CN114235988A - 一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种测定抑芽丹的高液相色谱方法,属于色谱分析领域。将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过苯基色谱柱分离后,利用浓度为0.05%~0.2%的氢氧化钠经80~120℃下碱解、浓度为0.01~0.02%邻苯二甲醛进行衍生后,在激发波长为330nm,发射波长为475nm的荧光检测器条件下测定,通过外标法对测定结果进行定量。利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定,方法干扰小,基质效应低,灵敏度高,重现性好,解决了目前抑芽丹测定存在的突出问题,适合抑芽丹含量的测定。
Description
技术领域
本发明属于色谱分析领域,具体涉及一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法。
背景技术
抑芽丹又叫马来酰肼,具有阻碍植物细胞分裂和降低光合作用的效果,在农业上主要用 作植物生长调节剂和选择性除草剂。如,用于抑制马铃薯、生姜、大蒜等发芽。抑芽丹具有 诱变致癌性质,在一定剂量下能导致染色体断裂,产生细胞毒性。我国已在大蒜、洋葱、马 铃薯等作物上制定了严格的限量标准,因此,强化对抑芽丹的风险监测十分必要。
抑芽丹的检测方法有很多,如分光光度法、高效液相色谱紫外检测法、高效液相色谱质 谱法等。但目前这些主流分析方法都存在一定的缺陷,如分光光度法的前处理繁琐,前处理 用到的强碱容易腐蚀仪器;抑芽丹的极性较强,出峰早,采用液相色谱紫外检测法会导致抑 芽丹与干扰杂质分不开,无法准确定量;液相色谱质谱法中抑芽丹与极性杂质共流出,对抑 芽丹产生较大的基质抑制作用,准确定量较困难,而且仪器成本较高。
因此,我们开发一种不同于以上抑芽丹分析的方法,该方法操作简便、成本较低。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中抑芽丹测定方法的不足,提供一种操作简便、成本较 低的测定方法。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法,包括:
(1)配制氢氧化钠的浓度为0.05~0.2%,流速为0.3ml/min;
(2)配制邻苯二甲醛的浓度为0.01~0.02%,流速为0.3ml/min;
(3)将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过苯基色谱柱分离后, 在80~120℃下碱解,在激发波长为330nm,发射波长为475nm的荧光检测器条件下测定。
本发明的有益效果在于:
利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定,方法操作简便、干扰小,成本 低,适合抑芽丹含量的测定。
附图说明
图1为实施例2中抑芽丹衍生后色谱图。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解,下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方 案进一步的说明,但是本发明不仅限于此。
实施例1
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过苯基柱分离,经碱解和衍 生后,在激发波长330nm,发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧 化钠的浓度为0.05%,碱解的温度为80℃,流速为0.3mL/min,衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.01%,流速为0.3mL/min。
实施例2
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过苯基柱分离,经碱解和衍 生后,在激发波长330nm,发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧 化钠的浓度为0.1%,碱解的温度为100℃,流速为0.3mL/min,衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.15%,流速为0.3mL/min。根据图1结果可知,在3.75min左右的色谱峰为抑芽丹衍生后 的色谱峰。
实施例3
一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法
将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过苯基柱分离,经碱解和衍 生后,在激发波长330nm,发射波长475nm的荧光检测器条件下进行测定。其中碱解液氢氧 化钠的浓度为0.2%,碱解的温度为120℃,流速为0.3mL/min,衍生试剂邻苯二甲醛的浓度 为0.2%,流速为0.3mL/min。
对比例1
现有发明专利《一种烟草中残留抑芽丹的提取方法及测定方法》(CN 107589187A)中抑 芽丹的测定步骤主要为:称取2.0g样品于100mL耐热螺口锥形瓶中,向瓶中加入20mL 4mol/L盐酸水溶液和100μL 200μg/mL的氘代抑芽丹内标溶液,150℃油浴磁力搅拌1h,冷 却室温后,提取液以10000rpm离心5min,用C18固相萃取柱净化,液相色谱串联质谱仪测 定。
实施例与对比例1相比,操作简便,节省时间,消耗试剂少,不需要氘代抑芽丹,成本 低。
对比例2
现有专利《一种液相串联质谱检测烟台质谱中抑芽丹含量的方法》(CN105651882A)中 涉及的测定步骤为:用0.5-2%甲酸甲醇溶液萃取抑芽丹,同时加入马来酰肼-D2内标,振荡 提取5-20min,超声提取5-20min后,取上清液用液相色谱串联质谱法测定。
实施例与对比例2相比,不需要使用马来酰肼-D2内标进行结果校正,不需要使用昂贵 的液相色谱串联质谱仪,成本较低,操作简便。
综上所述,利用液相色谱柱后衍生的方法实现对抑芽丹含量的测定,方法操作简便、干 扰小,成本低,适合抑芽丹含量的测定。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰, 皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (7)
1.一种测定抑芽丹含量的高效液相色谱法,包括:
利用氢氧化钠对抑芽丹进行碱解,产物经邻苯二甲醛衍生后,在荧光检测器下检测。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法,包括:
1)将抑芽丹待测溶液通过自动进样器引入高效液相色谱仪,通过色谱柱分离后,经碱解和衍生后,荧光检测器测定;
2)通过外标法对测定结果进行定量。
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法,其中:
所述氢氧化钠的浓度为0.05~0.2%。
4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法,其中:
所述碱解的温度为80~120℃,流速为0.3ml/min。
5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法,其中:
所述邻苯二甲醛的浓度为0.01~0.02%,流速为0.3ml/min。
6.根据权利要求1所述的高效液相色谱法,其中:
所述荧光检测器的激发波长为330nm,发射波长为475nm。
7.根据权利要求6所述的高效液相色谱法,其中:
色谱柱选择苯基柱。
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