BR112021003928A2

BR112021003928A2 - moduladores do receptor de nmda

Info

Publication number: BR112021003928A2
Application number: BR112021003928-7A
Authority: BR
Inventors: John Paul Kilburn; Erhad Ascic; Mauro Marigo; Laurent David
Original assignee: H. Lundbeck A/S
Priority date: 2019-07-03
Filing date: 2020-07-01
Publication date: 2021-05-18
Also published as: WO2021001423A1; IL289575A; AR119340A1; JOP20210331A1; JP2022539197A; CO2021017142A2; AU2020299992A1; US11466027B2; EP3994141A1; ECSP22003596A; MA56451A; CL2021003557A1; PE20220137A1; CA3144304A1; US20210002292A1; MX2021015742A; CR20210662A; TW202116779A; KR20220029568A; CN114008054A

Abstract

MODULADORES DO RECEPTOR DE NMDA. A presente invenção está dirigida a novos moduladores do receptor de NMDA. Aspectos separados da invenção estão dirigidos a composições farmacêuticas compreendendo os referidos compostos e usos dos compostos para tratar disfunções neurológicas ou disfunções neuropsiquiátricas tais como depressão.

Description

MODULADORES DO RECEPTOR DE NMDA Área da invenção

[0001] A presente invenção está dirigida a compostos que são moduladores do receptor de NMDA, composições farmacêuticas compreendendo os compostos e seu uso no tratamento de disfunções neurológicas ou disfunções neuropsiquiátricas tais como depressão, em particular disfunção depressiva maior (MDD) e depressão resistente ao tratamento (TRD). Antecedentes da invenção

[0002] A Organização Mundial da Saúde estima que 350 milhões de pessoas serão afetadas com Disfunção Depressiva Maior (MDD) e projetou que a depressão constituirá o maior problema de saúde para a sociedade em todo o mundo até 2030. Uma estimativa aproximada da prevalência é que a depressão afeta 1/5 da população em algum ponto, afetando as mulheres em uma proporção mais elevada do que os homens (incidência de 5-9% e 2-3% respectivamente nos EUA, representando uma incidência global de 6,6%). O Centro de Controle de Doenças estadounidense relatou que, de 2005-2008, 8,9% da população dos EUA recebeu prescrição de um antidepressivo durante qualquer dado mês, sendo os antidepressivos também prescritos para ansiedade, dor e outras disfunções não do humor [Murray et al., Global Burden of Disease Study. Lancet. 17 de maio, 1997; 349 (9063): 1436-1442].

[0003] Os antidepressivos são comercializados e assim conhecidos do perito. Exemplos de diferentes tipos de antidepressivos são mas não estão limitados a inibidores seletivos da recaptação da serotonina (SSRIs), Inibidores da recaptação da serotonina-norepinefrina (SNRIs), Inibidores da monoamina oxidase (MAOIs) e Antidepressivos tricíclicos. A limitação típica dos antidepressivos conhecidos é início retardado da eficácia e taxas de remissão baixas após múltiplos ciclos de farmacoterapia e, para alguns antidepressivos,

efeitos secundários graves [Jick et al., Antidepressants and the risk of suicidal behaviors. Jama. 21 de jul. 2004; 292 (3): 338-343].

[0004] Em anos recentes, os moduladores dos receptores de N-Metil-ᴅ- Aspartato (NMDA) têm recebido mais atração no tratamento de MDD, em particular depressão resistente ao tratamento (TRD). Especialmente, a cetamina, um antagonista do receptor de NMDA, é usada para o tratamento de MMD devido ao seu efeito antidepressivo e rápido início. No entanto, o tratamento de MDD com cetamina tem as desvantagens de efeitos secundários psicométricos e requisito de administração intravenosa.

[0005] Os receptores de NMDA são canais iônicos controlados por ligando tetraméricos que estão também envolvidos em processos fisiológicos essenciais tais como plasticidade e desenvolvimento sinápticos. Os receptores de NMDA são heterotetrâmeros compreendendo duas subunidades de GluN1 e duas subunidades de GluN2/GluN3. Isto significa que se montam como receptores di- heteroméricos ou tri-heteroméricos. A maioria dos receptores de NMDA nativos consiste em duas subunidades de GluN1 e duas subunidades de GluN2. A ativação dos receptores de NMDA requer ligação simultânea em dois locais de ligação diferentes. O glutamato, o principal neurotransmissor excitatório do sistema nervoso central, se liga às subunidades de GluN2 e a glicina se liga às subunidades de GluN1 e GluN3.

[0006] Outro modulador conhecido do receptor de NMDA é D-ciclosserina, que é um agonista parcial do local de glicina. A D-ciclosserina tem sido intensamente estudada devido às suas propriedades neuroativas e utilidade potencial no tratamento da depressão e disfunções da depressão tais como MDD [Heresco-Levy, U., Javitt, D.C., Gelfin, Y., Gorelik, E., Bar, M., Blanaru, M., Kremer, I., 2006. Controlled trial of d-cycloserine adjuvant therapy for treatment-resistant major depressive disorder. J. Affect. Disord. 93, 239–243] e PTSD [Olden, M.,

Wyka, K., Cukor, J., Peskin, M., Altemus, M., Lee, F.S., Finkelstein-Fox, L., Rabinowitz, T., Difede, J., 2017. Pilot study of a telehealth-delivered medication augmented exposure therapy protocol for PTSD. J. Nerv. Ment. Dis. 205, 154– 160]. No entanto, o tratamento da D-ciclosserina sofre de queixas frequentes de estimulação psicopatológica tais como ansiedade, euforia, agitação, sensação de estimulação, tontura/sonolência, fadiga, dor de cabeça e perturbação gastrointestinal [Schade, S., Paulus, W., 2016. D-Cycloserine in neuropsychiatric diseases: a systematic review. Int. J. Neuropsychopharmacol] Urwyler et al., J. Med. Chem. 2009, 52, 5093–5107 divulgam derivados do ácido 3-acilamino-2- amonipropiônico com afinidade pelo local de glicina do receptor de NMDA.

[0007] Apesar do interesse de longa data na área existe ainda evidentemente necessidade não atendida no que diz respeito ao desenvolvimento de fármacos eficientes, bem tolerados e ativos para o tratamento da depressão e disfunções da depressão tais como MDD. Um composto que seja um modulador do receptor de NMDA com afinidade pelo local de glicina pode atender a tais necessidades não atendidas. Sumário da invenção

[0008] Com estes antecedentes é um objetivo da invenção proporcionar compostos que são moduladores do receptor de NMDA com afinidade pelo local de glicina. Em um primeiro aspecto da invenção é proporcionado um composto da Fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que:

R1 é selecionado do grupo consistindo em um hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, alquila C1- 4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4, hidróxi-haloalquila C1-4, ciano, NRaRb, SRcRd, OR6, L-(OR6) e R7; Ra e Rb são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; Rc e Rd são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; R6 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4 e hidróxi-haloalquila C1-4; L representa um alquileno C1-3; e R7 é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila C3-6, fenila, heterociclo com 4, 5 ou 6 membros e heteroarila com 5 ou 6 membros, em que a referida cicloalquila, fenila, heterociclo ou heteroarila está independentemente não substituída ou substituída por 1, 2 ou 3 substituintes independentemente selecionados de halogênio, alquila C1-3, alcóxi C1-3, em que a referida alquila C1-3 e alcóxi C1-3 estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 F.

[0009] Em um aspecto adicional é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um ou mais carreadores ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis.

[0010] Em um aspecto adicional é proporcionado um método para o tratamento da depressão compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula I, ou seu sal aceitável, ou uma composição farmacêutica a um paciente com sua necessidade.

[0011] Em um aspecto adicional é proporcionado um composto da fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso como um medicamento compreendendo um composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0012] Em um aspecto adicional é proporcionado um composto da fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica para uso no tratamento da depressão.

[0013] Em um aspecto adicional é proporcionado um uso de um composto da fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica para a fabricação de um medicamento para uso no tratamento da depressão.

[0014] Estes e outros aspectos da invenção se tornarão aparentes após referência à seguinte descrição detalhada. Deve ser entendido que os vários aspectos, modalidades, implementações e características da invenção mencionados aqui podem ser reivindicados separadamente ou em qualquer combinação.

[0015] Todas as referências, incluindo publicações, pedidos de patentes e patentes, citadas aqui são deste modo incorporadas por referência em sua totalidade e na mesma medida como se cada referência fosse individualmente e especificamente indicada como estando incorporada por referência e fosse apresentada na sua totalidade.

[0016] Os cabeçalhos e subcabeçalhos são usados aqui somente por conveniência e não devem ser interpretados como limitando a invenção de qualquer modo. Breve descrição dos desenhos

[0017] FIG 1: Efeitos do composto 1e na Eletroencefalografia em Estado de repouso (rsEEG) obtida no Núcleo accumbens de acordo com o exemplo 3.

[0018] Eixo dos Y: Potência normalizada à linha de base (dB); Eixo dos X: barra à esquerda: captisol a 10%; barra à direita: composto 1e a 20 mg/kg.

[0019] O nível de significância para comparação post-hoc (em relação ao grupo com veículo) é indicado: *<0,05.

[0020] FIG 2: Relação entre a concentração do composto 1e no hipocampo ventral de rato após administração sistêmica em função do tempo de acordo com o exemplo 4.

[0021] Eixo dos X: tempo (minutos); Eixo dos Y: concentração do composto testado (µM) no hipocampo ventral de rato; Ο: composto 1e. Descrição Detalhada da Invenção

[0022] Os inventores identificaram novos compostos que têm afinidade pelo local de glicina do receptor de NMDA como visto na tabela 2.

[0023] Os inventores observaram que a administração do composto 1e doseado a 20 mg/kg mostrou efeitos significativos em rsEEG como mostrado na FIG 1.

[0024] Os inventores observaram que níveis extracelulares consideráveis do composto da invenção foram observados no hipocampo ventral de rato após administração sistêmica, como mostrado na FIG 2.

1. Definições

[0025] Como usado aqui, o termo “alquila” se refere a um hidrocarboneto saturado linear (i.e., não ramificado) ou ramificado tendo de um até oito átomos de carbono, inclusive. Exemplos de tais grupos incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, 1-propila, 2-propila, 1-butila, 2-butila, 2-metil-2-propila, 2-metil- 1-butila, n-hexila, n-heptila e n-octila.

[0026] Em alguns casos, o número de átomos de carbono em um substituinte de hidrocarbila (p.ex., alquila ou cicloalquila) é indicado pelo prefixo “Cx-y”, em que x é o número mínimo e y o máximo de átomos de carbono no substituinte. Assim, por exemplo, “alquila C1-3” se refere a um substituinte de alquila contendo de 1 a 3 átomos de carbono.

[0027] O termo “alquileno”, como usado aqui, se refere a um grupo divalente derivado de uma cadeia de hidrocarbonetos linear ou ramificada de 1 a 10 átomos de carbono, por exemplo, de 2 a 5 átomos de carbono. Exemplos representativos de alquilenos incluem, mas não estão limitados a, -CH2CH2-, - CH2CH2CH2-, -CH2CH(CH3)CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2CH(CH3)CH2CH2- e - CH2CH2CH2CH2CH2-.

[0028] Como usados no contexto da presente invenção, os termos “halo” e “halogênio” são usados indistintamente e se referem a um átomo do grupo consistindo em F, Cl, I e Br.

[0029] Como usado aqui, o termo “alcóxi” se refere a uma fração da fórmula -OR', em que R' indica alquila como definida acima. Em particular, “alcóxi C1-4” se refere a tal fração em que a parte de alquila tem 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Exemplos de “alcóxi C1-4” incluem, mas não estão limitados a, metóxi, etóxi, n-butóxi e terc-butóxi.

[0030] O termo “haloalquila”, como usado aqui, significa um grupo alquila, como definido aqui, no qual um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete ou oito átomos de hidrogênio estão substituídos por um halogênio.

[0031] Como usado aqui, o termo “fluoroalquila” se refere a um hidrocarboneto saturado de cadeia linear ou ramificado tendo de um a seis átomos de carbono inclusive substituídos por um ou mais átomos de flúor. Exemplos incluem, mas não estão limitados a, trifluorometila, pentafluoroetila, 1-fluoroetila e 1,2-difluoroetila.

[0032] O termo “hidroxila” ou “hidróxi”, como usado aqui, significa um grupo -OH.

[0033] O termo “hidroxialquila”, como usado aqui, significa que pelo menos um grupo -OH está anexado à fração molecular original através de um grupo alquileno, como definido aqui.

[0034] O termo “hidróxi-haloalquila”, como usado aqui, significa que pelo menos um grupo -OH está anexado à fração molecular original através de um grupo haloalquila, como definido aqui.

[0035] Similarmente, o termo “hidroxifluoroalquila”, como usado aqui, significa que pelo menos um grupo -OH está anexado à fração molecular original através de um grupo fluoroalquila, como definido aqui.

[0036] Como usado aqui, o termo “ciano” se refere a um grupo CN anexado à molécula original através do átomo de carbono do grupo CN.

[0037] O termo “heteroarila”, como usado aqui, se refere a um anel monocíclico aromático. Os anéis aromáticos monocíclicos são anéis com cinco ou seis membros contendo pelo menos um heteroátomo independentemente selecionado do grupo consistindo em N, O e S (p.ex. 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos independentemente selecionados de O, S e N). Os anéis aromáticos monocíclicos com cinco membros têm duas ligações duplas e os anéis aromáticos monocíclicos com seis membros têm três ligações duplas. Exemplos representativos de heteroarila incluem, mas não estão limitados a, indolila, piridinila (incluindo piridin-2-ila, piridin-3-ila, piridin-4-ila), pirimidinila, pirazinila, piridazinila, pirazolila, pirrolila.

[0038] O termo “heterociclo” ou “heterocíclico“, como usado aqui, significa um heterociclo monocíclico, um heterociclo bicíclico ou um heterociclo tricíclico. O heterociclo monocíclico é um anel com três, quatro, cinco, seis, sete ou oito membros contendo pelo menos um heteroátomo independentemente selecionado do grupo consistindo em O, N e S. O anel com três ou quatro membros contém zero ou uma ligação dupla e um heteroátomo selecionado do grupo consistindo em O, N e S. O anel com cinco membros contém zero ou uma ligação dupla e um, dois ou três heteroátomos selecionados do grupo consistindo em O, N e S. O anel com seis membros contém zero, uma ou duas ligações duplas e um, dois ou três heteroátomos selecionados do grupo consistindo em O, N e S. Os anéis com sete e oito membros contêm zero, uma, duas ou três ligações duplas e um, dois ou três heteroátomos selecionados do grupo consistindo em O, N e S. Exemplos representativos de heterociclos monocíclicos incluem, mas não estão limitados a, azetidinila, azepanila, aziridinila, diazepanila, 1,3-dioxanila, 1,3-dioxolanila, 1,3-ditiolanila, 1,3- ditianila, imidazolinila, imidazolidinila, isotiazolinila, isotiazolidinila, isoxazolinila, isoxazolidinila, morfolinila.

[0039] O termo “cicloalquila”, como usado aqui, se refere a um sistema anelar carbocíclico contendo três a dez átomos de carbono, zero heteroátomos e zero ligações duplas. A cicloalquila pode ser monocíclica ou bicíclica, em que os dois anéis são em ponte, fundidos ou espirocíclicos. Exemplos representativos de cicloalquila incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila.

[0040] Para os compostos descritos aqui podem ser selecionados grupos e seus substituintes de acordo com a valência permitida dos átomos e dos substituintes, tal que as seleções e substituições resultem em um composto estável, p.ex., que não sofra espontaneamente transformação tal como por rearranjo, ciclização, eliminação, etc.

[0041] O uso dos termos “um“, “uma” e “o/a“ e referentes similares no contexto da descrição da invenção é para ser interpretado como abrangendo tanto o singular como o plural, a não ser que de outro modo indicado aqui ou claramente contradito pelo contexto. Por exemplo, a frase “o composto“ é para ser entendida como se referindo a vários “compostos“ da invenção ou aspecto particular descrito, a não ser que de outro modo indicado.

[0042] A descrição aqui de qualquer aspecto ou aspecto da invenção usando termos tais como “compreendendo“, “tendo“, “incluindo“ ou “contendo“ com referência a um elemento ou elementos se destina a proporcionar fundamento para um aspecto ou aspecto da invenção similar que “consiste em“, “consiste essencialmente em“ ou “compreende essencialmente“ esse elemento ou elementos particulares, a não ser que de outro modo indicado ou claramente contradito pelo contexto (p.ex., uma composição descrita aqui como compreendendo um elemento particular deve ser entendida como descrevendo também uma composição consistindo em esse elemento, a não ser que de outro modo indicado ou claramente contradito pelo contexto).

[0043] No presente contexto, o termo um agonista parcial de glicina do receptor de NMDA se destina a indicar um composto que se liga ao e ativa o receptor de NMDA através do local de ligação ortostérica à glicina e provoca eficácia parcial em relação à glicina.

[0044] No presente contexto, o termo “quantidade terapeuticamente eficaz” de um composto se destina a indicar uma quantidade suficiente para curar, aliviar ou deter parcialmente as manifestações clínicas de uma dada doença (p.ex., depressão) e suas complicações em uma intervenção terapêutica compreendendo a administração do referido composto. Uma quantidade adequada para alcançar isto é definida como “quantidade terapeuticamente eficaz”. As quantidades eficazes para cada propósito dependerão da gravidade da doença ou lesão bem como do peso e estado geral do sujeito. Será entendido que a determinação de uma dosagem apropriada pode ser alcançada usando experimentação de rotina, p.ex., por construção de uma matriz de valores e teste de diferentes pontos na matriz, o que está tudo dentro das perícias habituais de um médico treinado.

[0045] No presente contexto, os termos “tratamento“ e “tratar“ significam a gestão e o cuidado de um paciente para o propósito de combate de uma doença. O termo se destina a incluir o espectro total de tratamentos para uma dada doença (p.ex., depressão) da qual o paciente está sofrendo, tal como administração do composto ativo para aliviar os sintomas ou complicações, para retardar a progressão da depressão, para aliviar ou amenizar os sintomas e complicações e/ou para curar ou eliminar a depressão. O paciente a ser tratado é preferencialmente um mamífero, em particular um ser humano. No presente contexto, “doença” pode ser usada como sinônimo de disfunção, condição, mau funcionamento, disfunção e similares.

2. Modalidades da invenção

[0046] No que se segue são divulgadas modalidades da invenção. A primeira modalidade é denotada E1, a segunda modalidade é denotada E2 e assim por diante.

[0047] E1. composto da Fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que:

R1 é selecionado do grupo consistindo em um hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, alquila C1- 4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4, hidróxi-haloalquila C1-4, ciano, NRaRb, SRcRd, OR6, L-(OR6) e R7; Ra e Rb são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; Rc e Rd são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; R6 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4 e hidróxi-haloalquila C1-4; L representa um alquileno C1-3; e R7 é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila C3-6, fenila, heterociclo com 4, 5, ou 6 membros e heteroarila com 5 ou 6 membros, em que a referida cicloalquila, fenila, heterociclo ou heteroarila estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 substituintes independentemente selecionados de halogênio, alquila C1-3, alcóxi C1-3, em que os referidos alquila C1-3 e alcóxi C1-3 estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 F.

[0048] E2. O composto de acordo com a modalidade E1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que: R1 é selecionado do grupo consistindo em um hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, alquila C1- 4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4, OR6 e R7; R6 é selecionado do grupo consistindo em alquila C1-4 e haloalquila C1-4; e R7 é selecionado do grupo consistindo em uma cicloalquila C3-6 e fenila, em que as referidas cicloalquila e fenila estão independentemente não substituídas ou substituídas por 1, 2 ou 3 substituintes independentemente selecionados de halogênio, alquila C1-3, alcóxi C1-3, em que os referidos alquila C1-3 e alcóxi C1-3 estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 F.

[0049] E3. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E2, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 é hidrogênio.

[0050] E4. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E3, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 é alquila C1-3 (p.ex., etila).

[0051] E5. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E4, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R2 é hidrogênio.

[0052] E6. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E5, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-4 e halogênio.

[0053] E7. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E6, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, flúor e metila.

[0054] E8. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E7, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R3 é hidrogênio.

[0055] E9. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E8, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 1, R2 e R3 são hidrogênio.

[0056] E10. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é alquila C1-4.

[0057] E11. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E10, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é metila.

[0058] E12. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é fluoroalquila C1-4.

[0059] E13. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é halogênio.

[0060] E14. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 4 é fenila não substituída ou substituída por alquila C1-3.

[0061] E15. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é alcóxi C1-4.

[0062] E16. O composto de acordo com a modalidade E15, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R4 é selecionado do grupo consistindo em isopropóxi, etóxi e metóxi.

[0063] E17. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 4 é selecionado do grupo consistindo em alquila C1-4, fluoroalquila C1-4, cicloalquila C3-6, hidroxialquila C1-4, alcóxi C1-4, NRaRb, SRcRd, halogênio e fenila não substituída ou substituída por etila.

[0064] E18. O composto de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R 4 é selecionado do grupo consistindo em metila, etila, isopropila, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, hidroximetila, isopropóxi, etóxi, metóxi, ciclopropila, flúor, bromo, dimetilamino, metiltio e etilfenila.

[0065] E19. O composto de acordo com a modalidade E1, em que o composto é selecionado do grupo consistindo em: ácido (R)-2-amino-3-[[7-tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico;

ácido (R)-2-amino-3-[[7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-hidroximetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(6-fluoro-7-metil-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; e ácido (R)-2-amino-3-[(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0066] E20. O composto de acordo com a modalidade E1, em que o composto é ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0067] E21. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E20 e um ou mais carreadores ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis.

[0068] E22. Um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E20 para uso como um medicamento.

[0069] E23. Um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 para uso no tratamento da depressão.

[0070] E24. O composto ou uma composição farmacêutica de acordo com a modalidade E23, em que a depressão é selecionada do grupo consistindo em disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

[0071] E25. O composto ou uma composição farmacêutica de acordo com a modalidade E24, em que a depressão é disfunção depressiva maior.

[0072] E26. O composto ou uma composição farmacêutica de acordo com a modalidade E24, em que a depressão é depressão resistente ao tratamento.

[0073] E27. Um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 para uso no tratamento de uma condição selecionada de ideação suicida, disfunção bipolar (incluindo depressão bipolar), disfunção obsessivo- compulsiva e estado de epilepsia.

[0074] E28. O composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica de acordo com a modalidade E27 para uso no tratamento da ideação suicida.

[0075] E29. Um método para o tratamento da depressão compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 a um paciente com sua necessidade.

[0076] E30. O método para o tratamento da depressão de acordo com a modalidade E29, em que a depressão é selecionada do grupo consistindo em disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

[0077] E31. O método para o tratamento da depressão de acordo com qualquer uma das modalidades E29 a E30, em que a depressão é disfunção depressiva maior.

[0078] E32. O composto ou uma composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das modalidades E29 a E30, em que a depressão é depressão resistente ao tratamento.

[0079] E33. Um método para tratamento de uma condição selecionada de ideação suicida, disfunção bipolar (incluindo depressão bipolar), disfunção obsessivo-compulsiva e estado de epilepsia, compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 a um paciente com sua necessidade.

[0080] E34. O método para tratamento da ideação suicida compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 a um paciente com sua necessidade.

[0081] E35. Uso de um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das modalidades E1 a E21 para a fabricação de um medicamento para uso no tratamento da depressão.

[0082] E36. O uso de um composto ou composição farmacêutica de acordo com a modalidade E35, em que a depressão é selecionada do grupo consistindo em disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

[0083] A referência a compostos englobados pela invenção inclui a substância livre (íon zwitter) de compostos da invenção, sais farmaceuticamente aceitáveis de compostos da invenção, tais como sais de adição de ácidos ou sais de adição de bases, e formas polimórficas e amórficas de compostos da invenção e de seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Além do mais, os compostos da invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem potencialmente existir em formas não solvatadas bem como solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis tais como água, etanol e similares. Ambas as formas solvatadas e não solvatadas são englobadas pela presente invenção.

[0084] Os nomes dos compostos podem ser atribuídos usando o algoritmo de designação Estrutura=Nome como parte do CHEMDRAW®.

[0085] Deve ser entendido que os compostos da invenção podem possuir formas tautoméricas, estereoisômeros, isômeros geométricos e que estes constituem também modalidades da invenção.

[0086] As formas racêmicas podem ser resolvidas nos antípodas ópticos por métodos conhecidos, por exemplo, por separação de seus sais diastereoisoméricos com um ácido opticamente ativo e liberação do composto amina opticamente ativo por tratamento com uma base. A separação de tais sais diastereoisoméricos pode ser alcançada, p.ex., por cristalização fracionada. Os ácidos opticamente ativos adequados para este propósito podem incluir, mas não estão limitados a, ácidos d- ou l-tartárico, mandélico ou canforsulfônico.

Outro método para resolução de racematos nos antípodas ópticos é baseado em cromatografia em uma matriz opticamente ativa. Os compostos da presente invenção podem ser também resolvidos pela formação e separação cromatográfica de derivados diastereoisoméricos a partir de reagentes de derivatização quirais, tais como reagentes alquilantes ou acilantes quirais, seguidas por clivagem do auxiliar quiral. Qualquer um dos métodos acima pode ser aplicado para resolver os antípodas ópticos dos compostos da invenção per se ou para resolver os antípodas ópticos de intermediários sintéticos, que podem ser depois convertidos por métodos descritos aqui nos produtos finais opticamente resolvidos que são os compostos da invenção. Podem ser usados métodos adicionais para a resolução de isômeros ópticos, conhecidos dos peritos na técnica. Tais métodos incluem aqueles discutidos por J. Jaques, A. Collet e S. Wilen em Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, Nova Iorque, 1981. Os compostos opticamente ativos podem ser também preparados a partir de materiais de partida opticamente ativos.

[0087] Estão também incluídos nesta invenção compostos isotopicamente marcados, que são similares àqueles reivindicados na fórmula I, em que um ou mais átomos são representados por um átomo do mesmo elemento tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa usualmente encontrado na natureza (p.ex., 2H, 3H, 11 C, 13 C, 15 N, 18 F e similares). É feita menção particular de compostos substituídos por 2H, i.e., compostos em que um ou mais átomos de H são representados por deutério.

[0088] Em uma modalidade da invenção, um ou mais dos átomos de hidrogênio do composto da fórmula I são representados por deutério. É reconhecido que elementos estão presentes em abundâncias isotrópicas naturais na maioria dos compostos sintéticos e resultam na incorporação inerente de deutério. No entanto, a abundância isotópica natural de isótopos de hidrogênio tais como deutério é imaterial (cerca de 0,015%) em relação ao grau de substituição isotópica estável de compostos indicados aqui. Assim, como usado aqui, a designação de um átomo como deutério em uma posição indica que a abundância de deutério é significativamente maior do que a abundância natural de deutério. Qualquer átomo não designado como um isótopo específico se destina a representar qualquer isótopo estável desse átomo, como será aparente ao especialista perito.

[0089] Em uma modalidade, a designação de uma posição como "D” em um composto tem uma incorporação de deutério mínima de mais do que 60% em essa posição tal como mais do que cerca de 70% em essa posição tal como mais do que cerca de 80% em essa posição tal como mais do que cerca de 85% em essa posição. Em uma modalidade adicional, a designação de uma posição como "D” em um composto tem uma incorporação de deutério mínima de mais do que 90% em essa posição tal como mais do que cerca de 95% em essa posição tal como mais do que cerca de 97% em essa posição tal como mais do que cerca de 99% em essa posição. A. Sais farmaceuticamente aceitáveis

[0090] Os compostos desta invenção são geralmente utilizados como a substância livre ou como um seu sal farmaceuticamente aceitável. Quando um composto da fórmula I contém uma base livre, tais sais podem ser preparados de uma maneira convencional por tratamento de uma solução ou suspensão de uma base livre da fórmula (I) com um equivalente molar de um ácido farmaceuticamente aceitável. Exemplos representativos de ácidos orgânicos e inorgânicos adequados são descritos abaixo.

[0091] Os sais farmaceuticamente aceitáveis no presente contexto se destinam a indicar sais não tóxicos, i.e., fisiologicamente aceitáveis.

[0092] O termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” inclui sais formados com ácidos inorgânicos e/ou orgânicos nos átomos de nitrogênio na molécula original. Os referidos ácidos podem ser selecionados de por exemplo de ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido nitroso, ácido sulfúrico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido glucônico, ácido láctico, ácido maleico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido acético, ácido propiônico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido glutâmico, ácido piroglutâmico, ácido salicílico, sacarina e ácidos sulfônicos tais como ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido toluenossulfônico e ácido benzenossulfônico.

[0093] Em uma modalidade da invenção, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de cloreto de hidrogênio.

[0094] Em uma modalidade da invenção, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de brometo de hidrogênio.

[0095] O termo sais farmaceuticamente aceitáveis inclui também sais formados com bases inorgânicas e/ou orgânicas nos grupos ácidos de compostos da fórmula I. As referidas bases podem ser selecionadas de por exemplo bases de metais alcalinos, tais como hidróxido de sódio, hidróxido de lítio, hidróxido de potássio, bases alcalinoterrosas, tais como hidróxido de cálcio e hidróxido de magnésio, e bases orgânicas, tais como trimetilamina.

[0096] Exemplos adicionais de ácidos e bases úteis para formar sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser encontrados, p.ex., em Stahl e Wermuth (Eds) “Handbook of Pharmaceutical salts. Properties, selection, and use”, Wiley-VCH, 2008.

3. Condições para tratamento

[0097] A invenção engloba o uso dos compostos da invenção para tratamento de todas as doenças e disfunções listadas acima.

[0098] Como descrito acima, a presente invenção pode ser útil no tratamento da depressão e disfunções depressivas. Consequentemente, em uma modalidade, um composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado para o tratamento da depressão.

[0099] O diagnóstico de depressão segue usualmente uma avaliação clínica por um psiquiatra ou outros profissionais de saúde mental. Os dois conjuntos mais reconhecidos de critérios de diagnóstico para a disfunção depressiva maior e outras disfunções depressivas, ou do humor, são delineados no DSM, Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Quarta Edição (DSM IV) publicado pela associação psiquiátrica americana e pela ICD (ICD-10: International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems – 10ª Revisão, publicada periodicamente pela Organização Mundial de Saúde) ou qualquer outro sistema de classificação psiquiátrica.

[0100] Os sinais e sintomas de depressão são por exemplo humor deprimido, perda de interesse (anedonia), mudanças de peso ou apetite, problemas de sono, atividade psicomotora (objetiva ou subjetiva), fadigabilidade, inutilidade, dificuldade de concentração, ideação suicida, perda de confiança, disfunção sexual e autocensura.

[0101] Assim, em uma modalidade da invenção, o tratamento com compostos da invenção previne, altera, reduz ou alivia um ou mais sinais ou sintomas da depressão selecionados do grupo consistindo em humor deprimido, perda de interesse (anedonia), mudanças de peso ou apetite, problemas de sono, atividade psicomotora (objetiva ou subjetiva), fadigabilidade, inutilidade, dificuldade de concentração, ideação suicida, perda de confiança, disfunção sexual e autocensura. O perito está familiarizado com vários testes para medir a melhora dos sintomas depressivos. Exemplos de teste para medir as melhorias são a mas se limitam à escala HAM-D ou MADRS.

[0102] Em uma modalidade, a depressão é disfunção depressiva maior.

[0103] Em uma modalidade adicional, a depressão é depressão resistente ao tratamento.

[0104] Em uma modalidade adicional, a depressão é selecionada de disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

[0105] Os antagonistas de NMDA clinicamente usados tais como cetamina e dextrometorfano são geralmente eficazes em pacientes com dor neuropática [Hy et al., Expert Rev Clin Pharmacol. 1 maio 2011; 4 (3): 379-388]. Consequentemente, em uma modalidade da invenção, o composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado no tratamento da dor. Em uma modalidade adicional, a dor é dor neuropática.

[0106] Modelos animais pré-clínicos demonstraram efeitos pró-cognitivos e tipo antidepressivos com o uso de moduladores do local de glicina de NDMA [Peyrovian et al., Progress in Neuropsychopharmacology & Biological Psychiatry. 92 (2019) 387-404]. Assim, em uma modalidade da invenção, um composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado no tratamento de uma condição selecionada de ideação suicida, disfunção bipolar (incluindo depressão bipolar), disfunção obsessivo-compulsiva e estado de epilepsia.

[0107] Em uma modalidade adicional, um composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado no tratamento da ideação suicida.

[0108] Em uma modalidade da invenção, o composto da fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado no tratamento de uma disfunção neurológica ou disfunção neuropsiquiátrica. a. Tratamento de combinação

[0109] Em uma modalidade da invenção, os compostos da fórmula I são para uso como tratamento isolado como o único composto ativo. Em outra modalidade da invenção, os compostos da fórmula I podem ser usados em combinação com outros agentes úteis no tratamento de disfunções tais como depressão. Os termos “uso combinado”, “em combinação com” e “uma combinação de” e similares como usados aqui no contexto do método da invenção compreendendo a administração combinada de quantidades terapeuticamente eficazes de um composto da fórmula (d, e outro composto, composto que é útil no tratamento de uma doença ou disfunção neurodegenerativa, se destinam a significar a administração de um composto da fórmula Id simultaneamente ou sequencialmente, em qualquer ordem, em conjunto com o referido outro composto.

[0110] Os dois compostos podem ser administrados simultaneamente ou sequencialmente com um intervalo de tempo entre as administrações dos dois compostos. Os dois compostos podem ser administrados como parte da mesma formulação ou composição farmacêutica ou em formulações ou composições farmacêuticas separadas. Os dois compostos podem ser administrados no mesmo dia ou em dias diferentes. Podem ser administrados pela mesma via, tal por exemplo por administração oral, por depósito, por injeção intramuscular ou intravenosa; ou por vias diferentes em que um composto é por exemplo administrado oralmente ou colocado por depósito e o outro composto é por exemplo injetado. Os dois compostos podem ser administrados pelo mesmo regime ou intervalo de dosagem, tal como uma vez ou duas vezes diariamente, semanalmente ou mensalmente; ou por regimes de dosagem diferentes, por exemplo em que um é administrado uma vez diariamente e o outro é administrado duas vezes diariamente ou semanalmente ou mensalmente.

[0111] Em alguns casos, o paciente a ser tratado pode já estar em tratamento com um ou mais outros compostos úteis no tratamento da depressão quando o tratamento com um composto da invenção é iniciado. Em outros casos, o paciente pode já estar em tratamento com um composto da invenção quando o tratamento com um ou mais outros compostos úteis no tratamento de uma depressão ou psicose é iniciado. Em outros casos, o tratamento com um composto da invenção e o tratamento com um ou mais outros compostos úteis no tratamento da psicose é iniciado ao mesmo tempo. b. Compostos para tratamento de combinação

[0112] Exemplos de compostos terapeuticamente ativos que podem ser vantajosamente combinados com compostos da invenção incluem sedativos ou hipnóticos, tais como benzodiazepinas; anticonvulsivantes, tais como lamotrigina, ácido valproico, topiramato, gabapentina, carbamazepina; estabilizantes do humor tais como lítio; fármacos dopaminérgicos, tais como agonistas da dopamina e L-Dopa; fármacos para tratar ADHD, tais como atomoxetina; psicoestimulantes, tais como modafinil, cetamina, metilfenidato e anfetamina; outros antidepressivos, tais como mirtazapina, mianserina, vortioxetina, cipralex e bupropriona; hormônios, tais como T3, estrogênio, DHEA e testosterona; antipsicóticos atípicos, tais como olanzapina, brexpiprazol e aripiprazol; antipsicóticos típicos, tais como haloperidol; fármacos para tratar doenças de Alzheimer, tais como inibidores da colinesterase e memantina, folato; S-Adenosil-Metionina; imunomoduladores, tais como interferons; opiáceos, tais como buprenorfinas; antagonistas do receptor 1 da angiotensina II (antagonistas AT1); inibidores de ACE; estatinas; e antagonista alfa1 adrenérgico, tal como prazosina. c. Vias de administração

[0113] As composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula I, quer como o único composto ativo ou em combinação com outro composto ativo, podem ser especificamente formuladas para administração por qualquer via adequada tal como a via oral, retal, nasal, bucal, sublingual, pulmonar, transdérmica e parenteral (p.ex., subcutânea, intramuscular e intravenosa).

[0114] Será apreciado que a via dependerá da condição geral e idade do sujeito a ser tratado, da natureza da condição a ser tratada e do ingrediente ativo. d. Doses

[0115] Em uma modalidade, o composto da presente invenção é administrado em uma quantidade de cerca de 0,5 mg/kg de peso corporal a cerca de 50 mg/kg de peso corporal por dia. Em particular, as dosagens diárias podem estar na gama de 1 mg/kg de peso corporal a cerca de 30 mg/kg de peso corporal por dia. As dosagens exatas dependerão da frequência e modo de administração, do sexo, da idade, do peso e da condição geral do sujeito a ser tratado, da natureza e da gravidade da condição a ser tratada, quaisquer doenças concomitantes a serem tratadas, do efeito desejado do tratamento e outros fatores conhecidos dos peritos na técnica.

[0116] Em uma modalidade, a frequência de administração é 1, 2, 3, 4 ou 5 vezes por dia.

[0117] Em uma modalidade, a frequência de administração é uma vez diariamente.

[0118] Em uma modalidade, a frequência de administração é duas vezes diariamente.

[0119] Uma dosagem oral típica para adultos estará na gama de 100-3000 mg/dia de um composto da presente invenção, tal como 700-2800 mg/dia, tal como 1000-2000 mg/dia ou 1200-1700 mg/dia. Convenientemente, os compostos da invenção são administrados em uma forma de dosagem unitária contendo os referidos compostos em uma quantidade de cerca de 100 a 1000 mg, tal como 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 750 mg ou até 1000 mg de um composto da presente invenção.

[0120] Em uma modalidade, a frequência de administração é 1, 2, 3, 4 ou 5 vezes por dia.

[0121] Em uma modalidade, a frequência de administração é uma vez diariamente.

[0122] Em uma modalidade, a frequência de administração é duas vezes diariamente.

[0123] Uma dosagem IV típica para adultos estará na gama de 20-300 mg/dia de um composto da presente invenção, tal como 50-200 mg/dia, tal como 70-150 mg/dia ou 75-125 mg/dia. Convenientemente, os compostos da invenção são administrados em uma forma de dosagem unitária contendo os referidos compostos em uma quantidade de cerca de 10 a 300 mg, tal como 10 mg, 20 mg, 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg de um composto da presente invenção.

[0124] Em uma modalidade, a frequência de administração é uma vez diariamente.

[0125] Em uma modalidade, a frequência de administração é duas vezes diariamente.

4. Formulações e excipientes farmacêuticos

[0126] No que se segue, o termo “excipiente” ou “excipiente farmaceuticamente aceitável” se refere a excipientes farmacêuticos incluindo, mas não se limitando a, enchimentos, antiaderentes, aglutinantes,

revestimentos, cores, desintegrantes, aromas, deslizantes, lubrificantes, conservantes, sorventes, adoçantes, solventes, veículos e adjuvantes.

[0127] A presente invenção proporciona também uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I), tal como um dos compostos divulgados na Seção Experimental aqui. A presente invenção proporciona também um processo para preparação de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula I. As composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser formuladas com excipientes farmaceuticamente aceitáveis de acordo com técnicas convencionais tais como aquelas divulgadas em Remington, “The Science and Practice of Pharmacy”, 22a edição (2013), Editado por Allen, Loyd V., Jr.

[0128] As composições farmacêuticas para administração oral incluem formas de dosagem oral sólidas tais como comprimidos, cápsulas, pós e grânulos; e formas de dosagem oral líquidas tais como soluções, emulsões, suspensões e xaropes bem como pós e grânulos a serem dissolvidos ou suspensos em um líquido apropriado.

[0129] As formas de dosagem oral sólidas podem ser apresentadas como unidades discretas (p. ex., comprimidos ou cápsulas duras ou moles), contendo cada um uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo e, preferencialmente, um ou mais excipientes adequados. Onde apropriado, as formas de dosagem sólidas podem ser preparadas com revestimentos tais como revestimentos entéricos ou podem ser formuladas de modo a proporcionarem liberação modificada do ingrediente ativo tal como liberação retardada ou prolongada de acordo com métodos bem conhecidos na técnica. Onde apropriado, a forma de dosagem sólida pode ser uma forma de dosagem se desintegrando na saliva, tal como por exemplo um comprimido dispersível oral.

[0130] Exemplos de excipientes adequados para formulação oral sólida incluem, mas não estão limitados a, celulose microcristalina, amido de milho, lactose, manitol, povidona, croscarmelose sódica, sacarose, ciclodextrina, talco, gelatina, pectina, estearato de magnésio, ácido esteárico e éteres de alquila inferior de celulose. Similarmente, a formulação sólida pode incluir excipientes para formulações de liberação retardada ou prolongada conhecidas na técnica, tais como monoestearato de glicerila ou hipromelose. Se for usado material sólido para administração oral, a formulação pode por exemplo ser preparada por mistura do ingrediente ativo com excipientes sólidos e subsequentemente compressão da mistura em uma máquina de preparação de comprimidos convencional; ou a formulação pode por exemplo ser colocada em uma cápsula dura, p.ex., em forma de pó, pélete ou minicomprimido. A quantidade de excipiente sólido variará amplamente mas variará tipicamente de cerca de 25 mg a cerca de 1 g por unidade de dosagem.

[0131] As formas de dosagem oral líquidas podem ser apresentadas como por exemplo elixires, xaropes, gotas orais ou uma cápsula cheia de líquido. As formas de dosagem oral líquidas podem ser também apresentadas como pós para uma solução ou suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso. Exemplos de excipientes adequados para formulação oral líquida incluem, mas não estão limitados a, etanol, propilenoglicol, glicerol, polietilenoglicóis, poloxâmeros, sorbitol, polissorbato, mono e di-glicerídeos, ciclodextrinas, óleo de coco, óleo de palma e água. As formas de dosagem oral líquidas podem por exemplo ser preparadas por dissolução ou suspensão do ingrediente ativo em um líquido aquoso ou não aquoso ou por incorporação do ingrediente ativo em uma emulsão líquida óleo-em-água ou água-em-óleo.

[0132] Podem ser usados excipientes adicionais em formulações orais sólidas e líquidas, tais como corantes, aromatizantes e conservantes, etc.

[0133] As composições farmacêuticas para administração parenteral incluem soluções, dispersões, suspensões ou emulsões para injeção ou infusão aquosas e não aquosas estéreis, concentrados para injeção bem como pós estéreis a serem reconstituídos em soluções ou dispersões para injeção ou infusão estéreis antes do uso. Exemplos de excipientes adequados para formulação parenteral incluem, mas não estão limitados a, água, óleo de coco, óleo de palma e soluções de ciclodextrinas. As formulações aquosas devem ser adequadamente tamponadas se necessário e tornadas isotônicas com solução salina ou glucose suficiente.

[0134] Outros tipos de composições farmacêuticas incluem supositórios, inalantes, cremes, géis, pensos dérmicos, implantes e formulações para administração bucal ou sublingual.

[0135] É um requisito que os excipientes usados para qualquer formulação farmacêutica cumpram com a via de administração pretendida e sejam compatíveis com os ingredientes ativos.

5. Compostos da Invenção Tabela 1: Compostos da invenção exemplificados Exemplo Nome estrutura Composto ácido (R)-2-amino-3-[[7- 1a tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1b etiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[[7- 1c (difluorometil)tieno[3,2-

Exemplo Nome estrutura b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1d ciclopropiltieno[3,2- b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1e metiltieno[3,2-b]piridina- 2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1f isopropiltieno[3,2- b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[[7-(2- 1g etilfenil)tieno[3,2- b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1h metoxitieno[3,2-b]piridina- 2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[[7- 1i (trifluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

Exemplo Nome estrutura Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1j etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1k isopropoxitieno[3,2- b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1l bromotieno[3,2-b]piridina- 2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(7- 1m hidroximetiltieno[3,2- b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[[7- 1n (fluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico Composto ácido (R)-2-amino-3-[(6- 1o fluoro-7-metil-tieno[3,2- b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

Exemplo Nome estrutura Composto ácido (R)-2-amino-3-[(6,7- 1p dimetiltieno[3,2-b]piridina- 2- carbonil)amino]propanoico

6. Seção Experimental a. Esquemas Gerais para preparação de compostos da invenção

[0136] Os compostos da presente invenção da fórmula geral I, em que R 1, R2, R3 e R4 são como definidos acima, podem ser preparados pelos métodos delineados nos seguintes Esquemas reacionais 1-15 e nos exemplos. Nos métodos descritos é possível usar variantes ou modificações, que são elas próprias conhecidas de químicos peritos na técnica ou que poderiam ser aparentes ao perito em esta técnica. Além do mais, outros métodos para preparação de compostos da invenção serão prontamente aparentes ao perito na técnica à luz dos seguintes esquemas reacionais e exemplos.

[0137] Os esquemas podem envolver o uso de grupos protetores seletivos durante a síntese dos compostos da invenção. O perito na técnica será capaz de selecionar o grupo protetor apropriado para uma reação particular. Pode ser necessário incorporar estratégias de proteção e desproteção para substituintes tais como grupos amino, amido, ácido carboxílico e hidroxila nos métodos de síntese descritos abaixo para sintetizar os compostos da Fórmula I. Métodos de proteção e desproteção de tais grupos são bem conhecidos na técnica e podem ser encontrados em T. Green, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 1991, 2ª Edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque.

[0138] Os esquemas em esta seção são representativos de métodos úteis na síntese dos compostos da presente invenção. Não se destinam a restringir o escopo da invenção de modo algum.

Esquema 1

[0139] Os compostos da fórmula geral I (Esquema 1) podem ser preparados a partir de compostos com a fórmula geral IV por procedimentos de desproteção padrão. Como um exemplo, os compostos da fórmula geral I (Esquema 1) podem ser preparados a partir de compostos com a fórmula geral IV onde Pg1 é Cbz e Pg2 é benzila usando condições tais como HBr em ácido acético.

[0140] Os compostos com a fórmula geral IV podem ser preparados por reação de aminas protegidas da fórmula geral III com ácidos carboxílicos (ou seu sal) da fórmula geral II por acoplamento de peptídeo padrão tal como usando Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio na presença de uma base tal como N,N-di-isopropiletilamina em um solvente tal como N,N-dimetilformamida. Esquema 2

[0141] Ácidos tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílicos (ou seu sal) da fórmula geral II (Esquema 2) podem ser obtidos a partir de tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V por desprotonação a baixa temperatura usando uma base tal como di-isopropilamida de lítio (LDA) em um solvente tal como tetra- hidrofurano (THF) seguida pela adição de dióxido de carbono VI e permissão para que a mistura reacional alcance a temperatura ambiente. Esquema 3

[0142] A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V onde R4 é Cl está comercialmente disponível. A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V onde R4 é Br (Esquema 3) pode ser obtida por tratamento do composto Va com um reagente tal como Oxibrometo de fósforo (V) VII a temperatura elevada. Esquema 4

[0143] A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral Vc (Esquema 4) pode ser obtida por tratamento do composto Vb sob condições reacionais tais como HI em água temperatura elevada. Esquema 5

[0144] A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V (Esquema 5) onde R4 é alcóxi C1-6 pode ser obtida por tratamento do composto Vb sob condições reacionais tais como na presença de um álcool ROH IX, desprotonado por uma base tal como sódio, a temperatura elevada. Esquema 6

[0145] A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V (Esquema 6) onde R4 pode ser trifluorometila como descrito na Fórmula geral I pode ser obtida por tratamento do composto Vc, sob condições reacionais tais como na presença de catalisador de metal tal como iodeto de cobre, um reagente tal como fluoreto de potássio e um precursor perfluorado tal como trimetil(trifluorometil)silano (TMSCF3) X. Esquema 7

[0146] A tieno[3,2-b]piridina da fórmula geral V (Esquema 7) onde R4 pode ser -CH2-OH como descrito na Fórmula geral I pode ser obtida a partir do composto XII, por tratamento com um agente redutor tal como boro-hidreto de sódio.

O composto XII pode ser obtido a partir do composto XI em condições reacionais tais como ácido clorídrico em metanol.

O composto XI pode ser obtido a partir do composto Vb usando um reagente tal como cianeto de zinco na presença de catalisadores de metal tais como [1,1′- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano e bis(dibenzilidenoacetona)paládio e zinco.

Esquema 8

[0147] O ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico da fórmula geral II (ou seu sal) (Esquema 8) onde R4 pode ser uma etila como descrito na Fórmula geral I pode ser preparado a partir do éster correspondente onde Pg pode ser metila como nos compostos da fórmula geral XVI por hidrólise sob condições aquosas em uma variedade de condições conhecidas dos químicos peritos na técnica. Os compostos da fórmula geral XVI podem ser obtidos a partir de compostos da fórmula geral XV, onde X pode ser hidrogênio, sob condições reacionais tais como hidrogenação na presença de um catalisador tal como paládio em carbono. Os compostos da fórmula geral XV podem ser obtidos por reação de compostos da fórmula geral XIII com reagentes da fórmula geral XIV na presença de um catalisador tal como [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano e uma base tal como carbonato de potássio. Os compostos da fórmula geral XIII onde Pg é metila podem ser obtidos a partir de compostos da fórmula geral IIa por tratamento com um reagente tal como cloreto de tionila em metanol como solvente. Esquema 9

[0148] Os compostos da fórmula geral II (ou seu sal) onde R4 é como descrito para a Fórmula I (Esquema 9) podem ser obtidos por reação de compostos da fórmula geral IIb com reagentes da fórmula geral XVII sob condições reacionais tais como na presença de um catalisador tal como [1,1′- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano ou [1,1′-Bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) e uma base tal como carbonato de sódio.

Esquema 10

[0149] O ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (ou seu sal) da fórmula geral II (Esquema 10) onde R4 pode ser difluorometila como descrito na Fórmula geral I pode ser preparado a partir do éster correspondente onde Pg pode ser metila como nos compostos da fórmula geral XIX por hidrólise em condições aquosas em uma variedade de condições conhecidas dos químicos peritos na técnica. Os compostos da fórmula geral XIX onde R4 pode ser difluorometila podem ser preparados por tratamento de um composto da fórmula geral XVIII com reagentes tais como trifluoreto de (dietilamino)enxofre. Os compostos da fórmula geral XVIII podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XVa, na presença de ozono, seguido por tratamento com um reagente tal como trifenilfosfina. Esquema 11

[0150] O ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico da fórmula geral II, onde R1 é hidrogênio (ou seu sal) (Esquema 11), pode ser preparado a partir do éster correspondente onde Pg pode ser metila como nos compostos da fórmula geral XXII por hidrólise sob condições aquosas conhecidas dos químicos peritos na técnica. Os compostos da fórmula geral XXII podem ser preparados por reação de aldeídos da fórmula geral XX com um reagente da fórmula geral XXI na presença de uma base tal como trietilamina. Esquema 12

[0151] Os aldeídos da fórmula geral XX (Esquema 12) podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXV usando um reagente redutor tal como hidreto de di-isobutilalumínio. Os compostos da fórmula geral XXV podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXIII, onde X é um halogênio tal como iodo, por reação com um reagente tal como XXIV na presença de um catalisador tal como [1,1'- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano e uma base tal como fosfato de potássio. Os compostos da fórmula geral XXIII podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXII, através de desprotonação usando uma base tal como di-isopropilamida de lítio seguida pela adição de uma espécie de halogênio eletrofílico, tal como iodo molecular. Esquema 13

[0152] Os aldeídos da fórmula geral XX (Esquema 13) podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXIX, sob condições reacionais tais como na presença de ozono, seguido por tratamento com reagente tal como trifenilfosfina. Os compostos da fórmula geral XXIX podem ser obtidos por reação de compostos da fórmula geral XXVIII com reagentes da fórmula geral XIV na presença de um catalisador tal como [1,1'- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano e uma base tal como carbonato de potássio. Os compostos da fórmula geral XXVIII podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXVII, onde X é um halogênio tal como iodo, por reação com um reagente tal como XXIV na presença de um catalisador tal como [1,1'- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II), complexo com diclorometano e uma base tal como carbonato de potássio. Os compostos da fórmula geral XXVII podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral XXVI, através de desprotonação usando uma base tal como di-isopropilamida de lítio seguida pela adição de uma espécie de halogênio eletrofílico tal como iodo molecular. Esquema 14

[0153] Os compostos da fórmula IV (Esquema 14) onde R4 = -CH2F podem ser preparados a partir de compostos da fórmula geral IV onde R4 = -CH2OH usando reagentes tais como trifluoreto de (dietilamino)enxofre. Esquema 15

[0154] Os compostos da fórmula geral I onde R4 é isopropila (Esquema 15) podem ser preparados a partir de compostos com a fórmula geral XXXI sob condições reacionais tais como hidrogenação na presença de um catalisador tal como paládio em carbono. Os compostos com a fórmula geral XXXI podem ser preparados por reação de aminas protegidas da fórmula geral III com ácidos carboxílicos da fórmula geral XXX por métodos de acoplamento de peptídeo padrão tal como usando Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-

tetrametilurônio na presença de uma base tal como N,N-di-isopropiletilamina em um solvente tal como N,N-dimetilformamida. Os compostos da fórmula geral XXX podem ser obtidos por reação de compostos da fórmula geral IIa, onde X é Cl ou Br respectivamente, com um reagente da fórmula XIV sob condições reacionais tais como na presença de um catalisador tal como [1,1′-Bis(di-terc- butilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) e uma base tal como carbonato de potássio. b. Métodos Gerais Métodos de LC-MS

[0155] Os Dados analíticos de LC-MS foram obtidos usando um dos métodos identificados abaixo.

[0156] Método AA: Foi usado um UPLC-MS Acquity da Waters. Coluna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 µm; 2,1 x 50 mm; Temperatura da coluna: 60°C; Sistema solvente: A = água/ácido trifluoroacético (99,965:0,035) e B = acetonitrila/água/ácido trifluoroacético (94,965:5:0,035); Método: Eluição com gradiente linear com A:B = 90:10 a 0:100 em 1,0 minutos e com um caudal de 1,2 mL/min.

[0157] Método BB: Foi usado um UPLC-MS Acquity da Waters. Coluna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 µm; 2,1 x 50 mm; Temperatura da coluna: 60°C; Sistema solvente: A = água/ácido trifluoroacético (99,5:0,5) e B = acetonitrila/água/ácido trifluoroacético (94,965:5:0,035); Método: Eluição com gradiente linear com A:B = 90:10 a 0:100 em 1,0 minutos e com um caudal de 1,2 mL/min. HPLC Preparativa

[0158] HPLC Preparativa (Método A): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, LC-8A LCMS2010 da SHIMADZU; Coluna: Triart C18 150*30 5 μm da YMC-Actus; Fase Móvel A: água (HCl a 0,05% v/v); Fase móvel

B: MeCN; Gradiente: B de 5% a 35% em 10 min, depois manter a 100% durante 3 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 35°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm

[0159] HPLC Preparativa (Método B): Instrumento: GX-215 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Triart C18 150*30 5 μm da YMC-Actus; Fase Móvel A: água (HCl a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 0% a 28% em 10 min, depois manter a 100% durante 3 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm

[0160] HPLC Preparativa (Método C): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 μm; Fase Móvel A: água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: de 42% a 72% em 10 min, depois manter a 100% durante 2,5 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 25°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm

[0161] HPLC Preparativa (Método D): Instrumento: GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Gemini 150*25 mm*5 μm; Fase Móvel A: água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 52% a 82% em 10 min, depois manter a 100% durante 2 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 30°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0162] HPLC Preparativa (Método E): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 μm; Fase Móvel A: água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 64% a 94% em 10 min, depois manter a 100% durante 2,5 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 25°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0163] HPLC Preparativa (Método F): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 μm; Fase Móvel A: água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: de 57% a 87% em 10 min, depois manter a 100% durante 2,5 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 25°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0164] HPLC Preparativa (Método G): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-215 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: DYA-5 C18 150*25 mm*5 μm; Fase Móvel A: água (HCl a 0,05% v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 6% a 36% em 10 min, depois manter a 100% durante 3 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 35°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0165] HPLC Preparativa (Método H): Instrumento: GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Gemini C18 250*50*10 μm da Phenomenex; Fase Móvel A: água (NH4HCO3 a 10 mM); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 10% a 40% em 11,2 min, manter a 100% durante 2,5 min; Caudal (mL/min): 22; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm

[0166] HPLC Preparativa (Método I): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Durashell C18 150 mm × 25 mm × 5 µm da Agela; Fase Móvel A: água (FA a 0,225%, v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 32% a 62% em 10 min, manter B a 100% durante 2 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm

[0167] HPLC Preparativa (Método J): Instrumento: GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Xbridge 150*25*5 μm da Waters; Fase Móvel A: água (NH4HCO3 a 10 mM); Fase móvel B: MeCN;

Gradiente: B de 40% a 66% em 8,4 min, depois manter a 100% durante 2 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 30°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0168] HPLC Preparativa (Método K): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: ASB 150*25 mm*5 μm da Agela; Fase Móvel A: água (HCl a 0,05%); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 0% a 25% em 8 min, depois manter a 100% durante 0 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0169] HPLC Preparativa (Método L): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: ASB 150*25 mm*5 μm da Agela; Fase Móvel A: água (HCl a 0,05%); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 0% a 25% em 8 min, depois manter a 100% durante 0 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0170] HPLC Preparativa (Método M): Instrumento: Manuseador de Líquidos GX-281 da Gilson, Bomba 322 da Gilson, Detector de UV 156 da Gilson; Coluna: Durashell C18 150 mm × 25 mm × 5 µm da Agela; Fase Móvel A: água (FA a 0,225%, v/v); Fase móvel B: MeCN; Gradiente: B de 40% a 70% em 10 min, manter B a 100% durante 0 min; Caudal (mL/min): 25; Temperatura da coluna: 40°C e Comprimento de onda: 220 nm 254 nm.

[0171] Os espectros de 1H RMN foram registrados a 300, 400, 500 ou 600 MHz em instrumentos Avance da Bruker. Foi usado TMS como padrão interno de referência. Os valores do desvio químico são expressos em ppm. São usadas as seguintes abreviaturas para a multiplicidade de sinais de RMN: s = singleto, d = dupleto, t = tripleto, q = quarteto, qui = quinteto, h = hepteto, dd = dupleto duplo, td = tripleto duplo, qd = quarteto duplo, tt = tripleto de tripletos, m = multipleto, sl = singleto largo e l = sinal largo.

[0172] As abreviaturas são de acordo com o ACS Style Guide: “The ACS Style guide – A manual for authors and editors” Janet S. Dodd, Ed. 1997, ISBN: 0841234620 c. Preparação dos intermediários Intermediário 1 Cloreto de (R)-3-(benziloxi)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-oxopropan- 1-amínio

[0173] A fenilmetanol (56,0 mL) foi adicionado cloreto de tionila (2,1 g, 17,6 mmol) gota a gota a 28°C. Após completação da adição, ácido (R)-3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoico (3,8 g, 15,9 mmol) foi adicionado em várias porções e a reação foi agitada durante 24 horas a 28°C. O álcool benzílico em excesso foi removido a 80°C/0,02 bar e o resíduo foi agitado em ciclo-hexano (35 mL) durante 16 horas. A filtração e a trituração do bolo de filtração com MTBE (50 mL) originaram o composto do título (3,0 g). LCMS (MH+): (m/z) = 329,2, tR (min, Método AA)= 0,52. Intermediário 2 7-Clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio

[0174] A uma solução de 7-clorotieno[3,2-b]piridina (10,0 g, 58,9 mmol) em THF (150 mL) foi adicionado gota a gota lítio de n-butila (n-BuLi) (2,5 M em hexano, 23,6 mL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C durante 30 minutos. Depois, dióxido de carbono gasoso (15 psi) foi borbulhado através da solução reacional e a mistura foi deixada a aquecer até 20°C ao longo de um período de 16 horas. A mistura foi diluída com THF (20 mL) e filtrada. O bolo filtrado foi coletado e seco para dar 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (12 g). d. Preparação de compostos da invenção exemplificados Composto 1a ácido (R)-2-amino-3-[[7-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0175] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[[7-tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0176] A uma mistura de 3-fluoropicolinaldeído (500 mg, 4,0 mmol) e 2- mercaptoacetato de metila (830 mg, 7,82 mmol, 0,7 mL) em dimetilformamida (DMF) (10 mL) foi adicionada trietilamina (TEA) (1,1 mL) a 20°C. A mistura foi agitada a 100°C durante 4 horas. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL x 2), seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por CombiFlash (Éter de petróleo: Acetato de etila = 0~30%) para dar tieno[3,2-b]piridina-2- carboxilato de metila (620 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,77 (dd, J=4,50, 1,37 Hz, 1 H), 8,22 (d, J=0,78 Hz, 1 H), 8,19-8,21 (m, 1 H), 7,35 (dd, J=8,22, 4,50 Hz, 1 H), 3,98 (s, 3 H). Passo 2: ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0177] Uma mistura de tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (200 mg, 1,04 mmol) e LiOHxH2O (87 mg, 2,1 mmol) em MeOH (2 mL), tetra- hidrofurano (THF) (2 mL) e H2O (2 mL) foi agitada a 25°C durante 16 h. A mistura foi extraída com éter de terc-butilmetila (MTBE) (5 mL x 2). A fase aquosa foi ajustada até pH = 3~4 com HCl (2 M, 1 mL). O precipitado foi filtrado. O bolo de filtração foi seco para dar ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (160 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,77 (dd, J=4,27, 1,25 Hz, 1 H), 8,56 (d, J=8,28 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,51 (dd, J=8,28, 4,52 Hz, 1 H). Passo 3: (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(tieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de benzila

[0178] Uma mistura de ácido tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (160 mg, 0,9 mmol), 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (326 mg, sal de HCl), Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′- tetrametilurônio (430 mg) e N,N-di-isopropiletilamina (0,8 mL) em DMF (5 mL) foi agitada a 25°C durante 15 h. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL x 2), seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por CombiFlash (Éter de petróleo: Acetato de etila = 0~80%) para dar (R)-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (300 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,73 (dd, J=4,41, 1,32 Hz, 1 H), 8,17 (d, J=8,16 Hz, 1 H), 8,03 - 8,03 (m, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,23 - 7,36 (m, 12 H), 6,03-6,05 (m, 1 H), 5,20 (s, 2 H), 5,11 (s, 2 H), 4,62-4,63 (m, 1 H), 3,80 - 4,00 (m, 2 H). Passo 4: ácido (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(tieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoico

[0179] Uma mistura do composto (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3- (tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (100 mg, 204,27 mmol) e LiOHxH2O (17 mg) em THF (2 mL), H2O (2 mL) e MeOH (2 mL) foi agitada a 25°C durante 15 h. A mistura foi extraída com MTBE (5 mL x 2). A fase aquosa foi ajustada até pH = 3~4 com HCl (2 M, 1,5 mL). O precipitado foi filtrado. O bolo de filtração foi seco para dar ácido (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3- (tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (45 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,01-9,04 (m, 1 H), 8,74 (dd, J=4,52, 1,51 Hz, 1 H), 8,53 (d, J=7,53 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,6-7,62 (m, 1 H), 7,46 (dd, J=8,28, 4,52 Hz, 1 H), 7,23 - 7,38 (m, 5 H), 4,97 - 5,10 (m, 2 H), 4,24 - 4,35 (m, 1 H), 3,51 - 3,75 (m, 2 H). Passo 5: ácido (R)-2-amino-3-[[7-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0180] Uma mistura do composto ácido (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)- 3-(tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (40 mg, 0,10 mmol) e HBr (2 mL, 33% em ácido acético) foi agitada a 25°C durante 1 h. A mistura foi diluída com MTBE (3 mL) e decantada com MTBE (3 mL x 3). O produto foi liofilizado para dar ácido (R)-2-amino-3-(tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico como um sal com moléculas de ácido bromídrico (28 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,29-9,31 (m, 1 H), 8,84 (d, J=4,52 Hz, 1 H), 8,71-8,73 (m, 1 H), 8,38-8,39 (m, 3 H), 8,33 (s, 1 H), 7,61 (dd, J=7,28, 4,77 Hz, 1 H), 4,13 - 4,22 (m, 1 H), 3,79 - 3,88 (m, 1 H), 3,70 - 3,79 (m, 1 H). LCMS (MH+): m/z = 266,1, tR (min, Método BB) = 0,16. [α]20D = -20,0 (c = 2,0 mg/mL, CH3OH) Composto 1b ácido (R)-2-amino-3-[(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0181] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0182] A uma solução de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (0,5 g, 2,28 mmol) em MeOH (10 mL), SOCl2 (813 mg, 6,83 mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi aquecida a 50°C durante 39 horas. A mistura foi concentrada para dar 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (0,5 g, rendimento de 75%) como um sal de HCl. LC-MS: tR = 0,844 min, m/z = 227,9 [M + H]+. Passo 2: 7-viniltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0183] A uma solução de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (1,2 g, 5,27 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (974 mg, 6,32 mmol) em dioxano (15 mL) e H2O (1,5 mL) foram adicionados [1,1′- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (Pd(dppf)Cl2) (386 mg, 0,53 mmol) e K2CO3 (2,19 g, 15,81 mmol) sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 100°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com água (20 mL) e EtOAc (20 mL) e filtrada. O filtrado foi extraído com EtOAc (20 mL x 3), e as camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por Combi Flash (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 20%) para dar 7-viniltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (920 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,75 (d, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,36 (d, 1H), 6,93 (dd, 1H), 6,22 (d, 1H), 5,79 (d, 1H), 4,00 (s, 3H). Passo 3: 7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0184] A uma solução de 7-viniltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (0,17 g, 0,78 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionada Pd/C (30 mg, Pd a 10%, água a 50%) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (balão) a 10°C durante 3 horas. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi concentrado para dar 7-etiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (0,1 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,69 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,20 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 2,93 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,41 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Passo 4: ácido 7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0185] A uma solução de 7-etiltieno[3,2-b]piridine-2-carboxilato de metila (0,1 g, 0,45 mmol) em uma mistura de MeOH (4 mL), H2O (2 mL) e THF (4 mL) foi adicionado LiOHxH2O (38 mg, 0,90 mmol). A mistura foi agitada a 10°C durante 16 horas. HCl aquoso foi usado para ajustar o pH até 3. A mistura reacional foi concentrada para dar ácido 7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (150 mg). 1 H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 8,94 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,90 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,23 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,49 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Passo 5: 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0186] A uma solução de ácido 7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (0,09 g) e 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (171 mg, 0,52 mmol, sal de HCl) em DMF (10 mL) foram adicionados Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (209 mg, 0,65 mmol) e N,N-di- isopropiletilamina (169 mg, 1,30 mmol). A mistura reacional foi agitada a 10°C durante 16 horas. A mistura reacional foi extinta com água (20 mL), extraída com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL × 3), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica gel (éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0% a 100%) para dar 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (70 mg). LC-MS: tR = 0,911 min, m/z = 518,1 [M + H]+. Passo 6: ácido (R)-2-amino-3-[(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0187] Uma solução de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-etiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (70 mg, 0,14 mmol) em HBr a 30% em AcOH (2 mL) foi aquecida a 50°C durante 16 horas. A mistura reacional foi concentrada e AcOH (2 mL) adicionado. O precipitado amarelo-claro formado foi coletado por filtração, lavado com AcOH (2 mL) e seco para dar ácido (R)-2- amino-3-(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (23 mg) como o sal de HBr. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 8,82 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,43-8,33 (m, 4H), 7,56 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,20-4,10 (m, 1H), 3,87-3,81 (m, 1H), 3,77-3,70 (m, 1H), 3,00 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,35 (t, J = 7,6 Hz, 3H). LCMS (MH+): m/z = 294, tR (min, Método BB) = 0,24. [α]20D = -2,0 (c = 1,0 mg/mL, CH3OH). Composto 1c ácido (R)-2-amino-3-[[7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0188] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[[7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-Formiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0189] Ozônio foi borbulhado em uma solução de 7-viniltieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (700 mg, 3,19 mmol) em MeOH (30 mL) a - 78°C durante 10 min, depois a mistura foi aquecida até 25°C. PPh3 (1,26 g, 4,79 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por CombiFlash (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 30%) para dar 7-formiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (550 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10,35 (s, 1H), 9,10 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,82 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H). Passo 2: 7-(Difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0190] A uma solução de 7-formiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (550 mg, 2,49 mmol) em diclorometano (DCM) (15 mL) foi adicionado trifluoreto de (dietilamino)enxofre (602 mg, 3,74 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas. A mistura foi extinta com água (0,5 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por CombiFlash (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 30%) para dar 7-(difluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (350 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,89 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,48 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,17 - 6,73 (t, 1H), 4,01 (s, 3H). Passo 3: ácido 7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0191] A uma solução de 7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxilato de metila (440 mg, 1,81 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado LiOH.H2O (228 mg, 5,43 mmol) dissolvido em água (1 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 3 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (10 mL) e lavado com EtOAc (10 mL), a camada orgânica foi descartada. A camada aquosa foi acidificada por HCl a 2N (2 mL) e o precipitado foi coletado para dar ácido 7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (320 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,94 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,73 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,63 - 7,32 (m, 1H). Passo 4: 2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(difluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0192] A uma solução de ácido 7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (320 mg, 1,40 mmol) e 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (511 mg, 1,40 mmol, sal de HCl) em DMF (8 mL) foram adicionados Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol- 1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (674 mg, 2,10 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (543 mg, 4,20 mmol). A mistura foi agitada a 25°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 mL) e salmoura (20 mL) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por Combi Flash

(éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 60%) para dar 2- (((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (600 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,85 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,46 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,39 - 7,27 (m, 10H), 6,91 (t, 1H), 6,05 (d l, 1H), 5,22 (s, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,68 - 4,59 (m, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 1H), 3,91 - 3,82 (m, 1H). Passo 5: Preparação de ácido (R)-2-amino-3-[[7-(difluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico

[0193] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- (difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (200 mg, 0,37 mmol) em HBr a 33% em AcOH (4 mL) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método A) para dar ácido (R)-2-amino-3-(7- (difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (86 mg) como sal de HCl. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (t l, J=6,0 Hz, 1H), 8,91 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,66-8,58 (m, 3H), 8,55 (s, 1H), 7,69 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,47 (t, 1H), 4,22-4,12 (m, 1H), 3,94 - 3,76 (m, 2H).

[0194] LCMS (MH+): m/z = 316,2, tR (min, Método BB) = 0,29, [α]20D = -6,5 (c = 2 mg/mL, DMSO). Composto 1d ácido (R)-2-amino-3-[(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0195] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: ácido 7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0196] Uma mistura de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (500 mg, 2,46 mmol), ácido ciclopropilborônico (423 mg, 4,92 mmol) e K 3PO4 (1,04 g, 4,92 mmol) em dioxano (10 mL) e H2O (2 mL) foi agitada sob condição de N2. Depois, PdCl2(dtbpf) (80 mg, 0,123 mmol) foi adicionado e a mistura agitada a 110°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (15 mL), extraída com acetato de etila (20 mL). A fase orgânica foi descartada, a fase de água foi ajustada quanto ao pH (4~5) por HCl aq (3 M) e concentrada para originar ácido 7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (700 mg). Passo 2: (R)-2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-ciclopropiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila

[0197] Uma mistura de ácido 7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (650 mg, 2,89 mmol), (R)-3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de benzila (1,05 g, 2,89 mmol, sal de HCl), N,N-di-isopropiletilamina (1,12 g, 8,67 mmol) e Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (1,39 g, 4,34 mmol) em DMF (5 mL) foi agitada a 30°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 2). As fases orgânicas combinadas foram lavadas por salmoura (30 mL x 3), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por combiFlash (Acetato de etila: Éter de petróleo = 0~50%) para dar (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (260 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,05 (l, 1H), 8,60 (d, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,89 (d l, 1H), 7,36 - 7,22 (m, 10H), 7,04 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 5,06 (m, 2H), 4,47 - 4,42 (m, 1H), 3,77 - 3,65 (m, 2H), 2,10 - 2,18 (m, 1H), 1,24 - 1,17 (m, 2H), 1,05 - 0,96 (m, 2H). Passo 3: ácido (R)-2-amino-3-[(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0198] Uma mistura de (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (80,0 mg, 0,15 mmol) em HBr/AcOH (3 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada on vacuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método B) para dar ácido (R)-2-amino-3-(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoico (15 mg) como sal de HCl.

H RMN (400MHz, D2O) δ 8,59 - 8,52 (m, 1H), 8,09 - 8,02 (m, 1H), 7,24 - 7,14 (m, 1H), 4,21 - 4,12 (m, 1H), 3,95 (dd, 1H), 3,85 (dd, 1H), 2,26 (m, 1H), 1,45 (dd, 2H), 1,24 - 1,14 (m, 2H). LCMS (MH+): m/z = 306,2, tR (min, Método BB) = 0,22. [α]20D = 12,0 (c = 0,25mg/mL,CH3OH). Composto 1e ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0199] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: Ácido 7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0200] Uma mistura de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (300 mg, 1,37 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (344 mg, 2,74 mmol, 0,4 mL), PdCl2(dtbpf) (90 mg, 0,14 mmol) e K3PO4 (727 mg, 3,43 mmol) em H2O (4 mL) e dioxano (12 mL) em tubo selado foi aquecida até 80°C durante 16 horas sob N2. A mistura foi filtrada. A fase aquosa foi ajustada até pH = 3~4 com HCl (2 M, 4 mL). A mistura foi concentrada para dar ácido 7-metiltieno[3,2-

b]piridina-2-carboxílico (260 mg). O produto em bruto foi usado para o próximo passo sem qualquer purificação adicional. Passo 2: 2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0201] Uma mistura de ácido 7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (260 mg, 1,35 mmol), 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)- benzila (491 mg, 1,35 mmol, sal de HCl), tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1- il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (648 mg, 2,02 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (870 mg, 6,73 mmol, 1 mL) em DMF (10 mL) foi agitada a 25°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL x 2), seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa (Método C) para dar 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (280 mg). 1 H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,61 (d, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,39 - 7,25 (m, 11H), 7,13 (d, 1H), 6,11 (m, 1H), 5,20 (s, 2H), 5,10 (s, 2H), 4,69 - 4,56 (m, 1H), 4,01 - 3,80 (m, 2H), 2,58 (s, 3H). Passo 3: ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0202] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-metiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg, 0,20 mmol) e

HBr/AcOH (3 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com MTBE (3 mL) e H2O (3 mL). A fase aquosa foi extraída com MTBE (3 mL x 2). A fase aquosa foi liofilizada para dar ácido (R)-2-amino-3-(7-metiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoico (50 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s l, 1H), 8,91 - 8,80 (m, 1H), 8,54 - 8,32 (m, 4H), 7,61 (s l, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 1H), 3,90 - 3,69 (m, 2H), 2,71 (s, 3H). LCMS (MH+): m/z = 280,1, tR (min, Método BB) = 0,17. [α]20D = -11,0 (c = 1,0 mg/mL, CH3OH). Composto 1f ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0203] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-isopropiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: ácido 7-(prop-1-en-2-il)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0204] Uma mistura de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (300 mg, 1,37 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano

(230 mg, 1,37 mmol), PdCl2(dtbpf) (10 mg, 0,01 mmol) e K2CO3 (189 mg, 1,37 mmol) em dioxano (25 mL) e H2O (5 mL) foi agitada a 100°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL). A fase de água foi ajustada até pH (4~5) por HCl aq (3 M) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas por salmoura (20 mL x 3), secas sobre Na2SO4 anidro e concentradas. O produto ácido 7-(prop-1-en-2-il)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (160 mg) foi obtido e usado no próximo passo sem purificação adicional. 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,75 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,46 (d, J=4,8 Hz, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,63 (s, 1H), 2,23 (s, 3H). Passo 2: 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(prop-1-en-2-il)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0205] Uma mistura de ácido 7-(prop-1-en-2-il)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (150 mg, 0,69 mmol), 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (225 mg, 0,62 mmol, sal de HCl), N,N-di-isopropiletilamina (442 mg, 3,42 mmol) e tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (329 mg, 1,03 mmol) em DMF (5 mL) foi agitada a 30°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3 vezes). As fases orgânicas combinadas foram lavadas por salmoura (10 mL x 3 vezes), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método D) para originar 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(prop-1-en-2-il)tieno[3,2-b]piridina- 2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (93 mg).

H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,72 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,41 - 7,25 (m, 11H), 5,73 (s, 1H), 5,57 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,00 - 3,80 (m, 2H), 2,27 (s, 3H). Passo 3: ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0206] A uma solução de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(prop-1-en-2- il)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (90 mg, 0,170 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionada Pd/C (Pd a 10%, água a 50%, 100 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 25°C durante 16 horas, filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi transferido para HBr/AcOH (2 mL, 33%) e agitado a 50°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi lavado por MTBE (5 ML) e filtrado para dar ácido (R)-2-amino-3-(7-isopropiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoico (25 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,26 (l, 1H), 8,77 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,44 - 8,35 (m, 2H), 8,31 (s, 1H), 7,49 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,20-4,10 (m, 1H), 3,88 - 3,72 (m, 2H), 3,30-3,20 (m, 1H), 1,38 (d, J=6,8 Hz, 6H). LCMS (MH+): m/z = 308, tR (min, Método BB) = 0,28, [α]20D = -3,1 (c = 0,96 mg/mL,CH3OH). Composto 1g ácido (R)-2-amino-3-[[7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0207] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[[7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: Ácido 7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0208] 7-Clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (1,0 g, 4,55 mmol), ácido (2-etilfenil)borônico (1,16 g, 7,74 mmol), Na2CO3 (1,45 g, 13,6 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (333 mg, 0,46 mmol) em H2O (10 mL) e dioxano (20 mL) foram desgaseificados e depois aquecidos até 110°C durante 16 horas sob N2. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi diluído com H2O (10 mL) e extraído com acetato de etila (10 mL x 2). A fase aquosa foi ajustada até pH = 3~4 com HCl (2 M, 5 mL). O precipitado foi filtrado e seco para dar ácido 7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina- 2-carboxílico (700 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,86 (d, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,51 - 7,47 (m, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,40 - 7,36 (m, 1H), 7,35 - 7,32 (m, 1H), 2,45-2,43 (m, 2H), 0,97 (t, 3H) Passo 2: (R)-2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(2-etilfenil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila

[0209] Uma mistura de ácido 7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (200 mg, 0,71 mmol), 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (258 mg, 0,71 mmol, sal de HCl), tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (340 mg, 1,06 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (456 mg, 3,53 mmol) em DMF (10 mL) foi agitada a 25°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL x 2), seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método E) para dar (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3- (7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (200 mg). 1 H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,78 (d, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,47 - 7,38 (m, 2H), 7,36 - 7,25 (m, 12H), 7,22 (d, 1H), 7,08 (s l, 1H), 5,97 (s l, 1H), 5,19 (s, 2H), 5,10 (s, 2H), 4,60 - 4,59 (m, 1H), 3,98 - 3,78 (m, 2H), 2,55 - 2,42 (m, 2H), 1,04 (t, 3H). Passo 3: ácido (R)-2-amino-3-[[7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0210] Uma mistura de (R)-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(2- etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (60 mg, 0,10 mmol) e HBr/AcOH (3 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com MTBE (3 mL) e decantada com MTBE (3 mL x 3). O precipitado foi filtrado. O bolo de filtração foi seco para dar ácido (R)-2-amino-3-(7-(2- etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (43 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,24 - 9,22 (m, 1H), 8,87 (d, 1H), 8,41 - 8,26 (m, 4H), 7,54 - 7,44 (m, 3H), 7,41 - 7,36 (m, 1H), 7,35 - 7,30 (m, 1H), 4,24 - 3,77 (m, 2H), 3,74 - 3,69 (m, 1H), 2,45 - 2,43 (m, 2H), 0,96 (t, 3H). LCMS (MH+): m/z = 370,1, tR (min, Método BB) = 0,46, [α]20D = -6,67, (c = 1,5 mg/mL,CH3OH). Composto 1h ácido (R)-2-amino-3-[(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0211] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-metoxitieno[3,2-b]piridina

[0212] A MeOH (5,0 mL) foi adicionado Na (135 mg, 0,59 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, e 7-clorotieno[3,2-b]piridina (200 mg, 1,18 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada em um tubo fechado a 110 - 120°C durante outras 15 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto 7-metoxitieno[3,2-b]piridina (160 mg). 1 H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,57 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,70 (d, 1H), 4,04 (s, 3H). Passo 2: ácido 7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0213] A uma solução de 7-metoxitieno[3,2-b]piridina (150 mg, 0,90 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 0,5 mL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C durante 0,5 horas. CO2 foi borbulhado na solução durante 0,5 horas. A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante outras 15 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente. O resíduo foi diluído com água (20 mL) e HCl (2 M, até pH~5), filtrado e o bolo de filtração foi concentrado sob pressão reduzida para dar ácido 7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (120 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,56 (l, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,04 (l, 1H), 4,01 (s, 3H). Passo 3: (R)-2-(((Benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-metoxitieno[3,2-b]piridina- 2-carboxamido)propanoato de benzila

[0214] A uma solução de ácido 7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (120 mg, 0,57 mmol) e 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (207 mg, 0,63 mmol, sal de HCl) em DMF (5 mL) foram adicionados Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (276 mg, 0,86 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (370 mg, 2,87 mmol). A mistura foi agitada a 20-30°C durante 16 horas. O resíduo foi diluído com água (20 mL) e extraído com EtOAc (20 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (Eluente de Acetato de etila/Éter de petróleo a 0~100%) para dar (R)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-metoxitieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (48 mg). Passo 4: ácido (R)-2-amino-3-[(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0215] Uma solução de (R)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7- metoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de benzila (125 mg, 0,24 mol) em HBr/AcOH (5 mL, ~33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente para dar o composto ácido (R)-2-amino-3-(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoico (100 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (t, 1H), 9,00 (d, 1H), 8,40 - 8,30 (m, 4H), 7,52 (d, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,15 - 4,13 (m, 1H), 3,84 - 3,72 (m, 2H). LCMS (MH+): m/z = 296,2, tR (min, Método BB) = 0,28, [α]20D= -1,45, (c = 2,75 g/mL, CH3OH). Composto 1i ácido (R)-2-amino-3-[[7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0216] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[[7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-Iodotieno[3,2-b]piridina

[0217] Uma solução de 7-clorotieno[3,2-b]piridina (1,00 g, 5,90 mmol) em HI (10 mL, 45% em água) foi agitada a 130°C durante 16 horas. A mistura reacional foi resfriada até à temperatura ambiente, cuidadosamente extinta com Na2CO3 aq sat. até pH = 6~7 e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 10 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por CombiFlash (éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 5% a 10%) para dar 7-iodotieno[3,2-b]piridina (1,2 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,32 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,85 - 7,77 (m, 2H), 7,66 (d, J = 5,2 Hz, 1H). Passo 2: 7-(Trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina

[0218] A uma solução de 7-iodotieno[3,2-b]piridina (500 mg, 1,92 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados CuI (401 mg, 2,11 mmol), KF (334 mg, 5,75 mmol) e TMSCF3 (327 mg, 2,30 mmol). A mistura reacional foi agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura reacional foi extinta com água (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 10 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por CombiFlash (éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0% a 3%) para dar 7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina (140 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,87 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 4,8 Hz, 1H). Passo 3: Ácido 7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0219] Uma solução de 7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina (120 mg, 0,59 mmol) em THF (2 mL) foi resfriada até -78 ºC e foi tratada com n-BuLi (solução a 2,5 M em hexanos, 0,5 mL, 1,25 mmol) e agitada a -78°C durante 30 minutos. CO2 foi borbulhado através da mistura reacional e agitado a -78°C durante 1 hora. A mistura reacional foi extinta com água (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 10 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas para dar ácido 7- (trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (70 mg). Passo 4: 2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(trifluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0220] A uma solução de ácido 7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (130 mg, 0,52 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados 3-amino-2-

(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (192 mg, 0,52 mmol, sal de HCl), Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (253 mg, 0,79 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (203 mg, 1,58 mmol). A mistura reacional foi agitada a 25°C durante 16 horas. A mistura reacional foi extinta com água (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 10 mL), secas sobre Na 2SO4 e concentradas. O resíduo foi adicionalmente purificado por HPLC Preparativa (Método F) para dar 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- (trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (50 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,91 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,58 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,40-7,28 (m, 10H), 5,93 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,66 - 4,60 (m, 1H), 4,05 - 3,92 (m, 1H), 3,88 - 3,77 (m, 1H). Passo 5: ácido (R)-2-amino-3-[[7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0221] A uma solução de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- (trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (50 mg, 0,90 mmol) em HBr/AcOH (2 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa (Método G) para dar ácido (R)-2-amino-3-(7- (trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (8 mg) como sal de HCl. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (l, 1H), 9,02 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,63 (l, 4H), 7,93 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 1H), 3,79 - 3,77 (m, 2H).

LCMS (MH+): m/z = 334,1, tR (min, Método BB) = 0,36 min. [α]20D = -10,0 (c = 1,0 mg/mL, CH3OH). Composto 1j ácido (R)-2-amino-3-[(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0222] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: ácido 7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0223] Uma mistura de 7-clorotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (300 mg, 1,37 mmol) e NaOEt (372 mg, 5,47 mmol) em EtOH (20 mL) foi agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (20 mL), ajustada quanto ao pH (3~4) por HCl aq. (3 M) e extraída com acetato de etila (15 mL x 3). A fase orgânica combinada foi lavada por salmoura (15 mL x 3), seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada para dar ácido 7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (300 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,45 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,60 (d, J=6,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J=5,2 Hz, 1H), 4,29 (q, J=6,8 Hz, 2H), 1,39 (t, J=6,8 Hz, 3H).

Passo 2: (R)-benzil-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-etoxitieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato

[0224] Uma mistura de ácido 7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (250 mg, 1,12 mmol), 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)- benzila (368 mg, 1,01 mmol, sal de HCl), N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (434 mg, 3,36 mmol) e Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′- tetrametilurônio (TBTU) (539 mg, 1,68 mmol) em DMF (5 mL) foi agitada a 30°C durante 16 horas. A mistura foi vertida em água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas por salmoura (10 mL x 3), secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por combiFlash (Acetato de etila: Éter de petróleo = 0~75%) para dar (R)-benzil-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato (120 mg). 1 H RMN (400MHz, CDCl3) δ 8,58 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,39 - 7,27 (m, 10H), 7,11 (l, 1H), 6,73 (d, J=5,2 Hz, 1H), 5,99 (l, 1H), 5,21 (s, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,70-4,62 (m, 1H), 4,31 (q, J=7,2 Hz, 2H), 3,95 - 3,80 (m, 2H), 1,54 (t, J=7,2 Hz, 3H). Passo 3: ácido (R)-2-amino-3-[(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0225] Uma mistura de 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-etoxitieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (70 mg, 0,131 mmol) em

HBr/AcOH (2 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada in vacuo. O resíduo foi lavado com 10 mL de éter de terc- butilmetila:metanol (V:V 10:1) seguido por filtração. O resíduo filtrado foi dissolvido em água (5 mL) e liofilizado para dar ácido (R)-2-amino-3-(7- etoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (35 mg) como sal de HBr. 1H RMN (400MHz, CD3OD) δ 8,93 (d, J=6,8 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,60 (d, J=6,8 Hz, 1H), 4,70 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,38 - 4,32 (m, 1H), 4,10 (dd, J= 14,8, 4,0 Hz, 1H), 3,94 (dd, J= 14,7, 6,7 Hz, 1H), 1,63 (t, J=6,8 Hz, 3H). LCMS (MH+): m/z = 310,2, tR (min, Método BB) = 0,18. [α]20D = -5,7 (c = 0,7 mg/mL, CH3OH). Composto 1k ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0226] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina

[0227] A propan-2-ol (15 mL) foi adicionado Na (339 mg, 15 mmol). A mistura foi agitada a 50°C durante 1 hora e 7-clorotieno[3,2-b]piridina (500 mg,

2,95 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada a 110-120°C em um frasco fechado durante outras 15 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para dar 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina (320 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,51 (d, J=5,6 Hz, 1H), 7,66(d, J=5,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J=5,6 Hz, 1H), 6,70 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,84-4,81 (m, 1H), 1,37 (d, J=6,0 Hz, 6H). Passo 2: ácido 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0228] A uma solução de 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina (320 mg, 1,7 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 0,9 mL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C durante 0,5 horas. CO2 foi borbulhado na solução durante 0,5 horas. A mistura foi agitada a 20-30°C durante outras 15 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente. O resíduo foi diluído com água (20 mL) e o pH ajustado, usando HCl (2 M) até pH~5. A mistura foi filtrada e o bolo de filtração foi seco sob pressão reduzida para dar ácido 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (210 mg). 1 H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,58 (d, J=5,4 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,11 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,93-4,99 (m, 1H), 1,37 (d, J=6,0 Hz, 6H). Passo 3: Preparação de 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7- isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0229] A uma solução de ácido 7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (200 mg, 0,84 mmol) e 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (304 mg, 0,93 mmol, sal de HCl) em DMF (10 mL) foram adicionados tetrafluoroborato de O- (benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (406 mg, 1,3 mmol) e N,N-di- isopropiletilamina (545 mg, 4,2 mmol). A mistura foi agitada a 20-30°C durante 16 horas. O resíduo foi diluído com água (20 mL) e extraído com EtOAc (20 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL), secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (Eluente de Acetato de etila/Éter de petróleo a 0~90%) para dar o composto 2- (((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (86 mg). 1 H RMN (400MHz,CDCl3) δ 8,56 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,38 - 7,27 (m, 10H), 7,09 (l, 1H), 6,72 (d, J=5,6 Hz, 1H), 5,99 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 5,11 (s, 2H), 4,85-4,85 (m, 1H), 4,65-4,55 (m, 1H), 3,97 - 3,80 (m, 2H), 1,47 (d, J=5,6 Hz, 6H). Passo 4: ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0230] Uma solução de 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7- isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (80 mg, 0,15 mmol) em HBr/AcOH (10 mL, 33%) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa (Método H) para dar ácido (R)-2-amino-3-(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoico (26 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,06 (l, 1H), 8,54 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,57 (l, 2H), 7,08 (d, J=5,2 Hz, 1H), 5,02 - 4,90 (m, 1H), 3,69-3,65 (m, 1H), 3,55-3,40 (m, 2H), 1,36(d, J=6,0 Hz, 6H). LCMS (MH+): m/z = 324,2, tR (min, Método BB) = 0,24. [α]20D = 18 (c = 1 mg/mL, CH3OH). Composto 1l ácido (R)-2-amino-3-[(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0231] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 7-bromotieno[3,2-b]piridina

[0232] Uma mistura de tieno[3,2-b]piridin-7-ol (2 g, 13 mmol) e POBr3 (25 g, 8 mmol) foi aquecida a 110°C durante 2 horas. A mistura foi resfriada e adicionada a água gelada (100 mL) e depois solução de NaOH a 2 M adicionada para ajustar o pH até 8. A mistura foi extraída com EtOAc (40 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 30%) para dar 7-bromotieno[3,2-b]piridina (2,5 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,51 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 5,2 Hz, 1H). Passo 2: 7-Bromotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio

[0233] A uma solução de di-isopropilamina (473 mg, 4,67 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 1,87 mL) gota a gota a -70°C. A solução foi agitada a -70°C durante 30 min. Depois, 7-bromotieno[3,2-b]piridina (1 g, 4,67 mmol) dissolvida em THF (5 mL) foi adicionada gota a gota e agitada a -70°C durante 30 min. Depois, dióxido de carbono gasoso foi borbulhado através da solução reacional e a mistura foi deixada a aquecer até 25°C ao longo de um período de 2 horas. A mistura foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com THF (10 mL × 2). O sólido foi coletado e seco para dar 7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carboxilato de lítio (800 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,47 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,62 (d, J = 5,2 Hz, 1H). Passo 3: 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0234] A uma solução de 7-bromotieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (200 mg, 0,76 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados Tetrafluoroborato de O- (benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (268 mg, 0,83 mmol), N,N-di-

isopropiletilamina (196 mg, 1,52 mmol) e 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (276 mg, 0,76 mmol, sal de HCl). A mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas. A mistura foi diluída com água (15 mL) e extraída com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL × 3), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 80%) duas vezes para dar o composto 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (190 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,54 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,51 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,38 - 7,24 (m, 11H), 6,05 (d l, J = 6,8 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 5,16 - 5,08 (m, 2H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,00 - 3,82 (m, 2H). Passo 4: ácido (R)-2-amino-3-[(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0235] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- bromotieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg, 0,18 mmol) em HBr a 30% em AcOH (3 mL) foi agitada a 25°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi adicionado a água (5 mL) e lavado com MTBE (5 mL × 2). A camada aquosa foi liofilizada para dar ácido (R)-2-amino-3- (7-bromotieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (75 mg) como sal de HBr. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,28 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 8,64 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,36 (d l, J = 4,0 Hz, 3H), 7,84 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,19 - 4,12 (m, 1H), 3,88 - 3,80 (m, 1H), 3,77 - 3,69 (m, 1H). LCMS (MH+): m/z = 343,9, tR (min, Método BB) = 0,34.

[α]20D = -4,8 (c = 3,2 mg/mL, CH3OH). Composto 1m ácido (R)-2-amino-3-[(7-hidroximetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0236] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(7-hidroximetiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: tieno[3,2-b]piridina-7-carbonitrila

[0237] A uma solução de 7-clorotieno[3,2-b]piridina (5 g, 29,48 mmol) e Zn(CN)2 (3,77 g, 32,1 mmol) em DMF (50 mL) foram adicionados tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (Pd2(dba)3) (2,70 g, 2,95 mmol), Pd(dppf)Cl2 (2,16 g, 2,95 mmol) e Zn em pó (385 mg, 5,90 mmol) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 120°C durante 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (80 mL) e água (50 mL) e filtrada através de Celite. O filtrado foi extraído com EtOAc (60 mL × 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL × 3) e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 20%) para dar o composto tieno[3,2-b]piridina-7-carbonitrila (2,8 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,85 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 4,8 Hz, 1H).

Passo 2: tieno[3,2-b]piridina-7-carboxilato de metila

[0238] Uma mistura de tieno[3,2-b]piridina-7-carbonitrila (2,8 g, 17,5 mmol) em HCl/MeOH (4 M, 50 mmol) foi agitada a 70°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi adicionado a água (10 mL) e ajustado quanto ao pH até 8 com solução aquosa de NaOH a 2 N. A mistura foi extraída com EtOAc (30 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 35%) para dar o composto tieno[3,2- b]piridina-7-carboxilato de metila (2,7 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,84 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H). Passo 3: tieno[3,2-b]piridin-7-ilmetanol

[0239] A uma solução de tieno[3,2-b]piridina-7-carboxilato de metila (2,7 g, 14 mmol) em MeOH (30 mL) foi adicionado NaBH4 (793 mg, 21 mmol). A mistura foi agitada a 25°C durante 3 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi adicionado a água (20 mL) e extraído com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar tieno[3,2-b]piridin-7-ilmetanol (2,1 g). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,62 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 5,77 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 5,6 Hz, 2H). Passo 4: 7-(hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio

[0240] A uma solução de tieno[3,2-b]piridin-7-ilmetanol (500 mg, 3,03 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 2,4 mL) gota a gota a -70°C e agitado a -70°C durante 30 min. Depois, dióxido de carbono gasoso (15 psi) foi borbulhado através da solução reacional durante 30 min e a mistura foi deixada a aquecer até 25° C ao longo de um período de 2 horas. A mistura foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com THF (10 mL × 2). O sólido foi coletado e seco para dar 7-(hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (700 mg). Passo 5: 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-(hidroximetil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0241] A uma solução de 7-(hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de lítio (200 mg, em bruto) em DMF (10 mL) foram adicionados Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (448 mg, 1,39 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (360 mg, 2,79 mmol) e 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (339 mg, 0,93 mmol, sal de HCl). A mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas. A mistura foi diluída com água (15 mL) e extraída com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL × 3), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (DCM: MeOH com MeOH de 0 a 10%) para dar 200 mg de produto em bruto. O produto em bruto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (Método

J) para dar 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7-(hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina- 2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,01 (t l, J = 5,6 Hz, 1H), 8,69 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,88 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,36 - 7,22 (m, 10H), 5,86 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,15 - 5,00 (m, 4H), 4,83 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 4,48 - 4,37 (m, 1H), 3,76 - 3,58 (m, 2H). Passo 6: ácido (R)-2-amino-3-[(7-hidroximetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0242] Uma mistura de 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7- (hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (60 mg, 0,12 mmol) em HCl aq. a 12 M (12 M, 4 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método K) para dar o composto ácido (R)-2-amino-3-(7-(hidroximetil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoico (18 mg) como sal de HCl. 1 H RMN (400 MHz, D2O) δ 8,82 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,85 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,18 - 4,14 (m, 1H), 4,06 - 3,99 (m, 1H), 3,94 - 3,86 (m, 1H). LCMS (MH+): m/z = 296,1, tR (min, Método BB) = 0,26. [α]20D = 5,0 (c = 1,2 mg/mL, CH3OH). Composto 1n ácido (R)-2-amino-3-[[7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0243] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[[7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(fluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0244] A uma solução de 2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(7- (hidroximetil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg, 0,19 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado DAST (62 mg, 0,38 mmol). A mistura foi agitada a 20°C durante 1 hora. A reação foi extinta com água (1 mL) e concentrada. Ao resíduo foi adicionada água (10 mL), ajustado quanto ao pH até 8 com solução de NaOH a 2 N e extraído com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas. O resíduo foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 100%) para dar 2- (((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (25 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,80 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,43 - 7,30 (m, 12H), 6,11 (d l, J = 6,4 Hz, 1H), 5,71 (d, J = 46,4 Hz, 2H), 5,23 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,69 - 4,61 (m, 1H), 4,00 - 3,96 (m, 2H). Passo 2: ácido (R)-2-amino-3-[[7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico

[0245] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(7- (fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (25 mg, 0,05 mmol) em HBr a 30% em AcOH (3 mL) foi agitada a 50°C durante 3 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Método L) para dar o composto ácido (R)-2-amino-3-(7-(fluorometil)tieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoico (9 mg) como sal de HCl. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,80 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,54 (d l, J = 3,6 Hz, 3H), 8,44 (s, 1H), 7,51 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 46,0 Hz, 2H), 4,20 - 4,11 (m, 1H), 3,86 - 3,80 (m, 2H). LCMS (MH+): m/z = 298,1, tR (min, Método BB) = 0,26. Composto 1o ácido (R)-2-amino-3-[(6-fluoro-7-metil-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0246] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(6-fluoro-7-metil-tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 3,5-difluoro-4-iodopicolinonitrila

[0247] A uma solução de di-isopropilamina (4,30 g, 42 mmol) em THF (50 mL) foi adicionado n-BuLi (17 mL, 2,5 M em hexano) a -78°C e a reação foi agitada a -78°C durante 0,5 horas. Uma solução de 3,5-difluoropicolinonitrila (5 g, 36 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada a -78°C e a mistura reacional agitada a - 78°C durante 0,5 horas. I2 (9,51 g, 37,5 mmol) foi adicionado em porções a -78°C e a mistura resultante foi agitada a -78°C durante 1 hora. H2O (50 mL) foi adicionada para extinguir a reação e a mistura foi extraída com EtOAc (100 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi flash (sílica gel, éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0~30%) para dar 3,5- difluoro-4-iodopicolinonitrila (4,5 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,28 (s, 1H). Passo 2: 3,5-difluoro-4-metilpicolinonitrila

[0248] Uma mistura de 3,5-difluoro-4-iodopicolinonitrila (2 g, 7,52 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (5,39 g, 42,92 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (1,84 g, 2,26 mmol) e K3PO4 (3,20 g, 15,08 mmol) em dioxano (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes e, depois, a mistura foi agitada a 120°C durante 10 horas sob atmosfera de N2. H2O (10 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc (15 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL × 2), secas sobre Na2SO4,

filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi flash (sílica gel, éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0~20%) para dar 900 mg de produto em bruto. O produto em bruto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (Método I) para dar 3,5-difluoro-4-metilpicolinonitrila (270 mg). Passo 3: 3,5-difluoro-4-metilpicolinaldeído

[0249] A uma solução agitada de 3,5-difluoro-4-metilpicolinonitrila (270 mg, 1,75 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (DIBAL-H) (2,30 mL, 1 M em tolueno, 2,30 mmol) a -20°C e a mistura foi agitada a -20°C durante 1 hora. H2O (10 mL) foi adicionada para extinguir a reação e HCl a 1 N foi adicionado para ajustar o pH até 5-6. A mistura reacional foi extraída com EtOAc (15 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar 3,5- difluoro-4-metilpicolinaldeído (270 mg). Passo 4: 6-fluoro-7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0250] A uma solução de 3,5-difluoro-4-metilpicolinaldeído (270 mg, em bruto) em DMF (5 mL) foram adicionados lentamente TEA (349 mg, 3,45 mmol) e 2-mercaptoacetato de metila (300 mg, 2,83 mmol) e a mistura foi agitada a 100°C durante 3 horas. H2O (5 mL) foi adicionada e extraída com EtOAc (5 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi flash (sílica gel, éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0~50%) para dar o composto em bruto (200 mg). O composto em bruto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (Método M) para dar 6-fluoro-7-metiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (40 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,59 (s, 1H), 8,20 (d, J = 1,2Hz, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,55 (s, 3H). Passo 4: ácido 6-fluoro-7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0251] A uma solução de 6-fluoro-7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (40 mg, 177,59 µmol) em MeOH (4 mL) foi adicionada uma solução de LiOH.H2O (22 mg, 524,26 µmol) em H2O (1 mL) e a mistura resultante foi agitada a 30°C durante 2 horas. O solvente foi removido. H2O (2 mL) foi adicionada, acidificada com solução sat. de KHSCO4 até pH 3~4 e extraída com EtOAc (10 mL × 5). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar ácido 6-fluoro-7- metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (25 mg, rendimento de 67%). LC-MS: tR = 1,267 min, m/z = 212,0[M + H]+. Passo 5: 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6-fluoro-7-metiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0252] Uma mistura de ácido 6-fluoro-7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (25 mg, 118 µmol), 3-amino-2- (((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)-benzila (52 mg, 142 µmol, sal de HCl), Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (57 mg, 177 µmol) e N,N-di-isopropiletilamina (31 mg, 241 µmol) em DMF (2 mL) foi agitada a 30°C durante 4 horas. H2O (2 mL) foi adicionada para extinguir a reação e extraída com EtOAc (5 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, Acetato de etila: Éter de petróleo = 1:1) para dar 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6-fluoro-7- metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (25 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,53 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,40-7,27 (m, 10H), 6,08 (d l, J = 5,6 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 5,21 (s, 2H), 5,11 (s, 2H), 4,69-4,55 (m, 1H), 3,92-3,85 (m, 2H), 2,52 (s, 3H). Passo 6: ácido (R)-2-amino-3-[(6-fluoro-7-metil-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0253] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6-fluoro-7- metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (25 mg, 48 µmol) em HBr a 33% em AcOH (2 mL) foi agitada a 50°C durante 16 horas. O solvente foi removido. O resíduo foi lavado com TBME (5 mL × 3), o sólido foi filtrado e o solvente residual foi removido por liofilização para dar ácido (R)-2- amino-3-(6-fluoro-7-metiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (16 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,18 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 8,71 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,41-8,26 (m, 3H), 8,26 (s, 1H), 4,21-4,09 (m 1H), 3,86-3,78 (m, 1H), 3,76- 3,67 (m, 1H), 2,50 (s, 3H). LCMS (MH+): m/z = 298, tR (min, Método BB) = 0,34. [α]20D = -16,00 (c = 2 mg/mL, MeOH).

Composto 1p ácido (R)-2-amino-3-[(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0254] O esquema de síntese global para a preparação de ácido (R)-2- amino-3-[(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carbonil)amino]propanoico é mostrado abaixo.

Passo 1: 2-Cloro-3-fluoro-4-iodo-5-metilpiridina

[0255] A uma solução de di-isopropilamina (5,8 mL, 41 mmol) em THF (50 mL) foi adicionado n-BuLi (17,5 mL, 2,5 M em hexano) a -78°C e a reação foi agitada a -78°C durante 1 horas. Uma solução de 2-cloro-3-fluoro-5-metilpiridina (5,00 g, 34,4 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada gota a gota a -78°C e a mistura reacional agitada a -78°C durante 1 horas. I2 (9,50 g, 37,4 mmol) foi adicionado em porções a -78°C e a mistura resultante foi agitada a -78°C durante 1 hora. NH4Cl sat. (20 mL) foi adicionado para extinguir a reação, seguido por H 2O (50 mL) a 0°C e extraído com EtOAc (100 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL × 2), solução sat. de Na2S2O3 (100 mL),

secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar 2-cloro-3-fluoro-4-iodo-5- metil-piridina (8,2 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,97 (s, 1H), 2,47 (s, 3H). Passo 2: 2-Cloro-3-fluoro-4,5-dimetilpiridina

[0256] Uma mistura de 2-cloro-3-fluoro-4-iodo-5-metilpiridina (4,20 g, 15,5 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (4,27 g, 34,0 mmol), K2CO3 (4,28 g, 30,9 mmol) e pd(dtbpf)Cl2 (1,01 g, 1,55 mmol) em dioxano (10 mL) foi desgaseificada por purga com N2 e, depois, a mistura foi agitada a 80°C sob N2 durante 16 horas. Depois, 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano adicional (4,27 g, 34,0 mmol) foi adicionado, e a mistura resultante foi agitada a 80°C durante outras 16 horas. Água (20 mL) foi adicionada para extinguir a reação e extraída com EtOAc (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi flash (sílica gel, éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0~10%) para dar 2-cloro-3-fluoro-4,5-dimetilpiridina (1,2 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,95 (s, 1H), 2,22 - 2,27 (m, 6H). Passo 3: 3-Fluoro-4,5-dimetil-2-vinilpiridina

[0257] Uma mistura de 2-cloro-3-fluoro-4,5-dimetilpiridina (1,70 g, 10,7 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (2,46 g, 15,9 mmol), Pd(dppf)Cl2 (780 mg, 1,07 mmol) e K2CO3 (2,94 g, 21,3 mmol) em uma mistura de dioxano (80 mL) e H2O (8 mL) foi desgaseificada por purga com N2 e, depois, a mistura foi agitada a 80°C durante 16 horas sob atmosfera de N2. H2O (50 mL) foi adicionada e extraída com EtOAc (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por Combi flash (sílica gel, éter de petróleo/EtOAc com EtOAc de 0 a 30%) para dar 3-fluoro-4,5-dimetil-2- vinilpiridina (1,0 g). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,10 (s, 1H), 7,04 - 6,82 (m, 1H), 6,31 (dd, J = 2,0 Hz, 17,6 Hz, 1H), 5,48 (dd, J = 2,0 Hz, 11,2 Hz, 1H), 2,4 (s, 3H), 2,18 (d, J = 2,0 Hz, 3H). Passo 4: 3-Fluoro-4,5-dimetilpicolinaldeído

[0258] Ozônio (15 psi) foi borbulhado através de uma solução de 3-fluoro- 4,5-dimetil-2-vinilpiridina (1,00 g, 6,61 mmol) em DCM (200 mL) a -70°C durante 15 min. Depois, PPh3 (2,08 g, 7,94 mmol) foi adicionado a -70 ºC, a mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada in vacuo mantendo a temperatura abaixo de 40°C, e o resíduo resultante foi purificado por Combi Flash em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc com EtOAc de 0 a 50%) para dar 3- fluoro-4,5-dimetilpicolinaldeído (600 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10,16 (s, 1H), 8,37 (s,1H), 2,39 (s, 3H), 2,30 (s, 3H). Passo 5: 6,7-Dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila

[0259] A uma solução de 3-fluoro-4,5-dimetilpicolinaldeído (550 mg, 3,59 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionada TEA (1 mL, 7,18 mmol) e agitada a 25°C durante 30 min, depois 2-sulfanilacetato de metila (460 mg, 4,33 mmol) foi adicionado lentamente. A mistura foi agitada a 100°C durante 3 horas. H 2O (10 mL) foi adicionada para extinguir a reação e a mistura foi extraída com EtOAc (10 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar 6,7-dimetiltieno[3,2- b]piridina-2-carboxilato de metila (800 mg), que foi usado sem qualquer purificação adicional. 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,53 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 3,97 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 2,43 (s, 3H). Passo 6: Ácido 6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico

[0260] A uma solução de 6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxilato de metila (400 mg, em bruto) em MeOH (8 mL) foi adicionada uma solução de LiOH.H2O (160 mg, 3,81 mmol) em H2O (2 mL) e a mistura resultante foi agitada a 25°C durante 1 hora. A mistura foi concentrada, e água (5 mL) foi adicionada, seguida por extração com EtOAc (5 mL × 2). As camadas orgânicas foram descartadas e a camada aquosa foi acidificada com solução sat. de KHSO4 até pH

3. O sólido foi filtrado e seco para dar ácido 6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxílico (140 mg). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 13,60 (s l, 1H), 8,55 (s,1H), 8,05 (s, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,39 (s, 3H). Passo 7: 2-(((Benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina- 2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila

[0261] Uma mistura de ácido 6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxílico (70 mg, 338 µmol), 3-amino-2-(((benzilóxi)carbonil)amino)propanoato de (R)- benzila (148 mg, 406 µmol, sal de HCl), Tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1- il)-N,N,N′,N′-tetrametilurônio (163 mg, 508 µmol) e N,N-di-isopropiletilamina (88,0 mg, 677 µmol) em DMF (5 mL) foi agitada a 25°C durante 16 horas. H2O (5 mL) foi adicionada para extinguir a reação e extraída com EtOAc (5 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL × 2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, Acetato de etila: Éter de petróleo = 2:1) para dar 2- (((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg). 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,50 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,42 - 7,28 (m, 10H), 7,08 (s l, 1H), 6,01 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,63 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,00 - 3,81 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,42 (s, 3H). Passo 8: ácido (R)-2-amino-3-[(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico

[0262] Uma mistura de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-(6,7- dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoato de (R)-benzila (100 mg, 193 µmol) em HBr a 33% em AcOH (5 mL) foi agitada a 50°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada. O sólido foi suspenso em AcOH (5 mL), filtrado e lavado com AcOH adicional (1 mL × 2). O solvente foi removido por liofilização para dar ácido (R)-2-amino-3-(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2-carboxamido)propanoico (77 mg) como sal de HBr. 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,27 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,29 - 8,41(m, 3H), 8,27 (s, 1H), 4,11 - 4,22 (m, 1H), 3,72 - 3,84 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 2,44 (s, 3H). LCMS (MH+): m/z = 294,2, tR (min, Método BB) = 0,24. [α]20D = -3,00 (c = 6 mg/mL, MeOH). e. Caracterização in vitro e in vivo de compostos da invenção. Exemplo 1: Dados de afinidade dos compostos da invenção exemplificados Ensaio de proximidade de cintilação (SPA):

[0263] Para se determinar a afinidade dos compostos da presente invenção, um SPA é usado. O ensaio é operado em um formato de 384 placas (OptiPlate-384) onde cada poço contém uma mistura de 5 µL do composto de teste, 5 µL NR1s1s2 (domínios de ligação ao ligando do receptor de NMDA, MW 35,6 kDa, 0,075 ug/poço final), 5 µL [3H]-MDL-105,519 (antagonista do receptor de glutamato N-metil-D-aspartato de alta afinidade (NMDA) de elevada afinidade, radiomarcado, no local de glicina, concentração final 5 nM, Kd = 1,3 nM), 5 µL esférulas de visualização revestidas com estreptavidina (No. de cat. da Perkin Elmer: RPNQ0273, 8 ug/poço). O tampão de ensaio contém HEPES-NaOH a 100 mM, NaCl a 150 mM, EDTA a 1 mM, glicerol a 10% a pH 7,4 em água ultra- pura. A ligação não específica é definida por inclusão de L-689,560 (antagonista de NMDA altamente potente) a 10 µM e a ligação total por DMSO a 1%. Após 30 minutos de incubação na escuridão (agitador, Multi-microplate Genie), as esférulas de SPA são deixadas a repousar durante 3 horas após o que o sinal é lido em um instrumento Viewlux (Perkin Elmer). Os dados normalizados são usados para calcular os valores de Ki.

Tabela 2: Valores de Ki de SPA (nm) do composto da invenção Exemplo Ki de SPA (nM) 1a 7400 1b 270 1c 170 1d 140 1e 96 1f 220 1g 860 1h 690 1i 360 1j 870 1k 220 1l 63 1m 3900 1n 180 1o 260 1p 490 A Tabela 2 mostra que os compostos da fórmula V têm afinidade pelo local de glicina do receptor de NMDA. Exemplo 2: Dados de exposição in vivo Procedimento in vivo:

[0264] A disposição cerebral do composto de teste foi avaliada em ratos Sprague Dawley machos (gama de pesos corporais padrão). Brevemente, compostos de teste discretos (dose nominal: 2 mg/kg, 2 mL/kg) ou em cassete

(dose nominal: 1 mg/kg/composto, 2 mL/kg) foram administrados por injeção intravenosa em bólus (formulada em hidroxipropil-β-ciclodextrina a 10% ou Captisol a 10-20%, pH = 3). Coleta de amostras:

[0265] Amostras de sangue em série foram coletadas de uma veia lateral da cauda em pontos temporais designados (n = 3 por ponto temporal), depois os ratos foram colocados sob anestesia profunda induzida por isoflurano antes da remoção dos cérebros (n = 3 por ponto temporal). O sangue foi coletado em tubos revestidos com K3-EDTA e as amostras foram gentilmente viradas de cabeça para baixo para assegurar uma amostra homogênea. Os tubos foram centrifugados a 3300 x g durante 10 min. a máx 4°C e as amostras de plasma foram transferidas para tubos Micronic. As amostras de cérebro foram dissecadas logo que o animal tivesse sido sacrificado, ligeiramente “mergulhadas” em papel de filtro para remover o excesso de sangue no exterior e transferidas para tubos AFA da Covaris. As amostras de plasma e cérebro foram armazenadas a -80°C até à análise. Preparação de amostras:

[0266] Sete padrões de calibração e três amostras QC foram preparados em plasma e homogenato de cérebro, respectivamente, na gama de concentrações 10-10000 ng/mL. Amostras em branco (matriz de controle com padrão interno) foram preparadas e tratadas do mesmo modo que os padrões de calibração. Antes da análise, as amostras de cérebro foram homogeneizadas com água milliQ 1:4 (p/v) usando um ultrassonicador focado da Covaris. As amostras do estudo com concentração esperada acima do limite superior de quantificação foram diluídas com matriz em branco.

[0267] Homogenato de cérebro e plasma de amostras de estudo, padrões de calibração, controles de qualidade e amostras em branco foram subsequentemente tratados com o mesmo procedimento de extração, i.e., precipitação de proteína por adição de 150 µL acetonitrila com padrão interno (Tolbutamida) a 25 µL de amostra. As amostras foram centrifugadas e o sobrenadante de cada amostra foi diluído 1:1 com água para diminuir o conteúdo de solvente orgânico. LC-MS/MS:

[0268] As amostras foram analisadas usando um espectrômetro de massa de triplo quadrupolo (TQ) API4000 da AB Sciex operado em ionização por eletropulverização positiva e negativa e modo MS/MS (monitorização de reação múltipla, MRM). O espectrômetro de massa foi acoplado a um Acquity UPLC da Waters equipado com uma coluna analítica Acquity UPLC HSS C18 SB (1,7 µm, 30 mm x 2,1 mm) da Waters. A separação cromatográfica foi alcançada por um gradiente de 3 minutos começando com fase móvel A (Ácido fórmico a 0,1% em água) a 98% e fase móvel B (Ácido fórmico a 0,1% em acetonitrila) a 2% aumentando para fase móvel B a 95%. O caudal foi 0,6 mL/min e a temperatura da coluna foi 40 ºC. As transições de MRM (m/z) foram como se segue: 380→248, 350→263, Tolbutamida: 269→106 (neg) e 271→155 (pos). A quantificação foi realizada por regressão linear, ponderação 1/x2.

[0269] Os dados de deposição de sangue no cérebro são mostrados na tabela 3 abaixo. Tabela 3: dados de deposição de sangue no cérebro para compostos da invenção Concentração Concentração Plasmática total Cerebral total Exemplo doseado Dose mg/kg (ng/mL) 30 min (ng/mL) 30 min pós-dose pós-dose 1e 2 270 8,4

[0270] Conclusão. Os resultados mostram que é alcançada exposição cerebral do composto de teste pós-dosagem intravenosa. Exemplo 3: Eletroencefalografia em Estado de repouso (rsEEG) em ratos

[0271] No dia da cirurgia, os ratos (270-300 g) foram anestesiados com uma injeção subcutânea (SC) a 0,25 mL/100 g de hipnorma/Dormicum 1:1 e montados em uma estrutura estereotáxica (David Kopf Instruments, Tujunga, CA, EUA) com barras de ouvido cegas. Marcaína (0,2 mL SC) foi injetada sob o couro cabeludo, e gel (Neutral Opthta Eye Gel) colocado nos olhos para prevenir o ressecamento da membrana mucosa. Orifícios foram perfurados no crânio para permitir a colocação de três elétrodos profundos (série E363; PlasticsOne, Roanoke, VA, EUA) no córtex pré-frontal medial (mPFC) (AP: 3,0 mm a partir da sutura do bregma, ML: -0,7 mm a partir da sutura sagital e DV: 3,0 mm a partir da dura), Núcleo accumbens (NAc): (AP + 1,6 mm a partir da sutura do bregma, ML: -1,0 mm a partir da sutura sagital, DV: -6,7 mm a partir da dura) e tálamo (AP: -2,8 mm a partir da sutura do bregma, ML: +0,7 mm a partir da sutura sagital e DV: 4,4 mm a partir da dura) e três elétrodos de parafuso acima do córtex auditivo (A1) (AP: -4,8 mm a partir da sutura do bregma, ML: +6,4 mm a partir da sutura sagital), um elétrodo de referência (AP: +8,0 mm e ML: −2,0 mm) e um elétrodo de aterramento (AP: -5 mm, ML: +5 mm). Durante as cirurgias, as unhas foram cortadas para evitar que os ratos coçassem as feridas após a cirurgia. Após completação das cirurgias, os ratos foram colocados sob lâmpadas de aquecimento até à recuperação da consciência (máximo 4 horas). Péletes de comida embebidos em água foram colocados na gaiola, tal que o rato pudesse começar a se alimentar facilmente e rapidamente. Muesli extra foi fornecido para auxiliar na recuperação. Os ratos foram tratados com Norodyl e Noromox durante 5 dias no total e observados de perto durante um período de recuperação pós-cirurgia de 10-14 dias. Os pesos corporais dos animais foram registrados diariamente. Nenhuns ratos perderam mais do que 10% de seu peso corporal pré-cirurgia. As suturas foram removidas após 7-10 dias. No final das experiências, lesões elétricas foram realizadas em todos os elétrodos de registro e os cérebros foram cortados para inspeção por microscopia visual da colocação dos elétrodos. As diferenças entre impedâncias dos elétrodos profundos e de parafuso foram tratadas por investigação das mudanças de potência relativa e as fontes de ruído de modo comum foram reduzidas do registro em caixas blindadas e exclusão de estimativas de potência em torno de 50, 100 e 150 Hz das análises.

[0272] Os ratos foram manuseados diariamente e habituados à caixa de registro na semana antes das sessões de registro. Os registros foram realizados durante a fase de escuridão do ciclo de luz/escuridão. Às 8 h, os ratos (400-500 g) foram individualmente transferidos para uma câmara de acrílico (30 cm de largura, 45 cm de profundidade, 55 cm de altura) colocada dentro de uma caixa à prova de som eletricamente blindada (90 cm de largura, 55 cm de profundidade, 65 cm de altura) e foram amarrados a um fio de seis pinos suspenso a partir de um suporte giratório, permitindo movimento livre dentro da caixa de registro. Existiu um período de habituação de 2 horas seguido por 45 minutos de registro de linha de base, após o que os ratos foram injetados subcutaneamente com captisol a 10% (veículo), composto 1e a 20 mg/kg e deixados na caixa durante mais duas horas. Os ratos só passaram por sessões de registro uma vez por semana com pelo menos seis dias entre registros para permitir a eliminação dos compostos. Os sinais analógicos LFP/ECoG foram amplificados e filtrados em banda passante a 0,01-300 Hz (Modelo de Precisão 440; Brownlee, Palo Alto, CA, EUA) e convertidos em um sinal digital a uma taxa de amostragem de 1 kHz (Potência CED 1401, Potência 1 (625 kHz, 16 bits) e Expansão CED ADC16; CED, Cambridge, Inglaterra). Os registros de vídeo foram processados em EthoVision. A análise do comportamento locomotor foi baseada no sinal do acelerômetro registrado. Os limiares do sinal do acelerômetro foram validados para detectar períodos de atividade locomotora (Ativo) e inatividade (Inativo).

[0273] O desenvolvimento do algoritmo de detecção do estado locomotor e as análises de farmaco-EEG específicas do estado foram levados a cabo em MATLAB R2017a (The MathWorks, Inc., Natick, MA, EUA) usando funções da caixa de ferramentas sigTOOL.

[0274] Como mostrado na FIG 1, a administração sistêmica do composto 1e (20 mg/kg, i.v.) mostra um efeito claro nas Oscilações de Elevada Frequência (HFO) no núcleo accumbens em comparação com o veículo (captisol a 10%). Exemplo 4: Estudos de microdiálise em ratos

[0275] Foram usados ratos Sprague-Dawley machos, pesando inicialmente 275-300 g. Os animais foram alojados sob um ciclo de luz/escuridão de 12 hr sob condições controladas para temperatura interna regular (21 ± 2°C) e umidade (55 ± 5%) com comida e água da torneira disponíveis ad libitum.

[0276] Os ratos foram anestesiados com hipnorma/dormicum (2 mL/kg) e cânulas guia intracerebrais

[0277] (CMA/12) foram estereotaxicamente implantadas no cérebro, visando posicionar a ponta da sonda de diálise

[0278] no hipocampo ventral (coordenadas: 5,6 mm posterior em relação ao bregma, lateral –4,8 mm, 7,0 mm ventral em relação à dura). Foram usados parafusos de ancoragem e cimento acrílico para fixação das cânulas guia. A temperatura corporal dos animais foi monitorizada por sonda retal e mantida a 37°C. Os ratos foram deixados a recuperar da cirurgia durante 2 dias, alojados individualmente em gaiolas.

[0279] No dia da experiência, uma sonda de microdiálise (CMA/12, 0,5 mm de diâmetro, 3 mm de comprimento) foi inserida através da cânula guia. A sonda foi conetada através de um giro de canal duplo a uma bomba de microinjeção. A perfusão da sonda de microdiálise com solução de Ringer filtrada (NaCl a 145 mm, KCl a 3 mM, MgCl2 a 1 mM, CaCl2 a 1,2 mM) foi iniciada imediatamente antes da inserção da sonda no cérebro e continuou durante a duração da experiência a um caudal constante de 1 μL/min. Após 180 min de estabilização, as experiências foram iniciadas. Os dialisados foram coletados a cada 20 min em microtubos de poliestireno contendo ácido trifluoroacético (concentração final 0,25%) a 4°C. Após as experiências, os animais foram sacrificados e os cérebros removidos e a colocação da sonda foi verificada.

[0280] A recuperação in vitro das sondas foi determinada por uso de solução de estoque do composto 1e a 1000 ng/mL. As experiências foram realizadas à temperatura ambiente. Para cada composto, três sondas de microdiálise (CMA/3) foram inseridas em tubos contendo soluções de estoque. A perfusão da sonda de microdiálise com solução de Ringer filtrada foi iniciada imediatamente antes da inserção da sonda nas soluções de estoque e continuou durante a duração da experiência a um caudal constante de 1 μL/min. Após 60 min de estabilização, 3 amostras consecutivas de 20 min foram amostradas por cada sonda.

[0281] Como mostrado na FIG 2 foram observados níveis extracelulares consideráveis do composto 1e no hipocampo ventral de rato após administração sistêmica do composto 1e doseado a 30 mg/kg subcutaneamente.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 O O

N N OH

H R2 S NH2 R3 R4

I R1 é selecionado do grupo consistindo em um hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, haloalquila C1-4, ciano, cicloalquila C3-6 e alquila C1-4; R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, alquila C1- 4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4, hidróxi-haloalquila C1-4, ciano, NRaRb, SRcRd, OR6, L-(OR6) e R7; Ra e Rb são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; Rc e Rd são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila C1-4; R6 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4 e hidróxi-haloalquila C1-4; L representa um alquileno C1-3; e R7 é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila C3-6, fenila, heterociclo com 4, 5 ou 6 membros e heteroarila com 5 ou 6 membros, em que a referida cicloalquila, fenila, heterociclo ou heteroarila estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 substituintes independentemente selecionados de halogênio, alquila C1-3, alcóxi C1-3, em que os referidos alquila C1-3 e alcóxi C1-3 estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 F.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R1 é selecionado do grupo consistindo em um hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio e alquila C1-4; R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogênio, alquila C1- 4, haloalquila C1-4, hidroxialquila C1-4, OR6 e R7; R6 é selecionado do grupo consistindo em alquila C1-4 e haloalquila C1-4; e R7 é selecionado do grupo consistindo em uma cicloalquila C3-6 e fenila, em que as referidas cicloalquila e fenila estão independentemente não substituídas ou substituídas por 1, 2 ou 3 substituintes independentemente selecionados de halogênio, alquila C1-3, alcóxi C1-3, em que os referidos alquila C1-3 e alcóxi C1-3 estão independentemente não substituídos ou substituídos por 1, 2 ou 3 F.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é hidrogênio.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é hidrogênio.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-4 e halogênio.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, flúor e metila.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é hidrogênio.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1, R2 e R3 são hidrogênio.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é alquila C1-4.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é metila.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é fluoroalquila C1-4.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é halogênio.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é fenila não substituída ou substituída por alquila C1-3.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é alcóxi C1-4.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupo consistindo em alquila C1-4, fluoroalquila C1-4, cicloalquila C3-6, hidroxialquila C1-4, alcóxi C1-4, NRaRb, SRcRd, halogênio e fenila não substituída ou substituída por etila.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupo consistindo em metila, etila, isopropila, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, hidroximetila, isopropóxi, etóxi, metóxi, ciclopropila, flúor, bromo, dimetilamino, metiltio e etilfenila.

17. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo consistindo em: ácido (R)-2-amino-3-[[7-tieno[3,2-b]piridina-2-carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-etiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(difluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-ciclopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(2-etilfenil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico;

ácido (R)-2-amino-3-[(7-metoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(trifluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-etoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-isopropoxitieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-bromotieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(7-hidroximetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[[7-(fluorometil)tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil]amino]propanoico; ácido (R)-2-amino-3-[(6-fluoro-7-metil-tieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; e ácido (R)-2-amino-3-[(6,7-dimetiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é ácido (R)-2-amino-3-[(7-metiltieno[3,2-b]piridina-2- carbonil)amino]propanoico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 18, e um ou mais carreadores ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis.

20. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizado pelo fato de ser para uso como um medicamento.

21. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, ou a composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 19, caracterizado(a) pelo fato de ser para uso no tratamento da depressão.

22. Composto ou composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 21, caracterizado(a) pelo fato de que a depressão é selecionada de disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

23. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, ou a composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 19, caracterizado(a) pelo fato de ser para uso no tratamento de uma condição selecionada de ideação suicida, disfunção bipolar (incluindo depressão bipolar), disfunção obsessivo-compulsiva e estado de epilepsia.

24. Uso do composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 18, ou a composição farmacêutica definida na reivindicação 19, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para uso no tratamento da depressão.

25. Uso de um composto ou composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a depressão é selecionada do grupo consistindo em disfunção depressiva maior, depressão resistente ao tratamento, depressão catatônica, depressão melancólica, depressão atípica, depressão psicótica, depressão perinatal, depressão pós-parto, depressão bipolar, incluindo depressão bipolar I e depressão bipolar II, e depressão leve, moderada ou grave.

26. Uso do composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 18, ou a composição farmacêutica definida na reivindicação 19, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para uso no tratamento de uma condição selecionada de ideação suicida, disfunção bipolar (incluindo depressão bipolar), disfunção obsessivo-compulsiva e estado de epilepsia.

27. Invenção de produto, processo, sistema, kit ou uso, caracterizada pelo fato de que compreende um ou mais elementos descritos no presente pedido de patente.