CN113913409A - 一种人参素提取用复合蛋白酶、制备方法及其应用工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种人参素提取用复合蛋白酶、制备方法及其应用工艺，其中复合蛋白酶按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶10～30％、淀粉酶40～45％、果胶酶10～20％、混合酶40～50％、海藻酸钠1％、复合稳定剂6％、复合链引发剂1～3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，所述混合酶包括：中性蛋白酶2～5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶1～3％、胃蛋白酶5～8％和胰蛋白酶5～8％，首次将多种酶共同用于人参有效成分的提取，并确定复合酶进行提取的最佳工艺条件，提升了有效成分提取率，同时复合酶在提取过程中将提取物中的杂质分解去除，也促进了某些极性低的脂溶成分转化为易溶于水的糖营养成分而有利于提取。

Description

一种人参素提取用复合蛋白酶、制备方法及其应用工艺
技术领域
本发明涉及人参素提取及应用的技术领域，具体涉及一种人参素提取用复合蛋白酶、制备方法及其应用工艺。
背景技术
人参素是人参酶解后的水提取物，是人参皂苷、人参多糖、人参多肽、18种以上的氨基酸及20种以上的微量元素等多种营养成分的综合体，可直接作为食品食用，具有在体内易分解、易吸收等特点，经常服用可以增强免疫、抗疲劳、补气血、益寿延年等功效。食用人参素相比较于传统方式的人参食用，其在有效成分的吸收上提升了20％～30％，可以达到70％～90％。故此，如何更高效的将人参中的人参素提取出来具有重要的意义。
近些年来，对人参成分的分离、提取、纯化和结构确定发展迅速,现在已知人参含有人参皂苷、挥发油、多糖、甾醇、脂肪酸、维生素、蛋白质、多肽等多种有效成分。目前对人参皂苷、人参多糖、人参蛋白单体方面的研究逐渐增多，但在提取方面大多还是采用传统方式，特别是对人参原料进行复合酶解方面的研究罕有报道。从近些年研究看来，研究的重点都倾向于提取人参皂苷、人参多糖、总蛋白、多肽和游离氨基酸等单方面实验，都普遍把人参中的一种单体或物质来研究。在产品精深加工方面的开发还相对落后，精深加工不足人参产量的10％，产品开发严重不足。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述现有人参提取处理存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明解决的技术问题是：解决现有人参提取处理均为其内有效成分单方面的研究，对人参原料进行复合酶解方面未存在有效技术的问题。
为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶10～30％、淀粉酶20～25％、果胶酶10～20％、混合酶20～30％、海藻酸钠1％、复合稳定剂6％、复合链引发剂1～3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，所述混合酶包括：中性蛋白酶2～5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶1～3％、胃蛋白酶5～8％和胰蛋白酶5～8％。
为解决上述技术问题，本发明还提供如下技术方案：一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1～3％的复合链引发剂及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入PH调节剂调节至PH＝5～7，常温下以12000～16000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法的一种优选方案，其中：复合稳定剂为浓度为0.15mol/l的聚乙烯醇。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法的一种优选方案，其中：复合链引发剂为氯化钙。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法的一种优选方案，其中：PH调节剂为碳酸氢钠。
为解决上述技术问题，本发明还提供如下技术方案：一种人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，包括以下步骤：
(1)人参预处理：将干人参通过粉碎机进行粉碎，获得粒径范围在300～3000微米的人参提取样，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；
(2)首次提取：取出人参提取样，加入其质量15倍的纯化水，搅拌15min后加入复合蛋白酶，50℃搅拌1.5h后通过活性炭柱，收集流出液A；
(3)二次提取：流出液A重复加入至搅拌腔中，保持搅拌，升温至90℃后通电，5V电离反应15～20min，通过非极性大孔树脂柱，收集流出液B；
(4)三次提取：流出液B重复加入至搅拌腔中，降温至50～55℃，保温搅拌2～3h，过滤，收集流出液C；
(5)灭酶：高温进行灭酶操作；
(6)水提取：20％乙醇加热回流流出液C三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，回流液和残余流出液C合并得到提取液，并旋干提取液，回收乙醇；
(7)过滤：旋干的提取液中加入纯化水，搅拌溶解后过滤，收集滤渣和滤液；
(8)浓缩、干燥：滤液旋干，收集旋干物，与滤渣合并于50℃下干燥24h以上即得人参素。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺的一种优选方案，其中：人参预处理步骤中，将粉碎后的人参提取样浸泡于0.5mol/l的氯化钠溶液中，并抽真空，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；其中，氯化钠溶液的质量为人参提取样的5～8倍，浸泡时间不低于15h。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺的一种优选方案，其中：首次提取操作中，搅拌速率为60r/s，二次提取操作中，搅拌速率为100～120r/s，三次提取操作中，搅拌速率为80～100r/s。
作为本发明所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺的一种优选方案，其中：首次提取、二次提取及三次提取操作中，均通过5％碳酸氢钠水溶液调节PH至6～7。
本发明的有益效果：本发明首次将多种酶共同用于人参有效成分的提取，并确定复合酶进行提取的最佳工艺条件，大大提升了人参皂苷、人参多糖、人参肽等有效成分提取率，同时复合酶在提取过程中将提取物中的杂质分解去除，也促进了某些极性低的脂溶成分转化为易溶于水的糖营养成分而有利于提取，提高了人参资源的生物利用率，为人参健康食品的开发提供了优质原料，为健康、亚健康人群提供不可或缺的营养健康食品，对人参产业产值的提高起到了极大的推动作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为本发明涉及的复合蛋白酶应用工艺的工艺流程图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
生物酶解技术在食品加工中应用广泛，酶可以在常温、常压和温和的酸碱条件下，将植物细胞壁分解，较大幅度提高天然植物中有效成分的提取率，改善生产过程中的过滤速度和纯化效果，提高产品纯度和制剂的质量。生物酶解技术是在传统的天然植物成分提取基础上进行的，应用常规提取设备即可完成，操作简便，成本低廉，将其应用于人参有效成分的提取，会大大提升人参的生物功效。特别是随着人参蛋白质水解产物--小分子多肽的生理活性逐渐在被人们发现，并且逐渐受到重视，尤其是一些活性肽的生理功能逐渐明确，在医药、保健、食品及日用化工领域中将会有令人惊喜的应用前景。
在人参提取领域，人参皂苷及其单体、人参多糖及低聚糖、人参蛋白及多肽、氨基酸，单一的功能研究现在已经逐渐向复合功能性方向发展,怎样把人参原料中所蕴含的生物活性功能相结合的全面开放将是未来的研究重点。
故此，本发明首先提供一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶10～30％、淀粉酶20～25％、果胶酶10～20％、混合酶20～30％、海藻酸钠1％、复合稳定剂6％、复合链引发剂1～3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶2～5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶1～3％、胃蛋白酶5～8％和胰蛋白酶5～8％。
具体的，本发明还提供一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1～3％的复合链引发剂及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入PH调节剂调节至PH＝5～7，常温下以12000～16000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
其中，复合稳定剂为浓度为0.15mol/l的聚乙烯醇；复合链引发剂为氯化钙；PH调节剂为碳酸氢钠。
需要说明的是，本发明采用了纤维素酶、淀粉酶和果胶酶，纤维素酶可以破坏植物细胞壁，淀粉酶和果胶酶可以得到人参多糖和低聚糖，有利于人参多糖的转化与提取，果胶酶还可分解植物组织中的果胶质，降低提取液粘度，利于有效成分浸出。
本发明采用体外酶解法，应用复合蛋白酶联合水解人参蛋白，大大提升了其营养保健功效。而且经过酶转化后的人参皂苷消除了个体差异的影响,提高了生物利用度。
实施例1
一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶10％、淀粉酶20％、果胶酶10％、混合酶20％、海藻酸钠1％、0.15mol/l的聚乙烯醇6％、氯化钙1％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶2％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶1％、胃蛋白酶5％和胰蛋白酶5％。
一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的氯化钙及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入5％碳酸氢钠水溶液调节至PH＝5，常温下以12000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
实施例2
一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶30％、淀粉酶25％、果胶酶20％、混合酶20％、海藻酸钠1％、0.15mol/l的聚乙烯醇6％、氯化钙1％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶3％、胃蛋白酶8％和胰蛋白酶8％。
一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的氯化钙及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入5％碳酸氢钠水溶液调节至PH＝7，常温下以16000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
实施例3
一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶20％、淀粉酶20％、果胶酶15％、混合酶25％、海藻酸钠1％、0.15mol/l的聚乙烯醇6％、氯化钙2％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶4％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶2％、胃蛋白酶6％和胰蛋白酶6％。
一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入2％的氯化钙及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入5％碳酸氢钠水溶液调节至PH＝6，常温下以12000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
实施例4
一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶30％、淀粉酶22％、果胶酶15％、混合酶25％、海藻酸钠1％、0.15mol/l的聚乙烯醇6％、氯化钙3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶2％、胃蛋白酶6％和胰蛋白酶7％。
一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入3％的氯化钙及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入5％碳酸氢钠水溶液调节至PH＝5，常温下以13000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
实施例5
一种人参素提取用复合蛋白酶，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶25％、淀粉酶23％、果胶酶16％、混合酶26％、海藻酸钠1％、0.15mol/l的聚乙烯醇6％、氯化钙3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，混合酶包括：中性蛋白酶3％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶3％、胃蛋白酶7％和胰蛋白酶7％。
一种人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入3％的氯化钙及3％的0.15mol/l的聚乙烯醇，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入5％碳酸氢钠水溶液调节至PH＝7，常温下以14000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
为了验证本发明的技术效果，单以提取的人参皂苷作为参照，测定提取出的质量含量、酶解反应时间及将其应用于同样生产人参素提取工艺的整体酶解时间。
测定说明：选定5组上述不同含量条件的复合蛋白酶，对比样为未经筛选的常规蛋白酶。
测试条件：同规格的干人参提取样，切片称重，选取8份同重量的干人参提取样进行测试。
测试方式：【含量测定】参照高效液相色谱法测定；各取约1g干人参提取样，酶0.15g参与提取酶解反应，精密称定，粉碎干人参提取样，采用甲醇-氨水的混合水溶液进行浸提8h，超声30,min后得到浸提液，将浸提液离心过滤，采用高效液相色谱进行定量分析。
其中，甲醇-氨水的混合水溶液中氨水的体积百分比含量为5％，加入的量为30ml，过滤采用滤膜，孔径为0.22μm以下，采用高效液相色谱分析的流动相为乙腈-甲酸水溶液，柱温35℃，检测波长为200nm，色谱柱为ACQUITY UPLC BEH-C18。
测定结果如下表1所示：
表1
人参皂苷含量(g) 酶解时间(min) 应用工艺酶解时间(min)
实施例1 0.08 5.44 约为38.04
实施例2 0.071 约为4.96 43.9
实施例3 0.082 4.82 41.73
实施例4 0.069 约为4.99 35.74
实施例5 0.075 约为5.31 约为39.99
对比样1 0.068 7.08 50.33
对比样2 0.047 8.81 约为69
对比样3 0.059 约为8.33 约为62.46
由上表1可看出，一方面本发明采用实施例相对比对比样，同样规格下人参皂苷含量提取量棉线更优、酶解反应时间更短，同时，由于本发明提供的是复合酶，将其应用于提取工艺中，整体的酶解反应时间明显更短；另一方面，本发明实施例针对人参皂苷的提取消除了个体差异的影响，提高了生物利用度。
本发明有益效果：
1.针对人参多糖、人参蛋白采用不同酶制剂进行筛选。利用纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、混合酶等不同工艺对人参多糖、人参皂苷提取率的影响进行优选；从中性蛋白酶，木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中找出制备具有抗氧化功能的人参多肽，并对酶解工艺进行应用。
2.根据酶解产物性状优劣分析，筛选出最佳酶制剂，优化人参的酶解条件。采用多尺度控制酶解生产工艺参数，通过过程控制及监测关键指标，进而达到人参素对人体易吸收的功效。
额外的，如图1所示，本发明依据上述复合蛋白酶及其制备方法，还提供一种人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，包括以下步骤：
(1)人参预处理：将干人参通过粉碎机进行粉碎，获得粒径范围在300～3000微米的人参提取样，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；
低温密封保存进一步提高了人参提取样的不受破坏，阻隔了空气及温度对粉碎后的人参样的影响，防止对后续的酶解反应进行干扰。
(2)首次提取：取出人参提取样，加入其质量15倍的纯化水，搅拌15min后加入复合蛋白酶，50℃搅拌1.5h后通过活性炭柱，收集流出液A；
(3)二次提取：流出液A重复加入至搅拌腔中，保持搅拌，升温至90℃后通电，5V电离反应15～20min，通过非极性大孔树脂柱，收集流出液B；
需要额外注意的是，样品液中预先加入的海藻酸钠、聚乙烯醇、氯化钙及碳酸氢钠水溶液，故此提取液中存在游离的离子，可直接加入电流进行电离辅助，电离加大了人参多糖的转化与提取，加大了果胶质的分解效率，降低了提取液粘度，利于有效成分浸出，同时进一步消除了提取单体个体差异的影响。
(4)三次提取：流出液B重复加入至搅拌腔中，降温至50～55℃，保温搅拌2～3h，过滤，收集流出液C；
(5)灭酶：高温进行灭酶操作；
(6)水提取：20％乙醇加热回流流出液C三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，回流液和残余流出液C合并得到提取液，并旋干提取液，回收乙醇；
(7)过滤：旋干的提取液中加入纯化水，搅拌溶解后过滤，收集滤渣和滤液；
(8)浓缩、干燥：滤液旋干，收集旋干物，与滤渣合并于50℃下干燥24h以上即得人参素。
进一步的，人参预处理步骤中，将粉碎后的人参提取样浸泡于0.5mol/l的氯化钠溶液中，并抽真空，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；其中，氯化钠溶液的质量为人参提取样的5～8倍，浸泡时间不低于15h。
进一步的，首次提取操作中，搅拌速率为60r/s，二次提取操作中，搅拌速率为100～120r/s，三次提取操作中，搅拌速率为80～100r/s。
更进一步的，首次提取、二次提取及三次提取操作中，均通过5％碳酸氢钠水溶液调节PH至6～7。
本发明以人参根部为主要原料，经酶解-提取-过滤-浓缩-干燥等关键技术控制，制取含有人参皂苷、人参多糖、人参多肽及氨基酸等多种营养元素的人参素，后再以人参素为原料，辅以蔓越莓粉、木糖醇等营养丰富配料，经调配混合后制取人参素系列健康食品。
工艺流程：人参→粉碎→酶解→灭酶→水提取→过滤→浓缩→干燥→混合(辅料处理)→包装→检验→入库。
通过感官指标、理化指标及微生物指标综合评价产品质量，并进行标准备案。
本发明首次将多种酶共同用于人参有效成分的提取，并确定复合酶进行提取的最佳工艺条件，大大提升了人参皂苷、人参多糖、人参肽等有效成分提取率，同时复合酶在提取过程中将提取物中的杂质分解去除，也促进了某些极性低的脂溶成分转化为易溶于水的糖营养成分而有利于提取，提高了人参资源的生物利用率，为人参健康食品的开发提供了优质原料，为健康、亚健康人群提供不可或缺的营养健康食品，对人参产业产值的提高起到了极大的推动作用。
重要的是，应注意，在多个不同示例性实施方案中示出的本申请的构造和布置仅是例示性的。尽管在此公开内容中仅详细描述了几个实施方案，但参阅此公开内容的人员应容易理解，在实质上不偏离该申请中所描述的主题的新颖教导和优点的前提下，许多改型是可能的(例如，各种元件的尺寸、尺度、结构、形状和比例、以及参数值(例如，温度、压力等)、安装布置、材料的使用、颜色、定向的变化等)。例如，示出为整体成形的元件可以由多个部分或元件构成，元件的位置可被倒置或以其它方式改变，并且分立元件的性质或数目或位置可被更改或改变。因此，所有这样的改型旨在被包含在本发明的范围内。可以根据替代的实施方案改变或重新排序任何过程或方法步骤的次序或顺序。在权利要求中，任何“装置加功能”的条款都旨在覆盖在本文中所描述的执行所述功能的结构，且不仅是结构等同而且还是等同结构。在不背离本发明的范围的前提下，可以在示例性实施方案的设计、运行状况和布置中做出其他替换、改型、改变和省略。因此，本发明不限制于特定的实施方案，而是扩展至仍落在所附的权利要求书的范围内的多种改型。
此外，为了提供示例性实施方案的简练描述，可以不描述实际实施方案的所有特征(即，与当前考虑的执行本发明的最佳模式不相关的那些特征，或于实现本发明不相关的那些特征)。
应理解的是，在任何实际实施方式的开发过程中，如在任何工程或设计项目中，可做出大量的具体实施方式决定。这样的开发努力可能是复杂的且耗时的，但对于那些得益于此公开内容的普通技术人员来说，不需要过多实验，所述开发努力将是一个设计、制造和生产的常规工作。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (9)

1.一种人参素提取用复合蛋白酶，其特征在于，按重量百分比计，由下述物质组成：纤维素酶10～30％、淀粉酶20～25％、果胶酶10～20％、混合酶20～30％、海藻酸钠1％、复合稳定剂6％、复合链引发剂1～3％及5％碳酸氢钠水溶液若干，其中，所述混合酶包括：中性蛋白酶2～5％、木瓜蛋白酶1％、碱性蛋白酶1～3％、胃蛋白酶5～8％和胰蛋白酶5～8％。
2.如权利要求1所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，
(1)按比例称取一定量的各原料；
(2)预混：将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用，记为混合物一；将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用，记为混合物二；
(3)分级处理：混合物一中加入高于其总质量5倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1％的海藻酸钠及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；混合物二中加入高于其总质量3倍的水，搅拌均匀后于25℃下加入1～3％的复合链引发剂及3％的复合稳定剂，高速搅拌备用；
(4)混合反应：将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中，加入PH调节剂调节至PH＝5～7，常温下以12000～16000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
3.如权利要求2所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，其特征在于：复合稳定剂为浓度为0.15mol/l的聚乙烯醇。
4.如权利要求2或3所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，其特征在于：复合链引发剂为氯化钙。
5.如权利要求4所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法，其特征在于：PH调节剂为碳酸氢钠。
6.如权利要求1所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，其特征在于：包括以下步骤，
(1)人参预处理：将干人参通过粉碎机进行粉碎，获得粒径范围在300～3000微米的人参提取样，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；
(2)首次提取：取出人参提取样，加入其质量15倍的纯化水，搅拌15min后加入复合蛋白酶，50℃搅拌1.5h后通过活性炭柱，收集流出液A；
(3)二次提取：流出液A重复加入至搅拌腔中，保持搅拌，升温至90℃后通电，5V电离反应15～20min，通过非极性大孔树脂柱，收集流出液B；
(4)三次提取：流出液B重复加入至搅拌腔中，降温至50～55℃，保温搅拌2～3h，过滤，收集流出液C；
(5)灭酶：高温进行灭酶操作；
(6)水提取：20％乙醇加热回流流出液C三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，回流液和残余流出液C合并得到提取液，并旋干提取液，回收乙醇；
(7)过滤：旋干的提取液中加入纯化水，搅拌溶解后过滤，收集滤渣和滤液；
(8)浓缩、干燥：滤液旋干，收集旋干物，与滤渣合并于50℃下干燥24h以上即得人参素。
7.根据权利要求6所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，其特征在于：人参预处理步骤中，将粉碎后的人参提取样浸泡于0.5mol/l的氯化钠溶液中，并抽真空，密封于0～5℃的低温环境下保存备用；其中，氯化钠溶液的质量为人参提取样的5～8倍，浸泡时间不低于15h。
8.根据权利要求7所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，其特征在于：首次提取操作中，搅拌速率为60r/s，二次提取操作中，搅拌速率为100～120r/s，三次提取操作中，搅拌速率为80～100r/s。
9.根据权利要求8所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺，其特征在于：首次提取、二次提取及三次提取操作中，均通过5％碳酸氢钠水溶液调节PH至6～7。
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