CN113648311B

CN113648311B - 7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯在制备降脂药物中的应用

Info

Publication number: CN113648311B
Application number: CN202111009202.9A
Authority: CN
Inventors: 玉万国; 唐皎瑢; 陈春华
Original assignee: Guangxi University of Science and Technology
Current assignee: Guangxi University of Science and Technology
Priority date: 2021-08-31
Filing date: 2021-08-31
Publication date: 2023-07-04
Anticipated expiration: 2041-08-31
Also published as: CN113648311A

Abstract

本发明属于单体化合物的用途技术领域，具体涉及7‑(2,2‑二甲基‑3‑丁烯酰胺基)‑八氢苯喹啉乙酸酯作为唯一活性成份在制备降脂和治疗肥胖症的药物中的用途。本发明通过体外、体内降脂实验模型研究发现，7‑(2,2‑二甲基‑3‑丁烯酰胺基)‑八氢苯喹啉乙酸酯具有减少脂肪堆积和降血脂的活性，可作为唯一活性成份用于制备降脂和治疗肥胖症的药物，适于大规模推广，具有潜在的应用价值。

Description

7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯在制备降脂药物中的应用

技术领域

本发明属于单体化合物的用途技术领域，具体涉及一种7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯在制备降脂药物中的用途。

背景技术

高脂血症在我国是常见的代谢疾病之一，发病率呈现逐年递增的趋势，它可以引发一系列的心脑血管等并发症，严重影响我国人口的生活质量和平均寿命。肥胖症是其中的主要表现形式，据估算，至2050年，全球肥胖将成为流行趋势，成年男性肥胖症患者将升至65%，成年女性肥胖症患者将升至50%，未成年儿童将升至25%左右。调查资料显示，高脂血症是冠心病、心肌梗死、脑血栓、脑卒中诱发的重要因素，机体显著的表现为甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平异常偏高。目前，临床上常用的降脂药物为他汀类和贝特类药物，它们具有确切的降脂效果，对血脂有较强的调节作用，但同时伴随着一定的毒副作用，如肌肉组织损伤、肝脏毒性、消化功能异常（异常增加胆固醇在胆汁中的浓度，导致胆结石的发生）等。在天然药物中寻找安全、高效、低毒的降脂活性成分，备受关注，具有潜在的应用价值。

7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，即7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-2,4-二甲基-5-氧代-1,2,3,4,4a,5,6,10b-八氢苯并[f]-1-喹啉基-乙酸酯[7-(2,2-dimethylbut-3-enamido)-2,4-dimethyl-5-oxo-1,2,3,4,4a,5,6,10b-octahydrobenzo[f] quinolin-1-yl acetate, DQA]，分子式为C₂₃H₃₀N₂O₄，相对分子量为398，分子结构如下所示。主要从药用植物红海榄气生根内生菌中提取分离制备。

目前尚无7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯用于降脂药物方面的相关研究报道。

发明内容

本发明的目的是解决上述现有技术中的问题，提供一种7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯作为唯一活性成份在制备降脂和治疗肥胖症的药物中的用途。7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯能够降低体外3T3-L1脂肪细胞胞内脂质堆积，提升胞外甘油的含量，能够减少体内高脂饮食诱导小鼠体重、内脏脂肪重量、血脂和胆固醇水平，可作为唯一活性成份用于制备降脂和治疗肥胖症的药物，具有潜在的应用价值。

为了实现上述目的，本发明的有益效果具体如下：

1、本发明通过研究发现，7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯能够降低体外3T3-L1脂肪细胞胞内脂质堆积，提升胞外甘油的含量，可作为唯一活性成份用于制备降脂和治疗肥胖症的药物；

2、本发明通过研究发现，7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯能够减少体内高脂饮食诱导小鼠体重、内脏脂肪重量、血液中甘油三酯和胆固醇水平，可作为唯一活性成份用于制备降血脂和治疗高脂血症的药物。

附图说明

图1为7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯减少3T3-L1脂肪细胞中脂质堆积，增加胞外甘油含量的柱形图，其中：A为脂质堆积柱形图，B为胞外甘油含量柱形图；A图和B图中，代号**表示与空白对照组相比较存在非常显著的差异（P<0.01），代号*表示与空白对照组相比较存在显著的差异（P<0.05）。

图2为7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯减少高脂饮食诱导肥胖小鼠体重、内脏脂肪重量、血液中甘油三酯和胆固醇的柱形图，其中：C为小鼠体重柱形图，D为小鼠内脏脂肪重量柱形图，E为小鼠血液中甘油三酯含量柱形图，F为小鼠血液中胆固醇含量柱形图；图2中，代号**表示与模型对照组相比较存在非常显著的差异（P<0.01），代号*表示与模型对照组相比较存在显著的差异（P<0.05），代号#表示与空白对照组相比较存在显著的差异（P<0.05）。

实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，特举以下实施例详细说明。

实施例1：7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，即7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-2,4-二甲基-5-氧代-1,2,3,4,4a,5,6,10b-八氢苯并[f]-1-喹啉基-乙酸酯作为唯一活性成份对3T3-L1脂肪细胞降脂活性实验。

试剂和药物：

脂肪细胞（3T3-L1，ATCC, Rockville, MD, USA）能够以甘油三酯的形式储存过剩的能量，保持较高的分化能力，可以通过诱导分化成为成熟的成脂肪细胞，是国际公认的研究脂质代谢的细胞模型；辛伐他汀（Sim），购自Sigma Aldrich Company (St. Louis, MO,USA)，纯度>99.5% (HPLC)；DQA，即7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，由实验室从药用植物红海榄气生根内生菌中提取分离得到，纯度>98% (HPLC)。

实验方法与结果：

1. 3T3-L1脂肪细胞分化与给药

将1×10⁵个细胞/孔密度的3T3-L1脂肪细胞接种至6孔板中，使用含有10% FBS的DMEM培养基培养48 h。然后，更换新鲜培养基，加入含有诱导剂的DMEM（10% FBS，0.5mMIBMX，1 μM DEX，10 μg/ml insulin）培养液分化96 h。其后，加入分化培养基（DMEM，10%FBS，10 μg/ml insulin）和不同浓度DQA，连续培养24 h。辛伐他汀（Sim）为阳性药物。

2. DQA对脂肪细胞脂质生成的实验结果

如图1所示，系列浓度DQA均能降低胞内脂质积累，呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为5 μM时（如图1（A）所示），作用效果优于阳性对照药物5 μM Sim。系列浓度DQA均能提升胞外甘油的含量，呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为5 μM时（如图1（B）所示），作用效果优于阳性对照药物5 μM Sim。

上述实验结果表明，7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯能够降低体外3T3-L1脂肪细胞胞内脂质堆积，提升胞外甘油的含量，可作为唯一活性成份用于制备降脂和治疗肥胖症的药物。

实施例2：7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，即7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-2,4-二甲基-5-氧代-1,2,3,4,4a,5,6,10b-八氢苯并[f]-1-喹啉基-乙酸酯作为唯一活性成份对急性高脂诱导肥胖小鼠脂质堆积和降血脂实验。

试剂和药物：

年龄4周的雄性C57BL/6小鼠（湖南斯莱克景达实验动物有限公司）；辛伐他汀（Sim），购自Sigma Aldrich Company (St. Louis, MO, USA)，纯度>99.5% (HPLC)；DQA，即7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，由实验室从药用植物红海榄气生根内生菌中提取分离得到，纯度>98% (HPLC)。

实验方法与结果：

1. 急性高脂诱导肥胖动物模型建立

使用年龄4周的雄性C57BL/6小鼠建模。将购买的小鼠在实验室正常饮食饲养一周后，随机分为5组（空白对照组、肥胖模型组、高剂量组、低剂量组和阳性药物对照组），每组10只。空白对照组小鼠喂饲低脂饮食（10% 脂肪，14% 蛋白质，76% 碳水化合物, 3.6 kcal/g），其余各组喂饲高脂饮食（50% 脂肪，14% 蛋白质，36% 碳水化合物, 5.1 kcal/g），连续饲养6周，建立急性高脂饮食诱导小鼠肥胖模型。空白对照组腹腔注射5% DMSO溶液，其余各组腹腔注射不同浓度DQA和阳性药物，连续注射6周。

2. DQA对急性高脂诱导肥胖小鼠脂质堆积和血脂调节的实验结果

如图2所示，急性高脂饮食诱导小鼠肥胖造模，经由不同浓度DQA腹腔注射给药处理后，实验结果表明，与肥胖诱导模型对照组相比较，DQA不同给药剂量组均能减少小鼠体重（如图2（C）所示），呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为20 mg/kg 时，作用效果优于阳性对照药物20 mg/kg Sim；DQA不同给药剂量组均能减少小鼠内脏脂肪重量（如图2（D）所示），呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为20 mg/kg 时，作用效果优于阳性对照药物20 mg/kg Sim；DQA不同给药剂量组均能减少小鼠血液中甘油三酯的水平（如图2（E）所示），呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为20 mg/kg 时，作用效果优于阳性对照药物20 mg/kg Sim；DQA不同给药剂量组均能减少小鼠血液中胆固醇的水平（如图2（F）所示），呈现剂量依赖关系，其中DQA浓度为20 mg/kg 时，作用效果优于阳性对照药物20 mg/kg Sim。

从上述实施例可以看出，7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯能够减少体内高脂饮食诱导小鼠体重、内脏脂肪重量、血液中甘油三酯和胆固醇水平，可作为唯一活性成份用于制备降血脂和治疗高脂血症的药物。

综上，本发明涉及的 7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯来源于天然药用植物红海榄气生根内生菌，属于纯天然来源，安全可靠，毒副作用小，其化合物能够降低体外3T3-L1脂肪细胞胞内脂质堆积，提升胞外甘油的含量，可作为唯一活性成份用于制备降脂和治疗肥胖症的药物；能够减少体内高脂饮食诱导小鼠体重、内脏脂肪重量、血液中甘油三酯和胆固醇水平，可作为唯一活性成份用于制备降血脂和治疗高脂血症的药物，具有潜在的应用价值。

在此说明书中，本发明已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出各种修改和变换而不背离本发明的精神和范围。因此，说明书和附图应被认为是说明性的而非限制性的。

Claims

1. 7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-八氢苯喹啉乙酸酯，即 7-(2,2-二甲基-3-丁烯酰胺基)-2,4-二甲基-5-氧代-1,2,3,4,4a,5,6,10b-八氢苯并[f]-1-喹啉基-乙酸酯作为唯一活性成份在制备降脂和治疗肥胖症的药物中的用途。