CN113933438A - 一种紫芪克咳口服液的含量测定方法及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种紫芪克咳口服液的含量测定方法及制备方法，含量测定方法采用高效液相色谱法对紫芪克咳口服液的含量进行测定，测定方法的步骤为：A、对照品溶液的制备；B、供试品溶液的制备；C、通过高效液相色谱法进行测定；紫芪克咳口服液的制备方法通过多个步骤完成紫芪克咳口服液的制备；本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法对现有的紫芪克咳口服液含量测定方法进行了相应的修订，解决WS‑5038(B‑0038)‑2014Z《含量测定》项中补骨脂素和异补骨脂素的理论转移率低的问题，确保药品质量；含量测定方法操作简单，检验误差较小，含量转移率高，在市场上使本领域技术人员能更快，更准确的对产品进行含量测定工作，有效地控制该制剂的质量及稳定性。

Description

一种紫芪克咳口服液的含量测定方法及制备方法
技术领域
本发明涉及一种口服液含量测定方法及制备方法，尤其涉及一种紫芪克咳口服液的含量测定方法及制备方法。
背景技术
紫芪克咳口服液具有益气健脾、补肺固肾的功效，适用于咳嗽气短，咳痰清稀的症状。现有的紫芪克咳口服液质量标准中萃取后HPLC法含量检测方法存在一定的缺陷，含量转移率偏低，重现性差，检测时限长，检测方法易造成较大的检验误差，在进行产品稳定性研究分析时容易造成误解、误判，紫芪克咳口服液含量的测定方法有待提高。
发明内容
为了解决上述技术所存在的不足之处，本发明提供了一种紫芪克咳口服液含量的测定方法。
为了解决以上技术问题，本发明采用的技术方案是：一种紫芪克咳口服液的含量测定方法：采用高效液相色谱法对紫芪克咳口服液的含量进行测定，色谱条件为ZORBAXEclipse XDB-C18柱(250×4.6mm，5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.125％磷酸溶液(25：75)为流动相，流速1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长为248nm，理论板数按补骨脂素峰计算应不低于2500；
测定方法的步骤为：
A、对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1ml各含5μg补骨脂素、异补骨脂素对照品的混合溶液，即得；
B、供试品溶液的制备：精密量取装量测定项下的紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液；
C、通过高效液相色谱法进行测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
一种紫芪克咳口服液的制备方法的步骤为：
紫芪克咳口服液由以下重量的原料药材制备而成：黄芪75g、丹参45g、白术30g、补骨脂45g、麦冬30g、紫苑50g、五味子25g；以上七味，粉碎成粗粉，装袋，加水浸泡过夜，加水煎煮提取三次，第一次加8倍量水，煎提1小时，第二、三次加6倍量水，煎提分别为1小时、0.5小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至300ml，离心，取上清液，加乙醇至含醇量达70％，静置12小时，滤取上清液，减压回收乙醇至无醇味，放冷，加水稀释至600ml，低温放置24小时，过滤，滤液浓缩至300ml，再加浸膏体积的0.2％的活性炭煮沸10分钟，过滤，滤液加蔗糖80克，加水至1000ml，滤过，灌装，即得。
本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法对现有的紫芪克咳口服液含量测定方法进行了相应的修订，改进紫芪克咳口服液含量测定方法，解决WS-5038(B-0038)-2014Z《含量测定》项中补骨脂素和异补骨脂素的理论转移率低的问题，确保药品质量。本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法操作简单，测定更为准确，检验误差较小，含量转移率高，在市场上使本领域技术人员能更快，更准确的对产品进行含量测定工作，有效地控制该制剂的质量及稳定性。
附图说明
图1为补骨脂素、异补骨脂素对照品图谱。
图2为紫芪克咳口服液样品图谱。
图3为紫芪克咳口服液阴性对照图谱。
图4为补骨脂素对照品标准曲线图。
图5为异补骨脂素对照品标准曲线图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
对组成为黄芪75重量份、丹参45重量份、白术30重量份、补骨脂45重量份、麦冬30重量份、紫菀50重量份、五味子25重量份的紫芪克咳口服液的含量进行测定；
紫芪克咳口服液的制备方法的步骤为：紫芪克咳口服液由以下重量的原料药材制备而成：黄芪75g、丹参45g、白术30g、补骨脂45g、麦冬30g、紫苑50g、五味子25g；以上七味，粉碎成粗粉，装袋，加水浸泡过夜，加水煎煮提取三次，第一次加8倍量水，煎提1小时，第二、三次加6倍量水，煎提分别为1小时、0.5小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至300ml，离心，取上清液，加乙醇至含醇量达70％，静置12小时，滤取上清液，减压回收乙醇至无醇味，放冷，加水稀释至600ml，低温放置24小时，过滤，滤液浓缩至300ml，再加浸膏体积的0.2％的活性炭煮沸10分钟，过滤，滤液加蔗糖80克，加水至1000ml，滤过，灌装，即得。
本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法，采用高效液相色谱法((中国药典2020年版通则0512)对紫芪克咳口服液的含量进行测定，色谱条件为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250×4.6mm，5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.125％磷酸溶液(25：75)为流动相，流速1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长为248nm，理论板数按补骨脂素峰计算应不低于2500；
测定方法的步骤为：
A、对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1ml各含5μg补骨脂素、异补骨脂素对照品的混合溶液，即得；
B、供试品溶液的制备：精密量取装量测定项下的紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液；
C、通过高效液相色谱法进行测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例、
本实施例所检测的紫芪克咳口服液为威海华洋药业有限公司生产。紫芪克咳口服液每10ml含补骨脂素(C11H6O3)和异补骨脂素(C11H6O3)的总量计，不得少于0.20mg。
1.所用仪器、试剂、对照品来源
1.1所用仪器来源
仪器名称 仪器型号 仪器编号 厂家
电子分析天平 MSA125P-CE HYJY-08-009 赛多利斯
高效液相色谱仪 U3000 HYJY-08-001 赛默飞
高效液相色谱仪 U3000 HYJY-08-002 赛默飞
1.2所用试剂来源
试剂名称 批号 生产厂家
甲醇 2105234 TEDIA
乙腈 57Y2005WL ACS
磷酸 20200725 天津市科密欧化学试剂有限公司
1.3所用对照品来源
名称 批号 含量 厂家
补骨脂素 110739-201918 99.6％ 中国食品药品检定研究院
异补骨脂素 110738-202016 99.4％ 中国食品药品检定研究院
2.专属性试验
2.1溶液的制备
阴性对照溶液(除补骨脂药材以外)的制备：按紫芪克咳口服液工艺规程除补骨脂以外其它原辅料制得阴性对照样品,精密吸取本样品5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为阴性对照溶液。
对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品约10mg、异补骨脂素对照品约10mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。分别精密量取对照品储备液5ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密吸取紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。
2.2测定法：分别精密吸取上述阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定。
2.3可接受标准为
空白溶剂、阴性对照均对主峰应无干扰，且供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间应一致。
2.4测定结果
试验结果见表1：
表1专属性试验结果
Figure BDA0003348804510000051
3.线性范围
3.1溶液的制备
取补骨脂素对照品约10mg、异补骨脂素对照品约10mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，制成分别含补骨脂素和异补骨脂素均约为0.5μg/ml、0.75μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml、5.0μg/ml、6.0μg/ml、8.0μg/ml的混合溶液，摇匀，作为对照品溶液(1)、对照品溶液(2)、对照品溶液(3)、对照品溶液(4)、对照品溶液(5)、对照品溶液(6)、对照品溶液(7)、对照品溶液(8)。
3.2测定法
分别精密量取上述溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。分别以浓度为自变量，以峰面积为因变量，按最小二乘法进行线性回归，得出线性方程。
3.3可接受的标准为
线性回归的相关系数(r)不得小于0.9990。
3.4测定结果
试验结果见表2：
表2方法线性试验结果
Figure BDA0003348804510000061
4.回收率试验
4.1溶液的制备
对照品储备液的制备：取补骨脂素对照品约10mg、异补骨脂素对照品约10mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得，备用。
供试品溶液的制备：精密吸取紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，精密加入对照品储备液各1ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。
同法制备6份供试品溶液。
对照品溶液制备：精密量取对照品储备液各5ml，置同一100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
4.2测定法
精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。计算补骨脂素、异补骨脂素的回收率。
4.3可接受的标准
回收率均应在85.0％-110.0％之间，6份回收率数据的相对标准偏差(RSD)应不大于2.0％。
4.4测定结果
试验结果见表3、表4：
表3补骨脂素回收率试验结果
Figure BDA0003348804510000081
表4异补骨脂素回收率试验结果
Figure BDA0003348804510000082
4.5结论
以上数据表明，补骨脂素、异补骨脂素回收率均符合规定，说明本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法补骨脂素、异补骨脂素测定准确度良好，可真实准确反映样品的含量。
5、重复性试验
5.1溶液的制备
对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品约10mg、异补骨脂素对照品约10mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密吸取紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。
同法制备6份供试品溶液。
5.2测定法
精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪中，记录色谱图。
5.3可接收标准
6份供试品溶液样品含量的相对标准偏差(RSD)应不大于4.0％。
5.4测定结果
试验结果见表5：
表5重复性试验结果
Figure BDA0003348804510000091
6、中间精密度试验
按照重复性试验方法操作，在同一实验室由不同分析人员在不同日期，采用同一方法，各测定6分样品，测定结果见表6。
表6重复性试验结果
Figure BDA0003348804510000101
7、耐用性试验
7.1不同品牌同类型色谱柱对含量测定的影响试验
按照重复性试验方法操作，取2根不同品牌同类型的色谱柱进行试验，测定结果见表7、表8。
表7不同品牌同类型色谱柱对补骨脂素测定的影响试验结果
Figure BDA0003348804510000111
表8不同品牌同类型色谱柱对异补骨脂素测定的影响试验结果
Figure BDA0003348804510000112
7.2不同流速对含量测定的影响试验
按照重复性试验方法操作，当流速分别为0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min时进行试验，测定结果见表9、表10。
表9不同流速对补骨脂素测定的影响试验
Figure BDA0003348804510000113
Figure BDA0003348804510000121
表10不同流速对异补骨脂素测定的影响试验
Figure BDA0003348804510000122
7.3被测溶液的稳定性试验
按照重复性试验方法操作，当0、2、4、8、12小时时进行分别进样，测定结果见表11、表12。
表11样品溶液稳定性-补骨脂素试验结果
Figure BDA0003348804510000123
表12样品溶液稳定性-异补骨脂素试验结果
Figure BDA0003348804510000124
7.4结论
通过不同品牌同类型色谱柱、不同流速、样品溶液稳定性试验可知，本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法测定条件小的变动能满足含量测定的要求，可确保紫芪克咳口服液的含量测定方法的可靠性。
8.两种不同检验方法对比
按照原标准WS-5038(B-0038)-2014Z及本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法，取3批样品分别进行检验，检测结果见表13。
表13两种不同检验方法结果对比
Figure BDA0003348804510000131
9.总结
通过专属性、线性范围、重复性、中间精密度、准确度、耐用性试验可知，本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法可满足检验要求，可保证数据准确、可靠，且本发明的紫芪克咳口服液的含量测定方法大大提高了补骨脂素和异补骨脂素的转移率。
上述实施方式并非是对本发明的限制，本发明也并不仅限于上述举例，本技术领域的技术人员在本发明的技术方案范围内所做出的变化、改型、添加或替换，也均属于本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种紫芪克咳口服液的含量测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法对紫芪克咳口服液的含量进行测定，色谱条件为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250×4.6mm，5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.125％磷酸溶液(25：75)为流动相，流速1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长为248nm，理论板数按补骨脂素峰计算应不低于2500；
测定方法的步骤为：
A、对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1ml各含5μg补骨脂素、异补骨脂素对照品的混合溶液，即得；
B、供试品溶液的制备：精密量取装量测定项下的紫芪克咳口服液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液；
C、通过高效液相色谱法进行测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.一种紫芪克咳口服液的制备方法，其特征在于：所述方法的步骤为：
紫芪克咳口服液由以下重量的原料药材制备而成：黄芪75g、丹参45g、白术30g、补骨脂45g、麦冬30g、紫苑50g、五味子25g；以上七味，粉碎成粗粉，装袋，加水浸泡过夜，加水煎煮提取三次，第一次加8倍量水，煎提1小时，第二、三次加6倍量水，煎提分别为1小时、0.5小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至300ml，离心，取上清液，加乙醇至含醇量达70％，静置12小时，滤取上清液，减压回收乙醇至无醇味，放冷，加水稀释至600ml，低温放置24小时，过滤，滤液浓缩至300ml，再加浸膏体积的0.2％的活性炭煮沸10分钟，过滤，滤液加蔗糖80克，加水至1000ml，滤过，灌装，即得。
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