CN109633003A - 一种测定远志中远志口山酮ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，‑二芥子酰基蔗糖含量的方法，属于药物检测技术领域。本技术方案采用高效液相色谱仪，限定甲醇‑乙腈‑磷酸水溶液体系为流动相，以及其他测定的条件的设定，实现目标峰远志山酮Ⅲ里面包着杂质峰的分离，同时，具有较高的灵敏度和专属性，分离度符合药典规定（即分离度大于1.5）；保证目标峰的纯度达到一定参数，即纯度角度<纯度阈值，可用于远志药材、饮片及标准汤剂等的质量控制，具有现实意义。

Description

一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量 的方法

技术领域

本发明涉及一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，尤其的，涉及一种能高效分离目标峰中杂质、测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的高效液相色谱方法，属于药物检测技术领域。

背景技术

远志是我国常用的传统中药材，为远志科植物远志Polygalatenuifolia Willd.或卵叶远志 Polygalasibirica L．的干燥根，是国家42种重点保护的三级野生品种之一。远志味苦，性辛、温，归心、肾、肺经，具有安神益智，交通心肾，祛痰，消肿的作用，临床用于治疗心肾不交引起的失眠多梦,健忘惊悸，神志恍惚，咳痰不爽，疮疡肿毒，乳房肿痛。

2015版《中国药典》第一部中记载有测定远志药材及饮片中远志口山酮Ⅲ和3，6，-二芥子酰基蔗糖的含量测定方法，其采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱为固定相，检测波长为320nm；其中，采用流动相为乙腈：0.05%磷酸=18：82等梯度方式洗脱，进而研究目标峰的含量，但其未对目标峰的纯度作进一步研究。

国知局于2017年07月04日公开了一种公开号为CN106918655A，名称为“一种远志UPLC测定方法”的专利文献，其中，包括：步骤1、对照品溶液制备：取西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、西伯利亚远志口山酮B、球腺糖A、远志口山酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖，甲醇定容制成混合对照品溶液；步骤2、供试品溶液制备：取远志药材含水低级醇提取后，滤过，得到供试品溶液；步骤3、将对照品溶液和供试品溶液分别注入超高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中的有效成分含量。但在该专利文献中，采用了UPLC色谱仪，且对于柱温调节（5°C）色谱峰的峰型，峰离度等系统适应性就会发生很大变化，并且参数也会发生变化，最终造成测定结果的变化。

论文文献“HPLC法测定参茸安神片中远志酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志皂苷B和五味子醇甲”中公开：进样量为10uL，体积流量为mL/min，柱温为30℃；同时，还公开了Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。但在该论文文献中，未有效避开杂质峰及峰的纯度，最终极大的影响了测定结果的准确性。

论文文献“不同产地远志中远志酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷A 含量测定”中公开：Kromasil ODS-C 18 色谱柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），柱温35 ℃ ；以0.05% 磷酸-乙腈溶液（A）-0.05%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度脱；同时，还公开：检测波长为315 nm，流速为1.0 mL/min ，进样量为10 μL。同样，在该论文文献中，未有效避开杂质峰及峰的纯度，最终极大的影响了测定结果的准确性。

国知局于2013年04月10日公开了一种公开号为CN103033570A，名称为“一种昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法”的专利文献，公开：以乙腈-甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；注温20℃；该发明的指纹图谱不仅可以测定雷公藤甲素、雷公藤红素和雷公藤内酯甲三种成分的含量，还对其微观的成分组成进行分析，制定了指纹图谱共有模式，从定性和定量方面都达到了最先进的水平。在该专利文献中，虽然采用乙腈-甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相，进行了昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测，但是该技术方案主要适用于昆明山海棠药材，根据常识，不同药材中的成分及其含量不同，因此，结合检测方法的适应性，若采用该技术方案对远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖进行含量测定，由于受杂质峰、测定条件等影响，而降低了测定结果的准确性。

发明内容

发明人针对远志药材及饮片等中的目标成分（远志口山酮Ⅲ和3，6，-二芥子酰基蔗糖），做进一步地研究其峰纯度，即采用高效液相色谱仪——二极管阵列检测器对目标峰纯度图分析，发现远志口山酮Ⅲ目标峰纯度角>纯度阈值，且目标峰里含有杂质。

本发明旨在克服现有技术的不足，而提出了一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法。本技术方案通过从远志口山酮Ⅲ峰中分离出一个杂质峰，以纯度角度小于纯度阈值为判断依据，有效分析和检测药材及饮片中的目标成分纯度，保证目标成分含量检测更加准确，以及药材质量更能控制，以供实际需求。

为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：

一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，采用高效液相色谱仪测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量，具体步骤包括：

S1.制备供试品溶液

精密称取远志药材粉末（过50目筛）1g，置于具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml；称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取过滤液，即得供试品溶液；

S2.制备对照品溶液

精密称取远志口山酮Ⅲ对照品10.57mg至25ml的容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；精密称取3,6，-二芥子酰基蔗糖对照品12.77mg至25ml容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；

分别精密量取所得的远志口山酮Ⅲ对照品溶液2ml及3，6，-二芥子酰基蔗糖溶液4ml，然后置于同一10ml的容量瓶中，用70%甲醇稀释，定容后摇匀，得对照品溶液，即为含浓度0.15 mg/mL远志口山酮Ⅲ及浓度0.2mg/mL3,6，-二芥子酰基蔗糖的混合溶液；

S3.测定

采用二极管阵列检测器，对所得的供试品溶液及对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱为：十八烷基硅烷键合硅胶，4.6*250mm，5um；

色谱柱柱温为：25～40℃；

流动相为：流动相A-流动相B-流动相C，A为甲醇（有机相），B为乙腈（有机相），C为0.05～0.2%的磷酸水溶液（水相），且流动相A与流动相C的体积比为16～18：84～82，流动相A、流动相B及流动相C三者的体积比为：14～20：5：81～75；

流动相流速：0.8～1.0mL/min；

测定波长为：320nm；

进样量为：10uL。

优选的，在步骤S3中，流动相以梯度洗脱，具体为：

0→5min，流动相A为20～24%，流动相B为5%，流动相C为75～71%；

5→35min，流动相A为24～26%，流动相B为5%，流动相C为71～69%；

35→40min，流动相A为26～32%，流动相B为5%，流动相C为69～63%；

40→42min，流动相A为32～60%，流动相B为5%，流动相C为63～35%；

42→52min，流动相A为60%，流动相B为5%，流动相C为35%；

52→55min，流动相A为60～20%，流动相B为5%，流动相C为35～75%；

55→68min，流动相A为20%，流动相B为5%，流动相C为75%。

优选的，磷酸水溶液浓度为0.2%；色谱柱柱温为40℃，流动相流速为1.0mL/min。

采用本技术方案，带来的有益技术效果为：

实现目标峰远志山酮Ⅲ里面包着杂质峰的分离，同时，具有较高的灵敏度和专属性，分离度符合药典规定（即分离度大于1.5）；保证目标峰的纯度达到一定参数，即纯度角度<纯度阈值，可用于远志药材、饮片、标准汤剂及配方颗粒等的质量控制，具有现实意义。

附图说明

图1为实施例1中供试品溶液的色谱图

图2为实施例1中对照品溶液的色谱图

图3为实施例2中供试品溶液的色谱图

图4为实施例3中供试品溶液的色谱图

图5为实施例4中供试品溶液的色谱图

图6为实施例5中供试品溶液的色谱图

图7为实施例6中供试品溶液的色谱图

图8为实施例7中供试品溶液的色谱图

图9为实施例7中对照品溶液的色谱图

图10为实施例8中供试品溶液的色谱图

图11为实施例8中对照品溶液的色谱图

图12为实施例9中供试品溶液的色谱图

图13为实施例9中对照品溶液的色谱图

图14为实施例10中供试品溶液的色谱图

图15为实施例10中对照品溶液的色谱图

图16为实施例11中供试品溶液的色谱图。

具体实施方式

下面通过对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

在以下实施例中，对对照品溶液、供试品溶液分别进行高效液相色谱仪测定，在所得的对应结果表中，依据：分离度值大于1.5，符合国家要求；拖尾值为0.95～1.05，符合国家标准；理论塔板数按3,6二芥子蔗糖峰计，不低于3000，符合国家要求。

此外，结果表中的空格是由仪器工作站自动生成。

实施例1

（1）制备供试品溶液：精密称取远志药材粉末l.0g ，置于具塞锥形瓶中，再精密加入70%甲醇25mL；称定重量，加热固回流1.5小时，冷却，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取过滤液，即得供试品溶液；

（2）精密称取远志口山酮Ⅲ对照品10.57mg至25ml的容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；精密称取3,6，-二芥子酰基蔗糖对照品12.77mg至25ml容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；

分别精密量取所得的远志口山酮Ⅲ对照品溶液2ml及3，6，-二芥子酰基蔗糖溶液4ml，然后置于同一10ml的容量瓶中，用70%甲醇稀释，定容后摇匀，即得对照品溶液；

（3）检测

采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图1所示），结果如表1所示；将所得的对照品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图2所示），结果如表2所示； 高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液（乙腈与0.05%磷酸水溶液体积比为18：82）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃；

同时，结果得出：图1及表1表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度>纯度阈值，需继续优化；

图2、表2表明混合对照品目标峰的系统适应性符合药典规定，且纯度角度<纯度阈值。

实施例2

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图3所示），结果如表3所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液（乙腈与0.05%磷酸水溶液体积比为16：84）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：35℃；

同时，结果得出：图3及表3表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例3

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图4所示），结果如表4所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液（乙腈与0.05%磷酸水溶液体积比为18：82）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：25℃；

同时，结果得出：图4及表4表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例4

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图5所示），结果如表5所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（乙腈与0.1%磷酸水溶液体积比为18：82）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：35℃；

同时，结果得出：图5及表5表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例5

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图6所示），结果如表6所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液（乙腈与0.2%磷酸水溶液体积比为18：82）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：35℃；

同时，结果得出：图6及表6表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例6

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图7所示），结果如表7所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液（乙腈与0.2%磷酸水溶液体积比为18：82）；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：40℃；

同时，结果得出：图7及表7表明远志药材中远志山酮Ⅲ目标峰呈现双肩峰，故推断分离出杂质峰，需继续优化。

实施例7

与实施例1相同的方式制备供试品溶液和对照品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图8所示），结果如表9所示；将所得的对照品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图9所示），结果如表10所示，高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：40℃；

采用甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液流动相体系梯度洗脱，具体如下表8所示：

同时，从图8、表9、图9及表10中得出：对照品目标峰3,6’-二芥子酰基蔗糖纯度角度>纯度阈值，远志药材中的远志山酮Ⅲ目标峰分出杂质峰，而3,6’-二芥子酰基蔗糖目标峰未分开杂质峰，故需继续优化。

实施例8

与实施例1相同的方式制备供试品溶液和对照品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图10所示），结果如表12所示；将所得的对照品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图11所示），结果如表13所示，高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：40℃；

采用甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液流动相体系梯度洗脱，具体如下表11所示：

同时，从图10、表12、图11及表13中得出：远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性不符合药典规定，且两个目标峰的纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例9

与实施例1相同的方式制备供试品溶液和对照品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图12所示），结果如表15所示；将所得的对照品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图13所示），结果如表16所示，高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：40℃；

采用甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液流动相体系梯度洗脱，具体如下表14所示：

同时，结果得出：图13、表16表明混合对照品目标峰的系统适应性符合药典规定，且纯度角度<纯度阈值；图12、表15表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，但目标峰纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例10

与实施例1相同的方式制备供试品溶液和对照品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图14所示），结果如表18所示；将所得的对照品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图15所示），结果如表19所示，高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液；

进样量为：10ul；

检测波长为320nm；

流速：0.8ml/min；

柱温：30℃；

采用甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液流动相体系梯度洗脱，具体如下表17所示：

同时，结果得出：图15、表19混合对照品目标峰的系统适应性符合药典规定，且纯度角度<纯度阈值；图14、表18表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，3,6’-二芥子酰基蔗糖目标峰纯度角度<纯度阈值，但远志口山酮Ⅲ目标峰纯度角度>纯度阈值，需继续优化。

实施例11

与实施例1相同的方式制备供试品溶液，然后采用型号为waters2695-996 PDA高效液相色谱仪，将所得的供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图（如图16所示），结果如表21所示；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱：月旭Ultimate XB C18（4.6*250mm，5um）；

流动相：甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液；

进样量为：10uL；

检测波长为320nm；

流速：1.0mL/min；

柱温：40℃；

采用甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液流动相体系梯度洗脱，具体如下表20所示：

同时，结果得出： 图16及表21表明远志药材中远志山酮Ⅲ和3,6’-二芥子酰基蔗糖系统适应性符合药典规定，且目标峰远志山酮Ⅲ的纯度角度<纯度阈值。

Claims (8)

1.一种测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，采用高效液相色谱仪测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量，其特征在于，具体步骤包括：

S1．制备供试品溶液

精密称取远志药材粉末供试品，置于具塞锥形瓶中，再以每克远志药材粉末加入70%甲醇25毫升；称定重量，加热回流1.5小时，冷却，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取过滤液，即得供试品溶液；

S2．制备对照品溶液

精密称取远志口山酮Ⅲ对照品至容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；精密称取3,6，-二芥子酰基蔗糖对照品至容量瓶中，加70%甲醇，超声溶解，定容后摇匀；

分别精密量取所得的远志口山酮Ⅲ对照品溶液及3，6，-二芥子酰基蔗糖溶液，然后置于同一容量瓶中，用70%甲醇稀释，定容后摇匀，即得对照品溶液；

S3．测定

采用二极管阵列检测器，对所得的供试品溶液及对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行测定，得对应的色谱图；高效液相色谱仪内测定条件满足：

色谱柱为：十八烷基硅烷键合硅胶，4.6*250mm，5um；

色谱柱柱温为：25～40℃；

流动相为：流动相A-流动相B-流动相C，即甲醇-乙腈-0.05～0.2%的磷酸水溶液；

流动相流速：0.8～1.0mL/min；

测定波长为：320nm；

进样量为：10uL。

2.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述远志药材粉末为50目。

3.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述对照品溶液为含浓度为0.15 mg/mL远志口山酮Ⅲ及浓度为0.2mg/mL3,6，-二芥子酰基蔗糖的混合溶液。

4.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，在步骤S3中，流动相以梯度洗脱，具体为：

0→5min，流动相A为20～24%，流动相B为5%，流动相C为75～71%；

5→35min，流动相A为24～26%，流动相B为5%，流动相C为71～69%；

35→40min，流动相A为26～32%，流动相B为5%，流动相C为69～63%；

40→42min，流动相A为32～60%，流动相B为5%，流动相C为63～35%；

42→52min，流动相A为60%，流动相B为5%，流动相C为35%；

52→55min，流动相A为60～20%，流动相B为5%，流动相C为35～75%；

55→68min，流动相A为20%，流动相B为5%，流动相C为75%。

5.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，流动相A与流动相C的体积比为16～18：84～82，流动相A、流动相B及流动相C三者的体积比为：14～20：5：81～75。

6.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，磷酸水溶液浓度为0.2%。

7.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，色谱柱柱温为40℃。

8.根据权利要求1所述的测定远志中远志口山酮Ⅲ和3,6，-二芥子酰基蔗糖含量的方法，其特征在于，流动相流速为1.0mL/min。