CN114908026A - 一种反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种反刍专用液态复合微生态制剂，包括以下重量百分比的原料：屎肠球菌20％、植物乳杆菌15％、嗜酸乳杆菌15％、枯草芽孢杆菌20％、普利菌‑7 15％和酿酒酵母15％。该反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法，在反刍动物胃肠道内，枯草芽抱杆菌的芽抱、酿酒酵母和普利菌‑7能够迅速萌发，繁殖，消耗肠内氧气，抑制有害菌的生长，从而保护何促进益生菌的生长，以维护肠道微生态平衡，屎肠球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌繁殖能力强，可耐受胃酸及肠道胆盐高渗透压环境，且粘附能力强，可在肠道定植发挥益生作用，可调节和改善微生物菌群的比例，本发明中采用的微生物菌种抗逆性强，可定植于畜禽肠道，具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性。

Description

一种反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及饲料微生物技术领域，具体为一种反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法。
背景技术
上世纪40年代末，抗生素作为饲料添加剂被应用于畜禽养殖业，抗生素及其他化学药品用作饲料添加剂，可以促进畜禽的生长或预防病原菌感染，病原菌疾病的发生，对饲料工业及养殖业的发展作出了巨大贡献，但随着抗生素的大量使用，特别是不科学的滥用，引起了抗生素的药物残留问题，目前，很多国家和饲养者反对以抗生素作为生长促进剂，甚至通过立法对愈来愈多的药物品种加以禁止，最大限度地减少农药残留，生产无污染和无残留的绿色农副产品，是国家和企业面临的刻不容缓的任务，在这种背景下，人们纷纷把目光投向了具有多重功能的无毒、无副作用和无残留的微生态活菌制剂，微生态菌种之间存在着相互影响抑制作用与相互激发的积极作用，科学合理的复合菌可以极大的提高单一菌种功能和效率，将多种有益菌复合成制剂其功效会表现得更为全面更为突出，因此，开展复合微生态制剂活菌技术研究作用重大，意义深远，空间广阔，2013年，中国农业部发布了2045号公告，《饲料添加剂品种目录》明确规定饲用微生物添加剂的种类，屎肠球菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母均位列其中。
目前，市场上已有众多的同类产品但还存在许多不足，比如产品中微生物菌株功能不高效；包含菌株种类多但不乏滥竽充数；菌株环境适应范围小；产品中菌株间的协作关系不好，协同效应不好；液体深层发酵技术不稳定，产品一致性差；后处理不当，产品维持性差，且生产工艺安全性不佳，制作工艺简单且成本高功效不佳等问题，大大的降低了饲料微生物制剂的发展前景，故而提出一种反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法，具备配方安全合理，工艺科学简单，成本低功效高等优点。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种反刍专用液态复合微生态制剂，包括以下重量百分比的原料：屎肠球菌20％、植物乳杆菌15％、嗜酸乳杆菌15％、枯草芽孢杆菌20％、普利菌-7 15％和酿酒酵母15％。
一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)准备好制备需要的工具和机械等，再按一定比例称取原料备用；
2)在150ML-250ML的发酵罐中装入50ML-100ML的微生物液体培养基备用；
3)按照一定百分比的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入屎肠球菌，植物乳杆菌，嗜酸乳杆菌，枯草芽孢杆菌，普利菌-7和酿酒酵母，再分别放于恒温培养箱中培养一定时间得到一级菌剂；
4)将每个材料制得的一级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，可得到活菌数为一定量的二级菌剂；
5)将每个材料制得的二级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，即可得到活菌数为一定量的液态高密度培养液；
6)分别将将屎肠球菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和普利菌-7的液态高密度培养液以4︰3︰3︰4︰3︰3比例进行配比，再真空包装即可得到最终菌剂。
进一步，所述屎肠球菌菌剂的制备方法如下：
①所述屎肠球菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为150ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为50rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入5L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温培养16h，转速为100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
⑤所述屎肠球菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，碳酸钙1％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
进一步，所述植物乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述植物乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温静止培养24h；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入200ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温静止培养18h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温静止24h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述植物乳杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
进一步，所述嗜酸乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述嗜酸乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入500ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养18h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，转速为200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述植物乳杆菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
进一步，所述枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述枯草芽孢杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入10L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养48h，转速为200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
⑤所述枯草芽孢杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖1％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，麦麸3％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
进一步，所述酿酒酵母菌剂的制备方法如下：
①所述酿酒酵母外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入1L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，搅拌转速150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养24h，转速为150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述酿酒酵母液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
进一步，所述普利菌-7菌剂的制备方法如下：
①所述普利菌-7外购，主要成分是啤酒酵母，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入1L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，搅拌转速150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养24h，转速为150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述普利菌-7液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
与现有技术相比，本申请的技术方案具备以下有益效果：
1、该反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法，在反刍动物胃肠道内，枯草芽抱杆菌的芽抱、酿酒酵母和普利菌-7能够迅速萌发，繁殖，消耗肠内氧气，抑制有害菌的生长，从而保护何促进益生菌的生长，以维护肠道微生态平衡，屎肠球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌繁殖能力强，可耐受胃酸及肠道胆盐高渗透压环境，且粘附能力强，可在肠道定植发挥益生作用，可调节和改善微生物菌群的比例。
2、该反刍专用液态复合微生态制剂及其制备方法，产品呈液态，乳酸菌活菌浓度含量高，活菌数≧1×109CFU/ML，液态复合微生态制剂中含有丰富的乳酸菌代谢产物，酸味更适宜畜禽味觉，有利于采食量增加，可以直接喂饲制剂，也可喷洒饲料表面喂饲，本发明中采用的微生物菌种抗逆性强，可定植于畜禽肠道，具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性；具有耐高温、耐胆盐、耐酸和耐抗生素等极高的稳定性；能够持续改善动物的生产性能，降低料肉比，减少死亡率与下痢的发生，为代替抗生素提供了有力依据。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本实施例中的一种反刍专用液态复合微生态制剂，包括以下重量百分比的原料：屎肠球菌20％、植物乳杆菌15％、嗜酸乳杆菌15％、枯草芽孢杆菌20％、普利菌-7 15％和酿酒酵母15％。
一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)准备好制备需要的工具和机械等，再按一定比例称取原料备用；
2)在150ML-250ML的发酵罐中装入50ML-100ML的微生物液体培养基备用；
3)按照一定百分比的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入屎肠球菌，植物乳杆菌，嗜酸乳杆菌，枯草芽孢杆菌，普利菌-7和酿酒酵母，再分别放于恒温培养箱中培养一定时间得到一级菌剂；
4)将每个材料制得的一级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，可得到活菌数为一定量的二级菌剂；
5)将每个材料制得的二级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，即可得到活菌数为一定量的液态高密度培养液；
6)分别将将屎肠球菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和普利菌-7的液态高密度培养液以4︰3︰3︰4︰3︰3比例进行配比，再真空包装即可得到最终菌剂。
屎肠球菌菌剂的制备方法如下：
①屎肠球菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为150ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为50rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入5L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温培养16h，转速为100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
⑤屎肠球菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，碳酸钙1％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
植物乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①植物乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温静止培养24h；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入200ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温静止培养18h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温静止24h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤植物乳杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
嗜酸乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①嗜酸乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入500ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养18h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，转速为200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤植物乳杆菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法如下：
①枯草芽孢杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入10L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养48h，转速为200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
⑤枯草芽孢杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖1％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，麦麸3％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
酿酒酵母菌剂的制备方法如下：
①酿酒酵母外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入1L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，搅拌转速150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养24h，转速为150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤酿酒酵母液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
普利菌-7菌剂的制备方法如下：
①普利菌-7外购，主要成分是啤酒酵母，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入1L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，搅拌转速150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养24h，转速为150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤普利菌-7液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
本发明的有益效果是：
本发明的反刍专用复合微生态制剂呈液态，乳酸菌活菌浓度含量高，活菌数≧1×109CFU/ML，液态复合微生态制剂中含有丰富的乳酸菌代谢产物，酸味更适宜畜禽味觉，有利于采食量增加，可以直接喂饲制剂，也可喷洒饲料表面喂饲，本发明中采用的微生物菌种抗逆性强，可定植于畜禽肠道，具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性；具有耐高温、耐胆盐、耐酸和耐抗生素等极高的稳定性；能够持续改善动物的生产性能，降低料肉比，减少死亡率与下痢的发生，为代替抗生素提供了有力依据，在反刍动物胃肠道内，枯草芽抱杆菌的芽抱、酿酒酵母和普利菌-7能够迅速萌发，繁殖，消耗肠内氧气，抑制有害菌的生长，从而保护何促进益生菌的生长，以维护肠道微生态平衡，屎肠球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌繁殖能力强，可耐受胃酸及肠道胆盐高渗透压环境，且粘附能力强，可在肠道定植发挥益生作用，可调节和改善微生物菌群的比例。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种反刍专用液态复合微生态制剂，其特征在于，包括以下重量百分比的原料：屎肠球菌20％、植物乳杆菌15％、嗜酸乳杆菌15％、枯草芽孢杆菌20％、普利菌-7 15％和酿酒酵母15％。
2.一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)准备好制备需要的工具和机械等，再按一定比例称取原料备用；
2)在150ML-250ML的发酵罐中装入50ML-100ML的微生物液体培养基备用；
3)按照一定百分比的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入屎肠球菌，植物乳杆菌，嗜酸乳杆菌，枯草芽孢杆菌，普利菌-7和酿酒酵母，再分别放于恒温培养箱中培养一定时间得到一级菌剂；
4)将每个材料制得的一级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，可得到活菌数为一定量的二级菌剂；
5)将每个材料制得的二级菌剂按无菌操作分别接入一定量的无菌改良MRS培养基中，并按一定的接种量，在恒温箱内培养一定时间，即可得到活菌数为一定量的液态高密度培养液；
6)分别将将屎肠球菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和普利菌-7的液态高密度培养液以4︰3︰3︰4︰3︰3比例进行配比，再真空包装即可得到最终菌剂。
3.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述屎肠球菌菌剂的制备方法如下：
①所述屎肠球菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为150ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为50rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入5L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温培养16h，转速为100rpm，活菌数为≧1×1010CFU/ML；
⑤所述屎肠球菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，碳酸钙1％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
4.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述植物乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述植物乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温静止培养24h；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入200ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温静止培养18h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温静止24h，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述植物乳杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
5.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述嗜酸乳杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入500ML无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养18h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，转速为200rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述植物乳杆菌液态培养的改良MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
6.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法如下：
①所述枯草芽孢杆菌外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有50ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为200rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入10L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养16h，搅拌转速200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为4％，37℃恒温好氧培养48h，转速为200rpm，活菌数为≧5×109CFU/ML；
⑤所述枯草芽孢杆菌液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖1％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，麦麸3％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
7.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述酿酒酵母菌剂的制备方法如下：
①所述酿酒酵母外购，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
③二级菌剂——将一级菌液按无菌操作接入1L无菌改良MRS培养基中，接种量为3％，37℃恒温好氧培养24h，搅拌转速150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
④发酵罐扩大培养——将二级菌液按无菌操作接入200L无菌改良MRS培养基中，接种量为2％，37℃恒温好氧培养24h，转速为150rpm，活菌数为≧1×109CFU/ML；
⑤所述酿酒酵母液态培养的优化MRS培养基为：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母浸粉0.5％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸氢二铵2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，吐温80 0.1％，pH值7.0±0.2。
8.根据权利要求2所述的一种反刍专用液态复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述普利菌-7菌剂的制备方法如下：
①所述普利菌-7外购，主要成分是啤酒酵母，经筛选纯化获得优良纯种菌株；
②一级菌剂——将活化斜面菌种接种于装有100ML无菌改良MRS培养基的锥形瓶中，锥形瓶容积为250ML，放于37℃恒温震荡培养箱中培养24h，转速为150rpm；
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