CN113730433B - 一种治疗阴道炎症的妇科凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种妇科凝胶及其制备方法与应用。所述妇科凝胶的制备原料包括:β‑葡聚糖1‑50份、甘露聚糖1‑50份、酵母菌多肽类5‑40份和乳酸5‑20份。本发明制备的妇科凝胶,通过采用食用级原料,以特定的协同作用,维持阴道正常pH值且能有效的维持其功能,在抑菌消炎的同时,对阴道粘膜产生良好的修复和愈合作用,从而加速了阴道的恢复,可以高效的用于妇科疾病的治疗,对治疗细菌性阴道炎、宫颈糜烂、阴道粘膜修复、白带异常等各种妇科疾病。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,具体涉及一种治疗阴道炎症的妇科凝胶及其制备方法与应用。
背景技术
阴道炎即阴道炎症,是导致外阴阴道症状如瘙痒、灼痛、刺激和异常流液的一组病症。正常健康妇女阴道由于解剖组织的特点对病原体的侵入有自然防御功能。如阴道口的闭合,阴道前后壁紧贴,阴道上皮细胞在雌激素的影响下的增生和表层细胞角化,阴道酸碱度保持平衡,使适应碱性的病原体的繁殖受到抑制,而颈管黏液呈碱性,当阴道的自然防御功能受到破坏时,病原体易于侵入,导致阴道炎症。
正常情况下有需氧菌及厌氧菌寄居在阴道内,形成正常的阴道菌群。任何原因将阴道与菌群之间的生态平衡打破,也可形成条件致病菌。临床上常见有:细菌性阴道病(占有症状女性22%~50%)、念珠菌性阴道炎(17%~39%)、滴虫性阴道炎(4%~35%)、老年性阴道炎、幼女性阴道炎。感染阴道的提取物中大约90%的真菌是白色念珠菌,而大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和白色念球菌则是细菌性阴道炎的常见致病菌。阴道内受到细菌等病原体的作用会导致阴道粘膜受损,从而导致疾病治疗周期长或难以根除。目前的解决办法中,市面上大部分产品的设计思路为抑菌消炎,不能对阴道粘膜产生修复作用。药品中大部分为激素,有些存在一定的副作用和耐药性;市场上多数产品的愈合效果欠佳或者容易复发,也存在一定的安全性问题。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明提出一种妇科凝胶,能够在抑菌消炎的同时对阴道粘膜进行修复。
本发明还提出一种上述妇科凝胶的制备方法。
本发明还提出上述妇科凝胶的应用。
根据本发明的第一方面实施方式的妇科凝胶,所述妇科凝胶的制备原料包括:β-葡聚糖1-50份、甘露聚糖1-50份、酵母菌多肽类5-40份和乳酸5-20份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶的制备原料包括:β-葡聚糖10-30份、甘露聚糖20-40份、酵母菌多肽类5-20份和乳酸10-18份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶的制备原料包括:β-葡聚糖18-22份、甘露聚糖26-32份、酵母菌多肽类8-12份和乳酸13-18份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶包括以下质量分数的原料:β-葡聚糖20份、甘露聚糖30份、酵母菌多肽类10份和乳酸15份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶的制备原料还包括:甘油、泊洛沙姆、羟苯甲酯钠和/或壳聚糖。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶还包括以下质量分数的原料:甘油30-60份、泊洛沙姆1-10份、羟苯甲酯钠1-5份和/或壳聚糖10-30份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶还包括以下质量分数的原料:甘油45-55份、泊洛沙姆8-12份、羟苯甲酯钠1-4份和/或壳聚糖18-22份。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科凝胶还包括以下质量分数的原料:甘油50份、泊洛沙姆10份、羟苯甲酯钠2份和/或壳聚糖20份。
根据本发明的一些实施方式,所述泊洛沙姆选自以下成分的其中一种:泊洛沙姆188,泊洛沙姆127,泊洛沙姆407,优选地,所述泊洛沙姆为泊洛沙姆188。
根据本发明的一些实施方式,所述β-葡聚糖来源于酵母菌细胞壁提取物,分子量低于500000D,优选地,所述β-葡聚糖分子量低于200000D。
根据本发明的一些实施方式,所述甘露聚糖来源于酵母菌细胞壁提取物,分子量低于500000D,优选地,所述β-葡聚糖分子量低于200000D。
根据本发明的第二方面实施方式上述妇科凝胶的制备方法,步骤如下:将β-葡聚糖、甘露聚糖、酵母菌多肽类、壳聚糖、泊洛沙姆、甘油、羟苯甲酯钠和乳酸,混合即得。
根据本发明的第三方面实施方式的应用,所述应用为上述妇科凝胶在制备用于预防和/或治疗妇科疾病药物中的应用。
根据本发明的一些实施方式,所述妇科疾病为细菌性阴道炎、宫颈糜烂、阴道粘膜修复和白带异常中的一种或多种。
本发明的有益效果在于:本发明制备的妇科凝胶,通过采用食用级原料,以特定的协同作用,维持阴道正常pH值且能有效的维持其功能,在抑菌消炎的同时,对阴道粘膜产生良好的修复和愈合作用,从而加速了阴道的恢复。其中包括使用酵母β-葡聚糖诱导伤口巨噬细胞中TNF-α的表达,甘露聚糖具有抗病毒、促进伤口愈合和抗氧化的功能,β-葡聚糖和甘露聚糖产生了明显的协同增效作用,能显著修复阴道粘膜;酵母菌多肽可以为阴道内正常菌群提供氨基酸源,同时可以提高本申请方案制备的妇科凝胶的稳定性;乳酸,调节生殖道pH值,维持引导生殖道内菌群平衡改善阴道微环境、减轻阴道炎性反应、减少阴道异常分泌物量,有效改善阴道清洁度,本发明方案制备得到的妇科凝胶,可以高效的用于妇科疾病的治疗,对治疗细菌性阴道炎、宫颈糜烂、阴道粘膜修复、白带异常等各种妇科疾病效果明显。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述,以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然,所描述的实施例只是本发明的一部分实施例,而不是全部实施例,基于本发明的实施例,本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例,均属于本发明保护的范围。实施例中所使用的试验方法如无特殊说明,均为常规方法;所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
本发明妇科凝胶的一种实施例,本实施例含有以下按重量百分比组成的组分:酵母β-葡聚糖2%、酵母甘露聚糖3%、酵母菌多肽类1%、壳聚糖2%、泊洛沙姆1881%、甘油5%、羟苯甲酯钠0.2%、乳酸1.5%,余量为水。
本实施例中的妇科凝胶的制作方法如下:
(1)在搅拌罐中加入适量纯化水,再加入1%泊洛沙姆188,80℃搅拌使溶解,并80℃保温30分钟,开启冷却水,降温;
(2)将酵母β-葡聚糖2%、酵母甘露聚糖3%、酵母菌多肽类1%、壳聚糖2%、甘油5%、羟苯甲酯钠0.2%和乳酸1.5%,加入余量的水加入搅拌罐中使溶解;
(3)将步骤(1)和(2)所得的混合物,混合搅拌10分钟。
实施例2
本发明制备的妇科凝胶一种实施例,本实施例中含有以下按重量百分比组成的组分:酵母β-葡聚糖1%、酵母甘露聚糖3%、酵母菌多肽类1%、壳聚糖1%、甘油4%、羟苯甲酯钠0.2%和乳酸1.5%,余量为水。
本实施例中的妇科凝胶的制作方法与实施例1相同。
实施例3
本发明制备的妇科凝胶一种实施例,本实施例中含有以下按重量百分比组成的组分:酵母β-葡聚糖1%、酵母甘露聚糖1%、酵母菌多肽类0.8%、壳聚糖2%、甘油3%、羟苯甲酯钠0.2%和乳酸1.5%,余量为水。
本实施例中的妇科凝胶的制作方法与实施例1相同。
对比例1
本发明妇科凝胶的一种对比例,本对比例中与实施例1的区别仅在于制备原料中去除β-葡聚糖。其余组分来源以及妇科凝胶的制作方法与实施例1相同。
对比例2
本发明妇科凝胶的一种对比例,本对比例中与实施例1的区别仅在于制备原料中去除甘露聚糖。其余组分来源以及妇科凝胶的制作方法与实施例1相同。
对比例3
本发明妇科凝胶的一种对比例,本对比例中与实施例1的区别仅在于制备原料中去除β-葡聚糖和甘露聚糖。其余组分来源以及妇科凝胶的制作方法与实施例1相同。
测试例
1、体外抑菌试验
本发明方案中的白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌均购自宁波明舟生物科技有限公司。
(1)抑菌剂筛选:采用滤纸片法。选择易引起阴道炎的白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌3种致病菌,以抑菌圈的大小为指标。
(2)菌种悬浮液制备:将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌菌种接种于斜面营养培养基上,30℃培养24h;白色念珠菌菌种接种于斜面沙氏培养基上,30℃培养48h。分别用无菌PBS将菌苔冲洗下来,调整浓度为3×108CFU/mL,备用。
(3)含药滤纸片制备:取无菌干燥滤纸,用打孔器打孔6mm,分别放入含等量实施例1、对比例2、对比例3制备的妇科凝胶的无菌生理盐水50mL中浸泡15min,备用。
抑菌活性测定:
在4个灭菌培养皿中分别加入上述制备好的菌株悬浮液100μL,再倒入40℃的灭菌培养基混合均匀。凝固后,用无菌镊子夹取各含药滤纸片,放置于距培养皿边缘15mm处,轻轻按压,使滤纸片紧贴培养基。每个重复进行3次。将培养皿倒置于30℃恒温培养箱中,分别培养24、48h,然后观察含药滤纸片周围有无抑菌圈,以十字交叉法测定其抑菌直径(包括纸片直径)。每个重复测量3次,取平均值。
表1
实验结果如表1所示,从表中可以看出,实施例1制备的妇科凝胶对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌相较对比例明显效果更好,结果表明酵母β-葡聚糖与酵母甘露聚糖对细菌的抑菌效果有协同作用。
2、动物实验
(1)小鼠混合性阴道炎治疗试验
本发明方案的小鼠购自宁波明舟生物科技有限公司。
1)建模:取健康的40只小鼠分别于给药前第3天皮下注射0.5 mg/只的苯甲酸雌二醇注射液(每日上午进行),大鼠阴道内注入链霉素50μg/只/次,然后向阴道内注入混合菌(加德纳菌,白色念珠菌,B族链球菌悬液(1:1:1菌落数))(1 ×108CFU/mL)50μL/只/次,每天1次,连续3天,
复制混合性阴道炎模型,空白组小鼠阴道接种50μL不含菌株的PBS。模型组和空白组小鼠分别于分组前向小鼠阴道内注入50μL无菌PBS,移液枪轻轻吹打5次后吸出冲洗液(约250μL),取50μL用于显微镜下观察发现给药第5天混合感染率为92.1%,致病性菌落数显著增加,阴道分泌物涂片转阴率显著减少,清洁度评分显著增加,同时阴道pH显著增加,其异常症状与临床上阴道炎的临床表现相似,说明模型构建成功。
2)模型治疗验证:
造模成功后进行7次给药治疗,将造模成功的小鼠分成4组,每组10只,将医用吸收性明胶海绵剪成0.5cm×0.5cm大小,分别涂抹实施例1、对比例1、对比例2、对比例3的制备的妇科凝胶后,分别放入小鼠阴道内;治疗恢复7天后,向小鼠阴道内注入50μL无菌PBS,移液枪轻轻吹打5次后吸出冲洗液(约250μL),取50μL用于显微镜下观察菌落数。结果如下表2所示。
表2
实验结果如表2所示,从表中可以看出,实施例1制备的妇科凝胶能够很好的抑制致病菌的活性,对比从对比例1、对比例2和对比例3的结果可以看出,结果表明酵母β-葡聚糖与酵母甘露聚糖对细菌的抑菌效果有协同作用,可以明显提高阴道炎的治疗效果。
(2)粘膜透皮吸收试验
将已经在实验室适应饲养环境的15只健康小鼠在接种前6d开始皮下注射含有0.1mg苯甲酸雌二醇油剂0.05mL,以后每2d注射一次。将已分离纯化的白念珠菌接种在含1%蛋白胨和0.1%葡萄糖的液基上,25℃水浴震荡培养16-18h。接种时将密度为2.5×106/L溶于PBS的菌悬液20μL(即白念珠菌孢子接种量为5×104个)在接种日注入小鼠阴道内,制备模型组小鼠白念珠菌性阴道炎模型。
从接种日开始诱导阴道炎,阴道炎导致阴道粘膜破损,接种5天后确认阴道粘膜出现明显破损。将造模成功的小鼠分成3组,每组5只,分别将实施例1-3制备的妇科凝胶以相同量分别推注入每组小鼠阴道,置入完成后正常饲养,于0.5h时将各组小鼠5只处死,切除试验组织部位并清洗干净,采用HPLC-示差折光法对清洗液中的β-葡聚糖和甘露聚糖进行定量分析(样品处理方法参考QB/T 4572-2013),其就是未能透皮的β-葡聚糖和甘露聚糖。
其中,透皮率计算公式为:透皮率=(注入的多糖总量-未能透皮的多糖量)/注入的多糖总量。实验重复3次,取平均值。
表3
实验结果如表3所示,从表中可以看出,本申请方案实施例1制备的妇科凝胶的透皮率测试结果最好,结果表明酵母β-葡聚糖与酵母甘露聚糖的配比对细菌的抑菌效果有协同作用。
3、临床试验
(1)对阴道炎修复功效测试
随机选取选出20-40岁年龄阶段的有阴道炎病症的60位已婚妇女,均为知情同意患者,随机平均分组:每组20位患者,分别用相同量的实施例1和对比例3制备的妇科凝胶以及市售妇科凝胶进行试用体验,每天使用2次,5天后观察试验结果:
表4
从表4可以看出,实施例1制备的妇科凝胶对阴道炎修复效果比较显著,相较市售妇科凝胶,具有更稳定的效果。
(2)对细菌性阴道炎和霉菌性阴道炎的修复测试
随机选取阴道炎患者50例,其中细菌性阴道炎患者28例,霉菌性阴道炎患者22例,均为知情同意患者。
诊断标准:
症状:白带增多,有味,外阴瘙痒,可伴有烧灼感、疼痛和性交痛、阴道干涩,滴虫或细菌性阴道炎患者阴道分泌物镜检时分别可见细菌,霉菌性阴道分泌物镜检时(+),细菌性阴道炎BV检查阳性。
治疗方法:
患者阴道给予实施例1制备的妇科凝胶,每天换药一次,每次3g,连续7天。
疗效评定标准:
治愈:自觉症状消失、阴道清洁度(Ⅰ)和阴道拭子培养转阴;
好转:自觉症状减轻、阴道清洁度(Ⅱ)或阴道拭子培养只有少数细菌生长,最多不超过10个;
无效:自觉症状无改善,阴道清洁度无变化,阴道拭子培养无变化。
阴道干涩改善程度:自觉在抑菌的同时,阴道内不会出现干涩的情况
表5
实验结果如表5所示,从表中可以看出,本发明方案制备的妇科凝胶对细菌性阴道炎患者和霉菌性阴道炎均有一定的治疗效果,但是对细菌性阴道炎的效果更显著。
本发明实施例和对比例中使用的酵母β-葡聚糖和酵母甘露聚糖均为市售所得常规产品。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明,但是本发明不限于上述实施例,在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外,在不冲突的情况下,本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
Claims (3)
1.一种妇科凝胶,其特征在于,所述妇科凝胶的制备原料含有以下按重量百分比组成的组分:酵母β-葡聚糖2%、酵母甘露聚糖3%、酵母菌多肽类1%、壳聚糖2%、泊洛沙姆1881%、甘油5%、羟苯甲酯钠0.2%、乳酸1.5%,余量为水。
2.一种如权利要求1所述的妇科凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)在搅拌罐中加入适量纯化水,再加入1%泊洛沙姆188,80℃搅拌使溶解,并80℃保温30分钟,开启冷却水,降温;
(2)将酵母β-葡聚糖2%、酵母甘露聚糖3%、酵母菌多肽类1%、壳聚糖2%、甘油5%、羟苯甲酯钠0.2%和乳酸1.5%,加入余量的水加入搅拌罐中使溶解;
(3)将步骤(1)和(2)所得的混合物,混合搅拌10分钟。
3.根据权利要求1所述的妇科凝胶在制备用于预防和/或治疗妇科疾病药物中的应用;所述妇科疾病为阴道炎。
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