CN112410244A - 一种阿氏芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一株阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)JNJ266及其应用，属于微生物技术领域。该菌株已于2020年8月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其生物保藏号为CGMCC No.20483。其具有解磷解钾，产蛋白酶、IAA、铁载体等功能，在盆栽条件下，本发明的阿氏芽孢杆菌发酵液在核桃定苗后灌根处理，施用JNJ266发酵液后，核桃的径粗、株高、分枝数、湿重和干重都发生了增长，叶绿素含量、核桃叶片酶活、核桃土壤酶活也都提高了；并且干旱条件下，施用JNJ266发酵液后的核桃相对于对照组核桃的径粗、株高、分枝数、湿重和干重都发生了增长，叶绿素含量、核桃叶片酶活、核桃土壤酶活也都提高了。本发明筛选获得的阿氏芽孢杆菌具有良好的核桃促生抗旱功效。

Description

一种阿氏芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及微生物资源技术领域，具体涉及一种阿氏芽孢杆菌及其应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
核桃(Juglans regia L.)是胡桃科植物，在我国有悠久的种植历史，是我国重要的经济林作物，核桃树的各部分都有重要的经济价值。核桃开始产自波斯，有7000年的种植历史，全球种植范围极广，对人类来说，核桃是一种十分悠久的树生食物。尽管在核桃的产量方面我国遥遥领先于其他国家，但我国核桃产业的所占份额和售价在国际市场中未能赶超美国等国家，核桃的质量有待提高，我国迫切需要提高种植技术，在绿色环保的基础上实现质的飞越。我国核桃种植地主要在山西、云南、新疆、四川、山东等十个省，预计在2020年核桃种植面积达到507万hm2，产量达580万吨。在国家的号召下，核桃产业迅速发展，但还是受到了干旱、土壤贫瘠、病害等因素的制约，为了提高产量，大量使用化学肥料造成土壤退化。将有益微生物进行发酵后施用于土壤或植物表面的微生物接种剂可以促进植物生长，其中含有的PGPR具有产IAA、产抗生素、解磷解钾、固氮等功能，除了提高了作物产量，还改善作物品质，一些微生物接种剂可以帮助植物抵抗病虫害，帮助植物抵抗干旱等逆境，减少了化学农药的使用，提高土壤活力，改善土壤环境，实现种植业绿色环保的可持续发展。
土壤中有很多不能溶解或者难以溶解的磷，植物无法直接对这些磷进行吸收利用，我国耕种过程中施加磷肥，利用率很低，而土壤中解磷菌可以将这些磷转化为植物可以直接吸收利用的磷形态。
钾是植物正常生长发育过程中必不可少的元素，参与光合作用，参与合成植物生长所需蛋白质，提高植物抗性。土壤中钾元素含量丰富，但多以矿化钾形式存在，植物无法直接利用，解钾菌又叫硅酸盐菌，可以将矿化钾分解转化，以供给植物利用，同时可以改善土壤环境，抵抗病原菌。
蛋白酶是能够催化水解蛋白质及多肽的一类酶，广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。蛋白酶降解土壤中的蛋白等物质，形成植株可以吸收的氨基酸，降解落叶等有机物来促进自然界的物质循环，改善土壤品质。
吲哚乙酸(IAA)是一种植物激素，经研究发现通过微生物次级代谢可以产生，且可以来调节植物生长，促进细胞增长，加快细胞分裂分化，调节根系发育，根际促生菌代谢产生的IAA可以帮助植物根系更好的发育生长。
微生物可以产生一种与Fe3+特异性结合的物质，称为铁载体，可以将土壤中难以利用的铁元素转化为植物可以利用的形式，提高铁元素的利用率。铁载体是微生物为了满足自身生长需求所需铁元素而产生的，在植物根际处的这类微生物产生的铁载体有利于植物吸收铁元素，帮助植物生长，同时掠夺病原菌需要的铁元素，使病原菌无法正常生长，从而保护植物。
目前，关于芽孢杆菌产蛋白酶和细菌产铁载体的报道较多，但关于同时具有解磷解钾、产蛋白酶、IAA、铁载体和在核桃上显著促生抗旱作用的芽孢杆菌报道却较少。
发明内容
为了解决现有技术中存在的技术问题，本发明的目的是提供一种解磷解钾、产蛋白酶、IAA和产铁载体，并且可以增强核桃苗的长势，提高叶片的光合能力和SOD、过氧化氢酶活性，并且可以调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构，增加有益菌的丰富度，明显促进核桃苗的抗干旱能力的芽孢杆菌及其应用。
具体地，本发明的技术方案如下所述：
在本发明的第一方面，本发明提供一种芽孢杆菌，该菌株分类命名为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)JNJ266，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2020年8月5日，保藏编号：CGMCC No.20483。该菌株的16S rDNA基因序列见SEQ NO.1。
所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物也属于本发明的保护范围。
所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物是将所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266接种于液体发酵培养基中进行发酵培养得到的；
其中，所述液体发酵培养基优选为LB液体培养基；
发酵培养条件具体为：将斜面保存的菌种转接到装有5ml LB液体培养基的试管中，放在恒温摇床中培养12h，温度：37℃，转速：180rpm；将活化好的菌液按1％接种量接入到50ml LB液体培养基中，放入摇床培养24h，温度：37℃，转速：180rpm，制成发酵液；
所述LB液体培养基组成为：0.5％酵母粉，1％蛋白胨，1％氯化钠和1000ml蒸馏水，pH7.0，配制培养基于121℃灭菌20min。
在本发明的第二方面，本发明提供一种微生物菌剂，其含有第一方面所述的阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或含阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物。
在本发明的第三方面，本发明提供一种第一方面所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或第二方面所述微生物菌剂在解磷和/或解钾和/或产蛋白酶和/或产IAA和/或产铁载体和/或核桃促生抗旱和/或调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构中的应用。
在本发明的第四方面，本发明提供一种核桃促生抗旱的方法，所述方法包括：在核桃定苗后，向核桃植株根际土壤中施用第一方面阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物和/或第二方面所述微生物菌剂。
本发明的具体实施方式具有以下有益效果：
在盆栽条件下，用本发明的芽孢杆菌的发酵液在核桃定苗后灌根处理，能够改善核桃苗生长时期的营养状况，促进苗期地径的生长，提高植株生物量，增强光合作用，提高叶片和土壤酶活；
干旱条件下本发明的芽孢杆菌的发酵液能够显著提高盆栽核桃株高、茎粗、分支数、植株干湿重、光合作用与叶绿素、叶片酶活及土壤酶活，有力的证明了本菌株的促生抗旱效果。
可在硅酸盐培养基中表现出解钾特性、在有机磷培养基中表现出解磷特性、在脱脂奶粉培养基中可以产生蛋白酶、在添加色氨酸的LB液体培养基中可以产IAA、在CAS培养基中可以产铁载体；
在盆栽条件下，用本发明的菌株的菌液在核桃幼苗初期灌根处理后，能够增强核桃苗地抗旱效果，提高了核桃株高、地径以及茎叶干湿重，核桃光合作用能力得到提高；核桃叶片超氧化物歧化酶和过氧化氢酶表现出较高活性；土壤脲酶、土壤蔗糖酶活性与干旱对照组相比均有提高；
土壤菌群结构分析表明，干旱条件下，本发明菌株处理的根际土壤细菌多样性降低、真菌多样性增加，但细菌和真菌的丰富度都有增加，且土壤细菌群落结构中芽孢杆菌等有益菌属丰度较高。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明实施例1中阿氏芽孢杆菌的菌体形态图；
图2为本发明实施例1中阿氏芽孢杆菌的菌落形态图；
图3为本发明实施例3中盆栽试验抗旱效果对比图；
图4为本发明实施例3中叶片荧光成像仪伪彩显示图；
图5为基于16S rDNA的JNJ266系统发育树；
图6为本发明实施例3中土壤真菌不同处理间属水平物种分布；
图7为本发明实施例3中土壤细菌不同处理间属水平物种分布。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。本发明所使用的试剂或原料均可通过常规途径购买获得，如无特殊说明，本发明所使用的试剂或原料均按照本领域常规方式使用或者按照产品说明书使用。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明的一种实施方式中，提供一株阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266，该菌株已于2020年8月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：20483。
在本发明中，通过测定该菌株的16S rDNA基因序列(见SEQ ID NO.1)并通过形态特征及生理生化指标测定，最终确定该菌株属于阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)。
本发明的又一具体实施方式中，提供了上述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的培养方法，具体为：将斜面保存的菌种转接到装有5ml LB液体培养基的试管中，放在恒温摇床中培养12h，温度：37℃，转速：180rpm；将活化好的菌液按1％接种量接入到50mlLB液体培养基中，放入摇床培养24h，温度：37℃，转速：180rpm，发酵培养。
其中，所述LB液体培养基组成为：0.5％酵母粉，1％蛋白胨，1％氯化钠和1000ml蒸馏水，121℃灭菌20min，pH7.0。
上述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的培养方法获得的发酵产物也属于本发明的保护范围。
本发明的又一种实施方式中，提供一种微生物菌剂，其含有第一方面所述的阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或含阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物。
在一种具体的实施方式中，所述菌剂还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。
本发明的又一具体实施方式中，所述固体载体为矿物材料、生物材料或高分子化合物；所述矿物材料为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石、草炭土和硅藻土中的至少一种；所述生物材料为各类作物的秸秆、松壳、稻草、花生壳、玉米粉、豆粉、淀粉、草炭和动物的粪便中的至少一种；所述高分子化合物为聚乙烯醇和/或聚二醇。
本发明的又一具体实施方式中，所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂为癸烷和/或十二烷。
本发明的又一种实施方式中，所述菌剂的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
本发明的又一种实施方式中，提供上述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或微生物菌剂在解磷和/或解钾和/或产蛋白酶和/或产IAA和/或产铁载体和/或核桃促生抗旱和/或调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构中的应用。
所述核桃促生抗旱和/或调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构包括但不限于：在干旱条件下促进苗期地径的生长；提高植株生物量，如提高株高、茎粗、分支数、植株干湿重；增强光合作用，增加叶绿素含量；提高叶片酶活和土壤酶活；调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构。
本发明的又一种实施方式中，提供一种核桃促生抗旱的方法，所述方法包括：在核桃定苗后，向核桃植株根际土壤中施用第一方面阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物和/或第二方面所述微生物菌剂。所述施用方式包括但不限于喷施、灌注。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1菌株鉴定
本发明通过对筛选获得的一株具有核桃促生抗旱效果的菌株，经16S rDNA以及生理生化指标鉴定，确定该菌株为阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266。如图1-2所示，所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的菌体及菌落特征为：JNJ266在LB平板培养基(酵母粉0.5％，蛋白胨1％，氯化钠1％，蒸馏水1000ml，琼脂1.6％，pH 7.0，121℃灭菌20min)上培养24h后菌落呈规则圆状，白色，无凸起，无褶皱；菌体呈杆状，产芽孢，革兰氏阳性。
该菌株的生理生化特征为：淀粉水解试验阴性，明胶液化试验阳性，接触酶试验阳性，V-P试验阴性，吲哚试验阴性，七叶苷试验阴性，葡萄糖发酵试验阴性，阿拉伯糖发酵试验阴性，山梨醇发酵试验阴性，甘露醇发酵试验阴性，棉子糖发酵试验阴性，鼠李糖发酵试验阴性。
所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的16S rDNA基因序列如下：
GGGCCTATACATGGCAAGGTCGAGCGAACTGATTAGAAGCTTGCTTCTATGACGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTTCGGGAAACCGAAGCTAATACCGGATAGGATCTTCTCCTTCATGGGAGATGATTGAAAGATGGTTTCGGCTATCACTTACAGATGGGCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCAACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTACGAGAGTAACTGCTCGTACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGAAAAGCGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTTTTTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGAGGGTTTCCGCCCTTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAACTCTAGAGATAGAGCGTTCCCCTTCGGGGGACAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAAAGGGCTGCAAGACCGCGAGGTCAAGCCAATCCCATAAAACCATTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGGAGTAACCGTAAGGAGCTAGCCGCCTAAGGTGAACCCG
实施例2阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266解磷解钾、产蛋白酶、产IAA、产铁载体试验
检测阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266产蛋白酶、解磷、产铁载体、产IAA和解钾能力，结果如表1-4所示。
表1蛋白酶产生结果
Figure BDA0002712442370000061
Figure BDA0002712442370000071
表2解有机磷结果
Figure BDA0002712442370000072
表3产IAA测定结果
Figure BDA0002712442370000073
表4 JNJ266功能效果
Figure BDA0002712442370000074
注：“+”表示有功能
实施例3阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的促生抗旱及对土壤的影响试验
发酵液的制备：将斜面保存的菌种转接到装有5ml LB液体培养基的试管中，放在恒温摇床中培养12h，温度：37℃，转速：180rpm；将活化好的菌液按1％接种量接入到50mlLB液体培养基中，放入摇床培养24h，温度：37℃，转速：180rpm，制成发酵液。
将发酵液在核桃定苗后取10ml，稀释至1000ml后进行灌根处理。以不加菌液的处理为对照；干旱处理和对照组，在施菌液同时，浇水后不再浇水，至试验结束(施菌后培养60天)。
灌根时的用量为：盆栽试验中每株10mL，菌液浓度为2*108cfu/ml，稀释至1000ml。
JNJ266的促生和抗旱效果以及对土壤酶活、土壤细菌和真菌群落结构的影响如表5-8和附图3-7所示。
表5植株农艺性状抗旱效果
Figure BDA0002712442370000075
表6叶片光合作用与叶绿素含量
Figure BDA0002712442370000081
表7核桃叶片酶活
Figure BDA0002712442370000082
表8根际土壤酶活
Figure BDA0002712442370000083
由表5-8和图2-7可以看出，从农艺性状来看干旱处理组(JNJ266)盆栽生长情况较好，60d后，干旱处理组(JNJ266)与干旱对照组(CK)相比，株高增长值提高了92.78％，茎粗增长值提高了38.56％，分支数增长值提高了63.75％。地上部鲜重提高了36.17％，干重提高了40.68％。可以看出JNJ266能够显著促进核桃植株在干旱条件下的生长。
施用JNJ266发酵液后提高了核桃幼苗叶片叶绿素含量，增强光化学效率。干旱处理组(JNJ266)叶绿素含量与干旱对照组(CK)相比达到极显著性差异(p<0.01)，提高了48.21％；暗适应下光系统Ⅱ最大光化学效率与干旱对照组(CK)相比达到极显著性差异(p<0.01)，与干旱对照组(CK)相比提高了9.84％。
施用JNJ266发酵液后还提高了核桃幼苗叶片酶含量。干旱处理组(JNJ266)中叶片的超氧化物歧化酶含量比干旱对照组(CK)提高了50.28％，过氧化氢酶含量提高了50.00％。并且提高了土壤酶活，在干旱处理组(JNJ266)中的蔗糖酶含量比干旱对照组(CK)提高了14.42％，脲酶含量提高了7.04％。
此外，干旱处理组(JNJ266)土壤细菌群落中特有OTU3603个。在相似度97％水平下将测序得到的序列进行多样性聚类分析，干旱处理组(JNJ266)的Shannon指数和Pielou’sevenness指数与干旱对照组(CK)相比都有所降低说明根际土壤细菌群落多样性和均匀度有一定降低，如下表9所示。
表9根际土壤细菌和真菌群落结构多样性和丰富度指数
Figure BDA0002712442370000091
在属水平上对土壤细菌群落结构分析发现干旱处理组(JNJ266)相对丰度增加的属是Subgroup 10、Dongia、戴沃斯氏菌属、生丝微菌属、土微菌属、类诺卡氏属、微杆菌属、红游动菌属、硝化螺旋菌属、Nordella、Aquicella、Bryobacter、SWB02、Chryseolinea、IS-44、纤维菌属、芽孢杆菌属、Terrimonas、芽单胞菌属、anaerobic digester metagenome、特吕珀菌属；干旱处理组(JNJ266)丰度增加的菌属多为有益菌属。在干旱条件下利用菌剂处理使土壤细菌群落中有益菌属丰度提高。
并且改善了真菌群落结构。干旱处理组(JNJ266)特有OTU有743个。在相似度97％水平下将测序得到的序列进行多样性聚类分析，与干旱对照组(CK)相比，干旱处理组(JNJ266)的Shannon指数和Chao1指数均有所提高，根际土壤真菌群落多样性和丰富度有所提高，如表9所示。
在属水平上分析发现干旱处理组(JNJ266)根际土壤中Iodophanus、曲霉菌属、Sagenomella、Zopfiella、管柄囊霉属、青霉属、Herpotrichia、支顶孢属、Tausonia、四枝孢菌属、头梗霉属、油壶菌属、球囊霉属等丰度明显提高。
本发明筛选的菌株在盆栽条件下对核桃抗旱效果的研究，所采用的试验方法更贴近实际应用状态，通过直接以土壤种植核桃为试验样品，接近于核桃的农业种植方式，这也有力地说明了在生产种植中对核桃抗旱方面的效果是非常明显的。同时，本发明检测了盆栽核桃株高、茎粗、分支数、植株干湿重、光合作用与叶绿素、叶片酶活及土壤酶活，有力的证明了本发明菌株的抗旱效果。另外，目前关于阿氏芽孢杆菌在植物抗旱上的应用鲜有报道，这说明本发明筛出的菌株丰富了菌种资源。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东农业大学
<120> 一种阿耶波多氏芽孢杆菌及其应用
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1447
<212> DNA
<213> 16S rDNA基因序列
<400> 1
gggcctatac atggcaaggt cgagcgaact gattagaagc ttgcttctat gacgttagcg 60
gcggacgggt gagtaacacg tgggcaacct gcctgtaaga ctgggataac ttcgggaaac 120
cgaagctaat accggatagg atcttctcct tcatgggaga tgattgaaag atggtttcgg 180
ctatcactta cagatgggcc cgcggtgcat tagctagttg gtgaggtaac ggctcaccaa 240
ggcaacgatg catagccgac ctgagagggt gatcggccac actgggactg agacacggcc 300
cagactccta cgggaggcag cagtagggaa tcttccgcaa tggacgaaag tctgacggag 360
caacgccgcg tgagtgatga aggctttcgg gtcgtaaaac tctgttgtta gggaagaaca 420
agtacgagag taactgctcg taccttgacg gtacctaacc agaaagccac ggctaactac 480
gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttat ccggaattat tgggcgtaaa 540
gcgcgcgcag gcggtttctt aagtctgatg tgaaagccca cggctcaacc gtggagggtc 600
attggaaact ggggaacttg agtgcagaag agaaaagcgg aattccacgt gtagcggtga 660
aatgcgtaga gatgtggagg aacaccagtg gcgaaggcgg ctttttggtc tgtaactgac 720
gctgaggcgc gaaagcgtgg ggagcaaaca ggattagata ccctggtagt ccacgccgta 780
aacgatgagt gctaagtgtt agagggtttc cgccctttag tgctgcagct aacgcattaa 840
gcactccgcc tggggagtac ggtcgcaaga ctgaaactca aaggaattga cgggggcccg 900
cacaagcggt ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg 960
acatcctctg acaactctag agatagagcg ttccccttcg ggggacagag tgacaggtgg 1020
tgcatggttg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa 1080
cccttgatct tagttgccag catttagttg ggcactctaa ggtgactgcc ggtgacaaac 1140
cggaggaagg tggggatgac gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt 1200
gctacaatgg atggtacaaa gggctgcaag accgcgaggt caagccaatc ccataaaacc 1260
attctcagtt cggattgtag gctgcaactc gcctacatga agctggaatc gctagtaatc 1320
gcggatcagc atgccgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc 1380
acgagagttt gtaacacccg aagtcggtgg agtaaccgta aggagctagc cgcctaaggt 1440
gaacccg 1447

Claims (10)

1.一株阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)JNJ266，该菌株已于2020年8月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号：20483。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包含权利要求1所述的阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物。
3.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266的发酵产物是将所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266接种于液体发酵培养基中进行发酵培养得到的。
4.如权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，所述液体发酵培养基为LB液体培养基。
5.如权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，发酵培养条件具体为：在30～40℃(优选为37℃)培养20～30h(优选为24h)，转速：180-200rpm。
6.如权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂还包括载体；优选的，所述载体为固体载体或液体载体。
7.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的剂型为液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
8.权利要求1所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或权利要求2-7任一权利要求所述的微生物菌剂在解磷和/或解钾和/或产蛋白酶和/或产IAA和/或产铁载体和/或核桃促生抗旱和/或调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构中的应用。
9.权利要求8所述应用，其特征在于，所述核桃促生抗旱包括但不限于：在干旱条件下促进苗期地径的生长；提高植株生物量，如提高株高、茎粗、分支数、植株干湿重；增强光合作用，增加叶绿素含量；提高叶片酶活和土壤酶活；调节核桃根际土壤细菌和真菌群落结构。
10.一种核桃促生抗旱的方法，所述方法包括：在核桃定苗后，向核桃植株根际土壤中施用权利要求1所述阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai)JNJ266和/或权利要求2-7任一权利要求所述的微生物菌剂。
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