CN113917004A - 一种远志药材质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种远志药材质量检测方法，包括步骤1、分别制备供试品、对照品及对照药材溶液；步骤2、构建待测远志药材、对照品和远志对照药材HPLC特征图谱，其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，检测波长为318～322nm，进样量为10ul；步骤3、将待测远志药材HPLC特征图谱与对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱进行对比，以检测待测远志药材是否质量合格。本发明通过HPLC测定检测远志的8种成分的方法，充分展示了远志的化学成分特征，该方法精密度高，稳定性好，重复性好，通过所构建的远志对照药材的HPLC特征图谱为远志药材的质量控制提供了全面的检测手段。
Description
技术领域
本发明属于中药材质量标准研究技术领域，具体涉及一种远志药材质量检测方法。
背景技术
远志为远志科植物PolygalatenuifoliaWilld.或卵叶细志Polygala sibiricaL.的干燥根(2020年版《中国药典》一部收载)，为常用中药，用于安神益智，交通心肾，祛痰，消肿。用于心肾不交引起的失眠多梦，健忘惊悸，神志恍惚，咳痰不爽，疮疡肿毒，乳房肿痛等症，在临床上具有广泛的应用。远志性味苦、辛、温，归心、肾、肺经，载于《神农本草经》，被列为上品。
2020年版《中国药典》一部对远志质量的检验方法包括性状、鉴别、检查、浸出物、含量测定，无特征图谱的检验方法，这对远志药材的质量控制存在一的缺陷。
发明内容
本发明提供一种远志药材质量检测方法，通过HPLC测定检测，检测远志的8种成分的方法，充分展示了远志的化学成分特征，该方法精密度高，稳定性好，重复性好，通过所构建的远志对照药材的HPLC特征图谱为远志药材的质量控制提供了全面的检测手段。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案实现：
一种远志药材质量检测方法，包括以下步骤：
步骤1、制备供试品、对照品及对照药材溶液：分别精密称取待测远志药材、远志
酮Ⅲ和3，6＇-二芥子酰基蔗糖对照品以及远志对照药材，制备得到远志药材供试品溶液、对照品混合溶液和远志对照药材溶液；
步骤2、HPLC特征图谱构建：精密吸取溶液，分别采用高效液相色谱仪分析，构建出待测远志药材HPLC特征图谱、对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱，其中，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，检测波长为318～322nm，进样量为10ul；
步骤3、质量检测：将待测远志药材HPLC特征图谱与对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱进行对比，以检测待测远志药材是否质量合格。
作为上述方案的优选，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，检测波长为320nm，进样量为10ul。
作为上述方案的优选，洗脱条件为：0～15min，流动相A的体积变化为6～11％，流动相B的体积变化为94～89％；15～25min，流动相A的体积为11％，流动相B的体积变化为89％；25～65min，流动相A的体积变化为11～25％，流动相B的体积变化为89～75％；67～72min，流动相A的体积为75％，流动相B的体积为25％；72～74min，流动相A的体积变化为75～6％，流动相B的体积变化为25～94％；74～90min，流动相A的体积为6％，流动相B的体积为94％。
作为上述方案的优选，远志药材供试品溶液和远志对照药材溶液的制备方法均为：取远志药材0.3～0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入10％～100％甲醇25ml，密塞，回流30～120min，放冷，再称定重量，用10％～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
作为上述方案的优选，远志药材供试品溶液和远志对照药材溶液的制备方法均为：取远志药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，回流60min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
作为上述方案的优选，对照品混合溶液的制备方法为：在远志对照药材溶液基础上，另取远志
酮Ⅲ、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖适量，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含远志
酮Ⅲ0.15mg、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖0.2mg的溶液，并混合均匀即得对照品混合溶液。
作为上述方案的优选，质量检测中，若供试品HPLC特征图谱呈现出与远志对照药材HPLC特征图谱中的8个特征峰保留时间相对应的色谱峰，且其中峰5、峰6与对照品保留时间相一致，则判断为质量合格。
由于具有上述结构，本发明的有益效果在于：
1、本发明创新性提出通过采用高效液相色谱仪分析构建远志药材HPLC特征图谱的远志质量检验方法，弥补了远志药材质量特征图谱检测领域的空白，为远志药材的质量控制提供了全面的检测手段；而且构建的特征图谱能够全面的反映样品的特征峰信息，方法稳定，精密度高，重现性好；
2、本发明能够全面并准确对远志药材进行质量控制，同时也为远志道地药材质量标准的建立提供依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为本发明一种远志药材质量检测方法的流程图；
图2为对照品HPLC特征图谱；
图3为远志对照药材HPLC特征图谱；
图4为待测远志药材与、对照品及远志对照药材HPLC特征图谱对照图。
具体实施方式
下面将结合本发明的附图，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本实施例提供一种远志药材HPLC特征图谱构建方法，步骤如下：
步骤10、精密称取远志药材，制备得到远志药材样品溶液；
步骤20、将远志药材样品溶液采用高效液相色谱仪分析，得到远志药材特征图谱；
其中，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，检测波长为318～322nm，进样量为10ul。
在本实施例中，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，检测波长为320nm，进样量为10ul。
所述洗脱条件为：0～15min，流动相A的体积变化为6～11％，流动相B的体积变化为94～89％；15～25min，流动相A的体积为11％，流动相B的体积变化为89％；25～65min，流动相A的体积变化为11～25％，流动相B的体积变化为89～75％；67～72min，流动相A的体积为75％，流动相B的体积为25％；72～74min，流动相A的体积变化为75～6％，流动相B的体积变化为25～94％；74～90min，流动相A的体积为6％，流动相B的体积为94％。
所用远志药材样品溶液的制备方法为：取远志药材0.3～0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入10％～100％甲醇25ml，密塞，回流30～120min，放冷，再称定重量，用10％～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
在本实施例中，所用远志药材样品溶液的制备方法为：取远志药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，回流60min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
图2、图3分别为利用本实施例的构建方法构建出的远志药材对照品和远志对照药材HPLC特征图谱，能够全面的反映样品的特征峰信息，方法稳定，精密度高，重现性好。
如图1所示，本实施例还提供一种远志药材质量检测方法，步骤如下：
步骤1、制备供试品、对照品及对照药材溶液：分别精密称取待测远志药材、远志
酮Ⅲ和3，6＇-二芥子酰基蔗糖对照品以及远志对照药材，制备得到远志药材供试品溶液和、对照品混合溶液远志对照药材溶液；
步骤2、HPLC特征图谱构建：精密吸取溶液，分别采用高效液相色谱仪分析，构建出待测远志药材HPLC特征图谱、对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱；
步骤3、质量检测：将待测远志药材HPLC特征图谱与对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱进行对比，以检测待测远志药材是否质量合格。
其中，供试品及对照药材溶液的制备，以及HPLC特征图谱的构建，均采用上述“一种远志药材HPLC特征图谱构建方法”中所述的方法得到，即：
所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，检测波长为318～322nm，进样量为10ul。在本实施例中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，检测波长为320nm，进样量为10ul。
洗脱条件为：0～15min，流动相A的体积变化为6～11％，流动相B的体积变化为94～89％；15～25min，流动相A的体积为11％，流动相B的体积变化为89％；25～65min，流动相A的体积变化为11～25％，流动相B的体积变化为89～75％；67～72min，流动相A的体积为75％，流动相B的体积为25％；72～74min，流动相A的体积变化为75～6％，流动相B的体积变化为25～94％；74～90min，流动相A的体积为6％，流动相B的体积为94％。
远志药材供试品溶液和远志对照药材溶液的制备方法均为：取远志对照药材0.3～0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入10％～100％甲醇25ml，密塞，回流30～120min，放冷，再称定重量，用10％～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。在本实施例中，制备方法为：取远志对照药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，回流60min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
对照品混合溶液的制备方法为：在远志对照药材溶液基础上，另取远志
酮Ⅲ、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖适量，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含远志
酮Ⅲ0.15mg、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖0.2mg的溶液，并混合均匀即得对照品混合溶液。
质量检测中，若供试品HPLC特征图谱呈现出与远志对照药材HPLC特征图谱中的8个特征峰保留时间相对应的色谱峰，且其中峰5、峰6与对照品保留时间相一致，则判断为质量合格。
图4即为利用本实施例的检测方法得到的待测远志药材与对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱对照图，图中，峰5：远志
酮Ⅲ，峰6：对照品3,6’-二芥子酰基蔗糖，为已知成份，能够全面并准确对远志药材进行质量控制，同时也为远志道地药材质量标准的建立提供依据。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种远志药材质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、制备供试品、对照品及对照药材溶液：分别精密称取待测远志药材、远志
酮Ⅲ和3，6＇-二芥子酰基蔗糖对照品以及远志对照药材，制备得到远志药材供试品溶液、对照品混合溶液和远志对照药材溶液；
步骤2、HPLC特征图谱构建：精密吸取溶液，分别采用高效液相色谱仪分析，构建出待测远志药材HPLC特征图谱、对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱，其中，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，检测波长为318～322nm，进样量为10ul；
步骤3、质量检测：将待测远志药材HPLC特征图谱与对照品HPLC特征图谱和远志对照药材HPLC特征图谱进行对比，以检测待测远志药材是否质量合格。
2.根据权利要求1所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，检测波长为320nm，进样量为10ul。
3.根据权利要求1所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，洗脱条件为：0～15min，流动相A的体积变化为6～11％，流动相B的体积变化为94～89％；15～25min，流动相A的体积为11％，流动相B的体积变化为89％；25～65min，流动相A的体积变化为11～25％，流动相B的体积变化为89～75％；67～72min，流动相A的体积为75％，流动相B的体积为25％；72～74min，流动相A的体积变化为75～6％，流动相B的体积变化为25～94％；74～90min，流动相A的体积为6％，流动相B的体积为94％。
4.根据权利要求1所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，远志药材供试品溶液和远志对照药材溶液的制备方法均为：取远志药材0.3～0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入10％～100％甲醇25ml，密塞，回流30～120min，放冷，再称定重量，用10％～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
5.根据权利要求4所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，远志药材供试品溶液和远志对照药材溶液的制备方法均为：取远志药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，回流60min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
6.根据权利要求5所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，对照品混合溶液的制备方法为：在远志对照药材溶液基础上，另取远志
酮Ⅲ、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖适量，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含远志
酮Ⅲ0.15mg、含3，6＇-二芥子酰基蔗糖0.2mg的溶液，并混合均匀即得对照品混合溶液。
7.根据权利要求1所述的远志药材质量检测方法，其特征在于，质量检测中，若供试品HPLC特征图谱呈现出与远志对照药材HPLC特征图谱中的8个特征峰保留时间相对应的色谱峰，且其中峰5、峰6与对照品保留时间相一致，则判断为质量合格。
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