CN1138697A

CN1138697A - 试样收集装置

Info

Publication number: CN1138697A
Application number: CN95120275A
Authority: CN
Inventors: P·F·H·M·沃海登; A·P·S·威塞
Original assignee: Akzo Nobel NV
Current assignee: Akzo Nobel NV
Priority date: 1994-11-28
Filing date: 1995-11-27
Publication date: 1996-12-25
Also published as: US5760315A; KR960018582A; CA2163501A1; MX9504932A; AU3909095A; AU694814B2; JPH08220096A; BR9505536A; ZA959940B

Abstract

叙述了一种试样收集装置，其中含一种吸收材料，这种材料容易吸收和释放试验液体，此外，装置中还含至少一种检定试剂。检定试剂存在于吸收材料的仅一部分，吸收材料的其余部分位于上游部分。上游部分含检定试剂，并作为要用作洗液的试验液体的贮库。含检定试剂的吸收材料的一部分提供了在取样过程防止检定试剂洗出的设施，而在取样过程或取样后，使检定试剂可用于试验操作。

Description

试样收集装置

本发明涉及一种试样收集装置，此装置含有一种吸收材料，可迅速吸收试验液体，并能直接或间接地释放试验液体。此外，装置中还含至少一种检定试剂。本发明的试样收集装置专门打算作家庭用或供非专业机构使用。这些机构取样一般由外行或非技术人员进行。

现在，有许多收集体液(如尿)样品的方法，用以检测专一反应物质。检测这些物质的方法很多，从化学检定到免疫和杂交检定法。在传统的免疫检定和杂交检定法中，试验试样通常用吸液管采取，在这些方法中要求精确的定量结果。在化学检定或免疫检定中，检定在试验条带上进行，通常使用纸带，将试验带(含所需的各种试剂)浸在试验液体中取样，或者，例如将这种试验带固定于尿流中。但是，因为试验带含为进行检测一种专一反应物质所需的试剂，因此存在尿与试剂之间直接接触的风险，这样，在实际检定发生前，试剂可从试验带上洗出。

为了尽量减少试剂被洗出的风险，特别是当试验由外行进行时，通常将试验带由套管或套箱加以包围，如欧洲专利EP291194和EP383619所讨论的。

另外一个容易和可靠的收集试验试样的方法可避免同检定试剂直接接触。这个方法是利用一个分离的试剂收集装置，如在欧洲专利EP293447中讨论的长刷。此种长刷，含有一吸收材料的尖，在试样收集后，插入一圆筒管中，这种圆筒管中有一个或多个密封容器或小室，其中顺序有各种检定试剂。当通过将收集装置推进和经过每个容器而使收集装置(长刷)的压力施于密封上时，则密封破裂或崩溃。收集装置的柄有适当的中止点，容许收集装置尖端进入适当的容器并同其中的内容进行混合，容器的关键特征是，收集装置的尖端和躯干能经过每一容器而进入圆筒管的较低部分，并与其连结。较低部分包含有配位体受体区。配位体受体区包含一俘获膜，膜上涂以专一的结合试剂以俘获反应物。检测的发生可看见或看不见。虽然在这篇专利申请中讨论的长刷适用于各种试验试样包括尿的方便收集，但实际上，试验进行起来是复杂的，因为在俘获膜区附近需要一具有密封的试剂小室的分离管。此外，为使试验试样和密封小室内的试剂之间足够的接触，需要一些特殊要求(收集装置的柄中的适当的中止点)。

在专利申请WO86/03839中，提出一个固相扩散检定法，其中，讨论了一多孔物体(长刷)，此多孔体含冻干的标记的专一结合试剂例如冻干的金溶胶标记hCG抗体。将此长刷用试验液体(如尿)润湿后，则标记的专一结合试剂溶解，或当使用颗粒标记时，重复悬浮在试验液体中。随后使长刷同含一固定的专一结合试剂(如hCG抗体)的不溶的支持物(如硝化纤维纸)接触，这样，含溶解或再悬浮的标记的专一结合试剂和可能要测定的被分析物(如hCG)的试验液体从长刷扩散到不溶的支持物中。当在试验液体中含有这种被分析物时，此被分析物和标记的专一结合试剂将被固定的专一结合试剂结合。被分析物的存在可以用肉眼检测到，例如，当金溶胶粒子用作标记时出现红斑。试验工作相当容易，需要的步骤最少。然而，用这种试验，如果未准备除去过量的标记的专一结合试剂，则可在不溶的支持物上观察到背景颜色。取样后，用于此试验的长刷含标记的专一结合试剂的溶液或悬浮液。在整个长刷分开，只要长刷同支持物接触，则转移到不溶的支持物上。这样的背景颜色可能有害试验结果。而且，用这种长刷具有一重要的风险，即在取样过程，可能会从长刷洗出标记的专一结合试剂。

本发明涉及对已有技术，如上面的专利申请(WO86/03839)的方法，加以改进，特别是有关可靠性和健全性。这些改进通过一试样收集装置已经实现。在此装置中，含有一种能够迅速吸收试验液体并能很容易地释放试验液体的吸收材料。此外，还至少含一种检定试剂，其特征在于，上述检定试剂存在于所说吸收材料的下游部分，所说部分含有在取样过程防止所说的检定试剂从装置中洗出所采用的设施，有了这样的设施，在取样中或取样后所说的检定试剂对试验操作是现成的，而所说的吸收材料的其余部分，全部或部分位于含检定试剂的所说部分的上游。

检定试剂包含在试样收集装置的仅一部分吸收材料中，此部分位于所说吸收材料的中或底部(下游)。收取试样时是将吸收材料完全浸入试验液体或固定吸收材料在尿流中。检定试剂溶解或-如果检定试剂含颗粒标记，则重新悬浮在试验液体中。试样收集后，试样收集装置的吸收材料的底(下游)部与试验带、膜等(例如含固定的专一结合试剂)接触，检定试剂和要被测定的专一反应物质(如果存在的话)由试样收集装置转移到试验带，在此，它们与固定的专一结合试剂结合。试样收集装置的吸收部分的上(上游)部不含任何检定试剂。用作试验液体的贮库。这种试验液体现在用作洗液以除去未能结合于固定的专一结合试剂的过量的标记的专一结合试剂。

为了进行合适的试样收集，在试样收集装置的那一部分(含检定试剂)采用设施，以防止所说的检定试剂从试样收集过程中从装置中被洗出来。当试样收集由不熟练(如由外行)的人进行和固定试样收集装置在尿流中时将检定试剂从装置中洗出的危险是完全可能的，。

在一优选的具体实施方案中，所说的设施是采用排斥水或不能透过水的材料的盖、套箱或外壳，将其包围在至少含检定试剂的那一部分吸收材料周围。此盖、套箱或外壳的结构应使得在取样中或取样后，所说的检定试剂可以得到(或容易使其得到)以用于试验操作。根据所用材料的类型和孔径大小，盖、套箱或外壳的厚度可以不同。这种排斥水材料最好是一疏水的织物或无纺材料、疏水纸或象纸一样的材料。优选是一疏水的多孔烧结材料。这种疏水多孔烧结材料的孔径大小应能防止试验液体透过，一般情况下孔径至多100微米。优选孔径是低于50微米。疏水多孔烧结聚合物优选是聚丙烯、聚乙烯、超高分子量聚乙烯、疏水聚酯，最为优选的是乙烯醋酸乙烯酯。这样的疏水多孔烧结聚合物材料，如乙烯醋酸乙烯酯可通过加入润湿剂，如Tween20或Triton X100，很容易制成亲水材料。因此，此材料在疏水状态可用来防止检定试剂的洗出，而在亲水状态，它可用作试验液体，如尿，的吸收材料。乙烯醋酸乙烯酯还有一个优点是柔韧性好，因此，特别适合同不同类型的试验装置(如含多孔试验带的测杆试验)结合。

当疏水多孔烧结材料以不同大小孔径应用时，最好将所说的孔径尺寸至多100微米的疏水材料同亲水型的，孔径尺寸大得足以使试验液体迅速吸收的相同材料结合使用。因此，一方面选择孔径如此小，使试验液体不能透过，从而，防止检定试剂的洗出，而另一方面，同一材料，以亲水型和优选具有大孔径可使试验液体迅速吸收可用作吸收材料。

通过用(例如含在有机溶剂中的蜡的)喷雾处理亲水材料也能得到排斥水材料。通过在亲水聚合物材料中分散涂有如氟碳化学吸收膜(FCAM)的填料物质—如SiO₂、TiO₂、Al₂O₃、SnO、Cu、铁酸盐和玻璃纤维—也可将亲水材料制成水排斥材料。这样，所说的亲水聚合物材料的孔为所说的用FCAM涂盖的填料粒子所填充。

不透水材料的有利形式是一种箔、一种半透膜、玻璃、橡胶或一种热熔体。这种箔可由聚合物材料制成，可以是合成聚合物材料，如聚丙烯或聚乙烯，也可以是天然聚合物材料，例如玻璃纸。适宜的箔也可由非聚合物材料，如铝制成。这些箔一般厚度为0.1-10毫米，要看所用材料来决定。箔带有孔以吸收尿。这些孔距离检定试剂的位置足够远，以防止检定试剂被尿洗出。玻璃能用作不透水材料，形式有胶囊或管，内含有检定试剂。在取样后，例如通过加压可使胶囊胶或管破裂，以便检定试剂释出。还有一些适宜的材料可作不透水材料，这些材料以液体形式施于或进入吸收材料，然后经过例如冷却、干燥或通过如紫外线照射引起的化学反应使其固化。按此方法，在吸收材料之上或之中形成一种膜或包层。有利的是，这种材料是热熔的，其所含的聚合物材料在室温下是固态，而在如100℃时成为液体。其它适宜的材料含环氧树脂、油漆或胶。

将水排斥材料表面的孔固化也能形成不透水材料。

所有所说的措施以如下的方式实现，即检定试剂在试样收集过程防止被洗出，但同时，检定试剂和试验液体通过吸收材料传送是可行的(或可使之可行)，这样，使得这些试剂可用于试验操作。

在另外一个具体实施方案中，通过使用能控制释放检定试剂(控制释放组分)的试剂组分，防止尿将检定试剂洗出。包括检定试剂的控制释放组分存在于吸收材料的较低(下游)部分。所说的控制释放组分一般含一粘合剂/控制释放剂、一稀释剂和可能的破碎剂。有利地是，所说的粘合剂/控制释放剂是粘度增加剂，可根据其浓度影响控制释放的速度，是脂肪物质或其混合物，为控制释放速度的常规赋形剂，以及是不溶于水的对释放速度有延迟影响的聚合物。适宜的粘度增加剂选自糖、聚乙二醇、明胶、胶淀粉、淀粉、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、树胶(如阿拉伯树胶和瓜耳树胶)、纤维素为基础和淀粉为基础的材料以及包括它的混合物等。适宜的脂肪物质选自脂肪醇、脂肪酯、蜡、脂肪酸(如十八烷醇、Precirol、硬脂酸镁、加氢的蓖麻油、加氢的花生油、蜡(象赋形剂Gelucire，由部分的甘油酯和聚缩水甘油脂肪酯组成)、硬脂酸)，植物源的固定的油类如花生油、蓖麻油、分馏的椰子油(Mygliols)、油酸乙酯、玉米油等。

对释放速度有延迟影响的不溶于水的聚合物选自聚甲基丙烯酸酯(如Eudragit)和乙基纤维素。

在试剂组分中常常是需要稀释剂。适宜的稀释剂选自不溶于水的磷酸钙(二和三元)、硫酸钙二水合物、碳酸钙、淀粉、改性淀粉、微晶纤维素、水溶性蔗糖、右旋糖、乳糖、甘露糖、木糖醇、山梨糖醇等及其混合物。

根据所希望的控制释放速度，某一浓度的破碎剂可以使用，但破碎剂不一定总是需要。适宜的破碎剂选自微晶纤维系(AvicelPH101和102)、纯化的木纤维素、藻酸、淀粉、淀粉甘醇酸钠、瓜耳树胶、聚乙烯基吡咯烷酮、交联聚乙烯基吡咯烷酮、离子交换树脂等及其混合物。

在一优选的控制释放组分的具体实施方案中，检定试剂同羟丙基纤维素、淀粉和乳糖或蔗糖混合，制备颗粒。随后颗粒按照在EP299,299，US5073344和EP963375叙述的方法，同乙烯醋酸乙烯酯粉末混合并烧结。在烧结过程中，乙烯醋酸乙烯酯颗粒在控制热条件下熔化在一起，这样，将含检定试剂的颗粒截留。控制释放的程度可以通过改变上述的控制释放组分的成分比例，加以调节。控制释放组分优选地同一水排斥材料结合使用。

试样收集装置的吸收材料能容易地吸收试验液体，但也容易在如机械压力或毛细管转移下释放试验液体。因此，它是海绵一样的材料，如棉毛、织物和无纺材料，挤压结合的纤维、纸和类似纸的材料。优选使用多孔烧结的亲水和亲水化材料，诸如亲水化的聚乙烯醋酸乙烯酯以及其它亲水化的聚酯、亲水化的聚丙烯、亲水化的聚乙烯和亲水化的超高分子量聚乙烯。在试样收集装置中上游部分这些多孔烧结的亲水和亲水化材料的孔径尺寸，优选大于下游部分的材料的孔径，使得可迅速吸收试验液体，并防止在取样过程中洗出检定试剂。也可给吸收材料着色以便于分析辨认。

存在于吸收材料中的检定试剂优选是一特种结合对(如一抗原或抗体或其片段，DNA或RNA片段，抗生物素蛋白或生物素)中的一员。这样的特种结合试剂优选给以标记。尽管原则上各种标记都可使用，但用在本发明的试样收集装置中的优选标记是所谓的颗粒标记，最优选的是使用直接颗粒标记，它会给出直接的可见的试验结果而不需要附加的试剂或设备。所说的直接颗粒标记含小的带色粒子，如金溶胶粒子、乳胶粒子、染料粒子、微脂粒或包括染料、碳—和硒溶胶粒子等的微胶囊。这些粒子不溶于水但在溶液中可再悬浮。所有这些颗粒标记在文献(见Clin，Chem，27，1157，1981，EP007654，EP032270，EP291194，EP154,749，EP321008)中是众所周知的。

金溶胶和碳溶胶粒子是特别有利的。金溶胶粒子有利地具有一直径约为5-100毫微米，而优选的碳溶胶粒子大小是20-500毫微米。

可以用许多方法将检定试剂引入试样收集装置。有利的是，通过例如分散可以直接施加于吸收材料。当多孔烧结亲水合成聚合物用作吸收材料时，检定试剂优选做为颗粒引入，在烧结过程之前，将其与多孔亲水合成聚合物混合(参见EP299299，US5073344和EP963373)。这样颗粒中除了检定试剂外还含有糖，如海藻糖。在这种烧结过程中，在控制热条件下，聚合物粒子熔合在一起产生一种坚实而多孔的结构。这样，含检定试剂的颗粒被截留。

检定试剂也可以间接方法应用，例如通过将浸有检定试剂的多孔载体引入吸收材料的内部空间。适宜的多孔载体是，例如圆纸盘、多孔烧结的材料或无纺材料。优选将检定试剂以冷冻干燥形式，如accuspheres，导入所说内部空间。也可以将检定试剂包含在胶囊或管中，然后插进吸收材料。

试样收集装置还有一手柄，此柄由一不透水材料生产是有利的。不透水材料可用热塑性材料，聚苯乙烯等。此柄可加以颜色。颜色能用于被分析物的辨认，从而对处理大量不同试样带来方便。

本发明进一步涉及含上述试样收集装置的检测专一反应物质的装置和方法。

这样装置最好含有一膜、试验带等，这些由主要凭借毛细管力传送试验液体的材料组成。优选使用有吸收能力的多孔或纤维状材料，这适宜迅速吸收液体。装置还含有检测所说的专一反应物质所需的其它的检定试剂。这些其它检定试剂优选是一抗原或抗体或其片段，DNA或RNA片段，抗生物素蛋白或生物素、蛋白质A等。此装置最简单形式是含附加的检定试剂的膜、试验带等。所说的装置优选是一过滤试验，最优选的是一多孔试验带试验。对这些类型的试验已进行了许多实施例的说明(参见EP180638，EP291194，EP349215)。特别有关的讨论是在我们的未决专利申请PCT/EP94/00899中讨论的设备。这设备含一有内部空间的套箱和一引入试样收集装置的孔。在套箱上有一支持装置。可运行由主要通过毛细管力传送试验液体的材料组成的试验带，并含有固定化的结合试剂，如专一结合对的一员，优选为一抗体。含有试剂混合物的液体试样从试样收集装置传送到试验带可以通过接触来实现。这种传送可以通过在套箱的特殊措施加以促进。特殊措施如在内壁有一提升装置，或通过弯曲试验带的顶端，使其伸进套箱的内部空间。

下面详细解释了本发明的示范的具体实施方案。

图1，表示本发明中讨论的试样收集装置的第一个具体实施方案的轴向横截面。

图2，表示本发明第一个具体实施方案的轴向横截面的改进。

图3，表示本发明第二个具体实施方案的轴向横截面。

图4，表示本发明第三个具体实施方案的轴向横截面。

图5，表示本发明第四个具体实施方案的轴向横截面。

图6，表示本发明第五个具体实施方案的轴向横截面。

图7，表示本发明第六个具体实施方案的轴向横截面。

图8，表示本发明第一个具体实施方案的改进的轴向横截面。

所有这些图的比例为2∶1。

图1试样收集装置有部分1和3，这两部分含多孔烧结的用一润湿剂亲水化的乙烯醋酸乙烯酯。部分2含有未处理的乙烯醋酸乙烯酯(为水排斥材料)。此装置还含有柄8。部分1有一顶端4，和一延长部分5，后者适合于部分2的内部空间6。检定试剂(标记的专一结合试剂7)以冷冻干燥形式引入内部空间6或浸入多孔载体。

图2试样收集装置为描绘于图1装置的改进。这样，部分1的延伸部分5用检定试剂(标记的专一结合试剂7)浸渍。

图3的试样收集装置中含有带有多孔的烧结的亲水或亲水化的材料的部分1。在部分1的中部区用标记的专一结合试剂7浸渍。在这个区域中也可以截留此试剂。这个区域用含不透水材料的圆筒元件9包围。

在图4的试样收集装置中，亲水部分1的延伸部分5伸进柄8，这里含孔12，使得将此装置固定于尿流中时可以吸收尿。部分1被带有孔11的不透水箔10所包围，这样，当使之同试验膜或试验带接触时，试剂混合物可流出。标记的专一结合试剂7包括在部分1的中部。

在图5的试样收集装置中，含标记的专一结合试剂7的玻璃胶囊或管13插入亲水部分1。在取样后胶囊破裂，使检定试剂用于试验操作。

图6的试样收集装置含两个亲水部分1和3。标记的专一结合试剂7以冷冻干燥形式位于两部分之间，或浸入多孔载体中。通过含不透水材料的圆筒元件14将两部分1和3联结起来。圆筒元件也环绕着标记的专一结合试剂7。

在图7的试样收集装置中，用带有孔13的不透水的箔10包围亲水部分1，当将此装置固定在尿流中时吸收尿。标记的专一结合试剂7包括在部分1的顶端4中。在进一步进行试验前，在不透水箔10的顶端4应再做一孔，以便试样收集装置中的试剂与试验带或试验膜的试剂相接触。

图8的试样收集装置是描绘在图2装置的改进。这样，图2含一内部空间6，部分3有一伸出部分5，适合于内部空间6。在伸出部分5的多孔烧结的乙烯醋酸乙烯酯的孔径大小小于部分3的剩余部分的孔径尺寸。两种材料用一种润湿剂亲水化。而且，部分1含用润湿剂亲水化的多孔烧结聚乙烯，这样，此材料的孔径尺寸小于伸出部分5中材料的孔径尺寸。标记的专一结合试剂或被截留或被浸于伸出部分5或位于伸出部分5和内部空间6的内壁之间。所说的试剂通过部分2的疏水的乙烯醋酸乙烯酯可免于被洗出。

本发明的试样收集装置可用于在试验液体，如尿中检测专一的反应物质，如抗原、半抗原、抗体或抗体片段、DNA-或RNA片段以及特别是hCG的方法中。

这样一种方法包括例如下面几步：

*.用所说的试样收集装置获取试验液体样品，这样，在试验液体中，如果有专一反应物质的话，就会同检定试剂反应。

*.将试样收集装置同，例如含固定的专一结合试剂的多孔试验带接触，这样，含有试剂混合物的试验液体将由试样收集装置传送到试验带，在此，专一反应物质和检定试剂之间形成的络合物被固定的专一结合试剂俘获。

*.肉眼读出检定结果。

仅通过实施例，详细讨论本发明的某些优选的具体实施方案。所用的试样收集装置是描绘在图8的装置，此外，如在我们的未决专利申请PCT/EP94/00899号中讨论的使用了试验带(含有固定的专一结合试剂和控制试剂)、支持装置和套箱。

实施例1

1.金溶胶标记的单克隆hCG抗体(标记的专一结合试剂)的制备。

具有平均粒子直径50毫微米(A540＝5.0)的金溶胶由Frens制得(Nature Physical Science Vol.240，1973，20)。

每毫升氯化钠含1毫克单克隆hCG抗体(如在EP045103)中讨论的β-单位专一和制备的)的溶液(9克/升)用0.1摩尔氢氧化钠调节到pH达到8.0。

用0.1摩尔氢氧化钠将1升的金溶胶溶液的pH调节到8.0，同20毫升的单克隆hCG抗体溶液混合，随后加入40毫升20摩尔聚乙二醇的pH8.0溶液进行后涂敷。在3500克和室温下进行离心20分钟使后涂敷的金溶胶标记的hCG抗体沉降。抽吸除掉上层清液后，金溶胶小粒在含2％(V/V)胎儿腓肠血清、160克/升蔗糖、2％(W/V)Triton X100和1摩尔Tris pH8.0的溶液中再悬浮成50.0的A540值。

2a.亲水化的乙烯醋酸乙烯酯的制备

60克乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸为350微米或500微米)与含1％Tween/span(1∶3w/v)的100毫升乙醇混合。将混合物在轻微摇动下静置10分钟，倾析除去过量乙醇，最终在20-25℃干燥过夜。

2b.亲水化聚乙烯的制备

将60克聚乙烯粉末(粒子尺寸为50微米)同100毫升含1％Tween/span(1∶3w/v)的乙醇混合，然后按2a所述的方法进行处理。

2c.疏水化的乙烯醋酸乙烯酯的制备

60克乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸为350微米)同100毫升含1％的Fluorresin(w/v)的异丙基乙醇混合。在轻微摇动下将混合物静置10分钟，倾析除去过量的异丙基乙醇，最后在20-25℃干燥过夜。

3.试样收集装置的制备

描绘在图8中的试样收集装置的部分A和部分B分别制造。部分A包括亲水部分1和疏水部分2，而部分5B含带有包括金溶胶标记的单克隆hCG抗体(标记的专一结合试剂7)的伸出部分5的亲水部分3。

部分A在一模中制备。此模有两个模部件：一个模部件用于亲水部分1，另一模部件用于疏水部分2。部分1的模部件装有亲水化的聚乙烯粉末(如在2b讨论的)，而部分2的模部件装以疏水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末(如2c中讨论的)。随后，按照在EP299,299，US5 073344和EP963375中讨论的方法烧结上述材料，并提起。

部分B的制备也是在两个模部件构成的模中进行：一个模部件用于亲水部分3的伸出部分5，另一模部件用于部分3的其它部分。用于伸出部分5的模部件装填以亲水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末，粒子大小350微米(如在2a中所述的)，而用于部分3其它部分的模部件也装填以亲水化的乙烯醋酸乙烯酯，但粒子大小为500微米(也是如在2a所述)。然后将这些材料如上述那样进行烧结。

在部分A和B烧结后，测定各部分的孔径尺寸。部分1的孔径大小为20微米，部分2的孔径大小为100微米，部分3的伸出部分5的孔径为120微米，而部分3其余部分的孔径为180微米。

然后，用蠕动泵将4-8微升的金溶胶标记的单克隆hCG抗体的悬浮液(见1)分散到部分3的伸出部分5的末端，在45-50℃用干燥温暖的空气流干燥5-6分钟。

在金溶胶标记的单元隆hCG抗体干燥后，将部分A和B连结和焊接。在装配之前将专门设计的焊接板放在部分A和部分B之间，将这两部分对着热的焊接板轻轻加压，乙烯醋酸乙烯酯材料开始熔化，约一秒钟后，将焊接板除去。通过将两部分相互相对加以轻压，则完成紧密的对接。

4.多克隆hCG抗体溶液的制备

按照传统的方法制备抗hCG的多克隆抗体。将6克的免疫提纯的hCG抗体溶于含3.5毫摩尔Tris.pH8.0和9克/升氯化钠的1升溶液中。

5.单克隆兔抗鼠抗体溶液的制备

按照传统的方法制备单克隆兔抗鼠抗体(抗卡巴粒)。将3克单克隆兔抗鼠抗体溶于含3.5毫摩尔Tris，pH8.0和9克/升氯化钠的1升溶液中。

6.试验带制备和装配

在一长100毫米宽7毫米矩形的玻璃纸板(厚度0.6毫米，基准重量为100克/米²)上，在每一试验带上通过离底边40毫米处吸移1微升的多克隆hCG抗体溶液(见4)形成含固定的专一结合试剂的检测区。通过离底边处50毫米吸移1微升的单克隆抗鼠IgG(见5)在每一试验带上形成第二区，称为控制区。

最后，在如我们在我们的未决专利申请号PCT/EP94/00899中提到的设备中将这些试验带装配起来。

7.检定方法

将试样收集装置(见3)固定在尿流中，这样，疏水部分1和3迅速吸收尿。尿也将同干燥的金溶胶标记的单克隆hCG抗体接触，其再悬浮在尿中，并将结合于尿中的hCG上，如果存在的话。试样收集装置随后同在6中讨论的设备中的试验带接触。含hCG-金溶胶标记的单克隆hCG抗体络合物的尿，在同试验带接触后从试样收集装置中释放出来，并由毛细管作用经过试验带传送。然后，通过固定的多克隆hCG抗体将hCG-金溶胶标记的单元隆hCG抗体络合物固定在试验带上，这样，通过肉眼看颜色即可检测hCG的存在。而且，通过在控制区观测颜色可以控制试验操作。

取样和使试样收集装置同试验膜或试验带接触之间的时间可以变化。结果，专一反应物质和检定试剂之间的预诱导时间也要改变。通过增加预诱导时间，可以提高检定的灵敏度，这是使用分离的试样收集装置的优点。

另外，检定时间可以缩短，而保持检定灵敏度不变。方法是缩短检测点和试样收集装置同试验带相接触区域间的距离。另外一种缩短检定时间而同时保持检定的灵敏度和检测点同接触区(见上面)之间的距离都不改变的可能性，是利用较少体积的检定试剂，可能同一适应的检定试剂组分(如较低的糖浓度)结合起来。

实施例2

试剂、试验带的制备和检定方法和实施例1中所述的相同。然而，金溶胶标记hCG抗体作为颗粒引入吸收材料，而且试样收集装置的制法也不同：

1.金溶胶标记的单克隆hCG抗体颗粒的制备。

将1克淀粉和8.6克蔗糖充分混合。向此混合物中加入10毫升的金溶胶标记的单克隆hCG抗体的悬浮液(见实施例1中的1)。混合物均匀后，将1毫升的0.3克羟丙基纤维素溶于蒸馏水中的溶液加入其中。充分混合后，在40℃和真空下干燥48小时。将干燥后的物质过筛(筛孔尺寸为300微米)，得到的颗粒贮放在含硅胶的干燥器中的管瓶中。

2.试样收集装置的制备

部分A(见实施例1中的3)的制法基本同实施例1中所述的方法相同。

部分B的制法也和实施例1中所述的相同。只是在伸出部分5的模部分不同。这里的模装填的是亲水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸350微米)同金溶胶标记的单克隆hCG抗体颗粒(见1)的混合物。随后，按照在实施例1中3的方法将材料烧结。

Claims

1.试样收集装置，包括能够迅速吸收试验液体并能容易地释放试验液体的吸收材料，装置中还含至少一种检定试剂，其特征是，所说的检定试剂存在于所说吸收材料的下游部分，所说的下游部分包含有能在取样过程防止所说的检定试剂从装置中洗出的设施，提供所说的设施是在取样过程或取样后，能使所说的试剂可用于试验操作，而所说吸收材料的其余部分则全部或部分地位于含有检定试剂的所说部分的上游。

2.权利要求1的试样收集装置，其特征在于，所说的设施是排水材料的盖、套或外壳。

3.权利要求2的试样收集装置，其特征在于，所说的水排斥材料选自疏水多孔烧结材料、疏水织物或无纺材料、疏水纸或纸类材料。

4.权利要求3的试样收集装置，其特征在于，所说的疏水多孔烧结材料是乙烯醋酸乙烯酯、聚丙烯、聚乙烯或超高分子量聚乙烯，这些材料的孔径尺寸至多为100微米。

5.权利要求1的试样收集装置，其特征在于，所说的设施是不透水材料。

6.权利要求5的试样收集装置，其特征在于，所说的不透水材料是箔、玻璃、橡胶、热熔体，或通过固化水排斥材料表面的孔形成的材料。

7.权利要求1的试样收集装置，其特征在于，所说的设施是能允许控制释放检定试剂的试剂组分。

8.权利要求1的试样收集装置，其特征在于，所说的吸收材料用所说的检定试剂或截留在所说吸收材料孔中的检定试剂浸渍。

9.权利要求1的试样收集装置，其特征在于，所说的检定试剂包括在所说吸收材料的内部空间中。

10.权利要求9的试样收集装置，其特征在于，所说的检定试剂是冷冻干燥形式。

11.权利要求9的试样收集装置，其特征在于，所说的检定试剂浸于一附加的多孔载体中。

12.上述权利要求中任何一项的试样收集装置，特征在于，所说的吸收材料包含一多孔烧结亲水或亲水化的材料。

13.权利要求12的试样收集装置，其特征在于，所说的多孔烧结亲水化材料是亲水化的乙烯醋酸乙烯酯、亲水化的聚丙烯、亲水化的聚乙烯或亲水化的超高分子量聚乙烯。

14.权利要求13的试样收集装置，其特征在于，在所说装置的上游部分的所说多孔烧结亲水化的材料的孔径大小大于在所说装置的下游部分中多孔烧结亲水化材料的孔径大小。

15.上述权利要求中任何一项的试样收集装置，特征在于，所说的检定试剂是一标记的专一结合试剂。

16.权利要求15的试样收集装置，其特征在于，所说的标记的专一结合试剂含一颗粒标记。

17.权利要求16的试样收集装置，其特征在于，所说的颗粒标记是金溶胶或碳溶胶。

18.检测在试验液体中至少一种专一反应物质的装置，包含权利要求1的试样收集装置。

19.检测在试验液体中至少一种专一反应物质的装置，包含：

一权利要求1-17的试样收集装置。

一套箱，套箱含内部空间和孔，以便将所说的试样收集器引入所说的内部空间。

一位于套箱上的支持装置

一试验带，位于支持装置中并且由主要通过毛细管力传送试验液体的材料组成，并含有固定的专一结合试剂。

20.权利要求18或19的装置，其特征在于，专一反应物质是hCG或hLH。

21.检测试验液体中至少一种专一反应物质的方法，这样，使用权利要求1-17中任何一项的试样收集装置。

22.权利要求21的方法，这样，专一反应物质是hCG或hLH。