CN114712346A - 一种山楂多酚、山楂多糖或组合物在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种山楂多酚、山楂多糖或组合物在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用。所述的山楂多酚具有式I所示的结构；所述的山楂活性多糖为分子量在3～5kD之间的山楂多糖；所述的组合物包含山楂多糖和山楂多酚，其中山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.01～0.1。研究表明，所述的山楂活性多糖及山楂多酚组合物具有非常优异的降脂减肥作用；因此，将其作为活性成分可以用于制备具有降脂减肥作用的食品或药物。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种山楂多酚、山楂多糖或组合物在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用。
背景技术
肥胖，一定程度的明显超重与脂肪层过厚，尤其是甘油三酯积聚过多而导致。随着人们生活质量及生活方式明显改变，而肥胖症的发病率高、增长态势也越发明显，肥胖是由于食物摄入过多或机体代谢的改变而导致体内脂肪积聚过多造成的，是大部分代谢类慢性病的促病因素。研究发现，肥胖者更易罹患高血脂、高血压等病症。除了改变生活方式、控制饮食、运动、药物和手术等，临床上尝试过使用多种药物用于治疗肥胖(如甲状腺提取物、2-硝基苯酚和苯丙胺)，但疗效与安全性均不理想。
山楂别名山里果以及山里红，其具有降血脂、血压、强心、抗心律不齐等作用。但目前，现有技术对于山楂中的降血脂以及减肥成分研究不够深入。因此，从山楂中开发出具有优异效果的降血脂以及减肥作用的有效成分，具有重要的应用价值。
发明内容
鉴于此，本发明提供了一种山楂多酚、山楂多糖以及组合物；研究表明，所述的山楂多酚、山楂多糖或组合物具有优异的降血脂以及减肥作用。
本发明的技术方案如下：
本发明首先提供了一种山楂多酚在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用，所述的山楂多酚具有式I所示的结构：
发明人在对山楂的研究中惊奇的发现，式I所示结构的山楂多酚能够显著降低肥胖模型小鼠血清中的血脂含量，具有明显的降血脂以及减肥作用。
本发明还提供了一种山楂活性多糖在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用，所述的山楂活性多糖为分子量在3～5kD之间的山楂多糖。
发明人在进一步研究中发现，分子量在3～5kD之间的山楂多糖同样具有一定的降血脂以及减肥作用。
本发明还提供一种组合物，其包含山楂多糖和山楂多酚。
优选地，所述的山楂活性多糖为分子量在3～5kD之间的山楂多糖；所述的山楂多酚具有式I所示的结构：
优选地，山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.01～0.1。
最优选地，山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.05。
发明人在研究中惊奇地发现：将山楂多酚和分子量在3～5kD之间的山楂多糖组合后，其降血脂作用要显著高于单独的山楂多酚和分子量在3～5kD之间的山楂多糖，其降血脂作用得到了进一步加强；这是由于山楂多酚和分子量在3～5kD之间的山楂多糖之间可以产生协同降血脂作用的缘故。值得说明的是，发明人在研究中还发现，山楂多酚和其它分子量的山楂多糖组合后，其降血脂作用并不能得到进一步加强，这说明山楂多酚和其它分子量的山楂多糖组合后并不能体现协同作用。
本发明还提供了一种上述组合物在制备具有降血脂作用的药物或食品中的应用。
本发明还提供了一种上述组合物在制备具有减肥作用的药物或食品中的应用。
有益效果：本发明首次提供了式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3～5kD之间的山楂多糖在降血脂和减肥方面的新的应用；尤其是，将式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3～5kD之间的山楂多糖组合后得到的组合物，其具有十分优异的降血脂和减肥作用，其降血脂和减肥作用还要显著好于单独的山楂多酚以及分子量在3～5kD之间的山楂多糖。此外，进一步实验研究表明，所述的山楂多酚、分子量在3～5kD之间的山楂多糖以及组合对动物无明显损害，未发现对机体产生的毒性反应，是一种安全可靠的药物
附图说明
图1为式I所示结构的山楂多酚的质谱图。
图2为式I所示结构的山楂多酚的1H-NMR谱图。
图3为式I所示结构的山楂多酚的13C-NMR谱图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1山楂多酚的制备
取新鲜山楂(10kg)，充分粉碎后，经50％乙醇于室温下浸渍提取，减压浓缩得粗提物(1.12kg)。将所得粗提物加适量水进行混悬，并依次用体积比约3:1的乙酸乙酯进行萃取，减压回收得乙酸乙酯萃取物(0.39kg)。
取乙酸乙酯萃取部位浸膏250g进行硅胶柱层析(200～300目，2kg)，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱(100:0→0:100)后得5个馏分(Fr.A～E)。基于构建的小鼠肥胖模型评价不同馏分(Fr.A～E)的降脂减肥活性。将具有最佳降脂减肥活性组分Fr.C(36g)再次经硅胶柱层析(300～400目，700g)，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱后得4个子馏分(Fr.Cs1～Fr.Cs4)。基于构建的小鼠肥胖模型评价不同馏分(Fr.Cs1～Fr.Cs4)的降脂减肥活性。将具有最佳降脂减肥活性组分Fr.Cs4再次经对经ODS柱层析(采用体积分数为15％的甲醇水溶液洗脱)后得含量最多化合物，经鉴定为具有式I所示结构的山楂多酚。
式I所示结构的山楂多酚的结构解析如下：化合物为黄色粉末；高分辨质谱[HR-ESI-MS m/z:399.1421[M+H]+(calcd for C20H24NaO7,399.1414)]确定分子式为C20H24O7，不饱和度为9。
1H NMR谱(500MHz,CDCl3)中显示3个羟基质子信号[δH 13.9,10.5,8.76(1H,s)]，2个不饱和质子信号[δH 6.10,5.95(1H,s)]，1个甲氧基信号[δH 3.99(3H,s)]及1个特征亚甲基信号[δH 3.61(2H,s)]。13C NMR谱(125MHz,CDCl3)中显示20个碳原子信号，结合其DEPT-135分析，可分别归属为10个季碳、2个次甲基、5亚甲基及3个甲基。
表1山楂多酚1D and 2D NMR数据(δin ppm,J in Hz)
有上述数据可知所述的化合物为二环间苯三酚类结构，进一步解析该化合物的2DNMR数据，发现其特征亚甲基信号H-7′(δH 3.61)分别与两个结构片段中的C-1(δC 104.6)/C-2(δC 159.8)和C-1′(δC 102.2)/C-2′(δC 170.0)/C-6′(δC 167.2)有HMBC远程相关。所以，化合物的结构得到鉴定，为式I所示结构的山楂多酚。
实施例2山楂多糖的制备
(1)取500g山楂粉，然后加入4L的水进行加热回流提取2h，提取结束后将提取液浓缩至1L；接着加入体积分数为95％的乙醇，使得提取液中乙醇的最终体积分数为70％，静置6h后，过滤，取固体得山楂多糖；
(2)将得到的山楂多糖，加入1000g的水溶解得山楂多糖水溶液；然后用孔径为10kD的透析袋进行透析得透析液和截留液，将截留液浓缩冻干后得分子量＞10kD的山楂多糖；
(3)将步骤(2)得到的透析液用孔径为5kD的透析袋进行透析得透析液和截留液，将截留液浓缩冻干后得分子量在5kD～10kD之间的山楂多糖；
(4)将步骤(3)得到的透析液用孔径为3kD的透析袋进行透析得透析液和截留液，将截留液浓缩冻干后得分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖；
(5)将步骤(4)得到的透析液用孔径为1kD的透析袋进行透析得透析液和截留液，将截留液浓缩冻干后得分子量在1kD～3kD之间的山楂多糖；将透析液浓缩冻干后得分子量＜1kD的山楂多糖。
实施例3组合物的制备
取实施例1所述的式I所示结构的山楂多酚以及按实施例2所述方法制备得到的分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖混合均匀，然后加去离子水调成固含量为8％的浆状液体，再经冻干后即得所述的组合物；
其中，分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.05。
实验例1降脂减肥活性评价
高脂肥胖模型小鼠模型构建方法：取SPF级6周龄16-20g雄性C57BL/6雄性小鼠；适应性饲养5天后，小鼠喂食高脂肥胖模型饲料(TP23300型60％高脂肥胖模型饲料)诱导肥胖模型，肥胖模型饲料喂养第4周(第28天)，构建高脂肥胖模型小鼠。
取高脂高糖肥胖模型小鼠随机分为4组(每组10只)，分别为模型组、山楂多糖组(给药分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖)、山楂多酚组(给药式I所示结构的山楂多酚)、组合物组(给药实施例3制备得到的组合物)继续喂食高脂肥胖模型饲料。另外取10只正常小鼠喂食正常饲料作为空白组对照。将待药物按2.0mg/mL溶于水中，各给药组按150mg/(kg·d)的给药剂量给药进行灌胃给药；空白组和模型组分别灌胃等量的水。连续给药5周后，所有小鼠禁食12h后，异氟烷麻醉，经眼眶静脉丛采血，4000rpm离心分取血清，按试剂盒说明书方法测定血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白固醇、高密度脂蛋白固醇的含量。实验结果见表2和表3。
表2山楂多糖、山楂多酚以及组合物对肥胖模型小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶的影响
*，相比于肥胖模型组，p＜0.05，**，相比于肥胖模型组，p＜0.01；#，相比于空白组组，p＜0.05，##，相比于空白组，p＜0.01。
由表2实验数据可以看出，肥胖模型组小鼠的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶水平均高于正常饮食小鼠(p＜0.01)。实施例3由式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖组合后形成的组合物能够显著降低小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶水平(p<0.01)，且活性优于单独的式I所示结构的山楂多酚以及单独的分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖。
表3山楂多糖、山楂多酚以及组合物对肥胖模型小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白固醇、高密度脂蛋白固醇的影响
*，相比于肥胖模型组，p＜0.05，**，相比于肥胖模型组，p＜0.01；#，相比于空白组组，p＜0.05，##，相比于空白组，p＜0.01。
由表3实验数据可以看出，高脂高糖肥胖模型饲料喂养小鼠与对照饲料喂养的正常小鼠甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白固醇等脂质水平显著增加(p<0.05)。
而式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖能够显著降低模型组小鼠血清中的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白固醇水平；这说明式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖具有明显的降血脂以及减肥作用。
此外，实施例3由式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖组合后形成的组合物，其对模型组小鼠血清中小鼠血清中的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白固醇的降低程度要显著高于单独的式I所示结构的山楂多酚或单独的分子量在3kD～5kD之间的山楂多糖；具有更加优异的降血脂以及减肥作用。这说明式I所示结构的山楂多酚以及分子量在3kD～5kD之间的山楂多组合后可以产生协同的降血脂以及减肥作用。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
Claims (8)
1.一种山楂多酚在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用，其特征在于，所述的山楂多酚具有式I所示的结构：
2.一种山楂活性多糖在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用，其特征在于，所述的山楂活性多糖为分子量在3～5kD之间的山楂多糖。
3.一种组合物，其特征在于，包含山楂多糖和山楂多酚。
4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述的山楂活性多糖为分子量在3～5kD之间的山楂多糖；所述的山楂多酚具有式I所示的结构：
5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.01～0.1。
6.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，山楂多糖和山楂多酚的质量比为1:0.05。
7.权利要求3～6任一项所述的组合物在制备具有降血脂作用的药物或食品中的应用。
8.权利要求3～6任一项所述的组合物在制备具有减肥作用的药物或食品中的应用。
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