CN114727928B - 用于诱导促进老化皮肤细胞周围环境变化的组合物 - Google Patents
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Abstract
提供一种用于制备用于诱导促进老化皮肤细胞周围环境变化的组合物的、由特定化学式表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐的用途。
Description
技术领域
本记载涉及一种仅促进人体来源年轻皮肤细胞的生长的组合物。
背景技术
作为构成人体的最大器官的皮肤起到从外部的物理、化学刺激中保护体内的功能和维持体内的湿度、体温等的稳态的功能。然而，随着年龄的增长或者持续暴露在外部刺激中时，皮肤受损且生理功能降低等加快皮肤老化。这种皮肤老化是随着年龄的增长而必然发生的自然现象，但是随着生活水平的提高而对生活品质的要求在增加，而且近年来由于各种环境因素而皮肤老化的发生因素在增加，因此迫切需要与皮肤老化有关的对策。
皮肤老化受到遗传、环境等各种因素的影响，大致分为自然衰老或者内源性衰老和外源性衰老。自然衰老或者内源性衰老(intrinsic aging)作为根据遗传信息而随着时间的流逝产生的老化现象，主要在不暴露于阳光的皮肤中观察得到，其特征为细纹和皮肤弹性的减少，且难以人为调节。外源性衰老(extrinsic aging)作为通过外部环境因素，其中也是通过在阳光中存在的紫外线而产生的老化现象，也称为光老化(photoaging)，出现在经常暴露于阳光的部位，其特征为深的皱纹、肤质粗糙、色素沉着、肤色以及皮肤弹性的减少，且容易人为调节。因此，持续着用于防止外源性衰老的研究，尤其是，随着因长时间暴露于紫外线而进行的外源性光老化，对防止皱纹形成的研究备受瞩目(Gilchrest B.A.,J.Am.Acad.Dermatol.,1989:21:610-613)。
为此，目前为止，使用在化妆料组合物中的所谓老化的术语全部是指外源性衰老，尤其是通过外源性光老化的皮肤老化，抗老化是指因外部环境因素而老化的细胞被去除(抑制老化)或者出现重新变年轻的修复现象(细胞回春)。然后，这种抗老化的概念其根本是通过改善个别细胞的老化因子来确保的。然而，事实上在包括临床学部分的各种应用中没有得到所期望的实际效果。最近，根据皮肤学会的趋势，相比通过个别细胞的抗老化机制的抑制老化或者细胞回春，追求整个环境的变化的研究成为趋势，尤其是，提及的是相比个别细胞，围绕各个个体的周围的变化更加重要。
为此，本发明人开发出如下组合物，即不受使用在现有化妆料组合物中的老化的定义的束缚，而可以应用在所有广义的老化(内源性衰老以及外源性衰老)中，而且代替抑制老化或者细胞回春，反而是在老化的环境中，将已经老化的细胞保持原样而仅促进尚未老化的年轻细胞的生长，从而能够将老化的环境变成未老化的环境。
这完全脱离以往通用的抗老化的概念，通过将老化细胞保持原样而仅特异性地增加周围的年轻细胞的细胞数，从而将老化环境变成非老化环境，通过这种变化，预测可以具有与现有的抗老化机制(抑制老化机制或者细胞回春机制)完全不同的机制。
发明内容
技术问题
一实现例想要提供一种在已经老化的环境下，将老化的细胞数保持原样，仅特异性地促进未老化的年轻细胞的生长，从而能够通过相比老化细胞的数量而相对增加年轻细胞的数量的机制，改变老化的环境的组合物。
技术方案
根据一实现例，提供一种用于诱导促进老化皮肤细胞周围环境变化的组合物，所述组合物作为有效成分包括由以下化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐，仅促进SA-β-gal(衰老相关β-半乳糖苷酶；senescence associated-betagalactosidase)未染色的人体来源皮肤细胞的生长。
【化学式1】
在所述化学式1中，
R1至R3各自独立为羟基或者羧基，
n为1至3的整数。
由所述化学式1表示的化合物可以由以下化学式1-1表示。
【化学式1-1】
在所述化学式1-1中，
R1以及R2各自独立为羟基，
R3为羧基。
由所述化学式1表示的化合物可以以所述组合物总量为基准，含有0.01重量％至5重量％。
所述皮肤细胞可以为成纤维细胞。
所述组合物可以在SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)染色的人体来源色素形成细胞以及SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)未染色的人体来源色素形成细胞中，仅选择性地促进SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)未染色的人体来源色素形成细胞的生长。
所述皮肤细胞可以为成纤维细胞。
所述组合物可以在SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)染色的人体来源成纤维细胞以及SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)未染色的人体来源成纤维细胞中，仅选择性地促进SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)未染色的人体来源成纤维细胞的生长。
所述组合物可以是仅增加SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)未染色的人体来源年轻皮肤细胞的细胞数，而将SA-β-gal(senescenceassociated-beta galactosidase)染色的人体来源老化细胞的细胞数保持原样。
所述组合物可以为化妆料组合物。
发明效果
根据一实现例的组合物可以在构成老化的皮肤的老化细胞和未老化的年轻细胞中，将老化细胞的数量保持原样而仅特异性地生长年轻细胞的数量，从而在无需去除老化的细胞或者将老化的细胞修复成年轻细胞的情况下，改善老化的皮肤环境。
附图说明
图1是示出UVB处理之前和之后的色素形成细胞的形态和细胞数的光学显微镜照片；
图2是观察随着由化学式E表示的化合物的浓度增加而UVB处理的色素形成细胞的形态以及细胞数的变化的光学显微镜照片；
图3是示出按照由化学式E表示的化合物的浓度而总色素形成细胞数、老化色素形成细胞数、SA-β-gal染色的色素形成细胞(SA-β-gal Stained Cell；Aged Cell(老化细胞))数和未染色的色素形成细胞(年轻细胞；Young cell)数的比率的图表；
图4是示出UVB处理之前和之后的成纤维细胞的形态和细胞数的光学显微镜照片；
图5是观察随着由化学式E表示的化合物的浓度增加而UVB处理的成纤维细胞的形态以及细胞数的变化的光学显微镜照片；
图6是示出按照由化学式E表示的化合物的浓度而总成纤维细胞数、老化成纤维细胞数、SA-β-gal染色的成纤维细胞(SA-β-gal Stained Cell；Aged Cell)数和未染色的成纤维细胞(Young cell)数的比率的图表。
具体实施方式
以下，详细说明本发明的实现例以供本发明所属技术领域中具有通常的知识的人能够容易实施。然而，本发明可以实现为各种不同的形态，不限于在此说明的实现例。
在本说明书中，老化细胞是指SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)染色的细胞，年轻细胞是指SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)未染色的细胞。
在本说明书中，当提及到层、膜、区域、板等部分位于其他部分“上方”时，其不仅包括“直接”位于其他部分“上方”的情况，还包括在其中间存在又一其他部分的情况。与此相反地，当提及到某一部分“直接”位于其他部分“上方”时，是指在中间不存在其他部分。
在本说明书中，没有另外有定义时，“组合”是指混合或者共聚合。另外，“共聚合”是指嵌段共聚合乃至无规共聚合，“共聚物”是指嵌段共聚物乃至无规共聚物。
以下，说明根据一实现例的SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)未染色的用于促进人体来源年轻皮肤细胞的生长的组合物。
根据一实现例的仅促进SA-β-gal(senescence associated-betagalactosidase)未染色的人体来源皮肤细胞的生长的、用于诱导促进老化皮肤细胞周围环境变化的组合物作为有效成分包括由以下化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐。
【化学式1】
在所述化学式1中，
R1至R3各自独立为羟基或者羧基，
n为1至3的整数。
例如，由所述化学式1表示的化合物可以由以下化学式1-1表示。
【化学式1-1】
在所述化学式1-1中，
R1以及R2各自独立为羟基，
R3为羧基。
本申请与以抑制个别细胞的老化或者改善个别老化因子为焦点的现有抗老化技术不同，是以环境的变化为焦点的发明。虽然在本申请中未看到通过UV等来去除老化的细胞或者使老化的细胞重新变年轻的修复现象，但是在老化的细胞之间年轻细胞(未显示老化因子的细胞)的生长具有相对于作为有效成分包括由所述化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐的组合物，以浓度依赖性地增加的特性，因此是通过与现有抗老化完全不同的机制来代替老化现象。
由所述化学式1表示的化合物可以在老化的人体来源色素形成细胞(原代黑色素细胞；primary melanocytes；MC)以及未老化的人体来源色素形成细胞(primarymelanocytes；MC)中，仅选择性地促进未老化的年轻色素形成细胞的生长。
由所述化学式1表示的化合物可以在老化的人体来源成纤维细胞(原代成纤维细胞；primary fibroblast；FB)以及未老化的人体来源成纤维细胞(primary fibroblast；FB)中，仅选择性地促进未老化的年轻成纤维细胞的生长。
即，所述皮肤细胞可以为色素形成细胞或者成纤维细胞。
所述组合物内由所述化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐可以以所述组合物总量为基准，含有0.01重量％至5重量％的含量范围。当以不足0.01重量％的含量使用由所述化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐时，其含量非常少而在老化的细胞中促进年轻细胞(未显示老化因子的细胞)的生长的效果非常微弱，当使用超过5重量％的含量时有可能是不经济的，因为通过5重量％以下的含量也已经充分具有促进年轻细胞(未显示老化因子的细胞)的生长的效果。
即，根据一实现例的组合物由于作为有效成分包括由所述化学式1表示的化合物、其衍生物或者其化妆学上可接受的盐，因此可以仅增加SA-β-gal(senescenceassociated-beta galactosidase)未染色的人体来源年轻皮肤细胞的细胞数，而将SA-β-gal(senescence associated-beta galactosidase)染色的人体来源老化细胞的细胞数保持原样。
以上“化妆学上有效的量”是指向动物或者人给药所述生理活性成分而显示所目的的生理学或者化妆学活性上充分的量。然而，所述化妆学上有效的量可以根据症状的程度、患者的年龄、体重、健康状态、性别、给药路径以及使用时间等而适当变化。
另外，以上“化妆学上可接受”是指生理学上允许且向人类给药时，一般不引起诸如皮肤过敏或者晕眩感的过敏反应或者与其类似的反应。
一方面，所述组合物还可以包括载体、赋形剂、稀释剂等，作为其示例，可以举出乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、甲基羟苯酸酯、丙基羟苯酸酯、滑石、硬脂酸镁以及矿物油。另外，可以进一步包括填充剂、抗凝剂、润滑剂、润湿剂、香料、乳化剂以及防腐剂等。
例如，所述组合物可以为化妆料组合物。
在本说明书中，“化妆料”可以是指，不仅具有美容功能，还可以具有除美容功能之外进一步具有医学功能的所有物质。
所述化妆料组合物的剂型不受特别限制，可以根据目的而适当选择。
例如，所述化妆料组合物可以剂型化为溶液、悬浮液、乳浊液、糊剂、凝胶、霜、乳液、粉、皂剂、含表面活性剂的清洁剂、油、粉状粉底、乳状粉底、蜡状粉底以及喷雾等，然而不限于此。更加详细地，可以剂型化为清洗剂、营养液(tonic)、头发定型剂、营养化妆水、精华液、精华乳、焗油剂、润发乳、洗发水、乳液、养发剂或者染发剂等的化妆料组合物；水包油(O/W)型、油包水(W/O)型等的基础化妆料。例如，所述组合物可以具有选自由润肤乳、润肤液、收敛剂、乳液、牛奶乳液、保湿乳液、滋养乳液、按摩霜、营养霜、保湿霜、护手霜、软膏、粉底、精华、滋养精华、面膜、皂剂、洁面泡沫、洁面乳、清洁霜、身体乳、沐浴乳、乳液、软膏、凝胶、霜、贴片以及喷雾剂而成的组中的一种剂型。另外，所述组合物在各个剂型中，除了所述必要成分之外，其他成分可根据其他外用剂的种类或者使用目的等，本领域技术人员容易适当选择并进行调配。例如，还可以包括紫外线阻隔剂、护发调理剂、香料等。
所述化妆料组合物可以含有化妆品学上可接受的介质或者基质。其作为适合局部使用的所有剂型，可以提供为例如溶液、凝胶、固体或者糊状无水生成物、在水相分散油相得到的乳剂、悬浮液、微乳剂、微胶囊、微颗粒球或者离子型(脂质体)以及/或者非离子型的囊素分散剂形态，或者霜、化妆水、乳液、粉、软膏、喷雾或者遮瑕棒形态。所述组合物可以按照本领域中的常规方法制备。
当本发明的剂型为溶液或者乳浊液时，作为载体成分，使用溶剂、增溶剂或者破乳剂，例如，有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂肪酯、聚乙二醇或者山梨糖醇的脂肪酸脂。
当本发明的剂型为悬浮液时，作为载体成分，可以使用诸如水、乙醇或者丙二醇的液态稀释剂；诸如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯以及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯的悬浮剂；微晶纤维素；偏氢氧化铝；膨润土、琼脂或者黄蓍胶等。
当本发明的剂型为糊剂、霜剂或者凝胶剂时，作为载体成分，可以使用动物性油、植物性油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、氧化硅、滑石或者氧化锌等。
当本发明的剂型为粉剂或者喷雾剂时，作为载体成分，可以使用乳糖、滑石、氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉剂，尤其为喷雾剂时，还可以含有诸如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚的推进剂。
在本发明的一实施形态中，所述化妆料组合物还可以含有增粘剂。本发明的化妆料组合物中包含的增粘剂可以使用甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基羟基鸟嘌呤、羟甲基纤维素、羟基乙纤维素、羧乙烯聚合物、聚季铵盐、鲸蜡硬脂醇、硬脂酸、卡拉胶等，可以优选使用羧甲基纤维素、羧乙烯聚合物、聚季铵盐中的一种以上，可以最优选为羧乙烯聚合物。
在本发明的一实施形态中，所述化妆料组合物可以根据需要而适当含有各种基质和添加剂，这些成分的种类和量可由发明人容易选定。可以根据需要含有可接受的添加剂，例如，还可以含有本领域常规的防腐剂、色素、添加剂等的成分。
作为防腐剂，具体可以为苯氧乙醇(Phenoxyethanol)或者1,2-己二醇(1,2-Hexanediol)等，香料可以为人工香料等。
此外，在本文发明的一实施形态中，化妆料组合物可以含有水溶性维生素、油溶性维生素、高分子肽、高分子多醣、神经鞘脂类以及海藻汁而成的组中的组合物。作为除此之外可以添加的调配成分，可以举出油脂成分、保湿剂、润滑剂(emollients)、表面活性剂、有机和无机颜料、有机粉体、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、pH调节剂、乙醇、色素、香料、血液循环促进剂、凉感剂、止汗剂、净化水等。
另外，除此之外可添加的调配成分不限于此，所述任意成分也可以在不破坏本发明的目的以及效果的范围内进行调配。
进一步地，根据一实现例的化妆料组合物，如上所述，不仅可以作为药学组合物使用，还可以作为保健食品使用。例如，可以容易作为食品的主原料、副原料、食品添加剂、功能性食品或者饮料使用。
所述“食品”是指含有一种或者其以上的营养素的天然物质或者加工品，优选为，是指经过某种程度的加工工序，成为可以直接食用的状态，作为通常的含义，是指包含食品、食品添加剂、功能性食品以及饮料全部。
作为可以添加所述食品用组合物的食品，例如具有各种食品类、饮料、口香糖、茶、维生素复合物、功能性食品等。进一步地，包括特殊营养食品(例如，配方奶粉、婴、幼儿食品等)、肉制品、鱼肉制品、豆腐类、凉粉类、面类(例如，拉面类、面条类等)、面包类、健康辅助食品、调味食品(例如，酱油、大酱、辣椒酱、混合酱等)、酱汁类、饼干类(例如，点心类)、糖果类、巧克力类、口香糖类、雪糕类、乳制品(例如，发酵乳、奶酪等)、其他加工食品、辣白菜、腌制食品(各种泡菜类、酱菜类)、饮料(例如，水果饮料、蔬菜饮料、豆乳类、发酵饮料类等)、天然调味料(例如，拉面调料包等)，但不限于此。所述食品、饮料或者食品添加剂可以通过常规的制备方法制备。
另外，所述“功能性食品”或者“保健食品”是指在食品利用物理学、生物化学、生物工学上的方法等赋予附加价值以使该食品的功能在特定目的中起作用、表现的食品群，或者设计为使食品组分所具有的与调节生物防御节律、防止疾病和疾病恢复等有关的体内调节功能对生物充分进行表达，并进行加工的食品，具体可以为保健食品。所述功能性食品可以包括食品学上可接受的食品辅助添加剂，可以进一步包括功能性食品的制备中通常使用的合适的载体、赋形剂以及稀释剂。
所述健康辅助食品的种类不限于此，可以为粉末、颗粒、片剂、胶囊或者饮料形态。
用于实施发明的形态
针对本申请发明的优点、特征以及达成其的方法，参考详细后述的实施例会变明确。以下，通过实施例详细说明本申请发明。然而，所述实施例是用于具体说明本发明，本发明的范围不受所述实施例的限定。
(实施例)
试验例1：随着UVB处理而色素形成细胞的形态变化以及细胞数变化
向色素形成细胞诱导UVB以使色素形成细胞发生老化，该结果，确认到形态学上细胞的形态发生变化，通过突然的老化而细胞发生凋亡，约50％水平的细胞发生凋亡。然后，处理由以下化学式E表示的化合物(西格玛奥德里奇；Sigma-Aldrich)。该结果，确认到细胞的数量相对于由所述化学式E表示的化合物，以浓度依赖性地再次增加(参考图1以及图2)。另外，测定总细胞数以及老化的细胞数，计算SA-β-gal染色的老化细胞数/总细胞数的比率，确认到SA-β-gal染色的老化细胞数/总细胞数的比率相对于由所述化学式E表示的化合物，以浓度依赖性地减少(参考图3)。
【化学式E】
试验例2：UVB处理之后成纤维细胞的细胞数变化
向成纤维细胞诱导UVB以使成纤维细胞发生老化，该结果，确认到形态学上细胞的形态发生变化，通过突然的老化而细胞发生凋亡，约60％水平的细胞发生凋亡。然后，处理由以下化学式E表示的化合物。该结果，确认到细胞的数量相对于由所述化学式E表示的化合物，以浓度依赖性地再次增加(参考图4以及图5)。另外，测定总细胞数以及SA-β-gal染色的老化细胞数，计算老化的细胞数/总细胞数的比率，确认到老化的细胞数/总细胞数的比率相对于由所述化学式E表示的化合物，以浓度依赖性地减少(参考图6)。
以上详细说明了本发明的优选实施例，然而本发明的权利范围不限于此，利用权利要求书中所定义的本发明的基本概念的本领域技术人员的各种变形以及改良形态也属于本发明的权利范围。
Claims (8)
1.由以下化学式1-1表示的化合物或者其化妆学上可接受的盐在制备仅促进SA-β-gal未染色的人体来源皮肤细胞的生长的、用于诱导促进老化皮肤细胞周围环境变化的组合物中的用途，其中：
【化学式1-1】
在所述化学式1-1中，
R1以及R2各自独立为羟基，
R3为羧基。
2.根据权利要求1所述的用途，其中：
由所述化学式1-1表示的化合物以所述组合物总量为基准，含有0.01重量％至5重量％。
3.根据权利要求1所述的用途，其中：
所述皮肤细胞为色素形成细胞。
4.根据权利要求3所述的用途，其中：
所述组合物在SA-β-gal染色的人体来源色素形成细胞以及SA-β-gal未染色的人体来源色素形成细胞中，仅选择性地促进SA-β-gal未染色的人体来源色素形成细胞的生长。
5.根据权利要求1所述的用途，其中：
所述皮肤细胞为成纤维细胞。
6.根据权利要求5所述的用途，其中：
所述组合物在SA-β-gal染色的人体来源成纤维细胞以及SA-β-gal未染色的人体来源成纤维细胞中，仅选择性地促进SA-β-gal未染色的人体来源成纤维细胞的生长。
7.根据权利要求1所述的用途，其中：
所述组合物是仅增加SA-β-gal未染色的人体来源年轻皮肤细胞的细胞数，
将SA-β-gal染色的人体来源老化细胞的细胞数保持原样。
8.根据权利要求1所述的用途，其中：
所述组合物为化妆料组合物。
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