 30％ | 50％ | 84％ | 98％ |
从表1的实验结果可以看出，实施例1制得的天然银杏酵素具有最佳的缓释效果，而实施例1与其他实施例和对比例的区别在于添加了以改性麦芽糊精和结冷胶混合而成的壁材，可能的原因是改性麦芽糊精和结冷胶混合而成的壁材能对酵素进行很好包埋，可以增加酵素的贮存时间和忍受人体胃肠道环境的能力，可以增加酵素在体内的循坏时间，从而提高了酵素的缓释效果。
测试例2
抗氧化性能测定：
自由基清除试验：分别用水将实施例1-4、对比例1制备的天然银杏酵素稀释成1wt％的溶液，加入400μL的DPPH甲醇溶液(1×10-4M)，于37℃下遮光反应30min，测定样品在紫外波长为517nm处的吸光值，将对照溶液、样品溶液、样液本底的测定值分别记为A0、A1、A2，由如下公式计算自由基清除率，代入Vc标准曲线，用Vc当量含量(mg Vc/L)表示，测试结果如表2所示：
表2天然银杏酵素的抗氧化性能测试结果
| V<sub>C</sub>/L | |
| 实施例1 | 37.68 |
| 实施例2 | 32.56 |
| 实施例3 | 28.64 |
| 实施例4 | 27.56 |
| 对比例1 | 24.35 |
从表2的实验结果可以看出，实施例1制得的天然银杏酵素具有最好的抗氧化性能，可能的原因是改性麦芽糊精和结冷胶混合而成的壁材能对酵素进行很好包埋，进而对酵素中抗氧化物质进行很好的保护，提高了酵素的抗氧化能力。
测试例3
肠道微生态重建实验：
本实验选用清洁剂昆明雌鼠，实验过程完全按照动物实验章程进行。
构建肠道菌群失调模型：将40只小鼠正常喂养7天，随机分成八组，选择其中一种作为对照组，其余七组通过灌喂盐酸林可霉素来建立动物模型，连续7天，按0.3mL/次，2次/d灌服，正常对照组灌服生理盐水，7d后，小鼠出现大便不成形，皮毛光泽度降低，肠道菌群失调模型构建成功。
肠道微生态重建实验：将35只肠道菌群失调小鼠分为七组，分别为灌喂实施例1-4、对比例1制得的天然银杏酵素的实验组、益生菌组、未干预组，益生菌组灌喂购买的活菌溶液(0.5亿活菌/mL)，灌喂量均为每只0.3mL，每天灌喂两次，将六组小鼠连续灌喂7d，未干预组则不做任何处理，小鼠依靠自身调节，在此过程中每天观察小鼠的活跃度及粪便形态，并记录体重变化，在最后一次灌喂后将小鼠禁食24h，之后麻醉处死。
肠组织中分泌性免疫球蛋白A(SIgA)指标水平检测：将麻醉处死小鼠，用75wt％的酒精浸泡消毒，在超净工作台内进行解剖，并采集小鼠的十二指肠和回肠，用生理盐水进行清洗，之后将其剪碎并用1mL生理盐水溶解，将组织混悬液离心取上清，按照试剂盒的说明要求进行SIgA含量检测，并记录数据进行统计分析。
肠道可培养微生物的培养：在解剖过程中采集适量小鼠肠道粪便，在离心管中用PBS缓冲液混匀，离心取上清液稀释10倍作为样品溶液备用；取50μL样品溶液在各培养基上进行接种培养，其中接种TSA培养基时将样品稀释至10-4～10-7，接种YPD培养基时将样品稀释至10-2～10-5、接种PDA培养基时将样品稀释至10-1～10-3，设置平行实验，涂布均匀后在恒温培养箱中进行培养，培养完成后进行菌落计数。实验结果如表3所示：
表3肠道微生态重建实验结果
SIgA是分泌性免疫球蛋白A，在肠道中有中和毒素、抑制细菌增长的作用，是肠道防疫系统的一道防线，其含量变化能够反应肠粘膜局部免疫状态，SIgA缺失或功能障碍会引起肠道菌群组成成分的变化。SIgA含量越高，说明肠道功能越好，从表2的实验数据看出，天然银杏酵素的加入可以使小鼠肠道微生态恢复，并调节肠道菌群平衡。而实施例1制得天然银杏酵素的肠道恢复功能最好，可能的原因是改性麦芽糊精和结冷胶混合而成的壁材对酵素活性物质的保护最好，使麦芽糊精和结冷胶形成一种互穿网络结构，使得壁材的结构致密更加稳定，降低了壁材的破裂率，增加了酵素在小鼠体内的循坏时间，促进了小鼠对酵素的吸收，经过肠道的消化吸收，活性物质缓慢释放，酵素中的益生菌可以更好地实现对肠道功能的恢复。
Claims (10)
1.一种天然银杏酵素，其特征在于，采用如下方法制备：
S1将银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂清净沥干，破碎打浆，得到混合果浆，酶解，过滤、灭菌得到酶解液；
S2将培养基经灭菌、冷却后将益生菌接种于培养基中得到活化菌株；
S3将酶解液、葡萄糖、水、活化菌株混合，进行发酵、过滤得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品用壁材进行包埋、冷冻干燥得到银杏酵素。
2.如权利要求1所述的天然银杏酵素，其特征在于，采用如下方法制备：
S1将银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂用水清洗干净沥干，用榨汁机破碎打浆，充分搅拌均匀后得到混合果浆，加入果胶酶，并调节pH值为5-7；在40-60℃下酶解2-3h后，经过二次过滤收集滤液，滤液经紫外照射10-12h灭菌得到酶解液待用；
S2将固体活化培养基加热至110-130℃灭菌10-30min、冷却至20-40℃；将植物乳杆菌接种于上述培养基中于30-40℃下无氧培养20-30h，接种量为2-4wt％，得到活化菌株；
S3将酶解液、葡萄糖、无菌水、活化菌株混合后，在25-35℃条件密封发酵，10-15天后将发酵液过滤，收集滤液得到酵素粗产品；
S4将酵素粗产品与壁材混合，在温度为40-60℃、转速为40-100rpm条件下均质1-2h形成乳浊液，然后将乳浊液经过0.3-0.5μm无菌微滤孔膜除菌后，冷冻干燥后粉碎过筛，得到所述天然银杏酵素。
3.如权利要求1或2所述的天然银杏酵素，其特征在于：所述步骤S1中银杏果、苹果、胡萝卜、山药、蓝莓、山楂的质量比为2-5:1-3:1-3:1-2:1-3:1-2。
4.如权利要求1或2所述的天然银杏酵素，其特征在于：所述步骤S1中果胶酶的添加量为混合果浆质量的0.5-1％。
5.如权利要求1或2所述的天然银杏酵素，其特征在于，所述步骤S2中固体活化培养基由以下质量百分比的成分混合而成：2-7wt％葡萄糖、0.5-1wt％NaCl、2-3wt％琼脂粉、余量为水。
6.如权利要求1或2所述的天然银杏酵素，其特征在于：所述步骤S3中酶解液、葡萄糖、无菌水、活化菌株的质量比为5-10:0.2-1:100-200:0.1-0.5。
7.如权利要求1或2所述的天然银杏酵素，其特征在于：所述步骤S4中壁材为麦芽糊精、结冷胶、改性麦芽糊精中的一种或两种以上的混合物。
8.如权利要求7所述的天然银杏酵素，其特征在于：所述步骤S4中壁材为质量比为1-3:1-2的改性麦芽糊精和结冷胶的混合。
9.如权利要求8所述天然银杏酵素，其特征在于，所述改性麦芽糊精的制备方法如下：
将胶原蛋白与水混合后加热至40-70℃，待其溶解后，调节胶原蛋白水溶液pH值为6-8；加入中性蛋白酶在40-50℃下酶解0.5-1h，然后在90-100℃水浴中灭酶10-20min；加入麦芽糊精，调节溶液pH值为6-8，加热至70-80℃反应2-5h，反应完毕后冷却至20-40℃，在-25～-20℃下冷冻干燥20-24h得到改性麦芽糊精。
10.如权利要求9所述天然银杏酵素，其特征在于：所述胶原蛋白、水、麦芽糊精的质量比为1-5：10-30：5-8。
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