KR101827374B1 - 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 육두구 유래의 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 특정 비율로 병용 시 노화 및 노화 관련 질환의 예방 및 치료에 시너지 효과를 발현함으로써 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학, 식품 또는 화장료로 유용하게 적용가능한 조성물에 관한 것이다.

Description

노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 {Composition for treating, improving or preventing aging and aging-related diseases}
본 발명은 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 육두구 유래의 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
고령화 사회로 빠르게 진행되고 있는 현대 사회에서 노화 과정을 지연시키는 것은 중요한 보건 과제 중 하나이다. 우리나라의 경우 2010년에 65세 이상의 인구가 11.3%를 차지하였으며, 2050년에는 37.3%로 급증할 것으로 예상되고 있다. 이와 같은 고령화 사회에서는 질병 이환율의 상승 및 막대한 의료비 지출이 예상되며 치매 등의 노인성 질환의 급증이 사회적으로 문제가 될 것으로 예상된다.
노화가 진행되는 과정은 유전, 환경, 그리고 생활 방식의 복합적인 작용에 의해 영향을 받으며, 다양한 형태적, 생화학적 변화가 수반되는데, 특히, 산화스트레스의 증가와 염증 반응의 증가는 노화 촉진에 관여하는 주요 원인으로 여겨지고 있다. 산화스트레스는 반응성이 강한 산소 라디칼 (ROS, reactive oxygen species)의 생성 증가나 체내 항산화 방어 메커니즘의 감소로 일어나게 되는데, 그 결과 DNA 등의 생체 고분자가 파괴되고 세포 손상을 유발하여 노화를 촉진시키고, 치매를 비롯한 신경퇴행성 질환, 암, 심혈관계 질환 등의 노화 질병의 위험도를 높이게 된다.
Adler등(Adler AS, Sinha S, Kawahara TL, Zhang JY, Segal E, Chang HY. Motif module map reveals enforcement of aging by continual NF-kappaB activity. Genes Dev. 2007;21:3244-57)은 다수의 인체 조직과 실험 동물 조직에서 NF-κB 활성화 모티프(motif)와 노화과정을 조절하는 단위의 관련성을 입증하여 NF-κB로 매개되는 염증 반응과 노화 과정이 매우 밀접하게 연관되어 있음을 입증하였다. 또한, 노화는 PI3K/AKT를 활성화시키고, 이는 FOXO3를 인산화하여 ROS 생성을 억제하지 못하여 유전자 변이 등이 일어나게 됨이 알려져 있다.
한편, 육두구(Myristica fragrans)는 육두구과에 속하는 상록교목으로 수마트라, 자바에서 재배되는 높이 10-20m 정도로 자라는 자웅이주 식물이다. 과실은 난구형 육질로서 가운데에 홍색의 가종피에 둘러싸인 종자를 포함하며 종자를 육두구라 하여 사용한다. 육두구는 예로부터 소스 등 식품의 향미료로서 광범위하게 이용되어 왔고, 한방에서는 설사, 복부팽만, 구토, 식용감퇴 등의 방향성 건위제로 사용되었다.
국내등록특허 제10-0526888호
본 발명에서는 육두구로부터 다수의 리그난계 화합물을 분리하고, 이들 화합물 단독, 병용 시에 따른 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선, 치료 효과를 확인하여 최적의 효과를 발현하는 리그난계 화합물과 이들 화합물의 혼합비율을 도출함으로써, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.
이에 본 발명은 본 발명은 육두구 유래의 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 피부노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 특정 비율로 병용하여 사용함으로써 육두구 유래의 다른 리그난 화합물과 대비하여 노화 및 노화 관련 질환의 예방 및 치료에 시너지 효과를 발현함으로써 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학, 식품 또는 화장료로 유용하게 적용이 가능하다.
도 1은 본 발명의 일실시예에 따라 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1이 SA β-galactosidase 활성에 미치는 영향을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 육두구 유래 리그난계 화합물인 사우스멘틴디올(A, Saucementindiol), 테트라하이드로푸로구알락신 B(B, THFG B), 베루코신(C, Verrucosin) 및 프라그란신 C1(D, Fragransin C1) 단독 처리한 경우와 테트라하이드로푸로구알락신 B와 사우스멘틴디올 혼합물(E), 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1 혼합물(F) 및 테트라하이드로푸로구알락신 B와 베루코신 혼합물(G)을 처리한 경우에 대한 노화세포에서의 migration 분석 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따라 육두구 유래 리그난계 화합물 중 테트라하이드로푸로구알락신 B+사우스멘틴디올 혼합물, 테트라하이드로푸로구알락신 B+프라그란신 C1 혼합물 및 테트라하이드로푸로구알락신 B+베루코신 혼합물의 혼합비율에 따른 노화세포에서의 migration 분석 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따라 육두구 유래 리그난계 화합물 중 프라그란신 C1+베루코신 혼합물, 프라그란신 C1+사우스멘틴디올 혼합물, 베루코신+사우스멘틴디올 혼합물의 혼합비율에 따른 노화세포에서의 migration 분석 결과를 나타낸 도이다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.
상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 하기 화학식 1 및 하기 화학식 2로 표시된다.
[화학식 1]
Figure 112017016013171-pat00001
[화학식 2]
Figure 112017016013171-pat00002
상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 육두구로부터 추출하여 분리할 수 있다.
상기 육두구 추출물은 당업계에 공지된 추출, 분리 및 분획하는 방법에 따라 적절한 용매를 이용하여 육두구로부터 추출한 것이며, 예를 들어 육두구의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.
상기 육두구로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 상기 용매로는 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올 등을 단독 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 바람직하게, 상기 용매로는 30~50%(v/v) 에탄올, 특히 35~40%(v/v) 에탄올을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 또한 추출방법으로는 상온추출법, 열수추출법, 냉침추출법, 환류추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법이 사용될 수 있다.
상기 육두구 추출물은 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획으로도 얻을 수도 있고, 이온교환수지를 사용하여 본 발명의 유효성분인 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1이 고농도로 농축된 농축물을 얻을 수도 있다.
상기 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 병용할 경우 통상 육두구에 함유된 넥탄그린, 베루코신, 사우스멘틴디올 등의 리그난 화합물과 이들 화합물의 다른 조합과 대비하여 노화 및 노화 관련 질환에 대한 현저히 향상된 예방, 개선 및 치료 효과를 나타낸다.
특히, 상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 1:2~3의 중량비로 병용할 경우 최대의 시너지 효과를 발현하여 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 각각 단독 사용하거나, 이들 화합물을 다른 비율로 혼합 사용한 경우와 대비하여 현저히 향상된 노화 및 노화 관련 질환에 대한 예방, 개선 및 치료 효과를 나타낸다.
따라서, 본 발명의 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1는 노화 및 노화 관련 질환의 예방, 개선, 치료를 위한 약학, 식품 및 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1를 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 약학 조성물 총 중량에 대하여 0.01~95중량%로 포함되는 것이 바람직하다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 복용의 효율성이 떨어질 수 있으며, 95중량%를 초과할 경우에는 제형화에 어려움이 있을 수 있다.
한편, 본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예컨대, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 다만, 본 발명의 조성물은 피부외용제의 형태로 제공되는 것이 가장 바람직할 수 있다. 구체적으로, 액제, 연고제, 크림제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 겔제 또는 에어로졸제 등의 피부외용제의 형태로 사용될 수 있다.
또한 각각의 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경구제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 제형을 가질 수 있다. 예컨대, 해당 부위에 국부적으로 사용되는 피부외용제인 경우에는 통상적인 첨가제, 예를 들어 보존제, 의약 침투를 보조하는 용매, 연고 및 크림의 경우 연화제 등을 포함할 수 있으며, 에탄올 또는 올레일 알코올과 같은 통상적 담체를 함유할 수 있다. 해당 기술 분야에 알려진 적합한 제제는 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 최근, Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 것을 사용하는 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다.
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유 등이 있다. 상기 약학 조성물을 제제화나 제형화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로오스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 상기 성분들은 유효성분, 즉 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명은 약학 조성물은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양, 즉 치료되는 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양인 치료상 유효량으로 투여할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 대한 치료상 유효 투여량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 것임은 당업자에게 자명하다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자 등에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 예를 들어, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 구강, 심장내, 골수내, 경막내, 경피, 장관, 피하, 설하 또는 국소 투여할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학 조성물은 1~10,000㎎/㎏/일의 양으로 투여할 수 있으며, 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수 회에 나누어 투여할 수도 있다.
또한 본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 유효성분으로 포함하는 노화 및 노화 관련 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 건강기능식품, 식품 첨가제 또는 식이보조제로 사용될 수 있다.
상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1이 식품 첨가제로 사용할 경우, 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 혼합하여 사용되는 등 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
또한 상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 변경될 수 있음은 물론이며, 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~95중량%로 포함되는 것이 바람직하다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 섭취의 효율성이 떨어질 수 있으며, 95중량%를 초과할 경우에는 사용량 대비 효과 상승률이 낮아 비경제적일 수 있다.
구체적인 예로, 식품 또는 음료의 제조 시에는 본 발명의 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 원료에 대하여 15중량% 이하, 바람직하게는 10중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하여 장기간 섭취할 경우에는 상기 범위 이하의 양으로 첨가될 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 그 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료, 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물이 음료로 제조될 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등의 추가 성분을 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당 등의 모노사카라이드; 말토오스, 수크로오스 등의 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린 등의 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐 등의 합성 감미제 등이 사용될 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10중량%, 바람직하게는 0.01~0.1중량%로 포함된다.
본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있으며, 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기의 첨가제 비율은 크게 제한되지는 않으나, 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~0.1중량% 범위내로 포함되는 것이 바람직하다.
건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우, 본 발명의 식품 조성물은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 장기간 복용이 가능하다.
또한 본 발명은 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 유효성분으로 포함하는 피부노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 약학 조성물 총 중량에 대하여 0.01~95중량%로 포함되는 것이 바람직하다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 사용에 따른 효율성이 떨어질 수 있으며, 95중량%를 초과할 경우에는 제형화에 어려움이 있을 수 있다.
상기 화장료 조성물은 상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 등과 같은 통상적인 보조제 및 담체가 더 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물에는 글리세린, 부틸렌 글라이콜, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 토코페릴 아세테이트, 시트릭산, 판테놀, 스쿠알란, 소듐 시트레이트, 알란토인 등의 보조성분이 추가로 더 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 기본적으로 피부에 도포되는 것이므로, 당업계의 화장료 조성물을 참조하여 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 마스크팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 등이 포함될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄, 디메틸 에테르 등의 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로 용매, 용해화제, 유탁화제 등이 포함될 수 있고, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로 물, 에탄올, 프로필렌글리콜 등의 액상 희석제; 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 등의 현탁제; 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가, 트라칸트 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린유도체, 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.
이하에서는 실시예를 들어 본 발명에 관하여 더욱 상세하게 설명할 것이나. 이들 실시예는 단지 설명의 목적을 위한 것으로 본 발명의 보호 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.
실시예 1
실시예 1. 육두구로부터 유효성분 분리 및 확인
분쇄된 육두구 250㎎을 35%(v/v) 에탄올 수용액 500㎖에 넣어 2시간 동안 3회에 걸쳐 초음파 추출기를 사용하여 추출하였다. 상기 육두구 추출물로부터 HPLC를 이용하여 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 분리하였다.
실시예 2. SA β-galactosidase 활성
본 발명의 유효성분인 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1이 SA β-galactosidase 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 SA β-gal 활성을 측정하는 senescence assay를 진행하였다. 노화된 HDF(human dermal fibroblast)를 이용하여 SA β-gal 활성을 측정하였으며 실험에 사용할 수 있도록 10% FBS, 1% Antibiotic antimycotics를 포함한 DMEM배지에서 배양한 HDF는 6well(35㎜ dish)에 10cells/well로 분주하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양한 후 1% Antibiotic antimycotics가 포함된 DMEM을 37℃, 5% CO₂ incubator에서 4시간 처리하여 starvation 과정을 진행하였다. 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 농도에 따라 DMEM(5% FBS, 1% Antibiotic antimycotics)에 희석하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 처리하였다. 처리 후 각각의 이미지를 촬영하여 전체 세포 대비 염색된 세포 수를 확인하였으며, 노화된 세포일수록 염색된 세포의 수가 많으며 이를 대조군과 비교하여 노화 회복 정도를 확인하는 방법으로 실험을 실시하였다. 이때 비교구로 육두구로부터 분리한 사우스멘틴디올(Saucementindiol) 및 베루코신(verrucosin)을 사용하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.
실험결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 사우스멘틴디올을 제외한 테트라하이드로푸로구알락신 B(THFG B), 프라그란신 C1 및 베루코신은 대조군(무처리 노화세포, Old)과 대비하여 β-galactosidase staining이 감소되었으며, 세포 형태의 변화가 나타남을 확인할 수 있었다. 이같은 결과를 통하여 육두구 유래 리그난계 화합물 중 테트라하이드로푸로구알락신 B, 프라그란신 C1 및 베루코신은 노화 기능 회복에 관련이 있을 것임을 유추할 수 있었다.
실시예 3. Migration Assay
본 발명의 유효성분인 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 이용하여 migration 분석을 시행하였다. 실험방법은 10% FBS, 1% Antibiotic antimycotics를 포함한 DMEM 배지에서 배양한 노화된 HDF를 24well에 3× 10⁴cells/well로 분주하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양한 후 1% Antibiotic antimycotics가 포함된 DMEM을 37℃, 5% CO₂ incubator에서 4시간 동안 처리하여 starvation 과정을 진행하였다. 육두구 유래 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1을 농도에 따라 DMEM(5% FBS, 1% Antibiotic antimycotics)에 희석하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24, 48시간 동안 처리하였으며, 처리 후 각각의 이미지를 촬영하여 세포의 migration 및 회복을 확인하였다. 동일한 처리 구간에서 세포 생장을 cell counting을 통해 확인하고, 이를 계산하여 대조군인 노화된 HDF와 대비하여 육두구 유래 소재를 처리하였을 경우의 세포 회복에 영향이 있는지를 확인하였으며, 그 결과를 도 2 내지 4에 나타내었다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 48시간 migration assay를 실시하였을 때 대조군의 경우에는 어린세포(young)에 비해 노화세포(old)가 기본적으로 회복이 되지 않음을 확인할 수 있었다. 한편, 실험군의 경우에는 사우스멘틴디올(A), 테트라하이드로푸로구알락신 B(B, THFG B), 베루코신(C) 및 프라그란신 C1(D)을 처리한 군은 아무것도 처리하지 않은 대조군에 비해 migration이 일어남을 확인할 수 있었으며, 테트라하이드로푸로구알락신 B, 프라그란신 C1, 베루코신 및 사우스멘틴디올 순으로 migration 효율이 좋게 나타남을 확인할 수 있었다. 또한 육두구 유래 리그난계 화합물을 2종씩 혼합하여 migration assay한 결과, 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1 혼합물(F), 테트라하이드로푸로구알락신 B와 베루코신 혼합물(G) 및 테트라하이드로푸로구알락신 B와 사우스멘틴디올 혼합물(E)의 조합이 순서에 따라 migration 효율이 우수하게 나타남을 확인할 수 있었으며, 특히 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1 혼합물(F)의 migration 효율이 가장 우수함을 알 수 있었다.
상기 도 2의 육두구 유래 리그난계 화합물 중 2종 혼합물 간의 혼합비율을 결정하기 위하여 각 성분을 단독으로 사용한 경우와, 혼합물 간에 혼합비율을 각각 달리한 경우에 대하여 노화세포의 migration 정도를 비교하여 그 결과를 도 3에 나타내었다. 테트라하이드로푸로구알락신 B(THFG B)와 프라그란신 C1, 베루코신, 사우스멘틴디올간의 혼합물은 1:0.5, 1:1, 1:2, 1:3의 혼합비율로 처리한 후 노화세포의 migration 정도를 비교하였다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 각각 단독으로 처리한 경우와 테트라하이드로푸로구알락신 B+프라그란신 C1 혼합물(T:F)을 1:0.5, 1:1, 1:2 및 1:3의 농도로 처리한 경우 노화세포의 migration 정도는 혼합비율이 1:0.5의 농도와 대비하여 1:1, 1:2 및 1:3의 농도순으로 migration 정도가 좋게 나타났으며, 1:2 및 1:3의 농도에서는 migration 정도가 월등히 우수함을 확인할 수 있었다. 한편, 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1 각각 단독으로 처리했을 경우에는 유의적인 차이가 그리 크지 않았다.
테트라하이드로푸로구알락신 B+베루코신 혼합물(T:V)의 경우 혼합비율이 1:2인 경우와 대비하여 1:3인 경우 migration 효율이 우수하게 나타났으며, 혼합비율이 1:0.5, 1:1 및 1:2인 경우 테트라하이드로푸로구알락신 B와 베루코신 각각 단독으로 처리한 경우와 대비하여 유의적인 차이가 없었다.
또한 테트라하이드로푸로구알락신 B+사우스멘틴디올 혼합물(T:S)의 경우 혼합비율이 1:0.5인 경우와 대비하여 1:1, 1:2 및 1:3인 경우 농도순으로 migration 정도가 유의적으로 좋았으나, 하이드로프로구아이아신 B를 단독으로 처리한 경우와 대비하여 유의적 변화가 없었다.
상기와 같은 결과로부터, 테트라하이드로푸로구알락신 B, 프라그란신 C1, 베루코신 및 사우스멘틴디올을 각각 단독으로 처리하거나, 상기 성분들을 병용하여 처리함에 있어 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 병용하는 것이 노화 기능 회복에 있어 최대의 효과가 있음을 확인할 수 있었으며, 특히 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 1:2~3의 비율로 혼합할 경우 최대, 최적의 노화 회복의 효과가 있음을 알 수 있었다.
한편, 상기 도 3의 혼합물 이외에 다른 조합의 혼합물의 경우 migration을 확인하기 위하여, 프라그란신 C1+베루코신 혼합물, 프라그란신 C1+사우스멘틴디올 혼합물, 베루코신+사우스멘틴디올 혼합물을 각각 1:0.5, 1:1, 1:2 및 1:3의 농도로 처리한 후 48시간 후 노화세포에서의 migration 정도를 비교하였다.
그 결과 도 4에 나타낸 바와 같이 프라그란신 C1+베루코신 혼합물의 경우 베루코신을 단독 처리한 것에 비해 1:0.5, 1:1, 1:2 및 1:3 순으로 농도의존적으로 migration 정도가 유의적으로 좋았으나, 프라그란신 C1 단독처리한 것에 비해 유의적인 변화가 나타나지 않았다. 또한 프라그란신 C1+사우스멘틴디올 혼합물의 경우 사우스멘틴디올을 단독 처리한 것에 비해 1:0.5, 1:1, 1:2 및 1:3 순으로 농도의존적으로 migration 정도가 유의적으로 좋았으며, 프라그란신 C1 단독처리한 것에 비해 1:2 및 1:3 으로 처리한 것이 migration 정도가 유의적으로 증가하였다. 그러나 프라그란신 C1은 사우스멘틴디올보다 월등히 migration 정도가 높게 나타났다.
뿐만 아니라, 베루코신+사우스멘틴디올 혼합물의 경우 사우스멘틴디올 단독 처리한 것에 비해 혼합비율 1:0.5, 1:1, 1:2 및 1:3의 순으로 농도의존적으로 migration 정도가 유의적으로 좋았으며, 베루코신 단독처리한 것에 비해 1:1, 1:2 및 1:3 으로 처리한 것이 migration 정도가 유의적으로 증가하였다.
이상과 같은 결과로부터, 육두구 유래 리그난계 화합물 중 테트라하이드로푸로구알락신 B, 프라그란신 C1, 베루코신 및 사우스멘틴디올은 각각 단독 처리할 경우와 대비하여 혼합처리할 경우 migration 효율이 우수하게 나타남을 알 수 있었으며, 특히 여러 조합들 중 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 혼합 처리할 경우 migration 효율이 가장 우수하였으며, 특히 이들 혼합 처리 시 테트라하이드로푸로구알락신 B와 프라그란신 C1을 1:2~3의 비율로 처리할 경우 최대의 migration 효율을 나타냄을 확인할 수 있었다.
제제예 1. 약학 제제의 제조
산제 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 20㎎, 유당 100㎎ 및 탈트 10㎎을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
정제 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 10㎎, 옥수수전분 100㎎, 유당 100㎎ 및 스테아린산 마그네슘 2㎎을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
캡슐제 제조
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 10㎎, 결정성 셀룰로오스 3㎎, 락토오스 14.8㎎ 및 마그네슘 스테아레이트 0.2㎎을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
주사제 제조
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1앰플당(2mL) 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 10㎎, 만니톨 180㎎, 주사용 멸균 증류수 2,974㎎ 및 Na2HPO4 2H2O 26㎎으로 제조하였다.
액제 제조
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 20㎎, 이성화당 10g 및 만니톨 5g을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합하였다. 그 다음 정제수를 더 가하여 전체 100mL로 조절한 후 갈색병에 충진하고 멸균시켜 액제를 제조하였다.
제제예 2. 식품 제제의 제조
건강식품 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 100㎎, 비타민 혼합물 적량, 비타민 A 아세테이트 70g, 비타민 E 1.0㎎, 비타민 B1 0.13㎎, 비타민 B2 0.15㎎, 비타민 B6 0.5㎎, 비타민 B12 0.2g, 비타민 C 10㎎, 비오틴 10g, 니코틴산아미드 1.7㎎, 엽산 50g, 판토텐산 칼슘 0.5㎎, 무기질 혼합물 적량, 황산제1철 1.75㎎, 산화아연 0.82㎎, 탄산마그네슘 25.3㎎, 제1인산칼륨 15㎎, 제2인산칼슘 55㎎, 구연산칼륨 90㎎, 탄산칼슘 100㎎ 및 염화마그네슘 24.8㎎을 혼합한 다음, 과립을 제조하고 통상의 방법에 따라 건강식품을 제조하였다. 이때, 상기 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
건강음료 제조
통상의 건강음료 제조방법에 따라 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 100㎎, 비타민 C 15g, 비타민 E(분말) 100g, 젖산철 19.75g, 산화아연 3.5g, 니코틴산아미드 3.5g, 비타민 A 0.2g, 비타민 B1 0.25g, 비타민 B2 0.3g 및 정량의 물을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하여 건강음료를 제조하였다. 이때, 상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 3. 화장료 제제의 제조
유연화장수 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 0.5중량%, 1,3-부틸렌글리콜 5.2중량%, 올레일알코올 15중량%, 에탄올 3.2중량%, 폴리솔베이트 20 3.2중량%, 벤조페논-9 2.0중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0중량%, 글리세린 3.5중량%, 미량의 향과 방부제 및 잔량의 정제수를 혼합하여 통상의 방법으로 유연화장수를 제조하였다.
밀크로션 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 0.6중량%, 글리세린 5.1중량%, 프로필렌글리콜 4.2중량%, 토코페릴아세테이트 3.0중량%, 유동파라핀 4.6중량%, 트리에탄올아민 1.0중량%, 스쿠알란 3.1중량%, 마카다미아너트오일 2.5중량%, 폴리솔베이트 60 1.6중량%, 솔비탄세스퀴롤레이트 1.6중량%, 프로필파라벤 0.6중량%, 카르복실비닐폴리머 1.5중량%, 미량의 향과 방부제 및 잔량의 정제수를 혼합하여 통상의 방법으로 밀크로션을 제조하였다.
영양크림 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 1.0중량%, 글리세린 4.0중량%, 바셀린 3.5중량%, 트리에탄올아민 2.1중량%, 유동파라핀 53중량%, 스쿠알란 3.0중량%, 밀납 2.6중량%, 토코페릴아세테이트 5.4중량%, 폴리솔베이트 60 3.2중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 3.1중량%, 미량의 향과 방부제 및 잔량의 정제수를 혼합하여 통상의 방법으로 영양크림을 제조하였다.
제조예 4. 마사지크림 제조
테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1의 혼합물(1:2중량비) 0.5중량%, 글리세린 4.0중량%, 바셀린 3.5중량%, 트리에탄올아민 0.5중량%, 유동파라핀 24.0중량%, 스쿠알란 3.0중량%, 밀납 2.1중량%, 토코페릴아세테이트 0.1중량%, 폴리솔베이트 60 2.4중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 2.3중량%, 미량의 향과 방부제 및 잔량의 정제수를 혼합하여 통상의 방법으로 마사지크림을 제조하였다.
비록 본 발명이 상기에 언급된 바람직한 실시예로서 설명되었으나, 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다양한 수정이나 변형을 하는 것이 가능하다. 또한 첨부된 청구 범위는 본 발명의 요지에 속하는 이러한 수정이나 변형을 포함한다.

Claims (5)

  1. 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)이 1:2~3의 중량비로 함유되는 것을 유효성분으로 하여, SA β-galactosidase(senescence-associated β-galactosidase) 발현을 억제시키는 것을 특징으로 하는 피부노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 테트라하이드로푸로구알락신 B 및 프라그란신 C1은 육두구를 35~40%(v/v) 에탄올로 추출하여 분리한 것인 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 유효성분은 사람 피부 섬유아세포(human dermal fibroblast)의 SA β-galactosidase(senescence-associated β-galactosidase) 발현을 억제시키고 세포이동(cell migration)을 촉진하는 것인 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 유연 화장수, 밀크로션, 영양크림 또는 마사지크림의 제형을 갖는 것인 화장료 조성물.
  5. 테트라하이드로푸로구알락신 B(tetrahydrofurogualacin B) 및 프라그란신 C1(fragransin C1)이 1:2~3의 중량비로 함유되는 것을 유효성분으로 하여, SA β-galactosidase(senescence-associated β-galactosidase) 발현을 억제시키는 것을 특징으로 하는 피부노화 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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Legal Events

Date Code Title Description
J301 Trial decision

Free format text: TRIAL NUMBER: 2017101005094; TRIAL DECISION FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20171020

Effective date: 20180110

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