CN114196603A - 一种乳双歧杆菌sf-b21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用 - Google Patents
一种乳双歧杆菌sf-b21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种乳双歧杆菌SF‑B21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用。乳双歧杆菌SF‑B21的分类命名为Bifidobacterium lactis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23474，保藏日期为2021年9月23日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。增加骨密度发酵饮品的制备工艺包括：将被发酵底物经乳双歧杆菌SF‑B21发酵后与调味料混合调味制得增加骨密度发酵饮品。本发明运用生物技术，使用乳双歧杆菌SF‑B21发酵制备的发酵饮品可提高骨密度，预防和治疗骨质疏松。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种乳双歧杆菌SF-B21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用。
背景技术
骨质疏松是一种全身性骨病，属于慢性病，在临床上主要表现为周身疼痛、身高降低、驼背、脆性骨折及呼吸系统影响等。其特征是骨量减少、骨微结构破坏、脆性增加，且引起骨折，如同“糠心萝卜”。目前根据骨密度分为骨量正常、低骨量、骨质疏松和严重骨质疏松。骨质疏松性骨折的危害巨大，是老年患者致残和致死的主要原因之一。发生髋部骨折后1年之内，20%患者会死于各种并发症，约50%患者致残，生活质量明显下降。目前，国内用于预防和治疗骨质疏松、提高骨密度的方式包括西式治疗与中式治疗，西式方法包括服用甲状旁腺激素类似物、双膦酸盐类、降钙素、选择性雌激素受体调节剂、RNAK抑制剂、维生素K2类等。中式治疗主要是传统中药，如人工虎骨粉制剂、淫羊藿苷类制剂等。
专利CN1250267C公布了一种用于改善睡眠和增加骨密度的保健品及制备方法，采用中药炒杏仁、地黄、生牡蛎、白芍、枸杞子、当归、麦冬、百合、北五味子与莲子心作为活性成分与药用辅料组成，药材加水煎煮两次并离心浓缩后制成口服液，具有改善睡眠和增加骨密度的功效。专利CN102224896A公布了一种用于增强人体免疫力、增加骨密度的保健食品及其制备方法，本发明的保健食品由透明质酸、氨基葡萄糖、胶原蛋白、葛根提取物、硫酸软骨素、维生素、钙等成分组成，长期服用过程中起到润滑关节、提高骨密度，增强骨强度的作用。专利CN104664402B公布了一种增加骨密度的组合物及其制备方法和应用，由氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、乳矿物盐、姜黄提取物、杜仲提取物组成，具有增加骨密度的功能。专利CN1250267C是纯中药方案，药效慢、口感差。专利CN102224896A与专利CN104664402B为中药与西药联合治疗方案，但是以药为主，长期服用对患者有一定的副作用。目前并未有关利用乳双歧杆菌制剂或产品增加骨密度方面的相关报道。
发明内容
针对现有技术中治疗骨质疏松的产品见效慢、口感差、具有一定副作用的问题，本发明运用生物技术，提供一种乳双歧杆菌SF-B21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用，使用该乳双歧杆菌SF-B21发酵制备的发酵饮品可提高骨密度，预防和治疗骨质疏松。
第一方面，本发明提供一种乳双歧杆菌SF-B21，分类命名为Bifidobacterium lactis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23474，保藏日期为2021年9月23日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
进一步的，所述乳双歧杆菌SF-B21是从酸奶中分离获得的。
第二方面，本发明提供一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺包括：将被发酵底物经乳双歧杆菌SF-B21发酵后与调味料混合调味制得增加骨密度发酵饮品。
进一步的，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺，具体包括以下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，培养得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，培养得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
进一步的，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺，具体包括以下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；
（3）将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
进一步的，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：净化水60-70份，茯苓提取物1-2份，杜仲叶提取物1-2份，黄芪提取物1-2份，党参提取物1-2份，甘草提取物2-3份，枸杞提取物2-3份，桑葚提取物2-3份，核桃仁粉2-3份，山药粉2-3份，红枣粉2-3份，黑芝麻粉2-3份，牡蛎粉2-3份；
所述调味料包括如下重量份的组分：蜂蜜1-2份，苹果浓缩汁4-5份，梨浓缩汁4-5份，桃浓缩汁4-5份。
进一步的，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：净化水64份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份；
所述调味料包括如下重量份的组分：蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
进一步的，所述增加骨密度发酵饮品为淡黄色或深黄色液体。
进一步的，所述增加骨密度发酵饮品中含有乳双歧杆菌SF-B21的数量为10-30亿/ml。
本发明增加骨密度发酵饮品的被发酵底物具备如下功效：
茯苓：味甘、淡，性平；归心、肺、脾、肾经，利水渗湿，健脾，宁心；
杜仲叶：微辛、温，归肝、肾经，具有补肝肾、强筋骨、降血压的功效，主治肝肾不足，腰膝酸软，筋骨痿弱等症；
黄芪：补气固表，托毒排脓，利尿，生肌。
党参：甘，平。补中益气，和胃生津，祛痰止咳，用于脾虚食少便溏，四肢无力；
甘草：补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药；
枸杞：甘，平，滋肾，润肺；
桑葚：味甘性寒，入心肝、肾经，有滋阴补血作用，并能治阴虚津少、失眠等；
核桃仁：温补肺肾，定喘润肠。用于肾虚腰痛、脚软、虚寒喘咳、大便燥结；
山药：健脾，补肺，固肾，益精；
红枣：味甘性温、归脾胃经，有补中益气、养血安神、缓和药性的功能；
黑芝麻：补肝肾，益精血，润肠燥；
牡蛎粉：敛阴，潜阳，止汗，涩精，化痰，软坚；
蜂蜜：具有调补脾胃的功效。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供的乳双歧杆菌SF-B21具有高粘附性、强肠胃适应能力，可有效调节肠胃菌群健康，提高机体免疫力的功效。
本发明提供的增加骨密度发酵饮品可起到提高骨密度，预防和治疗骨质疏松的功能，且本品原材料全部是药食两用，无任何副作用。
附图说明
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
图1为测试例2中发酵饮品对大鼠股骨重量的影响示意图。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
本发明使用的MRS固体平板培养基包括以下组分：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL。
本发明使用的MRS液体培养基包括以下组分：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、蒸馏水1000mL。
本发明使用的各物质提取物的制备方法为：茯苓提取物，杜仲叶提取物，黄芪提取物，党参提取物，甘草提取物，枸杞提取物，桑葚提取物制备工艺为：将原料洗净后破碎成粗粒，用10倍量水煎煮2次，煎煮时间为3h和1h，合并两次滤液，静置2h后过滤得提取液。将提取液在真空度为-0.06到0.08Mpa浓缩至1.10-1.15（70℃），然后进行喷雾干燥，最后粉碎成80目细粉即得提取物。
各物质粉的制备方法为：
核桃仁粉，核桃仁烘干至含水量5%以下，磨碎成80目的核桃仁粉。
山药粉，选择光滑、无病斑、条形直顺的新铁棍鲜山药；去除泥污，在清水中清洗干净；用削皮刀或竹片刮去外表皮，并挖除黑色斑眼。将去皮后的山药，切成0.2-0.3厘米厚的薄片。山药切片后立即浸入0.5%亚硫酸氢钠水溶液中进行变色处理，浸泡2-3小时后捞出；将捞出的山药片用清水漂去药液和胶体，然后放人沸水锅中烫漂6-8分钟，注意不要煮烂，捞出后再清水漂去黏液。将烫漂后的山药片置60-65℃烘房或烘箱内烘20小时。将烘干后的山药片用电磨加工成粉。
红枣粉，将挑选好的红枣清洗后进行预煮，预煮温度70-90℃，红枣与水的料液比为1：5，预煮时间30min，得到预煮红枣汁。红枣汁去核并打碎为浆状，得到红枣浆，然后加入0.01%的果胶酶进行酶解，酶解温度30℃，酶解时间80min，真空加热浓缩至原重量的20%，得到浓缩红枣浆，采用两级高压进行均质处理，均质红枣浆进行喷雾干燥即得红枣粉。
黑芝麻粉，黑芝麻烘干至含水量5%以下，磨碎成80目得黑芝麻粉。
牡蛎粉，将选取的牡蛎壳清洗后，用0.5%盐酸进行酸洗1小时，用蒸馏水漂洗后，将牡蛎磨碎成80目粉末。
各物质浓缩汁的制备方法为：
桃、苹果、梨浓缩汁，将原料挑选、修整后在100℃沸水中短时浸泡，用刷皮机除去表皮。水蜜桃需开瓢机并去核，然后用切丁机切丁后预煮5min，输送至打浆机打成浆，采用卧螺机提取汁液，同时用真空机除去氧气，用两效真空蒸发器，物料浓缩到36-40%，然后进行高温杀菌，冷却后即得水蜜桃、胡萝卜浓缩汁。
实施例1乳双歧杆菌SF-B21的分离和鉴定
1、菌源：酸奶；采集时间为2021年1月，采集地点为青海省西宁市。
2、菌株的分离
对酸奶样品做十倍梯度稀释，每个梯度取100μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上，随后取出置于厌氧罐中，37℃厌氧培养过夜；
次日可见平板上长有形态大小各异的菌落，挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理，平板厌氧活化1天，得培养物，随后做菌株鉴定。
3、鉴定结果
该菌株被鉴定为Bifidobacterium（双歧杆菌属），推测为Bifidobacteriumanimalis subsp. lactis（动物双歧杆菌乳亚种）。
实施例2 一种用乳双歧杆菌SF-B21发酵的增加骨密度发酵饮品
准备增加骨密度发酵饮品的原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水64份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份。
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备增加骨密度发酵饮品：
首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
实施例3一种用乳双歧杆菌SF-B21发酵的增加骨密度发酵饮品
准备增加骨密度发酵饮品的原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水66份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份。
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备增加骨密度发酵饮品：
首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
实施例4一种用乳双歧杆菌SF-B21发酵的增加骨密度发酵饮品
净化水67份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉3份。
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备增加骨密度发酵饮品：
首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
实施例5一种用乳双歧杆菌SF-B21发酵的增加骨密度发酵饮品
准备增加骨密度发酵饮品的原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水70份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物3份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份。
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备增加骨密度发酵饮品：
首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
实施例6一种用乳双歧杆菌SF-B21发酵的增加骨密度发酵饮品
准备增加骨密度发酵饮品的原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水67份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物2份，甘草提取物3份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份。
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备增加骨密度发酵饮品：
首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
测试例1乳双歧杆菌SF-B21的胃肠液耐受性测试
（1）模拟胃液的配置：125 mmol/L NaCl、7 mmol/L KCl、45 mmol/L、NaHCO3和3 g/L胃蛋白酶，用盐酸调节pH 2.5，制成模拟胃液，以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（2）模拟肠液的配置：45 mmol/L NaCl、1 g/L胰蛋白酶、3 g/L牛胆盐，用氢氧化钠调节pH 8.0，制成模拟肠液，以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（3）分别将动物双歧杆菌乳亚种CICC 21709、动物双歧杆菌 CICC 21711和乳双歧杆菌SF-B21连续活化三代（每代18h），测定连续活化三代的菌株在A600下的OD值，通过计算求出OD5所需的菌液量；
（4）将OD5的菌液以8000G离心10min，弃上清，重悬于1mL模拟胃液中，37℃培养3h后进行平板活菌计数；
（5）取模拟胃液处理后的菌液8000G离心10min，弃上清，重悬于等体积的模拟肠液中，37℃培养4h后进行平板活菌计数。
按照如下公式计算各菌株的耐受胃肠液后的存活率，分析各菌株的胃肠道适应能力。
耐受胃肠液后的存活率（%）＝（耐受模拟肠液后菌液中的活菌数/菌液中的原始活菌数）×100%。
表1-乳双歧杆菌SF-B21胃肠道适应性测试
| 菌种 | 存活率（%） |
| 动物双歧杆菌乳亚种CICC 21709 | 9.8 |
| 动物双歧杆菌 CICC 21711 | 9.5 |
| 乳双歧杆菌SF-B21 | 10.6 |
结果如上表1所示，可以看出，本发明乳双歧杆菌SF-B21较其他双歧杆菌胃肠适应能力强。
测试例2对去卵巢手术诱导大鼠骨质疏松模型骨密度的影响
将70只SPF级雌性SD大鼠，随机分为7组，每组10只。
模型组：切除大鼠双侧卵巢后，诱导大鼠骨质疏松，正常饲喂，每天口服生理盐水10ml一次，连续饲喂60天。
对照组：正常饲喂，每天口服生理盐水10ml一次，连续饲喂60天。
试验组1：切除大鼠双侧卵巢后，正常饲喂，每天口服实施例2制备的发酵饮品10ml一次，连续饲喂60天。
试验组2：切除大鼠双侧卵巢后，正常饲喂，每天口服实施例3制备的发酵饮品10ml一次，连续饲喂60天。
试验组3：切除大鼠双侧卵巢后，正常饲喂，每天口服实施例4制备的发酵饮品10ml一次，连续饲喂60天。
试验组4：切除大鼠双侧卵巢后，正常饲喂，每天口服实施例5制备的发酵饮品10ml一次，连续饲喂60天。
试验组5：切除大鼠双侧卵巢后，正常饲喂，每天口服实施例6制备的发酵饮品10ml一次，连续饲喂60天。
试验方法：饲养60天后处死，剥离左、右侧股骨，剔除软组织后，将大鼠左侧股骨在105℃烘箱中烘干至恒重，将股骨研成粉末，精密称取适量，以原子吸收法测定骨钙含量。采用双能X线骨密度仪测定右侧股骨的骨密度。
由下表2可以看出，通过去卵巢手术后对照组比模型组的股骨重量、股钙含量与股骨密度显著低于对照组，说明手术造成大鼠骨密度低下模型。通过口服本发明提供的增加骨密度发酵饮品后，实施例2制备的发酵饮品可明显改善大鼠的骨密度症状，实施例3、实施例4、实施例5、实施例6可在一定程度缓解大鼠的骨密度症状。
表2-去除卵巢大鼠股骨重量、股钙含量、骨密度的比较
| 组别 | 股骨重量/g | 股钙含量（mg/g） | 股骨中心密度（g/cm2） |
| 模型组 | 0.64±0.04▲ | 187.35±13.22▲ | 0.18±0.02▲ |
| 对照组 | 0.71±0.05 | 220.45±16.28 | 0.23±0.01 |
| 试验组1 | 0.69±0.08* | 210.37±12.25* | 0.22±0.01* |
| 试验组2 | 0.65±0.06 | 190.68±13.63 | 0.18±0.01 |
| 试验组3 | 0.65±0.10 | 189.12±15.39 | 0.19±0.02 |
| 试验组4 | 0.64±0.05 | 198.66±10.37* | 0.20±0.02* |
| 试验组5 | 0.65±0.07 | 191.36±12.15 | 0.19±0.01 |
注：▲表示与对照组比较P＜0.05；*表示与模型组比较P＜0.05
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以权利要求所述的保护范围为准。
Claims (8)
1.一种乳双歧杆菌SF-B21，其特征在于，分类命名为Bifidobacterium lactis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 23474，保藏日期为2021年9月23日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.如权利要求1所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺包括：将被发酵底物经乳双歧杆菌SF-B21发酵后与调味料混合调味制得增加骨密度发酵饮品。
3.如权利要求2所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺，具体包括以下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，培养得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，培养得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
4.如权利要求3所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述增加骨密度发酵饮品的制备工艺，具体包括以下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；
（3）将乳双歧杆菌SF-B21接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养24h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得增加骨密度发酵饮品。
5.如权利要求2所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：净化水60-70份，茯苓提取物1-2份，杜仲叶提取物1-2份，黄芪提取物1-2份，党参提取物1-2份，甘草提取物2-3份，枸杞提取物2-3份，桑葚提取物2-3份，核桃仁粉2-3份，山药粉2-3份，红枣粉2-3份，黑芝麻粉2-3份，牡蛎粉2-3份；
所述调味料包括如下重量份的组分：蜂蜜1-2份，苹果浓缩汁4-5份，梨浓缩汁4-5份，桃浓缩汁4-5份。
6.如权利要求5所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：净化水64份，茯苓提取物1份，杜仲叶提取物1份，黄芪提取物1份，党参提取物1份，甘草提取物2份，枸杞提取物2份，桑葚提取物2份，核桃仁粉3份，山药粉3份，红枣粉3份，黑芝麻粉3份，牡蛎粉2份；
所述调味料包括如下重量份的组分：蜂蜜1份，苹果浓缩汁4份，梨浓缩汁4份，桃浓缩汁4份。
7.如权利要求2所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述增加骨密度发酵饮品为淡黄色或深黄色液体。
8.如权利要求2所述的一种乳双歧杆菌SF-B21在制备增加骨密度发酵饮品中的应用，其特征在于，所述增加骨密度发酵饮品中含有乳双歧杆菌SF-B21的数量为10-30亿/ml。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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