CN114366679A - 一种含有有机酸微粒的脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种脂质体包含有机酸乳化微粒及其制备方法。本发明脂质体，以单室形式包裹有机酸微粒构成，该组合物包含按照质量百分比为1％ˉ5％的有机酸、1％ˉ10％乳化剂、10％ˉ30％脂质材料，其余为水；其中有机酸为果胶酸、熊果酸、委陵菜酸、杜鹃花酸的混合物，其混合质量份数比例为：1：1ˉ2：1：1；乳化剂为聚甘油酯硬脂酸酯或聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯的混合物，聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯以质量份数比例1：1。本发是胆一种稳定性好、靶向性、缓释控释效果好、且对皮肤或者粘膜有抑菌、消炎作用的的脂质体。

Description

一种含有有机酸微粒的脂质体及其制备方法

技术领域

本发明涉及化妆品及口腔护理中的载体技术领域，具体涉及一种脂质体包含有机酸乳化微粒及其制备方法。

背景技术

果胶酸由柑橘皮提取，是由半乳糖醛酸和半乳糖醋酸酯所组成的杂多糖酸，是植物细胞壁中的组分，可以抗龋齿和防治口腔溃疡。果胶酸是酸性物质，其一部分羧基易结合成钙盐和镁盐。

杜鹃花酸在杜鹃花、除虫菊和可可豆脂中存在。杜鹃花酸有抗菌性，既可用作食品和化妆品的防腐剂，又可用于口腔卫生用品防治龋齿。微溶于水。

熊果酸多存在于栀子果实和鼠尾草，为白色针状细结晶，易有机溶剂，不溶于水。熊果酸在口腔卫生用品中应用可防止牙病和龋齿。

委陵菜酸存在于委陵菜叶，微溶于水，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢菌有抑制作用。

上述有机酸均来自天然植物，获取途径便捷，同时均具有抑菌、消炎的效果。虽然有机酸不易被氧化，但是有异味，不耐硬水，对皮肤或者粘膜存在刺激性等问题，使其在化妆品或者口腔用品中使用存在一定局限。

聚甘油脂肪酸酯兼有亲水、亲油双重特性，具有良好乳化、分散、湿润、稳定、起泡等多重性能。在人体代谢过程中可分解，从而参与代谢，被人体利用，具有高度安全性，是一类高效安全添加剂，被联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)推荐使用。同时聚甘油脂肪酸酯在酸性、碱性和中性环境中相当稳定，遇含盐量较高时也有很好乳化性。聚甘油酯无色、无味、不易发生水解，对产品外观、气味均无不良影响；可与其它乳化剂复配，具有良好协同增效作用，因而广泛应用于食品、日化、石油、纺织、涂料、塑料、农药、橡胶、医药等领域。

同时采用脂质体包裹也可以提高生物制剂的稳定性。脂质体在化妆品中的应用比较多，主要包括两方面：一、脂质体作为功能性成分的载体避免生物活性物质相互作用或发生生物降解；二、脂质体膜中的磷脂和不饱和脂肪酸本身具有很好的保湿和护肤作用。脂质体特别是其与皮肤组成相似的类脂，如神经鞘磷脂所形成的脂质体与皮肤角质层脂质有高度相似性，能增加药物在皮肤局部的蓄积，增强皮肤靶向性，并能持续释放药物；具有增强药物进入角质层和表皮类脂内的作用。

脂质体在化妆品中应用本质上是为皮肤的局部给药：在以皮肤为靶向部位设计脂质体时，应使药物最大量地保留在皮肤中，尽量少地进入血液循环，即有效性成分作用于皮肤表面的角质层或进入表皮或真皮。即化妆品中脂质体及其他功能性成分要实现经皮渗透而又同时避免透过皮肤进入血循环，引起毒副作用。目前，脂质体经皮给药的研究表明：脂质体粒径大于1000nm的脂质体主要滞留于角质层；600nmˉ1000nm的脂质体可以渗透到表皮层和真皮层；而小于200nm的脂质体则会直接进入体循环系统，引起毒副作用。因此，我们在选择制备方法时以制备单室脂质体的方法为基础。

选取的脂质体材料卵黄高磷蛋白是自然界中含磷量最高的蛋白质，其磷含量超过10％。另一个脂质体材料酪蛋白的磷以全磷脂化形式存在，其磷含量超过9％。和人体皮肤或者粘膜更具有亲和性。

人们已经对脂质体的制备方法有了很多研究，常规有薄膜分散法、主动载药法、溶剂注入法、逆相蒸发法等。针对不同的包裹成分，其包封率存在差异，并不能找到一个固定最优的脂质体制备方法。而且针对本发明中的有机酸，甚少有人研究其脂质体包覆制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种稳定性好、靶向性、缓释控释效果好、且对皮肤或者粘膜有抑菌、消炎作用的的脂质体及其制备方法，同时掩盖有机酸的不良气味，降低其刺激性，扩大其使用范围。

本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的：

一种含有机酸微粒脂质体，其特征在于：所述脂质体以单室形式包裹有机酸微粒构成，该组合物包含按照质量百分比为1％ˉ5％的有机酸、1％ˉ10％乳化剂、10％ˉ30％脂质材料，其余为水；

其中有机酸为果胶酸、熊果酸、委陵菜酸、杜鹃花酸的混合物，其混合质量份数比例为：1：1ˉ2：1：1；

乳化剂为聚甘油酯硬脂酸酯或聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯的混合物，聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯以质量份数比例1：1。

本发明中脂质体平均粒径300ˉ800nm之间，其等电点位于5ˉ7之间。

本发明中脂质体还至少包含卵黄高磷蛋白、酪蛋白中的一种或几种组成，含磷量不低于9％。

一种含有机酸微粒脂质体的制备方法，其特征在于采用如下所述步骤，各步骤中的重量百分比均按照脂质体总重量计：

a.将0.5％ˉ5％乳化剂加热到60℃熔融，加入1％ˉ5％的有机酸，水浴保温60℃搅拌成均一液体，冷却到室温，用压力为60ˉ80MPa的高压均质机均质3ˉ5次，粒径在8ˉ50nm之间，得到均一液体A相；

b.将0.5％ˉ5％乳化剂加热到60℃熔融，加入10％ˉ30％的脂质体材料，水浴保温60℃搅拌成均一液体，然后加入水，水浴保温60℃搅拌成均一液体B相；

c.将B相在60℃水浴保温的情况下，搅拌加入A相，然后迅速降温至5℃；

d.将制备的液体冷却到室温，可以制成冻干粉，进一步提供其稳定性。

与现有技术相比，本发明有如下有益效果：

1.本发明提供的单室脂质体包裹有机酸微粒，脂质体对有机酸提供保护，屏蔽其不良气味，降低其刺激性及不耐硬水的问题。

2.本发明在合成过程中采用二次乳化法，将有机酸和脂质分别乳化，其中乳化剂和脂质体质量比大于乳化剂和有机酸重量比。然后在降温，在合适相转化温度下，通过非离子表面活性剂特有的相转化，得到终产品。降低了制备过程中的机械能，同时进一步控制终产品粒径。

3.本发明中的有机酸包覆率达到80％以上，具有良好的稳定性。

附图说明

图1为实施例1脂质体微粒的透射电镜图；

图2为实施例1脂质体微粒的粒径分布；

图3为实施例1、实施例2脂质体微粒的包封率；

图4为DPPH自由基清除率。

具体实施方式

实施例

该实施例1的100g的制备步骤如下：

1.烧杯中称取聚甘油硬脂酸酯5g，水浴加热到60℃熔融，加入称好的1g果胶酸、1熊果酸、1g委陵菜酸、1g杜鹃花酸，水浴保温60℃搅拌成均一液体，冷却到室温。用压力为60ˉ80MPa的高压均质机均质4次，得到均一液体A相。

2.烧杯中称取聚甘油硬脂酸酯5g，水浴加热到60℃熔融，加入称好的10g卵黄高磷蛋白、10g酪蛋白，水浴保温60℃搅拌成均一液体，然后加入66g水，水浴保温60℃搅拌成均一液体B相。

3.将B相在60℃水浴保温的情况下，搅拌加入A相，然后迅速降温至5℃，得到终产物。

实施例2也可以如上述方法制备。

同时，上述实施例可以通过冻干机，真空低温升华，制成冻干粉。

理化表征：

1.外观形态

透射电镜结果如图1所示。微粒为规则的球形颗粒，没有明显的聚集现象。

2.粒径测定

使用激光粒度分析仪检测粒径(结果如图2所示)，平均粒径为339.0±4.8nm。

3.包封率测定

取实施例1(A)和实施例2(B)制得的脂质体，过0.45μm微孔滤膜，按1：1加甲醇破乳，超声5min，后用HPLC进行测定。计算公式：EE％＝HPLC_{测得载药量}/HPLC_{药物加入量}×100％。结果如图3所示，A和B的包封率均超过80％。

4.DPPH自由基清除试验

分析天平精确称取8gDPPH，用无水乙醇定容至100mL容量瓶中，备用。有机酸按照质量比1：1：1：1，分别配制浓度为2、4、6、8(g/ml)乙醇溶液样品备用。测定空白样与室温下反应30min后，在波长517nm处，测定混合样品反应以及待测样品空白的吸光度，并利用式(1)计算出抑制率

式中：A待测样为2.0mL DPPH+1.0mL样品的吸光度；A空白样为1.0mL空白样+2.0mL水的吸光度；ADPPH为2.0mL DPPH+1.0mL水的吸光度。

图4表示的是含纯有机酸混合物与脂质体包裹有机酸微粒对DPPH自由基的清除率。从图4中可以看出，随着样品中有机酸浓度的增加，其对自由基的清除能力也随之不断的增加，这说明DPPH的清除率与有机酸的浓度成一定关系的正比。此外，同一浓度的有机酸和脂质体包裹微粒样品对DPPH自由基的清除率十分接近，证明包裹脂质体中的有机酸依然可以发挥其抗氧化能力等功效。

5.稳定性

有机酸脂质体微粒在高速离心机中进行高速离心，转速10000转/分，离心时间30分钟后未分层，未沉淀，说明具有很好的离心稳定性。置于4℃、20℃和45℃的有机酸脂质体微粒，在放置1个月、2个月、4个月、6个月后未出现破乳，分层等不稳定现象，且粒径均没有显著变化。与市场上购买到的微胶囊干粉进行水溶性测试对比发现搅拌后进行放置12小时后微胶囊干粉颗粒沉淀，而有机酸脂质体微粒与水互溶后仍为均一溶液，未出现沉淀现象，进行高速离心10000转/分，离心时间30分钟后也未出现沉淀等不稳定现象。可见，本发明的有机酸脂质体微粒具有良好的稳定性。

Claims (4)

1.一种含有机酸微粒脂质体，其特征在于：所述脂质体以单室形式包裹有机酸微粒构成，该组合物包含按照质量百分比为1％ˉ5％的有机酸、1％ˉ10％乳化剂、10％ˉ30％脂质材料，其余为水；

其中有机酸为果胶酸、熊果酸、委陵菜酸、杜鹃花酸的混合物，其混合质量份数比例为：1：1ˉ2：1：1；

乳化剂为聚甘油酯硬脂酸酯或聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯的混合物，聚甘油酯硬脂酸酯和聚甘油酯棕榈酸酯以质量份数比例1：1。

2.根据权利要求1中的脂质体，其特征在于：平均粒径300ˉ800nm之间，其等电点位于5ˉ7之间。

3.根据权利要求1中的脂质体，其特征在于：还至少包含卵黄高磷蛋白、酪蛋白中的一种或几种组成，含磷量不低于9％。

4.一种含有机酸微粒脂质体的制备方法，其特征在于采用如下所述步骤，各步骤中的重量百分比均按照脂质体总重量计：

a.将0.5％ˉ5％乳化剂加热到60℃熔融，加入1％ˉ5％的有机酸，水浴保温60℃搅拌成均一液体，冷却到室温，用压力为60ˉ80MPa的高压均质机均质3ˉ5次，粒径在8ˉ50nm之间，得到均一液体A相；

b.将0.5％ˉ5％乳化剂加热到60℃熔融，加入10％ˉ30％的脂质体材料，水浴保温60℃搅拌成均一液体，然后加入水，水浴保温60℃搅拌成均一液体B相；

c.将B相在60℃水浴保温的情况下，搅拌加入A相，然后迅速降温至5℃；

d.将制备的液体冷却到室温，可以制成冻干粉，进一步提供其稳定性。

Images