CN114751981A - 抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的单克隆抗体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本申请公开了抗SARS‑CoV‑2核衣壳蛋白的单克隆抗体及其应用。该抗体包括：如SEQ IDNO.1～7任一所示的VHCDR1；如SEQ ID NO.8～14任一的组中选择的VHCDR2；如SEQ IDNO.15～21任一所示的VHCDR3；如SEQ ID NO.22～28任一所示的VLCDR1；如SEQ ID NO.29～35任一所示的组中选择的VLCDR2；如SEQ ID NO.36～42任一所示的组中选择的VLCDR3。该抗体可用于SARS‑CoV‑2感染的快速检测或筛查。该抗体也可用于治疗SARS‑CoV‑2感染。

Description

抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的单克隆抗体及其应用
技术领域
本申请涉及抗SARS-CoV-2的单克隆抗体(mAbs)。具体地，本申请公开了抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体及其应用。
背景技术
SARS-CoV-2是指在2019年12月份最初鉴定的引起冠状病毒病2019(COVID-19)的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)。SARS-CoV-2的NP是一种与基因组RNA形成复合物的结构蛋白，在病毒体组装过程中与病毒膜蛋白相互作用，对提高病毒转录和组装效率起到关键作用。
发明内容
本申请发明人创造性地发现了一种识别SARS-CoV-2核衣壳蛋白的抗体及其应用。该抗体可用于SARS-CoV-2感染的快速检测或筛查。该抗体也可用于制备治疗或预防SARS-CoV-2感染相关疾病的药物中。
第1方面，本申请实施例公开了一种抗体，包括：
具有如SEQ ID NO.1～7任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR1；
具有如SEQ ID NO.8～14任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR2；
具有如SEQ ID NO.15～21任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR3；
具有如SEQ ID NO.22～28任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR1；
具有如SEQ ID NO.29～35任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR2；
具有如SEQ ID NO.36～42任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR3。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.22所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.29所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.36所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.16所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.23所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.30所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.37所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.17所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.24所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.31所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.38所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.18所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.25所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.32所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.39所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.26所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.33所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.40所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.20所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.27所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.34所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.41所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第1方面所述的抗体中，所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ ID NO.21所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.28所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.35所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ IDNO.42所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
第2方面，本申请实施例公开了一种抗体，包括：
具有如SEQ ID NO:43～49任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VH；以及
具有如SEQ ID NO:50～56任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VL。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:43所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:50所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:44所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:51所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:45所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:52所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:46所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:53所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:47所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:54所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:55所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第2方面所述的抗体中，所述VH具有如SEQ ID NO:49所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:56所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
第3方面，本申请实施例公开了一种抗体，包括具有重链和轻链的Fab段，
所述重链具有如SEQ ID NO:57～63任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；以及
所述轻链具有如SEQ ID NO:64～70任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:57所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:64所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:58所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述具有如SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:66所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:60所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:68所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:62所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
在本申请实施例提供的第3方面所述的抗体中，所述重链具有如SEQ ID NO:63所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
本申请实施例提供的第1方面、第2方面或第3方面所述的抗体中，所述抗体还包含共价或非共价连接的缀合物。
本申请实施例提供的第1方面、第2方面或第3方面所述的抗体中，所述缀合物包括酶，荧光团，生物素或链霉亲和素，或其组合。
本申请实施例提供的第1方面、第2方面或第3方面所述的抗体中，所述酶包括HRP。
本申请实施例提供的第1方面、第2方面或第3方面所述的抗体是人源化或嵌合抗体。
第4方面，本申请实施例公开了于体外诊断或检测SARS-CoV-2或SARS-CoV-2核衣壳蛋白的ELISA试剂盒，其包含第1方面所述的抗体；或者包含第2方面所述的抗体；或者包含第3方面所述的抗体，或者其组合。
第5方面，本申请实施例公开了于体外诊断或检测SARS-CoV-2或SARS-CoV-2核衣壳蛋白的方法，其包括使用第1方面所述的抗体；或者使用第2方面所述的抗体；或者使用第3方面所述的抗体，或者其组合。
本申请实施例提供的第5方面的方法是直接ELISA。
本申请实施例提供的第5方面的方法是捕获ELISA。
本申请实施例提供的第5方面的方法是双抗夹心ELISA。
本申请实施例提供的第5方面的方法中，包括将样品与所述抗体混合。
本申请实施例提供的第5方面的方法中，还包括加入包含用于检测的缀合物的二抗。
第6方面，本申请实施例公开了第1方面所述的抗体、或者第1方面所述的抗体、或者第1方面所述的抗体，或者其组合在制备治疗或预防SARS-CoV-2感染药物中的应用，所述药物以第1方面所述的抗体、或者第2方面所述的抗体、或者第3方面所述的抗体，或者其组合作为有效成分。
附图说明
图1为本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的结构示意图。
图2A为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的重链CDR1区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图2B为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的重链CDR2区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图2C为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的重链CDR3区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图3A为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的轻链CDR1区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图3B为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的轻链CDR2区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图3C为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的轻链CDR3区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图4为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的重链可变区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图5为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的轻链可变区序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图6为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的Fab段的重链序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图7为本申请实施例提供的说明了抗SARS-CoV-2NP的兔单抗的Fab段的轻链序列比对结果，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图8为本申请实施例提供的兔单抗基于直接抗原ELISA法用于检测SARS-CoV-2核衣壳蛋白的检测结合曲线，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图9为本申请实施例提供的兔单抗与SARS-CoV-2，SARS，MERS，HCOV-NL63的核衣壳蛋白(NP)的交叉反应性，其中实施例提供的兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
图10A本申请实施例提供的6H7作为捕获抗体、1G7作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
图10B本申请实施例提供的6H7作为捕获抗体、5B12作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
图10C本申请实施例提供的11B12作为捕获抗体、5B4作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
图10D本申请实施例提供的1F8作为捕获抗体、5B12作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
图10E本申请实施例提供的5B4作为捕获抗体、6H7作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
图10F本申请实施例提供的3A7作为捕获抗体、1F8作为检测抗体的双抗夹心ELISA的检测结果。
具体实施方式
为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。本申请中未详细单独说明的试剂均为常规试剂，均可从商业途径获得；未详细特别说明的方法均为常规实验方法，可从现有技术中获知。
需要说明的是，本申请的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序，也不对其后的技术特征起到实质的限定作用。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本申请的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
术语“一”或“一个”涵盖单数和复数引用，除非上下文有其他方面。术语“包括”、“具有”、“拥有”和“包含”是开放式术语，表示“包括但不限于”，除非另有说明。
本申请一般涉及抗SARS-CoV-2的抗体。具体地，本申请公开涉及抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体(mAb)及其用途。
在申请中，术语“抗体”可在最广义上的解释，具有各种抗体结构，包括但不限于Y型抗体，所谓的全长抗体，Y型抗体的抗原结合部分，及其遗传或化学修饰。其中，“抗原结合部分”是指Y型抗体的一个或多个部分或片段，并且能够保留抗体特异性结合SARS-CoV-2NP的能力。
术语“单克隆抗体”(mAb)包括具有基本相同的抗原决定簇的高度同质的抗体群。除了可能以少量存在的天然存在的突变外，该“抗体群”中的各个抗体基本上相同。“单克隆抗体”可对抗原上的特定表位表现单一的结合特异性和亲和力。与通常包括针对不同表位的多克隆抗体相比，每个单克隆抗体可以靶向抗原上的相同或基本相同的表位。修饰物“单克隆”表示抗体的特征是从基本同质的抗体群体中获得的，且不能被解释为需要通过任何特定的方法制得的抗体。该抗体可以通过各种方法制备，包括但不限于，例如杂交瘤方法，重组DNA方法，噬菌体抗体库以及类似的方法制得。
在本申请中，术语“抗SARS-CoV-2NP的mAb”和“抗SARS-CoV-2的核衣壳蛋白的mAb”、抗SARS-CoV-2NP的兔mAb”、“兔mAb”和“兔单抗”可互换使用，是指能够以足够亲和力结合SARS-CoV-2的核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体，使得该抗体可用作靶向SARS-CoV-2的检测、诊断剂、治疗剂和/或药物。术语“亲和力”是指单一分子(例如一个抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如一个抗原)之间的全部非共价分子间相互作用的强度。其中，“分子间相互作用”可以包括氢键作用、静电相互作用、疏水作用和范德华力。
在本申请中，术语“兔抗体”或“抗SARS-CoV-2Sl兔单克隆抗体”或者类似术语中的修饰词“兔”表示该抗体的互补决定区(CDR)来源于兔种系免疫球蛋白序列。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体可以包括来自兔种系免疫球蛋白序列的抗体的CDRs和骨架区(FRs)。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的兔抗体或兔mAb可包括来自兔种系免疫球蛋白序列的抗体的CDRs。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以为CDRs区来源于兔种系免疫球蛋白序列、而骨架区(FRs)来自于其他哺乳动物的种系免疫球蛋白序列(如小鼠或人类)的一种抗体。术语“抗SARS-CoV-2NP的兔mAb”也可包括包含具有非兔种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基的抗体，例如，由体外随机突变或点特异性突变引入的、或体内体细胞突变引入的突变。然而，术语“抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体”并不包括CDRs区来自其他哺乳动物的种系(如老鼠)的抗体。
在本申请实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是Y型抗体。参阅图1，其示出了一个具体的兔mAb对抗SARS-CoV-2NP的Y型结构。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可包括一对重链2和一对轻链3。重链2可以包括一个重链可变区(VH)和一个或多个重链恒定区(CHS)。在一个实施例中，重链2可包括一个VH和三个CHS(分别命名为CH1、CH2和CH1)。与三个CHS相比，VH更接近重链的N端。VH在氨基酸序列上表现出比CHS更高的多态性。VH可以在不同抗体之间有所不同，并且赋予每种抗体所具有的特异性。CHS的氨基酸序列在同一同型(类)的所有抗体中可以是相同的，但在不同同型之间有所不同。术语“同型”是指由重链恒定区域基因编码的同类抗体(例如同为IgG)。哺乳动物抗体可包括五种类型的重链：γ、δ、α、μ和ε，相对应组成的抗体就称为IgG，IgD，IgA，IgM和IgE五种抗体。
轻链3可以是相对于重链2更小的一个多肽亚基。轻链3可以包括一个轻链可变区(VL)和一个轻链恒定区(CL)。VL通常是轻链3具有更高多态性氨基酸序列的N-末端部分。而CL在不同抗体之间具有差异，并且对每种抗体在氨基酸序列上具有特异性。
在一些实施例中，VH和CL负责识别和绑定NP。在一个实施例中，CHS和CL不直接接触核壳蛋白的残基结合。
参阅图1，一对重链2和一对轻链3可以形成一个Y型结构。该“Y型结构”包括两个Fab段7(抗原结合片段)，一个Fc段8(可标记片段)以及铰链区10。两个Fab段7类似于“Y”型结构的两个臂，而Fc片段8类似于“Y”型结构的底部。铰链区域10将Fc片段8与两个Fab片段7连接起来。
每一Fab段7可以包含一个重链可变区VH、来自于重链2的重链恒定区CH1、一个轻链可变区VL和来自于轻链3的轻链恒定区CL。Fab段7包含一个由轻链可变区VL和重链可变区VH形成的可变段(Fv)。Fv段9容纳抗原结合位点，即抗原配位。抗原配位可以位于兔单克隆抗体Y型结构的手臂顶端。
每个可变区域，VH和VL，可以包括互补性决定区(CDR)和骨架区(FR)。CDR决定了Y型兔单克隆抗体的特异性和亲和力。CDR包含与抗原结合的残基，并具备识别和接触NP蛋白的功能。Y型兔单克隆抗体可包括6个CDR，其中3个位于VH中，即VHCDR1、VHCDR2和VHCD R3；另外3个位于VL中，即VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。
在一些实施例中，位于VH和VL区域中的CDR，相互之间可被都FR分隔开。FR是序列结构中的保守区域。FR通常可以作为一个支架，以使得CDR形成能够特异性地结合抗原(SARS-CoV-2核衣壳蛋白)的三维结构。FR的三维结构可以在不同的抗体中呈现保守性。Y型兔单克隆抗体的CDR可以被移植到来自其他物种的另一种抗体的FR之间，同时保留其与SARS-CoV-2核衣壳蛋白结合的能力，形成一种融合抗体。在一个实施例中，将Y型兔单克隆抗体的CDR移植到人抗体的FR之间，形成一个抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的人源化抗体。
在一些实施例中，Fc段8可以由来自不同重链2的CH2和CH3形成。在一个实施例中，Fc段8可以包含3个恒定区。由于Fc段8可以由来自于重链的恒定区组成，因此Fc段8可以用于对抗体进行分类。Y型兔单克隆抗体1的Fc片段8一般不涉及与抗原的结合。在一个实施例中，Fc段8可以在调节免疫细胞活性方面发挥作用，例如，通过与特定类别的Fc受体或其他免疫分子，例如通过结合特定的Fc受体或其它免疫分子如补体蛋白实现免疫调节。在一个实施例中，当CDR与抗原结合时，Fc段8可以发挥产生适当的免疫反应的作用。在一些实施例中，Fc片段8可以介导不同的生理反应；这些生理反应包括但不限于与结合FcγR时用于介导识别的调理素粒子，与Fcε受体结合时介导肥大细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞的脱粒反应，溶胞作用或补体依赖性细胞毒性反应，抗体依赖性细胞毒性效应(ADCC)，抗体依赖性细胞吞噬效应(ADCP)，以及与新生儿Fc受体(FcRn)反应以减缓抗体的降解作用并延长抗体的半衰期。
图2A、图2B和图2C分别显示了本申请实施例公开的抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的兔单克隆抗体的重链可变区(VH)的CDR1、CDR2和CDR3的序列比对，其中，本申请实施例提供的兔单克隆抗体包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
参照图2A，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR1可以具有大约8～10个氨基酸的长度。11B12的VHCDR1可以包含或具有LSLSSNTLN(SEQ ID NO:1所示)的氨基酸序列。5B4的VHCDR1可以包含或具有LSLSTNAPN(SEQ ID NO:2所示)。1F8的VHCDR1可以包含或具有FSLSNNYWIC(SEQ ID NO:3所示)的氨基酸序列。1G7的VHCDR1可以包含或具有FSFSSGYDMC(SEQ ID NO:4所示)的氨基酸序列。3A7的VHCDR1可以包含或具有FS LSDSAYMC(SEQ ID NO:5所示)的氨基酸序列。6H7的VHCDR1可以包含或具有FNVNSDCY MC(SEQ ID NO:6所示)的氨基酸序列。5B12的VHCDR1可以可以包含或具有FSFFYDYYMC组成(SEQ ID NO:7)。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR1具有FSLSS[][]YMC的共有序列式。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
参照图2B，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR2可以具有大约19～20个氨基酸的长度。11B12的VHCDR2可以包含或具有WIGTIFIDDEDTYYASWAK(SEQ ID NO:8所示)的氨基酸序列。5B4的VHCDR2可以包含或具有WIGTIFIDDEDTYYASWAK(SEQ ID NO:9所示)的氨基酸序列。1F8的VHCDR2可以包含或具有WIACIYTGRDYTYYTSWAK(SEQ ID NO:10所示)的氨基酸序列。1G7的VHCDR2可以包含或具有WIACIYPGSSGNTYYASWAK(SEQ ID NO:11所示)的氨基酸序列。3A7的VHCDR2可以包含或具有WIACIDAGVSGSTYYASWVN(SEQ ID NO:12所示)的氨基酸序列。6H7的VHCDR2可以包含或具有WIGCIDTVSGSTYYATWAK(SEQ ID NO:13所示)的氨基酸序列。5B12的VHCDR2可以包含或具有WIGCIYGASGDTYYASWAK(SEQ ID NO:14所示)的氨基酸序列。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR2具有WIGCIY[][][]SG[]TYYASWAK的共有序列式。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
参照图2C，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR3可以具有大约11-20个氨基酸的长度。11B12的VHCDR3可以包含或具有YFCARSSDLWD(SEQ ID NO:15所示)的氨基酸序列。5B4的VHCDR3可以包含或具有YFCARNSDLWD(SEQ ID NO:16所示)的氨基酸序列。1F8的VHCDR3可以包含或具有YFCARNNTDYGDYWD(SEQ ID NO:17所示)的氨基酸序列。1G7的VHCDR3可以包含或具有YFCARTYASSSGDYIPYFFN(SEQ ID NO:18所示)的氨基酸序列。3A7的VHCDR3可以包含或具有YFCARDFLYTPNNAGDIMD(SEQ ID NO:19所示)的氨基酸序列。6H7的VHCDR3可以包含或具有YFCARDFLYNVNNAGDIMD(SEQ ID NO:20所示)的氨基酸序列。5B12的VHCDR3可以包含或具有YFCARDVDTGSGIDFE(SEQ ID NO:21所示)的氨基酸序列。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VHCDR3具有YFCAR[][][][][][][][][][][][]IWD的共有序列式。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
图3A，图3B和图3C分别显示轻链可变区(VL)的CDR1，CDR2和CDR3的序列比对结果，其中，本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的兔mAb，包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
参照图3A，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR1可以具有大约9～11个氨基酸的长度。11B12的VLCDR1可以包含或具有QSVYKNNYLSW(SEQ ID NO:22所示)的氨基酸序列。5B4的VLCDR1可以包含或具有QSVYNNNYLSW(SEQ ID NO:23所示)的氨基酸序列。1F8的VLCDR1可以包含或具有QSVYKNNYLAW(SEQ ID NO:24所示)的氨基酸序列。1G7的VLCDR1可以包含或具有ENIYSGLAW(SEQ ID NO:25所示)的氨基酸序列。3A7的VLCDR1可以包含或具有HTVYSNNYLSW(SEQ ID NO:26所示)的氨基酸序列。6H7的VLCDR1可以包含或具有YNVYNNNYLAW(SEQ ID NO:27所示)的氨基酸序列。5B12的VLCDR1可以包含或具有QSIGSYLSW(SEQ ID NO:28所示)的氨基酸序列。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR1具有QSVY[]NNYLSW的序列共有式。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
参照图3B，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR2可以具有大约12个氨基酸的长度。11B12的VLCDR2可以包含或具有LIYQASKLASGV(SEQ ID NO:29所示)的氨基酸序列。5B4的VLCDR2可以包含或具有LIYKASTLASGV(SEQ ID NO:30所示)的氨基酸序列。1F8的VLCDR2可以包含或具有LIYWASKLPSGV(SEQ ID NO:31所示)的氨基酸序列。1G7的VLCDR2可以包含或具有LIYDASDLASGV(SEQ ID NO:32所示)的氨基酸序列。3A7的VLCDR2可以包含或具有LIYSASSLASGV(SEQ ID NO:33所示)的氨基酸序列。6H7的VLCDR2可以包含或具有LIYTTSTLASGV(SEQ ID NO:34所示)的氨基酸序列。5B12的VLCDR2可以包含或具有LIYSTSTLASGV(SEQ ID NO:35所示)的氨基酸序列。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR2具有LIY[]ASTLASGV的共有序列式。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
参照图3C，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR3可以具有大约12～15个氨基酸的长度。11B12的VLCDR3可以包含或具有LGSYDCRSANCIVFG(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列。5B4的VLCDR3可以包含或具有LGSYDCRSANCIVFG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列。1F8的VLCDR3可以包含或具有LGSYDCTIAECNVFG(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列。1G7的VLCDR3可以包含或具有QNYYYSSRGFNTFG(SEQ ID NO:39)的氨基酸序列。3A7的VLCDR3可以包含或具有HGYWRGPVNDFG(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列。6H7的VLCDR3可以包含或具有QGYYRGPVNDFG(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列。5B12的VLCDR3可以包含或具有QQGDTNHNIDNIFG(SEQ IDNO:42)的氨基酸序列。11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的VLCDR3具有共有序列式[]G[]Y[][][][][][][]NVFG。该序列式中，一对方括号“[]”表示蛋白质序列中的单个氨基酸，该处的氨基酸残基可以缺失也可以为任一氨基酸残基，或者如图2A中对应的所示氨基酸残基。
参照图4，其示了本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2的核衣壳蛋白的兔单抗重链可变区(VH)序列比对结果，其中，兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
11B12的VH的氨基酸序列包括或具有：QQQLEESGGGLVKPGGTLTLTCTVSGLSLSSNTLNWVRQAPGKGLEWIGTIFIDDEDTYYASWAKGRFTISKTSSTTITLKMTSLTAADTATYFCARSSDLWDPGTLVVVSS，如SEQ ID NO:43所示。
5B4的VH的氨基酸序列包括或具有：QSLEESGGGLVKPGGTLTLTCTVSGLSLSTNAPNWVRQAPGKGLEWIGTIFIDDEDTYYASWAKGRFTISKTSSTTITLKMTSLTAADTATYFCARNSDLWDPGTLVVVSS，如SEQ ID NO:44所示。
1F8的VH的氨基酸序列包括或具有：QEHLEESGGGLVKPGASLTLTCTASGFSLSNNYWICWVRQAPGKGLEWIACIYTGRDYTYYTSWAKGRFTISKTSSTTVTLQLNSLTAADTATYFCARNNTDYGDYWDLWGPGTLVTVSS，如SEQ ID NO:45所示。
1G7的VH的氨基酸序列包括或具有：QQQVVESGGGLVKPGASLTLTCEASGFSFSSGYDMCWVRQAPGKGLEWIACIYPGSSGNTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARTYASSSGDYIPYFFNLWGPGTLVTVSS，如SEQ ID NO:46所示。
3A7的VH的氨基酸序列包括或具有：QEQLEESGGGLVQPEGSLTLTCTASGFSLSDSAYMCWVRQAPGKGLEWIACIDAGVSGSTYYASWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTVADTATYFCARDFLYTPNNAGDIMDLWGPGTLVTVSL，如SEQ ID NO:47所示。
6H7的VH的氨基酸序列包括或具有：QQQLEESGGGLVQPGGSLTLSCKASGFNVNSDCYMCWVRQAPGKGLEWIGCIDTVSGSTYYATWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARDFLYNVNNAGDIMDLWGPGTLVTVSL，如SEQ ID NO:48所示。
5B12的VH的氨基酸序列包括或具有：QSLEESGGDLVQPEGTLTLTCTASGFSFFYDYYMCWVRQAPGKGLEWIGCIYGASGDTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLRWITSLTAADTATYFCARDVDTGSGIDFELWGPGTLVTVSS，如SEQ ID NO:49所示。
参照图5，其示出了本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白兔单抗的轻链可变区(VL)序列比对结果，其中，兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
11B12的VL的氨基酸序列包括或具有：AQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASQSVYKNNYLSWFQQKPGQPPKLLIYQASKLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYFCLGSYDCRSANCIVFGGGTEVVVK，如SEQ ID NO:50所示。
5B4的VL的氨基酸序列包括或具有：AQVLTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASQSVYNNNYLSWFQQKPGQPPKWYKASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYFCLGSYDCRSANCIVFGGGTEVVVK，如SEQ ID NO:51所示。
1F8的VL的氨基酸序列包括或具有：AQVLTQTASPVSVAVGDTVTINCQASQSVYKNNYLAWYQLKPGQPPKWYWGTKLPSGVPSRFKGSGSGTHFTLTISDVQCDDAATYYCLGSYDCTIAECNVFGGGTEVVVE，如SEQ ID NO:52所示。
1G7的VL的氨基酸序列包括或具有：ADIVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASENIYSGLAWYQQKPGQPPKLLIYDASDLASGVPSRFKGSGSGTEYTLTISDLECADAATYYCQNYYYSSRGFNTFGGGTEVVVK，如SEQ ID NO:53所示。
3A7的VL的氨基酸序列包括或具有：AQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSHTVYSNNYLSWYQQKPGQPPKLLIYSASSLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAAIYYCHGYWRGPVNDFGGGTEVVVE，如SEQ ID NO:54所示。
6H7的VL的氨基酸序列包括或具有：AQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSYNVYNNNYLAWYQQKPGQPPKLLIYTTSTLASGVPSRFSGSGSGTQFTLTISDLECDDAAIYYCQGYYRGPVNDFGGGTEVVVE，如SEQ ID NO:55所示。
5B12的VL的氨基酸序列包括或具有：AYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASQSIGSYLSWYQQKPGQPPKLLIYSTSTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGVECADAATYYCQQGDTNHNIDNIFGGGTEVVVE，如SEQ ID NO:56所示。
参照图6，其示了本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白兔单抗的Fab段的重链序列比对结果，其中，兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
11B12的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QQQLEESGGGLVKPGGTLTLTCTVSGLSLSSNTLNWVRQAPGKGLEWIGTIFIDDEDTYYASWAKGRFTISKTSSTTITLKMTSLTAADTATYFCARSSDLWDPGTLVVVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:57所示。
5B4的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QSLEESGGGLVKPGGTLTLTCTVSGLSLSTNAPNWVRQAPGKGLEWIGTIFIDDEDTYYASWAKGRFTISKTSSTTITLKMTSLTAADTATYFCARNSDLWDPGTLVVVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:58所示。
1F8的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QEHLEESGGGLVKPGASLTLTCTASGFSLSNNYWICWVRQAPGKGLEWIACIYTGRDYTYYTSWAKGRFTISKTSSTTVTLQLNSLTAADTATYFCARNNTDYGDYWDLWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:59所示。
1G7的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QQQVVESGGGLVKPGASLTLTCEASGFSFSSGYDMCWVRQAPGKGLEWIACIYPGSSGNTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARTYASSSGDYIPYFFNLWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:60所示。
3A7的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QEQLEESGGGLVQPEGSLTLTCTASGFSLSDSAYMCWVRQAPGKGLEWIACIDAGVSGSTYYASWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTVADTATYFCARDFLYTPNNAGDIMDLWGPGTLVTVSLGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:61所示。
6H7的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QQQLEESGGGLVQPGGSLTLSCKASGFNVNSDCYMCWVRQAPGKGLEWIGCIDTVSGSTYYATWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARDFLYNVNNAGDIMDLWGPGTLVTVSLGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:62所示。
5B12的Fab段的重链的氨基酸序列可以包括或具有：QSLEESGGDLVQPEGTLTLTCTASGFSFFYDYYMCWVRQAPGKGLEWIGCIYGASGDTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLRWITSLTAADTATYFCARDVDTGSGIDFELWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTV，如SEQ ID NO:62所示。
参照图7，其示了本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白兔单抗的Fab段轻链序列比对结果，其中，兔单抗包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。
11B12的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AQVLTQTPSVSAAVGGTVTINCQASQSVYKNNYLSWFQQKPGQPPKLLIYQASKLASGVSSRFKGSGSGTQFTISDVQCDDAATYFCLGSYDCRSANCIVFGGGTEVVKGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVVQSFNRGDC，SEQ ID NO:64所示。
5B4的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AQVLTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASQSVYNNYLSWFQQKPGQPPKWYKASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYFCLGSYDCRSANCIVFGGTEVVVKGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，SEQ ID NO:65所示。
1F8的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AQVLTQTASPVSVAVGDTVTINCQASQSVYKNNYLAWYQLKPGQPPKWYWGTKLPSGPSRFKGSGSGTHFTTISDVQCDDAATYYCYCLGSYDCTIAECNVFGGTEVVVEGDPVAPTVLIFPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，如SEQ ID NO:66所示。
1G7的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：ADIVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASENIYSGLAWYQQKPGQPPKLLIYDASDLASGVPSRFKGSGSGTEYTISDLECADAATYYCQNYYYSSRGFNTFGGTEVVVKGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，如SEQ ID NO:67所示。
3A7的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSHTVYSNNYLSWYQKPGQPPKLLIYSASSLASGVPSRFKGSGSGTQFTISDLECDDAAIYYCHGYWRGPVNDFGGTEVVVEGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，如SEQ ID NO:68所示。
6H7的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSYNVYNNYLAWYQQKPGQPPKLLIYTTSTLASGVPSRFSGSGSGTQFTISDLECDDAAIYYYYCQGYYRGPVNDFGGTEVVVEGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，如SEQ ID NO:69所示。
5B12的Fab段的轻链的氨基酸序列可以包括或具有：AYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASQSIGSYLSWYQQKPGQPPKLLIYSTLASGVPSRFKGSGTQFTLTISGVECADAATYCQGDTNHNIDNIFGGGTEVVVEGDPVAPTVLIPPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADCTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVQSFNRGDC，如SEQ ID NO:70所示。
本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的兔mAb也具有如本申请公开的Y型抗体的抗原结合部分。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是一个Fab段7形成，该Fab段具体为VH、VL、CH1和CL形成的一个单一亚基。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是F(ab')2段，该F(ab')2段由两个亚基通过连接形成(例如通过铰链区10的二硫键连接)，其中每一亚基均为一个Fab段7。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是由VH和CH1结构域形成的Fd段。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是VL和VH结构域形成的Fv片段9。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是一个孤立的互补决定区。
本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的兔mAb还可以包括来自上述实施例提供的结构或通过基因修饰获得的其抗原结合部分。在一些实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体可以具有不同的转基因抗体结构，包括但不限于人源化抗体和嵌合抗体。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是人源化抗体，该人源化抗体的蛋白序列具有与适应人体自然变异抗体的高度同源性。其中，“人源化抗体”的蛋白质序列可以与人类变异抗体的蛋白质序列基本相同，并同时使得其兔源的CDR区保持与SARS-CoV-2核衣壳蛋白的结合能力。在一个实施例中，“人源化抗体”可以通过将非人抗体的CDR插入人抗体支架中而产生。在一些实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是嵌合抗体。在一个实施例中，“嵌合抗体”可以是通过将来自本申请实施例提供的Y型抗体的重链和轻链的可变区移植到来自另一物种(例如人)的恒定区上而制备的抗体。在一个实施例中，“嵌合抗体”是通过将本申请公开的抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体的Fab段与人源Fc段融合而形成。在一个实施例中，抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可以是单链Fv(scFv)。尽管Fv片段的两个结构域，即VL和VH，是由两个单独的基因编码的，但可以通过重组方法将两个单独的编码基因连接形成的一个连接子，从而编码形成scFv。在一个实施例中，可以根据本领域技术人员熟知的方法进行相关基因修饰和转基因操作，并且可以与全长抗体相同的方式筛选遗传修饰的抗体结构。
本申请实施例提供的抗体还可以具有从上述实施例提供的抗体衍生形成的结构及其通过化学修饰产生的抗原结合部分。在一个实施例中，“化学修饰”可以是化学交联。在一个实施例中，一种或多种缀合物可与抗体共价连接或非共价连接。在一个实施例中，缀合物可以是与抗体共价连接的分子标记，以便于检测其抗原。“缀合物”可以是任何合适的小分子。“小分子”可以包括但不限于，例如生物素，链霉亲和素和/或荧光染料。“荧光染料”可以是任何合适的荧光染料，包括但不限于Alexa Flour染料，氨甲基香豆素(AMCA)，Atto染料，花青染料，Dylight Fluor染料，FITC，荧光探针647H，罗丹明和德克萨斯红。所述AlexaFlour染料包括但不限于Alexa Flour488，Alexa Flour555，Alexa Flour568，AlexaFlour594，Alexa Flour647和Alexa Flour700。所述Atto染料可以包括但不限于Atto 390，Atto 488，Atto 565，Atto 633和Atto 700。所述花青染料可以包括但不限于Cy3，Cy5和Cy5.5。染料可以包括但不限于染料350，染料405，染料488，染料550，染料594，染料633，染料650，染料680，染料755和染料800。在一个实施例中，“缀合物”可以是具有两个共价连接的荧光分子的串联染料。在一个实施例中，荧光分子之一用作供体，另一个用作受体。在一个实施例中，所述供体具有供体激发特性，而所述受体具有受体发射特性，二者可以进行独特荧光激发和发射反应。所述串联染料可以包括但不限于异藻蓝蛋白-Cy5.5、异藻蓝蛋白-Cy7、PE-Atto594、PE-Cy5、PE-Cy5.5、PE-Cy7、PE-德克萨斯红、PE-AlexaFluor647、PE-AlexaFluor700，PE-AlexaFluor750、APC-AlexaFluor750和PerCP-Cy5.5。
上述实施例中的“缀合物”也可以是大分子。在一个实施例中，大分子可以是酶。该酶可以包括但不限于碱性磷酸酶(AP)，葡萄糖氧化酶(GOX)，辣根过氧化物酶(HRP)。在一个实施例中，所述大分子可以是荧光蛋白。所述荧光蛋白可以包括但不限于别藻蓝蛋白(APC)，B-藻红蛋白(BPE)，R-藻红蛋白(R-PE)，PERCP和R-藻蓝蛋白(RPC)。在一个实施例中，所述大分子也可以是其特异性不同于兔mAb针对SARS-CoV-2NP的特异性的抗体，形成具有多种特异性的串联抗体。
本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的兔mAb可具有各种体内和体外应用，所述应用包括但不限于制备免疫分析的试剂盒、制备免疫染色的试剂盒、制备免疫化学的试剂盒、制备SARS-CoV-2病毒感染的诊断试剂盒、制备免疫肿瘤治疗药物和制备SARS-CoV-2引起的一些感染性疾病的治疗药物，以及于体外进行免疫分析、免疫染色、免疫化学反应、SARS-CoV-2病毒感染诊断。其中，所述的免疫分析方法可以包括酶联免疫吸附剂分析方法(ELISA)，本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP的单抗可用于不同形式的ELISA。在一个实施例中，所公开的抗SAR S-CoV-2NP的兔mAb可用于直接ELISA。所述直接ELISA可以是一种基于平板的免疫吸附试验，用于检测和量化来自复杂生物样本或在复杂生物样本内的特定抗原，可以采用多种方法实现直接ELISA。在一个实施例中，所述抗原(例如SARS-CoV-2的核衣壳蛋白)可以固定或吸附在塑料板的表面上。在一个实施例中，所述塑料板可以是多孔微量滴定板。在一个实施例中，所述多孔微量滴定平面可以是96孔聚苯乙烯板。在一个实施例中，过量的阻断蛋白可被加入到表面上以阻断所有其它结合位点。在一个实施例中，所述阻断蛋白是牛血清白蛋白。在一个实施例中，针对抗原(例如，SARS-CoV-2的核衣壳蛋白)的抗体，可以被加入到表面上以与抗原形成复合物。在一个实施例中，所述抗体可以与酶缀合。在一个实施例中，所述酶可以是HRP。在多余的缀合抗体被洗去后，与抗原结合的偶联抗体继续停留在表面上。在一个实施例中，所述缀合抗体催化与加入的底物的反应，以产生可由分光光度计或吸光度酶标仪测量的可见比色输出。与其它形式的ELISA测试相比，具有更少的检测步骤和更高的检测效率。在一个实施例中，直接ELIS A可以测试特异性抗体-抗原反应，并有助于消除其它抗体之间的交叉反应性。直接ELISA适用于感兴趣样品中的定性和定量抗原检测、抗体筛选和抗原表位定位。
表1示出了本申请实施例提供的多个兔单克隆抗体分别与SARS-CoV-2S结合动力学参数，其中，多个兔单克隆抗体包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12。如表1所示，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12对SARS-CoV-2的核衣壳蛋白表现出优异的结合亲和力和特异性，其解离常数(KD)分别为5.65E-11，7.17E-10，2.29E-09，8.14E-09，1.22E-09，6.74E-10，1.89E-09。
表1与SARS-CoV-2S结合动力学参数
克隆 K<sub>off</sub>(1/s) K<sub>on</sub>(1/Ms) K<sub>D</sub>(M)
1F8 2.06E-04 9.02E+04 2.29E-09
1G7 9.87E-05 1.21E+04 8.14E-09
3A7 2.72E-04 2.24E+05 1.22E-09
5B4 2.61E-04 3.64E+05 7.17E-10
5B12 8.29E-05 4.40E+04 1.89E-09
6H7 2.38E-04 3.54E+05 6.74E-10
11B12 2.63E-05 4.65E+05 5.65E-11
参照图8，其显示了多个实施例分别提供的抗SARS-CoV-2NP兔单克隆抗体基于直接ELISA检测SARS-CoV-2NP的检测结果，其中，多个兔单克隆抗体包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12的曲线。图中，X轴表示以ng/ml为单位的抗体浓度，Y轴表示在450nm(OD450)波长下的光密度。如图8所示，所有兔单克隆抗体都能特异性地与SARS-CoV-2NP结合，其结合曲线在从约1ng/ml到约1000ng/ml的抗体浓度范围内表现出近似于“S”形状。检测过程设置了阴性对照组，在与抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体相同的检测步骤下，使用空白缓冲液代替抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体。空白缓冲液为稀释兔单克隆抗体的缓冲液。与阴性对照组的曲线相比，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12对SARS-CoV-2在较宽的浓度范围对核衣壳蛋白表现出优异的敏感性。
参照图9，其示出了多个实施例分别提供的兔单抗(包括11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12)分别与SARS-CoV-2(SARS-CoV-2)，SARS，MERS，HCoV-NL63的核衣壳蛋白的交叉反应性。图9中，Y轴显示直接ELISA在450nm处的检测光密度。图9中，每组列包含8个组别，沿X轴方向每组列包括八(8)列，它们沿x轴方向顺序排列以显示1F8、1G7、3A7、5B4、5B12、6H7、11B12和阴性对照的交叉反应性，分别用于抗原如SARS-CoV-2NP、SARS-NP、MERS NP和HCoV-NL63 NP。结果如图9所示，11B12、5B4、1F8、1G7、3A7、6H7和5B12能够用于检测SARS-CoV-2NP、SARS-NP、MERS NP和HCoV-NL63 NP；并且，11B12，5B4，1F8，1G7，3A7，6H7和5B12用于检测SARS-CoV-2NP是具有最强的检测信号(例如OD450值)，用于SARS NP时的检测信号次之，用于检测HCoV-NL63 NP的检测信号最弱。
图10A示出了一个使用6H7作为捕获抗体、1G7作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10A所示，1G7可以结合或检测到被6H7捕获的SARS-CoV-2的Np。
图10B示出了一个使用6H7作为捕获抗体、5B12作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10B所示，5B12可以结合或检测到被6H7捕获的SARS-CoV-2的Np。
图10C示出了一个使用11B12作为捕获抗体、5B4作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10C所示，5B4可以结合或检测到被11B12捕获的SARS-CoV-2的Np。
图10D示出了一个使用1F8作为捕获抗体、5B12作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10D所示，5B12可以结合或检测到被1F8捕获的SARS-CoV-2的Np。
图10E示出了一个使用5B4作为捕获抗体、6H7作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10E所示，6H7可以结合或检测到被5B4捕获的SARS-CoV-2的Np。
图10F示出了一个使用3A7作为捕获抗体、1F8作为检测抗体的双抗夹心ELISA的实施例检测结果。如图10F所示，1F8可以结合或检测到被3A7捕获的SARS-CoV-2的Np。
方法
1、制备、分离和纯化抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体
抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆抗体可通过各种技术制得，包括单克隆抗体制备方法，例如体细胞杂交技术和其它技术，包括但不限于B淋巴细胞的杂交瘤技术。在一个实施例中，重组兔mAb是通过基于单个B细胞技术制得。
在一个实施例中，所述的兔单抗的制备过程包括：
(1)用不完全弗氏佐剂制得的SARSCoV-2NP蛋白的乳化制剂通过皮下注射刺激4～6周龄的加拿大白兔产生的免疫应答，并分别在第0，14，28，42和69天收集免疫前和免疫后血清；再手术摘取兔脾脏，分离新鲜的单个脾细胞，并在B细胞培养基中培养过夜，所述B细胞培养基例如来自例如，优睿赛思生物科技。
(2)用含2％胎牛血清和1mM EDTA的PBS溶氧稀释脾细胞制得新鲜的单细胞悬液。
(3)使用
Figure BDA0003677707130000181
平台(优睿赛思生物科技)分离单细胞悬液中的单个B细胞，然后再使用FACS Aria II(BD Biosciences，美国)对单个B细胞进行分选，并置于96孔板的每一单孔中。
(4)将具有NP特异性的原代B细胞加入B细胞完全培养基(例如，一种兔B细胞培养基，优睿赛思生物科技)中，NP特异于37℃、5％CO2条件下培养10～14天。
(5)在原代B细胞培养结束时，通过直接ELISA筛选抗NP的原代B细胞培养上清来鉴定识别NP的B细胞阳性克隆。
(6)一般而言通过OD450nm值测定阳性B细胞克隆比背景噪声高5倍以上。
(7)采用RT-PCR法检测，鉴原代B细胞上清液顶层的阳性克隆中IgG重链和轻链的可变区。将每个克隆的全长IgG重链和轻链共转染到HEK293T细胞中。将每个克隆的全长IgG重链和轻链共转染HEK293T细胞。将含转染HEK293T表达兔IgG重组蛋白的上清液用ELISA方法筛选对NP的特异性。将所选克隆的可变区PCR片段克隆到pcDNA3.4载体中，在HEK293F细胞中表达抗体
兔单克隆抗体可以通过多种技术分离和纯化。在一个实施例中，兔单克隆抗体可以从用兔抗体基因转染的哺乳动物细胞的培养上清中分离，随后通过蛋白A亲和层析纯化。纯化兔单克隆抗体的纯度和功能可分别通过SDS-PAGE和ELISA证实。
2、抗SARS-CoV-2NP的兔单克隆偶联抗体的制备
兔单克隆偶联抗体使用PierceEZ-Link Sulfo-NHS-生物素按照制造商手册进行生物素化。简言之，即将本申请实施例提供的抗SARS-CoV-2NP兔源单克隆抗体在1倍稀释体积的PBS中与磺基-NHS生物素混合，在室温下孵育30min。
3、ELISA表征免疫兔血清和抗SARS-CoV-2NP的单克隆抗体。
在℃、pH7.4的1×PBS下，将SARS-CoV-2蛋白NP或来自其他病毒的NP蛋白作为抗原包被至ELISA板(例如，Corning，Cat.NO:9018)上过夜。用洗涤缓冲液(1×PBS，补充0.5％(v/v)Tween-20(Sigma，Cat.NO:P96416))洗涤包被板三次，并用封闭缓冲液(1×PBS补充5％(w/v)脱脂乳)封闭。封闭后，孔板与连续稀释的兔血清样品或单克隆抗体在室温下孵育1h，然后用洗涤缓冲液洗涤5次，然后与经过1:5000封闭缓冲液稀释的HRP(例如，JacksonImmuno Research公司的HRP，Cat.NO：111-035-045)偶联的山羊抗兔IgG抗体孵育。用洗涤缓冲液洗涤板5次后，比色反应被HRP催化而显色。用Epoch微孔板分光光度计(Biotek，USA)测定了在450nm和630nm处的光密度(OD)值，最终值用OD450减去OD630得到。血清滴度计算为稀释后血清OD450读数为对照样品2倍或以上的最大稀释度。
4、兔单克隆抗体应用于捕获ELISA法检测SARS-CoV-2NP
于4℃将抗兔IgGFc抗体添加至高结合ELISA的孔板中，于1倍稀释体积的pH7.4PBS中包被过夜。将包被后的孔板用洗涤缓冲液(添加0.5％(V/V)Tween-20的1×PBS)洗涤，并用封闭缓冲液(添加5％(W/V)脱脂牛奶1×PBS中)封闭。向封闭孔板中加入抗SARS-CoV-2蛋白NP的兔抗体，于室温下孵育1h，洗涤，再用稀释3倍的生物素化SARS-CoV-2的NP蛋白孵育。最后再加入结合HRP的链霉亲和素孵育。将上述孵育后的孔板清洗后，使用HRP催化的比色反应，以检测单克隆抗体是否能够捕获NP。本领域技术人员应当理解的是，可以采用与上述不同的步骤、试剂、实验参数来执行上述的捕获ELISA步骤。
5、兔单克隆抗体应用于双抗夹心ELISA法检测SARS-CoV-2NP
于4℃将捕获抗体添加至至高结合ELISA的孔板中，于pH9.4的0.02M碳酸氢盐缓冲液中包被过夜。用洗涤缓冲液(1×PBS加0.5％(v/v)吐温-20)洗涤涂覆的板，并用封闭缓冲液(1×PBS加5％(w/v)脱脂乳)封闭。封闭后，平板与以3倍稀释的SARS-CoV-2NP系列在室温下孵育1h，随后洗涤，然后孵育抗SARS-CoV-2NP的生物素化mAbs，将平板再加入结合HRP的链霉亲和素孵育。将上述孵育后的孔板清洗后，使用HRP催化的比色反应，以观察用于捕获和用于检测的单克隆抗体是否能够同时或不能同时与SARS-CoV-2NP结合。
本领域技术人员应当理解的是，可以采用与上述不同的步骤、试剂、实验参数来执行上述的捕获ELISA步骤。
6、兔mAbs对抗SARS-CoV-2NP的结合动力学的测定
使用具有蛋白A传感器芯片的Biacore仪器(GE Health，USA)，通过表面等离子体共振(SPR)法分析兔mAbs对抗SARS-CoV-2NP的结合动力学。所有实验在25℃下以40l/min的流速进行。所有实验均在25℃条件下进行，流速为40μL/min。用含0.005％Tween-20脱气的PBS作为运行缓冲液。通道1装载与SARS-CoV-2蛋白NP没有特异性结合的参考抗体，通道2、3和4分别装载候选抗体。
一般而言，检测过程中，采用2μg/mL的抗体并进行20～30秒的快速注射至通道内进行上样，如此获得检测结果能够产生150～250反应单位(RU)，并且具有高度重现性。因此，在向所有通道表面注射抗原5分钟以便于抗原结合，随后连续注射10分钟进行解离，随后通过缓冲漂洗。使用1.2～100nM范围内的抗原稀释梯度以及空白缓冲液进行多次结合/解离循环。在每个周期结束时，通过30s注射甘氨酸缓冲液(pH2.0、10mM)再生通道，以便在每个通道再次装载抗体。动力学曲线采用BIA evaluation 3.2软件和1:1Langmuir模型进行双系数曲线进行分析，并计算结合合速率常数、解离速率常数和亲和常数。
虽然已经在典型实施例中示出和描述了本公开，但并不意味着局限于以上所示的细节，因为在不脱离本公开的情况下可以进行各种修改和替换。因此，本领域普通技术人员使用不超过常规实验就可以想到这里公开的公开内容的进一步修改和等同物。本文公开的这种修饰和等同物包括编码所公开的氨基酸序列的核酸序列。
以上所述，仅为本申请较佳的具体实施方式，但本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本申请的保护范围之内。
序列表
<110> 优睿赛思（武汉）生物科技有限公司
<120> 抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的单克隆抗体及其应用
<150> US17399367
<151> 2021-08-11
<160> 70
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 2
<211> 9
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 2
Leu Ser Leu Ser Thr Asn Ala Pro Asn
1 5
<210> 3
<211> 10
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 3
Phe Ser Leu Ser Asn Asn Tyr Trp Ile Cys
1 5 10
<210> 4
<211> 10
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 4
Phe Ser Phe Ser Ser Gly Tyr Asp Met Cys
1 5 10
<210> 5
<211> 10
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 5
Phe Ser Leu Ser Asp Ser Ala Tyr Met Cys
1 5 10
<210> 6
<211> 10
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 6
Phe Asn Val Asn Ser Asp Cys Tyr Met Cys
1 5 10
<210> 7
<211> 10
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 7
Phe Ser Phe Phe Tyr Asp Tyr Tyr Met Cys
1 5 10
<210> 8
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 8
Trp Ile Gly Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 9
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 9
Trp Ile Gly Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 10
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 10
Trp Ile Ala Cys Ile Tyr Thr Gly Arg Asp Tyr Thr Tyr Tyr Thr Ser
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 11
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 11
Trp Ile Ala Cys Ile Tyr Thr Gly Arg Asp Tyr Thr Tyr Tyr Thr Ser
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 11
Trp Ile Ala Cys Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala
1 5 10 15
Ser Trp Ala Lys
20
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 12
Trp Ile Ala Cys Ile Asp Ala Gly Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala
1 5 10 15
Ser Trp Val Asn
20
<210> 13
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 13
Trp Ile Gly Cys Ile Asp Thr Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Thr
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 14
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 14
Trp Ile Gly Cys Ile Tyr Gly Ala Ser Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser
1 5 10 15
Trp Ala Lys
<210> 15
<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 15
Tyr Phe Cys Ala Arg Ser Ser Asp Leu Trp Asp
1 5 10
<210> 16
<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 16
Tyr Phe Cys Ala Arg Asn Ser Asp Leu Trp Asp
1 5 10
<210> 17
<211> 15
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 17
Tyr Phe Cys Ala Arg Asn Asn Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Trp Asp
1 5 10 15
<210> 18
<211> 20
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 18
Tyr Phe Cys Ala Arg Thr Tyr Ala Ser Ser Ser Gly Asp Tyr Ile Pro
1 5 10 15
Tyr Phe Phe Asn
20
<210> 19
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 19
Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Thr Pro Asn Asn Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ile Met Asp
<210> 20
<211> 19
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 20
Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Asn Val Asn Asn Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ile Met Asp
<210> 21
<211> 16
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 21
Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Val Asp Thr Gly Ser Gly Ile Asp Phe Glu
1 5 10 15
<210> 22
<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 22
Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser Trp
1 5 10
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<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 23
Gln Ser Val Tyr Asn Asn Asn Tyr Leu Ser Trp
1 5 10
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<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 24
Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ala Trp
1 5 10
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 25
Glu Asn Ile Tyr Ser Gly Leu Ala Trp
1 5
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<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 26
His Thr Val Tyr Ser Asn Asn Tyr Leu Ser Trp
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<211> 11
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 27
Tyr Asn Val Tyr Asn Asn Asn Tyr Leu Ala Trp
1 5 10
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<211> 9
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 28
Gln Ser Ile Gly Ser Tyr Leu Ser Trp
1 5
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 29
Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
<210> 30
<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 30
Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 31
Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Lys Leu Pro Ser Gly Val
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 32
Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asp Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 33
Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 34
Leu Ile Tyr Thr Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 35
Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val
1 5 10
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<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 36
Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Arg Ser Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly
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<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 37
Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Arg Ser Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly
1 5 10 15
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<211> 15
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 38
Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Thr Ile Ala Glu Cys Asn Val Phe Gly
1 5 10 15
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 39
Gln Asn Tyr Tyr Tyr Ser Ser Arg Gly Phe Asn Thr Phe Gly
1 5 10
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
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Gln Gly Tyr Tyr Arg Gly Pro Val Asn Asp Phe Gly
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<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 42
Gln Gln Gly Asp Thr Asn His Asn Ile Asp Asn Ile Phe Gly
1 5 10
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 43
Gln Gln Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
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Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Leu Ser Leu Ser Ser Asn
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Thr Leu Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Ile Thr Leu
65 70 75 80
Lys Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala
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Arg Ser Ser Asp Leu Trp Asp Pro Gly Thr Leu Val Val Val Ser Ser
100 105 110
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<211> 111
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 44
Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Thr
1 5 10 15
Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Leu Ser Leu Ser Thr Asn Ala
20 25 30
Pro Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly
35 40 45
Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Ile Thr Leu Lys
65 70 75 80
Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg
85 90 95
Asn Ser Asp Leu Trp Asp Pro Gly Thr Leu Val Val Val Ser Ser
100 105 110
<210> 45
<211> 120
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 45
Gln Glu His Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Asn
20 25 30
Tyr Trp Ile Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Tyr Thr Gly Arg Asp Tyr Thr Tyr Tyr Thr Ser Trp
50 55 60
Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Asn Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Trp Asp Leu Trp Gly Pro
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 46
<211> 126
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 46
Gln Gln Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Glu Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Ser Gly
20 25 30
Tyr Asp Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser
50 55 60
Trp Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val
65 70 75 80
Thr Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Thr Tyr Ala Ser Ser Ser Gly Asp Tyr Ile Pro Tyr Phe
100 105 110
Phe Asn Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 47
<211> 125
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 47
Gln Glu Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Glu Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asp Ser
20 25 30
Ala Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Asp Ala Gly Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ser
50 55 60
Trp Val Asn Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val
65 70 75 80
Thr Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Val Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Thr Pro Asn Asn Ala Gly Asp Ile Met
100 105 110
Asp Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Leu
115 120 125
<210> 48
<211> 124
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 48
Gln Gln Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Val Asn Ser Asp
20 25 30
Cys Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Cys Ile Asp Thr Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp
50 55 60
Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Asn Val Asn Asn Ala Gly Asp Ile Met Asp
100 105 110
Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Leu
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<211> 121
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 49
Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Glu Gly Thr
1 5 10 15
Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Phe Phe Tyr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Cys Ile Tyr Gly Ala Ser Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr Leu
65 70 75 80
Arg Trp Ile Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
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Ala Arg Asp Val Asp Thr Gly Ser Gly Ile Asp Phe Glu Leu Trp Gly
100 105 110
Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 50
<211> 113
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 50
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val
65 70 75 80
Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys
85 90 95
Arg Ser Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val
100 105 110
Lys
<210> 51
<211> 111
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 51
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Trp
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val Gln Cys
65 70 75 80
Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Arg Ser
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Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys
100 105 110
<210> 52
<211> 111
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 52
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Ala Ser Pro Val Ser Val Ala Val Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn
20 25 30
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Tyr Trp Gly Thr Lys Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val Gln Cys
65 70 75 80
Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Thr Ile
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Ala Glu Cys Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu
100 105 110
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<211> 111
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 53
Ala Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Ala Ala Val
1 5 10 15
Gly Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser
20 25 30
Gly Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Ala Ser Asp Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu
65 70 75 80
Cys Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Tyr Tyr Ser Ser
85 90 95
Arg Gly Phe Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys
100 105 110
<210> 54
<211> 110
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 54
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ser Ser His Thr Val Tyr Ser Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu
65 70 75 80
Glu Cys Asp Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys His Gly Tyr Trp Arg Gly
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Pro Val Asn Asp Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu
100 105 110
<210> 55
<211> 110
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 55
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ser Ser Tyr Asn Val Tyr Asn Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Thr Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu
65 70 75 80
Glu Cys Asp Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gly Tyr Tyr Arg Gly
85 90 95
Pro Val Asn Asp Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu
100 105 110
<210> 56
<211> 110
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 56
Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Val Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys
65 70 75 80
Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asp Thr Asn His Asn
85 90 95
Ile Asp Asn Ile Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu
100 105 110
<210> 57
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 57
Gln Gln Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Leu Ser Leu Ser Ser Asn
20 25 30
Thr Leu Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Ile Thr Leu
65 70 75 80
Lys Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala
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Arg Ser Ser Asp Leu Trp Asp Pro Gly Thr Leu Val Val Val Ser Ser
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly
115 120 125
Asp Thr Pro Ser Ser Thr Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
130 135 140
Leu Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn
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Gly Val Arg Thr Phe Pro Ser Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
165 170 175
Leu Ser Ser Val Val Ser Val Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys
180 185 190
Asn Val Ala His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
195 200 205
<210> 58
<211> 206
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 58
Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Thr
1 5 10 15
Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Leu Ser Leu Ser Thr Asn Ala
20 25 30
Pro Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly
35 40 45
Thr Ile Phe Ile Asp Asp Glu Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Ile Thr Leu Lys
65 70 75 80
Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg
85 90 95
Asn Ser Asp Leu Trp Asp Pro Gly Thr Leu Val Val Val Ser Ser Gly
100 105 110
Gln Pro Lys Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly Asp
115 120 125
Thr Pro Ser Ser Thr Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu
130 135 140
Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly
145 150 155 160
Val Arg Thr Phe Pro Ser Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Val Val Ser Val Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn
180 185 190
Val Ala His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
195 200 205
<210> 59
<211> 215
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 59
Gln Glu His Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Asn
20 25 30
Tyr Trp Ile Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Tyr Thr Gly Arg Asp Tyr Thr Tyr Tyr Thr Ser Trp
50 55 60
Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Asn Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Trp Asp Leu Trp Gly Pro
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gln Pro Lys Ala Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly Asp Thr Pro Ser Ser Thr Val Thr
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu Pro Glu Pro Val Thr Val Thr
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly Val Arg Thr Phe Pro Ser Val
165 170 175
Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Ser Val Thr
180 185 190
Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Thr Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
210 215
<210> 60
<211> 221
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 60
Gln Gln Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Glu Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Ser Gly
20 25 30
Tyr Asp Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser
50 55 60
Trp Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val
65 70 75 80
Thr Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Thr Tyr Ala Ser Ser Ser Gly Asp Tyr Ile Pro Tyr Phe
100 105 110
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Pro Ser Ser Thr Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu Pro
145 150 155 160
Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly Val
165 170 175
Arg Thr Phe Pro Ser Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser
180 185 190
Ser Val Val Ser Val Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn Val
195 200 205
Ala His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
210 215 220
<210> 61
<211> 220
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 61
Gln Glu Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Glu Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asp Ser
20 25 30
Ala Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Ala Cys Ile Asp Ala Gly Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Ser
50 55 60
Trp Val Asn Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val
65 70 75 80
Thr Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Val Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Thr Pro Asn Asn Ala Gly Asp Ile Met
100 105 110
Asp Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Leu Gly Gln Pro
115 120 125
Lys Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly Asp Thr Pro
130 135 140
Ser Ser Thr Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly Val Arg
165 170 175
Thr Phe Pro Ser Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Ser Val Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn Val Ala
195 200 205
His Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
210 215 220
<210> 62
<211> 219
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 62
Gln Gln Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Val Asn Ser Asp
20 25 30
Cys Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Cys Ile Asp Thr Val Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp
50 55 60
Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Phe Leu Tyr Asn Val Asn Asn Ala Gly Asp Ile Met Asp
100 105 110
Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Leu Gly Gln Pro Lys
115 120 125
Ala Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly Asp Thr Pro Ser
130 135 140
Ser Thr Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly Val Arg Thr
165 170 175
Phe Pro Ser Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Ser Val Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn Val Ala His
195 200 205
Pro Ala Thr Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
210 215
<210> 63
<211> 216
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 63
Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Glu Gly Thr
1 5 10 15
Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Phe Phe Tyr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Cys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Cys Ile Tyr Gly Ala Ser Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Thr Leu
65 70 75 80
Arg Trp Ile Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Val Asp Thr Gly Ser Gly Ile Asp Phe Glu Leu Trp Gly
100 105 110
Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gln Pro Lys Ala Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Cys Gly Asp Thr Pro Ser Ser Thr Val
130 135 140
Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Leu Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Thr Trp Asn Ser Gly Thr Leu Thr Asn Gly Val Arg Thr Phe Pro Ser
165 170 175
Val Arg Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Ser Val
180 185 190
Thr Ser Ser Ser Gln Pro Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Thr
195 200 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val
210 215
<210> 64
<211> 217
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 64
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val
65 70 75 80
Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys
85 90 95
Arg Ser Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val
100 105 110
Lys Gly Asp Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala
115 120 125
Asp Gln Val Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys
130 135 140
Tyr Phe Pro Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln
145 150 155 160
Thr Thr Gly Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys
165 170 175
Thr Tyr Asn Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn
180 185 190
Ser His Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val
195 200 205
Val Gln Ser Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210 215
<210> 65
<211> 215
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 65
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Trp
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val Gln Cys
65 70 75 80
Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Arg Ser
85 90 95
Ala Asn Cys Ile Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Gly
100 105 110
Asp Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln
115 120 125
Val Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe
130 135 140
Pro Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr
165 170 175
Asn Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His
180 185 190
Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210 215
<210> 66
<211> 215
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 66
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Ala Ser Pro Val Ser Val Ala Val Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Leu Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Trp
35 40 45
Tyr Trp Gly Thr Lys Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val Gln Cys
65 70 75 80
Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Ser Tyr Asp Cys Thr Ile
85 90 95
Ala Glu Cys Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu Gly
100 105 110
Asp Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln
115 120 125
Val Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe
130 135 140
Pro Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr
165 170 175
Asn Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His
180 185 190
Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210 215
<210> 67
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<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 67
Ala Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Ala Ala Val
1 5 10 15
Gly Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser
20 25 30
Gly Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Ala Ser Asp Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu
65 70 75 80
Cys Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Tyr Tyr Ser Ser
85 90 95
Arg Gly Phe Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Gly
100 105 110
Asp Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln
115 120 125
Val Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe
130 135 140
Pro Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr
165 170 175
Asn Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His
180 185 190
Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210 215
<210> 68
<211> 214
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 68
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ser Ser His Thr Val Tyr Ser Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu
65 70 75 80
Glu Cys Asp Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys His Gly Tyr Trp Arg Gly
85 90 95
Pro Val Asn Asp Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu Gly Asp
100 105 110
Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln Val
115 120 125
Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe Pro
130 135 140
Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr Asn
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His Lys
180 185 190
Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210
<210> 69
<211> 214
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 69
Ala Gln Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ser Ser Tyr Asn Val Tyr Asn Asn
20 25 30
Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Thr Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu
65 70 75 80
Glu Cys Asp Asp Ala Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gly Tyr Tyr Arg Gly
85 90 95
Pro Val Asn Asp Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu Gly Asp
100 105 110
Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln Val
115 120 125
Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe Pro
130 135 140
Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr Asn
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His Lys
180 185 190
Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210
<210> 70
<211> 214
<212> PRT
<213> Oryctolagus cuniculus
<400> 70
Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Val Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys
65 70 75 80
Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asp Thr Asn His Asn
85 90 95
Ile Asp Asn Ile Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Glu Gly Asp
100 105 110
Pro Val Ala Pro Thr Val Leu Ile Phe Pro Pro Ala Ala Asp Gln Val
115 120 125
Ala Thr Gly Thr Val Thr Ile Val Cys Val Ala Asn Lys Tyr Phe Pro
130 135 140
Asp Val Thr Val Thr Trp Glu Val Asp Gly Thr Thr Gln Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ile Glu Asn Ser Lys Thr Pro Gln Asn Ser Ala Asp Cys Thr Tyr Asn
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Ser Thr Gln Tyr Asn Ser His Lys
180 185 190
Glu Tyr Thr Cys Lys Val Thr Gln Gly Thr Thr Ser Val Val Gln Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Asp Cys
210

Claims (13)

1.一种抗体，包括：
具有如SEQ ID NO.1～7任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR1；
具有如SEQ ID NO.8～14任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR2；
具有如SEQ ID NO.15～21任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VHCDR3；
具有如SEQ ID NO.22～28任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR1；
具有如SEQ ID NO.29～35任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR2；以及
具有如SEQ ID NO.36～42任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VLCDR3。
2.如权利要求1所述的抗体，其中，
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.15所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.22所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.29所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.36所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.16所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.23所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.30所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.37所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.17所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.24所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.31所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.38所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.18所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.25所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.32所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.39所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.19所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.26所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.33所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.40所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.20所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.27所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.34所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.41所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VHCDR1具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR2具有如SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VHCDR3具有如SEQ IDNO.21所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR1具有如SEQ ID NO.28所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR2具有如SEQ ID NO.35所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VLCDR3具有如SEQ ID NO.42所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
3.一种抗体，包括：
具有如SEQ ID NO:43～49任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VH；以及
具有如SEQ ID NO:50～56任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列的VL。
4.如权利要求3所述的抗体，其中，所述VH具有如SEQ ID NO:43所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:50所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:44所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:51所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:45所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:52所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:46所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:53所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:47所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:54所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:55所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述VH具有如SEQ ID NO:49所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述VL具有如SEQ ID NO:56所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
5.一种抗体，包括具有重链和轻链的Fab段，所述重链具有如SEQ ID NO:57～63任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:64～70任一所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
6.如权利要求5所述的抗体，其中，所述重链具有如SEQ ID NO:57所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:64所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:58所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述具有如SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:66所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:60所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:68所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:62所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列；或者
所述重链具有如SEQ ID NO:63所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列，所述轻链具有如SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列或其保守性修饰序列。
7.如权利要求1～2任一、或权利要求3～4任一、或权利要求5～6任一所述的抗体，所述抗体还包含共价或非共价连接的缀合物。
8.如权利要求7所述的抗体，所述缀合物包括酶，荧光团，生物素或链霉亲和素，或其组合。
9.如权利要求7所述的抗体，所述抗体是人源化或嵌合抗体。
10.于体外诊断或检测SARS-CoV-2或SARS-CoV-2核衣壳蛋白的ELISA试剂盒，其包含如权利要求1～2任一所述的抗体；或者包含如权利要求3～4所述的抗体；或者包含如权利要求5～6任一所述的抗体，或者其组合。
11.于体外诊断或检测SARS-CoV-2或SARS-CoV-2核衣壳蛋白的方法，包括使用如权利要求1～2任一所述的抗体；或者使用如权利要求3～4任一所述的抗体；或者使用如权利要求5～6任一所述的抗体，或者其组合。
12.如权利要求11所述的方法，所述方法选自直接ELISA、捕获ELISA和双抗夹心ELISA中的一种。
13.如权利要求1～2任一所述的抗体、或者如权利要求3～4任一所述的抗体、或者如权利要求5～6任一所述的抗体，或者其组合在制备治疗或预防SARS-CoV-2感染药物中的应用，所述药物以如权利要求1～2任一所述的抗体、或者如权利要求3～4任一所述的抗体、或者如权利要求5～6所述的抗体，或者其组合作为有效成分。
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