CN114262354B - 一种化合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明从连翘中分离纯化得到了如式I所示的化合物。本发明还提供了该类化合物等对癌症的用途。
Description
技术领域
本发明涉及天然化合物及其用途。
背景技术
癌症指的是恶性肿瘤及其一些来自于间叶组织的肉瘤。起源于上皮组织的恶性肿瘤,是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的,起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名,如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。
在癌症的治疗过程中,通常使用化疗、放疗、免疫治疗等手段。而目前常规的手段毒副作用较强,多数患者皆因无法承受治疗中的毒副作用而放弃治疗或治疗失败。
天然植物药物,是从天然植物中寻找到的具有特定治疗活性的药物。天然植物药物在中国发展历程数千年,各天然植物药物的毒副作用也基本了解,若能从中纯化制备得到具备抗癌活性的化合物,或将为癌症治疗带来新的尝试。
发明内容
连翘(Forsythia suspensa)是我国的传统中药,早在《本草图经》中就有记载,其味苦,性微寒,归肺,心,小肠经,具有清热解毒,消肿散结之功效,常用于风热感冒、温病初起、温热入营、高热烦渴、热淋尿闭、痈疽、瘰疬、乳痈、丹毒和肿毒等症。主要分布于我国山西、陕西、山东、安徽西部、河南等地。本发明拟从连翘中寻找可对癌症有效的活性成分。
本发明在研究中,对连翘果实的75%乙醇提取物经多种柱色谱分离纯化,运用高分辨质谱、核磁共振等波谱技术对各种分离部位进行结构确证,分离得到了1个新化合物(式III结构所示)。
通过细胞试验发现,本发明化合物对乳腺癌、恶性黑色素瘤等细胞有显著的抑制活性。
基于本发明研究,提供了如式I所示化合物或其药学上可接受的盐、水合物或氘代化合物:
其中,R1、R2分别独立选自H、糖基。
进一步地,结构式如下:
本发明中,糖基可以选自天然提取物中常见的糖基,例如木糖基、甘露糖基、葡萄糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、葡萄糖醛酸基,半乳糖醛酸基、鼠李糖基等。
当R1或/和R2选自糖基时,该化合物即为糖苷类结构,糖苷键可以是植物种天然存在,亦可通过常规的糖基化反应制备。
本发明中的组合物,其活性成分包括上述化合物,以及药学上可接受的辅料。
所述的药物组合物含有药学上各种常用添加剂(如赋形剂等),以制成药物制剂。根据治疗目的,可将该药物组合物制成各种类型的给药单位剂型,如片剂、丸剂、粉剂、液体、混悬剂、凝胶、乳液、乳膏、颗粒剂、硬胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液,一般为注射剂)等。优选地,该药物组合物的剂型为注射剂,用于局部注射(如皮下、神经周围、关节内腔等);或者,该药物组合物的剂型为凝胶、乳液、乳膏等,可涂覆于局部;或者,该药物组合物的剂型为片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、硬胶囊等,通过口服给药达到免疫抑制效果。
为了使片剂形式的药物组合物成形,可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。例如,载体,如乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素和硅酸等;粘合剂,如水、乙醇、丙醇、普通糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液,羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素和磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等;崩解剂,如干淀粉、藻酸钠、琼脂粉和海带粉、碳酸氢钠、碳酸钙、聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘酯、淀粉和乳糖等;崩解抑制剂,如白糖、甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油;吸附促进剂,如季胺碱和十二烷基硫酸钠等;润湿剂,如甘油、淀粉等;吸附剂,如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土和胶体硅酸等;以及润滑剂,如纯净的滑石,硬脂酸盐、硼酸粉和聚乙二醇等。如果需要,还可以用通常的涂渍材料使片剂作为糖衣片剂、涂明胶膜片剂、肠衣片剂、涂膜片剂、双层膜片剂及多层片剂。
为了使丸剂形式的药物组合物成形,可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋性剂,例如,载体,如乳糖、淀粉、椰子油、硬化植物油、高岭土和滑石等;粘合剂,如阿拉伯树胶粉、黄著胶粉、明胶和乙醇等;崩解剂,如琼脂和海带粉等。
为了使栓剂形式的药物组合物成形,可使用本领域任何已知并广泛使用的赋性剂,例如、聚乙二醇、椰子油、高级醇、高级醇的酯、明胶和半合成的甘油酯等。
为了制备针剂形式的药物组合物,可将溶液和悬浮液消毒,并最好加入适量的氯化钠、葡萄糖或甘油等,制成与血液等渗压的针剂。在制备针剂时,也可使用本领域内任何常用的载体,例如,水、乙醇、丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、聚氧基化的异硬脂醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外,还可加入通常的溶解剂、缓冲剂和止痛剂等。
本发明提供的这类化合物及其药学上可接受的盐在药物组合物中的含量无特殊限制,可在很宽的范围内进行选择,通常可为质量百分比0.1~99.9%,较佳的为质量百分比1~70%,更佳的为质量百分比1~30%。
本发明中,所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状,选择各种剂型的制剂给药。例如,片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊是口服给药;针剂可以单纯用针剂进行肌肉、皮内、皮下或腹内注射;栓剂为给药到直肠。
本发明中,可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。通常的给药剂量可为:约0.01~300mg药物活性成分/kg体重/天。一般来说,每个给药单位剂型可含1~200mg的药物活性成分。在不违背本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实施例。
本发明组合中还可以包括其他免疫抑制剂,例如(1)糖皮质激素类,如可的松和强的松;(2)微生物代谢产物,如环孢菌素和藤霉素等;(3)抗代谢物,如硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤等;(4)多克隆和单克隆抗淋巴细胞抗体,如抗淋巴细胞球蛋白和OKT3等;(5)烷化剂类,如环磷酰胺等。中的一种或多种。
除另有说明,本发明中公开的术语和缩写具有它们标准的含义。
本发明中,所述氘代化合物,是指本发明化合物分子中的一个或多个氢被同位素氘取代后的化合物。
氘是自然界存在的氢同位素。将氢替换为氘后,可能改善药物的药代动力学参数,同时保证疗效。
本发明中,所述盐,是将本发明化合物与酸或碱反应形成的盐。本发明所述酸、碱,包括但不限于路易斯酸、碱。
具体实施方式
实施例1
1仪器和材料
P850型旋光仪(中国海能公司);Shimadzu UV-1780紫外可见分光光度计(日本Shimadzu公司);Bruker AV 600NMR型核磁共振波谱仪(德国Bruker公司);Agilent 6545型高分辨率质谱仪(美国Agilent公司);Waters 515-2996高效液相色谱仪(美国Waters公司);YMC-Pack ODS-A反相半制备色谱柱(250×10mm,5μm)。柱色谱硅胶(100-200目,200-300目,青岛海洋化工厂);GF254(青岛海洋化工厂);ODS柱色谱填料(60~80μm,德国Merck);HP-20吸附树脂(日本三菱公司)。
D-葡萄糖标准品(纯度是>99%,日本和光株式会社),L-葡萄糖标准品(纯度是>99%,日本和光株式会社);浓盐酸(分析纯,天津市天力化学试剂有限公司)、吡啶(99.8%,P111513,Aladdin)、氯仿(分析纯,天津市天力化学试剂有限公司)、邻甲苯异硫氰酸酯(98%,M831176,Macklin)。
2提取与分离
中药连翘(F.suspensa)的干燥果实11.8kg,以75%乙醇超声提取3次,合并提取液并减压浓缩至浸膏,得总提取物1.9kg。浸膏用水复溶,依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇试剂按照1:1的比例进行萃取,得到氯仿层(650.9g)、乙酸乙酯层(213.2g)和正丁醇层(700.3g)。
乙酸乙酯部位通过HP-20色谱柱进行分离,流动相依次为体积分数为10%、30%、50%、70%、90%甲醇-水以及纯甲醇进行梯度洗脱(每个梯度7个柱体积),得到6个流份(E-1~E-6)(每个梯度合并成为一个流份,下同)。取E-2通过正相硅胶柱色谱,以二氯甲烷-甲醇(40:1、30:1、20:1、10:1、8:1、4:1)梯度洗脱得6个流份(E-2-1~E-2-6)。E-2-3经聚酰胺柱色谱分离,以二氯甲烷-甲醇(25:1、20:1、15:1、10:1、5:1)进行梯度洗脱得到5个流份(E-2-3-1~E-2-3-5)。E-2-3-2经开放ODS柱色谱分离,流动相依次为体积分数40%、50%、60%、70%、80%、90%甲醇-水以及纯甲醇,梯度洗脱得到7个流份(E-2-3-2-1~E-2-3-2-7)。E-2-3-2-7通过半制备液相分离,流动相为50%甲醇水,流速为2.5mL/min,得到式III化合物(tR=44min,10.2mg)。
3结构鉴定
式III化合物:浅黄色油状(甲醇),(c 0.1,MeOH);HR-ESI-MS显示其准分子离子峰为m/z 489.2108[M+Na]+(Calcd.489.2101,C24H34O9Na),提示式III化合物的分子式为C24H34O9,不饱和度为8。
1H-NMR(DMSO-d6,600MHz)谱(Table 1)中,低场区观察到一组AA′BB′偶合系统的苯环氢信号δH 7.00(2H,d,J=8.5Hz,H-2,H-6)和6.64(2H,d,J=8.5Hz,H-3,H-5)提示存在一个对位取代的苯环,另外还有一个sp2杂化的烯烃质子δH 6.91(1H,t,J=2.6Hz,H-2″)。高场区显示有2个连氧亚甲基氢信号δH 3.59(1H,dt,J=10.2,8.0Hz,H-8a),3.76(1H,dt,J=10.2,8.0Hz,H-8b),4.35(1H,dd,J=11.5,2.0Hz,H-6′a)和4.08(1H,dd,J=11.5,6.9Hz,H-6′b);2个甲基氢信号δH 1.04(3H,s,H-9″)和1.05(3H,s,H-10″)。
13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)谱和135°DEPT谱提示存在24个碳信号,其中δC 128.9(C-1),130.1(C-2,6),115.5(C-3,5)和156.1(C-4)为苯环上的碳信号;δC 103.52(C-1′),75.8(C-2′),77.0(C-3′),70.7(C-4′),74.1(C-5′)和64.0(C-6′)为一组葡萄糖碳信号[3],1H-NMR(DMSO-d6,600MHz)谱中δH 4.22(1H,d,J=8.0Hz,H-1′)为葡萄糖上半缩醛的端基质子,结合单糖衍生化样品的保留时间分析,确定为β-D-葡萄糖[5]。13C-NMR谱高场区中1个酯羰基碳信号δC 166.7(7″-C)和2个烯碳信号δC 130.0(1″-C)以及140.5(2″-C),提示存在一个α,β-不饱和羰基。在1H-1H COSY谱(Figure 2)中,H-2″/H-3″,H-3″/H-4″,H-4″/H-5″和H-5″/H-6″的相关,提示为-CH-CH2-CH-CH2-CH2-片段。结合HMBC谱中H-9″/C-8″以及H-10″/C-4″的远程相关,推断δC 27.6(C-9″)和27.0(C-10″)为偕二甲基,且连在C-8″位季碳上。结合HMBC谱中H-2″/C-6″和C-7″的远程相关,推断存在一个4-(2-羟基丙烷-2-基)环己烯-1-羧酸结构(oleuropeic acid unit)。对式III化合物的酸水解反应产物中苷元部分进行旋光度测定(+40.2°),与文献报道的S-松油酸(oleuropeic acid)(-114°)和R-松油酸(+46.5°)进行比较,结果表明苷元为R构型。在HMBC谱中H-2″/C-7″的H-6′/C-7″的远程相关,葡萄糖通过C-6′位糖苷键连接到苷元C-7″酯羰基碳上。
综上所述,式III化合物的结构如下:
4 MTT抗肿瘤活性测定
采用MTT比色法初步研究式III化合物对人乳腺癌细胞MCF-7、人恶性黑色素瘤细胞A-375、人前列腺癌细胞系PC-3和人肝癌细胞Hep-G2的细胞的抑制作用。待测细胞加入0.25%胰酶消化液使贴壁细胞消化脱落,形成细胞混悬液,对细胞进行记数,并将细胞稀释到1×104个/ml。将细胞悬液接种在96孔板上,每孔加入180μL,放置在37℃、5%CO2的恒温箱中培养,培养12h使细胞贴壁。更换新鲜培养液,加入待测化合物和阳性对照药5-氟尿嘧啶,40μM/孔和100μM/孔,在恒温箱中培养48h。吸去上清,加入100μL新鲜DMEM高糖培养液,再加入配置好的10μL MTT溶液(5mg/mL,0.5%MTT),继续在恒温箱中培养4h。吸去上清液后,每孔加入100μL的formazan溶解液,置摇床上低速振荡10min,在37℃条件下孵育3~4h。待结晶物充分溶解后,在酶联免疫检测仪570nm处测量各个孔的吸光值。结果显示,式III化合物在40μM浓度下对MCF-7,A-375细胞系的抑制率为39.85%和43.38%,在100μM浓度下对PC-3,Hep-G2细胞系没有抑制活性。
5糖取代基绝对构型的确定
式III化合物(1mg)用2M HCl在90℃下水解2h,将混合物在真空下蒸发干燥,残渣用水溶解,用氯仿提取三次,收集水层。在真空中干燥后,将残留物溶解在含有L-半胱氨酸甲酯(1mg)的吡啶(1mL)(Aladdin,China)中。在60℃下加热1小时,再加入邻甲苯异硫氰酸酯(5μL)(Macklin,China)在60℃下加热1小时,减压干燥。将残留物用甲醇水溶解至0.5mL左右,过0.45μm有机滤膜,待用。通过高效液相色谱(HPLC)进行分析。色谱柱为YMC-PackODS-A色谱柱(日本YMC公司,250×4.6mm i.d.,5μm),柱温25℃,35%甲醇水溶液等梯度洗脱,流速为0.6mL/min的流速洗脱,于250nm处检测峰。标准单糖衍生物的峰出现在tR=14.0min(L-Glu)和16min(D-Glu)。
6讨论
本发明采用各种色谱分离技术与波谱手段,并结合化学方法,从连翘的果实中分离得到1个新化合物(如式III所示),且对该化合物进行了抗肿瘤活性初筛,发现该化合物具有一定的抗癌活性。
表1式III化合物的1H-NMR和13C-NMR数据
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003047599A1 (en) * | 2001-12-06 | 2003-06-12 | Hun-Taeg Chung | An antiinflammatory composition containing catalposide isolated from stem bark of catalpa ovata |
CN101099769A (zh) * | 2007-06-25 | 2008-01-09 | 武汉大学 | 连翘在制备抗肿瘤化疗增敏减毒药物中的应用 |
CN101152261A (zh) * | 2007-09-04 | 2008-04-02 | 北京理工大学 | 连翘(果实或叶)中苯乙醇苷类和木质素苷类组分的应用 |
JP2013035795A (ja) * | 2011-08-09 | 2013-02-21 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | 新規フェニルエタノイド配糖体及び皮膚化粧料 |
WO2015158575A1 (en) * | 2014-04-14 | 2015-10-22 | Calixar | Synthesis of amphiphilic calixarene glycoside detergents and use of same for extracting and stabilizing native functional membrane proteins |
CN105294787A (zh) * | 2014-07-16 | 2016-02-03 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 一种红景天苷的合成方法及其中间体化合物 |
CN113694073A (zh) * | 2021-08-18 | 2021-11-26 | 西南民族大学 | 一种化合物及其用途 |
-
2021
- 2021-12-28 CN CN202111617380.XA patent/CN114262354B/zh active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003047599A1 (en) * | 2001-12-06 | 2003-06-12 | Hun-Taeg Chung | An antiinflammatory composition containing catalposide isolated from stem bark of catalpa ovata |
CN101099769A (zh) * | 2007-06-25 | 2008-01-09 | 武汉大学 | 连翘在制备抗肿瘤化疗增敏减毒药物中的应用 |
CN101152261A (zh) * | 2007-09-04 | 2008-04-02 | 北京理工大学 | 连翘(果实或叶)中苯乙醇苷类和木质素苷类组分的应用 |
JP2013035795A (ja) * | 2011-08-09 | 2013-02-21 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | 新規フェニルエタノイド配糖体及び皮膚化粧料 |
WO2015158575A1 (en) * | 2014-04-14 | 2015-10-22 | Calixar | Synthesis of amphiphilic calixarene glycoside detergents and use of same for extracting and stabilizing native functional membrane proteins |
CN105294787A (zh) * | 2014-07-16 | 2016-02-03 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 一种红景天苷的合成方法及其中间体化合物 |
CN113694073A (zh) * | 2021-08-18 | 2021-11-26 | 西南民族大学 | 一种化合物及其用途 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
stannic chloride-catalyzed synthesis of alkyl and aryl D-glycopranoside;bhat.v.s.et al;journal of the institution of chemists india;第63卷(第4期);第133-134页 * |
synthesis of 13C-labeled possible intermediates in the biosynthesis of phenythanoid derivatives,cornoside and rengyosides;kuwajima,hiroshi,et al;chemical pharmaceutical bulletin;第46卷(第4期);第581-586页 * |
王峥涛,等.中药化学.上海科学技术出版社,2009,第198页. * |
苯乙醇苷类成分构效关系研究进展;吴爱芝;林朝展;祝晨;;天然产物研究与开发(第06期);第862-865页 * |
连翘中 1 个新的苯乙醇苷;阎新佳,等;中国中药杂志;第47卷(第13期);第3526-3529页 * |
连翘中苯乙醇苷类成分的研究进展;卫 倩,等;中 国 临 床 药 理 学 杂 志;第34卷(第20期);第2481-2485页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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