CN114224951A - 一种黄连吴茱萸组合物中总生物碱的工业制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了能同时富集两种药味中的生物碱的方法，且可选择的除去了柠檬苦素这一毒性成分，工艺流程简便，能耗低，使用材料、试剂易得易处理，产品安全性高。

Description

一种黄连吴茱萸组合物中总生物碱的工业制备方法

技术领域

本发明涉及一种生物碱的制备方法，特别是黄连和/或吴茱萸中生物碱的工业制备方法，属于医药领域。

背景技术

左金方由金元时期著名医家朱丹溪创制，方药精良，以黄连、吴茱萸按6:1的特殊比例配伍而成。朱丹溪表其用意“凡伙盛者，不可骤用凉药，必兼温散”，故以苦寒之黄连清泻君相之火，辛温之吴茱萸温中调气佐制，辛开苦降、寒热并用，共奏清泻肝火、降逆止呕之功，主治胁肋疼痛，嘈杂吞酸，呕吐口苦，舌质红、苔黄，脉弦数等属肝火犯胃证。现代药理学研究发现，左金方除了“治肝火”的功效，还有抗幽门螺旋杆菌、抗溃疡及抑制胃酸分泌、抑菌和抗炎等作用，临床应用广泛。

《中国药典》收录的黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。黄连味苦，性寒，有泻火、解毒、清热、燥湿的功能。用于烦热神昏、心烦失眠、湿热痞满、呕吐、腹痛泻痢、目赤肿毒、口舌生疮、湿疹、烫伤、吐血、衄血等，其发挥药效的物质主要为生物碱类成分。吴茱萸属芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecarpa(Juss)Benth.、石虎Evodiarutaecarpa(Juss).vat.officinalis(Dode)Huang Benth.、疏毛吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss)Benth.vat,bodinieri(Dode)Huang干燥近成熟果实，味苦辛、性温热、有小毒；能温中散寒、疏肝止痛。用于厥阴头痛、腹脘冷痛、呕吐泄泻、痛经、高血压等症。研究表明吴茱萸主要成分为生物碱、挥发油、苦味素等，相关研究研究表明这些化学物质在抗实验性胃溃疡、抗炎镇痛、抗血栓形成和抗肿瘤等方面有着重要的作用。但近年来有研究表明，吴茱萸中的柠檬苦素具有肝肾和遗传毒性。

综上，对黄连和吴茱萸中生物碱进行提取纯化研究十分有必要，提高总生物碱含量不仅能除去非药效杂质，还能降低药物服用量；另一方面，针对左金方中黄连和吴茱萸6:1的投料比进行纯化的同时如何去除吴茱萸中的毒性成分柠檬苦素也是工艺上的一大难点，因此，纯化工艺也具有挑战性。

目前黄连和吴茱萸的提取纯化工艺绝大部分仅针对单味药进行，提取纯化工艺复杂、成本高、工艺放大困难、纯化产品纯度低等问题，且吴茱萸纯化没有较为简便的的方法能在保留生物碱的同时除去毒性成分柠檬苦素。

专利(CN02103880.5)报道了一种黄连总生物碱的提取工艺：黄连用水浸泡并时超声波处理，在温浸条件下进行总生物碱提取，提取液进行减压浓缩，然后用浓盐酸调节浓缩液的pH值，再加入氯化钠，静置，然后通过抽滤或离心甩干收集提取液中的沉淀物，烘干，粉碎，得黄连总生物碱盐酸盐。该工艺用水作溶剂提取，黄连碱等成分水溶性极低，提取效率不高，造成原料的浪费，且该法得到的为黄连总生物碱粗品，含量较低。

专利(CN200510044345.8)采取了一种苯乙烯型大孔树脂制备黄连总生物碱的方法。主要流程为称取经适当粉碎的药材，以水提取，水煎液过滤或离心沉降，控制流速将水煎液上清液加至预处理好的树脂柱上，水洗，用含水乙醇洗脱，将含水乙醇洗脱液浓缩即可析出大量生物碱沉淀，干燥即得；提取物总生物碱含量经HPLC检测，以盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱和硫酸黄连碱为对照品，黄连总生物碱含量25％以上。该专利工艺采取了大孔树脂纯化，但提取方法采用水提，直接过大孔树脂，上样量大，生物碱损失较大，导致最终收率较低。

专利(CN201110053453.7)使用一种聚酰胺树脂分离纯化黄连中的生物碱，主要包括：黄连粗浸膏用聚酰胺拌样后上聚酰胺柱，用二氯甲烷洗脱或用二氯甲烷和甲醇的混合溶剂梯度洗脱，用薄层层析检验流份，合并相同流份，干燥，即可分离得到小檗碱、巴马汀、黄连碱、非洲防己碱、药根碱、木兰花碱、Groenlandcine等七个生物碱。该工艺主要分离得到几种黄连生物碱单体，导致其他生物碱成分流失，且分离过程中使用了毒性较大的二氯甲烷等溶剂，安全和成本难以保障，工艺放大较为困难。

专利(CN200710026347.3)描述了一种超声提取吴茱萸生物碱的方法：将吴茱萸药材粉碎成粗粉，置于超声提取器中，用乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为1∶10～1∶30，浸泡时间30min～60min后在超声频率20～70kHz、温度20～70℃下，提取30min～120min后出料、滤过、取滤液经减压过滤或离心，清液浓缩回收溶剂得稠膏再干燥即得吴茱萸生物碱。该方法得到的为吴茱萸提取物，生物碱含量较低，没有除去毒性成分柠檬苦素，且超声提取能耗高，不易放大生产。

文献报道了[尚勇,李芸,刘永琦,邓彪。吴茱萸有效部位的提取纯化及含量测定[J].中兽医医药杂志,2015,34(01):35-38.]一种中性氧化铝层析柱纯化吴茱萸生物碱的方法：取提取物干膏，研细，加丙酮，置水浴锅60℃加热回流1h，滤过，滤液回收丙酮，得稠膏，加入适量的中性氧化铝搅拌，研成细粉状，上中性氧化铝(100-200目)柱，用5BV乙酸乙酯-二氯甲烷(70∶30)洗脱，流速为1BV/h，分段收集。洗脱过程中不断用4种生物碱沉淀试剂(苦味酸、碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘-碘化钾试液)同时进行检识，收集四者均呈阳性反应的洗脱液，回收洗脱剂，得生物碱粗品。该方法适合实验室小试研究，工艺放大困难，有毒试剂使用量较大。

发明内容

针对目前黄连吴茱萸纯化制备过程中的问题，本发明找到一种工艺简便、效率高且大批量生产较为容易的同时纯化制备黄连和吴茱萸中总生物碱的方法，且同时除去了柠檬苦素这一毒性成分。

本发明提供如下技术方案:

本发明提供了一种生物碱的制备方法，其特征在于，所述生物碱的原料为黄连和/或吴茱萸，所述制备方法包括如下步骤：将所述生物碱的原料采用乙醇提取，树脂纯化，乙醇梯度洗脱获得。

根据本发明，所述乙醇提取为使用50～90％乙醇回流提取，优选地，加入原料8～12倍量50～90％乙醇回流提取2～4次，每次1～3h。

根据本发明，所述树脂为大孔吸附树脂。优选地，选自苯乙烯型大孔吸附树脂柱、AB-8大孔吸附树脂柱、D101大孔吸附树脂柱中的一种。更有选地，所述树脂为直径40cm，原料重量：大孔树脂体积＝1:6～1:8的大孔吸附树脂。根据本发明，所述乙醇梯度洗脱为用40％-95％乙醇梯度洗脱。

示例的，依次用40％乙醇、60％乙醇、95％乙醇洗脱流速约300～350L/h。更具体地，依次用40％乙醇流速约150～260L/h，60％乙醇流速250～350L/h，95％乙醇洗脱流速约300～350L/h。其中，流量分别为：40％乙醇为25～30BV，60％乙醇为18～25BV，95％乙醇为15～20BV。

根据本发明，所述生物碱的原料为黄连或吴茱萸或二者的混合物。

本发明中，上述制备方法可以采用相同或类似的制备方法单独提取黄连或吴茱萸，也可以将黄连和吴茱萸混合在一起进行提取。优选是以两种生药材的混合物作为提取原料。

根据本发明，优选地，生药材量以黄连：吴茱萸6：1进行混合配比。根据本发明，所述乙醇提取后合并提取液，减压浓缩，过滤，取上清液。

优选地，所述减压浓缩至0.2～0.5g生药/ml，所述减压浓缩的条件为55-70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa，200～300目过滤，取上清液。

本发明人经检测发现，柠檬苦素这一毒性成分仅存在于60％乙醇洗脱液中，因此本发明在所述乙醇梯度洗脱后，可以根据需要收集相关的乙醇洗脱液，以尽可能减少或去除柠檬苦素这一副作用的成分。

基于此，本发明还提供一种黄连和吴茱萸总生物碱的工业制备方法，采用本发明的上述生物碱的制备方法，对于40％-95％乙醇梯度洗脱液，弃去其中的60％乙醇洗脱液，收集40％乙醇洗脱液和95％乙醇洗脱液。

根据本发明，所述总生物碱包括黄连生物碱和吴茱萸生物碱。优选地，所述总生物碱包括黄连碱、表小檗碱、药根碱、防己碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。

本发明还提供了一种去除柠檬苦素的方法，所述柠檬苦素来源于黄连和吴茱萸，其特征在于，采用本发明的上述生物碱的制备方法，对于40％-95％乙醇梯度洗脱液，弃去其中的60％乙醇洗脱液。

本发明还提供了一种制备黄连碱、表小檗碱、药根碱、防己碱、小檗碱和巴马汀的方法，采用本发明的上述生物碱的制备方法，得到40％乙醇洗脱液和60％乙醇洗脱液分别减压浓缩至浸膏，减压干燥。优选地，为去除柠檬苦素，即弃去60％乙醇洗脱液，收集40％乙醇洗脱液。

根据本发明，所述减压浓缩条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa。

所述减压干燥条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa。

本发明还提供了一种制备吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，采用本发明的上述生物碱的制备方法，收集60％乙醇洗脱液和95％乙醇洗脱液。优选地，为去除柠檬苦素，弃去60％乙醇洗脱液，收集95％乙醇洗脱液，所述95％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏，冷冻干燥，得吴茱萸碱和吴茱萸次碱干膏。

根据本发明，所述减压浓缩条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa，所述冷冻干燥条件为-40～-70℃，10～60pa。

有益效果

黄连和吴茱萸的主要药效成分均为生物碱，本发明的方法同时富集两种药味中的生物碱，且可选择性的除去了柠檬苦素这一毒性成分(存在于60％乙醇洗脱液中)，工艺流程简便，能耗低，使用材料、试剂易得易处理，产品安全性高。

具体实施方式

下文将结合具体实施例对本发明的制备方法做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例一

1总生物碱制备

1.1原料提取

取黄连36kg，吴茱萸6kg，加10倍量70％乙醇回流提取2次，每次1h，合并提取液，减压浓缩至0.5g生药/mL(60℃，-0.085Mpa)，过滤(300目)，取上清液，备用。

1.2树脂纯化

取上清液，通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂柱(直径40cm，大孔树脂装填高度200cm，柱体积251L，原料重量：大孔树脂体积＝1:6)，径高比1：5，上样流速280L/h，上样吸附1h，用纯化水(9BV)洗脱至molish反应阴性，洗脱流速约540L/h，然后依次用40％乙醇(28BV)流速约200L/h，60％乙醇(20BV)流速约300L/h，95％乙醇(18BV)洗脱流速约320L/h，收集各部位乙醇洗脱液，40％乙醇洗脱液和60％乙醇洗脱液分别减压浓缩至浸膏(60℃，-0.085Mpa)，减压干燥(65℃，-0.09Mpa)，得40％乙醇洗脱部位和60％乙醇洗脱部位干膏；95％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏(60℃，-0.085Mpa)，冷冻干燥(-40℃，10pa)，得95％乙醇洗脱部位干膏。

2含量检测

2.1黄连碱、表小檗碱、药根碱、防己碱、小檗碱和巴马汀方法学考察

色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(2.1mm*100mm,1.7μm)；流动相系统：A：水-0.1％甲酸；B：乙腈。0-3.6min 5％-11.5％B，3.6-10min11.5％-15％B，10-20min 15％-19％B，20-30min 19％-85％B检测波长：270nm，流速0.4ml/min。

对照品溶液的制备取盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、表小檗碱、盐酸巴马汀、药根碱和非洲防己碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含盐酸小檗碱214.2μg、盐酸黄连碱97.2μg、表小檗碱51.2μg、盐酸巴马汀68.3μg、药根碱48.45μg、非洲防己碱49μg的混合溶液，即得。

2.1.1线性关系和精密度

线性关系考察结果如下：

日内精密度和日间精密度实验测得各成分峰峰面积RSD小于2％，表明本方法精密度良好。

2.1.2重复性、稳定性、加样回收率

取“1.2”项下树脂纯化40％乙醇洗脱部分样品，精密称定，加甲醇适量溶解，滤过，取续滤液，即得。分别测得各成分的峰面积积分值，计算含量及RSD。

重复性结果各成分含量RSD(％)均小于2，表明样品重复性良好；稳定性结果显示，0、2、4、8、16、24、36小时内各成分峰面积RSD(％)均小于3，说明样品在36小时内稳定性良好；加样回收率实验显示各成分回收率在95％～105％，RSD(％)均小于2。

2.2去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱方法学考察

色谱条件同“2.1”项下色谱条件。

对照品溶液配制取吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含去氢吴茱萸碱46.45μg、吴茱萸碱46.45μg、吴茱萸次碱53.3μg的混合溶液，即得。

2.2.1线性关系和精密度考察

线性关系考察结果如下：

上述条件下，各成分线性关系良好。

日内精密度和日间精密度实验测得各成分峰峰面积RSD小于2％，表明本方法精密度良好。

2.2.2重复性、稳定性、加样回收率

取“实施例1”项下树脂纯化95％乙醇洗脱部位样品，精密称定，加甲醇适量溶解，滤过，取续滤液，即得。分别测得各成分的峰面积积分值，计算含量及RSD。

重复性结果各成分含量RSD(％)均小于2，表明样品重复性良好；稳定性结果显示0、2、4、8、16、24、36小时内各成分峰面积RSD(％)均小于3，说明样品在36小时内稳定性良好；加样回收率实验显示各成分回收率在95％～105％，RSD(％)均小于3。

2.3样品含量检测

照“2.1”色谱条件进行含量检测，对照品配制同“2.1”和“2.2”项下黄连生物碱对照品溶液、吴茱萸生物碱对照品溶液进行配制。

供试品溶液配制分别取40％乙醇洗脱部位、60％乙醇洗脱部位和95％乙醇洗脱部位干膏粉约0.1g，精密称定，置25mL容量瓶中，加甲醇适量溶解并定容至刻度，取2mL溶液至10mL容量瓶中甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；另取提取液1mL至5mL容量瓶甲醇定容滤过，取续滤液，即得。分取黄连和吴茱萸饮片粉碎过筛，取粉末(过二号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸(100︰1)溶液50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

此检测方法也可初步检测柠檬苦素含量，结果见下表：

上表结果显示，黄连中生物碱主要存在于40％乙醇洗脱部位，黄连碱等6种生物碱总量31.80％；吴茱萸生物碱主要存在于95％乙醇洗脱部位，吴茱萸碱和吴茱萸次碱总量10.65％；毒性成分柠檬苦素存在于60％乙醇洗脱部位，含量0.23％，其他部位并未检测到此成分，生物碱在60％乙醇洗脱部位含量较低，考虑到有柠檬苦素存在，此部位弃去。

实施例二

1总生物碱制备

1.1原料提取

取黄连36kg，吴茱萸6kg，加12倍量50％乙醇回流提取4次，每次3h，合并提取液，减压浓缩至0.2g生药/mL(65℃，-0.09Mpa)，过滤(200目)，取上清液，备用。

1.2树脂纯化

取上清液，通过预处理好的D101大孔吸附树脂柱(直径40cm，大孔树脂装填高度240cm，柱体积301L，原料重量：大孔树脂体积＝1:7)，径高比1：6，上样流速约300L/h，上样吸附2h，用纯化水(10BV)洗脱至molish反应阴性，洗脱流速约600L/h，然后依次用40％乙醇(30BV)流速约260L/h，60％乙醇(18BV)流速约250L/h，95％乙醇(15BV)洗脱流速约300L/h，收集各部位乙醇洗脱液，40％乙醇洗脱液和60％乙醇洗脱液分别减压浓缩至浸膏(70℃，-0.09Mpa)，减压干燥(65℃，-0.1Mpa)，得40％乙醇洗脱部位和60％乙醇洗脱部位干膏；95％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏(65℃，-0.085Mpa)，冷冻干燥(-50℃，40pa)，得95％乙醇洗脱部位干膏。

2含量测定

色谱条件和检测方法按照实施例一“2含量测定”项下进行，结果显示，40％乙醇洗脱部位黄连碱等6种生物碱总量28.70％；95％乙醇洗脱部位吴茱萸碱和吴茱萸次碱总量9.45％；60％乙醇洗脱部位柠檬苦素含量0.18％，其他部位未检测到此成分，生物碱在60％乙醇洗脱部位含量较低，且有柠檬苦素存在，此部位弃去。

实施例三

1总生物碱制备

1.1原料提取

取黄连36kg，吴茱萸6kg，加8倍量95％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，减压浓缩至0.3g生药/mL(55℃，-0.08Mpa)，过滤(300目)，取上清液，备用。

1.2树脂纯化

取上清液，通过预处理好的D101大孔吸附树脂柱(直径40cm，大孔树脂装填高度280cm，柱体积352L，原料重量：大孔树脂体积＝1:8)，径高比1：7，上样流速约320L/h，上样吸附3h，用纯化水(8BV)洗脱至molish反应阴性，洗脱流速约680L/h，然后依次用40％乙醇(25BV)流速约150L/h，60％乙醇(25BV)流速约350L/h，95％乙醇(20BV)洗脱流速约350L/h，收集各部位乙醇洗脱液，40％乙醇洗脱液和60％乙醇洗脱液分别减压浓缩至浸膏(60℃，-0.09Mpa)，减压干燥(65℃，-0.1Mpa)，得40％乙醇洗脱部位和60％乙醇洗脱部位干膏；95％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏(55℃，-0.09Mpa)，冷冻干燥(-70℃，60pa)，得95％乙醇洗脱部位干膏。

2含量测定

色谱条件和检测方法按照实施例一“2含量测定”项下进行，结果显示，40％乙醇洗脱部位黄连碱等6种生物碱总量27.50％；95％乙醇洗脱部位吴茱萸碱和吴茱萸次碱总量10.52％；60％乙醇洗脱部位柠檬苦素含量0.21％，其他部位未检测到此成分，生物碱在60％乙醇洗脱部位含量较低，且有柠檬苦素存在，此部位弃去。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种生物碱的制备方法，其特征在于，所述生物碱的原料为黄连和/或吴茱萸，所述制备方法包括如下步骤：将所述生物碱的原料采用乙醇提取，树脂纯化，乙醇梯度洗脱获得。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述乙醇提取为使用50～90％乙醇回流提取。优选地，加入原料8～12倍量50～90％乙醇回流提取2～4次，每次1～3h。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述树脂为大孔吸附树脂。

优选地，选自苯乙烯型大孔吸附树脂柱、AB-8大孔吸附树脂柱、D101大孔吸附树脂柱中的一种。

更有选地，所述树脂为直径40cm，原料重量：大孔树脂体积＝1:6～1:8的大孔吸附树脂。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇梯度洗脱为用40％-95％乙醇梯度洗脱。

优选地，依次用40％乙醇、60％乙醇、95％乙醇洗脱流速约300～350L/h。

更优选地，依次用40％乙醇流速约150～260L/h，60％乙醇流速250～350L/h，95％乙醇洗脱流速约300～350L/h。

更优选地，流量分别为：40％乙醇为25～30BV，60％乙醇为18～25BV，95％乙醇为15～20BV。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇提取后合并提取液，减压浓缩，过滤，取上清液。

优选地，所述减压浓缩至0.2～0.5g生药/ml，所述减压浓缩的条件为55-70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa，200～300目过滤，取上清液。

优选地，所述生物碱的原料为黄连或吴茱萸或二者的混合物。更优选，所述生物碱的原料为黄连和吴茱萸的混合物。最优选，所述原料按照生药材量以黄连：吴茱萸6：1进行混合配比。

6.一种去除黄连和/或吴茱萸中柠檬苦素的方法，其特征在于，采用权利要求1-5中任一所述的制备方法，所述乙醇梯度洗脱后，对于40％-95％乙醇梯度洗脱液，弃去其中的60％乙醇洗脱液。

7.一种黄连和吴茱萸组合物中总生物碱的工业制备方法，采用权利要求1-5中任一所述的制备方法，所述乙醇梯度洗脱后，对于40％-95％乙醇梯度洗脱液，弃去其中的60％乙醇洗脱液。优选地，所述总生物碱包括黄连生物碱和吴茱萸生物碱。更优选地，所述生物碱包括黄连碱、表小檗碱、药根碱、防己碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。

8.一种制备黄连碱、表小檗碱、药根碱、防己碱、小檗碱和巴马汀的方法，采用权利要求1-5中任一所述的制备方法，所述乙醇梯度洗脱后，40％乙醇洗脱液和60％乙醇洗脱液分别减压浓缩至浸膏，减压干燥。优选地，弃去其中的60％乙醇洗脱液，收集40％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏，减压干燥。

优选地，所述减压浓缩条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa。

所述减压干燥条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa。

9.一种制备吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，采用权利要求1-5中任一所述的制备方法，收集60％乙醇洗脱液和95％乙醇洗脱液。优选地，弃去其中的60％乙醇洗脱液。

10.一种制备吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其特征在于，采用权利要求1-5中任一所述的制备方法，收集95％乙醇洗脱液，所述95％乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏，冷冻干燥，得吴茱萸碱和吴茱萸次碱干膏。

优选地，所述减压浓缩条件为55～70℃，-0.08Mpa～-0.1Mpa，所述冷冻干燥条件为-40～-70℃，10～60pa。