CN114008054A

CN114008054A - Nmda受体调节剂

Info

Publication number: CN114008054A
Application number: CN202080045423.9A
Authority: CN
Inventors: J·P·基尔伯恩; E·阿希; M·马里戈; L·大卫
Original assignee: H Lundbeck AS
Current assignee: H Lundbeck AS
Priority date: 2019-07-03
Filing date: 2020-07-01
Publication date: 2022-02-01
Also published as: AU2020299992A1; JOP20210331A1; WO2021001423A1; US11466027B2; CO2021017142A2; PE20220137A1; CR20210662A; US20210002292A1; AR119340A1; EP3994141A1; JP2022539197A; MA56451A; CL2021003557A1; BR112021003928A2; TW202116779A; MX2021015742A; IL289575A; ECSP22003596A; CA3144304A1; KR20220029568A

Abstract

本发明涉及新颖的NMDA受体调节剂。本发明的单独方面涉及包含所述化合物的药物组合物以及这些化合物治疗神经障碍或神经精神障碍例如抑郁症的用途。

Description

NMDA受体调节剂

技术领域

本发明涉及作为NMDA受体调节剂的化合物，包含所述化合物的药物组合物，以及它们在治疗神经障碍或神经精神障碍(例如抑郁症，特别是重度抑郁症(MDD)和难治性抑郁症(TRD))中的用途。

背景技术

世界卫生组织估计将有3.5亿人患有重度抑郁症(MDD)，并预测到2030年抑郁症将构成全球社会最大的健康负担。粗略估计的患病率是，抑郁症在某个阶段影响人口的1/5，对女性的影响比男性高(在美国分别为5％-9％和2％-3％的发病率，占总发病率6.6％)。北美疾病控制中心(North-American Center for Disease Control)报告称，从2005年到2008年，在任何给定的月份中，美国人群中有8.9％接受处方抗抑郁药，此外还接受针对焦虑、疼痛和其他非心境障碍的处方[Murray等人,Global Burden of Disease Study.[全球疾病负担研究]Lancet.[柳叶刀]1997年5月17日；349(9063):1436-1442]。

抗抑郁药是市售的，因此是技术人员已知的。不同类型的抗抑郁药的实例包括但不限于选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)、5-羟色胺去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)、单胺氧化酶抑制剂(MAOI)和三环抗抑郁药。已知抗抑郁药的典型局限性是疗效延迟和在多疗程药物治疗后缓解率低，并且某些抗抑郁药有严重的副作用[Jick等人,Antidepressants and the risk of suicidal behaviors.[抗抑郁药和自杀行为的风险]Jama.[美国医学会杂志]2004年7月21日；292(3):338-343]。

近年来，N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的调节剂在治疗MDD中，特别是在难治性抑郁症(TRD)中获得了更多的注意。特别地，由于其抗抑郁作用且起效快，氯胺酮(NMDA受体的拮抗剂)被用于治疗MMD。但是，用氯胺酮进行MDD治疗具有心理副作用和需要静脉施用的缺点。

NMDA受体是四聚体配体门控的离子通道，也参与必要的生理过程，例如突触可塑性和发育。NMDA受体是包含两个GluN1亚基和两个GluN2/GluN3亚基的异四聚体。这意味着它们组装成二异聚体或三异聚体受体。大多数天然NMDA受体由两个GluN1亚基和两个GluN2亚基组成。NMDA受体的激活需要在两个不同的结合位点同时结合。谷氨酸是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质，与GluN2亚基结合，而甘氨酸与GluN1和GluN3亚基结合。

NMDA受体的另一种已知调节剂是D-环丝氨酸，它是部分甘氨酸位点激动剂。由于D-环丝氨酸的神经活性和在治疗抑郁症和抑郁障碍(例如MDD)方面的潜在用途，因此已对其进行了深入研究[Heresco-Levy,U.,Javitt,D.C.,Gelfin,Y.,Gorelik,E.,Bar,M.,Blanaru,M.,Kremer,I.,2006.Controlled trial of d-cycloserine adjuvant therapyfor treatment-resistant major depressive disorder.[d-环丝氨酸辅助疗法治疗难治性重度抑郁症的对照试验]J.Affect.disorders.[情感障碍杂志]93,239-243]和PTSD[Olden,M.,Wyka,K.,Cukor,J.,Peskin,M.,Altemus,M.,Lee,F.S.,Finkelstein-Fox,L.,Rabinowitz,T.,Difede,J.,2017.Pilot study of a telehealth-delivered medicationaugmented exposure therapy protocol for PTSD.[PTSD远程医疗交付的药物增强暴露治疗方案的先导研究]J.Nerv.Ment.Dis.[神经精神疾病杂志]205,154-160]。然而，D-环丝氨酸的治疗经常遭受精神病理学刺激的困扰，例如焦虑、欣快、躁动、感觉刺激、头昏/嗜睡、疲劳、头痛和胃肠道不适[Schade,S.,Paulus,W.,2016.D-Cycloserine inneuropsychiatric diseases:a systematic review.[D-环丝氨酸在神经精神疾病中的应用：系统综述]Int.J.Neuropsychopharmacol[国际神经精神药理学杂志]

Urwyler等人,J.Med.Chem.[医学化学杂志]2009,52,5093-5107公开了对NMDA受体的甘氨酸位点具有亲和力的3-酰基氨基-2-氨基丙酸衍生物。

尽管在本领域存在长期的兴趣，但是对于开发有效、耐受性良好且有活性的药物来治疗抑郁症和抑郁障碍(如MDD)，显然仍存在未满足的需求。对甘氨酸位点具有亲和力的、作为NMDA受体调节剂的化合物可以满足这种未满足的需求。

发明内容

针对此背景，本发明的目的是提供对甘氨酸位点具有亲和力的、作为NMDA受体调节剂的化合物。在本发明的第一方面中提供了一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自由以下组成的组：氢、卤素、C_1-4卤代烷基、氰基、C_3-6环烷基和C_1-4烷基；

R²选自由以下组成的组：氢、卤素、C_1-4卤代烷基、氰基、C_3-6环烷基和C_1-4烷基；

R³选自由以下组成的组：氢、卤素、C_1-4卤代烷基、氰基、C_3-6环烷基和C_1-4烷基；

R⁴选自由以下组成的组：氢、卤素、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_1-4羟基烷基、C_1-4羟基卤代烷基、氰基、NR^aR^b、SR^cR^d、OR⁶、L-(OR⁶)和R⁷；

R^a和R^b独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^c和R^d独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R⁶选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_1-4羟基烷基和C_1-4羟基卤代烷基；

L表示C_1-3亚烷基；并且

R⁷选自由以下组成的组：C_3-6环烷基，苯基，4、5或6元杂环和5或6元杂芳基，其中所述环烷基、苯基、杂环或杂芳基独立地未被取代或被1、2或3个独立地选自卤素、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基的取代基取代，其中所述C_1-3烷基和C_1-3烷氧基独立地未被取代或被1、2或3个F取代。

在另外的方面中提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂。

在另外的方面中提供了一种用于治疗抑郁症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的具有式I的化合物或其可接受的盐或药物组合物。

在另外的方面中提供了一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，其作为包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐的药物使用。

在另外的方面中提供了一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其用于在治疗抑郁症中使用。

在另外的方面中提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，或药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物中的用途。

在参考以下详细说明后，本发明的这些以及其他方面将变得显而易见。应理解的是，本文提到的本发明的多个方面、实施例、实施方式以及特征可以单独地或以任何组合要求保护。

在此所引用的所有文献(包括出版物、专利申请以及专利)均通过引用以其全部内容特此结合，并且引用的程度如同每个文献被单独地并且明确地指示通过引用结合并且以其全部内容在此阐述。

标题和副标题在此仅为方便而使用，并且不应以任何方式被解释为限制本发明。

附图说明

图1：根据实例3，化合物1e对伏隔核中获得的静息状态脑电图(rsEEG)的作用。

Y轴：基线归一化功率(dB)；X轴：左边的柱：10％captisol；右边的柱：20mg/kg的化合物1e。

指示了事后比较的显著性水平(相对于溶媒组)：*<0.05。

图2：根据实例4，全身施用后大鼠腹侧海马中化合物1e的浓度与时间的关系。

X轴：时间(分钟)；Y轴：大鼠腹侧海马中被测化合物的浓度(μM)；Ο：化合物1e。

具体实施方式

如表2所示，诸位发明人已经鉴定了对NMDA受体的甘氨酸位点具有亲和力的新化合物。

诸位发明人观察到，如图1所示，以20mg/kg剂量施用的化合物1e在rsEEG中显示出显著效果。

诸位发明人观察到，如图2所示，在全身施用后，在大鼠腹侧海马中观察到本发明化合物的可观的细胞外水平。

1.定义

如本文所用的术语“烷基”是指具有一到八个碳原子(包括端值)的直链(即，不分支的)或支链的饱和烃。此类基团的实例包括但不限于，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、正己基、正庚基以及正辛基。

在一些情况下，烃基取代基(例如，烷基或环烷基)中的碳原子数由前缀“C_x-y”表示，其中x是所述取代基中碳原子的最小数目并且y是最大数目。因此，例如，“C_1-3烷基”是指含有从1至3个碳原子的烷基取代基。

如本文所用的术语“亚烷基”是指衍生自具有1至10个碳原子，例如，具有2至5个碳原子的直链或支链烃的二价基团。亚烷基的代表性实例包括但不限于-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH(CH₃)CH₂-、-CH₂CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂-和-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-。

如在本发明的上下文中所使用，术语“卤基”与“卤素”可以互换使用并且是指由F、Cl、I和Br组成的组中的原子。

如本文所用的术语“烷氧基”是指具有式-OR’的部分，其中R’指如以上定义的烷基。特别地，“C_1-4烷氧基”是指这样的部分，其中烷基部分具有1、2、3或4个碳原子。“C_1-4烷氧基”的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丁氧基和叔丁氧基。

如本文所用的术语“卤代烷基”意指如本文所定义的烷基，其中一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个或八个氢原子被卤素取代。

如本文所用的术语“氟烷基”是指具有从一个至六个(包含端值)碳原子的被一个或多个氟原子取代的直链或支链饱和烃。实例包括但不限于，三氟甲基、五氟乙基、1-氟乙基、以及1,2-二氟乙基。

如本文所用的术语“羟基(hydroxyl)”或“羟基(hydroxy)”意指-OH基团。

如本文所用的术语“羟基烷基”意指通过如本文所定义的亚烷基与母体分子部分附接的至少一个-OH基团。

如本文所用的术语“羟基卤代烷基”意指通过如本文所定义的卤代烷基基团与母体分子部分附接的至少一个-OH基团。

类似地，如本文所用的术语“羟基氟烷基”意指通过如本文所定义的氟烷基与母体分子部分附接的至少一个-OH基团。

如本文所用的术语“氰基”是指通过CN基团的碳原子附接到母体分子上的-CN基团。

如本文所用的术语“杂芳基”是指芳族单环。芳族单环是含有至少一个独立地选自由N、O和S组成的组的杂原子(例如，独立地选自O、S和N的1、2、3或4个杂原子)的五元或六元环。五元芳族单环具有两个双键，并且六元芳族单环具有三个双键。杂芳基的代表性实例包括但不限于吲哚基、吡啶基(包括吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、吡咯基。

如本文所用的术语“杂环”或“杂环的”意指单环杂环、二环杂环、或三环杂环。单环杂环是含有至少一个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的三元、四元、五元、六元、七元或八元环。三元或四元环含有零个或一个双键和一个选自由O、N和S组成的组的杂原子。五元环含有零个或一个双键和一个、两个或三个选自由O、N和S组成的组的杂原子。六元环含有零个、一个或两个双键和一个、两个或三个选自由O、N和S组成的组的杂原子。七元和八元环含有零个、一个、两个或三个双键和一个、两个或三个选自由O、N和S组成的组的杂原子。单环杂环的代表性实例包括但不限于氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氮丙啶基、二氮杂环庚烷基、1,3-二噁烷基、1,3-二氧杂戊环基、1,3-二硫戊环基、1,3-二噻烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑烷基、吗啉基。

如本文所用的术语“环烷基”是指含有3至10个碳原子、0个杂原子和0个双键的碳环系统。环烷基可以是单环或双环的，其中两个环是桥联的、稠合的或螺环的。环烷基的代表性实例包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。

对于本文所述的化合物，其基团和取代基可根据原子和取代基的所允许化合价进行选择，使得选择和取代产生稳定的化合物，例如，该化合物不会自发地经历转化，例如通过重排、环化、消除等。

除非本文另外指示或与上下文明显矛盾，否则在描述本发明的上下文中，术语“一个/种(a/an)”和“该(the)”以及类似指称对象的使用应解释为包括单数和复数二者。例如，除非另外指示，否则短语“该化合物”应理解为是指本发明的多种“化合物”或具体描述的方面。

除非另外陈述或与上下文明显矛盾，否则在此使用涉及一种或多种要素的术语如“包括(comprising)”、“具有(having)”、“含有(including)”或“包含(containing)”的本发明的任何一方面或多方面的描述，旨在提供对“由那一种或多种特定要素组成”、“基本上由那一种或多种特定要素组成”或“基本上包含那一种或多种特定要素”的本发明的类似一方面或多方面的支持(例如，除非另外陈述或与上下文明显矛盾，否则在此所述的包含特定要素的组合物应理解为也描述由那个要素组成的组合物)。

在本发明上下文中，术语NMDA受体部分甘氨酸激动剂旨在表示通过正构甘氨酸结合位点结合并激活NMDA受体并引起与甘氨酸相关的部分功效的化合物。

在本发明上下文中，术语化合物的“治疗有效量”意指足以在包括施用所述化合物的治疗性介入中治愈、缓解或部分阻滞给定疾病(例如抑郁症)及其并发症的临床表现的量。将足以实现以上的量定义为“治疗有效量”。用于各目的有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受试者的体重及一般状态。将理解的是，可以使用常规实验确定适当剂量，例如通过构建值矩阵并测试矩阵中的不同点来实现，这均在受训医师的普通技术内。

在本发明上下文中，术语“治疗(treatment和treating)”意指管理并护理患者用于抗击疾病的目的。该术语意图包括对患者所患的给定疾病(例如抑郁症)的治疗的完整范围，例如施用活性化合物以缓解症状或并发症、以延迟抑郁症的进展、以缓解或减轻症状及并发症、和/或以治愈或消除抑郁症。欲治疗的患者优选是哺乳动物，特别是人类。在本发明上下文中，“疾病”可以与障碍(disorder)、病症(condition)、功能障碍(malfunction)、功能异常(dysfunction)等同义使用。

2.本发明的实施例

在下文披露本发明的实施例。第一实施例表示为E1，第二实施例表示为E2，依此类推。

E1.一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R^a和R^b独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^c和R^d独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

L表示C_1-3亚烷基；并且

E2.根据实施例E1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R²选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R³选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R⁴选自由以下组成的组：氢、卤素、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_1-4羟基烷基、OR⁶和R⁷；

R⁶选自由以下组成的组：C_1-4烷基和C_1-4卤代烷基；并且

R⁷选自由以下组成的组：C_3-6环烷基和苯基，其中所述环烷基和苯基独立地未被取代或被1、2或3个独立地选自卤素、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基的取代基取代，其中所述C_1-3烷基和C_1-3烷氧基独立地未被取代或被1、2或3个F取代。

E3.根据实施例E1至E2中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是氢。

E4.根据实施例E1至E3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是C_1-3烷基(例如乙基)。

E5.根据实施例E1至E4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²是氢。

E6.根据实施例E1至E5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基和卤素。

E7.根据实施例E1至E6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³选自由以下组成的组：氢、氟和甲基。

E8.根据实施例E1至E7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³是氢。

E9.根据实施例E1至E8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹、R²和R³是氢。

E10.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4烷基。

E11.根据实施例E1至E10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是甲基。

E12.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4氟烷基。

E13.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是卤素。

E14.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是未被取代或被C_1-3烷基取代的苯基。

E15.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4烷氧基。

E16.根据实施例E15所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴选自由以下组成的组：异丙氧基、乙氧基和甲氧基。

E17.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴选自由以下组成的组：C_1-4烷基，C_1-4氟烷基、C_3-6环烷基、C_1-4羟基烷基、C_1-4烷氧基、NR^aR^b、SR^cR^d、卤素、以及未被取代或被乙基取代的苯基。

E18.根据实施例E1至E9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴选自由以下组成的组：甲基、乙基、异丙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、羟基甲基、异丙氧基、乙氧基、甲氧基、环丙基、氟、溴、二甲氨基、甲硫基和乙基苯基。

E19.根据实施例E1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下组成的组：

(R)-2-氨基-3-[[7-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[[7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[[7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[[7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-羟基甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[[7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(6-氟-7-甲基-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；以及

(R)-2-氨基-3-[(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；或其药学上可接受的盐。

E20.根据实施例E1所述的化合物，其中所述化合物是(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸，或其药学上可接受的盐。

E21.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据实施例E1至E20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂。

E22.根据实施例E1至E20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物使用。

E23.根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，用于在治疗抑郁症中使用。

E24.根据实施例E23所述的化合物或药物组合物，其中所述抑郁症选自由以下组成的组：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

E25.根据实施例E24所述的化合物或药物组合物，其中所述抑郁症是重度抑郁症。

E26.根据实施例E24所述的化合物或药物组合物，其中所述抑郁症是难治性抑郁症。

E27.根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，用于在治疗选自自杀意念、双相障碍(包括双相抑郁症)、强迫症和癫痫持续状态的病症中使用。

E28.根据实施例E27所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，用于在治疗自杀意念中使用。

E29.一种治疗抑郁症的方法，所述方法包括将治疗有效量的根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物施用至有需要的患者。

E30.根据实施例E29所述的治疗抑郁症的方法，其中所述抑郁症选自由以下组成的组：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

E31.根据实施例E29至E30中任一项所述的治疗抑郁症的方法，其中所述抑郁症是重度抑郁症。

E32.根据实施例E29至E30中任一项所述的化合物或药物组合物，其中所述抑郁症是难治性抑郁症。

E33.一种治疗选自自杀意念、双相障碍(包括双相抑郁症)、强迫症和癫痫持续状态的病症的方法，所述方法包括将治疗有效量的根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物施用至有需要的患者。

E34.一种治疗自杀意念的方法，所述方法包括将治疗有效量的根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物施用至有需要的患者。

E35.根据实施例E1至E21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物中的用途。

E36.根据实施例E35所述的化合物或药物组合物的用途，其中所述抑郁症选自由以下组成的组：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

对本发明所涵盖的化合物的提及包括本发明的化合物的游离物质(两性离子)、本发明的化合物的药学上可接受的盐，例如酸加成盐或碱加成盐、以及本发明的化合物及其药学上可接受的盐的多晶形和非结晶形式。此外，本发明的化合物及其药学上可接受的盐能潜在地以未溶剂化形式存在以及以与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。本发明涵盖了溶剂化和未溶剂化形式二者。

可以通过使用作为

的一部分的结构＝名称(Struct＝Name)命名算法对化合物名称进行指定。

应该理解的是，本发明的化合物可具有互变异构形式、立体异构体、几何异构体，并且这些也构成本发明的实施例。

可以通过已知方法将外消旋形式拆分为旋光对映体，例如通过用光学活性酸分离其非对映异构盐并且通过用碱处理来离析光学活性胺化合物。可以例如通过分步结晶来实现此类非对映异构体盐的分离。适合于此目的的光学活性酸可以包括但不限于d-酒石酸或l-酒石酸、扁桃酸或樟脑磺酸。用于将外消旋体拆分为旋光对映体的另一种方法是基于在光学活性基质上的层析。本发明的化合物还可以通过从手性衍生化试剂(例如，手性烷基化或酰基化试剂)形成并层析分离非对映异构体衍生物，随后切割手性助剂来拆分。以上方法中的任一种都可以应用于拆分本发明的化合物的旋光对映体自身或应用于拆分合成的中间体的旋光对映体，然后可以通过在此描述的方法将其转化为光学拆分的终产物，该终产物是本发明的化合物。可以使用本领域的普通技术人员已知的用于拆分光学异构体的另外的方法。此类方法包括由J.Jaques、A.Collet和S.Wilen在“Enantiomers,Racemates,andResolutions[对映异构体、外消旋体与拆分]”，John Wiley and Sons[约翰威利父子公司]，纽约，1981中讨论的那些。光学活性化合物还可以从光学活性起始材料制备。

本发明还包括同位素标记的化合物，其与式I所要求保护的化合物相似，其中一个或多个原子由相同元素的原子表示，其原子质量或质量数与自然界中通常发现的原子质量或质量数不同(例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁵N、¹⁸F等)。特别提及²H取代的化合物，即其中一个或多个H原子由氘表示的化合物。

在本发明的一个实施例中，具有式I的化合物的一个或多个氢原子由氘表示。应认识到，在大多数合成化合物中，元素以天然同位素丰度存在并导致氘的固有掺入。但是，氢同位素(如氘)的天然同位素丰度相对于本文所述化合物的稳定同位素取代程度而言并不重要(约0.015％)。因此，如本文所使用的，在一个位置处原子指定为氘表明氘的丰度显著大于氘的天然丰度。任何未被指定为特定同位素的原子旨在表示该原子的任何稳定同位素，如对于本领域普通技术人员显而易见的。

在一个实施例中，化合物中指定为“D”的位置具有在该位置处大于约60％，如在该位置处大于约70％，如在该位置处大于约80％，如在该位置处大于约85％的最小氘掺入。在另外的实施例中，化合物中指定为“D”的位置具有在该位置处大于约90％，如在该位置处大于约95％，如在该位置处大于约97％，如在该位置处大于约99％的最小氘掺入。

a.药学上可接受的盐

本发明的化合物通常以游离物质形式或以其药学上可接受的盐形式利用。当具有式I的化合物含有游离碱时，此类盐可以以常规方式通过用摩尔当量的药学上可接受的酸处理具有式I的游离碱的溶液或悬浮液来制备。适合的有机酸及无机酸的代表性实例描述于下文。

在本发明上下文中的药学上可接受的盐旨在指示无毒的，即生理上可接受的盐。

术语“药学上可接受的盐”包括在母体分子中的氮原子上，与无机酸和/或有机酸形成的盐。所述酸可以选自例如盐酸、氢溴酸、磷酸、亚硝酸、硫酸、苯甲酸、柠檬酸、葡糖酸、乳酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、乙酸、丙酸、草酸、马来酸、富马酸、谷氨酸、焦谷氨酸、水杨酸、糖精、以及磺酸，例如甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、和苯磺酸。

在本发明的实施例中，药学上可接受的盐是氯化氢盐。

在本发明的实施例中，药学上可接受的盐是溴化氢盐。

术语药学上可接受的盐还包括在具有式I的化合物的酸基团上，与无机碱和/或有机碱形成的盐。所述碱可以选自例如碱金属碱，例如氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾，碱土金属碱，例如氢氧化钙和氢氧化镁，以及有机碱，例如三甲胺。

有用于形成药学上可接受的盐的酸和碱的另外实例可以例如在Stahl和Wermuth(编辑)“药用盐类手册-性质、选择和使用(Handbook of Pharmaceuticalsalts.Properties,selection,and use)”，威利-VCH出版社(Wiley-VCH)，2008中找到。

3.用于治疗的病症

本发明涵盖了本发明的化合物用于治疗以上列出的所有疾病和障碍的用途。

如上所述，本发明可用于治疗抑郁症和抑郁障碍。因此，在一个实施例中，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗抑郁症。

抑郁症的诊断通常是由精神科医生或其他精神健康专业人员进行的临床评估后得出的。美国精神病学协会出版的DSM(Diagnostic and Statistical Manual of MentalDisorders,Fourth Edition[精神障碍诊断和统计手册第四版](DSM IV))和ICD(ICD-10:International Statistical Classification of Diseases and Related HealthProblems-10^th Revision[ICD-10：疾病和相关健康问题的国际统计分类-第10版]，由世界卫生组织定期发布)或任何其他精神病分类系统概述了两套最受认可的重度抑郁症和其他抑郁障碍或心境障碍的诊断标准。

抑郁症的体征和症状是例如情绪低落、失去兴趣(快感缺失)、体重或食欲变化、睡眠问题、精神运动活动(客观或主观)、易疲劳、无价值感、注意力难以集中、自杀意念、信心丧失、性功能障碍和自责。

因此在本发明的实施例中，用本发明所述化合物进行的治疗可预防、改变、减少或减轻一种或多种抑郁症的体征和症状，所述抑郁症的体征或症状选自由以下组成的组：情绪低落、失去兴趣(快感缺失)、体重或食欲变化、睡眠问题、精神运动活动(客观或主观)、易疲劳、无价值感、注意力难以集中、自杀意念、信心丧失、性功能障碍和自责。技术人员熟悉用于测量抑郁症状改善的各种测试。测量改善的测试实例是但不限于HAM-D或MADRS量表。

在一个实施例中，所述抑郁症是重度抑郁症。

在另外的实施例中，所述抑郁症是难治性抑郁症。

在另外的实施例中，所述抑郁症选自：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

临床上使用的NMDA拮抗剂(如氯胺酮和右美沙芬)通常在神经性疼痛患者中有效[Hy等人,Expert Rev Clin Pharmacol.[临床药理学专家综述]2011年5月1日；4(3):379-388]。因此，在本发明的实施例中，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗疼痛。在另外的实施例中，所述疼痛是神经性疼痛。

临床前动物模型通过使用NDMA甘氨酸位点调节剂已经证明了促进认知和抗抑郁样作用[Peyrovian等人,Progress in Neuropsychopharmacology&BiologicalPsychiatry.[神经心理药理学和生物精神病学进展]92(2019)387-404]。因此在本发明的实施例中，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于在治疗选自自杀意念、双相障碍(包括双相抑郁症)、强迫症和癫痫持续状态的病症中使用。

在另外的实施例中，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗自杀意念。

在本发明的实施例中，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗神经障碍或神经精神障碍。

a.组合治疗

在本发明的实施例中，具有式I的化合物作为唯一活性化合物用作独立治疗(stand-alone treatment)。在本发明的另一个实施例中，具有式I的化合物可以与在障碍(例如抑郁症)的治疗中有用的其他药剂组合使用。如本文中在本发明的方法(包括组合施用治疗有效量的具有式I的化合物和另一种化合物，该化合物在治疗神经退行性疾病或障碍的治疗中有用)的上下文中使用的术语“组合使用”、“与……组合”以及“……的组合”等旨在是指同时或者顺序地(以任何顺序)与所述其他化合物一起施用具有式I的化合物。

这两种化合物可以同时施用或者在这两种化合物的施用之间有时间间隔的相继施用。可以作为同一药物制剂或组合物的一部分、或在分开的药物制剂或组合物中，施用这两种化合物。可以在同一天或不同天施用这两种化合物。它们可以通过同一个途径施用，例如通过口服施用，通过储库(depot)型，通过肌内注射或静脉注射；或者通过不同途径施用，其中一种化合物例如口服施用或通过储库放置，并且另一种化合物例如注射给药。可以通过相同给药方案或间隔施用这两种化合物，例如每天、每周、或每月一次或两次；或可以通过不同给药方案施用这两种化合物，例如其中每天一次施用一种化合物，并且每天或每周或每月两次施用另一种化合物。

在一些情况下，当用本发明的化合物开始治疗时，待治疗的患者可能已经用在抑郁症的治疗中有用的一种或多种其他化合物进行治疗。在其他情况下，当用在抑郁症或精神病的治疗中有用的一种或多种其他化合物开始治疗时，该患者可能已经用本发明的化合物进行治疗。在其他情况下，用本发明的化合物的治疗和用在精神病的治疗中有用的一种或多种其他化合物的治疗同时开始。

b.用于组合治疗的化合物

可以有利地与本发明的化合物组合的治疗活性化合物的实例包括镇静剂或催眠药，例如苯并二氮

类；抗惊厥药，例如拉莫三嗪、丙戊酸、托吡酯、加巴喷丁、卡马西平；情绪稳定剂，例如锂；多巴胺能药物，例如多巴胺激动剂和L-Dopa；治疗ADHD的药物，例如托莫西汀；精神兴奋剂，例如莫达非尼、氯胺酮、哌醋甲酯和苯丙胺；其他抗抑郁药，例如米氮平、米安色林、伏替西汀、依地普仑(cipralex)和安非他酮；激素类，例如T3、雌激素、DHEA和睾酮；非典型抗精神病药，例如奥氮平、依匹哌唑和阿立哌唑；典型抗精神病药，如氟哌啶醇；用于治疗阿尔茨海默氏病的药物，例如胆碱酯酶抑制剂和盐酸美金刚，叶酸；S-腺苷基-甲硫氨酸；免疫调节剂，例如干扰素；阿片类，例如丁丙诺啡；血管紧张素II受体1拮抗剂(AT1拮抗剂)；ACE抑制剂；他汀类；和α1肾上腺素拮抗剂，例如哌唑嗪。

c.施用途径

包含具有式I的化合物(作为唯一活性化合物或与另一种活性化合物组合)的药物组合物可以被具体配制用于通过任何适合途径施用，例如经口、经直肠、经鼻、经颊、舌下、经肺、经皮和非经肠(例如皮下、肌内和静脉内)途径。

将领会的是，该途径将取决于待治疗的受试者的一般状况和年龄、待治疗的病症的性质以及活性成分。

d.剂量

在一个实施例中，每天以从约0.5mg/kg体重至约50mg/kg体重的量施用本发明的化合物。具体而言，每日剂量可以处于每天1mg/kg体重至约30mg/kg体重的范围内。精确剂量将取决于施用频率及模式，待治疗的受试者的性别、年龄、体重及一般状况，待治疗的病症、任何待治疗的伴随疾病的性质及严重程度，所希望的治疗效果以及本领域的普通技术人员已知的其他因素。

在一个实施例中，施用频率是每天1、2、3、4或5次。

在一个实施例中，施用频率是每周一次。

在一个实施例中，施用频率是每周两次。

针对成人的典型口服剂量在以下范围内：100-3000mg/天的本发明的化合物，例如700-2800mg/天，例如1000-2000mg/天或1200-1700mg/天。方便地，将本发明的化合物以单位剂型施用，该单位剂型以如下的量包含所述化合物：约100至1000mg，例如100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、750mg或多达1000mg的本发明化合物。

在一个实施例中，施用频率是每天1、2、3、4或5次。

在一个实施例中，施用频率是每周一次。

在一个实施例中，施用频率是每周两次。

针对成人的典型IV剂量在以下范围内：20-300mg/天的本发明的化合物，例如50-200mg/天，例如70-150mg/天或75-125mg/天。方便地，将本发明的化合物以单位剂型施用，该单位剂型以如下的量包含所述化合物：约10至300mg，例如10mg、20mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg的本发明的化合物。

在一个实施例中，施用频率是每周一次。

在一个实施例中，施用频率是每周两次。

4.药物制剂和赋形剂

在下文中，术语“赋形剂”或“药物上可接受的赋形剂”是指药物赋形剂，包括但不限于填充剂、抗粘合剂、粘合剂、包衣、着色剂、崩解剂、调味剂、助流剂、润滑剂、防腐剂、吸着剂、甜味剂、溶剂、溶媒和佐剂。

本发明还提供了包含具有式I的化合物(例如在本文实验部分中所披露的化合物之一)的药物组合物。本发明还提供了一种用于制造包含具有式I的化合物的药物组合物的方法。根据本发明的药物组合物可以用药学上可接受的赋形剂根据常规技术进行配制，这些常规技术例如在以下中披露的那些：Remington,“The Science and Practice ofPharmacy[药学科学与实践]”,第22版(2013),由Allen,Loyd V.,Jr.编辑。

用于口服施用的药物组合物包括固体口服剂型，例如片剂、胶囊、粉剂以及颗粒剂；和液体口服剂型，例如溶液、乳剂、悬浮液和糖浆剂以及待溶解或悬浮在合适液体中的粉剂和颗粒剂。

固体口服剂型可以离散单位形式呈现(例如片剂或硬胶囊或者软胶囊)，各自含有预定量的活性成分，并且优选地包括一种或多种适合的赋形剂。适当时，根据本领域中熟知的方法，所述固体剂型可以制备为具有包衣，例如肠溶衣，或着它们可以被配制以提供活性成分的改进释放，例如延迟或延长释放。适当时，所述固体剂型可以是在唾液中崩解的剂型，例如口腔分散片剂。

适于固体口服制剂的赋形剂的实例包括但不限于：微晶纤维素、玉米淀粉、乳糖、甘露醇、聚维酮、交联羧甲纤维素钠、蔗糖、环糊精、滑石、明胶、果胶、硬脂酸镁、硬脂酸和纤维素的低级烷基醚。类似地，固体制剂可以包括本领域已知的用于延迟或延长释放制剂的赋形剂，例如单硬脂酸甘油酯或羟丙甲纤维素。如果将固体材料用于口服施用，则该制剂可以例如通过将活性成分与固体赋形剂混合，并且随后在常规压片机中压缩该混合物来制备；或可以例如将该制剂以例如粉剂、丸剂或微型片剂形式置于硬胶囊中。固体赋形剂的量将广泛变化，但将典型地在每剂量单位从约25mg至约1g的范围。

液体口服剂型能以例如酏剂、糖浆剂、口服滴剂或充液胶囊呈现。液体口服剂型还能以用于在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液的粉剂呈现。适合于液体口服制剂的赋形剂的实例包括，但不限于乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、泊洛沙姆、山梨醇、聚山梨醇酯、甘油单酯和甘油二酯、环糊精、椰子油、棕榈油和水。液体口服剂型可以例如通过将活性成分溶解或悬浮在水性或非水性液体中，或通过将活性成分掺入水包油或油包水液体乳液中来制备。

可以将另外的赋形剂(例如，着色剂、调味剂和防腐剂等)用于固体和液体口服制剂中。

用于非经肠施用的药物组合物包括：用于注射或输注的无菌水性及非水性溶液、分散液、悬浮液或乳液、用于注射或输注的浓缩物以及欲在使用之前在用于注射或输注的无菌溶液或分散液中复水的无菌粉剂。适合于非经肠制剂的赋形剂的实例包括，但不限于水、椰子油、棕榈油和环糊精溶液。必要时应该适当缓冲水性制剂，并且用足够盐水或葡萄糖使水性制剂变得等张。

其他类型的药物组合物包括栓剂、吸入剂、乳膏剂、凝胶剂、皮肤贴片、植入物和用于经颊或舌下施用的制剂。

用于任何药物制剂的赋形剂必须符合预期的施用途径并且与活性成分相容。

5.本发明的化合物

表1：本发明的例示性化合物

6.实验部分

a.用于制备本发明所述化合物的通用方案

可以通过在以下反应方案1-15和实例中所概述的方法制备本发明的具有通式I的化合物(其中R¹、R²、R³和R⁴如上所定义)。在所描述的方法中，使用其本身为本领域的熟练化学师已知或对本领域的普通技术人员而言可以是显而易见的变体或修饰是可能的。此外，根据以下反应方案和实例，用于制备本发明的化合物的其他方法对本领域的普通技术人员而言将是容易显而易见的。

这些方案可以涉及在合成本发明的化合物的过程中使用选择性保护基。本领域的普通技术人员将能够选择用于具体反应的适当保护基团。在下文描述的合成方法中，对于例如氨基、酰胺基、羧酸以及羟基基团的取代基而言，掺入保护和脱保护策略可以是必要的，以合成具有式I的化合物。此类基团的保护和脱保护的方法在本领域是熟知的，并且可以发现于T.Green等人，Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基团]，1991，第2版，John Wiley&Sons[约翰威利父子公司]，纽约中。

本部分中的这些方案是有用的合成本发明化合物的方法的代表。它们不旨在以任何方式约束本发明的范围。

方案1

具有通式I的化合物(方案1)可以通过标准的脱保护程序由具有通式IV的化合物制备。例如，可以使用如乙酸中的HBr的条件，由具有通式IV的化合物制备具有通式I的化合物(方案1)，其中Pg¹是Cbz并且Pg²是苄基。

具有通式IV的化合物可以通过使具有通式III的受保护的胺与具有通式II的羧酸(或其盐)通过标准的肽偶联反应来制备，例如使用O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐，在溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺)中，在碱(例如N,N-二异丙基乙胺)存在下。

方案2

具有通式II的噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羧酸(或其盐)(方案2)可以通过在溶剂例如(四氢呋喃(THF))中使用碱(例如二异丙基氨基锂(LDA))，在低温下去质子化，然后加入二氧化碳VI，并使反应混合物达到室温而从具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶获得。

方案3

具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶(其中R⁴是Cl)是可商购的。具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶(其中R⁴是Br)(方案3)可以通过在高温下用如氧溴化磷(V)VII的试剂处理化合物Va来获得。

方案4

具有通式Vc的噻吩并[3,2-b]吡啶(方案4)可以通过在高温下在水中在例如HI的反应条件下处理化合物Vb来获得。

方案5

具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶(方案5)(其中R⁴是C_1-6烷氧基)可以通过在反应条件下(例如在醇ROH IX存在下，在高温下用碱(例如钠)去质子化)处理化合物Vb来获得。

方案6

具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶(方案6)(其中R⁴可以是如通式I所述的三氟甲基)可以通过在反应条件下(例如在金属催化剂(如碘化亚铜)，试剂(例如氟化钾)和全氟化前体(例如三甲基(三氟甲基)硅烷(TMSCF₃)X的存在下)处理化合物Vc来获得。

方案7

具有通式V的噻吩并[3,2-b]吡啶(方案7)(其中R⁴可以是如通式I所述的-CH2-OH)可以通过用还原剂(例如硼氢化钠)处理而从化合物XII获得。化合物XII可以在反应条件下(例如在甲醇中的盐酸)从化合物XI获得。化合物XI可通过在金属催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷和双(二苯亚甲基丙酮)钯和锌形成的复合物)的存在下使用试剂(如氰化锌)从化合物Vb获得。

方案8

具有通式II的噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(或其盐)(方案8)(其中R⁴可以如通式I所述的乙基)可以由相应的酯通过在水性条件下在本领域化学师已知的各种条件下水解来制备(其中Pg可以为甲基)，如具有通式XVI的化合物中。具有通式XVI的化合物可以在反应条件(例如氢化)下，在催化剂(例如碳载钯)的存在下，从具有通式XV的化合物获得(其中X可以是氢)。具有通式XV的化合物可通过使具有通式XIII的化合物与具有通式XIV的试剂在催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷和碱(如碳酸钾)形成的复合物)的存在下反应而获得。具有通式XIII的化合物(其中Pg为甲基)可以通过在甲醇作为溶剂中用试剂(如亚硫酰氯)处理而从具有通式IIa的化合物获得。

方案9

具有通式II的化合物(或其盐)(其中R⁴如通式I所述)(方案9)可以在反应条件下(例如在催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷或[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)和碱(如碳酸钠)形成的复合物)的存在下)，使具有通式IIb的化合物与具有通式XVII的试剂反应而获得。

方案10

具有通式II的噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(或其盐)(方案10)(其中R⁴可以是如通式I所述的二氟甲基)可以由相应的酯通过在水性条件下在本领域化学师已知的各种条件下水解来制备(其中Pg可以为甲基)如具有通式XIX的化合物中。具有通式XIX的化合物(其中R⁴可以是二氟甲基)可以通过用试剂(如(二乙基氨基)三氟化硫)处理具有通式XVIII的化合物来制备。具有通式XVIII的化合物可以在臭氧存在下，然后用试剂(如三苯基膦)处理由具有通式XVa的化合物制备。

方案11

具有通式II的噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(或其盐)(方案11)(其中R¹是氢)可以由相应的酯通过在本领域化学师已知的水性条件下水解来制备(其中Pg可以为甲基)，如具有通式XXII的化合物中。具有通式XXII的化合物可以通过在碱(例如三乙胺)存在下使具有通式XX的醛与具有通式XXI的试剂反应来制备。

方案12

具有通式XX的醛(方案12)可以使用还原剂(例如二异丁基氢化铝)由具有通式XXV的化合物制备。具有通式XXV的化合物可通过使具有通式XXIII的化合物(其中X是卤素(例如碘))与试剂(例如XXIV)在催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷和碱(如磷酸钾)形成的复合物)的存在下反应而获得。具有通式XXIII的化合物可以由具有通式XXII的化合物通过使用碱(例如二异丙基氨基锂)，然后加入亲电子卤素物质(例如分子碘)进行去质子化来制备。

方案13

具有通式XX的醛(方案13)可以在反应条件下(例如在臭氧存在下)，然后用试剂(如三苯基膦)处理，由具有通式XXIX的化合物制备。具有通式XXIX的化合物可通过使具有通式XXVIII的化合物与具有通式XIV的试剂在催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷和碱(如碳酸钾)形成的复合物)的存在下反应而获得。具有通式XXVIII的化合物可通过使具有通式XXVII的化合物(其中X是卤素(例如碘))与试剂(例如XXIV)在催化剂(如[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷和碱(如碳酸钾)形成的复合物)的存在下反应而获得。具有通式XXVII的化合物可以由具有通式XXVI的化合物通过使用碱(例如二异丙基氨基锂)然后加入亲电子卤素物质(例如分子碘)进行去质子化来制备。

方案14

具有通式IV的化合物(其中R⁴＝-CH₂F)(方案14)可以使用试剂(如(二乙基氨基)三氟化硫)由具有通式IV的化合物(其中R⁴＝-CH₂OH)制备。

方案15

具有通式I的化合物(其中R⁴是异丙基)(方案15)可以在反应条件(例如氢化)下，在催化剂(例如碳载钯)的存在下，从具有通式XXXI的化合物制备。具有通式XXXI的化合物可以通过使具有通式III的受保护的胺与具有通式XXX的羧酸通过标准的肽偶联方法反应来制备，例如使用O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐，在溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺)中，在碱(例如N,N-二异丙基乙胺)存在下。具有通式XXX的化合物可以在反应条件下(例如在催化剂(如[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)和碱(如碳酸钾)的存在下))，使具有通式IIa的化合物(其中X分别为Cl或Br)与具有通式XIV的试剂反应而获得。

b.通用方法

LC-MS方法

使用以下鉴定的方法之一获得分析型LC-MS数据。

方法AA：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x50mm；柱温：60℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.965:0.035)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝90:10，在1.0分钟内至0:100并且流速为1.2mL/min。

方法BB：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x50mm；柱温：60℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.5:0.5)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝90:10，在1.0分钟内至0:100并且流速为1.2mL/min。

制备型HPLC

制备型HPLC(方法A)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,SHIMADZU LC-8ALCMS2010；柱：YMC-Actus Triart C18 150*30 5μm；流动相A：水(0.05％HCl v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从5％至35％，然后保持在100％持续3min；流速(ml/min)：25；柱温：35℃以及波长：220nm 254nm

制备型HPLC(方法B)：仪器：Gilson GX-215,Gilson 322泵,Gilson 156UV检测器；柱：YMC-Actus Triart C18 150*30 5μm；流动相A：水(0.05％HCl v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从0％至28％，然后保持在100％持续3min；流速(ml/min)：25；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm

制备型HPLC(方法C)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％氢氧化氨v/v)；流动相B：MeCN；梯度：在10min内从42％至72％，然后保持在100％持续2.5min；流速(ml/min)：25；柱温：25℃以及波长：220nm 254nm

制备型HPLC(方法D)：仪器：Gilson GX-281,Gilson 322泵,Gilson 156UV检测器；柱：Gemini 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％氢氧化氨v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从52％至82％，然后保持在100％持续2min；流速(ml/min)：25；柱温：30℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法E)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson 322泵,Gilson156UV检测器；柱：Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％氢氧化氨v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从64％至94％，然后保持在100％持续2.5min；流速(ml/min)：25；柱温：25℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法F)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％氢氧化氨v/v)；流动相B：MeCN；梯度：在10min内从57％至87％，然后保持在100％持续2.5min；流速(ml/min)：25；柱温：25℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法G)：仪器：Gilson GX-215液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：DYA-5C18 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％HCl v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从6％至36％，然后保持在100％持续3min；流速(ml/min)：25；柱温：35℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法H)：仪器：Gilson GX-281,Gilson 322泵,Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini C18 250*50*10μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)；流动相B：MeCN；梯度：B在11.2min内从10％至40％，保持在100％持续2.5min；流速(ml/min)：22；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm

制备型HPLC(方法I)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Agela Durashell C18 150mm×25mm×5μm；流动相A：水(0.225％FA,v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从32％至62％，保持100％B持续2min；流速(ml/min)：25；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm

制备型HPLC(方法J)：仪器：Gilson GX-281,Gilson 322泵,Gilson156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150*25*5μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)；流动相B：MeCN；梯度：B在8.4min内从40％至66％，然后保持在100％持续2min；流速(ml/min)：25；柱温：30℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法K)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Agela ASB 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％HCl)；流动相B：MeCN；梯度：B在8min内从0％至25％，然后保持在100％持续0min；流速(ml/min)：25；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法L)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Agela ASB 150*25mm*5μm；流动相A：水(0.05％HCl)；流动相B：MeCN；梯度：B在8min内从0％至25％，然后保持在100％持续0min；流速(ml/min)：25；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm。

制备型HPLC(方法M)：仪器：Gilson GX-281液体处理器,Gilson322泵,Gilson156UV检测器；柱：Agela Durashell C18 150mm×25mm×5μm；流动相A：水(0.225％FA,v/v)；流动相B：MeCN；梯度：B在10min内从40％至70％，保持100％B持续0min；流速(ml/min)：25；柱温：40℃以及波长：220nm 254nm。

在Bruker Avance仪器上于300、400、500或600MHz下记录¹H NMR光谱。将TMS用作内参考标准品。以ppm表示化学位移值。以下缩写用于NMR信号的多重性：s＝单峰、d＝双重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、qui＝五重峰、h＝七重峰、dd＝双双重峰、dt＝双三重峰、dq＝双四重峰、tt＝三三重峰、m＝多重峰、br s＝宽单峰并且br＝宽信号。

缩写是根据ACS Style Guide[ACS风格指南]：“The ACS Style guide–A manualfor authors and editors[ACS风格指南-作者与编辑手册]”Janet S.Dodd,编辑.1997,ISBN:0841234620。

c.中间体的制备

中间体1

(R)-3-(苄氧基)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-氧代丙-1-氯化铵

在28℃下向苯甲醇(56.0mL)中滴加亚硫酰氯(2.1g，17.6mmol)。添加完成后，分几批添加(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸(3.8g，15.9mmol)，并将反应在28℃搅拌24小时。在80℃/0.02巴下除去过量的苄醇并将残余物在环己烷(35mL)中搅拌16小时。将滤饼用MTBE(50mL)过滤并研磨，得到标题化合物(3.0g)。

LCMS(MH+):(m/z)＝329.2,t_R(min,方法AA)＝0.52。

中间体2

7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂

在-78℃下向7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(10.0g，58.9mmol)在THF(150mL)中的溶液中滴加正丁基锂(n-BuLi)(己烷中2.5M，23.6mL)。将混合物在-78℃下搅拌30分钟。然后将气态二氧化碳(15psi)鼓泡通过反应溶液，并使混合物在16小时内升温至20℃。将混合物用THF(20mL)稀释并过滤。收集滤饼并干燥，得到7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(12g)。

d.本发明的例示性化合物的制备

化合物1a(R)-2-氨基-3-[[7-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[[7-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

在20℃下，向3-氟吡啶甲醛(500mg，4.0mmol)和2-巯基乙酸甲酯(830mg，7.82mmol，0.7mL)在二甲基甲酰胺(DMF)(10mL)中的混合物中加入三乙胺(TEA)(1.1mL)。将混合物在100℃下搅拌4小时。将混合物用H₂O(30mL)稀释，并且用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将有机相用盐水(10mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚:乙酸乙酯＝0-30％)纯化，得到噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(620mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.77(dd,J＝4.50,1.37Hz,1H),8.22(d,J＝0.78Hz,1H),8.19-8.21(m,1H),7.35(dd,J＝8.22,4.50Hz,1H),3.98(s,3H)。

步骤2：噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

在25℃，将噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(200mg，1.04mmol)和LiOHxH₂O(87mg，2.1mmol)在MeOH(2mL)、四氢呋喃(THF)(2mL)和H₂O(2mL)中的混合物搅拌16h。将混合物用叔丁基甲醚(MTBE)(5mL x 2)萃取。用HCl(2M，1mL)将水相调节至pH＝3-4。将沉淀物过滤。将滤饼干燥，得到噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(160mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.77(dd,J＝4.27,1.25Hz,1H),8.56(d,J＝8.28Hz,1H),8.11(s,1H),7.51(dd,J＝8.28,4.52Hz,1H)。

步骤3：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(160mg，0.9mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(326mg，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(430mg)和N,N-二异丙基乙胺(0.8mL)在DMF(5mL)中的混合物在25℃下搅拌15h。将混合物用H₂O(30mL)稀释，并且用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将有机相用盐水(10mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚:乙酸乙酯＝0-80％)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(300mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.73(dd,J＝4.41,1.32Hz,1H),8.17(d,J＝8.16Hz,1H),8.03-8.03(m,1H),7.82(s,1H),7.23-7.36(m,12H),6.03-6.05(m,1H),5.20(s,2H),5.11(s,2H),4.62-4.63(m,1H),3.80-4.00(m,2H)。

步骤4：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸

将化合物(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg，204.27mmol)和LiOHxH₂O(17mg)在THF(2mL)、H₂O(2mL)和MeOH(2mL)中的混合物在25℃搅拌15h。将混合物用MTBE(5mL×2)萃取。用HCl(2M，1.5mL)将水相调节至pH＝3-4。将沉淀物过滤。将滤饼干燥，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸(45mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.01-9.04(m,1H),8.74(dd,J＝4.52,1.51Hz,1H),8.53(d,J＝7.53Hz,1H),8.22(s,1H),7.6-7.62(m,1H),7.46(dd,J＝8.28,4.52Hz,1H),7.23-7.38(m,5H),4.97-5.10(m,2H),4.24-4.35(m,1H),3.51-3.75(m,2H)。

步骤5：(R)-2-氨基-3-[[7-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

将化合物(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸(40mg，0.10mmol)和HBr(2mL，33％在乙酸中)的混合物在25℃搅拌1h。将混合物用MTBE(3mL)稀释，并且用MTBE(3mL×3)倾析。将产物冻干，得到呈盐(具有氢溴酸分子)的(R)-2-氨基-3-(噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸(28mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.29-9.31(m,1H),8.84(d,J＝4.52Hz,1H),8.71-8.73(m,1H),8.38-8.39(m,3H),8.33(s,1H),7.61(dd,J＝7.28,4.77Hz,1H),4.13-4.22(m,1H),3.79-3.88(m,1H),3.70-3.79(m,1H)。

LCMS(MH+):m/z＝266.1,t_R(min,方法BB)＝0.16。

[α]²⁰D＝-20.0,(c＝2.0mg/mL,CH₃OH)

化合物1b

(R)-2-氨基-3-[(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

向7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(0.5g，2.28mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加SOCl₂(813mg，6.83mmol)。将反应混合物在50℃下加热39小时。将混合物浓缩，得到7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯HCl盐(0.5g，75％产率)。

LC-MS:t_R＝0.844min,m/z＝227.9[M+H]⁺。

步骤2：7-乙烯基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

在氮气气氛下，向7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(1.2g，5.27mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(974mg，6.32mmol)在二噁烷(15mL)和H₂O(1.5mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(Pd(dppf)Cl₂)(386mg，0.53mmol)和K₂CO₃(2.19g，15.81mmol)。将混合物在100℃下搅拌16小时。将混合物用水(20mL)和EtOAc(20mL)稀释并过滤。将滤液用EtOAc(20mL x 3)萃取，并且将合并的有机层在减压下浓缩。将残余物通过Combi Flash(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至20％)纯化，得到7-乙烯基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(920mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.75(d,1H),8.26(s,1H),7.36(d,1H),6.93(dd,1H),6.22(d,1H),5.79(d,1H),4.00(s,3H)。

步骤3：7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

在N₂下，向7-乙烯基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(0.17g，0.78mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加Pd/C(30mg，10％Pd，50％水)。将悬浮液在真空下脱气并用H₂吹扫几次。在H₂下(气球)，将混合物在10℃下搅拌3小时。过滤反应混合物，并且浓缩滤液，得到7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(0.1g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝4.4Hz,1H),8.23(s,1H),7.20(d,J＝4.8Hz,1H),3.98(s,3H),2.93(q,J＝7.6Hz,2H),1.41(t,J＝7.6Hz,3H)。

步骤4：7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

向7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(0.1g，0.45mmol)在MeOH(4mL)、H₂O(2mL)和THF(4mL)的混合物中的溶液中添加LiOHxH₂O(38mg，0.90mmol)。将混合物在10℃下搅拌16小时。用HCl水溶液将pH调节至3。浓缩反应混合物，得到7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(150mg)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.94(d,J＝6.0Hz,1H),8.28(s,1H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),3.23(q,J＝7.6Hz,2H),1.49(t,J＝7.6Hz,3H)。

步骤5：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(0.09g)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(171mg，0.52mmol，HCl盐)在DMF(10mL)中的溶液中添加O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(209mg，0.65mmol)和N,N-二异丙基乙胺(169mg，1.30mmol)。将反应混合物在10℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(20mL)淬灭，用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经Na₂SO₄干燥、并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0％至100％)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(70mg)。

LC-MS:t_R＝0.911min,m/z＝518.1[M+H]⁺。

步骤6：(R)-2-氨基-3-[(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(70mg，0.14mmol)在30％HBr在AcOH(2mL)中的溶液在50℃加热16小时。将反应混合物浓缩并加入AcOH(2mL)。通过过滤收集形成的浅黄色沉淀，用AcOH(2mL)洗涤并干燥，得到(R)-2-氨基-3-(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(23mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.35(t,J＝5.6Hz,1H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.43-8.33(m,4H),7.56(d,J＝4.8Hz,1H),4.20-4.10(m,1H),3.87-3.81(m,1H),3.77-3.70(m,1H),3.00(q,J＝7.6Hz,2H),1.35(t,J＝7.6Hz,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝294,t_R(min,方法BB)＝0.24。[α]²⁰D＝-2.0(c＝1.0mg/mL,CH₃OH)。

化合物1c

(R)-2-氨基-3-[[7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[[7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-甲酰基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

在-78℃下，将臭氧鼓泡至7-乙烯基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(700mg，3.19mmol)在MeOH(30mL)中的溶液持续10min，然后将混合物升温至25℃。添加PPh₃(1.26g，4.79mmol)并将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至30％)纯化，得到7-甲酰基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(550mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.35(s,1H),9.10(d,J＝4.4Hz,1H),8.33(s,1H),7.82(d,J＝4.4Hz,1H),4.02(s,3H)。

步骤2：7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

在0℃，向7-甲酰基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(550mg，2.49mmol)在二氯甲烷(DCM)(15mL)中的溶液中添加(二乙基氨基)三氟化硫(DAST)(602mg，3.74mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用水(0.5mL)淬灭并在减压下浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至30％)纯化，得到7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(350mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.89(d,J＝4.4Hz,1H),8.30(s,1H),7.48(d,J＝4.4Hz,1H),7.17-6.73(t,1H),4.01(s,3H)。

步骤3：7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

向7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(440mg，1.81mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加溶解在水(1mL)中的LiOH.H₂O(228mg，5.43mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物溶于水(10mL)中，并用EtOAc(10mL)洗涤，弃去有机层。用2N HCl(2mL)酸化水层，并收集沉淀，得到7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(320mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.94(d,J＝4.4Hz,1H),8.22(s,1H),7.73(d,J＝4.4Hz,1H),7.63-7.32(m,1H)。

步骤4：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(320mg，1.40mmol)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(511mg，1.40mmol，HCl盐)在DMF(8mL)中的溶液中添加O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(674mg，2.10mmol)和N,N-二异丙基乙胺(543mg，4.20mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用水(10mL)稀释，并且用EtOAc(10mL×3)萃取。将合并的有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，并在减压下浓缩。将残余物通过Combi Flash(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至60％)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(600mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.85(d,J＝4.4Hz,1H),7.90(s,1H),7.46(d,J＝4.4Hz,1H),7.39-7.27(m,10H),6.91(t,1H),6.05(br d,1H),5.22(s,2H),5.12(s,2H),4.68-4.59(m,1H),4.01-3.92(m,1H),3.91-3.82(m,1H)。

步骤5：(R)-2-氨基-3-[[7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的制备

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(200mg，0.37mmol)在33％HBr的AcOH(4mL)中的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法A)，得到(R)-2-氨基-3-(7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HCl盐(86mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.58(br t,J＝6.0Hz,1H),8.91(d,J＝4.8Hz,1H),8.66-8.58(m,3H),8.55(s,1H),7.69(d,J＝4.8Hz,1H),7.47(t,1H),4.22-4.12(m,1H),3.94-3.76(m,2H)。

LCMS(MH+):m/z＝316.2,t_R(min,方法BB)＝0.29,[α]²⁰D＝-6.5,(c＝2mg/mL,DMSO)。

化合物1d

(R)-2-氨基-3-[(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(500mg，2.46mmol)、环丙基硼酸(423mg，4.92mmol)和K₃PO₄(1.04g，4.92mmol)在二噁烷(10mL)和H₂O(2mL)中的混合物在N₂条件下搅拌。然后加入PdCl₂(dtbpf)(80mg，0.123mmol)，并将混合物在110℃下搅拌16小时。将混合物倒进水(15mL)中，用乙酸乙酯(20mL)萃取。丢弃有机相，用HCl水溶液(3M)调节水相的pH(4-5)，并浓缩以得到7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(700mg)。

步骤2：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(650mg，2.89mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(1.05g，2.89mmol，HCl盐)、N,N-二异丙基乙胺(1.12g，8.67mmol)和O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(1.39g，4.34mmol)在DMF(5mL)中的混合物在30℃下搅拌16小时。将混合物倒进水(20mL)中，并且用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过combiFlash(乙酸乙酯:石油醚＝0-50％)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(260mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.05(br,1H),8.60(d,1H),8.18(s,1H),7.89(br d,1H),7.36-7.22(m,10H),7.04(d,J＝5.2Hz,1H),5.11(d,J＝5.2Hz,2H),5.06(m,2H),4.47-4.42(m,1H),3.77-3.65(m,2H),2.10-2.18(m,1H),1.24-1.17(m,2H),1.05-0.96(m,2H)。

步骤3：(R)-2-氨基-3-[(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(80.0mg，0.15mmol)在HBr/AcOH(3mL，33％)中的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法B)，得到(R)-2-氨基-3-(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HCl盐(15mg)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ8.59-8.52(m,1H),8.09-8.02(m,1H),7.24-7.14(m,1H),4.21-4.12(m,1H),3.95(dd,1H),3.85(dd,1H),2.26(m,1H),1.45(dd,2H),1.24-1.14(m,2H)。

LCMS(MH+):m/z＝306.2,tR(min,方法BB)＝0.22。[α]²⁰D＝12.0(c＝0.25mg/mL,CH₃OH)。

化合物1e

(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(300mg，1.37mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(344mg，2.74mmol，0.4mL)、PdCl₂(dtbpf)(90mg，0.14mmol)和K₃PO₄(727mg，3.43mmol)在H₂O(4mL)和二噁烷(12mL)中的混合物在密封管中加热至80℃在N₂下持续16小时。将混合物过滤。用HCl(2M，4mL)将水相调节至pH＝3-4。浓缩混合物，得到7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(260mg)。将粗产物不经任何进一步纯化而用于下一步骤。

步骤2：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(260mg，1.35mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(491mg，1.35mmol，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(648mg，2.02mmol)和N,N-二异丙基乙胺(870mg，6.73mmol，1mL)在DMF(10mL)中的混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用H₂O(30mL)稀释，并且用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将有机相用盐水(10mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法C)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(280mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.61(d,1H),7.84(s,1H),7.39-7.25(m,11H),7.13(d,1H),6.11(m,1H),5.20(s,2H),5.10(s,2H),4.69-4.56(m,1H),4.01-3.80(m,2H),2.58(s,3H)。

步骤3：(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg，0.20mmol)和HBr/AcOH(3mL，33％)的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物用MTBE(3mL)和H₂O(3mL)稀释。将水相用MTBE(3mL×2)萃取。将水相冻干，得到(R)-2-氨基-3-(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(50mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.42(br s,1H),8.91-8.80(m,1H),8.54-8.32(m,4H),7.61(br s,1H),4.20-4.10(m,1H),3.90-3.69(m,2H),2.71(s,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝280.1,t_R(min,方法BB)＝0.17。

[α]²⁰D＝-11.0,(c＝1.0mg/mL,CH₃OH)。

化合物1f

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(300mg，1.37mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(230mg，1.37mmol)、PdCl₂(dtbpf)(10mg，0.01mmol)和K₂CO₃(189mg，1.37mmol)在二噁烷(25mL)和H₂O(5mL)中的混合物在100℃下搅拌16小时。将混合物倒进水(20mL)中，并且用乙酸乙酯(20mL)萃取。用HCl水溶液(3M)将水相调节至pH(4-5)，并用乙酸乙酯萃取(20mL×3次)。将合并的有机层用盐水(20mL x 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并且浓缩。获得产物7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(160mg)，并且不经进一步纯化而用于下一步骤。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.75(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.46(d,J＝4.8Hz,1H),5.71(s,1H),5.63(s,1H),2.23(s,3H)。

步骤2：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(150mg，0.69mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(225mg，0.62mmol，HCl盐)、N,N-二异丙基乙胺(442mg，3.42mmol)和O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(329mg，1.03mmol)在DMF(5mL)中的混合物在30℃下搅拌16小时。将混合物倒进水(10mL)中，并且用乙酸乙酯(10mL x 3次)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×3次)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法D)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(93mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.72(d,J＝4.8Hz,1H),7.82(s,1H),7.41-7.25(m,11H),5.73(s,1H),5.57(s,1H),5.22(s,2H),5.13(s,2H),4.70-4.60(m,1H),4.00-3.80(m,2H),2.27(s,3H)。

步骤3：(R)-2-氨基-3-[(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

在N₂下，向(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(丙-1-烯-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(90mg，0.170mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入Pd/C(10％Pd，50％水，100mg)。将悬浮液在真空下脱气并用H₂吹扫几次。将混合物在H₂(50psi)下在25℃搅拌16小时，过滤，并将滤液浓缩。将残余物转移至HBr/AcOH(2mL，33％)中，并在50℃下搅拌16小时。将混合物浓缩。将残余物用MTBE(5mL)洗涤并过滤，得到(R)-2-氨基-3-(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(25mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.26(br,1H),8.77(d,J＝4.8Hz,1H),8.44-8.35(m,2H),8.31(s,1H),7.49(d,J＝4.8Hz,1H),4.20-4.10(m,1H),3.88-3.72(m,2H),3.30-3.20(m,1H),1.38(d,J＝6.8Hz,6H)。

LCMS(MH+):m/z＝308,t_R(min,方法BB)＝0.28,[α]²⁰D＝-3.1(c＝0.96mg/mL,CH₃OH)。

化合物1g

(R)-2-氨基-3-[[7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[[7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

将在H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(1.0g，4.55mmol)、(2-乙基苯基)硼酸(1.16g，7.74mmol)、Na₂CO₃(1.45g，13.6mmol)和Pd(dppf)Cl₂(333mg，0.46mmol)脱气，并且然后在N₂下加热至110℃持续16小时。将混合物浓缩，并将残余物用H₂O(10mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。用HCl(2M，5mL)将水相调节至pH＝3-4。将沉淀物过滤并干燥，得到7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(700mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.86(d,1H),8.18(s,1H),7.51-7.47(m,2H),7.45(d,1H),7.40-7.36(m,1H),7.35-7.32(m,1H),2.45-2.43(m,2H),0.97(t,3H)

步骤2：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(200mg，0.71mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(258mg，0.71mmol，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(340mg，1.06mmol)和N,N-二异丙基乙胺(456mg，3.53mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用H₂O(30mL)稀释，并且用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将有机相用盐水(10mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法E)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(200mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.78(d,1H),7.89(s,1H),7.47-7.38(m,2H),7.36-7.25(m,12H),7.22(d,1H),7.08(br s,1H),5.97(br s,1H),5.19(s,2H),5.10(s,2H),4.60-4.59(m,1H),3.98-3.78(m,2H),2.55-2.42(m,2H),1.04(t,3H)。

步骤3：(R)-2-氨基-3-[[7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(60mg，0.10mmol)和HBr/AcOH(3mL，33％)的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物用MTBE(3mL)稀释，并且用MTBE(3mL×3)倾析。将沉淀物过滤。将滤饼干燥，得到(R)-2-氨基-3-(7-(2-乙基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(43mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.24-9.22(m,1H),8.87(d,1H),8.41-8.26(m,4H),7.54-7.44(m,3H),7.41-7.36(m,1H),7.35-7.30(m,1H),4.24-3.77(m,2H),3.74-3.69(m,1H),2.45-2.43(m,2H),0.96(t,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝370.1,t_R(min,方法BB)＝0.46,[α]²⁰D＝-6.67,(c＝1.5mg/mL,CH₃OH)。

化合物1h

(R)-2-氨基-3-[(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶

向MeOH(5.0mL)中添加Na(135mg，0.59mmol)。将混合物在室温搅拌1小时，并加入7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(200mg，1.18mmol)。将混合物在封闭的小瓶中在110℃-120℃下再搅拌15小时。将反应混合物在减压下浓缩，以得到化合物7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶(160mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.57(d,1H),7.67(d,1H),7.50(d,1H),6.70(d,1H),4.04(s,3H)。

步骤2：7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

在-78℃下向7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶(150mg，0.90mmol)在THF(15mL)中的溶液中添加n-BuLi(己烷中2.5M，0.5mL)。将混合物在-78℃下搅拌0.5小时。将CO₂鼓泡到溶液中持续0.5小时。将混合物升温至室温并且再搅拌15小时。在减压下浓缩反应混合物以除去溶剂。将残余物用水(20mL)和HCl(2M，至pH约5)稀释，过滤，并将滤饼在减压下浓缩，得到7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(120mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.56(br,1H),7.86(s,1H),7.04(br,1H),4.01(s,3H)。

步骤3：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(120mg，0.57mmol)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(207mg，0.63mmol，HCl盐)在DMF(5mL)中的溶液中添加O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(276mg，0.86mmol)和N,N-二异丙基乙胺(370mg，2.87mmol)。将混合物在20℃-30℃下搅拌16小时。将残余物用水(20mL)稀释，并且用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(0-100％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(48mg)。

步骤4：(R)-2-氨基-3-[(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(125mg，0.24mol)在HBr/AcOH(5mL，约33％)中的溶液在50℃搅拌16小时。在减压下浓缩反应混合物以去除溶剂，得到化合物(R)-2-氨基-3-(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(100mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.52(t,1H),9.00(d,1H),8.40-8.30(m,4H),7.52(d,1H),4.22(s,3H),4.15-4.13(m,1H),3.84-3.72(m,2H)。

LCMS(MH+):m/z＝296.2,t_R(min,方法BB)＝0.28,[α]20D＝-1.45,(c＝2.75g/mL,CH₃OH)。

化合物1i

(R)-2-氨基-3-[[7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[[7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-碘噻吩并[3,2-b]吡啶

在130℃下将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(1.00g，5.90mmol)在HI(10mL，45％在水中)中的溶液搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用饱和Na₂CO₃水溶液小心淬灭至pH＝6-7，并用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥、并且浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚/EtOAc，其中EtOAc从5％至10％)纯化，得到7-碘噻吩并[3,2-b]吡啶(1.2g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.85-7.77(m,2H),7.66(d,J＝5.2Hz,1H)。

步骤2：7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶

向7-碘噻吩并[3,2-b]吡啶(500mg，1.92mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入CuI(401mg，2.11mmol)、KF(334mg，5.75mmol)和TMSCF₃(327mg，2.30mmol)。将反应混合物在80℃搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)淬灭并且用EtOAc(3×10mL)进行萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过CombiFlash(石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0％至3％)纯化，得到7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶(140mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.87(d,J＝4.4Hz,1H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),7.68(d,J＝5.6Hz,1H),7.52(d,J＝4.8Hz,1H)。

步骤3：7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

将7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶(120mg，0.59mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至-78℃，并用n-BuLi(2.5M己烷溶液，0.5ml，1.25mmol)逐滴处理并在-78℃下搅拌30分钟。将CO₂鼓泡通过反应混合物，并在-78℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10mL)淬灭并且用EtOAc(3×10mL)进行萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(70mg)。

步骤4：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(130mg，0.52mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(192mg，0.52mmol，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(253mg，0.79mmol)和N,N-二异丙基乙胺(203mg，1.58mmol)。将反应混合物在25℃搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)淬灭并且用EtOAc(3×10mL)进行萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物进一步通过制备型HPLC纯化(方法F)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(50mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.91(d,J＝4.8Hz,1H),7.88(s,1H),7.58(d,J＝4.4Hz,1H),7.40-7.28(m,10H),5.93(d,J＝6.8Hz,1H),5.27(s,2H),5.13(s,2H),4.66-4.60(m,1H),4.05-3.92(m,1H),3.88-3.77(m,1H)。

步骤5：(R)-2-氨基-3-[[7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(50mg，0.90mmol)在HBr/AcOH(2mL，33％)中的溶液在50℃搅拌16小时。在减压下除去溶剂。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法G)，得到(R)-2-氨基-3-(7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HCl盐(8mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.69(br,1H),9.02(d,J＝3.6Hz,1H),8.63(br,4H),7.93(d,J＝4.0Hz,1H),4.20-4.10(m,1H),3.79-3.77(m,2H)。

LCMS(MH+):m/z＝334.1,t_R(min,方法BB)＝0.36min。

[α]²⁰D＝-10.0(c＝1.0mg/mL,CH₃OH)。

化合物1j

(R)-2-氨基-3-[(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

在80℃下，将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(300mg，1.37mmol)和NaOEt(372mg，5.47mmol)在EtOH(20mL)中的混合物搅拌16小时。将混合物倒入水(20mL)中，用HCl水溶液(3M)调节pH(3-4)，并且用乙酸乙酯(15mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(15mL×3)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(300mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.45(d,J＝5.2Hz,1H),7.60(d,J＝6.4Hz,1H),6.93(d,J＝5.2Hz,1H),4.29(q,J＝6.8Hz,2H),1.39(t,J＝6.8Hz,3H)。

步骤2：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(250mg，1.12mmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(368mg，1.01mmol，HCl盐)、N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)(434mg，3.36mmol)和O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)(539mg，1.68mmol)在DMF(5mL)中的混合物在30℃下搅拌16小时。将混合物倒进水(10mL)中，并且用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过combiFlash(乙酸乙酯:石油醚＝0-75％)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(120mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.58(d,J＝5.2Hz,1H),7.77(s,1H),7.39-7.27(m,10H),7.11(br,1H),6.73(d,J＝5.2Hz,1H),5.99(br,1H),5.21(s,2H),5.12(s,2H),4.70-4.62(m,1H),4.31(q,J＝7.2Hz,2H),3.95-3.80(m,2H),1.54(t,J＝7.2Hz,3H)。

步骤3：(R)-2-氨基-3-[(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(70mg，0.131mmol)在HBr/AcOH(2mL，33％)中的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物用10mL甲基叔丁基醚:甲醇(V:V 10:1)洗涤，然后过滤。将过滤的残余物溶于水(5mL)中并冻干，得到(R)-2-氨基-3-(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(35mg)。

1H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.93(d,J＝6.8Hz,1H),8.37(s,1H),7.60(d,J＝6.8Hz,1H),4.70(q,J＝7.2Hz,2H),4.38-4.32(m,1H),4.10(dd,J＝14.8,4.0Hz,1H),3.94(dd,J＝14.7,6.7Hz,1H),1.63(t,J＝6.8Hz,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝310.2,t_R(min,方法BB)＝0.18。

[α]²⁰D＝-5.7(c＝0.7mg/mL,CH₃OH)。

化合物1k

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶

向丙-2-醇(15mL)中添加Na(339mg，15mmol)。将混合物在50℃搅拌1小时，并加入7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(500mg，2.95mmol)。将混合物在封闭的小瓶中在110℃-120℃下再搅拌15小时。将反应混合物在减压下浓缩，以得到7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶(320mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.51(d,J＝5.6Hz,1H),7.66(d,J＝5.6Hz,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),6.70(d,J＝5.6Hz,1H),4.84-4.81(m,1H),1.37(d,J＝6.0Hz,6H)。

步骤2：7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

在-78℃下向7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶(320mg，1.7mmol)在THF(15mL)中的溶液中添加n-BuLi(己烷中2.5M，0.9mL)。将混合物在-78℃下搅拌0.5小时。将CO₂鼓泡到溶液中持续0.5小时。将混合物在20℃-30℃下再搅拌15小时。在减压下浓缩反应混合物以除去溶剂。用水(20mL)稀释残余物，并使用HCl(2M)将pH调节至pH约5。过滤混合物，并将滤饼在减压下干燥，得到7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(210mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.58(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.11(d,J＝5.4Hz,1H),4.93-4.99(m,1H),1.37(d,J＝6.0Hz,6H)。

步骤3：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯的制备

向7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(200mg，0.84mmol)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(304mg，0.93mmol，HCl盐)在DMF(10mL)中的溶液中添加O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(406mg，1.3mmol)和N,N-二异丙基乙胺(545mg，4.2mmol)。将混合物在20℃-30℃下搅拌16小时。将残余物用水(20mL)稀释，并且用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出残余物。将残余物通过快速硅胶色谱法(0-90％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化，得到化合物(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(86mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.56(d,J＝5.2Hz,1H),7.76(s,1H),7.38-7.27(m,10H),7.09(br,1H),6.72(d,J＝5.6Hz,1H),5.99(d,J＝7.2Hz,1H),5.20(s,2H),5.11(s,2H),4.85-4.85(m,1H),4.65-4.55(m,1H),3.97-3.80(m,2H),1.47(d,J＝5.6Hz,6H)。

步骤4：(R)-2-氨基-3-[(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(80mg，0.15mmol)在HBr/AcOH(10mL，33％)中的溶液在50℃搅拌16小时。在减压下浓缩反应混合物以除去溶剂。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法H)，得到(R)-2-氨基-3-(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸(26mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.06(br,1H),8.54(d,J＝5.2Hz,1H),8.10(s,1H),7.57(br,2H),7.08(d,J＝5.2Hz,1H),5.02-4.90(m,1H),3.69-3.65(m,1H),3.55-3.40(m,2H),1.36(d,J＝6.0Hz,6H)。

LCMS(MH+):m/z＝324.2,t_R(min,方法BB)＝0.24。

[α]²⁰D＝18(c＝1mg/mL,CH₃OH)。

化合物1l

(R)-2-氨基-3-[(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶

将噻吩并[3,2-b]吡啶-7-醇(2g，13mmol)和POBr₃(25g，8mmol)的混合物在110℃加热2小时。将混合物冷却并加入冰水(100mL)中，然后加入2M NaOH溶液以将pH调节至8。将混合物用EtOAc(40mL×3)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至30％)，得到7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶(2.5g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.51(d,J＝4.8Hz,1H),7.82(d,J＝6.0Hz,1H),7.66(d,J＝5.6Hz,1H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H)。

步骤2：7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂

在-70℃下向二异丙胺(473mg，4.67mmol)在THF(20mL)中的溶液中滴加n-BuLi(己烷中2.5M，1.87mL)。将溶液在-70℃下搅拌30min。然后滴加溶于THF(5mL)中的7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶(1g，4.67mmol)，并在-70℃下搅拌30min。然后将气态二氧化碳鼓泡通过反应溶液，并使混合物在2小时内升温至25℃。将该混合物过滤并将滤饼用THF(10mL×2)洗涤。收集固体并干燥，得到7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(800mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.68(s,1H),7.62(d,J＝5.2Hz,1H)。

步骤3：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(200mg，0.76mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(268mg，0.83mmol)、N,N-二异丙基乙胺(196mg，1.52mmol)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(276mg，0.76mmol，HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用水(15mL)稀释并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至80％)两次，得到化合物(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(190mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.54(d,J＝4.8Hz,1H),7.88(s,1H),7.51(d,J＝5.2Hz,1H),7.38-7.24(m,11H),6.05(br d,J＝6.8Hz,1H),5.22(s,2H),5.16-5.08(m,2H),4.68-4.57(m,1H),4.00-3.82(m,2H)。

步骤4：(R)-2-氨基-3-[(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg，0.18mmol)在30％HBr在AcOH(3mL)中的混合物在25℃搅拌16小时。将混合物浓缩。向残余物中添加水(5mL)并用MTBE(5mL×2)洗涤。将水层冻干，得到(R)-2-氨基-3-(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(75mg)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ9.28(t,J＝5.6Hz,1H),8.64(d,J＝4.8Hz,1H),8.41(s,1H),8.36(br d,J＝4.0Hz,3H),7.84(d,J＝4.8Hz,1H),4.19-4.12(m,1H),3.88-3.80(m,1H),3.77-3.69(m,1H)。

LCMS(MH+):m/z＝343.9,t_R(min,方法BB)＝0.34。

[α]²⁰D＝-4.8(c＝3.2mg/mL,CH₃OH)。

化合物1m

(R)-2-氨基-3-[(7-羟基甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(7-羟基甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲腈

在N₂气氛下，向7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(5g，29.48mmol)和Zn(CN)₂(3.77g，32.1mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂(dba)₃)(2.70g，2.95mmol)、Pd(dppf)Cl₂(2.16g，2.95mmol)和Zn粉(385mg，5.90mmol)。将混合物在120℃下搅拌2小时。将混合物用EtOAc(80mL)和水(50mL)稀释，并通过硅藻土(Celite)过滤。将滤液用EtOAc(60mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×3)洗涤，并且浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至20％)，得到化合物噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲腈(2.8g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.85(d,J＝4.8Hz,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),7.68(d,J＝5.6Hz,1H),7.54(d,J＝4.8Hz,1H)。

步骤2：噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲酸甲酯

将噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲腈(2.8g，17.5mmol)在HCl/MeOH(4M，50mL)中的混合物在70℃下搅拌16小时。将混合物浓缩。向残余物中添加水(10mL)，并用2N NaOH水溶液将pH调节至8。将混合物用EtOAc(30mL×3)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至35％)，得到化合物噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲酸甲酯(2.7g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.84(d,J＝4.8Hz,1H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),7.86(d,J＝4.8Hz,1H),7.63(d,J＝5.6Hz,1H),4.07(s,3H)。

步骤3：噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基甲醇

向噻吩并[3,2-b]吡啶-7-甲酸甲酯(2.7g，14mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中添加NaBH₄(793mg，21mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物浓缩。向残余物中添加水(20mL)并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基甲醇(2.1g)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ8.62(d,J＝4.4Hz,1H),8.10(d,J＝5.6Hz,1H),7.57(d,J＝6.0Hz,1H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),5.77(t,J＝5.6Hz,1H),4.82(d,J＝5.6Hz,2H)。

步骤4：7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂

在-70℃下向噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基甲醇(500mg，3.03mmol)在THF(20mL)中的溶液中滴加n-BuLi(己烷中2.5M，2.4mL)，并在-70℃下搅拌30min。然后将气态二氧化碳(15psi)鼓泡通过反应溶液持续30min，并使混合物在2小时内升温至25℃。将该混合物过滤并将滤饼用THF(10mL×2)洗涤。收集固体并干燥，得到7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(700mg)。

步骤5：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸锂(200mg，粗品)在DMF(10mL)中的溶液中加入O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(448mg，1.39mmol)、N,N-二异丙基乙胺(360mg，2.79mmol)和(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(339mg，0.93mmol，HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用水(15mL)稀释并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(DCM:MeOH，其中MeOH从0至10％)，得到200mg粗产物。将粗产物进一步通过制备型HPLC纯化(方法J)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.01(br t,J＝5.6Hz,1H),8.69(d,J＝4.8Hz,1H),8.16(s,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(d,J＝4.8Hz,1H),7.36-7.22(m,10H),5.86(t,J＝5.6Hz,1H),5.15-5.00(m,4H),4.83(d,J＝5.2Hz,2H),4.48-4.37(m,1H),3.76-3.58(m,2H)。

步骤6：(R)-2-氨基-3-[(7-羟基甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(60mg，0.12mmol)在12M HCl水溶液(12M，4mL)中的混合物在80℃搅拌2小时。将混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(方法K)，得到化合物(R)-2-氨基-3-(7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HCl盐(18mg)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ8.82(d,J＝6.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.85(d,J＝6.0Hz,1H),5.22(s,2H),4.18-4.14(m,1H),4.06-3.99(m,1H),3.94-3.86(m,1H)。

LCMS(MH+):m/z＝296.1,t_R(min,方法BB)＝0.26。

[α]²⁰D＝5.0(c＝1.2mg/mL,CH₃OH)。

化合物1n

(R)-2-氨基-3-[[7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[[7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

向(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(羟基甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg，0.19mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入DAST(62mg，0.38mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应用水(1mL)淬灭并浓缩。向残余物中加入水(10mL)，用2NNaOH溶液将pH调节至8，并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至100％)，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(25mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.80(s,1H),8.02(s,1H),7.43-7.30(m,12H),6.11(br d,J＝6.4Hz,1H),5.71(d,J＝46.4Hz,2H),5.23(s,2H),5.13(s,2H),4.69-4.61(m,1H),4.00-3.96(m,2H)。

步骤2：(R)-2-氨基-3-[[7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(25mg，0.05mmol)在30％HBr的AcOH(3mL)中的混合物在50℃搅拌3小时。将混合物浓缩。将残余物通过制备型-HPLC纯化(方法L)，得到化合物(R)-2-氨基-3-(7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HCl盐(9mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ9.44(t,J＝6.0Hz,1H),8.80(d,J＝4.8Hz,1H),8.54(brd,J＝3.6Hz,3H),8.44(s,1H),7.51(d,J＝4.4Hz,1H),5.87(d,J＝46.0Hz,2H),4.20-4.11(m,1H),3.86-3.80(m,2H)。

LCMS(MH+):m/z＝298.1,t_R(min,方法BB)＝0.26。

化合物1o

(R)-2-氨基-3-[(6-氟-7-甲基-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(6-氟-7-甲基-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：3,5-二氟-4-碘吡啶-2-甲腈

在-78℃下向二异丙胺(4.30g，42mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加n-BuLi(17mL，己烷中2.5M)，并将反应在-78℃下搅拌0.5小时。在-78℃下加入3,5-二氟吡啶-2-甲腈(5g，36mmol)在THF(50mL)中的溶液，并将反应混合物在-78℃下搅拌0.5小时。在-78℃下分批添加I₂(9.51g，37.5mmol)，并将所得混合物在-78℃下搅拌1小时。添加H₂O(50mL)以淬灭反应，并且将混合物用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过Combi flash纯化(硅胶，石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0-30％)，得到3,5-二氟-4-碘吡啶-2-甲腈(4.5g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.28(s,1H)。

步骤2：3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲腈

将3,5-二氟-4-碘吡啶-2-甲腈(2g，7.52mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(5.39g，42.92mmol)、Pd(dppf)Cl₂·CH₂Cl₂(1.84g，2.26mmol)和K₃PO₄(3.20g，15.08mmol)在二噁烷(10mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，然后将混合物在N₂气氛下在120℃搅拌10小时。添加H₂O(10ml)，并且将混合物用EtOAc(15mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过Combi flash纯化(硅胶，石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0至20％)，得到900mg粗产物。将粗产物通过制备型HPLC进一步纯化(方法I)，得到3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲腈(270mg)。

步骤3：3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲醛

在-20℃下向3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲腈(270mg，1.75mmol)在THF(10mL)中的搅拌的溶液中加入氢化二异丁基铝(DIBAL-H)(2.30mL，1M在甲苯中，2.30mmol)，并且将混合物在-20℃下搅拌1小时。加入H₂O(10mL)以淬灭反应，并加入1N HCl以将pH调节至5-6。将反应混合物用EtOAc(15mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲醛(270mg)。

步骤4：6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

向3,5-二氟-4-甲基吡啶-2-甲醛(270mg，粗品)在DMF(5mL)中的溶液中缓慢加入TEA(349mg，3.45mmol)和2-巯基乙酸甲酯(300mg，2.83mmol)，并将混合物在100℃下搅拌3小时。添加H₂O(5ml)，并用EtOAc(5mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过Combi flash纯化(硅胶，石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0至50％)，得到粗化合物(200mg)。将粗化合物通过制备型HPLC进一步纯化(方法M)，得到6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(40mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.59(s,1H),8.20(d,J＝1.2Hz,1H),3.99(s,3H),2.55(s,3H)。

步骤4：6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

向6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(40mg，177.59μmol)在MeOH(4mL)中的溶液中添加LiOH.H₂O(22mg，524.26μmol)在H₂O(1mL)中的溶液，并且将所得混合物在30℃下搅拌2小时。将溶剂除去。添加H₂O(2mL)，用饱和KHSO₄溶液酸化至pH 3-4，并用EtOAc(10mL×5)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(25mg，67％产率)。

LC-MS:t_R＝1.267min,m/z＝212.0[M+H]⁺。

步骤5：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(25mg，118μmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(52mg，142μmol，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(57mg，177μmol)和N,N-二异丙基乙胺(31mg，241μmol)在DMF(2mL)中的混合物在30℃下搅拌4小时。添加H₂O(2ml)以淬灭反应，并用EtOAc(5mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，乙酸乙酯:石油醚＝1:1)纯化，得到(R)-苄基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(25mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.53(s,1H),7.78(s,1H),7.40-7.27(m,10H),6.08(br d,J＝5.6Hz,1H),5.30(s,1H),5.21(s,2H),5.11(s,2H),4.69-4.55(m,1H),3.92-3.85(m,2H),2.52(s,3H)。

步骤6：(R)-2-氨基-3-[(6-氟-7-甲基-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(25mg，48μmol)在AcOH(2mL)中的33％HBr的混合物在50℃搅拌16小时。将溶剂除去。将残余物用TBME(5mL×3)洗涤，将固体过滤，并通过冻干除去残余溶剂，得到(R)-2-氨基-3-(6-氟-7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(16mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ9.18(t,J＝5.6Hz,1H),8.71(d,J＝1.6Hz,1H),8.41-8.26(m,3H),8.26(s,1H),4.21-4.09(m 1H),3.86-3.78(m,1H),3.76-3.67(m,1H),2.50(s,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝298,t_R(min,方法BB)＝0.34。

[α]²⁰D＝-16.00(c＝2mg/mL,MeOH)。

化合物1p

(R)-2-氨基-3-[(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

制备(R)-2-氨基-3-[(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸的整体合成方案如下所示。

步骤1：2-氯-3-氟-4-碘-5-甲基吡啶

在-78℃下向二异丙胺(5.8mL，41mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加n-BuLi(17.5mL，己烷中2.5M)，并将反应在-78℃下搅拌1小时。在-78℃下滴加2-氯-3-氟-5-甲基吡啶(5.00g，34.4mmol)在THF(50mL)中的溶液，并将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。在-78℃下分批添加I₂(9.50g，37.4mmol)，并将所得混合物在-78℃下搅拌1小时。加入饱和NH₄Cl(20ml)以淬灭反应，然后在0℃下加入H₂O(50mL)，并用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL×2)、饱和Na₂S₂O₃溶液(100mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到2-氯-3-氟-4-碘-5-甲基-吡啶(8.2g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.97(s,1H),2.47(s,3H)。

步骤2：2-氯-3-氟-4,5-二甲基吡啶

将2-氯-3-氟-4-碘-5-甲基吡啶(4.20g，15.5mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(4.27g，34.0mmol)、K₂CO₃(4.28g，30.9mmol)和pd(dtbpf)Cl₂(1.01g，1.55mmol)在二噁烷(10mL)中的混合物通过用N₂吹扫进行脱气，然后将混合物在N₂下在80℃搅拌16小时。然后加入另外的2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(4.27g，34.0mmol)，并将所得混合物在80℃下再搅拌16小时。添加水(20ml)以淬灭反应，并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过Combi flash纯化(硅胶，石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0-10％)，得到2-氯-3-氟-4,5-二甲基吡啶(1.2g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.95(s,1H),2.22-2.27(m,6H)。

步骤3：3-氟-4,5-二甲基-2-乙烯基吡啶

将2-氯-3-氟-4,5-二甲基吡啶(1.70g，10.7mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.46g，15.9mmol)、Pd(dppf)Cl₂(780mg，1.07mmol)和K₂CO₃(2.94g，21.3mmol)在二噁烷(80mL)和H₂O(8mL)中的混合物通过用N₂吹扫进行脱气，然后将混合物在N₂气氛下在80℃搅拌16小时。添加H₂O(50ml)，并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过Combi flash纯化(硅胶，石油醚/EtOAc，其中EtOAc从0至30％)，得到3-氟-4,5-二甲基-2-乙烯基吡啶(1.0g)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.10(s,1H),7.04-6.82(m,1H),6.31(dd,J＝2.0Hz,17.6Hz,1H),5.48(dd,J＝2.0Hz,11.2Hz,1H),2.4(s,3H),2.18(d,J＝2.0Hz,3H)。

步骤4：3-氟-4,5-二甲基吡啶-2-甲醛

在-70℃下，将臭氧(15psi)鼓泡通过3-氟-4,5-二甲基-2-乙烯基吡啶(1.00g，6.61mmol)在DCM(200mL)中的溶液持续15min。然后在-70℃添加PPh₃(2.08g，7.94mmol)并将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，保持温度低于40℃，并且将所得残余物通过硅胶上的Combi Flash纯化(石油醚:EtOAc，其中EtOAc从0至50％)，得到3-氟-4,5-二甲基吡啶-2-甲醛(600mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.16(s,1H),8.37(s,1H),2.39(s,3H),2.30(s,3H)。

步骤5：6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯

向3-氟-4,5-二甲基吡啶-2-甲醛(550mg，3.59mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入TEA(1mL，7.18mmol)，并在25℃搅拌30min，然后缓慢加入2-巯基乙酸甲酯(460mg，4.33mmol)。将混合物在100℃下搅拌3小时。添加H₂O(10ml)以淬灭反应，并且将混合物用EtOAc(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(10mL×2)，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(800mg)，将其无需进一步纯化即使用。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.53(s,1H),8.18(s,1H),3.97(s,3H),2.52(s,3H),2.43(s,3H)。

步骤6：6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸

向6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(400mg，粗品)在MeOH(8mL)中的溶液中添加LiOH^.H₂O(160mg，3.81mmol)在H₂O(2mL)中的溶液，并且将所得混合物在25℃搅拌1小时。将混合物浓缩，并加入水(5mL)，然后用EtOAc(5mL×2)萃取。丢弃有机层，并用饱和KHSO₄溶液将水层酸化至pH 3。将固体过滤并干燥，得到6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(140mg)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.60(brs,1H),8.55(s,1H),8.05(s,1H),2.50(s,3H),2.39(s,3H)。

步骤7：(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯

将6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(70mg，338μmol)、(R)-3-氨基-2-(((苄氧基)羰基)氨基)丙酸苄酯(148mg，406μmol，HCl盐)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(163mg，508μmol)和N,N-二异丙基乙胺(88.0mg，677μmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃下搅拌16小时。添加H₂O(5ml)以淬灭反应，并用EtOAc(5mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，乙酸乙酯:石油醚＝2:1)纯化，得到(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.50(s,1H),7.77(s,1H),7.42-7.28(m,10H),7.08(br s,1H),6.01(d,J＝6.4Hz,1H),5.22(s,2H),5.12(s,2H),4.63(d,J＝3.6Hz,1H),4.00-3.81(m,2H),2.51(s,3H),2.42(s,3H)。

步骤8：(R)-2-氨基-3-[(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸

将(R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸苄酯(100mg，193μmol)在33％HBr在AcOH(5mL)中的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物浓缩。将固体悬浮于AcOH(5mL)中，过滤，并用另外的AcOH(1mL×2)洗涤。通过冻干除去溶剂，得到(R)-2-氨基-3-(6,7-二甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-甲酰胺基)丙酸HBr盐(77mg)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ9.27(t,J＝5.2Hz,1H),8.69(s,1H),8.29-8.41(m,3H),8.27(s,1H),4.11-4.22(m,1H),3.72-3.84(m,2H),2.58(s,3H),2.44(s,3H)。

LCMS(MH+):m/z＝294.2,t_R(min,方法BB)＝0.24。

[α]²⁰D＝-3.00(c＝6mg/mL,MeOH)。

e.本发明的化合物的体外和体内表征。

实例1：本发明的例示性化合物的亲和力数据

闪烁亲近测定法(SPA)：

为了确定本发明的化合物的亲和力，使用SPA。该测定法以384孔板形式(OptiPlate-384)进行，其中每个孔包含5μL测试化合物、5μL NR1s1s2(NMDA受体的配体结合域，MW 35.6kDa，最终0.075ug/孔)、5μL[³H]-MDL-105,519(甘氨酸位点的放射性标记的、高亲和力N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)谷氨酸受体拮抗剂，终浓度5nM，Kd＝1.3nM)、5μL链霉亲和素包被的成像珠(珀金埃尔默公司(Perkin Elmer)目录号：RPNQ0273，8ug/孔)的混合物。在超纯水中，测定缓冲液包含pH值为7.4的100mM HEPES-NaOH、150mM NaCl、1mM EDTA、10％甘油。通过包含10μM L-689,560(高效NMDA拮抗剂)和1％DMSO的总结合来定义非特异性结合。在黑暗中孵育30分钟(摇床，Multi-microplate Genie(微孔板混匀器))后，将SPA珠静置3小时，然后在Viewlux仪器(珀金埃尔默公司)上读取信号。归一化数据用于计算Ki值。

表2：本发明所述化合物的SPA Ki值(nm)

实例	SPA Ki(nM)
		1a	7400
1b	270
		1c	170
1d	140
		1e	96
1f	220
		1g	860
1h	690
		1i	360
1j	870
		1k	220
1l	63
		1m	3900
1n	180
		1o	260
1p	490

表2显示具有式V的化合物对NMDA受体的甘氨酸位点具有亲和力。

实例2：体内暴露数据

体内程序：

在雄性斯普拉-道来(Sprague Dawley)大鼠(标准体重范围)中评估了测试化合物的大脑处置。简而言之，通过静脉推注(以10％羟丙基-β-环糊精或10-20％的Captisol配制，pH＝3)施用散装(标称剂量：2mg/kg，2ml/kg)或盒装(标称剂量：1mg/kg/化合物，2ml/kg)测试化合物。

样品收集：

在指定的时间点(每个时间点n＝3)从侧尾静脉采集连续血液样品，然后在取出大脑之前将大鼠置于深异氟烷诱导的麻醉下(每个时间点n＝3)。将血液收集到涂有K3-EDTA的试管中，然后将样品轻轻倒置以确保样品均一。在最高4℃的条件下，将试管以3300x g离心10分钟，并且将血浆样品转移到微管(Micronic tube)中。处死动物后，解剖脑样品，将其略微“蘸”在滤纸上以去除外部的血液溢出，然后转移到Covaris AFA管中。将血浆和脑样品保存在-80℃直至分析。

样品制备：

在血浆和脑匀浆中分别制备了七个校准标样和三个QC样品，浓度范围为10-10000ng/mL。制备空白样品(带有内标的对照基质)并按与校准标样相同的方式处理。在分析之前，使用Covaris聚焦超声仪将脑样品与milliQ水1:4(w/v)匀浆。用空白基质稀释预期浓度高于定量上限的研究样品。

随后使用相同的提取程序处理研究样品、校准标样、质量对照品和空白样品的脑匀浆和血浆，即通过向25μL样品中加入150μL内标乙腈(甲苯磺丁脲(Tolbutamide))进行蛋白质沉淀。离心样品，并将每个样品的上清液用水按1:1稀释，以降低有机溶剂的含量。

LC-MS/MS：

使用AB Sciex API4000三重四极杆(TQ)质谱仪以正电和负电喷雾电离和MS/MS模式(多反应监测，MRM)操作分析样品。质谱仪连接到配备有Waters Acquity UPLC HSS C18SB(1.7μm，30mm x 2.1mm)分析柱的Waters Acquity UPLC。色谱分离是通过3分钟的梯度完成的，从98％的流动相A(0.1％的甲酸水溶液)和2％的流动相B(0.1％的乙腈甲酸)增加到95％的流动相B。流速为0.6mL/min，并且柱温为40℃。MRM转变(m/z)如下：380→248、350→263，甲苯磺丁脲：269→106(负)和271→155(正)。通过线性回归，1/x2加权进行定量。

下表3显示了血脑沉积数据。

表3：本发明所述化合物的血脑沉积数据

结论。结果显示，静脉内给药后实现了测试化合物的脑暴露。

实例3：大鼠的静息状态脑电图(rsEEG)

在手术当天，将大鼠(270-300g)用0.25ml/100g皮下注射(SC)1:1Hypnorm/速眠安(Dormicum)麻醉，并固定在带有钝耳棒的立体定位仪(大卫·科普夫仪器公司(David KopfInstruments)，图洪加(Tujunga)，加利福尼亚州，美国)中。在头皮下注射麻卡因(0.2mlSC)，并在眼睛上涂凝胶(Neutral Opthta Eye Gel)以防止粘膜变干。在颅骨中开孔，以允许在内侧前额叶皮质(mPFC)(AP：距前囟缝合线3.0mm，ML：距矢状缝合线-0.7mm以及DV：距硬脑膜3.0mm)、伏隔核(NAc)：(AP距前囟缝合线+1.6mm，ML：距矢状缝合线-1.0mm，DV：距硬脑膜-6.7mm)和丘脑(AP：距前囟缝合线-2.8mm，ML：距矢状缝合线+0.7mm，以及DV：距硬脑膜4.4mm)中放置三个深度电极(E363系列；PlasticsOne，美国弗吉尼亚州罗阿诺克(Roanoke,VA,USA))；和在听皮质(A1)之上的三个螺旋电极(AP：距前囟缝合线-4.8mm，ML：距矢状缝合线+6.4mm)，参比电极(AP：+8.0mm和ML：-2.0mm)和接地电极(AP：-5mm，ML：+5mm)。在手术期间，将指甲切开以防止大鼠在手术后刮伤伤口。手术完成后，将大鼠置于加热灯下直至意识恢复(最多4小时)。将浸泡过水的食物颗粒放在饲养笼中，这样大鼠就可以轻松快捷地开始喂食。提供了额外的麦片，以帮助恢复。大鼠用Norodyl和Noromox治疗共计5天，并在术后10-14天的恢复期内密切观察。每天记录动物体重。没有大鼠的体重减轻超过手术前体重的10％。7-10天后移除缝合线。在实验结束时，在所有记录电极上进行电损伤，并切开大脑以进行显微镜观察，检查电极位置。深度和螺旋电极阻抗之间的差异通过调查相对功率变化来解决，而共模噪声源从在屏蔽盒中进行记录得以减少，并且从分析中排除了约50、100和150Hz的功率估计。

每天处理大鼠，并使大鼠在记录阶段的一周前习惯于记录盒。在明/暗周期的暗阶段进行记录。在上午8点，将大鼠(400-500g)分别转移到放置在电屏蔽隔音盒(90cm宽，55cm深，65cm高)中的丙烯酸室(30cm宽，45cm深，55cm高)中，并且将它们拴在悬挂在旋转转环上的六针电线上，以便其在记录盒内自由移动。有一个2小时的适应期，随后是45分钟的基线记录，然后在大鼠中皮下注射10％的Captisol(溶媒)，20mg/kg的化合物1e或在盒子中再放置两个小时。大鼠每周只进行一次记录，记录之间至少要间隔六天，以清除化合物。对LFP/ECoG模拟信号进行放大并在0.01-300Hz处进行带通滤波(精度模型(Precision Model)440；布朗利(Brownlee)，帕洛阿尔托，加利福尼亚州，美国)，并以1kHz的采样率转换为数字信号(CED Power 1401，电源1(625kHz，16位)和CED扩展ADC16；CED，剑桥，英国)。视频记录在EthoVision中进行处理。运动行为的分析基于记录的加速度计信号。验证加速度计信号阈值以检测运动活动(活跃)和不活动(不活跃)的时间段。

使用sigTOOL工具箱中的函数在MATLAB R2017a(美国马萨诸塞州纳蒂克市的MathWorks公司(The MathWorks,Inc.,Natick,MA,USA))中开发了运动状态检测算法和状态特定的药学-EEG分析。

如图1所示，与溶媒(10％Captisol)相比，全身施用化合物1e(20mg/kg，i.v.)对伏隔核中的高频振荡(HFO)显示出明显的作用。

实例4：大鼠的微透析

使用最初体重为275-300g的雄性斯普拉-道来大鼠。这些动物是在可控制的条件下于正常室内温度(21±2℃)和湿度(55±5％)的条件下，在12小时的明/暗循环中畜养的，并随意提供食物和自来水。

用hypnorm/速眠安(2ml/kg)麻醉大鼠并且将脑内导向套管。

(CMA/12)立体定位植入大脑，旨在将透析探针尖端定位在腹侧海马中(坐标：前囟后5.6mm，侧面-4.8mm，腹侧至硬脑膜7.0mm)。固定螺栓和丙烯酸接合剂被用于固定导向套管。通过直肠探针监测动物的体温并保持在37℃。使大鼠从手术中恢复2天，将它们单独地关在笼子里。

实验当天，将微透析探针(CMA/12，直径0.5mm，长度3mm)插入导向套管。探针通过双通道旋转接头连接到微注射泵。在将探针插入大脑之前不久，开始使用过滤的林格液(145mm NaCl，3mM KCl，1mM MgCl2、1.2mM CaCl2)灌注微透析探针，并以1μl/min的恒定流速继续进行实验。稳定180分钟后，开始实验。在4℃下，每20分钟将透析液收集到含三氟乙酸(最终浓度为0.25％)的聚苯乙烯微瓶中。实验后，处死动物并移除大脑，并验证探针的位置。

通过使用浓度为1000ng/ml的化合物1e的储备溶液确定探针的体外回收。在室温下进行实验。对于每种化合物，将三个微透析探针(CMA/3)插入装有储备溶液的试管中。在将探针插入储备溶液之前不久，开始使用过滤的林格氏溶液灌注微透析探针，并以1μl/min的恒定流速继续进行实验。稳定60分钟后，每个探针采样3个连续的20分钟样品。

如图2所示，在经皮下全身施用剂量为30mg/kg的化合物1e后，在大鼠腹侧海马中观察到可观的化合物1e的细胞外水平。

Claims

1.一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R^a和R^b独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^c和R^d独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

L表示C_1-3亚烷基；并且

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R²选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R³选自由以下组成的组：氢、卤素和C_1-4烷基；

R⁶选自由以下组成的组：C_1-4烷基和C_1-4卤代烷基；并且

3.根据权利要求1至2中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是氢。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²是氢。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基和卤素。

6.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³选自由以下组成的组：氢、氟和甲基。

7.根据权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³是氢。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹、R²和R³是氢。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4烷基。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是甲基。

11.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4氟烷基。

12.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是卤素。

13.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是未被取代或被C_1-3烷基取代的苯基。

14.根据权利要求1至8所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是C_1-4烷氧基。

15.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴选自由以下组成的组：C_1-4烷基，C_1-4氟烷基、C_3-6环烷基、C_1-4羟基烷基、C_1-4烷氧基、NR^aR^b、SR^cR^d、卤素、以及未被取代或被乙基取代的苯基。

16.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴选自由以下组成的组：甲基、乙基、异丙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、羟基甲基、异丙氧基、乙氧基、甲氧基、环丙基、氟、溴、二甲氨基、甲硫基和乙基苯基。

17.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物选自由以下组成的组：

(R)-2-氨基-3-[[7-噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-乙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-环丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-甲氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-乙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-异丙氧基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-溴噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[(7-羟基甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸；

(R)-2-氨基-3-[[7-(氟甲基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基]氨基]丙酸；

18.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是

(R)-2-氨基-3-[(7-甲基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-羰基)氨基]丙酸，或其药学上可接受的盐。

19.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂。

20.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物使用。

21.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求19所述的药物组合物，用于在治疗抑郁症中使用。

22.根据权利要求21所述的化合物或药物组合物，其中所述抑郁症选自：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

23.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求19所述的药物组合物，用于在治疗选自自杀意念、双相障碍(包括双相抑郁症)、强迫症和癫痫持续状态的病症中使用。

24.一种治疗抑郁症的方法，所述方法包括将治疗有效量的根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求19所述的药物组合物施用至有需要的患者(例如人类患者)。

25.根据权利要求24所述的治疗抑郁症的方法，其中抑郁症选自：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。

26.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求19所述的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物中的用途。

27.根据权利要求26所述的化合物或药物组合物的用途，其中所述抑郁症选自由以下组成的组：重度抑郁症；难治性抑郁症；紧张性抑郁症；忧郁性抑郁症；非典型抑郁症；精神病性抑郁症；产期抑郁症；产后抑郁症；双相抑郁症，包括I型双相抑郁症和II型双相抑郁症；以及轻度、中度或重度抑郁症。