CN114015612B - 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用 - Google Patents

一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114015612B
CN114015612B CN202111445534.1A CN202111445534A CN114015612B CN 114015612 B CN114015612 B CN 114015612B CN 202111445534 A CN202111445534 A CN 202111445534A CN 114015612 B CN114015612 B CN 114015612B
Authority
CN
China
Prior art keywords
xanthan gum
xanthomonas
fermentation
pigmented
strain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111445534.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114015612A (zh
Inventor
董学前
张永刚
王伟
张艳敏
韩鸿宇
刘洋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Food Ferment Industry Research & Design Institute
Original Assignee
Shandong Food Ferment Industry Research & Design Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Food Ferment Industry Research & Design Institute filed Critical Shandong Food Ferment Industry Research & Design Institute
Priority to CN202111445534.1A priority Critical patent/CN114015612B/zh
Publication of CN114015612A publication Critical patent/CN114015612A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114015612B publication Critical patent/CN114015612B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C12P19/06—Xanthan, i.e. Xanthomonas-type heteropolysaccharides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明属于微生物领域，涉及一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用，提供了一株不产菌黄素的适用于工业化黄原胶高效发酵生产的非基因工程菌种——无菌黄素黄单胞杆菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用。采用本发明所述的黄单胞杆菌及其应用方法可高效发酵生产无色素黄原胶，显著提高黄原胶产品的品质，增强国内黄原胶产品的市场竞争力。与当前国内工业生产菌种比较，本发明公开菌株除能够以淀粉、豆粉等为原料高效发酵产黄原胶外，还能够以葡萄糖、酵母粉等全可溶性物质为原料高效发酵生产黄原胶，丰富了黄原胶生产的原料并提供产品品质。

Description

一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用
技术领域
本发明涉及一种微生物多糖黄原胶新型生产菌株，尤其涉及一株无色素黄单胞杆菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
黄原胶(Xanthan Gum，XG)又称黄胶、黄胞胶或汉生胶，是一种天然多糖和重要的生物聚合物，由黄单胞杆菌(Xanthomonascampestris)以淀粉等为主要原料，经好氧发酵而来。黄原胶具有安全、无毒，低浓度高粘性，良好的触变性、增稠性、乳化稳定性，以及对酸、碱、盐的高度稳定性等优点，是目前国际上公认的性能最优越的生物胶，已在食品、石油、医药、日化及农业开发等领域得到广泛应用。
近年来，随着经济快速发展，对黄原胶工业发酵生产能力与产品品质的要求逐年提高。目前的专利技术主要通过优化发酵条件来提高发酵生产黄原胶能力，降低发酵成本，对提高黄原胶产量帮助不大。黄单胞杆菌还产生黄色的菌黄素，是黄原胶生产过程的杂质。目前工业生产上为了除去这些菌黄素，专门有一道工序是“脱黄”，生产成本偏高。
现有技术专利CN110016480A公开了一种菌黄素合成相关基因XC_4092，通过将野油菜黄单胞菌野油菜致病变种的野生菌株Xcc8004基因组中的该基因失活获得生产无色黄原胶的工程菌。但该工程菌是基于一个低产黄原胶菌株，黄原黄胶发酵效价低，生产成本高。专利CN110777105A公开了经基因工程方法敲除群体感应退出关键基因rpfB和菌黄素关键合成基因xanK构建得到高产无菌黄素白原胶的菌株，但该工程菌株构建与产业化应用过程复杂，成本较高。
发明内容
针对现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一株不产菌黄素的适用于工业化黄原胶高效发酵生产的非基因工程菌种——无菌黄素黄单胞杆菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用。
为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一个方面，提供了一株无色素黄单胞菌，所述无色素黄单胞菌为黄单胞杆菌Xanthomonas sp.110，其保藏编号为CCTCC NO.M20211419。
本发明的第二个方面，提供了上述的无色素黄单胞菌在生产无色素黄原胶中的应用。
本发明的第三个方面，提供了一种无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，包括：
将上述的无色素黄单胞菌依次进行活化培养，液体种子培养，黄原胶发酵生产，即得。
本发明的第四个方面，提供了上述的方法制备的无色素黄原胶。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明公开了一株能够发酵生产无色素黄原胶的黄单胞杆菌，即黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110 CCTCC No.M20211419。
(2)采用本发明所述的黄单胞杆菌及其应用方法可高效发酵生产无色素黄原胶，显著提高黄原胶产品的品质，增强国内黄原胶产品的市场竞争力。
(3)与当前国内工业生产菌种比较，本发明公开菌株除能够以淀粉、豆粉等为原料高效发酵产黄原胶外，还能够以葡萄糖、酵母粉等全可溶性物质为原料高效发酵生产黄原胶，丰富了黄原胶生产的原料并提供产品品质。
(4)本发明公开菌株为工业生产菌株诱变获得的稳定突变菌株，可直接用于工业化生产，不存在稳定性与安全性问题。
(5)本申请的操作方法简单、成本低、具有普适性，易于规模化生产。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1：本发明所述菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110与出发菌株发酵生产黄原胶发酵液比较图；
图2：本发明所述菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110与出发菌株所产黄原胶产品比较图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
本发明所述适用于工业生产无色素黄原胶的黄单胞杆菌，该菌株名为黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110，菌株已于2021年11月15日保藏在中国典型培养物保藏中心(ChinaCenter for Type Culture Collection，简称CCTCC，地址：中国.武汉.武汉大学)，其保藏编号为CCTCC NO.M20211419。
上述黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110是发明人在筛选黄原胶高产菌株过程中，由黄原胶工业生产菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101经多轮等离子体与微波复合诱变筛选获得，其优点如下：
所述菌株在LB培养基上生产快，菌落白色，稍粘稠，革兰氏染色菌体形态与出发菌株无显著差异。
对本发明所述黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株进行全基因组测序，通过序列比对，该菌株与菌黄素合成相关的基因XanM和XanK发生了序列点突变，具体核苷酸序列及突变点如SEQ ID NO.1和2所示。
本发明所述黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株，与出发菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101进行摇瓶试验发酵生产黄原胶的比较。
(1)种子液制备：将斜面培养好的两株菌挑取两环分别接种于种子培养基里，28～34℃培养18～26h，获得用于黄原胶发酵生产的种子液；
(2)黄原胶发酵生产：将培养好的种子液按10％(v/v)分别接种于发酵培养基里，28～34℃发酵50～72h，不同的黄原胶发酵液。
其中，所述发酵液分别有如下质量分数的组分组成：(单位：g/L)
发酵培养基(一)：玉米淀粉30～60、豆粉3～6、碳酸钙00～0.8、硫酸镁0.5～1.0，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2；
发酵培养基(二)：葡萄糖40～60、酵母粉2～5、碳酸钙0～0.8、硫酸镁0.5～1.0，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
(3)发酵结果如下表：
下面结合具体的实施例，对本发明做进一步的详细说明，应该指出，所述具体实施例是对本发明的解释而不是限定。
实施例1：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110的选育
以黄原胶工业生产菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101为出发菌株，连续两轮室温等离子体(ARTP)与微波复合诱变，无菌操作将诱变菌体涂布于LB平板培养基上，28～34℃静置培养2～3天，挑取所有白色单菌落接种于LB斜面培养基上，28～34℃静置培养1～2天，待菌株生长完成。
将所有生长好的白色单菌落接种于LB液体培养，28～34℃、220～280r/min摇瓶培养24h，按接种量10％(v/v)接种于发酵培养基中，28～34℃、240～300r/min摇瓶发酵60～72h。
所述发酵液分别有如下质量分数的组分组成：(单位：g/L)
发酵培养基(单位：g/L)：玉米淀粉40～60、豆粉3～6、碳酸钙0.2～0.8、硫酸镁0.5～1.0，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
选取发酵液粘度高、多糖产率高的菌株进行重复筛选，最终选育得到一株遗传性质稳定、不产菌黄素、黄原胶多糖产率高的黄单胞杆菌，该菌株命名为黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株。
上述菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110，已于2021年11月15日保藏在中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，简称CCTCC，地址：中国.武汉.武汉大学)，其保藏编号为CCTCC NO.M20211419。实施例2：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株与出发菌株基因组比较分析
将实施例1选育得到的黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株即CCTCCNO.M20211419菌株与出发菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101委托华大基因进行菌株全基因组测序，获得菌株基因组框图。
实验方法：
(1)挑取斜面培养好的菌株接种于液体LB培养基里，28～34℃、220～280r/min摇瓶培养16～18h，收集菌液。
(2)将收集菌液标记后，干冰保藏送测序公司测序全基因组。
通过使用美国生物工程信息中心(National Center for BiotechnologyInformation,NCBI)BLAST程序进行两菌株全基因组序列比对，并结合相关黄单胞杆菌菌黄素合成相关基因进行分析，得本发明菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110与出发菌株比较，其菌黄素合成相关基因XanM和XanK发生了点突变，具体核苷酸序列及突变点如SEQ IDNO.1和2所示，已报到的其他菌黄素合成相关基因为发现序列改变，说明本发明菌株是通过上述两基因的突变导致不能合成菌黄素。
XanM(SEQ ID NO.1)
ATGGCCCCGGTCGCCATCACCGCCTTCACCGCCACCACCGCGCTCGGCGCCGGATTGGACGCCCAGGCCAGCGCGCTGCGCGAGCGCCGCAGCGGCATGCGCCGCAACGACTTCGGCCCACAGCCGCTGGAATGCTGGATCGGCCGGGTTGCCGGCGTAGAAGACGTGGTGCTACCAGACGCGCTGCAAGGCTGGGACTGCCGCAACAACCAGCTGGCCTGGCTGGCCCTACAACAGGACGGCATGGCCGCCGCCGTGCAGGCCGCCGCGCAGCGCTATGGCGCCGAGCGCGTGGCGGTGGTGATGGGCACGTCCACCTCCAGCGTGGGCGCCAGCGAAGAGGCCTACACGCGCCTGGTCGAAGACGCCCACGGCCTGCGCTTCCCGGGCGACCTGCAGC
A-G(Asp-Gly)
GCCCGATCGTGCATACCCCGCATTCGCTGGGCGATTTCGTGCAGCACGCCACCGGCCTGCGCGGGCCGGCGATCACCGTGGCCACGGCGTGTTCGTCCAGCGCCAAGGTGTTCGCCCAGGCCGCGCGGTTGATGGCGGCCGGCGTGGTCGACGCGGCCTTGGTCGGCGGCGTGGATACCTTGTGCGGCAGCGTGTTGTTCGGCTTCAACTCGTTGCAGGTGGTGGCACCGCAGCTGTGCCAGCCGTTCGACGCACGCCGGGTCGGCCTGAGCCTGGGCGAGGCCGGCGGCTTTGCCCTGCTCGAACGCCCCGCCGCCGCGCCGGACGCCGCGCAGTGGCTGTACGGCTATGGCGAATCCAGCGATGCCCACCACATGTCCGCCCCGCACCCGCAGGGCCTGGGCGCGCAGTTGGCGATGCGTGGCGCGCTGGACACCGCCGGGCTGGATGCCGCGGCGGTGGGCTATCTCAACCTGCACGGCACCGCCACGCCGGCCAACGACAGCGTCGAGGCGGCCGCGGTGGCGGCGATCTTCCCCGACACCTTGCATGCCAGTTCCACCAAGGCCTGGATGGGCCACACGCTGGGTGCGGCCGGCATTGTGGAGTCGGTGATTGCGCTGCTCGCGCTGCGCGACGGCCTGCTGCCGGGCACGCTCAACAGTGCGGTGCCCGACCCCGCCTGCGGCCCGCAGATCCGCTTCGATAACGCCCATTCCCGGATTCAGTACGCAATGAACAACTCCTTTGGCTTCGGCGGCAACAACTGCTCGCTGCTGTTCGGGCTGGCACGCTGA
A-T(Gln-Leu)
XanK(SEQ ID NO.2)
ATGAGCCGCATCCCGCTGAGCCGCGACGACACCGCGATCCTGGTGCCGGCCTTGAACGAGTCGCTGCGCATCCGCGAGGTGGTCAACGACGCGCTGACCTATTGCTCGCAAGTGATCGTGATCGACGACGGCTCCGATGGCGGCACCGCC
A-G(Asp-Gly)
GATTGCATCGCCGATTTGCCGGTCACCCTGATCCGCCACCCGCAGCGCATGGGCAAGGGTGCCGCACTGCGCAGCGGCTTTGCCGAAGCCCAGCGGCAGGGCATGCGCGCGGTGATGACCATGGACGGCGATGGCCAGCACAAGGCCGCCGATTTCCCGCGCCTGCTGGCTGCGGCGAACCGCCACCCGGGCGCGGTGATCGTCGGCGCGCGCATGCGCAAGCGGGCCACCCAGCCCACCATCCGCCGCATCGGCAACGACTTCGGCGACTGGGGCATCGCCTGGGCCTGCGGCTTCCGGCTGGTCGACAGCCAAAGCGGCCAGCGCCTGTATCCGGCCTCGGTGTTCACCCTGCCCAACGTACCCGGCGAAGGCTTCGTGTTCGAAGCACAACTGCTGATCTCCGCCGCGCGCCAGGCCGGTGCACGCGTGGTCGCTGTGCCGATCGAAACCCGGTACGCGGGCACCTCGCCCGGCACCTTCCGCAAGAGCCATTTCCGGCTGGTTCGCGATCTGTGGAACATCACCTCGCACGTGGTCAAGCAGGTGTGGGCTTACGGCCACATCTGGCGCGAATACCGCCGCGTGCGCGCACACCCGGTGCTGATTGACGACCCGGACGGCGAATTTGCTACTGTGCCCGCGGTCACCAAGAGCAATCCATCCACATGA
实施例3：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110发酵产黄原胶
以实施例1选育得到的黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株即CCTCCNO.M20211419菌株作为实验菌株；
(1)挑取斜面培养好的菌株两环接种于液体种子培养基里，32℃、240r/min摇瓶培养28h，获得成熟发酵种子。
(2)将培养成熟的种子按10％(v/v)转接入摇瓶发酵培养基里，270r/min摇床发酵65h。
(3)本实施例中黄原胶的产率为41.1g/L，发酵液粘度7106mPa.s，发酵液为白色(见图1中A)、提取黄原胶产品为白色(见图2中A)、多糖黄原胶分子量为1.78×107Da，1％(w/v)产品粘度为1308mPa.s。
上述种子培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖10.0，蛋白胨5.0，酵母粉3.5，氯化钠2.0，其他为蒸馏水，pH 7.0～7.2。
上述发酵培养基组成为(单位：g/L)：玉米淀粉50、豆粉5、碳酸钙0.5、硫酸镁0.5，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
实施例4：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110发酵产黄原胶
以实施例1选育得到的黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)110菌株即CCTCCNO.M20211419菌株作为实验菌株；(1)挑取斜面培养好的菌株两环接种于液体种子培养基里，28℃、220r/min摇瓶培养24h，获得成熟发酵种子。
(2)将培养成熟的种子按10％(v/v)转接入摇瓶发酵培养基里，260r/min摇床发酵60h。
(3)本实施例中黄原胶的产率为39.1g/L，发酵液粘度6896mPa.s，发酵液为白色、提取黄原胶产品为白色、多糖黄原胶分子量为1.69×107Da，1％(w/v)产品粘度为1260mPa.s。
上述种子培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖10.0，蛋白胨5.0，酵母粉3.5，氯化钠2.0，其他为蒸馏水，pH 7.0～7.2。
上述发酵培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖55、酵母粉15、碳酸钙0.2、硫酸镁0.6，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
对比例1：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101发酵产黄原胶
以实施例1筛选的出发菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101为实验菌株，
(1)挑取斜面培养好的菌株两环接种于液体种子培养基里，32℃、240r/min摇瓶培养28h，获得成熟发酵种子。
(2)将培养成熟的种子按10％(v/v)转接入摇瓶发酵培养基里，270r/min摇床发酵65h。
(3)本实施例中黄原胶的产率为41.8g/L，发酵液粘度7116mPa.s，发酵液为白色(附图1-B)、提取黄原胶产品为白色(附图2-B)、多糖黄原胶分子量为1.81×107Da，1％(w/v)产品粘度为1318mPa.s。
上述种子培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖10.0，蛋白胨5.0，酵母粉3.5，氯化钠2.0，其他为蒸馏水，pH 7.0～7.2。
上述发酵培养基组成为(单位：g/L)：玉米淀粉50、豆粉5、碳酸钙0.5、硫酸镁0.5，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
对比例2：黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101发酵产黄原胶
以实施例1筛选的出发菌株黄单胞杆菌(Xanthomonas sp.)101为实验菌株，
(1)挑取斜面培养好的菌株两环接种于液体种子培养基里，28℃、220r/min摇瓶培养24h，获得成熟发酵种子。
(2)将培养成熟的种子按10％(v/v)转接入摇瓶发酵培养基里，260r/min摇床发酵60h。
(3)本实施例中黄原胶的产率为18.8g/L，发酵液粘度2216mPa.s，发酵液为白色、提取黄原胶产品为白色、多糖黄原胶分子量为0.571×107Da，1％(w/v)产品粘度为485mPa.s。
上述种子培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖10.0，蛋白胨5.0，酵母粉3.5，氯化钠2.0，其他为蒸馏水，pH 7.0～7.2。
上述发酵培养基组成为(单位：g/L)：葡萄糖55、酵母粉15、碳酸钙0.2、硫酸镁0.6，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
最后应该说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东省食品发酵工业研究设计院
<120> 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用
<130> 2021
<160> 2
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1197
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
atggccccgg tcgccatcac cgccttcacc gccaccaccg cgctcggcgc cggattggac 60
gcccaggcca gcgcgctgcg cgagcgccgc agcggcatgc gccgcaacga cttcggccca 120
cagccgctgg aatgctggat cggccgggtt gccggcgtag aagacgtggt gctaccagac 180
gcgctgcaag gctgggactg ccgcaacaac cagctggcct ggctggccct acaacaggac 240
ggcatggccg ccgccgtgca ggccgccgcg cagcgctatg gcgccgagcg cgtggcggtg 300
gtgatgggca cgtccacctc cagcgtgggc gccagcgaag aggcctacac gcgcctggtc 360
gaagacgccc acggcctgcg cttcccgggc gacctgcagc gcccgatcgt gcataccccg 420
cattcgctgg gcgatttcgt gcagcacgcc accggcctgc gcgggccggc gatcaccgtg 480
gccacggcgt gttcgtccag cgccaaggtg ttcgcccagg ccgcgcggtt gatggcggcc 540
ggcgtggtcg acgcggcctt ggtcggcggc gtggatacct tgtgcggcag cgtgttgttc 600
ggcttcaact cgttgcaggt ggtggcaccg cagctgtgcc agccgttcga cgcacgccgg 660
gtcggcctga gcctgggcga ggccggcggc tttgccctgc tcgaacgccc cgccgccgcg 720
ccggacgccg cgcagtggct gtacggctat ggcgaatcca gcgatgccca ccacatgtcc 780
gccccgcacc cgcagggcct gggcgcgcag ttggcgatgc gtggcgcgct ggacaccgcc 840
gggctggatg ccgcggcggt gggctatctc aacctgcacg gcaccgccac gccggccaac 900
gacagcgtcg aggcggccgc ggtggcggcg atcttccccg acaccttgca tgccagttcc 960
accaaggcct ggatgggcca cacgctgggt gcggccggca ttgtggagtc ggtgattgcg 1020
ctgctcgcgc tgcgcgacgg cctgctgccg ggcacgctca acagtgcggt gcccgacccc 1080
gcctgcggcc cgcagatccg cttcgataac gcccattccc ggattcagta cgcaatgaac 1140
aactcctttg gcttcggcgg caacaactgc tcgctgctgt tcgggctggc acgctga 1197
<210> 2
<211> 822
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
atgagccgca tcccgctgag ccgcgacgac accgcgatcc tggtgccggc cttgaacgag 60
tcgctgcgca tccgcgaggt ggtcaacgac gcgctgacct attgctcgca agtgatcgtg 120
atcgacgacg gctccgatgg cggcaccgcc gattgcatcg ccgatttgcc ggtcaccctg 180
atccgccacc cgcagcgcat gggcaagggt gccgcactgc gcagcggctt tgccgaagcc 240
cagcggcagg gcatgcgcgc ggtgatgacc atggacggcg atggccagca caaggccgcc 300
gatttcccgc gcctgctggc tgcggcgaac cgccacccgg gcgcggtgat cgtcggcgcg 360
cgcatgcgca agcgggccac ccagcccacc atccgccgca tcggcaacga cttcggcgac 420
tggggcatcg cctgggcctg cggcttccgg ctggtcgaca gccaaagcgg ccagcgcctg 480
tatccggcct cggtgttcac cctgcccaac gtacccggcg aaggcttcgt gttcgaagca 540
caactgctga tctccgccgc gcgccaggcc ggtgcacgcg tggtcgctgt gccgatcgaa 600
acccggtacg cgggcacctc gcccggcacc ttccgcaaga gccatttccg gctggttcgc 660
gatctgtgga acatcacctc gcacgtggtc aagcaggtgt gggcttacgg ccacatctgg 720
cgcgaatacc gccgcgtgcg cgcacacccg gtgctgattg acgacccgga cggcgaattt 780
gctactgtgc ccgcggtcac caagagcaat ccatccacat ga 822

Claims (8)

1.一株无色素黄单胞菌，其特征在于，所述无色素黄单胞菌为黄单胞杆菌（Xanthomonas sp.）110，其保藏编号为CCTCC NO.M20211419。
2.权利要求1所述的无色素黄单胞菌在生产黄原胶中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述黄原胶为无色素黄原胶。
4.一种无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，其特征在于，包括：
将权利要求1所述的无色素黄单胞菌依次进行活化培养，液体种子培养，黄原胶发酵生产，即得。
5.如权利要求4所述的无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，其特征在于，发酵培养基由如下浓度的原料组成：玉米淀粉30～60g/L、豆粉3～6g/L、碳酸钙0～0.8g/L、硫酸镁0.5～1.0g/L，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
6.如权利要求4所述的无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，其特征在于，发酵培养基由如下浓度的原料组成：葡萄糖40～60g/L、酵母粉2～5g/L、碳酸钙0～0.8g/L、硫酸镁0.5～1.0g/L，其他为蒸馏水，pH7.0～7.2。
7.如权利要求4所述的无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，其特征在于，所述发酵生产的具体条件为：将培养好的种子液按10～12％v/v分别接种于发酵培养基里，28～34℃发酵60～72h，得到不同的黄原胶发酵液。
8.如权利要求4所述的无色素黄单胞菌生产无色素黄原胶的方法，
其特征在于，所述液体种子培养的条件为：28～34℃培养20～26h。
CN202111445534.1A 2021-11-30 2021-11-30 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用 Active CN114015612B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111445534.1A CN114015612B (zh) 2021-11-30 2021-11-30 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111445534.1A CN114015612B (zh) 2021-11-30 2021-11-30 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114015612A CN114015612A (zh) 2022-02-08
CN114015612B true CN114015612B (zh) 2023-08-01

Family

ID=80067266

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111445534.1A Active CN114015612B (zh) 2021-11-30 2021-11-30 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114015612B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117286082B (zh) * 2023-11-24 2024-01-30 内蒙古工业大学 野油菜黄单胞菌及发酵产低粘度黄原胶的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999055833A2 (en) * 1998-04-27 1999-11-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Lytobacter mycophilus, a novel bacterial genus with antifungal characteristics
CN111909872A (zh) * 2020-08-03 2020-11-10 南京理工大学 类芽孢杆菌ZX1905及其生产的胞外多糖Lubcan和应用

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3856558T2 (de) * 1987-04-14 2004-04-29 Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Herstellung von Xanthan-Gummi mittels Xanthomonas campestris mit Genen zur hydrolisierung von Laktose integriert im Chromosom.
US5340743A (en) * 1987-04-14 1994-08-23 Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Xanthan gum-producing strain of xanthomonas
DE102004009155A1 (de) * 2004-02-20 2005-09-01 Beiersdorf Ag Hautpflegeprodukt enthaltend Ursolsäure und Ginkgo-Extrakt
CN104388493B (zh) * 2014-11-30 2017-07-04 内蒙古阜丰生物科技有限公司 一种提高黄原胶生产转化率的方法
CN105647990B (zh) * 2016-03-14 2019-07-02 山东省食品发酵工业研究设计院 一种微生物胞外多糖及其制备方法
CN105861401B (zh) * 2016-06-24 2019-05-21 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司 一株黄单胞菌nyw79及其用途
CN107686822A (zh) * 2017-09-30 2018-02-13 泰州职业技术学院 一种发酵产低色素黄原胶的方法
CN108048505A (zh) * 2017-12-20 2018-05-18 泰州职业技术学院 一种通过发酵条件控制提高黄原胶白度的方法及黄原胶发酵液检测方法
CN116144718A (zh) * 2022-11-08 2023-05-23 山东阜丰发酵有限公司 低色素黄原胶的发酵工艺

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999055833A2 (en) * 1998-04-27 1999-11-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Lytobacter mycophilus, a novel bacterial genus with antifungal characteristics
CN111909872A (zh) * 2020-08-03 2020-11-10 南京理工大学 类芽孢杆菌ZX1905及其生产的胞外多糖Lubcan和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
微波诱变筛选无色素黄原胶产生菌;白先放;宁欢欢;;安徽农业科学(第36期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114015612A (zh) 2022-02-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106190921B (zh) 一种谷氨酸棒状杆菌与应用
Jung et al. Bacterial cellulose production by Gluconacetobacter hansenii in an agitated culture without living non-cellulose producing cells
CN105886431B (zh) 一株谷氨酸棒状杆菌及其高产异亮氨酸的方法
EP2360238B1 (en) A yellow pigments generation deficient sphingomonas strain and its application in the production of gellan gum
CN108624524B (zh) 一株生产细菌纤维素的菌株及其分离筛选方法
KR101005560B1 (ko) 신규한 글루콘아세토박터 속 ｃ１ 균주 및 이를 이용한셀룰로오스 생산방법
CN110484471A (zh) 一株高产细菌纤维素的耐酸菌株及其生产细菌纤维素的方法
CN110804572A (zh) 一株链霉菌及其制备ε-聚赖氨酸的方法
CN114015612B (zh) 一株无色素黄单胞菌及其在发酵生产无色素黄原胶中的应用
CN116731933B (zh) 一种谷氨酸棒杆菌及其在生产缬氨酸中的应用
CN110144318B (zh) 无色素低分子量威兰胶生产菌株及其构建方法与应用
CN114015607B (zh) 一种高产5-甲基四氢叶酸的解淀粉芽孢杆菌及其应用
KR20050022591A (ko) 맥주 발효 폐효모액을 이용한 미생물 셀룰로오스의 제조방법
CN108220188A (zh) 一种溶杆菌及其应用
CN109825446A (zh) 一种高产枯草芽孢杆菌的工业化生产方法
CN100540653C (zh) 一种具有抗汞特性的喜温硫杆菌基因工程菌及其应用
CN102618468B (zh) 一种耐温型产碱杆菌及其在威兰胶生产中的应用
CN116590203B (zh) 一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产l-异亮氨酸中的应用
CN115786300B (zh) 一株低产芽孢解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN116590202B (zh) 一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产l-亮氨酸中的应用
CN116731934B (zh) 一株大肠埃希氏菌及其在生产氨基葡萄糖中的应用
CN116694540B (zh) 一株大肠埃希氏菌及其在生产苏氨酸中的应用
CN117070367B (zh) 出芽短梗霉ncps2022-m及培养方法
CN111100802A (zh) 一株粪肠球菌及其应用
CN115820470B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌zh804及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant