CN114014860A - 一种制备生物碱hosieineA的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种制备生物碱hosieineA的方法，通过粉碎、提取浓缩、聚酰胺柱色谱洗脱、大孔吸附树脂柱色谱洗脱、洗脱液浓缩调节pH重结晶等一系列步骤改变原有采用硅胶柱进行分离的工艺，采用聚酰胺联合大孔吸附树脂方法进行制备，方法操作简单、安全、成本低，得率范围0.43%‑0.82%，是原有工艺得率的1.48‑2.83倍。
Description
技术领域
本发明涉及红豆属植物提取技术领域，特别涉及于一种制备生物碱hosieineA的方法。
背景技术
hosieine A为类金雀花型生物碱化合物，浅黄色结晶，分子式为C15H20N2O，分子量为244。hosieine A对神经元烟碱型乙酰胆碱α4β2受体抑制作用明显，IC50为0.96 nM，优于阳性对照药烟碱（IC50为4.9 nM），极具开发价值。
该成分最早由法国学者Isabelle Pouny首次从豆科红豆属鄂西红豆树的根和枝的提取物中获得，具体步骤包括甲醇提取-盐酸调节pH值-乙酸乙酯萃取-碳酸钠调节pH值-二氯甲烷萃取-硅胶柱色谱分离-高效液相色谱纯化制备高纯度hosieine A，得率最高为0.29‰，且工艺过程复杂，成本高，无法应用于生产。随后，该成分新颖的结构和显著的神经保护作用引发国内外化学合成学者的高度关注。2015年，中科院上海有机所欧阳杰等通过21步反应首次完成了Hosieine A的全合成工作，意义重大，但几乎无生产价值；2018年，美国贝勒大学Huang等以6-甲基-2-吡啶酮为起始原料，通过7步反应仅完成了外消旋体(±)-Hosieine A的全合成，未对其进行结构拆分，且得率较植物中制备更低，但其进一步证实了该生物碱具有显著的神经保护和抗肿瘤活性。由于该类生物碱骨架刚性强，手性较多，合成复杂，得率低，后续研究未见报道。
原工艺采用硅胶、高效液相等多种柱色谱技术从鄂西红豆树、小叶红豆、花榈木等红豆属植物的根、枝叶及种子提取物中均分离得到hosieine A，制得hosieineA的产率较低。经过研究和总结，本发明提供一种制备生物碱hosieineA的方法，提高了hosieineA的产率。
发明内容
（1）要解决的技术问题
本发明提供一种制备生物碱hosieineA的方法，克服了原工艺采用硅胶、高效液相等多种柱色谱技术从鄂西红豆树、小叶红豆、花榈木等红豆属植物的根、枝叶及种子提取物中均分离得到hosieine A产率较低的缺点。
（2）技术方案
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种制备生物碱hosieineA的方法，包括以下步骤：
（1）粉碎：取红豆属植物干燥的根、枝、叶、种子或它们的混合体经干燥后粉碎过20目备用；
（2）提取：称取粉末加入60-80%乙醇溶液，加热煮沸2小时，过滤得提取液，滤渣再加入60-80%乙醇溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；
（3）浓缩：合并两次乙醇溶液提取液，减压浓缩至干得提取物；
（4）聚酰胺柱色谱洗脱：提取物与等量聚酰胺混合，将水作为洗脱溶剂，洗脱4-6个柱体积，收集水洗脱液；
（5）大孔吸附树脂柱色谱洗脱：水洗脱液通过大孔吸附树脂柱色谱进一步纯化，采用乙醇-水系统进行洗脱，首先乙醇-水比例为3:7，洗脱4-6个柱体积，除去杂质；接着乙醇-水比例为1:1进行洗脱，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得高浓度hosieine A浸膏；
（6）洗脱液浓缩调节pH重结晶：取高浓度hosieine A浸膏，加入亲水性有机溶剂，煮沸至高浓度hosieine A浸膏完全溶解，加浓氨水调节pH至10-11，自然冷却，析出浅黄色固体，过滤，即得高纯度hosieine A。
优选地，步骤（1）中乙醇溶液的浓度为70%。
优选地，步骤（6）中的亲水性有机溶剂为乙醇。
（3）有益效果
本发明提供一种制备生物碱hosieineA的方法，与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
（1） 改变原有采用硅胶柱进行分离的工艺，采用聚酰胺联合大孔吸附树脂方法进行制备，得率范围0.43‰-0.82‰，是原有工艺得率的1.48-2.83倍。硅胶具有微酸性，对hosieine A可造成死吸附，工艺最终得率低。本发明通过聚酰胺柱色谱方法有效去除植物提取物中的酚酸类物质，再通过大孔吸附树脂柱色谱技术除去提取物中色素；两次的柱色谱技术纯化，重结晶操作更容易实现，且最终产物纯度高。
（2）采用上述提供的低成本、安全的hosieine A制备方法，无需多次萃取，无需硅胶色谱分离，无需多次液相色谱分离，工艺简单，生产成本低。
具体实施方式
实施例1
取红豆树枝叶粉末1000 g，加入70%乙醇溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入8000 mL 70%乙醇溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；合并两次乙醇溶液提取液，减压浓缩至干得提取物120 g；提取物与150 g 60-90目聚酰胺拌样，600 g60-90目聚酰胺干法装柱，4000 mL水洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得浸膏13.9 g；浸膏与15g PRP拌样，60 g PRP干法装柱，乙醇-水（3:7）600 mL洗脱，除去杂质后，换洗脱比例为乙醇-水（1:1）600 mL洗脱，收集洗脱液，浓缩得高浓度hosieine A浸膏4.1 g；浸膏加入乙醇，煮沸至至浸膏完全溶解，浓氨水调节pH至10~11，自然冷却，析出浅黄色固体hosieine A精制品560 mg, 产率为0.56‰，纯度为93.2%。
实施例2
取红豆树枝叶粉末1000 g，按照实例1方式操作，仅改变提取剂，使用65%乙醇进行提取，最终得hosieine A精制品541 mg，产率为0.54‰，纯度为92.5%。
实施例3
取红豆树枝叶粉末1000 g，按照实例1方式操作，仅改变提取剂，使用75%乙醇进行提取，最终得hosieine A精制品526 mg，产率为0.53‰，纯度为91.7%。
实施例4
取红豆树根粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品733 mg，产率为0.73‰，纯度为91.8%。
实施例5
取红豆树叶粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品490 mg，产率为0.49‰，纯度为90.3%。
实施例6
取红豆树种子粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品786mg，产率为0.79‰，纯度为93.8%。
实施例7
取小叶红豆根粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品711mg，产率为0.71‰，纯度为92.2%。
实施例8
取小叶红豆种子粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品805mg，产率为0.80‰，纯度为93.4%。
实施例9
取小叶红豆枝叶粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品426mg，产率为0.43‰，纯度为90.9%。
实施例10
取木荚红豆种子粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品817mg，产率为0.82‰，纯度为91.6%。
实施例11
取木荚红豆枝叶粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品452mg，产率为0.45‰，纯度为92.1%。
实施例12
取木荚红豆根粉末1000 g，按照实例1方式操作，最终得hosieine A精制品600mg，产率为0.60‰，纯度为92.4%。
以上所述的实施例仅表达了对本发明优选实施方式，其描述较为具体和详细，但本发明不仅限于这些实施例，应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说。在未脱离本发明宗旨的前提下，所为的任何改进均落在本发明的保护范围之内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (3)
1.一种制备生物碱hosieineA的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）粉碎：取红豆属植物干燥的根、枝、叶、种子或它们的混合体经干燥后粉碎过20目备用；
（2）提取：称取粉末加入60-80%乙醇溶液，加热煮沸2小时，过滤得提取液，滤渣再加入60-80%乙醇溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；
（3）浓缩：合并两次乙醇溶液提取液，减压浓缩至干得提取物；
（4）聚酰胺柱色谱洗脱：提取物与等量聚酰胺混合，将水作为洗脱溶剂，洗脱4-6个柱体积，收集水洗脱液；
（5）大孔吸附树脂柱色谱洗脱：水洗脱液通过大孔吸附树脂柱色谱进一步纯化，采用乙醇-水系统进行洗脱，首先乙醇-水比例为3:7，洗脱4-6个柱体积，除去杂质；接着乙醇-水比例为1:1进行洗脱，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得高浓度hosieine A浸膏；
（6）洗脱液浓缩调节pH重结晶：取高浓度hosieine A浸膏，加入亲水性有机溶剂，煮沸至高浓度hosieine A浸膏完全溶解，加浓氨水调节pH至10-11，自然冷却，析出浅黄色固体，过滤，即得高纯度hosieine A。
2.根据权利要求1所述的一种制备生物碱hosieineA的方法，其特征在于，步骤（1）中乙醇溶液的浓度为70%。
3.根据权利要求1所述的一种制备生物碱hosieineA的方法，其特征在于，步骤（6）中的亲水性有机溶剂为乙醇。
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Non-Patent Citations (4)
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| ISABELLE POUNY等: "Cytisine-like alkaloids from Ormosia hosiei Hemsl. & E.H. Wilson", PHYTOCHEMISTRY, vol. 107, pages 97 - 101 * |
| NI, LIN等: "Hositisines A and B, new alkaloids from the stems of Ormosia hosiei Hemsl. et Wils", NATURAL PRODUCT RESEARCH, vol. 35, no. 13, pages 2184 - 2189 * |
| XU, HUIYOU等: "Chemical Constituents and Their Activities From the Seeds of Ormosia hosiei", NATURAL PRODUCT COMMUNICATIONS, vol. 14, no. 7, pages 1 - 4 * |
| 张琳婧等: "红豆属植物化学成分及其药理活性研究进展", 中草药, vol. 52, no. 14, pages 4433 - 4442 * |
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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