CN114480197A - 一株侧孢短芽孢杆菌及菌剂与其在生物药肥中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一株侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583，已于2021年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24137；本发明提供的侧孢短芽孢杆菌高产植物生长素吲哚乙酸(IAA)，对植物促生作用显著，并且对植物根结线虫和植物放线菌病害防治作用显著。

Description

一株侧孢短芽孢杆菌及菌剂与其在生物药肥中的应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株侧孢短芽孢杆菌及菌剂与其在生物药肥中的应用。
背景技术
化肥在现代农业发展中发挥着巨大的作用，但随着化肥的过度使用，对农业生产有着极大的影响。同时化肥和农药的过度使用和残留，不仅影响植物生长，还污染土壤和水源，对人类的健康和环境造成极大的危害，需要加强保护生态环境和合理生产。生物药肥具有安全、环保、提高肥效和药效、简化操作、降低成本等优势。随着农业高速、高效的发展，应加强生物药肥的研究、开发及推广，从而提高农业的可持续发展。因此，当务之急是开发代替传统化肥的生物药肥，以适应绿色农业和可持续发展农业的趋势。
植物根际土壤中含有大量微生物，近年来根际微生物的研究已成为一个新的发展趋势。根际微生物一类对植物生长有害，一类可促进植物生长。能够促进植物生长、防治病害、增加作物产量的微生物被称为植物根际促生菌(Plant growthpromotingrhizobacteria，PGPR)。随着生物技术的兴起，根际促生菌的开发和利用对创造良好的根际生态环境、改善土壤性质、抑制病虫害的发生、降低化肥和农药的使用有着重要的作用，在保证现代农业可持续发展的同时又达到增产的目的。
现有技术中对短芽孢杆菌属(Brevibacillus)在促生以及生防作用方面都有相关报道，但是菌种不同作用效果存在显著差异，现有技术中对产生长素(IAA)含量高同时防治根结线虫以及放线菌作用显著的菌株报道较少。
中国专利文献CN110396485A(申请号：201910507692.1)公开了一种产生生长素的类短短芽孢杆菌及其应用，该专利文献中涉及的类短短芽孢杆菌BI07能够产生植物生长素，在添加了0.05％色氨酸的Tryptone的培养基中，其生长素(IAA)产量达36.1μg/mL，产量较低。
中国专利文献CN103756930A(申请号：201310643869.3)公开了一株花生根际生防菌及其制备方法和应用，该专利文献中涉及的侧孢短芽孢杆菌LX12，该菌种具有防治花生根腐病、白绢病疮痂病和褐斑病的作用，并未涉及高产生长素以及防治根结线虫的作用，并且引起马铃薯疮痂病的病原菌属于放线菌，而引起花生疮痂病的病原菌属于真菌，二者防治病原菌的种类不同。
中国专利文献CN1580242A(申请号：200410042433.X)公开了一种侧孢短芽孢杆菌、其发酵过程及应用，该专利文献中公开的侧孢短芽孢杆菌STP-B.lat具有裂解真菌、线虫功能，该侧孢短芽孢杆菌STP-B.lat分泌4种植物激素(Z、IPA、GA3、IAA)，其量达838.2μg/100mL(即8.382mg/L)产量较低。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一株侧孢短芽孢杆菌及菌剂与其在生物药肥中的应用。
本发明提供的侧孢短芽孢杆菌高产植物生长素吲哚乙酸(IAA)，对植物促生作用显著，并且对植物根结线虫和植物放线菌病害防治作用显著。本发明涉及的菌株可以用于发酵生产植物生长素，用于植物扦插、幼苗栽培、种子的生根促生、植物土传病害防治等方面。
本发明的技术方案
一株侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583，已于2021年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24137。
上述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株的主要生物学特性为：菌落形状呈规则圆形，边缘整齐，表面光滑，不透明，菌落颜色为乳白色，培养基颜色未见明显变化。细胞杆状，芽孢椭圆形。其接触酶、明胶水解呈阳性，柠檬酸盐利用、V-P测定、淀粉水解、苯丙氨酸脱氢酶实验呈阴性。
上述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583的培养方法，包括如下步骤：
(1)将侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583接种于固体培养基活化培养，制得活化菌株；
(2)将步骤(1)制得的活化菌株接种于种子液体培养基中，进行种子培养，制得种子液；
(3)将步骤(2)制得的种子液按体积百分比5-8％的接种量接种到液体培养基中，进行液体培养，制得初级发酵液；
(4)将步骤(3)制得的初级发酵液按体积百分比5-8％的接种量接种到发酵培养基中，进行发酵培养，制得发酵液。
根据本发明优选的，所述步骤(1)中，固体培养基为LB固体培养基。
根据本发明优选的，所述步骤(1)中，活化条件为35-37℃活化培养22-25h。
根据本发明优选的，所述步骤(2)中，种子液体培养基为LB液体培养基。
根据本发明优选的，所述步骤(2)中，种子培养条件为35-37℃、150-200rpm振荡培养17-20h。
根据本发明优选的，所述步骤(3)中，液体培养条件为35-37℃℃培养7-9h。
根据本发明优选的，所述步骤(3)中，液体培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl2 0.01％，余量水，pH7.0-7.2。
根据本发明优选的，所述步骤(4)中，发酵培养条件为35-37℃培养22-25h。
根据本发明优选的，所述步骤(4)中，发酵培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl2 0.01％，余量水，pH7.0-7.2。
根据本发明优选的，所述步骤(4)中，制得发酵液中，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株的菌液浓度为5.0×109～8.0×109CFU/g。
一种微生物菌剂，含有上述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583。
一种生物药肥，含有上述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583和/或上述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583的代谢物。
侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或上述微生物菌剂用于生产植物生长素。
根据本发明优选的，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或上述微生物菌剂用于生产吲哚乙酸。
侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或上述微生物菌剂在植物促生、植物生物防治、制备生物药肥中的应用。
根据本发明优选的，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或上述微生物菌剂在植物育苗促生、植物根结线虫防治、植物放线菌病害防治中的应用。
进一步优选的，所述植物为番茄、马铃薯。
进一步优选的，所述根据线虫为番茄根结线虫、植物放线菌病害为疮痂病。
有益效果
1、本发明提供的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583能够高产植物生长素IAA，产量可达81.06mg/L，该菌具有明显促生效果。
2、本发明提供的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583能够有效防治根结线虫，在番茄幼苗定植后施用该菌，其根结数量可减少75.02％，虫口密度下降83.73％，防治效果显著。
3、本发明提供的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583能够有效防治植物疮痂病，在马铃薯种植后施用该菌，防治效果为66.67％，防治效果显著。
附图说明
图1为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株的菌落形态照片。
图2为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株染色后显微镜观察照片。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。
实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
实施例1
菌种的分离鉴定及保藏
一、AMCC101583菌株的分离
来源于山东省临沂市费县，从番茄根际土壤中分离筛选出一株促生菌株，命名为AMCC101583菌株。
AMCC101583菌株的菌落形态照片见图1，染色后显微镜观察照片见图2。
由图1中可以看出，菌落形状呈规则圆形，边缘整齐，表面光滑，不透明，菌落颜色为乳白色，培养基颜色未见明显变化。
AMCC101583菌株接触酶、明胶水解呈阳性，柠檬酸盐利用、V-P测定、淀粉水解、苯丙氨酸脱氢酶实验呈阴性。
AMCC101583菌株的16Sr DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
二、AMCC101583菌株的保藏
经鉴定，AMCC101583菌株为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)，已于2021年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC；地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24137。
实施例2
AMCC101583菌剂的制备
侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583的培养方法，步骤如下：
(1)将超低温冻存的侧孢短芽孢杆菌AMCC101583划线接种于LB固体培养基平板上，于37℃培养24h，制得活化菌株；
(2)将步骤(1)制得的活化菌株接种于装有LB液体培养基的三角瓶中，于恒温振荡器中37℃，180rpm振荡培养18h，制得种子液；
(3)将步骤(2)制得的种子液以8％的接种量接种到液体培养基中，于37℃培养8h，制得初级发酵液；
所述液体培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl2 0.01％，余量水，pH7.0-7.2。
(4)将步骤(3)制得的初级发酵液以5％的接种量接种到发酵培养基中，37℃培养24h，制得发酵液；
所述发酵培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl2 0.01％，余量水，pH7.0-7.2。
经检测，侧孢短芽孢杆菌AMCC101583发酵液的浓度为5.0×109～8.0×109CFU/g。
实施例3
AMCC101583菌株产IAA能力测定
一、在LB液体培养基中培养
用接种环挑取斜面保存的AMCC101583菌株划线于LB(酵母膏0.5％，蛋白胨1％，氯化钠1％，琼脂1.6％，pH7.0，121℃，20min高压灭菌，均为质量百分比)平板上活化；将活化好的菌种于LB液体培养基(酵母膏0.5％，蛋白胨1％，氯化钠1％，pH7.0，添加0.05％的L型色氨酸，H2O 1000mL，121℃，20min高压灭菌，均为质量百分比)中，30℃下，180rpm摇床培养48h，3000rpm离心15min，收集上清液，每毫升上清液加1mL Salkowski反应液(50mL35％HClO4溶液加入1mL 0.5mol/L FeCl3溶液，混合均匀)。在暗处30℃混合反应30min。测定OD530值。
标准曲线的制作：称取吲哚乙酸(indole-3-acetic acid，IAA)的标准品，用双蒸水分别配制配置浓度为2、3、4、5、6mg/L的IAA标准溶液，并与Salkowski比色液按体积比1：1混合，室温、避光放置30min，然后分别测定各浓度的OD530,得到IAA标准曲线。
结果表明：AMCC101583菌株在培养48h后可产生的18.59mg·L-1IAA。
二、在MM培养基中培养
用接种环挑取斜面保存的AMCC101583菌株划线于LB培养基(酵母膏0.5％，蛋白胨1％，氯化钠1％，琼脂1.6％，pH7.0，121℃，20min高压灭菌，均为质量百分比)平板上活化；将活化好的菌种于MM培养基(1％葡萄糖；50mM KH2P04；50mM K2HPO4；25mM(NH4)2SO4；5mMMgSO4；添加0.05％的L型色氨酸，H2O 1000mL)中，30℃下，180rpm摇床培养48h，3000rpm离心15min，收集上清液，每毫升上清液加1mL Salkowski反应液(50mL35％HClO4溶液加入1mL0.5mol/L FeCl3溶液，混合均匀)。在暗处30℃混合反应30min。测定OD530值。
标准曲线的制作：称取吲哚乙酸(indole-3-acetic acid，IAA)的标准品，用双蒸水分别配制浓度为2、3、4、5、6mg/L的IAA标准溶液，并与Salkowski比色液按体积比1：1混合，室温、避光放置30min，然后分别测定各浓度的OD530,得到IAA标准曲线。
结果表明：AMCC101583菌株在培养48h后可产生的81.06mg·L-1IAA。
实施例4
实施例2制备的AMCC101583菌剂的促生长实验
选取长势一致的番茄幼苗进行定植。定植时，将AMCC101583菌剂用无菌水进行不同浓度的稀释，稀释倍数分别为300、400、500、600、700、1000、1500倍，分别为处理T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7，以无菌水为空白对照即CK，对番茄进行蘸根处理。
定植20天后，每个处理随机选取10株幼苗进行测定。用卷尺测量幼苗从茎基部至生长点为株高，游标卡测量幼苗下胚轴中间部位的直径为茎粗。用天平称量番茄地上、下部鲜重；干重先在通风鼓风干燥箱105℃下杀青30min，然后在85℃下烘至恒质量后用分析天平称量；采用TTC法测定根系活力；使用专业版WinRHIZO根系分析系统测定根系构型参数,测定指标包括根系总长度、根系表面积和根体积；按照公式壮苗指数：壮苗指数＝(茎粗/株高+地下部干重/地上部干重)×全株干重(参考文献：甜椒穴盘苗壮苗指数及其与苗期性状的相关性研究，山东农业大学学报(自然科学版),2004)
结果表明：侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583对番茄幼苗期具有明显的促生效果，经检测，该菌在500倍的稀释效果最好，壮苗指数增加103.70％；根长增加22.24％，根表面积增加23.68％；根体积增加48.70％；根系活力增长29.33％。其他稀释倍数也增加，具体如表1、2、3、4、5所示。
表1 AMCC101583菌剂对番茄植株的促生效果
Figure BDA0003498435170000061
Figure BDA0003498435170000071
表2 AMCC101583菌剂对番茄鲜重的促生效果
Figure BDA0003498435170000072
表3 AMCC101583菌剂对番茄干重的促生效果
Figure BDA0003498435170000073
Figure BDA0003498435170000081
表4 AMCC101583菌剂对番茄根系促生效果
Figure BDA0003498435170000082
表5 AMCC101583菌剂对番茄根系活力的影响
Figure BDA0003498435170000083
Figure BDA0003498435170000091
实施例5
实施例2制备的AMCC101583菌剂的盆栽抗番茄根结线虫病实验
盆栽实验于山东农业大学温室内进行，所用土壤采集自山东农业大学试验站，虫口密度为20条/g土，线虫经分子生物鉴定为南方根结线虫。共设置3个处理：(1)CK，12.5kg虫土+清水；(2)T1，12.5kg虫土+噻唑磷稀释液；(3)T2，12.5kg虫土+菌剂，所述菌剂用量为20kg/亩(以番茄每亩定植2200株计算盆栽中每株的菌剂用量)。每个处理6个重复。常规管理，移栽120d后将番茄整株取样，统计根结数、虫口密度，计算病情指数和防治效果，具体方法参照Affokpon et al.(Biocontrol potential of native Trichoderma isolatesagainst root-knot nematodes in West African vegetable production systems,SoilBiology and Biochemistry，2011)结果见表6。
表6 AMCC101583菌剂的盆栽抗番茄根结线虫病实验
Figure BDA0003498435170000092
盆栽实验结果表明：侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌剂处理含虫病土，种植120d后其根结数量可减少75.02％，虫口密度下降83.73％，防治效果可达到71.43％。
实施例6
实施例2制备的AMCC101583菌剂的盆栽抗马铃薯疮痂病实验
盆栽实验于山东农业大学生命科学学院试验站，共设为三个处理：(1)CK：不加疮痂病病原菌和侧孢短芽孢杆菌；(2)T1：将马铃薯疮痂病病原菌Streptomycesbottropensis AMCC 40023 106CFU/mL的菌悬液100mL灌根接种；(3)T2:将马铃薯疮痂病病原菌Streptomyces bottropensis AMCC 40023 106CFU/mL的菌悬液100mL和侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌剂100mL灌根接种；每个处理6个重复，常规管理。在马铃薯收获期釆样检测。收获时进行调查，计算发病率、病情指数、防治效果。具体方法参照：Hao J.J.,et al.(Characterization of a new Streptomyces strain,DS3024,that causes potato common scab.Plant Dis.,2009,93:1329-1334)，结果见表7。
表7 AMCC101583菌剂的盆栽抗马铃薯疮痂病实验
Figure BDA0003498435170000101
盆栽实验结果表明：侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌剂处理含马铃薯疮痂病病原菌土，种植至收获期其发病率为66.67％，病情指数为27.78％，防治效果为66.67％。
综上，本发明筛选获得了一株侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株，该菌株能够高产植物生长素IAA，产量可达81.06mg/L，该菌种具有明显促生效果，将番茄幼苗定植前用其蘸根，从而促进了番茄幼苗的生长；经检测，该菌在500倍的稀释效果最好，壮苗指数增加103.70％；根长增加22.24％，根表面积增加23.68％；根体积增加48.70％；根系活力增长29.33％。
本发明涉及的菌株可用于防治番茄根结线虫病，利用本发明涉及的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株有效防治番茄根结线虫病，在番茄幼苗定植后施加本发明涉及的菌剂处理含虫病土，番茄种植120d后，其根结数量可减少75.02％，虫口密度下降83.73％。
本发明涉及菌株还可用于防治马铃薯疮痂病，利用本发明涉及的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583菌株有效防治马铃薯疮痂病，种植后种植施加本发明涉及的菌剂处理含马铃薯疮痂病病原菌的土，收获期时其发病率为66.67％，病情指数为27.78％，防治效果为66.67％。
本发明涉及的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583能够高产植物生长素IAA，又具有显著生物防治作用，可以用于制备生物药肥。
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cggggggggg tgctatacat gcaagtcgag cgagggtctt cggaccctag cggcggacgg 60
gtgagtaaca cgtaggcaac ctgcctgtga gactgggata acatagggaa acttatgcta 120
ataccggata gggttttgct tcgcctgaag cgaaacggaa agatggcgca agctatcact 180
tacagatggg cctgcggcgc attagctagt tggtgaggta acggctcacc aaggcgacga 240
tgcgtagccg acctgagagg gtgaccggcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc 300
tacgggaggc agcagtaggg aattttccac aatggacgaa agtctgatgg agcaacgccg 360
cgtgaacgat gaaggctttc gggtcgtaaa gttctgttgt tagggaagaa acagtgctat 420
ttaaataagg tagcaccttg acggtaccta acgagaaagc cacggctaac tacgtgccag 480
cagccgcggt aatacgtagg tggcaagcgt tgtccggaat tattgggcgt aaagcgcgcg 540
caggtggcta tgtaagtctg atgttaaagc ccgaggctca acctcggttc gcattggaaa 600
ctgtgtagct tgagtgcagg agaggaaagt ggtattccac gtgtagcggt gaaatgcgta 660
gagatgtgga ggaacaccag tggcgaaggc gactttctgg cctgtaactg acactgaggc 720
gcgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatga 780
gtgctaggtg ttaggggttt caataccctt agtgccgcag ctaacgcaat aagcactccg 840
cctggggagt acgctcgcaa gagtgaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg 900
gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgaagaacct taccaggtct tgacatccca 960
ctgaccgctc tagagataga gcttcccttc ggggcagtgg tgacaggtgg tgcatggttg 1020
tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccttatctt 1080
tagttgccag cattcagttg ggcactctag agagactgcc gtcgacaaga cggaggaagg 1140
cggggatgac gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt gctacaatgg 1200
ttggtacaac gggatgctac ttcgcgagaa gatgctaatc tcttaaaacc aatctcagtt 1260
cggattgtag gctgcaactc gcctacatga agtcggaatc gctagtaatc gcggatcagc 1320
atgccgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc acgggagttt 1380
gcaacacccg aagtcggtga ggtaaccgta aggagccagc cgccgaaggt gggaaaattt 1440
gt 1442

Claims (10)

1.一株侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583，已于2021年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24137。
2.权利要求1所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583接种于固体培养基活化培养，制得活化菌株；
(2)将步骤(1)制得的活化菌株接种于种子液体培养基中，进行种子培养，制得种子液；
(3)将步骤(2)制得的种子液按体积百分比5-8％的接种量接种到液体培养基中，进行液体培养，制得初级发酵液；
(4)将步骤(3)制得的初级发酵液按体积百分比5-8％的接种量接种到发酵培养基中，进行发酵培养，制得发酵液。
3.如权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中，固体培养基为LB固体培养基；
优选的，所述步骤(1)中，活化条件为35-37℃活化培养22-25h。
4.如权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述步骤(2)中，种子液体培养基为LB液体培养基；
优选的，所述步骤(2)中，种子培养条件为35-37℃、150-200rpm振荡培养17-20h。
5.如权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中，液体培养条件为35-37℃℃培养7-9h；
优选的，所述步骤(3)中，液体培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl20.01％，余量水，pH7.0-7.2；
优选的，所述步骤(4)中，发酵培养条件为35-37℃培养22-25h；
优选的，所述步骤(4)中，发酵培养基每升组分如下，按质量百分数计：
玉米粉2％，豆饼粉3％，麸皮2％，柠檬酸钠0.5％，KH2PO4 0.03％，K2HPO4 0.01％，CaCl20.01％，余量水，pH7.0-7.2；
优选的，所述步骤(4)中，制得发酵液中，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacilluslaterosporus)AMCC101583菌株的菌液浓度为5.0×109～8.0×109CFU/g。
6.一种微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583。
7.一种生物药肥，含有权利要求1所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacilluslaterosporus)AMCC101583和/或权利要求1所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacilluslaterosporus)AMCC101583的代谢物。
8.权利要求1所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或权利要求6所述微生物菌剂用于生产植物生长素。
9.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacilluslaterosporus)AMCC101583或所述微生物菌剂用于生产吲哚乙酸。
10.权利要求1所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或权利要求6所述微生物菌剂在植物促生、植物生物防治、制备生物药肥中的应用；
优选的，所述侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)AMCC101583或所述微生物菌剂在植物育苗促生、植物根结线虫防治、植物放线菌病害防治中的应用；
优选的，所述植物为番茄、马铃薯；
优选的，所述根据线虫为番茄根据线虫、植物放线菌病害为疮痂病。
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