JP2023519815A

JP2023519815A - スピロ環含有キナゾリン化合物

Info

Publication number: JP2023519815A
Application number: JP2022552910A
Authority: JP
Inventors: シエ，ユリ; ファン，ホウシン; ツアオ，ガン; チエン，リュイ
Original assignee: Wigen Biomedicine Technology Shanghai Co Ltd
Current assignee: Wigen Biomedicine Technology Shanghai Co Ltd
Priority date: 2020-03-25
Filing date: 2021-03-23
Publication date: 2023-05-15
Also published as: CN115335379B; US20230128824A1; WO2021190467A1; EP4130000A1; CN115335379A; CA3170068A1

Abstract

本発明は、一般式（１）の化合物およびその調製方法、並びに、腫瘍などのＲａｓ関連疾患に抵抗するための医薬品の調製における、Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異タンパク質に対する不可逆的阻害剤としての、式（１）の化合物、並びに、その異性体、結晶形態物、および、薬学的に許容可能な塩の使用に関する。【化１】TIFF2023519815000059.tif67168

Description

本出願は中国特許出願第ＣＮ２０２０１０２２２７６６Ｘが２０２０年３月２５日に出願したものを優先するものであり、本件は、その全体を参考として盛り込んでいる。

技術分野
本発明は医薬化学の分野に属し、特に、スピロ環含有キナゾリン化合物、その調製方法、および抗腫瘍薬の調製におけるＫ－ＲａｓＧ１２Ｃ阻害剤としての化合物の使用に関する。

背景
Ｒａｓタンパク質ファミリーメンバーは細胞における重要なシグナル伝達分子であり、成長と発達に重要な役割を果たす。ｉｎｖｉｔｒｏ腫瘍細胞、動物モデルおよびヒト腫瘍試料の広範な分析および研究は、Ｒａｓファミリータンパク質の過剰活性化がヒト腫瘍の発生における初期事象であり、多くのタイプの癌の発生および進行の重要な原因の１つことを示す。Ｒａｓタンパク質を標的とし、Ｒａｓタンパク質活性を阻害することは、関連した腫瘍を治療するための重大な手段である。Ｒａｓタンパク質は２つの形態で存在する。ＧＤＰと結合していると不活性な休止状態にあり、細胞が成長因子の刺激などのシグナルを受け取ると、ＧＴＰと結合して活性化される。活性化されたＲａｓタンパク質は様々なシグナル伝達アダプタータンパク質を動員して、ＥＲＫやＳ６などの下流のシグナル伝達分子のリン酸化を促進し、それによってＲａｓシグナル伝達経路を活性化し、細胞の増殖、生存、遊走および分化を調節する。Ｒａｓタンパク質はＧＴＰａｓｅ活性のためにＧＴＰをＧＤＰに加水分解することができる。その上、細胞内のＧＴＰａｓｅ活性化タンパク質（ＧＡＰ）はＲａｓと相互作用し、ＲａｓのＧＴＰａｓｅ活性を大幅に向上させ、それによってＲａｓタンパク質が過剰に活性化されるのを妨げる。

Ｒａｓタンパク質ファミリーのＫ－Ｒａｓ、Ｈ－ＲａｓおよびＮ－Ｒａｓタンパク質の変異は様々な腫瘍における一般的な遺伝子変異の１つであり、腫瘍におけるＲａｓタンパク質の過剰活性化をもたらす主要な因子である。野生型Ｒａｓタンパク質と比較して、これらの変異をもつＲａｓタンパク質は調節されていない活性をもっている。ＧＴＰに安定に結合し、常に活性化されているので、腫瘍細胞の増殖、遊走、分化が促進される。これらの変異の中で、Ｋ－Ｒａｓタンパク質におけるものは最も一般的なものであり、全Ｒａｓ変異の８５％を占めるが、Ｎ－Ｒａｓ（１２％）およびＨ－Ｒａｓ（３％）におけるものは比較的まれである。Ｋ－Ｒａｓ変異は、膵癌（９５％）、大腸癌（４５％）、肺癌（２５％）など多くの種類の癌で非常に多くみられるが、乳癌、卵巣癌、脳腫瘍では比較的まれ（２％未満）である。Ｋ－Ｒａｓ変異は主にＧ１２位に起こり、Ｇ１２Ｃ変異が最も一般的なものである。例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）では、Ｋ－Ｒａｓ変異の約５０％がＫ－ＲａｓＧ１２Ｃであり、Ｇ１２ＶとＧ１２Ｄが２番目に多い変異である。ゲノム研究から、非小細胞肺癌におけるＫ－Ｒａｓ変異は一般にＥＧＦＲ、ＡＬＫ、ＲＯＳ１、ＲＥＴおよびＢＲＡＦ変異と共在しないが、ＳＴＫ１１、ＫＥＡＰ１、ＴＰ５３および他の変異と共在することが示され、Ｋ－Ｒａｓ変異はＳＴＫ１１、ＫＥＡＰ１、ＴＰ５３および他の変異と相乗的に細胞の悪性転換、増殖および浸潤に関与する可能性が示唆された。腫瘍に加えて、Ｒａｓタンパク質の異常な活性化は、糖尿病、神経変性疾患などを含む非腫瘍疾患にも関与する。したがって、Ｒａｓタンパク質を標的とする低分子化合物は、特定の遺伝子変異を有する多数の癌患者およびＲａｓ経路の過剰活性化を有する非癌患者に恩恵をもたらすことができる。

４０年前の腫瘍のＲａｓ変異の発見以来、Ｒａｓ経路が関与する病因についてより深い洞察が得られているが、Ｒａｓタンパク質変異およびＲａｓ経路の過剰活性化を有する多数の患者に対して、Ｒａｓタンパク質を標的とする臨床的に有効な治療アプローチはまだ市場に出ていない。したがって、Ｒａｓタンパク質、特に変異頻度の高いＫ－ＲａｓＧ１２Ｃタンパク質を標的とした高活性低分子阻害剤の開発は、臨床的意義が大きい。

主要な治療標的としてのＫ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異体は、現在広く研究されておらず、ＡｍｇｅｎのＡＭＧ５１０およびＭｉｒａｔｉのＭＲＴＸ８４９のような少数の化合物のみが臨床研究中である。２０１８年には、Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異標的共有結合阻害剤ＡＲＳ－１６２０がＣｅｌｌで報告された（Ｃｅｌｌ、２０１８、１７２：５７８－５８９）。マウスにおけるＫ－ＲａｓＧ１２Ｃ活性および抗腫瘍活性を有するスピロ化合物のクラスは、特許：国際公開第２０１８／１４３３１５号に報告されており、一般式Ａおよびその代表的な化合物Ｂ（特許中の実施例３５）は、以下の構造として示されている（式中の記号の定義については特許を参照のこと）。

国際公開第２０１８／１４３３１５号

現在、良好なＫ－ＲａｓＧ１２Ｃ活性および優れた薬物動態特性を有する化合物を研究および発見する緊急の必要性が存在する。

発明の概要
本発明は、一般式（１）の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物を提供することを目的とする。

ここで、一般式（１）において、
ｍは、１または２の整数であり、
ｎは、１または２の整数であり、
Ｒ^１は、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ２～Ｃ４アルケニル、Ｃ２～Ｃ４アルキニルまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルであり、
Ｒ^２は、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキルであり、
Ｒ^３は、

であり、
ここで、Ｒ^ａは、ＨまたはＦであり、Ｒ^ｂは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＭｅであり、Ｒ^ｃは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＭｅであり、Ｒ^ｄは、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、Ｍｅまたはシクロプロピルであり、Ｒ^ｅ、Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、Ｒ^ｈ、Ｒ^ｉ、Ｒ^ｊおよびＲ^ｋは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＮＨ_２、ＣＦ_３、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルであり、
Ｒ^４は、

であり、
ここで、ｎ_１およびｎ_２は、独立して、１または２の整数であり、ｍ_１、ｍ_２、ｍ_３およびｍ_４は、独立して、０、１、２、３または４の整数であり、ｍ_５は、１、２または３の整数であり、Ａは、ＣＨ_２－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＳＯ、－ＳＯ_２－または－Ｎ（Ｃ１～Ｃ３アルキル）－であり、Ｖは、－ＣＨ_２－、－ＳＯ_２－または－ＣＯ－であり、Ｌは、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ－または－ＣＯ－であり、Ｘは、５～７員のヘテロアリールまたは部分飽和の５～７員のヘテロシクロアルキルであり、Ｙは、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－またはヘテロシクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－であり、Ｒ^１およびＲ^ｍは、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキル、ヒドロキシル置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、シアノ置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキルであり、または、Ｒ^１およびＲ^ｍは、Ｎ原子と共に、３－～８－員のヘテロシクロアルキルを形成し、ここで、前記３－～８－員のヘテロシクロアルキルは、ＯＨ、ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシおよび（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシから選択される１～３個の置換基で置換され得、Ｒ^ｎは、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ２～Ｃ４アルケニル、Ｃ２～Ｃ４アルキニル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキル、ヒドロキシル置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、シアノ－置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル、（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－またはヘテロシクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－であり、および、Ｒ^Ｏは、ＯＨ、ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ１～Ｃ３アルコキシまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルである。

別の好ましい実施形態では、一般式（１）において、Ｒ^１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｍｅ、Ｅｔ、イソプロピル、ビニル、エチニルまたはシクロプロピルである。

別の好ましい実施形態では、一般式（１）において、Ｒ^２は、ＣＨ_３、ＣＨ_３ＣＨ_２、ＣＦ_３ＣＨ_２、ＣＨＦ_２ＣＨ_２またはＣＦ_３（ＣＨ_３）ＣＨである。

別の好ましい実施形態では、一般式（１）において、Ｒ^３は、

である。

別の好ましい実施形態では、一般式（１）において、Ｒ^４は、

である。

種々の実施形態では、本発明の代表的な化合物は、以下の構造の１つを有する。

本発明の別の目的は、薬学的に許容可能な賦形剤または担体、および、有効成分としての本発明の一般式（１）の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容され可能なる塩、水和物、または、溶媒和物を含む医薬組成物を提供することである。

本発明はまた、Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異タンパク質に関連する疾患を治療、調節および／または予防するための医薬品を調製する際の、上記一般式（１）の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能なその塩、水和物、または、溶媒和物、或いは、医薬組成物の使用を提供する。

本発明のさらに別の目的は、本発明の上記一般式（１）の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物、或いは、本発明の上記医薬組成物を対象体に投与することを含む、Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異によって媒介される疾患を治療するための方法を提供することである。Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異によって媒介される疾患は、血液癌と固形腫瘍であり得る。

本発明者らはＫ－ＲＡＳＧ１２Ｃ阻害効果を有する種々の新規化合物の合成および慎重な研究により、Ｒ^４が非芳香族複素環またはスピロ環である場合、一般式（１）の化合物がＫ－ＲＡＳＧ１２Ｃに対して強い阻害活性を有することを見出した。さらに、この化合物は、また、マウスにおける抗腫瘍活性の評価において、強力なｉｎｖｉｖｏ抗腫瘍活性を示す。

本発明の上記の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方は例示的かつ説明的であり、特許請求の範囲に記載の本発明のさらなる説明を提供することが意図されることが理解されるべきである。

化合物の合成
以下、本発明の一般式（１）の化合物の製造方法について詳細に説明するが、これらの具体的な方法は本発明を何ら限定するものではない。

上記の一般式（１）の化合物は、本明細書に記載の方法と組み合わせて、標準的な合成技術または周知の技術を使用して合成され得る。さらに、溶媒、温度、および本明細書に記載される他の反応条件は変更し得る。化合物の合成のための出発物質は、合成的にまたは商業的に得ることができる。本明細書に記載の化合物および異なる置換基を有する他の関連化合物は、Ｍａｒｃｈ，ＡｄｖａｎｃｅｄＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，４^ｔｈＥｄ．，（Ｗｉｌｅｙ１９９２）；ＣａｒｅｙａｎｄＳｕｎｄｂｅｒｇ，ＡｄｖａｎｃｅｄＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，４^ｔｈＥｄ．，Ｖｏｌｓ．ＡａｎｄＢ（Ｐｌｅｎｕｍ２０００，２００１）、および、ＧｒｅｅｎａｎｄＷｕｔｓ、ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^ｒｄＥｄ．，（Ｗｉｌｅｙ１９９９）を含む、周知の技術および出発物質を使用して合成し得る。化合物を調製するための一般的な方法は、本明細書中に提供される式に異なる基を導入するための適切な試薬および条件を使用することによって変更され得る。

一態様では、本明細書に記載の化合物が当技術分野で周知の方法に従って調製される。ただし、反応物、溶媒、塩基、使用する化合物の量、反応温度、反応に要する時間などの、方法に関わる条件は、以下の説明に限定されるものではない。本発明の化合物は、また、本明細書に記載されているか、または、当技術分野で公知の種々の合成方法を任意に組み合わせることによって簡便に調製することができ、そのような組み合わせは、本発明が関連する技術分野の当業者によって容易に決定することができる。一態様では、本発明はまた、以下の一般反応スキーム１を使用して調製される、一般式（１）の化合物を調製するための方法を提供する。

一般反応スキーム１

一般式（１）の化合物の実施形態において、調製は、一般反応スキーム１に従って実行し得、ここで、ｍ、ｎ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４が上記のように定義され、ＰＧが保護基を表し、Ｘがホウ酸、ホウ酸塩またはトリフルオロホウ酸塩を表す。一般反応スキーム１に示すように、化合物Ａ１（ＷＯ２０１８／１４３３１５に従って合成）を塩基性条件下で化合物Ａ２と反応させて化合物Ａ３を得、化合物Ａ３を塩基性条件下でＲ^４Ｈと反応させて化合物Ａ４を得、化合物Ａ４を塩基性条件下でＲ^２ＯＨと反応させて化合物Ａ５を得、化合物Ａ５およびＲ^１－Ｘをカップリング反応に供して化合物Ａ６を得、化合物Ａ６およびＲ３－Ｘを別のカップリング反応に供して化合物Ａ７を得、化合物Ａ７から保護基を除去して化合物Ａ８を得、化合物Ａ８を塩化アクリロイルまたは無水アクリル酸と反応させて標的化合物Ａ９を得る。

化合物のさらなる形態
本明細書中で「薬学的に許容可能な」とは、化合物にその生物学的活性または特性を失わせない物質（例えば、担体または希釈剤）をいう。それは比較的非毒性であり、例えば、個体に物質を与える場合、それは望ましくない生物学的効果を引き起こさず、または、有害な様式でその中に含まれる任意の成分と相互作用しない。

用語「薬学的に許容可能な塩」は、薬物投与のために生物に有意な刺激を引き起こさないか、または、化合物の生物学的活性および特性を排除しない化合物の形態をいう。特定の態様において、薬学的に許容可能な塩は、一般式（１）の化合物を、酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、リン酸および硝酸などの無機酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、トリフルオロ酢酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ－トルエンスルホン酸などの有機酸、並びにアスパラギン酸およびグルタミン酸などの酸性アミノ酸と反応させることによって得られる。

薬学的に許容可能な塩への言及は、溶媒付加形態物または結晶形態物、特に溶媒和物または多形体を含むことを理解されたい。溶媒和物は化学量論的または非化学量論的量のいずれかの溶媒を含み、水およびエタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒との結晶化の間に選択的に形成される。水和物は溶媒が水である場合に形成され、または、アルコラートは溶媒がエタノールである場合に形成される。一般式（１）の化合物の溶媒和物は、本明細書に記載の方法に従って簡便に調製または形成される。例えば、一般式（１）の化合物の水和物は簡便には水／有機溶媒の混合溶媒からの再結晶によって調製され、ここで使用される有機溶媒は、テトラヒドロフラン、アセトン、エタノールまたはメタノールを含むが、これらに限定されない。さらに、本明細書に記載の化合物は、非溶媒和形態および溶媒和形態の両方で存在することができる。一般に、溶媒和形態は本明細書中に提供される化合物および方法の目的のためには、非溶媒和形態と同等であると考えられる。

他の特定の例では、一般式（１）の化合物は、非晶質、粉砕、およびナノ粒子形態を含むがこれらに限定されるものではない、異なる形態に調製される。さらに、一般式（１）の化合物は結晶形態物を含み、多形であってもよい。多形は、化合物の同じ元素の異なる格子配置を含む。多形は、通常、異なるＸ線回折パターン、赤外スペクトル、融点、密度、硬度、結晶形、光学特性および電気特性、安定性および溶解性を有する。再結晶溶媒、結晶化速度および保存温度のような様々な要因により、単結晶形態が優位となり得る。

別の態様では、一般式（１）の化合物は、軸不斉および／またはキラル中心を有し、したがって、ラセミ体、ラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオマー化合物および単一ジアステレオマーの形態で存在する。これらの軸不斉の各々は２つの光学異性体を独立して生成し、全ての可能な光学異性体、ジアステレオマー混合物、および純粋または部分的に純粋な化合物は、本発明の範囲内に含まれる。本発明は、これらの化合物の全てのそのような異性体形態を含むことを意味する。

本発明の化合物は、化合物を構成する１個以上の原子に不自然な割合の原子同位体を含んでいてもよい。例えば、トリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）、およびＣ－１４（^１４Ｃ）などの放射性同位体を用いて、この化合物を標識することができる。別の例として、化合物の水素原子を重水素で置き換えて重水素化化合物を形成することができ、重水素および炭素によって形成される結合は、一般的な水素原子および炭素によって形成される結合よりも強固である。重水素化薬物は非重水素化薬物と比較して、一般に、毒性および副作用を減少させ、薬物安定性を増加させ、有効性を増強し、薬物の生体内半減期を延長するなどの利点を有する。放射性であろうとなかろうと、本発明の化合物の全ての同位体変異体は、本発明の範囲内に包含される。

用語
特に明記しない限り、本明細書および特許請求の範囲における用語を含む、本出願において使用される用語は、以下のように定義される。明細書および添付の特許請求の範囲において、単数形「ａ」および「ａｎ」は文脈上他の意味を明確に示さない限り、複数の意味を含むことに留意しなければならない。特に明記しない限り、慣用の質量分析、核磁気共鳴分光、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術および薬理学の方法が使用される。本明細書において、「または」または「および」は特に明記しない限り、「および／または」を意味するために使用される。

特に明記しない限り、「アルキル」は、１～６個の炭素原子を含む直鎖および分枝鎖の基を含む飽和脂肪族炭化水素基を指す。メチル、エチル、プロピル、２－プロピル、ｎ－ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ－ブチルのような１～４個の炭素原子を含む低級アルキルが好ましい。本明細書中で使用される場合、「アルキル」は非置換および置換アルキル、特に、１つ以上のハロゲンで置換されたアルキルを含む。好適なアルキルは、ＣＨ_３、ＣＨ_３ＣＨ_２、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＦ_３ＣＨ、^ｉＰｒ、^ｎＰｒ、^ｉＢｕ、^ｎＢｕ、および、^ｔＢｕから選択される。

特に明記しない限り、「アルケニル」は炭素－炭素二重結合を含む不飽和脂肪族炭化水素基を指し、１～６個の炭素原子を含む直鎖および分枝鎖の基を含む。１～４個の炭素原子を含む低級アルケニル、例えばビニル、１－プロペニル、１－ブテニルまたは２－メチルプロペニルが好ましい。

特に明記しない限り、「アルキニル」は炭素－炭素三重結合を含む不飽和脂肪族炭化水素基を指し、１～６個の炭素原子を含む直鎖および分枝鎖の基を含む。１～４個の炭素原子を含む低級アルケニル、例えばエチニル、１－プロピニルまたは１－ブチニルが好ましい。

特に明記しない限り、「シクロアルキル」は３～６員の全炭素単環式脂肪族炭化水素基を指し、ここで、環の１つ以上は１つ以上の二重結合を含み得るが、それらのいずれも完全に共役したπ電子系を有さない。例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキサン、およびシクロヘキサジエンである。

特に明記しない限り、「アルコキシ」は、エーテル酸素原子を介して分子の残りの部分に結合するアルキル基を指す。代表的なアルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシおよびｔｅｒｔ－ブトキシなどの１～６個の炭素原子を有するものである。本明細書中で使用される場合、「アルコキシ」は、非置換および置換アルコキシ、特に１つ以上のハロゲンで置換されたアルコキシを含む。好適なアルコキシは、ＯＣＨ_３、ＯＣＦ_３、ＣＨＦ_２Ｏ、ＣＦ_３ＣＨ_２Ｏ、^ｉ－ＰｒＯ、^ｎ－ＰｒＯ、^ｉ－ＢｕＯ、^ｎ－ＢｕＯ、および、^ｔ－ＢｕＯから選択される。

特に明記しない限り、「ヘテロアリール」は、１つ以上のヘテロ原子（Ｏ、ＳまたはＮ）を含む芳香族基を指し、それは単環式または多環式であり、例えば、単環式ヘテロアリール環は、１つ以上の炭素環式芳香族基または他の単環式ヘテロシクリル基と縮合する。ヘテロアリールの例としては、ピリジル、ピリダジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾピリジル、および、ピロロピリミジニルが挙げられるが、これらに限定されない。

特に明記しない限り、「ヘテロシクロアルキル」は、１つ以上のヘテロ原子（Ｏ、ＳまたはＮ）を含む飽和または部分不飽和環系基を指し、ここで、窒素および硫黄原子は任意に酸化され、窒素原子は任意に環原子として４級化される。特に明記しない限り、「ヘテロシクロアルキル」環系は、単環式、二環式、スピロ、または、多環式の環系であってもよい。「ヘテロシクロアルキル」は、１個以上の環炭素またはヘテロ原子を介して分子の残りの部分に連結し得る。「ヘテロシクロアルキル」の例としては、ピロリジン、ピペリジン、Ｎ－メチルピペリジン、テトラヒドロイミダゾール、ピラゾリジン、ブチロラクタム、バレロラクタム、イミダゾリジノン、ヒダントイン、ジオキソラン、フタルイミド、ピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン、１，４－ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリン－Ｓ－オキシド、チオモルホリン－Ｓ，Ｓ－オキシド、ピペラジン、ピラン、ピリドン、３－ピロリン、チオピラン、ピロン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、キヌクリジン、２－アザスピロ［３．３］ヘプタンを含む。

特に明記しない限り、「ハロゲン」（またはハロ）は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。基名の前の用語「ハロ」（または「ハロゲン化」）は基が部分的または完全にハロゲン化されていること、すなわち、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、好ましくはＦまたはＣｌによって任意の組合せで置換されていることを示す。

特定の薬学・医学用語
本明細書で使用される「許容可能」という用語は、製剤の構成成分または有効成分が一般的な治療標的の健康に過度に悪影響を及ぼさないことを意味する。

本明細書中で使用される用語「治療」、「治療経過」または「治療」は、疾患の症状または状態を緩和、阻害または改善すること、合併症の発症を阻害すること、根底にあるメタボリックシンドロームを改善または予防すること、疾患または症状の発症を阻害すること、例えば、疾患または状態の進行を制御すること、疾患または症状を緩和すること、疾患または症状を軽減すること、疾患または症状により引き起こされる合併症を緩和すること、または、疾患または症状により引き起こされる徴候を予防または治療することを含む。本明細書中で使用される場合、化合物または医薬組成物は投与される場合、疾患、症状または状態を改善することができ、特に、重症度を改善すること、発症を遅延させること、進行を遅らせること、または、疾患の持続時間を減少させることを意味する。定期的または一時的な投与、若しくは、連続的または断続的な投与は、投与に起因するか、または、投与に関連し得る。

「有効成分」は、一般式（１）～（３）の化合物、および一般式（１）～（３）の化合物の薬学的に許容可能な無機または有機塩を指す。本発明の化合物は１つ以上の不斉中心（軸不斉）を含むことができ、したがって、ラセミ体、ラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオマー化合物および単一ジアステレオマーの形態で存在する。存在し得る不斉中心は、分子上の種々の置換基の性質に依存する。これらの不斉中心の各々は２つの光学異性体を独立して生成し、全ての可能な光学異性体、ジアステレオマー混合物、および純粋または部分的に純粋な化合物は、本発明の範囲内に含まれる。本発明は、これらの化合物の全てのそのような異性体形態を含むことを意味する。

「化合物」、「組成物」、「薬剤」または「医薬品（ｍｅｄｉｃｉｎｅ）または医薬品（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）」などの用語は本明細書では互換的に使用され、すべて、個体（ヒトまたは動物）に投与された場合に、局所的および／または全身的作用によって所望の薬理学的および／または生理学的応答を誘導することができる化合物または組成物を指す。

「投与された（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）、投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）または投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という用語は、本明細書において、化合物または組成物の直接投与、または活性化合物のプロドラッグ、誘導体、アナログなどの投与を指す。

本発明の広い範囲を規定する数値範囲およびパラメータは近似値であるが、特定の実施例に記載された関連する数値は本明細書において可能な限り正確に提示されている。しかしながら、任意の数値は本質的に、特定の試験方法から必然的に生じる標準偏差が含まれている。本明細書において、「約」とは、一般に、実際の値が特定の値または±１０％、５％、１％または０．５％の範囲内であることを意味する。或いは、用語「約」が当業者によって考慮されるように、実際の値が平均の許容可能な標準誤差内に収まることを示す。本明細書で使用される全ての範囲、量、値、およびパーセンテージ（例えば、材料の量、時間の長さ、温度、作動条件、定量比などを記述するために）は、実験例において、または、明示的に示される場合を除いて、「約」という語によって改変されると理解されるべきである。したがって、特に明記しない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータはすべて近似値であり、所望に応じて変更し得る。少なくとも、これらの数値パラメータは、示された有効数字または従来の丸め規則を使用して得られた数値として解釈されるべきである。

本明細書で特に定義されない限り、本明細書で使用される科学用語および技術用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。さらに、本明細書で使用される単数形の名詞は文脈によって矛盾しない限り、それらの複数形を包含し、使用される複数形の名詞もそれらの単数形を包含する。

治療用途
本発明はＧ１２ＣＫ－Ｒａｓ、Ｇ１２ＣＨ－Ｒａｓおよび／またはＧ１２ＣＮ－Ｒａｓ変異（例えば、癌）を含むがこれらに限定されない状態を含む疾患を治療するために、本発明の化合物または医薬組成物を使用する方法を提供する。

いくつかの実施形態では癌を治療するための方法が提供され、この方法は保護された一般式（１）～（３）の構造の上記化合物のいずれかの有効量の医薬組成物を、それを必要とする個体に投与することを含む。いくつかの実施形態において、癌は、Ｋ－Ｒａｓ、Ｈ－Ｒａｓおよび／またはＧ１２ＣＮ－Ｒａｓ変異によって媒介される。他の態様において、癌は、肺癌、膵臓癌、結腸癌、ＭＹＨ関連ポリポーシスまたは結腸直腸癌である。

投与経路
本発明の化合物およびその薬学的に許容可能な塩は、安全かつ有効な量の範囲の本明細書に開示される化合物またはその薬学的に許容可能な塩および薬学的に許容可能な賦形剤または担体を含む種々の調製物に調製することができ、「安全かつ有効な量」は、化合物の量が重篤な副作用を引き起こすことなく状態を有意に改善するのに充分であることを意味する。化合物の安全かつ有効な量は、治療される対象の年齢、状態、治療の経過、および他の特定の状態に従って決定される。

「薬学的に許容可能な賦形剤または担体」は、ヒトでの使用に適しており、十分な純度および十分に低い毒性でなければならない、１つ以上の適合可能な固体または液体の充填剤またはゲル物質を指す。「適合可能な」とは、組成物の成分が化合物の薬効を有意に低下させることなく、本化合物と、および、互いに混合することができることを意味する。薬学的に許容可能な賦形剤または担体の例は、セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースナトリウムまたは酢酸セルロース）、ゼラチン、タルク、固体潤滑剤（例えば、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウム）、硫酸カルシウム、植物油（例えば、大豆油、ゴマ油、落花生油またはオリーブ油）、ポリオール（例えば、プロピレングリコール、グリセロール、マンニトールまたはソルビトール）、乳化剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標））、湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）、着色剤、香料、安定剤、抗酸化剤、保存剤、パイロジェンフリー水などである。

本発明の化合物を投与する場合、経口、直腸、非経口（静脈内、筋肉内または皮下）または局所的に投与することができる。

経口投与のための固体剤形には、カプセル、錠剤、丸剤、散剤および顆粒剤が含まれる。これらの固体剤形において、活性化合物は、少なくとも１つの従来の不活性賦形剤（または担体）（例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム）と混合されるか、若しくは、以下の成分、（ａ）充填剤または増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および、ケイ酸）、（ｂ）結合剤（例えば、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、および、アカシア）、（ｃ）保湿剤（例えば、グリセロール）、（ｄ）崩壊剤（例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定の複合ケイ酸塩、および、炭酸ナトリウム）、（ｅ）溶液遅延剤（例えば、パラフィン）、（ｆ）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）、（ｇ）湿潤剤（例えば、セチルアルコール、および、モノステアリン酸グリセロール）、（ｈ）吸着剤（例えば、カオリン）、および（ｉ）潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコールおよびラウリル硫酸ナトリウムまたはこれらの混合物）、と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形には、緩衝剤も含み得る。

錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒剤のような固体剤形は、腸溶コーティングなどのコーティングおよびシェル、および、当技術分野で周知の他の材料を使用して調製することができる。それらは乳白剤を含んでもよく、そのような組成物中の活性化合物または化合物は消化管の特定の部分において遅延様式で放出されてもよい。使用することができる埋め込み成分の例は、ポリマー物質およびワックスベースの物質である。必要であれば、活性化合物は、１つ以上の上記賦形剤を含むマイクロカプセル形態であってもよい。

経口投与に適した液体剤形は、医薬として許容可能なエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤を含む。活性化合物に加えて、液体剤形は、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エタノール、イソプロパノール、炭酸エチル、酢酸エチル、プロピレングリコール、１，３－ブタンジオール、ジメチルホルムアミド、および油、特に綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油、または、これらの物質の混合物などの当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含むことができる。

このような不活性希釈剤に加えて、組成物は、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味料、香味剤、および芳香剤などのアジュバントを含むこともできる。

懸濁液は、活性化合物に加えて、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメチレートおよび寒天、または、これらの物質の混合物などの懸濁化剤を含むことができる。

非経口注射のための組成物は、生理学的に許容可能な無菌の水性または無水溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、および無菌の注射可能な溶液または分散液に再溶解するための無菌粉末を含み得る。適切な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒または賦形剤には、水、エタノール、ポリオールおよびそれらの適切な混合物が含まれる。

本発明の化合物の局所投与のための剤形には、軟膏、散剤、パッチ、スプレーおよび吸入剤が含まれる。有効成分は、無菌条件下で、生理学的に許容可能な担体、および必要に応じて必要とされ得る任意の保存剤、緩衝剤または噴射剤と混合される。

本発明の化合物は、単独で、または、他の薬学的に許容可能な化合物と組み合わせて投与され得る。

医薬組成物が使用される場合、本発明の化合物の安全かつ有効な量が、治療される哺乳動物（ヒトなど）に投与され、ここで、投与量は薬学的に有効な投与量である。体重６０ｋｇのヒトの場合、１日当たりの投与量は、通常、１～２０００ｍｇ、好ましくは５０～１０００ｍｇである。特定の用量を決定する際に、投与経路、患者の健康状態などのような因子も考慮され、これは当業者に周知である。

なお、上記した本発明の特徴および実施例の特徴は、任意に組み合わせることができる。本明細書に開示された全ての特徴は任意の構成形態で使用されてもよく、本明細書に開示された様々な特徴は、同一、同等、または、同様の目的を提供する任意の代替的な特徴で置き換えられてもよい。したがって、特に明記しない限り、開示された特徴は、単に、同等または類似の特徴の一般的な例に過ぎない。

詳細な説明
上記の化合物、方法および医薬組成物の種々の特定の態様、特徴および利点は以下の説明において詳細に記載され、これは本発明を明確にする。以下の詳細な説明および実施例は、参照のためだけに特定の実施形態を説明していることを理解されたい。本発明の説明を読んだ後、当業者は本発明に様々な変更または改変を加えることができ、そのような均等物も本明細書で定義される本発明の範囲内に含まれている。

全ての実施例において、１Ｈ－ＮＭＲスペクトルは、ＶｉａｎＭｅｒｃｕｒｙ４００核磁気共鳴分光計を用いて記録され、化学シフトはδ（ｐｐｍ）で表され、分離用のシリカゲルは特定されない場合、２００～３００メッシュシリカゲルであり、溶離剤の比は体積比である。

本発明において、以下の略語を使用する。ＭｅＣＮはアセトニトリルを表し、ＤＣＭはジクロロメタンを表し、ＤＩＰＥＡはジイソプロピルエチルアミンを表し、ジオキサンは１，４－ジオキサンを表し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドを表し、ｈは時間を表し、Ｋ_３ＰＯ_４はリン酸カリウムを表し、ｍｉｎは分を表し、ＭＳは質量分析を表し、ＮａＨは水素化ナトリウムを表し、ＮＭＲは核磁気共鳴を表し、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３はトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムを表し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２は［１，１´－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウムジクロリドを表し、ＴＦＡ（ＣＦ_３ＣＯＯＨ）はトリフルオロ酢酸を表し、ＴＬＣは薄層クロマトグラフィを表し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し、キサントホスは４，５－ビス（ジフェニルホスファン）－９，９－ジメチルキサンテンを表す。

実施例１．１－（７－（６－シクロプロピル－２－（３－（（ジメチルアミノ）メチル）アゼチジン－１－イル）－７－（５－メチル－１Ｈ－インダゾール－４－イル）－８－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）キナゾリン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノン－２－イル）プロプ－２－エン－１－オン（化合物１）の合成

ステップ１：化合物１－３の合成
化合物１－１（５．５３ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）をジオキサン（８０ｍＬ）に懸濁した。ＤＩＰＥＡ（１０．１ｇ、７８．６ｍｍｏｌ）を氷浴中に添加し、続いて１～２（２．９６ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０分間撹拌し、次いで室温に温め、室温で１時間撹拌した。ＴＬＣで検出した反応終了後、反応混合物に水を添加してＥＡで抽出した。有機相を乾燥、濃縮し、残渣をＥＡでスラリー化して黄色固体１－３（４．５２ｇ、収率５６．３％）を得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：８．２６（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｓ，４Ｈ），３．６５（ｓ，４Ｈ），１．８６（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，４Ｈ）、１．３９（ｓ，９Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）：ＭＳ（ＥＳＩ）：６１１．２［Ｍ＋１］^＋。

ステップ２：化合物１－４の合成
化合物１－３（４．２８ｇ、７．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）およびＴＨＦ（４０ｍＬ）の混合溶液に溶解した。１－（アゼチジン－３－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルメチルアミン（１．６０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）およびＤＡＢＣＯ（１５５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応混合物に水を添加してＥＡで抽出した。有機相を乾燥、濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して化合物１－４（３．６２ｇ、収率７５．１％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：６８９．２［Ｍ＋１］^＋。

ステップ３：化合物１－５の合成
トリフルオロエタノール（０．７５ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解した。ＮａＨ（６０％、０．６０ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）を氷浴中で添加した。混合物を室温で５分間撹拌して、ナトリウムトリフルオロエトキシドを得た。化合物１－４（３．４５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解した。上記で調製したＤＭＦ中のトリフルオロエトキシナトリウム溶液を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応混合物に水を添加してＥＡで抽出した。有機相を乾燥、濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して化合物１－５（３．５４ｇ、収率９２．１％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：７６９．２［Ｍ＋１］^＋。

ステップ４：化合物１－６の合成
１つ口フラスコに、化合物１－５（３．０８ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸（０．４３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（０．５９ｇ、０．８ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（０．８５ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＭｅＣＮ（４０ｍＬ）、ジオキサン（４０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（１６．５ｍＬ）を添加した。混合物を窒素雰囲気下で１００℃にて５時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、化合物１－６（１．７８ｇ、収率６５．２％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：６８３．３［Ｍ＋１］^＋。

ステップ５：化合物１－７の合成
一つ口フラスコに、化合物１－６（１．３７ｇ、２．０ｍｍｏｌ）、５－メチル－１Ｈ－インダゾール－４－ボロン酸（０．５３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（０．２７ｇ、０．３ｍｍｏｌ）、キサントホス（０．３５ｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（０．８５ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、続いてジオキサン（３０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（３ｍＬ）を添加した。混合物を窒素下で１２０℃にて一晩撹拌した。反応終了後、カラムクロマトグラフィーにより精製し、化合物１－７（５５７ｍｇ、収率２６．４％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：７３５．４［Ｍ＋１］^＋。

ステップ６：化合物１－８の合成
化合物１－７（５１５ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解した。ＴＦＡ（３ｍＬ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応終了後、反応混合物を濃縮し、飽和炭酸ナトリウムで塩基性化し、ＥＡで抽出した。有機相を乾燥、濃縮して化合物１－８（４４５ｍｇ、収率１００％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：６３５．４［Ｍ＋１］^＋。

ステップ７：化合物１の合成
化合物１－８（３１８ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（６５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を氷塩浴中で添加し、続いて塩化アクリロイル（４３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。混合物を氷浴中で２時間反応させた。反応混合物を飽和食塩水で洗浄した。有機相を乾燥、濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製し、化合物１（１８１ｍｇ、収率６５．８％）を得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．９３（ｓ，１Ｈ），７．４３－７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），６．３４（ｄｄ，Ｊ＝１６．９，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），６．０９－６．１４（ｍ，１Ｈ），５．６７－５．７０（ｍ，１Ｈ），４．８０－４．９０（ｍ，１Ｈ），４．４９－４．５９（ｍ，１Ｈ），４．０２－４．１０（ｍ，４Ｈ），３．８３－３．８７（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，２Ｈ），３．５７（ｓ，４Ｈ），２．１０－２．１５（ｍ，１２Ｈ），１．９２－２．０２（ｍ，４Ｈ），１．２６－１．２９（ｍ，１Ｈ），０．４８－０．６１（ｍ，４Ｈ），ＭＳ（ＥＳＩ）：６８９．４［ｍ＋１］^＋。

キラルカラム上での分離および精製により、化合物１の２つの軸不斉キラル異性体を得ることができる。

実施例２～１３２．化合物２～１３２の合成
標的化合物２～１３２は、実施例１と同様の合成方法に従って、異なる出発物質を用いて得られた。

実施例１３３．化合物７３のキラル分割
本明細書の化合物は、軸不斉を有し得る。軸不斉を有する化合物は、２つのキラル異性体を得るために分割することができる。

サンプルをエタノールに溶解して２５ｍｇ／ｍＬの濃度とし、注入量は５００μＬであった。分取クロマトグラフィーの条件：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ－Ｈ（２０×２５０ｍｍ、５μｍ）クロマトグラフィーカラム；移動相：エタノール－ｎ－ヘキサン（４０：６０）；流速：１２ｍＬ／分；検出波長：２５４ｎｍ。段階的溶離液を回転蒸発によって濃縮し、乾燥させて生成物７３－ａおよび７３－ｂを得た。

第１の軸不斉異性体：７３－ａ；クロマトグラフィーカラムでのリテンションタイム：８．５３２分；および第２の軸不斉異性体：７３－ｂ；クロマトグラフィーカラムでのリテンションタイム：１０．１２６分。

化合物６７を同様の分割法によってキラル分割して、それらの２つのキラル異性体６７－ａおよび６７－ｂを得た。クロマトグラフィーカラムでのリテンションタイムは以下の通りであった。第１の軸不斉異性体：６７－ａ；クロマトグラフィーカラムでのリテンションタイム：５．４１３分；および第２の軸不斉異性体：６７－ｂ；クロマトグラフィーカラムでのリテンションタイム：７．９３８分。

本明細書における他の化合物も、同様の方法を用いてキラルに分割することができる。

実施例１３４．化合物によるＨ３５８細胞におけるｐＥＲＫおよびＥＲＫタンパク質含量アッセイ

Ｈ３５８細胞を２４ウェルプレートに播種した。増殖の１日後、試験化合物（１μＭの濃度）を添加した。化合物の２４時間の作用後、細胞を溶解し、細胞溶解物を９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに移した。溶解物におけるｐＥＲＫおよびＥＲＫのレベルを、ＥＬＩＳＡキット（ａｂｃａｍ１７６６６０）を用いて測定した。ＥＲＫに対するｐＥＲＫの比を計算し、ＤＭＳＯグループと比較し、化合物によるｐＥＲＫ活性の阻害のパーセンテージを計算した。結果を下記の表２に示す。

実施例１３５．Ｈ３５８細胞に対する化合物の抗増殖活性
２５００のＨ３５８細胞を９６ウェルの超低接着表面プレート（コーニング、７００７）に播種した。増殖１日後、連続希釈した化合物（最大濃度５μＭ、５倍希釈、合計５用量）を添加した。化合物を添加してから３日後に、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９６８１）を添加して、ペレットの増殖を評価し、ＩＣ_５０を計算した。結果を下記の表３に示す。

表２および表３から分かるように、Ｈ３５８細胞に対する抗増殖活性は０．３μＭ未満であり、Ｒ^４が非芳香族複素環またはスピロ環である場合、ＲＡＳ経路のＥＲＫリン酸化に対して強い阻害活性を有し、Ｋ－ＲＡＳＧ１２Ｃ変異を有するＨ３５８腫瘍細胞の増殖に対して強い阻害活性を有する。

実施例１３６．マウスにおける抗腫瘍活性の評価
ヒト膵癌ＭｉａＰａＣａ－２細胞を、３７℃／５％ＣＯ_２インキュベーターで、１０％ウシ胎仔血清を含む１６４０培地で従来通りに培養した。継代培養後、細胞が所望の数に達した時点で細胞を回収した。１×１０^７のＭｉａＰａＣａ－２細胞を各ヌードマウスの左側背面に注射し、腫瘍が１５０ｍｍ^３に成長した後、動物を投与のために無作為にグループ分けした。グループは以下の通りである。１）溶媒対照グループ、８匹のマウス、２）化合物６グループ、化合物１４グループ、化合物２８グループ、化合物４４グループ、化合物６０グループ、化合物１０３グループおよび対照薬物Ｂ（ＷＯ２０１８／１４３３１５の実施例３５）、各グループは８匹のマウスである。溶媒対照グループのマウスには０．５％ＣＭＣ－Ｎａを１日１回胃内投与し、化合物グループのマウスには０．５％ＣＭＣ－Ｎａ懸濁液を１日１回胃内投与した。毎週火曜日と木曜日に、マウスの腫瘍体積と体重を測定し、ヌードマウスを治療期間中２１日目に屠殺した。試験結果を下記の表４に示す。

上記表のデータから分かるように、本発明の化合物は強いｉｎｖｉｖｏでの抗腫瘍活性を有し、１０ｍｇ／ｋｇ／日の用量での連続投与の２１日後に腫瘍退縮を生じることができる。化合物６、１４、２８、６０および１０３は、対照薬物Ｂよりも強いｉｎｖｉｖｏ活性を有する。

Claims

一般式（１）の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物。

一般式（１）において、
ｍは、１または２の整数であり、
ｎは、１または２の整数であり、
Ｒ^１は、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ２～Ｃ４アルケニル、Ｃ２～Ｃ４アルキニルまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルであり、
Ｒ^２は、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキルであり、
Ｒ^３は、

であり、
ここで、Ｒ^ａは、ＨまたはＦであり、Ｒ^ｂは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＭｅであり、Ｒ^ｃは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＭｅであり、Ｒ^ｄは、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、Ｍｅまたはシクロプロピルであり、Ｒ^ｅ、Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、Ｒ^ｈ、Ｒ^ｉ、Ｒ^ｊおよびＲ^ｋは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＮＨ_２、ＣＦ_３、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルであり、
Ｒ^４は、

であり、
ここで、ｎ_１およびｎ_２は、独立して、１または２の整数であり、ｍ_１、ｍ_２、ｍ_３およびｍ_４は、独立して、０、１、２、３または４の整数であり、ｍ_５は、１、２または３の整数であり、Ａは、－ＣＨ_２－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＳＯ－、－ＳＯ_２－または－Ｎ（Ｃ１～Ｃ３アルキル）－であり、Ｖは、－ＣＨ_２－、－ＳＯ_２－または－ＣＯ－であり、Ｌは、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ－または－ＣＯ－であり、Ｘは、５～７員のヘテロアリールまたは部分飽和の５～７員のヘテロシクロアルキルであり、Ｙは、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－またはヘテロシクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－であり、Ｒ^ｌとＲ^ｍは、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキル、ヒドロキシル置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、シアノ置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－であり、または、Ｒ^ｌおよびＲ^ｍは、Ｎ原子と共に３～８員のヘテロシクロアルキルを形成し、ここで、前記３～８員のヘテロシクロアルキルは、ＯＨ、ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシおよび（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシから選択される１～３置換基で置換され得、Ｒ^ｎは、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ２～Ｃ４アルケニル、Ｃ２～Ｃ４アルキニル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３アルキル、ヒドロキシル置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、シアノ置換Ｃ１～Ｃ３アルキル、（Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（ハロゲン化Ｃ１～Ｃ３）アルコキシ－（Ｃ２～Ｃ３）アルキル－、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－またはヘテロシクロアルキル－（Ｃ１～Ｃ３）アルキル－であり、Ｒ^ｏは、ＯＨ、ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ１～Ｃ３アルコキシまたはＣ３～Ｃ６シクロアルキルである。
前記一般式（１）において、Ｒ^１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｍｅ、Ｅｔ、イソプロピル、ビニル、エチニルまたはシクロプロピルである請求項１に記載の化合物。
前記一般式（１）において、Ｒ^２は、ＣＨ_３、ＣＨ_３ＣＨ_２、ＣＦ_３ＣＨ_２、ＣＨＦ_２ＣＨ_２またはＣＦ_３（ＣＨ_３）ＣＨである請求項１または２に記載の化合物。
前記一般式（１）において、Ｒ^３は、

である、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。
前記一般式（１）において、Ｒ^４は、

である、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。
前記化合物は、以下の構造

の１つを有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物、または、その薬学的に許容可能な塩。
薬学的に許容可能な賦形剤または担体、および、有効成分として請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物を含む、医薬組成物。
Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異タンパク質に関連する疾患の治療、調節、および／または、予防用の医薬品の調製における、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物、或いは、請求項７に記載の医薬組成物の使用。
Ｋ－ＲａｓＧ１２Ｃ変異によって媒介される疾患を治療するための方法であって、対象体に、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物、若しくは、その異性体、結晶形態物、薬学的に許容可能な塩、水和物、または、溶媒和物、或いは、請求項７に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
前記疾患は癌であり、前記癌は血液癌および固形腫瘍である請求項９に記載の方法。