CN114525222A - 一种抑幽益生菌 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及益生菌加工技术领域，尤其涉及一种抑幽益生菌，针对当前现有的益生菌加工技术存在加工过程中大都采用单一菌种进行加工导致加工出的产品抑幽率低的问题，现提出如下方案，其中一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌40‑60份、嗜热链球菌30‑50份、嗜酸乳杆菌20‑45份、保加利亚乳杆菌10‑30份，本发明的目的是通过采用多种益生菌混合培养发酵，提高了益生菌制剂的抑幽率，同时通过对接种前、后分别进行取样镜检，保证了制成的益生菌制剂的成功率。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌加工技术领域，尤其涉及一种抑幽益生菌。
背景技术
幽门螺杆菌英文简称“Hp”，常被称作“幽门螺旋杆菌”，是寄生在胃里的一种致病菌，与日常中很多疾病有密切关联，如消化性溃疡、慢性胃炎、消化不良、胃癌等，而益生菌是通过定殖在人体内，改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物。通过调节宿主黏膜与系统免疫功能或通过调节肠道内菌群平衡，促进营养吸收保持肠道健康的作用，从而产生有利于健康作用的单微生物或组成明确的混合微生物，益生菌对人体的免疫、抗菌、抗病毒、代谢等生理活动有一定的促进作用。益生菌能够调理肠道的正常菌群，用于治疗消化不良引起来的恶心，呕吐，腹胀，腹泻或者便秘的时候，也能够用益生菌得到改善。
但是目前现有的益生菌加工技术存在加工过程中大都采用单一菌种进行加工导致加工出的产品抑幽率低的问题，因此，我们提出一种抑幽益生菌用于解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决目前现有的益生菌加工技术存在加工过程中大都采用单一菌种进行加工导致加工出的产品抑幽率低等问题，而提出的一种抑幽益生菌。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌40-60份、嗜热链球菌30-50份、嗜酸乳杆菌20-45份、保加利亚乳杆菌10-30份；
优选的，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌50-60份、嗜热链球菌35-50份、嗜酸乳杆菌20-35份、保加利亚乳杆菌10-24份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断处理；
优选的，所述S1中，由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧1-3min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
优选的，所述S2中，将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
优选的，所述S3中，将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在20-40℃，发酵时间为20-36h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
优选的，所述S4中，发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
优选的，所述S5中，对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、通过采用多种益生菌混合培养发酵，提高了益生菌制剂的抑幽率。
2、通过对接种前、后分别进行取样镜检，保证了制成的益生菌制剂的成功率。
本发明的目的是通过采用多种益生菌混合培养发酵，提高了益生菌制剂的抑幽率，同时通过对接种前、后分别进行取样镜检，保证了制成的益生菌制剂的成功率。
附图说明
图1为本发明提出的一种抑幽益生菌的流程图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例一
参照图1，一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌55份、嗜热链球菌45份、嗜酸乳杆菌28份、保加利亚乳杆菌17份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧2min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在30℃，发酵时间为26h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
实施例二
参照图1，一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌50份、嗜热链球菌35份、嗜酸乳杆菌20份、保加利亚乳杆菌10份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧1min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在20℃，发酵时间为20h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
实施例三
参照图1，一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌60份、嗜热链球菌50份、嗜酸乳杆菌35份、保加利亚乳杆菌24份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧3min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在40℃，发酵时间为36h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
实施例四
参照图1，一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌53份、嗜热链球菌40份、嗜酸乳杆菌25份、保加利亚乳杆菌12份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧1min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在24℃，发酵时间为21h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
实施例五
参照图1，一种抑幽益生菌，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌58份、嗜热链球菌47份、嗜酸乳杆菌33份、保加利亚乳杆菌22份；
其制作包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养，其中通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧2min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在36℃，发酵时间为26h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
将实施例一、实施例二、实施例三、实施例四和实施例五中一种抑幽益生菌进行试验，得出结果如下：
实施例一、实施例二、实施例三、实施例四和实施例五制得的抑幽益生菌对比现有抑幽益生菌抑幽率有了显著提高，且实施例一为最佳实施例。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种抑幽益生菌，其特征在于，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌40-60份、嗜热链球菌30-50份、嗜酸乳杆菌20-45份、保加利亚乳杆菌10-30份。
2.根据权利要求1所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，包括以下重量份的原料：长双歧杆菌50-60份、嗜热链球菌35-50份、嗜酸乳杆菌20-35份、保加利亚乳杆菌10-24份。
3.根据权利要求1所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：
S1：菌种准备：由专业人员选取原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养；
S2：菌种培养：将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养；
S3：菌种发酵：将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理；
S4：混合接种：发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂；
S5：取样镜检：对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断处理。
4.根据权利要求3所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，所述S1中，由专业人员选取长双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为原始菌种，并将选取的原始菌种进行扩大培养。
5.根据权利要求4所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，通过平板划线法进行原始菌种的扩大培养，其中所述平板划线法采用连续划线分离原始菌种，且划线时的起始点在平板的1/5处，边缘留有5mm的空白，以防污染的细菌被划线进入分离区，进行连续划线分离前先将接种环灭菌，其中接种环灭菌是将接种环放置在酒精灯光火焰上方灼烧1-3min，灭菌完成后取标本进行划线，其中进行划线时菌液采用Z形划线直至划满平板。
6.根据权利要求3所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，所述S2中，将分离出的菌种分别进行单株菌株摇瓶培养，其中所述摇瓶培养是在250mL三角瓶中装入50mL液体培养基，且三角瓶在使用先进行灭菌处理，其中进行灭菌处理时温度为121℃，瓶内压强为0.15MPa，灭菌时间0.5h，灭菌完成将三角瓶进行冷却，并由人工通过温度检测仪进行瓶身温度检测，通过检测结果进行判断处理，检测结果为温度数据在40℃以上则继续进行冷却，检测结果为温度数据在40℃以下则停止冷却，停止冷却后由技术人员向三角瓶内接入菌种，并将接入菌种的三角瓶置于26℃的恒温摇床上培养至发酵罐准备工作完毕，其中所述发酵罐准备工作是将种子罐和发酵罐在121℃、9.1MPa条件下进行空罐、实罐灭菌1h，且灭菌完成冷却至26℃，并在种子罐中加入300ml培养液。
7.根据权利要求3所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，所述S3中，将摇瓶培养后的菌种分别进行发酵处理，其中进行发酵处理时采用微孔压差法打开接种阀，且进行发酵在酒精灯火焰的保护下将摇瓶内的菌种接入种子罐，其中进行菌种发酵时发酵温度保持在20-40℃，发酵时间为20-36h，同时发酵过程中由人工通过监控系统对发酵情况进行实时监测，其中所述实时监测是由人工通过监控系统对进行发酵的菌种进行观测，通过发酵过程中菌种的表面及生长速度进行判断，并通过判断结果进行处理，其中发酵过程中菌种的表面出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵异常，发酵过程中菌种的表面未出现病变或生长速度低于预测速度范围的阈值则判断为发酵正常，判断为发酵异常则由人工进行上报，由技术人员对发酵过程进行分析，并通过分析结果下达处理命令，判断为发酵正常则由人工继续进行实时监测直至发酵过程结束。
8.根据权利要求3所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，所述S4中，发酵完成由技术人员将菌种按比例进行混合接种，并在接种后向混合形成的菌种集群中加入氯化钠和葡萄糖的混合溶液制成益生菌制剂，其中所述混合溶液是由5％的氯化钠和8％的葡萄糖混合形成。
9.根据权利要求3所述的一种抑幽益生菌，其特征在于，所述S5中，对摇瓶菌种和种子罐营养液接种前、后分别进行取样镜检，并由技术人员通过镜检现象进行判断，通过判断结果进行处理，其中技术人员通过镜检现象判断为发生污染则停止菌种的培养接种，并计算出污染率，技术人员通过镜检现象判断为未发生污染则继续进行菌种的培养接种，并计算出培养接种成功率，同时将培养接种成功后制成的益生菌制剂进行试验，并计算出所述益生菌制剂的抑幽率。
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