CN114617267A - 一种强化型复合骨肽及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种强化型复合骨肽及其制备方法与应用，该强化型复合骨肽按包括牛骨胶原蛋白肽10～15份、鸡软骨蛋白肽1.5～2.5份、磷酸氢钙0.001～0.005份、L‑乳酸钙5～8份、维生素D 0.01～0.02份、维生素B12 0.005～0.01份、维生素C 0.1～0.2份、姜黄0.1～0.2份、壳寡糖0.2～0.5份、甜菊糖苷0～0.01份、DL‑苹果酸0.01～0.04份、果胶0.01～0.03份、调味辅助剂0.01～1份，鸡软骨蛋白肽中含硫酸软骨素35wt％以上，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽55wt％以上。该强化型复合骨肽通过对成分的优化，提高了有效成分的吸收和利用率，效果好。

Description

一种强化型复合骨肽及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种强化型复合骨肽及其制备方法与应用。
背景技术
骨骼中有机物的70％～80％是胶原蛋白，骨骼生成时，首先必须合成充足的胶原蛋白纤维来组成骨骼的框架。因此，有人称胶原蛋白为“骨中之骨”。胶原蛋白的流失或缺乏会引起骨质疏松等疾病。筋腱—构成骨骼与肌肉相联的筋腱的成分80％是胶原蛋白，缺乏胶原蛋白会导致筋腱与肌肉的衰弱。
随着年龄的增长，胶原蛋白流失及身体各方面营养供给不足，软骨的营养供给不足会导致骨骼中的无机物增多，进而导致骨骼弹性和韧性降低，关节软骨不可避免的发生退化和磨损，而关节一直处于运动状态，导致软骨的磨损越来越严重，两块骨直接接触，引发炎症，最后导致骨关节疾病。而骨关节炎多发于中老年人，致残率非常高，被称为“不死的癌症”。且据资料显示，随着人老龄化程度的逐渐加大，骨质疏松逐渐成为人类健康生活的一大关键因素。另外，骨折也是骨损伤的重要因素之一，骨折是指骨头或骨头的结构完全或部分断裂，多见于儿童及老年人，中青年也时有发生。
传统的骨关节临床用药主要以止痛+非甾体类抗炎药结合使用为主，但过多的使用药物治疗存在一系列的副作用，不仅会加重肝肾代谢负担，还会产生药物依赖效应，存在较大的健康安全隐患；还有关节置换、修复性治疗、基础治疗、运动支持等治疗方法，但有费用昂贵、治标不治本或疗效不明确等缺陷。
而骨折时通常伴随着重要血管损伤、周围组织损伤以及周围神经损伤，骨折的愈合一般分为肉芽组织修复期、原始骨痂形成期、成熟骨板期和塑形期，肉芽组织修复期。肉芽组织修复期是骨折后骨的正常结构和周围的软组织破坏，形成血肿，血肿的清除、机化，形成肉芽组织，使骨折断端初步连接在一起，这个过程在骨折后两到三个星期内完成。原始骨痂形成期也就是骨折后新骨形成。开始于骨折后七到十天延续到骨折完全愈合。成熟骨板期是将原始的骨痂被改造成坚强有力的板状骨，这个过程需要8到12个星期。塑形期为骨折愈合过程中塑形，使骨折断端愈合的骨骼结实有力，骨折线消失恢复以前的正常结构，通常要几个月甚至几年。骨折修复大多需卧床，不仅神经和肌肉的活动力大大降低，且血液运行不畅，不利于骨折愈合，修复时间过长，还可能会出现痔疮、下肢深静脉血栓、关节僵硬等并发症。
而随着人们生活水平的提高及营养保健意识日益增强，人们更追求有利于自身健康的食品，更接受“食补、食疗”的养生方式，食疗养生逐渐成为人们关注的热点。通过食补养生达到保健目的以及通过食补促进康健效果、缩减康复时间的方法逐渐被大众所接受和尝试。
骨肽即骨胶原蛋白肽，是以骨明胶为原料，应用酶解工艺，通过控制反应条件所制备得到的骨胶原蛋白产品。胶原蛋白能有效抑制骨骼、软骨肉胶原蛋白的分解，并加速骨密度增加，可预防及治疗退化性关节炎、快速消炎、止痛、消肿、逐渐修复关节软骨及促进新骨形成，可有效预防退化性关节炎，并对关节炎患者具保护功能，能用于帮助关节炎病人的治疗，并有效改善关节疼痛，加速断骨修复、骨折的复原。现有实际生产中也有了骨肽片、骨肽注射液和骨肽饮料等产品，但现有的骨肽饮料产品在吸收速率、人体利用率以及效果等方面都还有很大的优化空间。
发明内容
本发明目的在于提供一种强化型复合骨肽，可应用于促进骨骼生长、增强骨密度、改善骨质疏松和骨关节炎，其具有优良的吸收速率和人体利用率。
为达到上述目的，本发明提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：
牛骨胶原蛋白肽10～15份、鸡软骨蛋白肽1.5～2.5份、磷酸氢钙0.001～0.005份、L-乳酸钙5～8份、维生素D 0.01～0.02份、维生素B12 0.005～0.01份、维生素C 0.1～0.2份、姜黄0.1～0.2份、壳寡糖0.2～0.5份、甜菊糖苷0～0.01份、DL-苹果酸0.01～0.04份、果胶0.01～0.03份、调味辅助剂0.01～1份，所述鸡软骨蛋白肽中含硫酸软骨素35wt％以上，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽55wt％以上。
进一步优选的，所述调味辅助剂包括三氯蔗糖0.01～0.05份、焦糖色素0.005～0.01份和/或黄原胶0.1～0.3份。
进一步优选的，所述调味辅助剂还包括益生菌0.1～0.2份和/或透明质酸钠0.05～0.2份。
本发明还提供所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉；
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：复合酶结合超声波辅助酶解，超声波频率25～30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100～120min；所述鸡软骨蛋白肽粉中含硫酸软骨素含量35wt％以上，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽55wt％以上；
步骤三、按照质量比，在搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、调味辅助剂，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到所述强化型复合骨肽。
进一步优选的，步骤二中步骤二中复合酶为胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml。
本发明还提供所述的强化型复合骨肽在制备药物中的应用，所述的药物用于促进骨骼生长、增强骨密度、缓解关节疼痛、舒缓骨质疏松和改善骨关节炎。
本发明还提供所述的强化型复合骨肽在制备保健品或食品中的应用，所述的保健品或食品用于骨胶原蛋白和钙、磷元素补充，促进钙、磷元素吸收和强健骨骼。
本发明还提供一种用于促进骨骼生长的药物，所述药物中包括质量分数为70～100％的所述强化型复合骨肽和质量分数为0～30％药品领域可接受的辅料，所述药物为片剂、粉剂、颗粒剂、口服液、滴剂、丸剂或胶囊剂。
本发明还提供一种食品或保健品，所述食品或保健品中包括质量分数为30～50％的所述强化型复合骨肽和质量分数为50～70％的食品或保健品领域可接受的辅料，所述保健品或食品为饮品、糖果或粉剂。。
本发明的有益效果是：本强化型复合骨肽以牛骨胶原蛋白肽、鸡软骨蛋白肽、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、调味辅助剂复配，牛骨胶原蛋白肽、鸡软骨蛋白肽为使用者提供身体所需的胶原蛋白，胶原蛋白与维生素C形成完成胶原蛋白网状结构，磷酸氢钙、乳酸钙为人体提供磷和钙元素，钙和磷质与氢氧离子结合形成羟基磷灰石的结晶，沉淀在胶原蛋白网状结构上，形成富有弹性(胶原蛋白)及坚硬(羟基磷灰石)的骨骼，促进断骨愈合及改善骨质疏松，且骨钙主要以磷酸氢钙和羟磷灰石的形式存在，以磷酸氢钙为骨修复提供磷和钙元素，元素吸收性和补充性更好、针对性更强。同时维生素B12能增强人体免疫力和营养神经，能提高人体体质和促进神经修复，促进元素吸收，提高断骨及其周围神经的修复效率，还能清除血液中的高半胱氨酸，防止因高半胱氨酸过多导致骨质疏松甚至髋骨骨折，对骨骼起保护作用。而且维生素B12能促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处于正常状态，另维生素B12中含有矿物质钴，能促进胃肠道对铁的吸收，加速体内储存铁造血，保证骨折修复时需大量供血的要求，有利于断骨及周围神经修复。另以姜黄提供缓解关节炎症作用，同时补充壳寡糖，促进软骨形成，增加滑液粘性，保持软骨水分，抑制软骨老化，改善关节僵硬程度，以及促进肠道双歧杆菌、乳酸菌等人体有益菌群，提高人体肠道功能，促进物质吸收。复配果胶，调节和增强脾肠胃功能，促进物质吸收，提高人体免疫的同时，提高产品吸收速率和有效度。通过复配维生素D调节钙、磷代谢和利用，促进骨对钙、磷的吸收利用，从而保证骨骼的形成过程的顺利进行，促进断骨的愈合。维生素C促进胶原蛋白肽吸收。以甜菊糖苷作为甜味剂，不参与吸收和产生热能，适宜糖尿病患者食用。
另以三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠为调味辅助剂，通过益生菌和DL-苹果酸配合，调节消化道内微生物，保证消化道功能，从而促进物质消化吸收。以三氯蔗糖作为甜味剂之一，量少而味甜，与甜菊糖苷及DL-苹果酸配合调味，味质良好。透明质酸钠与壳寡糖配合，进一步提高减轻关节疼痛和僵硬、改善关节不适症状的效果，有助于缓解退行性关节炎症状。
本发明的强化型复合骨肽从有效成分、提高肠胃功能进而提高有效成分的吸收和利用等方面进行优化，能有效抑制骨骼、软骨肉胶原蛋白的分解，并加速骨密度增加，可预防及治疗退化性关节炎、快速消炎、止痛、消肿、逐渐修复关节软骨，并对关节炎患者具保护功能，加速骨折、关节炎、骨质疏松的复原。
本发明提供的所述强化型复合骨肽的制备方法以鸡胸软骨为原料，使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，提高了酶解产物得率，丰富产品元素。
本发明提供的药物包括质量分数为70～100％所述强化型复合骨肽，能有效抑制骨骼、软骨肉胶原蛋白的分解，并加速骨密度增加，可预防及治疗退化性关节炎、快速消炎、止痛、消肿、逐渐修复关节软骨，并对关节炎患者具保护功能，加速骨折、关节炎、骨质疏松的复原。
本发明提供的食品或保健品包括质量分数为30～50％的所述强化型复合骨肽，能够为人体补充骨胶原蛋白和钙、磷元素，促进钙、磷元素吸收和强健骨骼。
具体实施方式
下面所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明涉及一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽10～15份，包括且不限于10份、11份、12份、13份、14份和15份；鸡软骨蛋白肽1.5～2.5份，包括且不限于1.5份、2份、2.5份；磷酸氢钙0.001～0.005份，包括但不限于0.001份、0.002份、0.003份、0.004份和0.005份；L-乳酸钙5～8份，包括但不限于5份、6份、7份和8份；维生素D 0.01～0.02份，包括但不限于0.01份、0.013份、0.015份、0.017份和0.02份，维生素D规格为10万IU/份；维生素B12 0.005～0.01份，包括但不限于0.005份、0.006份、0.007份、0.008份、0.009和0.01份，所述维生素B12规格为0.1％；维生素C 0.1～0.2份，包括但不限于0.1份、0.12份、0.14份、0.18份和0.2份；姜黄0.1～0.2份，包括但不限于0.1份、0.12份、0.14份、0.18份和0.2份；壳寡糖0.2～0.5份，包括但不限于0.2份、0.3份、0.4份和0.5份；甜菊糖苷0～0.01份，包括但不限于0份、0.002份、0.004份、0.008份和0.01份；DL-苹果酸0.01～0.04份，包括但不限于0.01份、0.02份、0.03份和0.04份；果胶0.01～0.03份，包括但不限于0.01份、0.02份和0.03份；调味辅助剂0.01～1份，包括但不限于0.1份、0.3份、0.5份、0.7份和1份。其中所述调味辅助剂可以包括三氯蔗糖0.01～0.05份、焦糖色素0.005～0.01份和/或黄原胶0.1～0.3份以及益生菌0.1～0.2份和/或透明质酸钠0.05～0.2份。所述鸡软骨蛋白肽中含硫酸软骨素35wt％以上，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽55wt％以上。
骨胶原蛋白肽可以被人体主动且无障碍吸收，无需消化，供身体组织充分利用。可促进骨的形成，增强低钙水平下的骨胶原结构，从而提高了骨强度，即达到了预防骨质疏松症的作用；另外胶原蛋白肽还具有其它许多特殊的生理功能：如保护胃粘膜和抗溃疡作用，抗过敏作用等。
鸡软骨蛋白肽中的硫酸软骨素是形成软骨细胞的重要营养素，是健康关节软骨的天然组织成份，会随着年龄的增加合成逐步减少，主要功能是保护软骨，它大量存在于动物软骨中，是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖，是抑制破坏软骨的酵素，能够防止软骨被分解或溶解。
Ⅱ型胶原蛋白肽是关节软骨的主要组成成分，约占软骨干重的50％。关节炎的发生往往伴随着Ⅱ型胶原蛋白的降解。Ⅱ型胶原蛋白肽可以修复软骨，能明显改善关节疼痛、关节炎、骨僵等症状，及保护骨关节、预防关节损伤。
壳寡糖功效成分为N-乙酰氨基葡萄糖(NAG)。该原料有4大特点：NAG人体利用率比氨基葡萄糖高3倍，且壳寡糖食品可用；促进软骨生物合成能力；增加软骨滑液；改善关节僵硬程度。还具有提高免疫，抑制癌肿细胞生长，促进肝脾抗体形成，促进钙及矿物质的吸收，增殖双歧杆菌、乳酸菌等人体有益菌群，提高人体肠道功能，降血脂、降血压、降血糖、调节胆固醇，减肥，预防成人疾病等功能，而且抑制腐败菌性能效果显著，能延长产品保质期。
磷酸氢钙白色单斜晶系结晶性粉末，无臭无味。通常以二水合物(其化学式为CaHPO4·2H2O)的形式存在，可用于食品添加剂，补充人体磷、钙元素，参与骨骼的形成与骨折后骨组织的再建、肌肉收缩、神经传递、凝血的过程，并降低毛细血管的渗透性等，适用于预防和治疗钙缺乏症，如骨质疏松、手足抽搐症、骨发育不全、佝偻病以及儿童、妊娠和哺乳期妇女、绝经期妇女、老年人钙的补充。
所述L-乳酸钙与所述磷酸氢钙配合，为人体补充钙元素。
姜黄为NovaSOL姜黄，德国进口。经过德国政府、医院、高校联合人体试验验证：高生物利用度185倍(目前全球在售姜黄最高生物利用度)，打破姜黄素应用壁垒；吸收速率为传统姜黄的6.8倍，更容易被人体吸收；体内血液留存时间超过24小时，持续起效。该姜黄通过动物功效实验发现可有效缓解关节炎症。
DL-苹果酸为食用酸，适当剂量可增强体内正常代谢，为有机酸，作为酸味剂的同时，能够降低消化道内pH，使其处于胃蛋白酶的激活剂和保持较高活性的必要条件，并有助于物质的软化、溶解和水解，而且还起着阻止病原微生物经消化道进入体内的屏障作用，提高消化机能，调节消化道内微生物，保证消化道功能，促进消化吸收。
维生素C有助于维持皮肤和黏膜健康；维持骨骼、牙龈的健康；促进铁的吸收；有抗氧化作用；能够促进胶原蛋白肽的吸收。
维生素D主要生理功能为调节钙、磷代谢，特别是促进小肠对钙、磷的吸收；调节肾脏对钙、磷的排泄；控制骨骼中钙与磷的贮存和血液中钙、磷的浓度等。维生素D不足时，即使钙、磷充足，人体也不能很好的利用，钙、磷、镁在骨骼中的沉积下降，成骨作用发生障碍，骨骼修复和生长受阻。
维生素B12能增强人体免疫力和营养神经，能提高人体体质和促进神经修复。有研究表明，血液中维生素B12浓度较低者通常会有骨质流失加快的状况，这是因为维生素B12能清除血液中的高半胱氨酸，可防止因高半胱氨酸过多导致骨质疏松甚至髋骨骨折，对骨骼起保护作用。维生素B12能促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处于正常状态，还能维护神经系统健康，另维生素B12中含有矿物质钴，能促进胃肠道对铁的吸收，加速体内储存铁造血，保证骨折修复时需大量供血的要求，有利于断骨及周围神经修复。
甜菊糖苷甜度为蔗糖的250～450倍，带有轻微涩味，适度可口，纯品后味较少，是最接近砂糖的天然甜味剂，食用后不被吸收，不产生热能，对糖尿病、肥胖病患者非常友好。
果胶是存在于植物细胞壁的初生壁和细胞中间片层的杂多糖，含有非常高的脂溶性的纤维素和维生素，有助于降低血糖、降低血脂、减少胆固醇、降低血压，对皮肤也好，还能促进肠道蠕动，缓解和预防便秘的功效，可"吸附"细菌和有毒物质，包括重金属、铅等，起到排毒作用。同时，果胶可保护胃部免受刺激，减少溃疡，滋养肠胃，增强肠胃功能，提高物质吸收。
黄原胶具有优良的增稠性、悬浮性、乳化性和水溶性，并具有良好的热、酸碱稳定性，可用于，起到增稠、悬浮作用，使口感滑爽、风味自然。
透明质酸钠，新食品原料，食品中的添加量规定：液体饮料≤50ml包装2.0g/kg；食用限量≤200毫克/天。实验证明，口服透明质酸钠，可以减轻关节疼痛和僵硬，改善关节不适症状，有助于缓解退行性关节炎症状。
三氯蔗糖甜度可达蔗糖600倍。这种甜味剂具有无能量，甜度高，甜味纯正，高度安全等特点。以其作为甜味剂，具有量少味甜的特点。
益生菌抵抗细菌病毒的感染提升免疫，通过抑制有害菌的生长、抑制有害菌产生毒素、清除有害菌产生的毒素来清除有害菌对身体的伤害。并产生维生素包括泛酸、尼克酸、B1，B2，B6及维生素K等，同时能产生短链脂肪酸、抗氧化剂、氨基酸等等，对骨骼成长和心脏健康有重要作用，能预防和治疗某些疾病如肠道综合症、胃溃疡等，调节肠道菌群平衡，提高肠道功能，促进营养物质的吸收。
本发明还提供所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，超声波频率25～30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100～120min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、调味辅助剂，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到所述强化型复合骨肽。
进一步优选的，步骤二中胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml。
所述的强化型复合骨肽可应用于制备促进骨骼生长与复原、增强骨密度、缓解关节疼痛、舒缓骨质疏松和改善骨关节炎的药物，所述药物中包括70～100％的所述强化型复合骨肽和质量分数为0～30％药品领域可接受的辅料，所述药物为片剂、粉剂、颗粒剂、口服液、滴剂、丸剂或胶囊剂。所述强化型复合骨肽也可应用于保健品或食品，所述保健品或食品中包括质量分数为30～50％的所述强化型复合骨肽和质量分数为50～70％的食品或保健品领域可接受的辅料，所述保健品或食品为饮品、糖果或粉剂，可为人体补充骨胶原蛋白和钙、磷元素，促进钙、磷元素吸收，强健骨骼。
实施例1
本实施例提供一种强化型复合骨肽包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽11份、鸡软骨蛋白肽1.8份、磷酸氢钙0.002份、L-乳酸钙5.46份、维生素D 0.012份、维生素B120.008份、维生素C 0.16份、姜黄0.12份、壳寡糖0.4份、DL-苹果酸0.02份、果胶0.02份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、DL-苹果酸、果胶，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例2
本实施例提供一种强化型复合骨肽包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽11份、鸡软骨蛋白肽1.8份、磷酸氢钙0.002份、L-乳酸钙5.46份、维生素D 0.012份、维生素B120.008份、维生素C 0.16份、姜黄0.12份、壳寡糖0.4份、甜菊糖苷0.008份、DL-苹果酸0.02份、果胶0.02份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率25Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为110min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽，所述强化型复合骨肽50ml/瓶。
实施例3
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽11份、鸡软骨蛋白肽1.8份、磷酸氢钙0.002份、L-乳酸钙5.46份、维生素D 0.012份、维生素B120.008份、维生素C 0.16份、姜黄0.12份、壳寡糖0.4份、甜菊糖苷0.008份、DL-苹果酸0.02份、果胶0.02份、三氯蔗糖0.01份、焦糖色素0.006份、黄原胶0.1份、益生菌0.16份、透明质酸钠0.14份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率25Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为110min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例4
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽11份、鸡软骨蛋白肽1.8份、磷酸氢钙0.002份、L-乳酸钙5.46份、维生素D 0.012份、维生素B120.008份、维生素C 0.16份、姜黄0.12份、壳寡糖0.4份、甜菊糖苷0.008份、DL-苹果酸0.02份、果胶0.03份、三氯蔗糖0.01份、焦糖色素0.006份、黄原胶0.12份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例5
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽14份、鸡软骨蛋白肽1.6份、磷酸氢钙0.003份、L-乳酸钙6.73份、维生素D 0.014份、维生素B120.006份、维生素C 0.14份、姜黄0.14份、壳寡糖0.3份、甜菊糖苷0.006份、DL-苹果酸0.03份、果胶0.02份、三氯蔗糖0.03份、焦糖色素0.007份、黄原胶0.16份、益生菌0.18份、透明质酸钠0.1份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，超声波频率25Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例6
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽12份、鸡软骨蛋白肽2份、磷酸氢钙0.005份、L-乳酸钙7.15份、维生素D 0.018份、维生素B12 0.01份、维生素C 0.18份、姜黄0.18份、壳寡糖0.4份、甜菊糖苷0.01份、DL-苹果酸0.04份、果胶0.01份、三氯蔗糖0.04份、焦糖色素0.008份、黄原胶0.2份、益生菌0.1份、透明质酸钠0.07份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率25Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为120min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例7
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽13份、鸡软骨蛋白肽1.8份、磷酸氢钙0.04份、L-乳酸钙7.62份、维生素D0.016份、维生素B120.009份、维生素C 0.2份、姜黄0.16份、壳寡糖0.5份、甜菊糖苷0.02份、DL-苹果酸0.01份、果胶0.03份、三氯蔗糖0.01份、焦糖色素0.005份、黄原胶0.25份、益生菌0.2份、透明质酸钠0.2份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml，超声波频率25Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为110min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
实施例8
本实施例提供一种强化型复合骨肽，包括以下质量份组分：牛骨胶原蛋白肽15份、鸡软骨蛋白肽1.5份、磷酸氢钙0.001份、L-乳酸钙5.2份、维生素D0.01份、维生素B12 0.005份、维生素C 0.1份、姜黄0.1份、壳寡糖0.2份、甜菊糖苷0.004份、DL-苹果酸0.02份、果胶0.03份、三氯蔗糖0.02份、焦糖色素0.01份、黄原胶0.3份、益生菌0.14份、透明质酸钠0.18份，所述鸡软骨蛋白肽中硫酸软骨素不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％。
所述强化型复合骨肽的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉。
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：使用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶结合超声波辅助酶解，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml；超声波频率30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为120min。
步骤三、按照质量比，向搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、三氯蔗糖、焦糖色素、黄原胶、益生菌、透明质酸钠，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到强化型复合骨肽。
1、鸡软骨酶解条件试验
选用木瓜蛋白酶和胰酶配合为复合酶1、胰酶和胃蛋白酶配合为复合酶2、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶配合为复合酶3、木瓜蛋白酶和胰酶及胃蛋白酶配合为复合酶4以及木瓜蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶分别对鸡软骨进行酶解，酶总添加量相同，酶解温度为酶最适温度，酶解相同时间，以蛋白回收率、Ⅱ型胶原蛋白得率和硫酸软骨素得率为评价标准。结果如下表1。
表1鸡软骨酶解条件试验结果
Figure BDA0003558886120000181
由表1可得，以木瓜蛋白酶和胰酶及胃蛋白酶配合得复合酶3酶解产物蛋白回收率、Ⅱ型胶原蛋白得率和硫酸软骨素得率最高。
另以步骤二时不以超声辅助酶解，其余工艺条件与实施例3相同为对照制备鸡软骨蛋白肽粉，对照制得的鸡软骨蛋白肽粉的蛋白回收率、Ⅱ型胶原蛋白得率和硫酸软骨素得率均低于实施例3。
2、实施例1～4的强化型复合骨肽治疗骨质疏松功效的研究
1)30只雄性昆明小鼠在SPF级饲养室正常喂食稳定三天后准备建立骨质疏松模型，30只小鼠随机分为三组，分别为正常组、模型组和试验组1～4。除正常组外，其余5组每天灌胃给予150mg/kg的维甲酸建立骨质疏松模型，建模时间持续两周。
维甲酸诱导的骨质疏松模型建立完成后，正常组和模型组小鼠除正常饮食外每天给予自由饮水，试验组1～4除正常饮食饮水外分别每天给予7.5m1/20g体积的实施例1～4的强化型复合骨肽喂养，喂养时间持续三周。
2)小鼠股骨体积及骨钙含量测定
(1)小鼠股骨体积及长、短径的测量
喂食鳄鱼骨肤21天后，处死小鼠，剥离小鼠股骨，置于烘箱中干燥，称量干燥后的小鼠股骨重量，记录骨重数据，股骨干重记为B，随后将小鼠股骨置于lml注射器内，推动针芯，将股骨抵至注射器底部，然后将注射器置于4 0C的水中，抽动针芯，直至股骨被水浸泡，同时翻动注射器以将空气排出，推动针芯使其抵住股骨。在注射器针芯边界处做好标记，用游标卡尺测量针芯至注射器底部的距离记为L，然后称量注射器总重(注射器内仅含水和骨)，记录为C。抽出针芯，将股骨及水移出注射器，然后抽水至标记的刻度处，并用滤纸将注射器周围的水吸干，称重，记录注射器及水重为D。股骨在注射器中所占体积V＝D+B-C，根据水在4℃水中的体积重量换算方法:1g水的体积为lcm3，即可将股骨重量换算为体积。取出的股骨用游标卡尺测量其横长径与横短径，记录结果，详细结果见表1。
表1小鼠骨体积及长、短径数据
正常组 模型组 试验组1 试验组2 试验组3 试验组4
股骨体积/10<sup>-2</sup> 8.9±0.3 3.6±0.4 8.7±0.2 8.6±0.5 8.9±0.4 8.6±0.4
横长径 3.2±0.2 2.1±0.1 3.1±0.1 3.0±0.1 3.2±0.1 3.1±0.1
短长径 1.6±0.3 1.3±0.2 1.5±0.1 1.5±0.1 1.6±0.1 1.6±0.2
(2)骨钙测量结果如表2。
表2小鼠股骨骨钙含量
Figure BDA0003558886120000201
如表1、表2所示，骨质疏松模型组小鼠的股骨体积及横长、短径明显小于正常组，股骨骨钙含量也明显低于正常组，而试验组1～4小鼠无论是股骨体积及横长、短径，还是股骨骨钙含量均与正常组相差无几，说明本申请提供的强化型复合骨肽能为小鼠进行钙元素补充且能促进其对骨钙的吸收，对于骨质疏松疗效良好。
以上所揭露的仅为本发明几种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明申请专利范围所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。

Claims (10)

1.一种强化型复合骨肽，其特征在于，包括以下质量份组分：
牛骨胶原蛋白肽10～15份、鸡软骨蛋白肽1.5～2.5份、磷酸氢钙0.001～0.005份、L-乳酸钙5～8份、维生素D 0.01～0.02份、维生素B12 0.005～0.01份、维生素C 0.1～0.2份、姜黄0.1～0.2份、壳寡糖0.2～0.5份、甜菊糖苷0～0.01份、DL-苹果酸0.01～0.04份、果胶0.01～0.03g、调味辅助剂0.01～1份；
所述鸡软骨蛋白肽中含硫酸软骨素35wt％以上，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽55wt％以上。
2.如权利要求1所述的一种强化型复合骨肽，其特征在于，所述调味辅助剂包括三氯蔗糖0.01～0.05份、焦糖色素0.005～0.01份和/或黄原胶0.1～0.3份。
3.如权利要求2所述的一种强化型复合骨肽，其特征在于，所述调味辅助剂还包括益生菌0.1～0.2份和/或透明质酸钠0.05～0.2份。
4.一种强化型复合骨肽的制备方法，用于制备如权利要求1～3所述的强化型复合骨肽，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、牛骨脱脂、酶解、灭酶、浓缩干燥得到牛骨胶原蛋白肽粉；
步骤二、鸡胸软骨粉碎、高压蒸煮、脱脂、低温酶解、灭酶后浓缩干燥得到鸡软骨蛋白肽粉，其中低温酶解条件为：复合酶结合超声波辅助酶解，超声波频率25～30Hz，酶解温度为46～48℃，酶解时间为100～120min；所述鸡软骨蛋白肽粉中硫酸软骨素含量不低于35wt％，含活性Ⅱ型胶原蛋白肽不低于55wt％；
步骤三、按照质量比，在搅拌机中边搅拌边加入全部量的牛骨胶原蛋白肽粉、鸡软骨蛋白肽粉、磷酸氢钙、L-乳酸钙、维生素D、维生素B12、维生素C、姜黄、壳寡糖、甜菊糖苷、DL-苹果酸、果胶、调味辅助剂，搅拌均匀后采用高温瞬时灭菌技术进行灭菌处理，得到所述强化型复合骨肽。
5.如权利要求4所述的强化型复合骨肽的制备方法，其特征在于，步骤二中复合酶为胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶。
6.如权利要求5所述的强化型复合骨肽的制备方法，其特征在于，胰酶、木瓜蛋白酶及胃蛋白酶添加量分别为1.2g/1000ml、1g/1000ml、1.1g/1000ml。
7.权利要求1～3任一项所述的强化型复合骨肽在制备药物中的应用，其特征在于，所述的药物用于促进骨骼生长、增强骨密度、缓解关节疼痛、舒缓骨质疏松和改善骨关节炎。
8.权利要求1～3任一项所述的强化型复合骨肽在制备保健品或食品中的应用，其特征在于，所述的保健品或食品用于骨胶原蛋白和钙、磷元素补充，促进钙、磷元素吸收和强健骨骼。
9.一种用于促进骨骼生长的药物，其特征在于，所述药物中包括质量分数为70～100％的权利要求1～3任一项所述的强化型复合骨肽和质量分数为0～30％药品领域可接受的辅料，所述药物为片剂、粉剂、颗粒剂、口服液、滴剂、丸剂或胶囊剂。
10.一种食品或保健品，其特征在于，所述食品或保健品中包括质量分数为30～50％的权利要求1～3任一项所述的强化型复合骨肽和质量分数为50～70％的食品或保健品领域可接受的辅料，所述保健品或食品为饮品、糖果或粉剂。
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