CN113820189A - 一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及细胞芯片技术领域，且公开了一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，包含取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中进行离心，离心过后的沉淀物放置于试管中保存；向试管中加入配置好的基液并与沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，风干后得到细胞芯片。该用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，使用时将待筛查的肿瘤细胞滴在细胞芯片上，再对细胞芯片进行封固，利用高倍显微镜观察细胞芯片上的影像，对影像进行提取分析从而筛查出肿瘤细胞，细胞芯片九公格所以一次可以筛查九种样品，从而达到高效率筛查，并且封固结构避免细胞芯片被感染。
Description
技术领域
本发明涉及细胞芯片技术领域，具体为一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法。
背景技术
小分子或基因排列将会在一个芯片上被制备，而且细胞应用在它上面，当细胞连接到芯片上的每个遗传材料时，每个基因将会缓慢地释放而且吸收到细胞内，正如病媒动物的行为一样，如果病媒动物表达细胞表面的受体，受体序列将会在细胞表面上被构造，为将来的化验做筛选不只有DNA或蛋白质，还有整个细胞或器官也能布置在玻璃表面上从而制得细胞芯片或组织芯片，举例来说，如果你想要找与细胞膜受体成键的配体，你需要布置整个细胞而不是提纯受体并用其点板，如果矩阵由不同的细胞组成，将会容易地辨认出与细胞特异性成键配体，这种方法应用将会很广，例如，如果配体与一个特定的癌细胞成键，对照试剂或者毒素取代物将会连到配体上，然后对每个做图像分析和处理，举例来说，RNA样品易于被少量的RNase分解，而RNase可能由实验者的皮肤或有黏液的组织产生，蛋白质也因环境因素不同程度的改变本性，为了要减少这些种人为的误差，芯片上的整个制备步骤的自动化引发人们极大的兴趣，这种方法称作芯片实验室，芯片实验室的成功结果将会得到一个测试芯片去任何地点测试生物学的样品，例如血液，并进一步实时实地得到想要的数据成为可能，而目前制备出来的细胞芯片均为单个芯片，筛查效率低，且细胞芯片在使用时没有封固结构，导致细胞芯片容易与外界环境产生交叉感染，为解决上述问题，现提出一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，具备筛查效率高，封固结构避免细胞芯片被感染的优点，解决了目前制备出来的细胞芯片均为单个芯片，筛查效率低，且细胞芯片在使用时没有封固结构，导致细胞芯片容易与外界环境产生交叉感染问题。
(二)技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，包括以下步骤：
S1、取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中，并向离心管中加入分离液；
S2、对所述S1中的细胞保存液进行离心，离心过后除去细胞上层液，过滤的带样本细胞的沉淀物，将样本细胞沉淀物放置于试管中保存；
S3、向所述S2的试管中加入配置好的基液，基液与试管中样本细胞沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；
S4、取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将所述S3中的悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，然后放入无菌风干箱中进行风干，风干后得到细胞芯片；
S5、将载玻片固定在基板上，并用封固盖进行密封固定。
优选的，所述S2中的离心采用KH19A台式高性能高速离心机，离心速度为16600r/min，所述S2中离心管的离心时间为8分钟。
优选的，所述细胞分离液包含细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液，所述细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液的比例为2:5。
优选的，所述基板与封固盖的制作材料为聚四氟乙烯，所述聚四氟乙烯为耐腐蚀的透明材质。
优选的，所述基液由以下份数的材料组成：双蒸水120份、四水硝酸钙10份、氯化钠15份、L－精氨酸25份、L－谷氨酸3份、甘氨酸28份、L－苯丙氨酸14份、盐酸硫胺30份、无碳酸氢钠0.8份。
优选的，向所述载玻片中滴入脂溶性封片试剂，然后盖上封固盖，所述载玻片在封固前放置于灭菌箱中进行灭菌，在封固后得到细胞芯片。
优选的，所述细胞芯片中滴入待检测样品，待检测样品分为九份且均为待检测细胞，在加入待检测样品后对细胞芯片进行再次封固并用数字扫描显微镜进行摄取图像与分析。
与现有技术相比，本发明提供了一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，具备以下有益效果：
1、该用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，该用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法在使用时，取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中，并向离心管中加入分离液；对细胞保存液进行离心，离心过后除去细胞上层液，过滤的带样本细胞的沉淀物，将样本细胞沉淀物放置于试管中保存；向试管中加入配置好的基液，基液与试管中样本细胞沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，然后放入无菌风干箱中进行风干，风干后得到细胞芯片。
2、该用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，将载玻片固定在基板上，并用封固盖进行密封固定，使用细胞芯片时将待筛查的肿瘤细胞滴在细胞芯片上，然后对细胞芯片进行再次封固，之后利用高倍显微镜观察细胞芯片上的影像，对影像进行提取分析从而筛查出肿瘤细胞，由于细胞芯片是九公格状的，所以一次可以筛查九种样品，从而达到高效率筛查，通过以上的方法从而可以达到高效率筛查，并且封固结构避免细胞芯片被感染。
附图说明
图1为本发明方法流程示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，包括以下步骤：
S1、取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中，并向离心管中加入分离液；
S2、对所述S1中的细胞保存液进行离心，离心过后除去细胞上层液，过滤的带样本细胞的沉淀物，将样本细胞沉淀物放置于试管中保存；
S3、向所述S2的试管中加入配置好的基液，基液与试管中样本细胞沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；
S4、取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将所述S3中的悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，然后放入无菌风干箱中进行风干，风干后得到细胞芯片；
S5、将载玻片固定在基板上，并用封固盖进行密封固定。
具体的，所述S2中的离心采用KH19A台式高性能高速离心机，离心速度为16600r/min，所述S2中离心管的离心时间为8分钟。
具体的，所述细胞分离液包含细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液，所述细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液的比例为2:5，细胞分离液的作用主要是保持渗透压和与调整pH值。
具体的，所述基板与封固盖的制作材料为聚四氟乙烯，所述聚四氟乙烯为耐腐蚀的透明材质。
具体的，所述基液由以下份数的材料组成：双蒸水120份、四水硝酸钙10份、氯化钠15份、L－精氨酸25份、L－谷氨酸3份、甘氨酸28份、L－苯丙氨酸14份、盐酸硫胺30份、无碳酸氢钠0.8份。
具体的，向所述载玻片中滴入脂溶性封片试剂，然后盖上封固盖，所述载玻片在封固前放置于灭菌箱中进行灭菌，在封固后得到细胞芯片。
具体的，所述细胞芯片中滴入待检测样品，待检测样品分为九份且均为待检测细胞，在加入待检测样品后对细胞芯片进行再次封固并用数字扫描显微镜进行摄取图像与分析。
工作原理：该用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法在使用时，取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中，并向离心管中加入分离液；对细胞保存液进行离心，离心过后除去细胞上层液，过滤的带样本细胞的沉淀物，将样本细胞沉淀物放置于试管中保存；向试管中加入配置好的基液，基液与试管中样本细胞沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，然后放入无菌风干箱中进行风干，风干后得到细胞芯片；将载玻片固定在基板上，并用封固盖进行密封固定，使用细胞芯片时将待筛查的肿瘤细胞滴在细胞芯片上，然后对细胞芯片进行再次封固，之后利用高倍显微镜观察细胞芯片上的影像，对影像进行提取分析从而筛查出肿瘤细胞，由于细胞芯片是九公格状的，所以一次可以筛查九种样品，从而达到高效率筛查，通过以上的方法从而可以达到高效率筛查，并且封固结构避免细胞芯片被感染。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、取样本细胞保存液放置于洁净的离心管中，并向离心管中加入分离液；
S2、对所述S1中的细胞保存液进行离心，离心过后除去细胞上层液，过滤的带样本细胞的沉淀物，将样本细胞沉淀物放置于试管中保存；
S3、向所述S2的试管中加入配置好的基液，基液与试管中样本细胞沉淀物混合后的得到样本细胞的悬浮液；
S4、取载玻片，并将载玻片分成九宫格，再将所述S3中的悬浮液均匀地滴在载玻片的九宫格中，然后放入无菌风干箱中进行风干，风干后得到细胞芯片；
S5、将载玻片固定在基板上，并用封固盖进行密封固定。
2.根据权利要求1所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：所述S2中的离心采用KH19A台式高性能高速离心机，离心速度为16600r/min，所述S2中离心管的离心时间为8分钟。
3.根据权利要求1所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：所述细胞分离液包含细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液，所述细胞悬液制备试剂与淋巴细胞分离液的比例为2:5。
4.根据权利要求1所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：所述基板与封固盖的制作材料为聚四氟乙烯，所述聚四氟乙烯为耐腐蚀的透明材质。
5.根据权利要求1所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：所述基液由以下份数的材料组成：双蒸水120份、四水硝酸钙10份、氯化钠15份、L－精氨酸25份、L－谷氨酸3份、甘氨酸28份、L－苯丙氨酸14份、盐酸硫胺30份、无碳酸氢钠0.8份。
6.根据权利要求1所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：向所述载玻片中滴入脂溶性封片试剂，然后盖上封固盖，所述载玻片在封固前放置于灭菌箱中进行灭菌，在封固后得到细胞芯片。
7.根据权利要求6所述的一种用于非妇科的肿瘤筛查的细胞芯片的制备方法，其特征在于：所述细胞芯片中滴入待检测样品，待检测样品分为九份且均为待检测细胞，在加入待检测样品后对细胞芯片进行再次封固并用数字扫描显微镜进行摄取图像与分析。
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