CN113912461A - 一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥 - Google Patents

一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥，按重量份计算，包括如下成分：丁香酚15～40份，贝莱斯芽孢杆菌HAB‑2的构树发酵液10～40份，矿源黄腐酸钾5～20份，二氧化硅1～5份，尿素5～15份，维生素C 8～20份，氨基酸4～10份，中微量元素0.2～1.0份，甘蔗蜜糖5～10份，褐藻寡糖0.2～0.8份。本发明将公丁香中提取的丁香精油丁香酚与HAB‑2的构树发酵液等其他物质进行合理配比，对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病的防治效果可以大大增强，能够抑制植株发病率。

Description

一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥
技术领域
本发明涉及一种叶面肥，具体涉及一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥。
背景技术
多种植物叶片病害均由真菌引起的。研究具有广谱抗植物叶片真菌的叶面肥对于防治由真菌导致的植物叶片病害具有重要的意义。
叶面肥主要是以叶片吸收为目的，将作物营养所需养分直接施用叶面的肥料，目前市场的肥料产品中，普遍存在偏重于有机质的含量，其可补充根部施肥的不足，起到迅速补充营养、充分发挥肥效、减轻对土壤污染等作用，有着吸收快、作用强、用量省等优点。但是现有的抗植物病害叶面肥，大多主要针对一种或二种病害进行开发研究应用，存在抗植物叶片真菌病害谱窄等缺点，急需一些抗植物叶片真菌病害的作物广的叶面肥。
丁香酚(4-烯丙基-2-甲氧基苯酚)是一种植物源天然化合物，具有抗菌、消炎、解热、麻醉、防腐、驱蚊等药理作用，在医药领域研究应用较多；丁香酚作为丁香精油的主要成分在食品及化妆品领域也应用广泛；在农用领域，丁香酚可破坏细菌的细胞膜通透性，抑制蛋白质合成；也可以影响真菌膜通透性，使真菌的内容物泄露，引起真菌死亡；还能够激发植物防御酶活性，在田问具有较好的抗植物病毒病活性。
构树是一种乳液、根皮、树皮、叶、果实及种子可入药的中药材，具有杀菌、消炎、去腹泻等多种生物学功能。构树叶含有丰富的蛋白质、氨基酸和微量元素等营养物质，具有提高动植物免疫力、促生长等功能。通过跟莱斯芽孢杆菌HAB-2生防菌株联合发酵，可以产生大量的氨基酸和微量元素，并可以产生丰富的次级代谢产物，可以抑制植物病原真菌，在农用领域大有可为。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其配方科学合理，在施用追肥的同时对多种植物等病害进行防控，部分替代化学农药的使用，减少了环境污染，提高了作物安全性。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥，按重量份计算，包括如下成分：丁香酚15～40份，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液10～40份，矿源黄腐酸钾5～20份，二氧化硅1～5份，尿素5～15份，维生素C 8～20份，氨基酸4～10份，中微量元素0.2～1.0份，甘蔗蜜糖5～10份，褐藻寡糖0.2～0.8份，其中，所述贝莱斯芽孢杆菌HAB-2，于2015年1月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为CCTCC NO:M 2015070。
需要说明的是，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2，前期鉴定认为是解淀粉芽孢杆菌，后来由于多个菌株的基因组分析及分子生物学技术的发展，归类为贝莱斯芽孢杆菌。
生物材料的分类命名：解淀粉芽孢杆菌HAB-2(Bacillus amyloliquefaciensHAB-2)；
保藏该生物材料样品的单位名称：中国典型培养物保藏中心；
地址：中国武汉武汉大学；
保藏日期：2015年1月27日；
和保藏编号：CCTCC NO:M 2015070。
本发明中，中微量元素为现有技术提供，其中成分可以为：中量元素：钙≥10％、镁≥4％、硫≥4％；微量元素：硼、铜、氯、铁、锰、钼、锌、镍均≥2％。
本发明中，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液的制备方法如下：把构树粉碎放入100L的塑料桶中，加入红糖10g、白砂糖4g、果糖3g和蜂蜜3g，漆酶5g，加入2L预发酵液，所述预发酵液为乳酸乳球菌的预发酵液和贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的混合液，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2:乳酸乳球菌＝2:1(v/v)，补足灭菌水至100L，35～40℃条件下发酵10～20天，过滤掉构树渣，得到贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液。
本发明中，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的制备方法如下：把贝莱斯芽孢杆菌HAB-2接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有贝莱斯芽孢杆菌HAB-2 1×107cfu/mL的预发酵液，备用。
本发明中，乳酸乳球菌的预发酵液的制备方法如下：把乳酸乳球菌(采购于上海帛科生物技术有限公司)接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有乳酸乳球菌1×106cfu/mL的预发酵液，备用。
本发明中，发酵培养基包括蔗糖15～20％(w/w)，毕赤酵母菌5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，用0.1M/L氢氧化钠调节pH＝7.2，121℃高温湿热灭菌20分钟备用。
丁香酚，能够激发植物防御酶活性，诱导植物对病害的抗病性，已知400μg/mL的丁香酚对烟草花叶病毒病的预防和治疗效果较好，防效分别为65.82％和62.14％，对金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌、肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等16个细菌有较好的抑制作用，对链格孢菌、白色念珠菌、小麦根腐病菌、灰霉菌、青霉菌等真菌具有较好的抑制作用。
构树，为桑科构属，其皮、茎、叶、果实和根部位含有生物碱、黄酮类、木脂素类、萜类挥发油类等多种化学成分，具有抗氧化、抗菌、增强免疫力、抗病毒等功效，对于已经发病的植株，能够缩短植株的恢复期，降低病害对植株生长的影响。
相比于现有技术，本发明具有如下优点：
本发明将公丁香中提取的丁香精油丁香酚与贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液等其他物质进行合理配比，对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病的防治效果可以大大增强，能够抑制植株发病率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
本发明中，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液的制备方法如下：
把构树粉碎放入100L的塑料桶中，加入红糖10g、白砂糖4g、果糖3g和蜂蜜3g，漆酶5g，加入2L预发酵液，所述预发酵液为乳酸乳球菌的预发酵液和贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的混合液，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2:乳酸乳球菌＝2:1(v/v)，补足灭菌水至100L，35～40℃条件下发酵10～20天，过滤掉构树渣，得到贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液。
其中，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的制备方法如下：把贝莱斯芽孢杆菌HAB-2接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有贝莱斯芽孢杆菌HAB-2 1×107cfu/mL的预发酵液，备用。
其中，乳酸乳球菌的预发酵液的制备方法如下：把乳酸乳球菌(采购于上海帛科生物技术有限公司)接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有乳酸乳球菌1×106cfu/mL的预发酵液，备用。
上述发酵培养基包括蔗糖15～20％(w/w)，毕赤酵母菌5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，用0.1M/L氢氧化钠调节pH＝7.2，121℃高温湿热灭菌20分钟备用。
本发明提出的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，按重量份计算，包括如下成分：丁香酚15～40份，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液10～40份，矿源黄腐酸钾5～20份，二氧化硅1～5份，尿素5～15份，维生素C 8～20份，氨基酸4～10份，中微量元素0.2～1.0份，甘蔗蜜糖5～10份，褐藻寡糖0.2～0.8份，其中，所述贝莱斯芽孢杆菌HAB-2，于2015年1月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为CCTCC NO:M 2015070。
中微量元素含量为0.2～1.0份是指中微量元素含量之和为0.2～1.0份。
本发明中，中微量元素为现有技术提供，其中成分可以为：中量元素：钙≥10％、镁≥4％、硫≥4％；微量元素：硼、铜、氯、铁、锰、钼、锌、镍均≥2％。
具体实施例1
本实施例中，抗植物叶片真菌病害的叶面肥包括：丁香酚20wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液30wt.％，矿源黄腐酸钾10wt.％，二氧化硅3wt.％，尿素10wt.％，维生素C10wt.％，氨基酸8wt.％，中微量元素0.7wt.％，甘蔗蜜糖8wt.％，褐藻寡糖0.3wt.％。
本实施例的叶面肥对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病具有防治效果。获得的防治效果如下：
对于番石榴果实轮纹病，每亩用量2L，稀释500倍液10～20天使用一次，发病率为3％左右，不喷施，发病率为20％。
对于香蕉炭疽病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为5％左右，不喷施，发病率为24％。
对于芒果炭疽病，每亩用量2L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为4％左右，不喷施，发病率为15％。
对于草莓炭疽病，每亩用量1L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为3％作用，不喷施，发病率为21％。
对于柑橘青霉病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为5％左右，不喷施，发病率为24％。
对于橡胶树炭疽病，每亩用量3L，稀释600倍液10～20天使用一次，发病率为3％左右，不喷施，发病率为25％。
具体实施例2
本实施例与实施例1不同的是：抗植物叶片真菌病害的叶面肥包括：丁香酚35wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液15wt.％，矿源黄腐酸钾15wt.％，二氧化硅2wt.％，尿素6wt.％，维生素C15wt.％，氨基酸5wt.％，中微量元素0.5wt.％，甘蔗蜜糖6wt.％，褐藻寡糖0.5wt.％。
本实施例的叶面肥对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病具有防治效果。获得的防治效果如下：
对于番石榴果实轮纹病，每亩用量2L，稀释500倍液10～20天使用一次，发病率为4％左右，不喷施，发病率为20％。
对于香蕉炭疽病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为7％左右，不喷施，发病率为24％。
对于芒果炭疽病，每亩用量2L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为3％左右，不喷施，发病率为15％。
对于草莓炭疽病，每亩用量1L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为3％作用，不喷施，发病率为21％。
对于柑橘青霉病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为5％左右，不喷施，发病率为24％。
对于橡胶树炭疽病，每亩用量3L，稀释600倍液10～20天使用一次，发病率为6％左右，不喷施，发病率为25％。
具体实施例3
本实施例与实施例1不同的是：抗植物叶片真菌病害的叶面肥包括：丁香酚25wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液20wt.％，矿源黄腐酸钾5wt.％，二氧化硅4wt.％，尿素15wt.％，维生素C 20wt.％，氨基酸6wt.％，中微量元素0.4wt.％，甘蔗蜜糖4wt.％，褐藻寡糖0.6wt.％。
本实施例的叶面肥对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病具有防治效果。获得的防治效果如下：
对于番石榴果实轮纹病，每亩用量2L，稀释500倍液10～20天使用一次，发病率为5％左右，不喷施，发病率为20％。
对于香蕉炭疽病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为10％左右，不喷施，发病率为24％。
对于芒果炭疽病，每亩用量2L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为4％左右，不喷施，发病率为15％。
对于草莓炭疽病，每亩用量1L，稀释1000倍液10～20天使用一次，发病率为5％作用，不喷施，发病率为21％。
对于柑橘青霉病，每亩用量2L，稀释800倍液10～20天使用一次，发病率为8％左右，不喷施，发病率为24％。
对于橡胶树炭疽病，每亩用量3L，稀释600倍液10～20天使用一次，发病率为8％左右，不喷施，发病率为25％。
以上所述是发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于按重量份计算，包括如下成分：丁香酚15～40份，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液10～40份，矿源黄腐酸钾5～20份，二氧化硅1～5份，尿素5～15份，维生素C 8～20份，氨基酸4～10份，中微量元素0.2～1.0份，甘蔗蜜糖5～10份，褐藻寡糖0.2～0.8份，其中，所述贝莱斯芽孢杆菌HAB-2，于2015年1月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为CCTCC NO:M 2015070。
2.根据权利要求1所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述叶面肥包括如下成分：丁香酚20wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液30wt.％，矿源黄腐酸钾10wt.％，二氧化硅3wt.％，尿素10wt.％，维生素C10wt.％，氨基酸8wt.％，中微量元素0.7wt.％，甘蔗蜜糖8wt.％，褐藻寡糖0.3wt.％。
3.根据权利要求1所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述叶面肥包括如下成分：丁香酚35wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液15wt.％，矿源黄腐酸钾15wt.％，二氧化硅2wt.％，尿素6wt.％，维生素C15wt.％，氨基酸5wt.％，中微量元素0.5wt.％，甘蔗蜜糖6wt.％，褐藻寡糖0.5wt.％。
4.根据权利要求1所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述叶面肥包括如下成分：丁香酚25wt.％，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液20wt.％，矿源黄腐酸钾5wt.％，二氧化硅4wt.％，尿素15wt.％，维生素C 20wt.％，氨基酸6wt.％，中微量元素0.4wt.％，甘蔗蜜糖4wt.％，褐藻寡糖0.6wt.％。
5.根据权利要求1所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液的制备方法如下：把构树粉碎放入100L的塑料桶中，加入红糖10g、白砂糖4g、果糖3g和蜂蜜3g，漆酶5g，加入2L预发酵液，所述预发酵液为乳酸乳球菌的预发酵液和贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的混合液，贝莱斯芽孢杆菌HAB-2:乳酸乳球菌v/v＝2:1，补足灭菌水至100L，35～40℃条件下发酵10～20天，过滤掉构树渣，得到贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的构树发酵液。
6.根据权利要求5所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述贝莱斯芽孢杆菌HAB-2的预发酵液的制备方法如下：把贝莱斯芽孢杆菌HAB-2接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有贝莱斯芽孢杆菌HAB-2 1×107cfu/mL的预发酵液，备用。
7.根据权利要求5所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述乳酸乳球菌的预发酵液的制备方法如下：把乳酸乳球菌接种在发酵培养基中，在28℃下发酵，得到含有乳酸乳球菌1×106cfu/mL的预发酵液，备用。
8.根据权利要求6或7所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于所述发酵培养基包括蔗糖15～20wt.％，毕赤酵母菌5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，用0.1M/L氢氧化钠调节pH＝7.2，121℃高温湿热灭菌20分钟备用。
9.根据权利要求1所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于，所述叶面肥应用于番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病的防治。
10.根据权利要求9所述的抗植物叶片真菌病害的叶面肥，其特征在于，所述叶面肥的使用方法为每亩用量1～3L，稀释500～1000倍液，10～20天使用一次。
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