CN114907987A - 一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株及其应用。该菌株命名为弯孢菌CLD001（Curvularia CLD001），于2022年4月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.40127，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏地址的邮编为100101。该菌株能够吸附重金属镉。
Description
技术领域
本发明涉及弯孢菌(Curvularia)，具体涉及一株从水稻中分离出的具有高抗镉和高效吸附镉的弯孢菌株，其能高效吸附重金属镉。
背景技术
镉是重要的环境污染物，主要来源于矿产冶炼、电镀和塑料制品生产等。镉污染很难在环境中降解，往往通过食物链途径进入生物体内。当生物体内的镉含量超过一定限量时﹐便会破坏生物体正常的新陈代谢，从而危害生态环境及人畜健康。当前，重金属污染日益严重，污染治理已迫在眉睫，重金属污染中主要是镉污染。
传统的修复污水中重金属离子方法存在许多无法避免的副作用：如处理效率较低、成本高、一级存在二次污染等问题。近10年来，生物吸附作为一个理想的效率高、成本低的污水处理方法被呼吁，微生物可通过生物转化和生物吸附改变土壤中重金属的生物有效性，从而清除或稳定环境中的重金属，生物法治理重金属污染已被认可并广泛应用，因此，寻找到一种具有重金属镉吸附功能的微生物去修复污水具有十分重要的意义。
当前，弯孢菌(Curvularia)的研究大多集中在其致病性以及分类鉴定上，对其重金属抗性特别是镉耐受性和镉吸附性的研究报道极少。
发明内容
本发明的目的在于提供一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株，及其吸附镉的应用。
本发明所述耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株从水稻种子中自然分离获得，对其进行了形态学、生理生化性质和ITS测序鉴定，将该菌株命名为弯孢菌CLD001(CurvulariaCLD001)，属半知菌类、丛梗孢目、暗梗孢科、弯孢属。该菌株已于2022年4月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.40127，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏地址的邮编为100101。
具体地，该菌株的ITS序列如SEQ ID No.3所示。
本发明还提供了所述的弯孢菌CLD001菌株的分离纯化、鉴定的方法以及该菌对镉吸附性的研究，包括如下步骤：菌种分离纯化、原种制作、CLD001菌株对镉吸附性研究。所述原种制作是指将弯孢菌CLD001母种接种到液体培养基或固体培养基中得到液体菌种或固体菌种。
具体地，菌种分离纯化的操作如下：
(1)耐镉菌株的初筛：从水稻种子中分离出耐镉的菌株，将菌株接种到氯化镉浓度为25mmol/L(5709mg/L)的固体平板培养基上筛选培养，每个浓度设置3个重复；28℃恒温培养4～8d，观察记录单菌落特征；
(2)耐镉真菌复筛：在无菌条件下，用接种针挑取氯化镉浓度为25mmol/L(5709mg/L)平板固体培养基上各个单菌落分别划线于浓度梯度为25mmol/L(5709mg/L)和50mmol/L(11418mg/L)的PDA氯化镉固体平板培养基上筛选耐镉能力强的菌株，得到的菌株在平板上划线转接3次以上进行菌株纯化，并挑选长势好、菌落饱满的单菌接种到马铃薯培养基平板，作为弯孢菌CLD001母种。
具体地，得到所述液体菌种的操作如下：弯孢菌CLD001母种转接到PDA液体培养基中，置于180r/min的摇床上，28℃暗光培养4～8d，得到液体菌种。
进一步地，得到所述固体菌种的操作如下：弯孢菌CLD001母种接入PDA固体培养基中，28℃培养10～15d，得到固体菌种。
具体地，所述CLD001菌株对镉吸附性的研究操作如下：将CLD001固体菌种接种到氯化镉浓度为50mmol/L(11418mg/L)的PDA液体培养基中进行摇床处理培养9d，处理完成后，用滤纸将处理培养9d的菌体和液体培养基过滤分离，用ICP-MS分别测定菌体内部吸收的镉的浓度以及液体培养基溶液中残余的镉的浓度。
其中，所述CLD001菌株对镉吸附性实验得出结果如下：将CLD001固体菌种直接接种到氯化镉浓度为50mmol/L(11418mg/L)的PDA液体培养基中进行摇床处理培养9d后，过滤分离菌体和液体培养基后用ICP-MS测得液体培养基溶液中残余的镉的浓度为576mg/L；用ICP-MS测得液体菌体内部吸附的镉浓度为4439mg/kg，说明该菌通过将镉吸收进菌体内部，从而达到除去培养基中的镉的目的。
本发明的优点在于提供一株耐镉且能高效吸收镉的弯孢菌优良菌株。该菌株是从水稻种子中自然分离出的天然菌株，其应用不会对生态造成不良影响，首先利用该菌株可对镉污染严重的农田进行生物吸附修复该农田的重金属污染；广泛地，还可利用该菌进行污水修复，利用该菌进行生物吸附是一种效率高、成本低的污水处理方法，在治理重金属污染方面有着很大的潜在应用价值。
附图说明
图1为本发明实施例中弯孢菌CLD001的菌体透射电镜图。
图2为本发明实施例中弯孢菌CLD001的菌体透射电镜能谱图。
具体实施方式
下面对本发明进行清楚、完整地描述。以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
实施例1：CLD001菌株的分离纯化及鉴定
1.培养基制作：配制PDA培养基(土豆200g、葡萄糖20g、超纯水1000mL)。
2.菌种分离与纯化：
耐镉菌株的发现与初筛：从“沪优二号”水稻种子中分离出耐镉的菌株，将菌株接种到氯化镉浓度为25mmol/L(5709mg/L)的固体平板培养基上筛选培养，每个浓度设置3个重复；28℃恒温培养4～8d，观察记录单菌落特征；
耐镉菌株复筛：在无菌条件下，用接种针挑取氯化镉浓度为25mmol/L的PDA固体培养基上的各个单菌落分别划线于氯化镉浓度梯度为10mmol/L(2283.6mg/L)、25mmol/L(5709mg/L)和50mmol/L(11418mg/L)的PDA固体培养基平板上筛选耐镉能力强的菌株，得到的菌株在平板上划线转接3次以上进行菌株纯化，并挑选长势好、菌落饱满的单菌接种到马铃薯培养基平板，作为弯孢菌CLD001母种。进行下一步菌株鉴定和吸附性研究。
3.CLD001菌株形态学鉴定：分离和纯化后获得的CLD001菌株接种到马铃薯培养基平板中央，28℃培养8d，观察菌落形态。
CLD001菌株在PDA培养基上菌落呈圆形，平整，周缘整齐。菌丝初为灰白色，后逐渐转为墨绿至黑色，短绒状，致密。显微镜下观察，菌丝无色或淡褐色，有隔膜，多分支。分生孢子梗单生或簇生，产生于菌丝末端和中央细胞，少分枝。分生孢子顶端侧生，近卵形，有隔膜，色较深，端部颜色稍浅。
4.CLD001菌株ITS序列测定：
采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒法提取CLD001菌株的基因组DNA并以其作为模板，以引物ITS1：5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’(SEQ ID No.1)和引物ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’(SEQ ID No.2)为引物对，进行PCR扩增。PCR反应参数为：94℃预变性4min；94℃变性45S，55℃退火45S，72℃延伸1min，共30个循环；72℃扩增后延伸10min，4℃终止反应。PCR扩增产物经1％琼脂糖电泳(150V、100mA、20min)电泳检测后，用解剖刀割下凝胶上的目的条带﹐采用SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒纯化回收PCR产物，送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。
CLD001菌株经过测序得到一段568bp的序列(SEQ ID No.3)：
ACCTGCGGAGGGATCATTACACAATAAACATATGAAGGCTGCACCGCCAACAGGCGGCAAGGCTGGAGTATTTTATTACCCTTGTCTTTTGCGCACTTGTTGTTTCCTGGGCGGGTTCGCCCGCCTCCAGGACCACATGATAAACCTTTTTTATGCAGTTGCAATCAGCGTCAGTACAACAAATGTAAATCATTTACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAGTGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCTTTGGTATTCCAAAGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTGTACCCTCAAGCTTTGCTTGGTGTTGGGCGTTTTTTGTCTTTGGTTTTGTCCAAAGACTCGCCTTAAAACGATTGGCAGCCGGCCTACTGGTTTCGCAGCGCAGCACATTTTTGCGCTTGCAATCAGCAAAAGAGGACGGCACTCCATCAAGACTCTATATCACTTTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAAA
将该序列进行Blast序列分析，采用BLAST进行同源性搜索，与数据库中各菌株序列进行相似性比对，将该菌株鉴定为Curvularia。
实施例2：CLD001菌株对镉的吸附性研究
1.CLD001菌种的培养
(1)液体菌种：将弯孢菌CLD001母种转接到PDA液体培养基中，置于180r/min的摇床上，28℃培养6～8d，得到液体菌种；
(2)固体菌种：在无菌条件下，用接种针挑取弯孢菌CLD001母种固体培养基上的单菌落或菌落孢子划线于PDA固体培养基上，28℃培养10～15d，得到固体菌种。
2.CLD001菌株对镉的吸附性实验研究
(1)实验一：将CLD001固体菌种直接接种到氯化镉浓度为50mmol/L(11418mg/L)的PDA液体培养基中进行摇床处理培养9d(注：该菌能在氯化镉浓度为50mmol/L的培养基中生长)，处理完成后，用滤纸将处理培养9d的菌体和液体培养基过滤分离，用ICP-MS分别测定菌体内部吸收的镉的浓度以及液体培养基溶液中残余的镉的浓度；对处理后的菌体进行透射电镜和能谱分析。
(2)实验二：将获得的CLD001菌株制成菌悬液(20g)，分别转接于体积为150ml、氯化镉浓度为1mmol/L(228.36mg/L)和2mmol/L(456.72mg/L)的灭菌水中，28℃振荡培养6d，设置3次重复，以接种等量无菌水的处理为对照；摇床完成后，12000r/min低温离心15min，取上清液备用；将该上清液用于配置水稻培养营养液后进行水稻水培，观察记录水稻的长势。
CLD001菌株对镉的吸附性实验得出结果如下：
实验一结果：将CLD001固体菌种直接接种到氯化镉浓度为50mmol/L(11418mg/L)的PDA液体培养基中进行摇床处理培养9d后，过滤分离菌体和液体培养基后用ICP-MS测得液体培养基溶液中残余的镉的浓度为576mg/L；用ICP-MS测得菌体内部吸收的镉浓度为4439mg/kg，说明该菌株通过将镉吸收进菌体内部，从而达到除去培养基中的镉的目的。
CLD001菌株在氯化镉浓度为50mmol/L(11418mg/L)的PDA液体培养基中摇床处理9d后的透射电镜和能谱图如图1和图2所示(注：透射电镜图中黑色的点是吸附进菌体内部的重金属镉)。
实验二结果：氯化镉浓度为1mmol/L(228.36mg/L)、2mmol/L(456.72mg/L)的水溶液经CLD001菌株摇床处理后(注：在三角锥形瓶中将质量为20g的CLD001菌体加入体积为150ml镉水溶液中进行摇床培养处理)，其上清液配制的营养液培养的水稻苗株高与以氯化镉浓度为1mmol/L、2mmol/L的水溶液配制的营养液培养的水稻苗的株高相比有明显的升高。说明经菌处理后的镉水溶液，其镉含量明显降低，降低了镉对水稻幼苗的胁迫，从而其株高明显有所升高。
实验二结果数据：
表1.不同处理水配制的营养液培养的水稻苗的株高
其中，CK是指以无菌水配制的水稻营养液培养的水稻苗；FC是指以氯化镉浓度为1mmol/L的水溶液配制的营养液培养的水稻苗；FD是指氯化镉浓度为1mmol/L的水溶液经CLD001菌株摇床处理6d后，过滤分离菌体得到上清液，以其上清液配制的营养液培养的水稻苗；SC是指以氯化镉浓度为2mmol/L的水溶液配制的营养液培养的水稻苗；SD是指氯化镉浓度为2mmol/L的水溶液经CLD001菌株摇床处理6d后，过滤分离菌体得到上清液，以其上清液配制的营养液培养的水稻苗。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
序列表
<110> 江西师范大学
<120> 一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
tccgtaggtg aacctgcgg 19
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
tcctccgctt attgatatgc 20
<210> 3
<211> 568
<212> DNA
<213> 弯孢菌(Curvularia)
<400> 3
acctgcggag ggatcattac acaataaaca tatgaaggct gcaccgccaa caggcggcaa 60
ggctggagta ttttattacc cttgtctttt gcgcacttgt tgtttcctgg gcgggttcgc 120
ccgcctccag gaccacatga taaacctttt ttatgcagtt gcaatcagcg tcagtacaac 180
aaatgtaaat catttacaac tttcaacaac ggatctcttg gttctggcat cgatgaagaa 240
cgcagcgaaa tgcgatacgt agtgtgaatt gcagaattca gtgaatcatc gaatctttga 300
acgcacattg cgccctttgg tattccaaag ggcatgcctg ttcgagcgtc atttgtaccc 360
tcaagctttg cttggtgttg ggcgtttttt gtctttggtt ttgtccaaag actcgcctta 420
aaacgattgg cagccggcct actggtttcg cagcgcagca catttttgcg cttgcaatca 480
gcaaaagagg acggcactcc atcaagactc tatatcactt ttgacctcgg atcaggtagg 540
gatacccgct gaacttaagc atatcaaa 568
Claims (8)
1.一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株，命名为弯孢菌CLD001（Curvularia CLD001），于2022年4月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.40127，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
2.根据权利要求1所述的耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株，其特征在于：所述菌株ITS序列如SEQ ID No.3所示。
3.根据权利要求1所述的耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株的应用，其特征在于：所述菌株用于吸附镉。
4.根据权利要求1所述的耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株的分离纯化方法，包括以下步骤：
（1）菌株的初筛：将从水稻种子中分离出的菌株接种到含氯化镉的固体平板培养基上筛选培养；
（2）菌株的复筛：在无菌条件下，挑取所述固体平板培养基上各个单菌落并分别划线于具有浓度梯度的PDA氯化镉固体平板培养基上，筛选耐镉能力强的菌株，将得到的菌株在平板上划线转接3次以上进行菌株纯化，得到所述耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（1）中，所述含氯化镉的固体平板培养基中氯化镉的浓度为25 mmol/L。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（1）中，培养温度为28℃，培养时间为4~8 d。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（2）中，所述具有浓度梯度的PDA氯化镉固体平板培养基的浓度梯度为10 mmol/L、25 mmol/L和50 mmol/L。
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（2）中，培养温度为28℃，培养时间为10~15 d。
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Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015100431A2 (en) * | 2013-12-24 | 2015-07-02 | Symbiota, Inc. | Plants containing beneficial endophytes |
| CN108271339A (zh) * | 2014-12-30 | 2018-07-10 | 靛蓝农业公司 | 栽培品种和物种间的种子内生菌、相关组合物及其使用方法 |
| CN108865920A (zh) * | 2017-05-11 | 2018-11-23 | 北京有色金属研究总院 | 一株耐镉、铅离子的有机物降解菌及其应用 |
| CN111117909A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-05-08 | 河南省科学院生物研究所有限责任公司 | 一种耐多重重金属促植物生长的菌株及其应用 |
| CN111185479A (zh) * | 2018-12-13 | 2020-05-22 | 四川君和环保股份有限公司 | 一种用于农田土壤镉污染的微生物/动植物联合生态修复方法 |
| CN111925950A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-11-13 | 徐州工程学院 | 一种高耐镉菌株及其分离筛选方法 |
| WO2021248974A1 (zh) * | 2020-06-11 | 2021-12-16 | 齐鲁工业大学 | 具有降低蔬菜重金属含量、提高蔬菜质量的功能菌株及应用 |
-
2022
- 2022-04-28 CN CN202210471437.8A patent/CN114907987B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015100431A2 (en) * | 2013-12-24 | 2015-07-02 | Symbiota, Inc. | Plants containing beneficial endophytes |
| CN108271339A (zh) * | 2014-12-30 | 2018-07-10 | 靛蓝农业公司 | 栽培品种和物种间的种子内生菌、相关组合物及其使用方法 |
| CN108865920A (zh) * | 2017-05-11 | 2018-11-23 | 北京有色金属研究总院 | 一株耐镉、铅离子的有机物降解菌及其应用 |
| CN111185479A (zh) * | 2018-12-13 | 2020-05-22 | 四川君和环保股份有限公司 | 一种用于农田土壤镉污染的微生物/动植物联合生态修复方法 |
| CN111117909A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-05-08 | 河南省科学院生物研究所有限责任公司 | 一种耐多重重金属促植物生长的菌株及其应用 |
| CN111925950A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-11-13 | 徐州工程学院 | 一种高耐镉菌株及其分离筛选方法 |
| WO2021248974A1 (zh) * | 2020-06-11 | 2021-12-16 | 齐鲁工业大学 | 具有降低蔬菜重金属含量、提高蔬菜质量的功能菌株及应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| S. K. V. RAMA RAO VEPACHEDU等: "Isolation of a cadmium tolerant Curvularia sp. from polluted effluents", CURRENT SCIENCE, vol. 73, no. 5, pages 1 - 2 * |
| SIQI WANG等: "Effects of Cd-resistant fungi on uptake and translocation of Cd by soybean seedlings", CHEMOSPHERE, vol. 291, pages 132908 * |
| ZHAO DI等: "Curvularia coatesiae XK8, a Potential Bioadsorbent Material for Adsorbing Cd(II) and Sb(III) Compound Pollution: Characteristics and Effects", FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, vol. 12, pages 4 * |
| 于洪飞等: "一株抗镉真菌的鉴定及其抗性的初步研究", 生物学杂志, no. 03, pages 47 - 50 * |
| 周芳如等: "高效去除镉污染真菌的筛选与鉴定", 浙江农业学报, vol. 27, no. 4, pages 639 * |
| 李朝阳: "高锑背景下耐镉真菌优选及其对锑、镉的吸附特性研究", 中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑, no. 2021, pages 006 - 859 * |
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