CN114736215B - 四氢噻吩并吡啶氘代衍生物及其制备方法和药物用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种四氢噻吩并吡啶氘代衍生物及其制备方法和药物用途。该衍生物可用于制备预防或治疗血栓相关疾病药物。该衍生物可平衡优化药物的安全性与有效性，避免噻吩并吡啶衍生物在胃肠道过快水解，在不增加患者出血风险的前提下达到更优的治疗效果。

Description

四氢噻吩并吡啶氘代衍生物及其制备方法和药物用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及光学活性的氘代四氢噻吩并吡啶衍生物及其制备方法与在制药中的用途，尤其涉及(S)-5-(1-(2-氯苯基)-2-(甲氧基-d3)-2-羰基乙基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基衍生物在预防或治疗血栓和栓塞相关疾病药物中的用途。

背景技术

噻吩并吡啶类药物是典型的P2Y₁₂受体拮抗剂。原形药物自身不具备活性，在体内先经CYP450酶氧化为中间产物2-氧代谢物，而后2-氧代谢物再经CYP450酶代谢为有药理活性的活性代谢物，活性代谢物与P2Y₁₂受体通过二硫键共价结合从而发挥药效。受参与噻吩并吡啶类药物代谢的CYP450酶各亚型遗传多态性的影响，使得这类药物个体差异大，有效性备受关注。目前市场上流通的噻吩并吡啶类药物有第二代的氯吡格雷和第三代的普拉格雷。

氯吡格雷(Clopidogrel)是目前世界范围内应用最广泛的血小板聚集抑制剂。氯吡格雷在噻吩并吡啶母核的7-位引入了(S)-甲酸甲酯取代基大大提高了安全性，使得氯吡格雷成为目前安全性最好的噻吩并吡啶类药物。然而在实际应用中氯吡格雷仍面临两个问题：其一，活性代谢物转化率低，约有85％的药物原形会因7-位酯基被酯酶代谢为氯吡格雷酸及其代谢衍生物而失去活性；其二，个体差异大，不同患者CYP450酶表达的差异，会造成依赖CYP450酶代谢起效的氯吡格雷在临床治疗效果上产生较大的个体差异，也是造成所谓的“氯吡格雷抵抗”现象的一个主要因素(Circulation，2004，109:166)。

普拉格雷(Prasugrel)是第三代噻吩并吡啶类药物，2009年FDA获准上市。普拉格雷在噻吩并吡啶母核的2-位引入乙酸酯的结构，使其可通过酯水解快速代谢出噻吩并吡啶类药物活化过程的中间产物2-氧代谢物，从而摆脱了活化途径中对CYP450酶的过度依赖、增加了活性代谢物转化率，提高了有效性。然而，普拉格雷在实际临床应用过程中存在着严重的毒副作用，致命性出血事件的发生频率高，且出血风险随着服药时间的延长而升高。由于出血风险的问题，FDA对于普拉格雷作出了黑框警告，不建议患有糖尿病、75岁以上和有心梗病史的患者服用普拉格雷。(抗血小板药物的研究进展[J].中国心血管病研究,2013,(1):59-61.)

对比临床用量普拉格雷(首日剂量20mg)与氯吡格雷(首日剂量300mg)活性代谢物的峰浓度，普拉格雷活性代谢物峰浓度约是氯吡格雷活性代谢物的5倍，普拉格雷的活性代谢物平均达峰时间是氯吡格雷的1/2(DOI:10.1002/cpdd.259)。过高的峰浓度超过了机体对抗凝的耐受性，导致体内出血-凝血平衡被破坏，过强的抗凝药效体现为副作用，是普拉格雷出血风险高的潜在原因。单纯降低给药剂量会导致活性代谢物浓度过低，抗血小板药效持续时间不足；解决致命性严重出血风险应从降低活性代谢物峰浓度、延缓达峰时间入手。

羧酸酯酶(carboxylesterases，CESs)与多种药物、前体药物、环境毒物及致癌物的解毒和代谢有关，能有效催化羧酸酯类、氨酯类、酰胺类、硫酯类等外源性物质的水解。人体内CESs主要有CES1和CES2，两者在组织分布及底物特异性方面存在着较大的差异。CES1主要分布于肝脏和肺部，能催化小醇基和大酰基酯底物的水解，CES1有着较大的活性口袋(active pocket)，对催化大醇基、大酰基酯水解也有一定活性；CES2主要分布于胃肠道和肾脏，主要催化大醇基、小酰基酯底物(如伊立替康)的水解，不能催化小醇基、大酰基酯的水解。

普拉格雷2-位的乙酸酯结构在体内主要是由胃肠道中的CES2代谢为2-氧代谢物的，水解后会快速释放出2-氧代谢物并迅速被吸收。2-氧代谢物在体内可迅速地转化为活性代谢物，从而引起活性代谢物峰浓度的升高。

发明内容

基于上述技术缺陷，本发明的目的在于提供一种四氢噻吩并吡啶衍生物，可平衡优化药物的安全性与有效性，避免噻吩并吡啶衍生物在胃肠道过快水解，在不增加患者出血风险的前提下达到更优的治疗效果。

为了实现以上的技术目的，本发明的发明构思为：

在噻吩并吡啶母核的2-位引入大酰基取代基可抑制前药过早在胃肠道被CES2水解，延缓活性代谢物的释放、降低峰浓度，从而降低出现严重的(包括致命性)出血风险。

基于从CES1底物选择性进行改构的思路，优先选择大体积、大位阻或难水解的酯或氨酯取代基，尤其是具有生物活性的(如血栓类疾病常用药物的)羧基或胺通过酯键或氨酯键与噻吩并吡啶母核的2-位相连。此外，通过将噻吩并吡啶母核7-位羧酸甲酯氘代可降低药物水解成无活性代谢物的比率，从而提高活性代谢物转化率。

本发明的具体方案如下：

一种光学活性的N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物，所述化合物具有如下结构：

R¹-(CO)_n-R²；

其中，R¹如式I所示：

R⁰为氟或氯；

R²为R¹或R³，R³为11～20个碳的非取代或X取代的直链或支链的烷烃、烯烃或炔烃；4～15个碳的非取代或X取代的环烷基、桥环烷基、螺环烷基；NR⁴R⁵；

其中R⁴，R⁵共同组成5-8元非取代或X取代的含氮杂环；

其中X为氟、氯、羟基、甲氧基、乙氧基、乙酰氧基、芳氧基、苯氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、胺基、吗啉、哌啶、酰胺基、磺酰胺基、巯基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、1～5个碳的直链或支链烷基或Y取代烷基、苯基或Y取代苯基；

其中Y为氟、氯、羟基、甲氧基、乙氧基、乙酰氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、烷基咪唑、吡咯烷酮、酰胺基、磺酰胺基、巯基或芳香基；

其中n为1或2，当R²不同于R¹时，n为1。

本发明式I化合物中R³优选非取代或X取代的金刚烷基、葑烷基、蒎烷基、蒈烷基、莰烷基、异莰烷基、吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪基、高哌嗪基、吡啶基、咪唑基、嘧啶基、法舒地尔基、曲美他嗪基、奥扎格雷、吉非罗齐、阿司匹林、阿魏酸。

本发明优选化合物如下：

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-三环[3.3.1.1(3,7)]癸烷-1-甲酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-1氯吡格雷-金刚烷)；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-反式-3-(4-((咪唑-1-基)甲基)苯基)-2-丙烯酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-2氯吡格雷-奥扎格雷)；

奥扎格雷能选择性地抑制血栓烷合成酶，从而抑制血栓烷A₂的产生和促进前列环素(PGI2)的产生，改善二者间的平衡，最终抑制血小板聚集和减轻血管痉挛，改善大脑局部缺血时的微循环和能量代谢障碍。目前该药物已经广泛应用于脑梗死的急性期和亚急性期的治疗。临床上奥扎格雷和氯吡格雷联用治疗急性脑梗的应用也屡见不鲜。国内临床上奥扎格雷采用静脉滴注的方法给药，口服奥扎格雷消除极快口服后2小时药物浓度即消除到峰浓度的1/20，药效持续时间极短。奥扎格雷口服具有很强的首过效应，在肠道中可被代谢为非活性代谢物奥扎格雷M1和奥扎格雷M2，这也是其口服生物利用度低的根本原因。奥扎格雷与噻吩并吡啶母核2-位成酯可避免奥扎格雷在胃肠道暴露引发的首过效应，同时还可解决噻吩并吡啶类药物代谢对CYP450的过度依赖、活性代谢物转化率低等问题。

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-2,2-二甲基-5-(2,5-二甲基苯氧基)戊酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-3氯吡格雷-吉非罗齐)；

吉非罗齐用于高脂血症，适用于严重Ⅳ或Ⅴ型高脂蛋白血症、冠心病危险性大而饮食控制、减轻体重等治疗无效者。吉非罗齐能延缓PCI术后患者冠状动脉粥样硬化的进展，并且有效抑制旁路移植血管的动脉粥样硬化病变的形成。吉非罗齐通过酯键连接至氘代氯吡格雷2-位。

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(哌啶基哌啶-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-4氯吡格雷-哌啶基哌啶)；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(六氢-1-(5-异喹啉磺酰基)-1H-1,4-二氮杂卓-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-5氯吡格雷-法舒地尔)；

法舒地尔能预防和改善多种原因引起的血管痉挛，选择性扩张痉挛的血管，改善心，脑缺血能力，改善脑灌注。法舒地尔通过氨酯键连接至氘代氯吡格雷2-位。

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(1-(2,3,4-三甲氧基苄基)哌嗪-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯(I-6氯吡格雷-曲美他嗪)；

曲美他嗪抗能抗心肌缺血，临床用于冠心病、心绞痛、心梗等症状。曲美他嗪通过氨酯键连接至氘代氯吡格雷2-位。

双(S)-2-(5-(1-(2-氯苯基)-2-(甲氧基-d3)-2-氧乙基)-4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶-2-基)-2-草酸酯(I-7草酸酯二聚)；

双(S)-2-(5-(1-(2-氯苯基)-2-(甲氧基-d3)-2-氧乙基)-4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶-2-基)-2-碳酸酯(I-8碳酸酯二聚)；

2-氧氘代氯吡格雷(式V化合物)，既氘代氯吡格雷活化中间体。两分子2-氧氘代氯吡格雷通过适当的连接分子相连，形成二聚体。

本发明提供的式I化合物的羧酸甲酯和甲基中的氘含量为50～100％，优选为70～100％，更优选为90～100％。

本发明的化合物还包括式对映异构体和外消旋体。

本发明的化合物还包括式I化合物的药学上可接受的盐，包括但不限于本发明化合物可以与药学上可接受的酸成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、乙酸、马来酸、富马酸、苹果酸、杏仁酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、双羟茶酸(帕莫酸)、草酸或琥珀酸。

本发明提供了通过羧酸或活化的羧酸衍生物合成光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-基四氢噻吩并吡啶衍生物(I)的制备方法，此处以I-1～3为例：

具体包括下列步骤：

摩尔比为1:1～1:10的式V化合物与式VI酰氯在用量为式VI化合物1～10当量的碱存在下反应，得到式I-1～3化合物；

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

本发明提供了通过氨基或氨基甲酰氯合成光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-基四氢噻吩并吡啶衍生物(I)的制备方法，此处以I-4～6为例：

包括以下步骤：

(1)摩尔比为1:1～1:10的式IV化合物或其盐与BOC酸酐在用量为BOC酸酐1～10当量的碱存在下反应，得到式VII化合物，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

(2)摩尔比为10:1～1:1的HNR⁴R⁵或其盐与三光气在用量为1～10当量的碱存在下反应，得到ClCONR⁴R⁵，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

(3)摩尔比为1:1～1:10的式VII化合物或其盐与ClCONR⁴R⁵在用量为式VII化合物1～10当量的碱存在下反应，得到Boc-III化合物，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

(4)Boc-III化合物在催化量的三乙基硅烷存在下与三氟乙酸反应，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

(5)摩尔比1:2～2:1的式III化合物与式II化合物或其盐在用量为式II化合物1～10当量的碱的存在下反应，得到式I-4～6化合物或其盐，

其中-OR_LG为离去基团，如甲磺酸酯、对甲苯磺酸酯、对硝基苯磺酸酯，对甲氧基苯磺酸酯，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

本发明提供了通过草酰氯或三光气合成光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-基四氢噻吩并吡啶二聚体衍生物(I)的制备方法，此处以I-7～8为例：

摩尔比为1:1～1:10的式V化合物或其盐与三光气或草酰氯化合物在用量为式化合物1～10当量的碱存在下反应，得到式I-7～8化合物，

所用反应溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜中的一种或多种混合溶剂，可选地加入六甲基磷酰胺、12-冠-4、18-冠-6、四甲基乙二胺等助溶剂；

所用的碱选自三乙胺、氢化钠、氢化钾、1,8-二氯杂环[5,4,0]十一7烯、吡啶、二异丙基乙胺、二异丙基胺基锂碳酸锂、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯、叔丁醇钾或叔丁醇钠；

反应温度为-20℃至溶剂沸点。

本发明通式I化合物的对映异构体的制备可参照上述方法进行，所不同的只是采用式II化合物的对映异构体作为起始原料。

本发明通式I化合物的外消旋体的制备也参照上述方法进行，所不同的只是采用式II化合物的外消旋体作为起始原料。

本发明结构改造给临床应用带来的优势：

1、借鉴普拉格雷经验，通过在噻吩环2-位引入大体积、大位阻或难水解的酯或氨酯的改造，减少了2-位酯或氨酯在胃肠道的水解，避免了活化代谢中间体2-氧氘代氯吡格雷的快速释放，降低了出血风险；

2、通过在噻吩环的2-位引入氧取代基，克服噻吩并吡啶衍生物活化过程中对CYP450酶依赖；通过氘代的方法，减慢7-位羧酸甲酯水解失活的速率，降低无活性羧酸代谢物产生的比例，从而提高活性代谢物的转化率；

3、基于“协同作用”的取代基选择，发挥双靶点、双机制的抗凝效果；

4、此种前药的设计同时也改变了具有“协同作用”药物部分的体内代谢行为，减少了代谢失活的药物比例。

以奥扎格雷为例：口服奥扎格雷药物作用时间极短，2h体内药物浓度仅为峰浓度的1/20；

口服奥扎格雷会导致“首过效应”，产生奥扎格雷非活性代谢物奥扎格雷M1和奥扎格雷M2，这也使得口服奥扎格雷生物利用度低(J.Pharm.Sci.1997,86,1111-1114)。

通过“协同作用”思路合成出的化合物I-2(氯吡格雷-奥扎格雷)可使前药中奥扎格雷部分经过酯水解缓慢代谢释放，延长了药物作用时间；且化合物I-2不经过胃肠道代谢直接进入肝脏，提高了奥扎格雷的生物利用度，减少了口服后产生的非活性代谢物奥扎格雷M1和M2的比例，改善了口服奥扎格雷的“首过效应”。

体外大鼠全血水解实验结果表明，本发明式I化合物的水解速率明显低于未氘代的相同结构的化合物，证明本发明式I化合物可以显著降低非活性的羧酸衍生物产生速率。

体外大鼠肝微粒体代谢实验结果表明，本发明式I化合物的产生的活性代谢物的量明显高于未氘代的相同结构的化合物，证明本发明式I化合物可显著提高活性代谢物产生的比例。

式I与双联给药的对比实验表明，本发明式I化合物可在体内有效地转化为药理活性的“协同作用”药物并改善其的体内命运，延长“协同作用”药物的作用时间、改善“首过效应”。

药代动力学实验结果表明，本发明式I化合物可在体内有效地转化为药理活性的代谢物从而发挥其抑制血小板聚集功效，且活性代谢物的转化率显著高于氯吡格雷或相应结构的非氘代化合物，药代参数表明发明式I化合物减缓了活性代谢物的吸收、消除速率，可提高药效的持续时间、降低出血毒性风险。

药效实验结果表明，本发明式I化合物具有显著的抑制血小板聚集作用和抗血栓形成的作用，且抗血小板聚集作用明显好于氯吡格雷及其相应的非氘代化合物。

出血时间结果表明，本发明式I化合物出血风险低于氯吡格雷。

上述实验结果提示，本发明化合物或其药学上的接受的盐可以用于制备预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物，尤其是用于制备预防或治疗冠状动脉粥样硬化疾病、心机梗死、中风、缺血性脑血栓、外周动脉疾病、剂型冠脉综合征或冠脉介入术后的血栓形成的药物。

本发明还提供了一种预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物组合物，其中含治疗有效量的式I所述化合物或其药学上可接受的载体或制剂，如片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂、口服液或注射剂等制剂形式。

综上，本发明的有益效果为：

本发明式I化合物具有明显缓于普拉格雷的代谢活化速度，具有比氯吡格雷更高的活性代谢物转化率、更长的治疗窗口；在解决了“氯吡格雷抵抗”问题的同时也防止了因乙酰氧基水解过快造成2-氧代谢物释放过快而引发的出血风险提高。

此外，式I化合物体内水解可同时释放出氘代氯吡格雷2-氧代谢物以及另一种抗血栓药物，从而发挥联合用药般的复合疗效，平衡出血与凝血风险。

本发明通过适当调整2-位酰基取代基类型与7-位羧酸甲酯水解速率，可平衡优化药物的安全性与有效性，避免噻吩并吡啶衍生物在胃肠道过快水解，在不增加患者出血风险的前提下达到最佳治疗效果。“双机制”的药物设计思路下选择的配体在水解后也可发挥其原有的药效，起到联合用药般的效果。

附图说明

图1氘代氯吡格雷与氯吡格雷原药全血水解速率图(分析物为药物原型)；

图2氘代氯吡格雷与氯吡格雷肝微粒体孵育活性代谢物浓度图(分析物为药物原形、氯吡格雷酸和活性代谢物)；

图3大鼠分别灌胃给予I-2、氯吡格雷、奥扎格雷与氯吡格雷的混合药物药时曲线(分析物为活性代谢物)；

图4大鼠分别灌胃给予奥扎格雷与氯吡格雷的混合药物(双联)、I-2药时曲线(分析物为奥扎格雷、奥扎格雷M1和奥扎格雷M2)；

图5大鼠分别灌胃给予氯吡格雷、I-1、I-2和I-3药时曲线(分析物为活性代谢物)；

图6大鼠分别灌胃给予氯吡格雷、I-4、I-5和I-6药时曲线(分析物为活性代谢物)；

图7小鼠分别灌胃给予氯吡格雷、I-1和I-2出血时间对比图(注：与溶媒组比较，*P≤0.05、**P≤0.01、***P≤0.001；与氯吡格雷组相比，#P≤0.05、##P≤0.01、###P≤0.001)。

图8为化合物I-1～I-8结构式。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明内容。在本发明中，以下所述的实施例为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

以下实施例1～3为前期物质的合成，实施例4～实施例11为化合为I-1～I-8的制备方法，实施例12～18为效果验证。

实施例1

(R)邻酰氯扁桃酸氘代甲酯

将(R)-邻酰氯扁桃酸47g溶解于150mL氘代甲醇中，加入4M氯化氢/二氧六环溶液1.5mL，加热回流5小时，冷却后减压蒸干溶剂，剩余物用二氯甲烷溶解，一次用5％碳酸钠水溶液、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤除去干燥剂后蒸干，得无色透明油状物(R)-邻酰氯扁桃酸氘代甲酯47.8g，收率93.1％。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ3.69(d，1H)，5.6(d，1H)，7.27-7.32(m，2H)，7.39-7.44(m，2H)。ESI-MS m/z226.1[M+Na]⁺。

实施例2

(R)-2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸氘代甲酯(II-1)

将(R)邻酰氯扁桃酸氘代甲酯51g溶于200mL无水二氯甲烷中，加入三乙胺42mL和催化量DMAP，搅拌，降温至0℃，同温下滴加70g对硝基苯磺酰氯的200mL无水二氯甲烷溶液，然后保温反应4小时。向反应液中加入200mL水，搅拌，静置，分液，水箱再用150mL二氯甲烷分三次萃取，合并有机相后无水硫酸钠干燥，过滤除去干燥剂后减压蒸干二氯甲烷得暗红色油状粗品102g，经甲醇重结晶得淡黄色固体粉末(II-1)78g，收率80.3％。熔点70.8-72.1℃。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ6.41(s，1H)，7.24-7.28(m，1H)，7.30-7.41(m，3H)，8.09(d，2H)，8.33(d，2H)。ESI-MS m/z411.1[M+Na]⁺。

实施例3

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)

将(R)-2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸氘代甲酯(II-1)77.8g(0.2mol)、5,6,7,7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶2(4H)-酮(IV)28.8g(0.21mol)和60g(0.71mol)碳酸氢钠加入到500mL乙腈中，反应体系用氮气保护，室温搅拌26小时。反应液静置后过滤不溶物，得暗红色母液。减压蒸干溶剂，用乙醇重结晶，得浅黄色固体粉末57g，收率83.5％。熔点143.9-145℃。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ1.89(dq，1H)，2.35-2.39(m，1H)，2.62(dt，1H)，3.04(d，1H)，4.93(s，1H)，6.05(s，1H)，7.30-7.34(m，2H)，7.43-7.46(m，1H)，7.54-7.56(m，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ198.6,170.8,167.1,134.8,132.8,130.1,129.8,129.7,127.2,126.9,77.2,67.3,51.7,51.1,49.6,33.8。HRMS m/z 341.0817[M+H]⁺，C₁₆H₁₄D₃ClNO₃S的计算值为341.0806。

实施例4

氯吡格雷-金刚烷I-1

将(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7，7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)10g(0.03mol)、1-金刚烷甲酰氯11.9g(0.06mol)、三乙胺33mL(0.24mol)和催化量DMAP溶于250mL乙腈中，室温搅拌12小时。反应液蒸干用250mL二氯甲烷复溶，用100mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:5)，得到白色固体粉末14.17g，收率94％。熔点131.3-133.1℃，ee值为94.6％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ1.69-1.77(m，8H)，1.94(d，1H)，1.99-2.02(m，6H)，2.77(s，2H)，2.88(s，2H)，3.52-3.66(m，2H),4.90(s，1H)，6.25(s，1H)，7.25-7.31(m，2H)，7.39-7.45(m，1H)，7.68(d，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ174.3,173.4,150.1,134.7,133.8,130.0,129.8,129.5,129.0,127.2,125.5,111.4,67.9,50.4,48.2,41.1,39.2,38.7,38.6,38.3,36.3,27.8,27.7,26.9。HRMS m/z 503.1856[M+H]⁺，C₂₇H₂₇D₃ClNO₄S的计算值为503.1845。

实施例5

氯吡格雷-奥扎格雷I-2

将(E)-3-[4-(1H-咪唑-1-基甲基)苯基]-2-丙烯酸14g(0.06mol)溶于200mL二氯甲烷中，加入草酰氯11mL(0.12mol)，滴加催化量DMF，室温搅拌1小时，减压蒸干溶剂；加入(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)10g(0.03mol)，加入二氯甲烷250mL和三乙胺33mL(0.24mol)复溶，加入催化量DMAP，室温搅拌12小时。反应液用100mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(甲醇:氯仿＝1:24，0.1％氨水)，得到橙红色固体粉末13.6g，收率82％。熔点151.2-153.4℃，ee值为97.0％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ2.78-2.80(m，2H)，2.88-2.91(m，2H)，3.57(d，1H)，3.66(d，1H)，4.91(s，1H)，5.15(s，2H)，6.35(s，1H)，6.56(d，1H)，6.91(s，1H)，7.12(s，1H)，7.19(d，2H)，7.25-7.31(m，2H)，7.38-7.42(m，1H)，7.54-7.58(m，3H)，7.68-7.69(m，1H)，7.80(d，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ171.3,163.5,149.6,146.3,139.0,137.5,134.7,134.0,133.7,130.0,129.9,129.8,129.5,129.2,128.9,127.8,127.2,126.0,119.3,116.8,111.9,67.9,51.8,51.7,51.5,51.3,51.1,48.1,25.6。HRMS m/z 551.1559[M+H]⁺，C₂₉H₂₃D₃ClN₃O₄S的计算值为551.1549。

实施例6

氯吡格雷-吉非罗齐I-3

将2,2-二甲基-5-(2,5-二甲基苯氧基)戊酸15g(0.06mol)溶于50mL氯化亚砜中，滴加催化量DMF，加热回流搅拌3小时，减压蒸干溶剂；加入(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)10g(0.03mol)，加入乙腈250mL和三乙胺33mL(0.24mol)复溶，加入催化量DMAP，室温搅拌11小时。反应液蒸干，用250mL二氯甲烷复溶，用100mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:3)，得到淡黄色固体粉末11.5g，收率67％。熔点113.5-115.1℃，ee值为93.0％(分析条件：Agilent1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ1.27(s，6H)，1.64-1.69(m，2H)，1.77-1.80(m，2H)，2.07(s，3H)，2.22(s，3H)，2.94(s，2H)，3.08(s，2H)，3.33(s，2H)3.94(t，2H)，5.47(s，1H)，6.43(s，1H)，6.60(d，1H)，6.69(s，1H)，6.96(d，1H)，7.47-7.54(m，2H)，7.63(d，1H)，7.82(s，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ174.74,156.81,150.17,136.53,134.61,130.87,130.54,128.69,125.23,122.98,121.02,112.79,112.52,72.54,67.56,49.21,42.60,36.90,27.31,25.11,24.96,21.50,16.01。HRMS m/z 573.2273[M+H]⁺，C₃₁H₃₃D₃ClNO₅S的计算值为573.2264。

实施例7

氯吡格雷-哌啶基哌啶I-4

将(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)3.4g(0.01mol)、哌啶基哌啶甲酰氯2.8g(0.012mol)、三乙胺2.8mL(0.02mol)、碳酸铯7.8g(0.024mol)、催化量TBACl和催化量DMAP投入100mL二氯甲烷中，室温搅拌9小时。用100mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(氨水:甲醇:二氯甲烷＝0.1:5:100)，得到淡黄色固体粉末4.528g，收率85％。ee值为96.8％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ1.45-1.60(m，8H)，1.87(d，2H)，2.45-2.52(m，5H)，2.75-2.92(m，6H)，3.51(d，1H)，3.63(d，1H)，4.27(d，2H)，4.89(s，1H)，6.19(s，1H)，7.24-7.30(m，2H)，7.40(d，1H)，7.68(d，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ171.33,152.26,150.95,134.70,133.83,129.96,129.80,129.41,129.14,127.16,125.49,111.71,67.90,62.30,50.19,48.20,44.23,28.06,27.45,26.27,25.07,24.67。HRMS m/z535.2231[M+H]+，C₂₇H₃₁D₃ClN₃O₄S的计算值为535.2220。

实施例8

氯吡格雷-法舒地尔I-5

(1)式IV化合物15.5g(0.1mol)、BOC酸酐26.2g(0.12mol)与三乙胺27.7mL(0.2mol)投入二氯甲烷300mL室温反应8h。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:4)，得到白色固体式VII化合物21.8g，收率85.3％。

(2)法舒地尔9.76g(0.033mol)、三光气3.56g(0.012mol)与三乙胺8.3mL(0.06mol)投入二氯甲烷100mL室温反应9h，用50mL水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(纯乙酸乙酯)，得到白色固体4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮烷-1-羰基氯8.03g，收率68.8％。

(3)式VII化合物5.1g(0.02mol)、4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮烷-1-羰基氯3.54g(0.01mol)与氢化钠0.53g(0.022mol)投入四氢呋喃50mL室温反应9h。反应用10mL水猝灭，蒸干溶剂用50mL乙酸乙酯复溶，用20mL水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥乙酸乙酯溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(纯乙酸乙酯)，得到白色固体式VIII-1化合物3.22g，收率56.2％。

(4)式VIII-1化合物5.7g(0.01mol)、三乙基硅烷0.05mL和三氟乙酸5mL投入二氯甲烷95mL，室温反应9h。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干经硅胶柱层析纯化(甲醇:氯仿＝1:24，0.1％氨水)得式III-1化合物棕黄色油状物4.37g，收率92.5％。

(5)式III-1化合物4.7g(0.01mol)、式II-1化合物5.8g(0.015mol)、碳酸铯4.9g(0.015mol)、催化量TBACl和催化量DMAP投入100mL二氯甲烷中，室温搅拌12小时。用50mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(氨水:甲醇:二氯甲烷＝0.1:3:100)，得到淡黄色固体粉末4.8g，收率73％。ee值为97.0％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl3):δ2.74(s，2H),2.87(d，2H)，3.47-3.53(m，6H)，3.61-3.74(m，6H)，4.89(s，1H)，6.17(d，1H)，7.24-7.30(m，2H)，7.40(d，1H)，7.68(q，2H)，8.20(d，1H)，8.31-8.39(m，2H)，8.70(s，1H)，9.35(s，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ171.31,153.21,150.48,145.34,134.71,134.11,133.74,133.05,131.50,129.87,129.45,129.22,127.16,125.92,117.28,111.92,67.84,60.39,50.34,50.01,49.69,49.49,48.15,47.44,46.66,46.34,28.52,27.80,25.06。HRMS m/z658.1628[M+H]+，C₃₁H₂₈D₃ClN₄O₆S₂的计算值为658.1635。

实施例9

氯吡格雷-曲美他嗪I-6

(1)式IV化合物15.5g(0.1mol)、BOC酸酐26.2g(0.12mol)与三乙胺27.7mL(0.2mol)投入二氯甲烷300mL室温反应8h。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:4)，得到白色固体式VII化合物21.8g，收率85.3％。

(2)曲美他嗪8.32g(0.033mol)、三光气3.56g(0.012mol)与三乙胺8.3mL(0.06mol)投入二氯甲烷100mL室温反应9h，用50mL水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(纯乙酸乙酯)，得到白色固体4-(2,3,4-三甲氧基苯基)哌嗪-1-羰基氯2.23g，收率70.8％。

(3)式VII化合物5.1g(0.02mol)、4-(2,3,4-三甲氧基苯基)哌嗪-1-羰基氯3.15g(0.01mol)与氢化钠0.53g(0.022mol)投入四氢呋喃50mL室温反应9h。反应用10mL水猝灭，蒸干溶剂用50mL乙酸乙酯复溶，用20mL水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥乙酸乙酯溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)，得到白色固体式VIII-2化合物3.19g，收率59.8％。

(4)式VIII-2化合物5.3g(0.01mol)、三乙基硅烷0.05mL和三氟乙酸5mL投入二氯甲烷95mL，室温反应9h。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干经硅胶柱层析纯化(甲醇:氯仿＝1:24，0.1％氨水)得式III-2化合物棕黄色油状物3.92g，收率90.4％。

(5)式III-2化合物4.3g(0.01mol)、式II-1化合物5.8g(0.015mol)、碳酸铯4.9g(0.015mol)、催化量TBACl和催化量DMAP投入100mL二氯甲烷中，室温搅拌12小时。用100mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)，得到淡黄色固体粉末4.2g，收率68％。ee值为95.2％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H(5μm×4.6mm×250mm)色谱柱，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ2.49(s，2H)，2.75(d，2H)，2.87(d，2H)，3.50-3.65(m，8H)，3.87(t，9H)，4.89(s，1H)，6.19(s，1H)，6.65(s，1H)，6.98(s，1H)，7.24-7.30(m，2H)，7.40(d，1H)，7.68(d，1H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ171.31,153.13,152.67,152.30,150.85,142.33,134.69,133.82,129.87,129.42,129.15,127.15,125.51,125.15,111.74,107.00,67.89,61.21,60.80,56.47,55.98,53.45,52.38,50.41,48.18,44.40,25.06。HRMS m/z 619.2076[M+H]+，C₃₀H₃₁D₃ClN₃O7_S的计算值为619.2067。

实施例10

氯吡格雷草酰氯二聚I-7

将(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)10g(0.03mol)、草酰氯1.27g(0.01mol)、三乙胺7mL(0.05mol)和催化量DMAP溶于100mL乙腈中，室温搅拌30小时。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:9)，得到白色固体3.8g，收率52％。熔点167.8-169.1℃，ee值为92.6％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV 254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ2.26-2.34(m，2H)，2.51-2.58(m，2H)，2.75-2.91(m，4H)，3.42-3.53(m，2H)，3.60-3.73(m，2H)，4.91(d，2H)，5.87(d，2H)，7.28-7.31(m，4H)，7.41-7.43(m，2H)，7.54-7.56(m，2H)。¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：δ196.03,195.93,171.03,170.99,167.30,167.10,134.78,134.76,132.99,132.77,130.09,130.05,129.79,127.32,127.27,127.14,127.07,125.66,125.50,90.39,90.36,67.00,66.98,53.45,51.81,51.63,51.45,48.63,48.34,46.09,46.01,40.26,40.07,29.70,29.32。HRMS m/z 735.1264[M+H]+，C₃₄H₂₄D₆Cl₂N₂O₈S₂的计算值为735.1270。

实施例11

碳酸酯二聚I-8

将(2S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-氧代-7,7a-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(2H,4H,6H)-基)-乙酸氘代甲酯(V-1)10g(0.03mol)、N,N'-羰基二咪唑1.62g(0.01mol)、三乙胺7mL(0.05mol)和催化量DMAP溶于100mL乙腈中，室温搅拌30小时。反应液蒸干用100mL二氯甲烷复溶，用50mL饱和碳酸氢钠、水洗涤，无水硫酸钠干燥二氯甲烷溶液，过滤，滤液蒸干残余物经硅胶柱层析纯化(丙酮:正己烷＝1:5)，得到白色固体4.7g，收率67％。熔点167.2-168.8℃，ee值为96.9％(分析条件：Agilent 1100高效液相系统，Chiralpak AD-H色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)，流动相为10％水+90％乙腈，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长UV254nm)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃):δ2.29-2.39(m，2H)，2.54-2.57(m，2H)，2.78-2.82(m，2H)，2.88-2.92(m，2H)，2.54(d，2H)，2.74(d，2H)，4.94(s，2H)，5.90(s，2H)，7.30-7.33(m，4H)，7.43-7.45(m，2H)，7.57-7.59(m，2H)。¹³C-NMR(151MHz,CDCl₃)δ195.86,170.93,166.99,134.80,132.92,130.58,129.97,129.24,127.80,127.12,125.64,90.33,67.38,51.78,51.65,49.21,48.62,48.32,46.11,46.03,40.21,40.02,29.33,27.22。HRMS m/z707.1240[M+H]+，C₃₃H₂₄D₆Cl₂N₂O₇S₂的计算值为707.1231。

实施例12

氘代氯吡格雷与氯吡格雷体外全血水解稳定性实验

取大鼠新鲜全血2mL，置于玻璃试管中。盒式给药的方式加入氯吡格雷和氘代氯吡格雷分别40μg/mL的生理盐水溶液0.05mL，实验进行3个平行。试管37℃水浴恒温震荡，于固定时间点10min，20min，30min，40min，50min，60min，70min，80min，90min，100min，110min，120min取出0.05mL，加入0.25mL乙腈立即终止反应，再依次加入0.05mL乙水(乙腈:水＝1:1，v/v)，0.05mL内标(安定，50ng/mL)。涡流2min，13000rpm离心10min，取上清40μL进样。

表1.盒式给药全血稳定性中氯吡格雷原型(/ng.mL^-1)

表2.盒式给药全血稳定性中氘代氯吡格雷原型(/ng.mL^-1)

结果如图1所示。由图1可以看出，氘代氯吡格雷各时间点浓度均大于氯吡格雷，即在大鼠全血中氘代氯吡格雷稳定性更好。证实了7-位氘代甲酯可提高N-(苯基乙酸甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物的稳定性，显著降低非活性的羧酸衍生物产生速率。

实施例13

氯吡格雷和氘代氯吡格雷肝微粒体代谢实验

配制好100mmol/L的磷酸钾缓冲液；将肝微粒体浓度配制为1.5mg/mL；将氯吡格雷或氘代氯吡格雷配制成10μmol、40μmol的溶液，将NADPH配制成20mmol/L，将GSH配制成10mmol/L，将内标地西泮配制成50ng/mL，将碳酸氢铵配制成16mg/mL。在离心管中离心管，加入50μL的磷酸钾缓冲液，加入40μL的大鼠的肝微粒体，加入15μL相应浓度的氯吡格雷或氘代氯吡格雷加入15μL的GSH溶液，混匀后，然后再加入30μL的预先NADPH溶液，用移液器吹打使其充分混匀，氧化反应开始进行，37℃恒温震荡孵育40min后，放入-20℃冰箱终止反应。取出50μL，加入250μL乙腈立即终止反应，再依次加入50μL乙水(乙腈:水＝1:1，v/v)，50μL内标(安定，50ng/mL)。涡流2min，13000rpm离心10min，取上清40μL进样。

结果如图2所示。图2表明，氘代氯吡格雷的活性代谢物的转化率高于氯吡格雷。从肝微粒体体外代谢研究结果可知，将7-位甲酸甲酯的甲基氘代后，孵育完成后药物原形更多、活性代谢物更多、灭活的氯吡格雷酸更少，7-位酯键的稳定性得到了明显增强。更少的药物原形通过水解成氯吡格雷酸的途径灭活，前药到活性代谢物的转化率大幅提高。7-位甲酸甲酯的甲基氘代提高7-位稳定性从而提高活性代谢物转化率的思路在体外得到了验证。

实施例14

药代动力学角度阐述化合物I-2对于氯吡格雷-奥扎格雷双联用药的优势

Wistar大鼠，雄性，体重180～220g，给药前12小时禁食、自由饮水，分别灌胃给药式I-2化合物(79μmol/kg)、氯吡格雷(79μmol/kg)和氯吡格雷、奥扎格雷双联用药(各79μmol/kg)。与给药前(0h)及给药后0.0833，0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6，8和10小时从大鼠眼底静脉丛取血；取出的大鼠全血置于EDTA二钠抗凝管中，并加入3`-甲氧基苯甲酰甲基溴对活性代谢物进行衍生化，离心分离血浆。将血浆与50μL内标(安定50ng/mL)、50μL乙水(乙腈:水＝1:1，v/v)和250μL乙腈混合，涡流2min，13000rpm离心10min，取上清40μL进样。

液相条件

色谱柱：Agilnet ZORBAX SB-C18(4.6mm×50mm，5μm)；

柱温：40℃ 进样量：40μL 洗针溶剂：甲醇和水(1/1，v/v)

流动相A：0.05％甲酸-水 流动相B：乙腈

液相泵：总流速：1mL/min 运行时间：7.5min

洗脱条件：见表3。

表3.实施例14洗脱条件

质谱条件具体的质谱条件参数如表4所示：

表4.实施例14质谱条件

结果如图3、图4所示。图3中数据说明式I-2化合物、氯吡格雷和双联用药经灌胃进入大鼠体内后，均可有效转化为相应的噻吩并吡啶类活性代谢物，且式I-2化合物转化的活性代谢物的转化率显著高于氯吡格雷和双联用药，且活性代谢物的消除速率明显低于氯吡格雷和双联用药。

图4中所示为奥扎格雷和其无活性代谢物奥扎格雷M1和奥扎格雷M2，其中图4a为双联用药后，图4b为给予式I-2化合物后。结果表明化合物I-2可转化为奥扎格雷，且转化后奥扎格雷的消除速率明显低于双联用药，增加了药效的持续时间。比较奥扎格雷的活性暴露量和灭活暴露量，双联用药的活性暴露量/灭活暴露量比值为55％，而化合物I-2代谢出的奥扎格雷活性暴露量/灭活暴露量比值为65％；化合物I-2，降低了奥扎格雷口服后的灭活率，改善了口服奥扎格雷的首过效应。

实施例15

药效学角度阐述化合物I-2对于氯吡格雷-奥扎格雷双联用药的优势

Wistar大鼠，雄性，体重180～220g，给药前12小时禁食、自由饮水，选择0.5％CMCNa作为溶剂，分别灌胃给药式I-2化合物(3μmol/kg)和氯吡格雷、奥扎格雷双联用药(各3μmol/kg)，溶媒组灌胃给予等体积0.5％CMCNa溶液。给药后4小时，戊巴比妥钠麻醉，腹主动脉取血，以柠檬酸钠1:9抗凝，离心取富血小板血浆和贫血小板血浆，两者混合比例为贫血小板血浆:富血小板血浆＝3:1。制得混合血小板血浆后采用“光学比浊法”，用血小板聚集仪检测加入ADP后的聚集率。

结果见下表：

表5.化合物I-2和氯吡格雷-奥扎格雷双联用药血小板聚集度(/％)

注：与溶媒组比较，*P≤0.05、**P≤0.01、***P≤0.001；与双联用药组相比，#P≤0.05、##P≤0.01、###P≤0.001。

如表5所示ADP诱导血小板凝集实验中，各受试组均有显著抑制大鼠血小板聚集作用，并且可以逆转血小板相聚集，引起解聚。化合物I-2组的血小板聚集度显著低于双联用药组，表现出显著强于双联用药抗血小板聚集活性。

实施例16

N-(苯基乙酸甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物药代动力学

Wistar大鼠，雄性，体重180～220g，给药前12小时禁食、自由饮水，每组3只灌胃给药式I-1至I-6化合物(30μmol/kg)和氯吡格雷(30μmol/kg)。与给药前(0h)及给药后0.0833，0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6，8和10小时从大鼠眼底静脉丛取血；取出的大鼠全血置于EDTA二钠抗凝管中，并加入3`-甲氧基苯甲酰甲基溴对活性代谢物进行衍生化，离心分离血浆。将血浆与50μL内标(安定50ng/mL)、50μL乙水(乙腈:水＝1:1，v/v)和250μL乙腈混合，涡流2min，13000rpm离心10min，取上清40μL进样。

液相条件

色谱柱：Agilnet ZORBAX SB-C18(4.6mm×50mm，5μm)；

柱温：40℃ 进样量：40μL洗针溶剂：甲醇和水(1/1，v/v)

流动相A：0.05％甲酸-水 流动相B：乙腈

液相泵：总流速：1mL/min 运行时间：6.5min

洗脱条件：见表6。

表6.实施例16洗脱条件

质谱条件具体的质谱条件参数如表7所示：

表7.实施例16质谱条件

结果如图5和图6所示。式I-1至I-6化合物经灌胃进入大鼠体内后，均可有效转化为相应的活性代谢物，且式I-1至I-4化合物活性代谢物的转化率显著高于氯吡格雷，式I-6化合物活性代谢物转化率与氯吡格雷相当。式I-1至I-6化合物和氯吡格雷给药后活性代谢物暴露量如表8所示：

表8.氯吡格雷和式I-1至I-6化合物活性代谢物暴露量(/ng.mL^-1.h^-1,mean±SD)

图5、图6中，式I-1至I-6化合物达峰时间为45分钟至60分钟，氯吡格雷达峰时间为30分钟，而普拉格雷的达峰时间早于氯吡格雷，式I-1至I-6化合物延缓了噻吩并吡啶类药物活性代谢物的释放。图5图6所示的式I-1至I-6化合物活性代谢物的消除速率明显低于氯吡格雷。因而达到延缓了活性代谢物的释放和消除，提高了药物活性代谢物的转化率，增加了药效的持续时间。

实施例17

抑制ADP诱导血小板凝集作用实验

Wistar大鼠，雄性，体重180～220g，给药前12小时禁食、自由饮水，以0.5％CMCNa作为溶剂，灌胃给予式I-1和I-2化合物及氯吡格雷(氯吡格雷10mg/kg，式I-1和I-2化合物低浓度1.5mg/kg、中浓度3mg/kg、高浓度6mg/kg)，溶媒组灌胃给予等体积0.5％CMCNa，给药后4小时，戊巴比妥钠麻醉，腹主动脉取血，以柠檬酸钠1:9抗凝，离心取富血小板血浆和贫血小板血浆，两者混合比例为贫血小板血浆:富血小板血浆＝3:1。制得混合血小板血浆后采用“光学比浊法”，用血小板聚集仪检测加入ADP后的聚集率。

结果见表9：

表9.式I-1、I-2化合物和氯吡格雷血小板聚集度(/％)

注：与溶媒组比较，*P≤0.05、**P≤0.01、***P≤0.001；与氯吡格雷组相比，#P≤0.05、##P≤0.01、###P≤0.001。

如表9所示，ADP诱导血小板凝集实验中，各受试品均有显著抑制大鼠血小板聚集作用，并且可以逆转血小板第二时相聚集，引起解聚。相较于氯吡格雷组(10mg/kg)两个受试化合物中浓度(3mg/kg)便显示出比氯吡格雷更强的抗血小板聚集活性，而两个受试化合物高浓度(6mg/kg)均显示出显著优于氯吡格雷组的抗血小板聚集活性。

实施例18

出血时间实验

断尾法测定出血时间(BT)：KM小鼠，雄性，体重20～22g，给药前12小时禁食、自由饮水，灌胃给药式I-1和I-2化合物(低浓度2mg/kg、中浓度4mg/kg、高浓度8mg/kg)和氯吡格雷(15mg/kg)，给药液用0.5％CMCNa溶液配制，溶媒组给予等体积0.5％CMCNa。在小鼠灌胃给药4h后，切去尾尖约3mm，当尾尖流出血液时计时开始，前10min内每隔1min用滤纸轻轻拭血1次，超过10min每隔30s拭血1次，直到拭血后尾尖不再出血为止，从开始出血到停止出血所经历的时间即为BT，超过60min的，以60min计算。

结果如图7所示。式I-1和I-2化合物各剂量组出血时间普遍低于氯吡格雷，I-1低中浓度组、I-2低浓度组出血时间显著低于氯吡格雷组。出血时间是判定出血风险的重要依据，因此可得出结论，式I-1和I-2化合物出血风险低于氯吡格雷。

实施例19

片剂

分别将化合物I-1～I-8(50g)、羟丙甲基维生素E(150g)、淀粉(200g)、聚维酮K30适量和硬脂酸镁(1g)混合，制粒，压片。

Claims (7)

1.一种光学活性的N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物，其特征在于，所述化合物具有如下式I所示结构：R¹-(CO)_n-R²(I)；

其中，R¹为

R⁰为氟或氯；

R²为R³；

R³为X取代的金刚烷基、葑烷基、蒎烷基、蒈烷基、莰烷基、异莰烷基、法舒地尔基、曲美他嗪基、奥扎格雷、吉非罗齐、-NR⁴R⁵；其中R⁴，R⁵共同组成X取代的哌啶环；

其中X为哌啶、1～5个碳的直链或支链烷基；

其中n为1。

2.根据权利要求1的光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物，其特征在于，所述衍生物选自下列化合物：

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-三环[3.3.1.1(3,7)]癸烷-1-甲酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-1；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-反式-3-(4-((咪唑-1-基)甲基)苯基)-2-丙烯酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-2；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(2-2,2-二甲基-5-(2,5-二甲基苯氧基)戊酰氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-3；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(哌啶基哌啶-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-4；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(六氢-1-(5-异喹啉磺酰基)-1H-1,4-二氮杂卓-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-5；

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(1-(2,3,4-三甲氧基苄基)哌嗪-1-甲氧基-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基)-乙酸氘代甲酯，记作I-6。

3.权利要求1或2所述的光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物的药学上可接受的酸式盐，其特征在于，所述可接受的酸式酸为：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、乙酸、马来酸、富马酸、苹果酸、杏仁酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、帕莫酸、草酸或琥珀酸。

4.权利要求2所述光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物的制备方法，其特征在于，物质的量比为1:1～1:10的式V化合物与式VI酰氯在碱存在下反应，得到式I-1～3化合物；

所述式V化合物的结构式为：

所述式VI酰氯的结构式为：

所述式I-1～3化合物的结构式为：

R⁰、R³的定义与权利要求2中衍生物结构相对应。

5.权利要求2所述光学活性N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)物质的量比为1:1～1:10的式IV化合物或其盐与BOC酸酐在碱存在下反应，得到式VII化合物，

(2)物质的量比为10:1～1:1的HNR⁴R⁵或其盐与三光气在碱存在下反应，得到ClCONR⁴R⁵，

(3)物质的量比为1:1～1:10的式VII化合物或其盐与ClCONR⁴R⁵在碱存在下反应，得到Boc-III化合物；

(4)Boc-III化合物在三氟乙酸和三乙基硅烷存在下分解产生III；

(5)物质的量比为1:2～2:1的式III化合物与式II化合物或其盐在碱的存在下反应，得到式I-4～6化合物或其盐，

其中-OR_LG为离去基团，包括甲磺酸酯、对甲苯磺酸酯、对硝基苯磺酸酯，对甲氧基苯磺酸酯；

所述式IV化合物的结构式为：

所述式VII化合物的结构式为：

所述式III化合物的结构式为：

所述式II化合物的结构式为：

R⁰、R⁶、R⁷的定义与权利要求2中衍生物结构相对应。

6.权利要求1或2所述光学活性的N-(苯基乙酸氘代甲酯-2-基)-四氢噻吩并吡啶衍生物在制备预防或治疗血栓相关疾病药物的用途。

7.一种预防或治疗血栓相关疾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中含有权利要求1所述化合物或其药学上可接受的载体或制剂，所述制剂为片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂、口服液或注射剂。

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