CN1142889A

CN1142889A - 包膜杀虫剂，其制备方法以及含有它们的组合物

Info

Publication number: CN1142889A
Application number: CN 95108480
Authority: CN
Inventors: F·阿迈德
Original assignee: American Cyanamid Co
Current assignee: Wyeth Holdings LLC
Priority date: 1994-10-13
Filing date: 1995-07-27
Publication date: 1997-02-19
Also published as: MD1165F2; TW381003B; MD1165G2; MD950355A

Abstract

本发明提供一种包膜杀虫剂及其制备方法。本发明还提供一种含有该包膜杀虫剂的可湿性粉末杀虫组合物。

Description

包膜杀虫剂，其制备方法以及含有它们的组合物

某些杀虫剂经太阳光中的紫外线辐照后成为非活性的。由于这些杀虫剂对于防治讨厌的害虫是有用的并且施用于将受紫外线辐照的区域，因此需要一种含有这些杀虫剂的对光稳定的组合物。

为了防止杀虫剂的紫外线失活，制备了含有紫外吸收剂和/或反射剂以及一种杀虫剂的组合物。

美国专利No.3,541,203叙述了一种用于昆虫防治的被保护起来的病毒组合物。这种较好的组合物包括一种病毒、一种光化吸光材料和一种聚合物的粘合剂材料。该专利揭示了将一种光化吸光材料和一种病毒的混合物与乙基纤维素聚合物材料一起混合，在甲苯溶液中将该混合物与乙基纤维素混合。搅拌所得到的混合物，用聚丁二烯处理并注入石油馏出物中，使乙基纤维素固化产生很小的乙基纤维素聚合物材料颗粒，其中充分均匀地封装入光化吸光材料和病毒的混合物颗粒。然后用另外的石油馏出物洗涤该颗粒几次以完全去除残余量的液体聚丁二烯材料。遗憾的是用于制备美国专利No.3,541,203的较好组合物的方法不能完全令人满意，因为它需要使用有毒材料并且需要用可燃溶剂洗涤多次。

美国专利No.4,948,586揭示了一种微囊包封的杀虫病原。列出了四种微囊包封的组合物降低Autographa californica NPV的光失活。然而，该微囊包封的组合物只保持光照之前30.7至71.43％的初始活性。美国专利No.4,948,586揭示了一种制备微囊包封的杀虫病原的方法，其具有众多步骤且既费时又费力。显然从紫外线辐照效应考虑，美国专利No.4,948,586所述的加工方法和微囊包封的杀虫病原对用于保护杀虫病原都是不能完全令人满意的。

本发明的一个目的是提供一种包膜杀虫剂，其在紫外线辐时之后仍能保持足够量的初始活性。

本发明的另一个目的是提供简单的、费力较少的用于制备包膜杀虫剂的方法，这些方法更适用于工业生产。

本发明还有一个目的是提供一种含有包膜杀虫剂的可湿性粉末杀虫组合物。

本发明叙述包膜杀虫剂，其在紫外线辐照之后仍能保持足够量的初始活性。

本发明的包膜杀虫剂包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括约2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，0％至约5％(重量)的增塑剂，约5至45％(重量)的紫外线防护剂，0％至约75％(重量)的茋化合物，0％至约10％(重量)的崩解剂和0％至约10％(重量)的助流剂。

本发明还提供用于制备包膜杀虫剂以及包括该包膜杀虫剂的可湿性粉末杀虫组合物的方法。

图1描述了显示egt基因部位的AcMNPV基因组的示意图。在图1A中整个AcMNPV基因组以图单位以及如Eco RI和Hind III限制图表示。图1B描述了更详细的位于图单位7.6和11.1之间的区域图并显示了egt基因的部位。

图2描述egt基因的示意图，其显示了在AcMNPV基因组中图单位8.3和9.8之间的关键限制酶切点。图2B描述了在图单位8.3和9.8之间AcMNPV基因组的三个正向(1，2，3)和三个反向(1’，2’，3’)译读框架中开放译读框架的结构。在框架2中大的开放译读框架表示egt基因的蛋白质密码区的位置。

图3描述用于组装(未加负荷的)AcMNPV V8转移载体NF4的DNA片段的构造和衍生的示意图。图3A描述片段A-D连接形成NF4的方法。图3B描述用于制备片段C和D的方法的示意图。AcMNPV V8 Eco RI“I”片段的线性限制图上方的箭头表示在AcMNPV基因组中位于图单位0.32和5.83之间主要开放译读框架(ORFS)的部位和转录极性。符号“H”和“E”分别表示对于限制性核酸内切酶Hind III和Eco RI的识别部位的位置。

图4描述了构建质粒pBS ADK-AaIT的细节，其包含异种脂肪动员激素基因信号序列和编码AaIT的密码经过优化的cDNA序列。

图5描述在含有启动子组件、多酶切点组件和a3’UTR组件的表达盒的相反端带有Bsu36I和Sse8387I切点的组件表达载体的部分。多酶切点组件含有一个Esp3I识别部位。以最外面的Bsu36I和Sse8387I切点为界限的区域被定为病毒插入组件。

图6描述用于扩增脂肪动员激素基因信号/密码优化的AaIT基因的聚合酶链反应(PCR)策略，随后所述基因用BamHI消化。

图7描述通过将脂肪动员激素基因信号/密码优化的AaIT基因插入pMEV1.1中(其含有AcMNPV DA26启动子)形成调制表达载体(AC0075.1)的示意图。

本发明提供用于制备包膜杀虫剂的方法，该方法避免了与现有技术中已知方法有关的问题。

本发明的一个方法包括：

a)将一种与pH有关的聚合物、杀虫剂、任选的增塑剂、紫外线防护剂、任选的茋化合物、任选的崩解剂和任选的助流剂的混合物在一种有机溶剂例如丙酮、C₁～C₃醇、或其结合物中进行混合产生一种均匀的悬浮液；

b)干燥步骤(a)的均匀悬浮液；以及任选地

c)研磨步骤(b)中干燥的材料。

有利的是，本发明的上述方法提供了一种用于制备包膜杀虫剂的二步或三步的有效方法，其避免使用多重混合和乳化步骤，以及免去多次用可燃溶剂洗涤的步骤。并且，本发明的上述方法较好地使用丙酮/C₁～C₃醇溶液，其不会使杀虫剂(例如杀虫病原)明显失活。其它的现有技术中使用的有机溶剂，例如二氯甲烷，会使杀虫剂(例如杀虫病源)严重失活。

当上述方法被认为是对现有方法的一个明显的进步时，又发明了一种更好的方法，其避免使用有机溶剂。

特别是已发现，包膜的杀虫剂可通过水溶液的方法制备，包括：

a)制备与pH有关的聚合物和任意的一种增塑剂的水溶液混合物；

b)通过用一种碱将步骤(a)的混合物的pH值调节至约8.5至10溶解与pH有关的聚合物；

c)向步骤(b)的溶液中加入杀虫剂、紫外线防护剂、任选的茋化合物、任选的崩解剂和任选的助流剂，并进行混合产生一种均匀的悬浮液；

d)干燥步骤(c)的均匀悬浮液；以及任选地

e)研磨步骤(d)中干燥的材料。

有利的是，本发明的水溶液方法不需使用多重混合和乳化步骤，以及不需使用多次用可燃溶剂洗涤的步骤，并且不需使用有机溶剂。

本发明的包膜杀虫剂较好为颗粒尺寸小于约20μm，更好为颗粒尺寸约2μm至10μm。本发明的均匀悬浮液可用任何常规的干燥技术进行干燥。较好的是使悬浮液喷雾干燥或空气干燥。

用上述方法制备的较好的包膜杀虫剂为包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括约2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，高至约5％(重量)的增塑剂，约5至45％(重量)紫外线防护剂，高至约75％(重量)的茋化合物，高至约10％(重量)的崩解剂和高至约10％(重量)的助流剂。

杀虫剂对基质的比例较好为1∶1至1∶10。丙酮对C₁～C₃醇的比例较好为1∶9至9∶1，更好为1∶4至2∶3。在有机工艺中适用的C₁～C₃醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇和正丙醇，异丙醇是优选的。

对本发明适用的杀虫剂包括化学和生物杀虫剂、杀螨剂、杀线虫剂和杀菌剂或其混合物，它们不会被紫外线辐照失活。较好的杀虫剂是杀虫病原类例如病毒病原、细菌病原和真菌病原。适用的病毒病原包括野舞蛾核多角体病毒(wild gypsy moth NPV)；Autographacalifornica NPV’s例如AcMNPV E2、AcMNPV L1、AcMNPVV8、V8vEGTDEL和V8vEGTDELAaIT；Douglas fir tossock mothNPV；European pine saw fly NPV；以及Heliothis zea NPV。用于本发明的最好的杀虫剂是野舞蛾核多菌体病毒(Wild gypsy mothNPV)、AcMNPV E2、AcMNPV L1、AcMNPV V8、V8vEGTDEL、V8vEGTDELAaIT和玉米螟核多角体病毒(Heliothis zea NPV)。

在1994年10月26日公布的EP621337中叙述了AcMNPV。

对本发明适用的与pH有关的聚合物包括在pH5以下基本不溶的聚合物，例如甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物、马来酐和苯乙烯的共聚物等或其混合物。较好的与pH有关的聚合物包括甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物的混合物以及马来酐和苯乙烯的共聚物。最好的与pH有关的聚合物为Eudragit^S(甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物，其中游离羧基对酯的比例为1∶2，Rohm Pharma GmbH，Weit-erstadt，Germany)、Eudragit^L(甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物，其中游离羧基对酯的比例为1∶1，Rohm Pharma GmbH)和其混合物。

对本发明适用的增塑剂包括现有技术中已知的任何常规增塑剂例如聚乙二醇类、聚丙二醇类、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、柠檬酸酯类、蓖麻油、甘油三乙酸酯等或其混合物，较好的是分子量为300至1,000的乙二醇类。

本发明中使用紫外线防护剂以减小杀虫剂的光致失活性。适用的紫外线防护剂包括紫外线吸收剂和紫外线反射剂或其混合物。紫外线吸收剂包括各种形式的碳例如碳黑；二苯酮类例如2-羟基-4-甲氧基二苯酮(CYASORB^UV9，Cytec Ind.)、2，2’-二羟基-4-甲氧基二苯酮(CYASORB^UV24，Cytec Ind.)、2-羟基-4-丙烯酰氧基乙氧基二苯酮(CYASORB^UV2098，Cytec Ind.)、2-羟基-4-正辛氧基二苯酮(CYASORB^UV531，Cytec Ind.)等；以及染料类例如刚果红、孔雀绿、盐酸孔雀绿、甲基橙、甲基绿、亮绿、吖啶黄、FDC绿、FDC黄、FDC红等。紫外线反射剂包括二氧化钛等。较好的紫外线防护剂包括碳黑、二苯酮类、染料类和二氧化钛，最好的是碳黑、CYASORB^UV9和CYASORB^UV24。

对本发明的水溶液方法适用的碱类包括氢氧化铵、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物等，较好的为氢氧化铵。某些杀虫病毒病原可以在pH大于10时失活。因此较好的是选择一定量的碱将pH调节至8.5至10以确保易于溶解并减少失活的机会。

本发明中使用茋化合物以提高杀虫剂的杀虫活性。对本发明适用的茋化合物在美国专利No.5,246,936中用所叙述。

较好的茋化合物为4，4’-二氨基-2，2’-茋二磺酸的类似物，即，一种Calcofluor White(Sigma Chemical Co.，St.Louis，Mo.有售)例如Calcofluor White M2R、Calcofluor White ABT、CalcofluorWhite LD、Calcofluor White RWP等；一种Blancophor(MobayCHemicals，Pittsburgh，Pa.有售)例如Blancophor BBH、Blan-cophor MBBH、Blancopher BHC等；一种INTRAWITE^(一种杂环茋衍生物，Crompton and Knowles Corp.，Charlotte，N.C.有售)例如INTRAWITE^CF等；一种Leucophor(Sandoz ChemicalsCorp.，Charlotte，N.C.有售)例如Leucophor BS、LeucophorBSB、Leucophor EKB、Leucophor PAB等；一种Phorwite(MobayChemicals，Pittsburgh，Pa.有售)例如Phorwite AR、PhorwiteBBU、Phorwite BKL、Phorwite CL、Phorwite RKK等。最好的茋化合物为Blancophor BBH、Calcofluor White M2R如Phorwite。

本发明中使用崩解剂以缩短研磨时间和使干燥材料的颗粒尺寸减小。对本发明适用的崩解剂包括甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类、亲水淀粉例如葡聚糖、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷等或其混合物。较好的崩解剂为甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类例如甲醛与萘磺酸盐类石油磺酸盐类和木素磺酸盐类缩合物的盐类，其中最好的是萘磺酸钠甲醛缩合物例如MOR-WET^D425(Witco，Houston，Texas)、LOMAR^PW(Henkel，Cincinnati，Ohio)和DARVAN^1(R.T.Vanderbilt Co.，Nor-walk，Connecticut)。

本发明的方法中使用助流剂以使干燥的包膜杀虫剂不粘在一起。对本发明适用的助流剂包括滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硫酸钙等或其混合物，其中较好的是滑石。

其它添加剂例如防腐剂、稳定剂(海藻糖)、防霉剂、杀真菌剂、抗菌剂等也可包括在本发明的基质中。很显然，当分别给真菌病原和细菌病原包膜时，则一般相应地不使用杀真菌剂和抗菌剂。

本发明较好的包膜杀虫剂包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括约2至20％(重量)的与pH有关的聚合物，高至约3％(重量)的增塑剂，约5至35％(重量)的紫外线防护剂，约25％至75％(重量)的茋化合物，高至约10％(重量)的崩解剂和高至约10％(重量)的助流剂。

本发明还提供一种可湿性粉末杀虫组合物，包括约2至25％(重量)的湿润剂；约2至40％(重量)的分散剂；约10至70％(重量)的填充剂；约1至10％(重量)的流动增强剂；高至约20％(重量)的pH调节剂；以及约5至75％(重量)的包膜杀虫剂其包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括约2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，高至约5％(重量)的增塑剂，约5至45％(重量)的紫外线防护剂，高至约75％(重量)的茋化合物，高至约10％(重量)的崩解剂和高至约10％(重量)的助流剂。

本发明较好的可湿性粉末杀虫组合物，包括约2至15％(重量)的湿润剂；约2至15％(重量)的分散剂；约10至60％(重量)的填充剂；约1至5％(重量)的流动增强剂；高至约20％(重量)的pH调节剂；以及约5至75％(重量)的包膜杀虫剂其包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括约2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，高至约5％(重量)的增塑剂，约5至45％(重量)的紫外线防护剂，高至约75％(重量)的茋化合物，高至约10％(重量)的崩解剂和高至约10％(重量)的助流剂。

本发明适用的湿润剂包括现有技术中已知的任何常规试剂。较好的湿润剂包括阴离子试剂例如N-甲基-N-油酰牛磺酸钠(SodiumN-methyl-N-oleoyltaurate)、辛基苯氧基多乙氧基乙醇、壬基苯氧基多乙氧基乙醇、二辛基硫代琥珀酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基萘磺酸钠、磺化烷基羧酸钠等或其混合物。其中最好的湿润剂是烷基萘磺酸钠和磺化烷基羧酸钠的混合物(MORWET^EFW，Witco)。

在本发明的可湿性粉末杀虫组合物中有用的分散剂包括现有技术中已知的任何常规试剂。较好的分散剂为阴离子试剂例如甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类、木素磺酸钠等或其混合物，其中最好的是萘甲醛缩合物的磺酸钠例如MORWET^D425(Witco)、LOMAR^PW(Henkel)和DARVAN^1(R.T.Vander-bilt Co.，)。

对本发明的组合物适用的填充剂包括天然的和人工合成的粘土和硅酸盐，例如：天然硅石如硅藻土；硅酸镁如滑石粉；硅酸镁铝如活性白土和蛭石；硅酸铝如高岭土、蒙脱土和云母；以及水合硅酸铝如高岭粘土。较好的填充剂为水合硅酸铝、硅酸铝、硅酸镁和硅酸镁铝，其中最好的填充剂为高岭粘土。在本发明的可湿性粉末杀虫组合物中有用的流动增强剂为现有技术中已知的常规流动增强剂，其中较好的是硅酸盐例如硅酸钙。

使用pH调节剂维持由本发明的组合物制备的容器内水混合物(aqueous tank-mix)的pH低于pH5。适用的pH调节剂包括邻苯二甲酸氢钾和有机酸，其中较好的是柠檬酸。

本发明的可湿性粉末杀虫组合物可通过混合湿润剂、分散剂、填充剂、流动增强剂和任选的pH调节剂的混合物以形成一种预混合物进行制备。然后将该预混合物与包膜杀虫剂混合形成所需的本发明的可湿性粉末杀虫组合物。

为了控制害虫，本发明的可湿性粉末杀虫组合物用水稀释形成容器内水混合物，将该容器内混合物直接施用于害虫、其繁殖地、食物或栖息地。

在本发明的可湿性粉末组合物中也可加入其它组份例如吸引剂、粘着剂、消泡剂等。然而，这些另外的组份一般分别加入至容器内混合物中。也可以将一种辅助剂或辅助剂混合物加入容器内混合物中。

为了便于进一步理解本发明，提出下面的实施例主要为了对其作更具体详细的说明。本发明不应受其限制，而由权利要求书确定。

除非另有说明，所采用的标准分子生物学技术根据Sambrook等人在Molecular Cloning：A Laboratory Manual，2nd ed.，ColdSpring Harbor Press，Cold Spring Harbor，N.Y.(1989)中所述。所采用的用于杆状病毒生长和生产的标准技术根据Summers和Smith在A Manual of Methods For Baculovirus Vectors and InsectCell Culture Procedures，Dept.of Entomology，Texas Agricultur-al Experimental Station and Texas A&M University，College Sta-tion，Texas 77843-2475，Texas Agricultural Experiment StationBulletin No.1555(1987)中所述的方法。

实施例1

包膜的V8vEGTDEL多角体(polyhedrin)包含体的制备

——水溶液方法

将氢氧化铵溶液(28％NH₃)加入至在去离子水(551.8g)中的Eudragit^S100(62g，Rohm Pharma Co.)和PEG(6.2g，聚乙二醇，平均M.W.400，Aldrich Chemical Co.)的混合物中直至得到pH为约9.4。对得到的混合物搅拌30分钟得到一种溶液。将V8vEGTDEL多角体(polyhedrin)包含体(62g，平均尺寸为约2μm，约每克10¹¹包含体)、Blancophor BBH(248g，茋增亮剂，Miles Inc.)和CYASORB^UV9(31g，平均颗粒尺寸约2μm，Cytec Ind.)加入至已调节pH的水溶液中。对得到的混合物搅拌30分钟并在混合下空气干燥以得到固体颗粒。将该固体颗粒空气研磨得到包膜的V8vEGTDEL多角体包含体(362g，平均尺寸约5μm)。上面制备的包膜V8vEGTDEL多角体(polyhedrin)包含体即为表II中组合物1。

用基本相同的程序，但用表1中所列的组份，制备表II中作为组合物2～10的包膜杀虫剂。

表I

杀虫剂

a.V8vEGTDEL多角体(Polyhedrin)包含体

b.玉米螟核多角体病毒(Heliothis zea NPV)

c.AcMNPV

d.1∶1玉米螟核多角体病毒(Heliothis zea NPV)和AcMN-PV的混合物与pH有关的聚合物

e.Eudragit^S100

增塑剂

f.PEG400

紫外线防护剂

g.CYASORB^UV9

h.Charcoal

茋化合物

i.Blancophor BBH

助流剂

j.滑石

表II

用水溶液方法制备的包膜杀虫剂组合物

组份/wt/wt％

组合物编号杀虫剂与pH有关的聚合物增塑剂紫外线防护剂茋化合物助流剂

1 a/15.15 e/15.15 f/1.52 g/7.58 i/60.61 -

2 a/24.69 e/12.35 f/1.23 g/12.35 i/49.38 -

3 a/21.74 e/21.74 f/2.17 g/10.87 i/43.48 -

4 a/19.80 e/9.90 f/0.99 g/9.90 i/49.41 -

5 a/17.86 e/17.86 f/1.79 g/8.93 i/53.57 -

6 a/16.53 e/8.26 f/0.83 g/8.26 i/66.12 -

7 b/4.81 e/11.75 f/1.18 g/11.75 i/70.51 -

8 c/21.36 e/9.71 f/0.97 g/9.71 i/58.25 -

9 d/8.41 e/11.98 f/1.20 g/11.43 i/66.98 -

10 a/16.09 e/3.17 f/0.32 h/32.17 i/32.17 j/8.04包膜的V8vEGTDEL多角体包含体的制备——有机方法

将V8vEGTDEL多角体(plyhedrin)包含体(43.24g，平均尺寸约2μm，约每克10¹¹包含体)、Blancophor BBH(86.44g)和CYA-SORB^UV9(31.93g)加入至在30∶70的丙酮/异丙醇溶液(195.15g)的Eudragit^S100(5.88g)中。对得到的混合搅拌几分钟并在混合下空气干燥以得到固体颗粒。研磨该固体颗粒通过一个60目的筛得到平均尺寸约为10μm的包膜V8vEGTDEL多角体包含体。上面制备的包膜V8vEGTDEL多角体包含体即为表IV中的组合物11。

用基本相同的程序，但用表III中所列的组份，制备表IV中作为组合物12～28的包膜杀虫剂。

表III

杀虫剂

a.V8vEGTDEL多角体包含体

b.野舞蛾核多角体病毒

与pH有关的聚合物

c.Eudragit^S100

d.Cypress^48(马来酐/苯乙烯共聚物，Cytec Ind.)

增塑剂

e.PEG400

紫外线防护剂

f.CYASORB^UV9

g.Carcoal

h.TiO₂

茋化合物

i.Blancophor BBH

崩解剂

j.MORWET^D425

稳定剂

k.岩藻糖(Trehalose)

表IV

用有机方法制备的包膜杀虫剂组合物

组份/wt/wt％组合物编号杀虫病原与pH有关的聚合物增塑剂紫外防护剂茋化合物崩解剂稳定剂

11 a/23.76 c/3.24 e/0.83 f/17.55 i/47.50 j/7.12 -

12 a/70.18 c/3.51 e/1.75 f/17.54 - j/7.02 -

13 a/35.09 c/3.86 e/1.75 f/17.54 i/34.74 j/7.02 -

14 a/23.40 c/4.91 e/1.75 f/17.52 i/45.39 j/7.02 -

15 b/77.19 c/3.51 e/1.75 f/17.54 - - -

16 b/62.86 c/5.71 e/2.86 f/28.57 - - -

17 b/40.00 c/3.64 e/1.82 f/18.18 - - k36.36

18 b/77.19 c/3.51 e/1.75 g/17.54 - - -

19 b/62.86 c/5.71 e/2.86 g/28.57 - - -

20 b/77.19 c/3.51 e/1.75 h/17.54 - - -

21 b/62.86 c/5.71 e/2.86 h/28.57 - - -

22 b/26.83 c/4.05 e/2.02 g/13.42 - - k53.67

23 b/44.74 c/2.24 e/1.12 f/11.22 i/40.67 - -

24 b/23.16 c/2.11 e/1.05 f/10.53 i/63.16 - -

25 b/40.00 c/3.64 e/1.82 g/18.18 i/36.36 - -

26 b/20.37 c/3.70 e/1.85 h/18.52 i/55.56 - -

27 b/48.89 c/4.44 e/2.22 f/22.22 - j/22.22 -

28 b/23.66 c/3.57 e/1.79 g/11.83 - j/11.83 k/47.33

实施例3可湿性粉末杀虫组合物的制备

将表II中组合物1的包膜V8vEGTDEL多角体包含体(362g)加入MORWET^EFW(13.1g)、MORWET^D425(26.2g)、高岭粘土(91.6g)、合成硫酸钙(6.5g，MICRO-CEL^E，Manville Co.)和柠檬酸(0.7g)的预混合物中。将得到的混合物掺和得到表V的可湿性粉末组合物即组合物29。

用基本上相同的程序，制备表V中组合物30～53的可湿性粉末组合物。

表V

可湿性粉末杀虫组合物

组份wt/wt％组合物编号包膜杀虫剂¹ MORWET^EFW MORWET^D425 高岭粘土 MICRO-CEL^E 柠檬酸糖 MIRA-SPERSE^229 1/72.40 2.62 5.24 18.32 1.30 0.14 - -30 2/38.83 5.80 11.60 40.58 2.90 0.29 - -31 3/37.50 5.92 11.85 41.47 2.96 0.30 - -32 4/41.67 5.53 11.06 38.70 2.76 0.28 - -33 5/33.33 6.32 12.64 44.23 3.16 0.32 - -34 6/35.09 6.15 12.31 43.07 3.08 0.31 - -35 7/38.25 5.85 11.71 40.97 2 93 0.29 - -36 8/43.25 5.38 10.76 37.65 2.69 0.27 - -37 9/39.50 5.73 11.47 40.14 2.87 0.29 - -38 11/29.08 6.76 13.51 47.27 3.38 - - -39 15/13.36 13.21 4.40 29.39 4.40 - 17.62 17.6240 16/13.78 13.15 4.38 29.24 4.38 - 17.53 17.5341 17/23.62 11.65 3.88 25.90 3.88 - 15.52 15.5242 18/13.01 13.27 4.42 29.50 4.42 - 17.68 17.6843 19/15.97 12.81 4.27 28.50 4.27 - 17.08 17.0844 20/13.52 13.19 4.39 29.34 4.39 - 17.58 17.5845 21/16.70 12.69 4.23 28.24 4.23 - 16.94 16.9446 22/22.61 11.80 3.93 26.21 3.93 - 15.78 15.7847 23/21.95 11.90 3.96 26.47 3.96 - 15.87 15.8748 24/43.78 8.57 2.86 19.07 2.86 - 11.42 11.4249 25/29.99 10.68 3.56 23.79 3.56 - 14.23 14.2350 26/48.56 7.84 2.61 17.45 2.61 - 10.46 10.4651 27/27.64 11.03 3.67 24.57 3.67 - 14.74 14.7452 28/18.85 12.37 4.12 27.53 4.12 - 16.49 16.4953 10/30.45 6.59 13.19 46.16 3.30 0.33 - -

1.包膜杀虫剂与表II或表IV的组合物编号一致。

2.MIRA-SPERSE^为由A.E.Staley Manufacturing Co.，Decatur IL.生产的2-羟丙基醚淀粉。

实施例4未辐照和辐照的可湿性粉末杀虫组合物对L.dispar的杀虫性评价

将可湿性粉末杀虫病原组合物悬浮在蒸馏水中并稀释成浓度为每ml2.4×10⁵包膜杀虫多角体包含体。将得到的悬浮液(0.5ml)用滴管吸移至在180ml塑料杯中的小麦芽食物的表面。每杯用紫外线辐照(一台Westinghouse BLB球管和一台Phillips F40 UVB球管相隔3英寸，辐射源中心线与食物表面的距离为4英寸)0或80分钟。在每杯中放入十条二龄L.dispar幼虫。将这些杯子盖上并在黑暗中保持在29℃及55～60％相对湿度下。13天后，检查这些杯子并测定病毒感染死亡率。

结果汇总于表VI，其中每种组合物的效率以紫外线辐照后保存的初始活性的百分数(％OAR)表示，即由辐照的组合物导致的死亡率％/由未辐照的组合物导致的死亡率×100。在评价中所用的对照组合物如下所示。

对照组合物

组份 wt/wt％

¹包膜杀虫病原 11.19

MORWET^EFW 13.54

MORWET^D425 4.51

高岭粘土 30.12

MICRO-CEL^E 4.51

糖 18.06

MIRA-SPERSE^ 18.06

1.93.62wt/wt％野舞蛾核多角体病毒，4.26％wt/wt％Eu-dragit^S100，和2.13wt/wt％PEG400。

表VI

对L.dispar杀虫剂评价

％死亡率组合物编号¹ 辐照的未辐照的％OAR²

对照 47.5 100.0 47.5

39 70.0 100.0 70.0

40 76.7 99.2 77.2

41 87.5 99.2 88.2

42 91.7 98.3 93.2

43 98.3 99.2 99.2

44 57.5 100.0 57.5

45 65.0 96.7 67.3

46 82.5 98.3 84.0

47 91.7 98.3 93.2

48 90.0 99.2 90.8

49 90.0 98.3 91.6

50 87.9 100.0 87.9

51 77.5 99.2 78.2

52 90.0 99.2 90.7

1.来自表V的组合物编号

2.紫外线辐照后保存初始活性的百分数

实施例5可湿性粉末杀虫组合物对Helicoverpa aea的杀虫性评价

用有32个穴的塑料生物鉴定盘(4×4×2.5cm，L×M×H，C-DInternational，Inc.)作为在该评价中的测试场所。每盘一穴中倒入5mlStoneville饲料(大豆/小麦芽)并令其成为固体。可湿性杀虫病原组合物粉末的水悬液(0.4ml)均匀地喷洒在固化的饲料表面，每穴提供4×10⁵至4×10⁷V8vEGTDEL包膜的或未包膜的多角体包含体。将盘子在超净台上干燥之后，在每一盘穴中放入一条三日龄的Helicoverpa zea幼虫。用一张粘附性的透气的透明塑料布(C-D In-ternational Inc.)盖住穴，置于恒定荧光灯下，温度约27℃，处理5天和10天后，观察穴并测量幼虫死亡率。

结果概括于表VII中，评价中使用的对照组合物如下所示。

对照组合物组份 wt/wt％

A 未包膜V8vEGTDEL多角体 10.00

包含体

MORWET^EFW 8.53

MORWET^D425 17.06

高岭粘土 59.71

MICRO-CEL^E 4.27

柠檬酸 0.43

B 未包膜V8vEGTDEL多角体 8.69

包含体

MORWET^EFW 8.71

MORWET^D425 17.40

高岭粘土 60.86

MICRO-cel^e 4.35

表VII

对Helicoverpa zea杀虫性评价

组合物编号¹ 浓度％死亡率

(包含体/穴) 5天 10天

对照A 4×10⁷ 49 91

4×10⁶ 47 93

4×10⁵ 29 63

对照B 4×10⁷ 33 75

4×10⁶ 35 70

4×10⁵ 18 47

29 4×10⁷ 77 100

4×10⁶ 58 100

4×10⁵ 35 77

38 4×10⁷ 43 95

4×10⁶ 45 80

4×10⁵ 25 56

1.来自表V的组合物编号

实施例6

未辐照过的和辐照过的可湿性粉末组合物对米螟(H.zea)和粉纹夜蛾(H.virescens)杀虫效果的评价

塑料生物检测盘每个有32个开口的穴(4×4×2.5cm长×宽×高，C-D International，Inc.)，用做本评价试验的场所。每个盘穴中倒入5ml Stoneville饲料(大豆/小麦芽)并使固化。将可湿性粉末杀虫病原组合物的水悬浮液(0.4ml)均匀地喷洒在变硬的饲料表面以提供每穴4×10⁶V8vEGTDEL包膜的和未包膜的多角体包含体。然后将某些处理的盘置于紫外灯下(二个FS40UVB灯泡安装在盘的上方30cm，Phillips Co.)辐照—或二小时。选出经二小时辐照的盘，每1小时间隔每穴补加去离子水0.4ml，以防止饲料过干并碎裂。然后所有盘子喂养一条三日龄的玉米螟(H.zea)或四日龄的粉纹夜蛾(H.vircscens)幼虫。用一张粘附性的，透气的透明塑料布(C-D In-ternational Inc.，)盖住穴，置于恒定荧光灯下温度约27℃，处理后10天，观察穴，计量幼虫死亡率。

结果归纳于表VIII中评价中使用杀虫组合物如下所示。

对照组合物

组份wt/wt％

未包膜V8vEGTDEL多角体包含体 4.93

MORWET^EFW 9.01

MORWET^D425 18.02

高岭粘土 63.09

MICRO-CEL^E 4.51

柠檬酸 0.45

表VIII未辐照和辐照的可湿性粉末组合物对玉米螟(H.zea)和粉纹夜蛾(H.virescens)杀虫性评价组合物编号辐照时间幼虫死亡率平均值％

(小时)

玉米螟粉纹夜蛾

对照 0 59 77

1 46 56

2 40 36

53¹ 0 91 89

1 90 87

2 83 56

1.来自表V的组合物编号

实施例7溶剂相容性评价

下面的评价用于确定各种不同溶剂和混合物对AutographaCalifornica多角体包含体的活力的影响。Autographa californica多角体包含体(0.55g)与适当溶剂或溶剂混合物的混合物(1.5ml)置于锥形试管中10至60分钟。然后离心试管，倒掉上清液。将固体物在干燥器中真空干燥。然后按照实施例6中描述的方法(无辐照)评价干燥的固体物对粉纹夜蛾(Heliothis virescens)的杀虫活力。

结果归纳于表IX中。由表IX中的数据可以看出，与二氯甲烷混合了10分钟或60分钟的Autographa Californica多角体包含体对粉纹夜蛾的活力显著低于与丙酮，异丙醇和30∶70丙酮/异丙醇混合物混合过的Autographa californica多角体包含体。

表IX

溶剂相容性评价

溶剂放置时间(分钟) 比例(包含体/穴) ％死亡率

丙酮 10 4×10² 19

60 4×10² 25

10 4×10⁴ 100

60 4×10⁴ 100

异丙醇 10 4×10² 31

60 4×10² 13

10 4×10⁴ 100

60 4×10⁴ 100

丙酮/异丙醇 10 4×10² 34

(30∶70) 60 4×10² 19

10 4×10⁴ 100

60 4×10⁴ 100

二氯甲烷 10 4×10² 9

60 4×10² 6

10 4×10⁴ 84

60 4×10⁴ 19

Claims

1.一种用于制备包膜杀虫剂的方法其包括：

a)制备一种与pH有关的聚合物和任选的一种增塑剂的水溶液混合物；

b)通过用一种碱将步骤(a)的混合物的pH值调节至高于与pH有关的聚合物的溶液化pH值以溶解与pH有关的聚合物；

d)干燥步骤(c)的均匀悬浮液；以及任选地

e)研磨步骤(d)中干燥的材料。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述与pH有关的聚合物选自甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯的共聚物、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物的混合物以及马来酐和苯乙烯的共聚物；所述增塑剂选自聚乙二醇、聚丙二醇、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、柠檬酸酯、蓖麻油和甘油三乙酸酯；所述碱选自氢氧化铵、碱金属氢氧化物和碱土金属氢氧化物；所述杀虫剂为一种杀虫病原；所述紫外防护剂选自碳黑、二苯酮、染料和二氧化钛；将步骤(b)中的pH值调节至8.5至10；所述崩解剂选自甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类、亲水淀粉、羧甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷；以及所述助流剂选自滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙和硫酸钙。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述增塑剂是分子量为300至1,000的乙二醇；所述碱为氢氧化铵；所述杀虫病原为一种选自wild gypsy moth NPV，AcMNPV E2，AcMNPV L1，AcMN-PV V8，V8vEGTDEL，V8vEGTDEL-AaIT和Heliothis zea NPV的病毒；所述崩解剂为萘磺酸钠甲醛缩合物；以及所述助流剂为滑石，其中包膜杀虫剂的颗粒尺寸小于20μm。

4.一种用于制备包膜杀虫剂的方法，包括：

a)将一种与pH有关的聚合物、杀虫剂、选自的增塑剂、紫外线防护剂、选自的茋化合物、任选的崩解剂和任选的助流剂的混合物在一种选自丙酮、C₁-C₃醇、或其混合物的有机溶剂中进行混合产生一种均匀的悬浮液；

b)干燥步骤(a)的均匀悬浮液；以及任选地

c)研磨步骤(b)中干燥的材料。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述的有机溶剂为丙酮和C₁-C₃醇的混合物，丙酮对C₁-C₃醇的比例为1∶9至9∶1。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述的与pH有关的聚合物选自甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物的混合物以及马来酐和苯乙烯的共聚物；所述杀虫剂为一种杀虫病原；所述增塑剂选自聚乙二醇、聚丙二醇、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、柠檬酸酯、蓖麻油和甘油三乙酸酯；所述紫外防护剂选自碳黑、二苯酮、染料和二氧化钛；所述崩解剂选自甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类、亲水淀粉、羧甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷；所述助流剂选自滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙和硫酸钙；以及所述C₁-C₃醇为异丙醇。

7.一种包膜杀虫剂包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，0％至5％(重量)的增塑剂，5至45％(重量)的紫外线防护剂，0％至75％(重量)的茋化合物，0％至10％(重量)的崩解剂和0％至10％(重量)的助流剂。

8.如权利要求7所述的包膜杀虫剂，其特征在于杀虫剂对基质的比例为1∶1至1∶10。

9.如权利要求7所述的包膜杀虫剂，其特征在于所述杀虫剂为一种杀虫病原；与pH有关的聚合物选自甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯的共聚物、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯共聚物的混合物以及马来酐和苯乙烯的共聚物；所述增塑剂选自聚乙二醇、聚丙二醇、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、柠檬酸酯、蓖麻油和甘油三乙酸酯；所述紫外防护剂选自碳黑、二苯酮、染料和二氧化钛；所述崩解剂选自甲醛与多环芳烃化合物的磺化产物缩合物的盐类、亲水淀粉、羧甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷；以及所述助流剂选自滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙和硫酸钙。

10.一种可湿性粉末杀虫组合物，包括2至25％(重量)的湿润剂；2至40％(重量)的分散剂；10至70％(重量)的填充剂；1至10％(重量)的流动增强剂；0％至20％(重量)的pH调节剂；以及5至75％(重量)的包膜杀虫剂其包括被一种基质包围的杀虫剂核心，该基质包括2至25％(重量)的与pH有关的聚合物，0％至5％(重量)的增塑剂，5至45％(重量)的紫外线防护剂，0％至75％(重量)的茋化合物，0％至10％(重量)的崩解剂和0％至10％(重量)的助流剂。