CN114908132A - 一种利用生物合成法制备曲酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括选取菌种、配置种子培养基、配置发酵培养基、发酵培养、发酵液提取和曲酸检测七个步骤。通过设置的不同氮源和碳源的培养基之间进行对比，从而寻找最合适的碳源和氮源培养基，使产曲酸曲霉在适宜的营养环境生长，将其性能发挥到最优水平，从而满足工业生产需求，培养基及发酵方法可以使曲酸产量达提上，该方法能显著提高曲酸的产量和生产效率，降低生产成本，为其工业化生产提供了基础。
Description
技术领域
本发明涉及曲酸制备相关技术领域，特别是涉及一种利用生物合成法制备 曲酸的方法。
背景技术
曲酸学名5-羟基-2-羟甲基-1，4-吡喃酮，是曲霉属的某些菌株以糖类为原 料，经好氧发酵生产的一种弱酸性次级代谢产物。曲酸具有较强的抗菌、抗氧 化、与金属离子螯合和抑制酪氨酸酶活性的作用，也是制备增香剂麦芽酚和乙 基麦芽酚的工业原料，因此，曲酸作为稳定剂、保鲜剂、护色剂、增香剂、多 酚氧化酶抑制剂、农作物生长促进剂、杀虫剂和祛斑剂等被广泛用于食品加工、 化妆品、医药、香料生产和农作物生产的诸多领域。
产曲酸曲霉作为典型的丝状真菌，液态深层发酵与其他单细胞微生物相比， 一个显著的特征是个体形态具有明显的变化，易形成多种形态，使其发酵过程 变得复杂与难以控制。丝状真菌在液态发酵过程中菌体形态主要分为丝状、球 状、团状，这主要由自身的遗传特性与环境因素共同影响。
曲酸的产量不仅与菌株的遗传特性有关，还与其所处的环境有着密切的关 系。微生物的生长代谢是非常复杂的生化过程，需要大量的营养物质作为底物 或诱导物，同时也有一些物质会对微生物的生长代谢产生抑制，即使是同一种 物质也有可能随着浓度的变化而对曲酸发酵产生不同影响的现象。微生物只有 在适宜的营养环境生长代谢才能将其性能发挥到最优水平，而原始条件往往不 能满足工业生产需求。培养基组分及其配比不合理会直接降低曲酸的产率和提 高生产成本。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种利用生物合成法制备曲 酸的方法，解决了培养基组分及其配比不合理会直接降低曲酸的产率和提高生 产成本的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种利用生物合成法制备曲 酸的方法，包括以下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种。
S2：配置种子培养基：碳源200-400g、氮源10-40g、KH2PO45-15g、 MgSO4.7H2O1-10g、KCl1-10g、FeSO40.1-0.5g和水10000mL，配置完毕后以待备 用。
S3：配置发酵培养基：碳源800-1200g、氮源30-80g、KH2PO410-30g、 MgSO4.7H2O1-10g、KCl1-5g和水10000mL，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.05-0.1MPa，通风量0.8-1.5vvm，发酵温度为28-33℃培养一段时间，备用。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
在进一步的技术方案中，所述S1步骤中所选取的产曲酸曲霉菌种为不产生 黄曲霉毒素菌种。
在进一步的技术方案中，所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵 培养基中所采用的碳源为玉米粉、玉米淀粉、蔗糖和葡萄糖中的一种。
在进一步的技术方案中，所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵 培养基中所采用的氮源为NH4NO3、(NH4)2SO4、豆饼粉和蛋白陈中的一种。
在进一步的技术方案中，所述S4步骤发酵罐A在开启搅拌进行搅拌培养时 搅拌装置的转速为100-200r/min，培养的温度为30-40℃，培养的时间为24h。
在进一步的技术方案中，所述S5步骤发酵罐B在开启搅拌进行搅拌培养时 搅拌装置的转速为50-100r/min，培养的温度为25-35℃，培养的时间为120h。
在进一步的技术方案中，所述S5发酵培养在进行时需要在无菌空间内进行， 并且在进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步， 其中空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保 证系统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进 行灭菌。
在进一步的技术方案中，所述S2步骤中所配置的种子培养基的PH为 6.8-7.5，所述S3步骤中所配置的发酵培养基的PH为3.8-4.2。
本发明的有益效果是：
通过设置的不同氮源和碳源的培养基之间进行对比，从而寻找最合适的碳 源和氮源培养基，使产曲酸曲霉在适宜的营养环境生长，将其性能发挥到最优 水平，从而满足工业生产需求，培养基及发酵方法可以使曲酸产量达提上，该 方法能显著提高曲酸的产量和生产效率，降低生产成本，为其工业化生产提供 了基础。
具体实施方式
实施例一：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：葡萄糖300g、NHNO330g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、 KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为7，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：葡萄糖1000g、NH4NO350g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、 KCl3g和水10000mL，PH为4，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.05MPa，通风量0.8vvm，发酵温度为28℃培养一段时间，备用，进行培养发 酵罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培 养的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例二：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：玉米粉300g、NHNO330g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、 KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为7.2，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：玉米粉1000g、NH4NO350g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、 KCl3g和水10000mL，PH为4，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.1MPa，通风量1.5vvm，发酵温度为33℃培养一段时间，备用，进行培养发酵 罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培养 的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例三：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：玉米淀粉300g、NH4NO350g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、 KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为6.8，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：玉米淀粉1000g、NH4NO350g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、 KCl3g和水10000mL，PH为4.1，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.08MPa，通风量1.3vvm，发酵温度为29℃培养一段时间，备用，进行培养发 酵罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为200r/min，培养的温度为30℃，培 养的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例四：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：蔗糖300g、NH4NO330g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为6.9，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：蔗糖1000g、NH4NO350g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、 KCl3g和水10000mL，PH为3.9，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.05MPa，通风量0.8vvm，发酵温度为28℃培养一段时间，备用，进行培养发 酵罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培 养的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例五：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：葡萄糖300g、(NH4)2SO430g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为7.1，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：葡萄糖1000g、(NH4)2SO450g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、KCl3g和水10000mL，PH为4.2，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.1MPa，通风量1.5vvm，发酵温度为33℃培养一段时间，备用，进行培养发酵 罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培养 的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例六：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：葡萄糖300g、豆饼粉30g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、 KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为7，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：葡萄糖1000g、豆饼粉50g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、 KCl3g和水10000mL，PH为3.9，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.1MPa，通风量1.5vvm，发酵温度为33℃培养一段时间，备用，进行培养发酵 罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培养 的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
实施例七：
本发明提供一种技术方案：一种利用生物合成法制备曲酸的方法，包括以 下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种，且产曲酸曲霉菌种 为不产生黄曲霉毒素菌种。
S2：配置种子培养基：葡萄糖300g、蛋白陈30g、KH2PO410g、MgSO4.7H2O5g、 KCl5g、FeSO40.2g和水10000mL，PH为7.2，配置完毕后以待备用。
S3：配置发酵培养基：葡萄糖1000g、蛋白陈50g、KH2PO420g、MgSO4.7H2O5g、KCl3g和水10000mL，PH为4.2，配置完毕后以待备用。
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭 菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有 种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为 0.05MPa，通风量0.8vvm，发酵温度为28℃培养一段时间，备用，进行培养发 酵罐A在进行搅拌培养时搅拌装置的转速为150r/min，培养的温度为30℃，培 养的时间为24h。
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并 将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进 行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用，发酵罐B 在搅拌装置的顶部进行搅拌培养时搅拌装置的转速为80r/min，培养的温度为 30℃，培养的时间为120h，在进行发酵培养时需要在无菌空间内进行，并且在 进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中 空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系 统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭 菌。
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理， 然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发 酵罐C中。
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液 进行曲酸检测。
分别取上述实施例中加入FeCl2·HCl溶液的发酵液于500nm的处检测吸光 度，检测发酵液中曲酸的含量，如下表：
由上表可知，通过产曲酸曲霉制备曲酸的产量和培养基中所采用的氮源和 碳源有关，其中以蔗糖为碳源所得的曲酸产量最高，以蛋白陈＝胨为氮源的培养 所得菌体量多而菌丝球小，产曲酸最高。
以上实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但 并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改 进，这些都属于本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种；
S2：配置种子培养基：碳源200-400g、氮源10-40g、KH2PO45-15g、MgSO4.7H2O1-10g、KCl1-10g、FeSO40.1-0.5g和水10000mL，配置完毕后以待备用；
S3：配置发酵培养基：碳源800-1200g、氮源30-80g、KH2PO4 10-30g、MgSO4.7H2O1-10g、KCl 1-5g和水10000mL，配置完毕后以待备用；
S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为0.05-0.1MPa，通风量0.8-1.5vvm，发酵温度为28-33℃培养一段时间，备用；
S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用；
S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理，然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发酵罐C中；
S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl2·HCl溶液进行曲酸检测。
2.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S1步骤中所选取的产曲酸曲霉菌种为不产生黄曲霉毒素菌种。
3.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵培养基中所采用的碳源为玉米粉、玉米淀粉、蔗糖和葡萄糖中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵培养基中所采用的氮源为NH4NO3、(NH4)2SO4、豆饼粉和蛋白陈中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S4步骤发酵罐A在开启搅拌进行搅拌培养时搅拌装置的转速为100-200r/min，培养的温度为30-40℃，培养的时间为24h。
6.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S5步骤发酵罐B在开启搅拌进行搅拌培养时搅拌装置的转速为50-100r/min，培养的温度为25-35℃，培养的时间为120h。
7.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S5发酵培养在进行时需要在无菌空间内进行，并且在进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌。
8.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤中所配置的种子培养基的PH为6.8-7.5，所述S3步骤中所配置的发酵培养基的PH为3.8-4.2。
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