CN114634896A - 一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 - Google Patents
一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114634896A CN114634896A CN202210362788.5A CN202210362788A CN114634896A CN 114634896 A CN114634896 A CN 114634896A CN 202210362788 A CN202210362788 A CN 202210362788A CN 114634896 A CN114634896 A CN 114634896A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- brevundimonas diminuta
- tetrabromobisphenol
- beef extract
- degradation
- brevundimonas
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A62—LIFE-SAVING; FIRE-FIGHTING
- A62D—CHEMICAL MEANS FOR EXTINGUISHING FIRES OR FOR COMBATING OR PROTECTING AGAINST HARMFUL CHEMICAL AGENTS; CHEMICAL MATERIALS FOR USE IN BREATHING APPARATUS
- A62D3/00—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances
- A62D3/02—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances by biological methods, i.e. processes using enzymes or microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A62—LIFE-SAVING; FIRE-FIGHTING
- A62D—CHEMICAL MEANS FOR EXTINGUISHING FIRES OR FOR COMBATING OR PROTECTING AGAINST HARMFUL CHEMICAL AGENTS; CHEMICAL MATERIALS FOR USE IN BREATHING APPARATUS
- A62D2101/00—Harmful chemical substances made harmless, or less harmful, by effecting chemical change
- A62D2101/20—Organic substances
- A62D2101/28—Organic substances containing oxygen, sulfur, selenium or tellurium, i.e. chalcogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/30—Organic compounds
- C02F2101/34—Organic compounds containing oxygen
- C02F2101/345—Phenols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/30—Organic compounds
- C02F2101/36—Organic compounds containing halogen
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Business, Economics & Management (AREA)
- Emergency Management (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚A的应用。本发明中的缺陷短波单胞菌分离于四溴双酚A废水生物处理反应器中,得到一株对四溴双酚A具有优势降解能力的缺陷短波单胞菌,将其命名为TB‑1菌,已于2022年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2022366。该菌株具有较强的四溴双酚A降解能力;能够以四溴双酚A为唯一营养来源进行代谢;同时该菌株活力高,培养方法简单,可直接应用于对四溴双酚A污染物的生物修复;具有良好前景。
Description
技术领域
本发明涉及的是环境微生物学研究领域,具体涉及的是一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚A的应用。
背景技术
四溴双酚A分子结构中的羟基和溴基团易与高分子材料反应,常作为反应型阻燃剂,广泛应用于印刷线路板、电子元器件中,且可作为添加型阻燃剂应用于纺织、塑料、造纸、电子设备等领域。四溴双酚A的大量生产与使用使其部分释放到环境中,对水、空气、土壤都造成了严重的污染。且因具有生物富集性,常通过呼吸作用、暴露途径、食物链等在人类和动物体内积累。
处理四溴双酚A污染的方法主要有物理、化学和生物法。物理法仅对污染物进行转移而不能彻底去除,且易对环境产生二次污染;化学法处理成本昂贵且处理过程中伴随有毒副产物的产生;生物法降解四溴双酚A成本低、高效、不产生二次污染,具有良好的降解四溴双酚A的应用前景。
降解四溴双酚A的微生物主要有细菌、真菌和原生生物。其中参与降解的真菌主要有白腐真菌,细菌主要有假单胞菌属、苍白杆菌属,参与降解的原生生物有甲基杆菌。目前可用于降解四溴双酚A的假单胞菌属处理四溴双酚A时存在两种问题:处理时间长及可降解四溴双酚A的浓度较低。如:当苍白杆菌降解2mg/L的四溴双酚A时,84h后的降解率为96.2%,可降解的四溴双酚A浓度低且降解时间长。因此,筛选具有高效降解四溴双酚A能力的微生物至关重要。
发明内容
本发明目的在于提供一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚A的应用。
为实现上述目的,本发明采用技术方案为:
一株缺陷短波单胞菌,该缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta)的保藏编号为CCTCC M 2022366;已于2022年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号,邮编:430072;电话:(027)-6875 2319。
一种培养缺陷短波单胞菌的方法,所述的缺陷短波单胞菌为权利要求1所述的缺陷短波单胞菌;挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
本发明所述的缺陷短波单胞菌用于降解四溴双酚A的应用。
可选的,缺陷短波单胞菌降解水中四溴双酚A包括:接种生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液于水中,降解温度25~33℃,降解转速150~210r/min。
优选的,所述的降解温度为31℃,降解转速150r/min。
进一步的,生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液的培养方法包括:挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;
牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
本发明所述的缺陷短波单胞菌用于制备生物降解剂的应用,所述的生物降解剂用于降解四溴双酚A。
可选的,生物降解剂降解水中四溴双酚A包括:接种生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液于水中,降解温度25~33℃,降解转速150~210r/min。
进一步的,所述的降解温度为31℃;
生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液的培养方法包括:挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
一种生物降解剂,所述的生物降解剂中含有本发明所述的缺陷短波单胞菌和/或其次生代谢产物;所述的生物降解剂用于降解四溴双酚A。
本发明具有以下有益效果:
a.本发明首次从处理四溴双酚A的生物反应器中分离筛选出具有高效降解四溴双酚A能力的缺陷短波单胞菌。
b.本发明的缺陷短波单胞菌降解四溴双酚A的能力强且降解时间短,在四溴双酚A浓度为50mg/L时,降解96h后的降解率可达56.095%。
c.本发明的缺陷短波单胞菌对四溴双酚A的耐受能力强,可耐受四溴双酚A的最大浓度为1000mg/L。
附图说明
附图是用来提供对本公开的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与下面的具体实施方式一起用于解释本公开,但并不构成对本公开的限制。在附图中:
图1是本发明的缺陷短波单胞菌TB-1的菌落形态;
图2是本发明的缺陷短波单胞菌TB-1菌体形态电镜图;
图3是本发明与有效种之间构建的系统发育树;
图4是本发明随时间对50mg/L四溴双酚A的降解率;
图5是本发明对不同浓度四溴双酚A耐受度的研究。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方案做进一步说明,但本发明的实施方案不仅限于此:
本发明的缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1分离于处理四溴双酚A的生物反应器中,具有高效降解四溴双酚A的能力,其优势在于可耐受高浓度的四溴双酚A环境且生物降解时间短。目前为止,还未见筛选出具有高效降解四溴双酚A能力的缺陷短波单胞菌。该缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta)的保藏编号为CCTCC M 2022366;已于2022年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号,邮编:430072;电话:(027)-6875 2319。
本发明的缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1能够降解环境中的四溴双酚A,不限于土壤、水体等环境中的四溴双酚A。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌种收集:于处理四溴双酚A的生物反应器中,收集该系统中的固定化生物膜,并经超声震荡将生物膜上的微生物收集于无菌水中,得菌悬液。
处理四溴双酚A的生物反应器为铜绿假单胞菌NY3降解四溴双酚A模拟废水的序批式好氧生物反应器(陕西西安,西安建筑科技大学实验室),具体为:在序批式好氧生物反应器中,加入适量的溴双酚A模拟废水,以葡萄糖为共代谢碳源,将铜绿假单胞菌NY3固定化生物膜置于反应器中,进行四溴双酚A的降解。其中,四溴双酚A的浓度为50mg/L,铜绿假单胞菌NY3固定化生物膜的接种量为1.44g固定化载体/100mL溴双酚A模拟废水。待反应器运行结束后,取出生物膜,经超声震荡将生物膜上的微生物收集于无菌水中,得菌悬液。然后将菌悬液涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基,分离纯化后获得TB-1菌。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌种分离:取上述菌悬液,经梯度稀释后涂布于牛肉膏固体培养基上,稀释浓度梯度为10-1,10-2,10-3.....,10-7,每个浓度梯度涂布三个平行样品,于37℃恒温箱中倒置培养,待平板长出菌落后(一般10-5或10-6稀释浓度的平板单菌落分布较好),根据菌落的形态、大小和颜色挑取不同的单菌落。
其中,牛肉膏培养基的配置为:5g/L Nacl、10g/L酵母浸粉、3g/L牛肉膏,加热溶解培养基之后待其冷却,用6mol/L NaOH调其pH为7.8后,加琼脂15g/L,于高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌30min备用。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌种纯化:挑取分离的不同类型单菌落,在牛肉膏固体培养基平板上采用平板划线法划线培养,于37℃恒温箱中倒置培养24h,如此反复转接,直至获得纯化的单菌落。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌落形态观察:将纯化的TB-1单菌落转接于牛肉膏液体培养基中,置于31℃、150r/min的恒温水浴摇床过夜生长,待其OD600nm值为1.6~1.8,采用稀释涂布法,吸取TB-1菌的不同浓度梯度的悬浊液100μL到牛肉膏固体培养基上,经均匀涂布至培养基完全吸收后,倒置放于37℃恒温培养箱,于24h后观察平板上菌落生长情况发现:TB-1菌的菌落呈现圆形、透亮、白绿色、生长密集、边缘整齐、表面湿润、点状大小,直径约0.5mm。其中,牛肉膏液体培养基配置方法同上述固体培养基,不加琼脂即可。具体菌落形态见图1。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌体形态观察:取TB-1菌种子液50mL,进行固定及梯度脱水预处理后,使用扫描式电子显微镜(SEM)观察菌体形态特征发现,具体见图2:TB-1菌的菌体呈现为细杆状,大小约2~2.5×0.2~0.4μm。
其中,种子液脱水程序如下:10000r/min,4℃冷冻离心后去其上清收集菌体后,将收集菌体置于4%戊二醛溶液中制成菌悬液,4℃冰箱浸泡过夜以进行固定;将上述菌体收集并均匀分散于0.2M的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中,于恒温振荡器150r/min震荡15min,以相同方法漂洗样品3次;使用不同浓度的乙醇(50%、70%、80%、90%和95%)对样品梯度脱水,每次均匀分散以后静置15min,最后用100%浓度的乙醇处理两次,每次20min;将脱水后的菌体浸泡于醋酸异戊酯中,置于4℃冰箱保存过夜后置于临界点干燥仪(K850)中干燥,备用。将该制备样品于电流20mA的溅射仪上喷金60s,即可用扫描式电子显微镜观察微生物的菌体结构。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌的分子生物学鉴定:经细菌基因组提取DNA试剂盒提取TB-1菌的基因组DNA,送至上海生工生物工程有限公司测序后获得其16S rDNA序列,将该基因序列与Genbank中已登录的基因序列进行比对分析发现:TB-1菌与Brevundimonas diminuta JCM 2788相似性最高,为100%。由此可得知TB-1菌为缺陷短波单胞菌属。
缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta)TB-1的16S rDNA序列如下所示:
上海生工生物工程有限公司,PatentIn version 3.5;缺陷短波单胞菌(Brevundimonas sp.)。
图3中发育树的做法包括:将TB-1菌的16Sr DNA序列输入NCBI GenBank中,经BLAST比对,确定其在属水平的分类;然后从bacterio网站(http://www.bacterio.cict.fr/)查找其属水平的所有“种”的模式菌株,根据菌株号或网站已提供的该种的登录号,下载所有模式菌株的16Sr RNA序列,并下载临近属的一个模式菌株的16SrRNA序列作为外源序列。导入所有序列后,以clustalX 1.83进行序列对比,然后采用mega 4.0NJ法构建进化树,确定TB-1菌的分类地位。
结论:由图3的发育树可知,TB-1菌为缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta。
测定缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1菌主要的生理生化特征发现其:革兰氏阴性菌,不水解明胶,不含有脲酶、酯酶及淀粉水解酶,含氧化酶、接触酶,产吲哚,在半固体牛肉膏培养基上穿刺接种运动阴性。将上述各项理化性质与常见细菌系统鉴定手册中的缺陷短波单胞菌进行比较,结合分子生物学鉴定结果,可确定所分离的TB-1菌为Brevundimonas diminuta种,命名为Brevundimonas diminuta TB-1。
缺陷短波单胞菌Brevundimonas diminuta TB-1降解四溴双酚A的能力探究:无菌条件下以10%接种量转接生长至对数期的TB-1菌种子液于无机盐培养基中,添加四溴双酚A使其体系浓度为50mg/L,置于31℃、150r/min的恒温水浴摇床,分别测定降解体系相应时间点的降解率;
用接种环从牛肉膏蛋白胨的固体平板培养基上挑取TB-1单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,将其置于31℃,150±10r/min的恒温水浴摇床中震荡,待其生长至OD600nm为1.6-1.8,即得黏质沙雷氏菌种子液。
牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
牛肉膏蛋白胨固体平板培养基的制备方法:NaCl 5g/L,蛋白胨10g/L,牛肉膏3g/L,将其溶于适量蒸馏水中,煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH溶液调节pH为7.8后,加入琼脂15g/L,于121℃,高温高压灭菌15min后,制备牛肉膏蛋白胨固体平板。
其中,无机盐培养基的配备:NH4NO3 1g/L,磷酸盐缓冲液25mL/L,MgSO4·7H2O(1M,246.47g/L)0.5mL,CaCl2·2H2O(1M,147.01g/L)0.1mL,微量元素1mL,蒸馏水定容至1L。磷酸盐缓冲液:NaH2PO4·2H2O:42.9g/L;K2HPO4·3H2O:42.9g/L,蒸馏水定容至1L,用NaOH颗粒调pH至8.0。微量元素:ZnSO4·7H2O 0.148g;MnSO4·H2O 0.258g;NiSO4·6H2O 0.022g;CoCl2·6H2O 0.024g;CuCl2·2H2O 0.013g;H3BO3 0.062g;Na2MoO4·2H2O 0.10g;FeSO4·7H2O 4.5g,蒸馏水定容至1L。
通过图4中的测试结果,发现24及96h的降解率分别为:34.728%、47.661%。
目前已发现的降解四溴双酚A的菌株如下:
厌氧条件下:1.链球菌属在1d内对四溴双酚A(0.5mg/L)的降解率为71.6%,其降解率较好但污染物四溴双酚A的浓度过低;2.丛毛单胞菌属在10d后对四溴双酚A(0.5mg/L)的降解率为的降解率为86.0%,其存在的问题是,可降解浓度较低,且所需的降解时间过长。
好氧条件下:1.苍白杆菌T(Ochrobactrum sp.T),该菌株在35℃、pH为7下,3d后对3mg/L的四溴双酚A达86.7%的降解率,存在的问题是可降解浓度较小;2.假单胞菌属W1-2,属于好氧性降解菌株,在10mg/L的四溴双酚A浓度下,其5d的降解率达91.4%,其降解率虽好,但系统的耐受浓度较低且所需的降解时间较长;3.假单胞菌fz(Pseudomonas sp.f z),该菌株在外加碳氮源-牛肉膏和蛋白胨的辅助下,对10mg/L四溴双酚A有80%的降解率,其存在的问题是需添加共代谢碳源作为微生物的共培养物质,且可耐受的四溴双酚A浓度较小;4.假单胞菌属(Pseudomonas sp.)在添加8g/L的葡萄糖为共代谢碳源条件下,对于四溴双酚A的浓度为10mg/L的降解体系,降解6d的降解率为55.2%,其存在的问题是,降解时间长,且菌株在无外加碳源的条件下不能直接以四溴双酚A为唯一碳源进行微生物的代谢及利用。
目前对于降解四溴双酚A的菌株及条件而言,好氧菌比厌氧菌降解四溴双酚A更具优势,且目前已发现关于降解四溴双酚A的相关好氧菌属存在的明显问题是其降解四溴双酚A的浓度较低,且所需的降解时间较长,一般需要添加共代谢碳源如葡萄糖等到降解体系。经试验,在未优化条件下,当体系四溴双酚A浓度为50mg/L时,缺陷短波单胞菌TB-1在以四溴双酚A为唯一碳源条件下,24h的降解率可达34.728%,96h的降解率可达47.661%。
缺陷短波单胞菌TB-1降解四溴双酚A的耐受度探究:以相同方法配置无机盐体系,分别设置TB-1菌降解四溴双酚A体系的终浓度为50、100、1000、1500mg/L,置于31℃、150r/min的恒温水浴摇床,且于相应时间点测定各降解体系的生长及降解率情况。以OD600nm表示的生长及降解率结果如表1和图5所示。
表1不同初始浓度的四溴双酚A体系的生长及降解率
四溴双酚A浓度 | OD<sub>600nm</sub> | 降解率 |
50mg/L | 0.828 | 64.479% |
100mg/L | 0.733 | 48.248% |
1000mg/L | 0.582 | 39.264% |
1500mg/L | 0.549 | 3.898% |
从表1可看出,缺陷短波单胞菌TB-1可耐受的最大四溴双酚A浓度为:1000mg/L。
上述为本发明的最佳实施方案,但本发明的具体实施方案不局限于此,其他任何未背离本发明的实质与原理下所做的改变、修饰、替代、组合、简化等,均应为等效的置换方式,均包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一株缺陷短波单胞菌,其特征在于,该缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta)的保藏编号为CCTCC M 2022366。
2.一种培养缺陷短波单胞菌的方法,其特征在于,所述的缺陷短波单胞菌为权利要求1所述的缺陷短波单胞菌;
挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;
牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
3.权利要求1所述的缺陷短波单胞菌用于降解四溴双酚A的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,缺陷短波单胞菌降解水中四溴双酚A包括:
接种生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液于水中,降解温度25~33℃,降解转速150~210r/min。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的降解温度为31℃,降解转速150r/min。
6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于,生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液的培养方法包括:挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;
牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
7.权利要求1所述的缺陷短波单胞菌用于制备生物降解剂的应用,所述的生物降解剂用于降解四溴双酚A。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,生物降解剂降解水中四溴双酚A包括:
接种生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液于水中,降解温度25~33℃,降解转速150~210r/min。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的降解温度为31℃;
生长至对数期的缺陷短波单胞菌种子液的培养方法包括:挑取缺陷短波单胞菌单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于31℃及150±10r/min下恒温震荡培养,待其生长至OD600nm为1.6~1.8;
牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法:NaCl 5g/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L。煮沸溶解至溶液澄清,冷却后用6M NaOH调溶液pH为7.8。
10.一种生物降解剂,其特征在于,所述的生物降解剂中含有权利要求1所述的缺陷短波单胞菌和/或其次生代谢产物;所述的生物降解剂用于降解四溴双酚A。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210362788.5A CN114634896B (zh) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210362788.5A CN114634896B (zh) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114634896A true CN114634896A (zh) | 2022-06-17 |
CN114634896B CN114634896B (zh) | 2023-07-14 |
Family
ID=81952527
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210362788.5A Active CN114634896B (zh) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114634896B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115322924A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-11 | 济南大学 | 一种双菌混合培养合成聚羟基脂肪酸酯的方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20120083605A (ko) * | 2011-01-18 | 2012-07-26 | 이은영 | 신규한 브레번디모나스 디미누타 균주 및 이를 포함하는 축산분뇨의 악취방지 제거제 및 그 제조방법 |
CN103881947A (zh) * | 2014-02-26 | 2014-06-25 | 东北农业大学 | 一株形成生物膜的缺陷短波单胞菌及其在含氰废水处理中的应用 |
CN111808874A (zh) * | 2019-04-11 | 2020-10-23 | 中国科学院微生物研究所 | 一种磷酸三酯酶8047-pte的编码基因及其应用 |
-
2022
- 2022-04-07 CN CN202210362788.5A patent/CN114634896B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20120083605A (ko) * | 2011-01-18 | 2012-07-26 | 이은영 | 신규한 브레번디모나스 디미누타 균주 및 이를 포함하는 축산분뇨의 악취방지 제거제 및 그 제조방법 |
CN103881947A (zh) * | 2014-02-26 | 2014-06-25 | 东北农业大学 | 一株形成生物膜的缺陷短波单胞菌及其在含氰废水处理中的应用 |
CN111808874A (zh) * | 2019-04-11 | 2020-10-23 | 中国科学院微生物研究所 | 一种磷酸三酯酶8047-pte的编码基因及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
YUANWANG LIU ET AL.: "Biodegradation of gentamicin by bacterial consortia AMQD4 in synthetic medium and raw gentamicin sewage", 《SCIENTIFIC REPORTS》 * |
党亚攀等: "制浆中段废水处理优势菌的鉴定及其对COD去除效果的研究", 《中国造纸》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115322924A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-11 | 济南大学 | 一种双菌混合培养合成聚羟基脂肪酸酯的方法 |
CN115322924B (zh) * | 2022-07-19 | 2023-11-14 | 济南大学 | 一种双菌混合培养合成聚羟基脂肪酸酯的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114634896B (zh) | 2023-07-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109182192B (zh) | 一株好氧反硝化菌hy3-2及其在污水脱氮中的应用 | |
CN112625942B (zh) | 一种好氧反硝化菌及其应用 | |
CN111100824B (zh) | 一株芽孢杆菌及其在养殖水体中脱氮除硫的应用 | |
CN110527652A (zh) | 一种降解甲醛、苯酚混合废气的微生物复合菌剂及应用 | |
CN110283741A (zh) | 一株具有高效降解多环芳烃功能的玫瑰杆菌及其应用 | |
CN115786179A (zh) | 降解邻二氯苯的菌株及其应用 | |
CN114045239B (zh) | 具有二甲基乙酰胺降解能力的泛养副球菌ybh-7及应用 | |
CN114634896B (zh) | 一株缺陷短波单胞菌及降解四溴双酚a的应用 | |
CN108277175A (zh) | 2,4二硝基甲苯磺酸盐高效降解菌株Microbacterium sp.X3及其应用 | |
CN114107092A (zh) | 一株降解邻苯二甲酸酯的植物内生菌戈登氏菌l191及其应用 | |
CN111909885A (zh) | 一种耐盐降cod菌种、培养方法及应用 | |
CN110157637A (zh) | 肠杆菌z1和克雷伯氏杆菌z2复合菌剂去除高氮污染废水及应用 | |
CN114657102B (zh) | 一株黏质沙雷氏菌及降解四溴双酚a的应用 | |
CN107988124A (zh) | 一株2,4-二硝基甲苯磺酸盐高效降解菌株Brucella sp.X2及其应用 | |
CN114045238B (zh) | 高效降解二甲基乙酰胺的赤红球菌hjm-8及应用 | |
CN112779189B (zh) | 一株土壤变形杆菌及其应用 | |
CN115960745A (zh) | 一株耐盐环氧氯丙烷降解菌及其在处理高盐水体中环氧氯丙烷的应用 | |
CN111635877B (zh) | 一株降解木质素的无色杆菌及其在含木质素废水处理中的应用 | |
CN108034613A (zh) | 一株2,4-二硝基甲苯磺酸盐高效降解菌株Sphingomonas sp.X4及其应用 | |
CN115491325A (zh) | 一种耐金属贪铜菌及应用方法 | |
CN113980851A (zh) | 具有二甲基乙酰胺降解能力的副球菌ybh-x及应用 | |
CN114933988B (zh) | 一株具有好氧反硝化同步脱氮除磷性能的假单胞菌 | |
CN117511768B (zh) | 一种耐盐促生透明纤细芽孢杆菌及其应用 | |
CN116426440B (zh) | 一株海洋硫氧化细菌新种菌株及其应用 | |
CN113862177B (zh) | 一种同步降解混合酚的溶肌谷氨酸杆菌及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |