CN113584087B - 一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，发酵，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；S3、将蛹虫草菌体破碎，过滤，得到蛹虫草溶胞物；S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。通过将人参经蛹虫草发酵后，经生物转化，人参皂苷向人参稀有皂苷转化，提高了人参稀有皂苷Rh1、Rh3的含量，而蛹虫草中富含活性物质虫草素与虫草酸，以人参为基质培养蛹虫草，虫草素与虫草酸含量增加，两者相辅相成，具有良好的抗氧化、抗菌作用。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法。
背景技术
人参属五加科植物，原产于中国、韩国和日本等地，味甘，性温，喜阴凉，具有大补元气、调补五脏等功效，是“百草之王”人参，五加科，人参属植物，根茎叶中富含18种人参单体皂苷，具有良好的抗氧化功能，能有效抑制络氨酸酶的生成，具有良好的消炎抗菌的效果，但人参中人参稀有皂苷Rh1、Rh3含量较低，如何提高人参稀有皂苷Rh1、Rh3成为了亟待解决的问题。
发明内容
本发明提供一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，所述的蛹虫草人参发酵产物滤液具有良好的抗氧化、抗菌作用。
本发明解决其技术问题采用以下技术方案：
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为8~15%，发酵，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将蛹虫草菌体破碎，过滤，得到蛹虫草溶胞物；
S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。
本发明通过对蛹虫草菌先进行固体培养基培养再进行液体培养基的培养，得到蛹虫草菌菌液，再通过将人参进行培养得到人参培养基，将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基培养，过滤，再将蛹虫草菌体破碎，加入到发酵产物滤液，进行大孔吸附处理，得到了具有良好的抗氧化、抗菌作用的蛹虫草人参发酵产物滤液。
作为一种优选方案，所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌接种于固体培养基中，进行活化培养8~10d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养8~10d，得到蛹虫草菌菌液。
作为一种优选方案，所述固体培养基配方按重量百分比：1~5%葡萄糖、0.4~1%磷酸二氢钾、0.2~0.6%七水硫酸镁、0.5~1.2%牛肉膏、0.2~0.5%酵母膏、0.2~0.6%乙酸钠、1~2.5%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于300~600mL水中煮沸30~50min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
作为一种优选方案，所述液体培养基配方按重量百分比：1~5%葡萄糖、0.4~1%磷酸二氢钾、0.2~0.6%七水硫酸镁、0.5~1.2%牛肉膏、0.2~0.5%酵母膏、0.2~0.6%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于300~600mL水中煮沸30~50min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
作为一种优选方案，所述人参培养基的制备方法为：
将人参清洗，烘干，粉碎至100~300目，得到人参粉；
将3~5重量份人参粉、95~99重量份去离子水加入发酵罐中，在70~85℃浸泡2~5h，再加入8~15重量份葡萄糖、2~4重量份酵母膏、3~5重量份牛肉膏、1~4重量份蛋白胨，以105℃~121℃灭菌20~50min，冷却至25~40℃。
作为一种优选方案，所述S2中发酵温度为25~40℃，发酵时间为8~10d。
作为一种优选方案，所述S3中破碎采用超高压均质机破碎，所述超高压均质机的破碎压力为1800~2500bar。
通过将蛹虫草菌体破碎得到蛹虫草溶胞物，将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液，进行大孔吸附处理，能够有效的人参皂苷向人参稀有皂苷转化，提高了人参稀有皂苷Rh1、Rh3的含量，同时更进一步增加虫草素与虫草酸含量，从而提高得到了具有良好的抗氧化、抗菌作用的蛹虫草人参发酵产物滤液。
作为一种优选方案，所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以2~5倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为60~100ml/min，再用2~5柱体积的60~80wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为40~80ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述混合液、去离子水、大孔吸附树脂重量比为1：3~6：0.4~0.6。
作为一种优选方案，所述大孔吸附树脂为HP-20大孔吸附树脂。
本发明的发明人在大量的研究中发现，通过上述大孔吸附处理，能够显著提高抗氧化、抗菌作用，将其他杂质以及不具有抗氧化、抗菌作用的物质洗脱点，提高皂苷Rh1、Rh3、虫草素与虫草酸的含量。
且发明人发现，若采取其他的大孔吸附树脂或者其他的洗脱液进行洗脱，会将皂苷Rh1、Rh3、虫草素与虫草酸洗脱点，从而降低抗氧化、抗菌作用。
作为一种优选方案，所述S4中灭菌温度为80~100℃。
本发明的有益效果：本发明将人参经蛹虫草发酵后，经生物转化，人参皂苷向人参稀有皂苷转化，提高了人参稀有皂苷Rh1、Rh3的含量，而蛹虫草中富含活性物质虫草素与虫草酸，以人参为基质培养蛹虫草，虫草素与虫草酸含量增加，两者相辅相成，得到了具有良好的抗氧化、抗菌作用的蛹虫草人参发酵产物滤液。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在本发明中，除特别声明，所述的份均为重量份。
实施例1
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为12%，在35℃发酵10d，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将蛹虫草菌体用超高压均质机破碎，破碎压力为2000bar，过滤，得到蛹虫草溶胞物；
S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，90℃下灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。
所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌（BNCC190531 蛹虫草菌）接种于固体培养基中，进行活化培养9d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养9d，得到蛹虫草菌菌液。
所述固体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、1.2%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述液体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述人参培养基的制备方法为：
将长白山人参清洗，烘干，粉碎至200目，得到人参粉；
将4重量份人参粉、96重量份去离子水加入发酵罐中，在80℃浸泡4h，再加入12重量份葡萄糖、3重量份酵母膏、4重量份牛肉膏、2重量份蛋白胨，以112℃灭菌30min，冷却至28℃。
所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入HP-20大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以4倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为80ml/min，再用4柱体积的70wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为50ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述混合液、去离子水、HP-20大孔吸附树脂重量比为1：4：0.5。
实施例2
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为10%，在35℃发酵10d，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将蛹虫草菌体用超高压均质机破碎，破碎压力为2000bar，过滤，得到蛹虫草溶胞物；
S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，90℃下灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。
所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌（BNCC190531 蛹虫草菌）接种于固体培养基中，进行活化培养8d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养8d，得到蛹虫草菌菌液。
所述固体培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖、0.6%磷酸二氢钾、0.4%七水硫酸镁、1%牛肉膏、0.3%酵母膏、0.4%乙酸钠、1.5%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述液体培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖、0.6%磷酸二氢钾、0.4%七水硫酸镁、1%牛肉膏、0.3%酵母膏、0.4%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述人参培养基的制备方法为：
将长白山人参清洗，烘干，粉碎至200目，得到人参粉；
将5重量份人参粉、95重量份去离子水加入发酵罐中，在75℃浸泡3h，再加入14重量份葡萄糖、3重量份酵母膏、4重量份牛肉膏、2重量份蛋白胨，以115℃灭菌30min，冷却至30℃。
所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入HP-20大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以4倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为90ml/min，再用3柱体积的75wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为60ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述混合液、去离子水、HP-20大孔吸附树脂重量比为1：5：0.5。
实施例3
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为15%，在35℃发酵10d，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将蛹虫草菌体用超高压均质机破碎，破碎压力为2000bar，过滤，得到蛹虫草溶胞物；
S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，90℃下灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。
所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌（BNCC190531 蛹虫草菌）接种于固体培养基中，进行活化培养8d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养8d，得到蛹虫草菌菌液。
所述固体培养基配方按重量百分比：4%葡萄糖、0.5%磷酸二氢钾、0.3%七水硫酸镁、1%牛肉膏、0.3%酵母膏、0.4%乙酸钠、2%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于400mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述液体培养基配方按重量百分比：4%葡萄糖、0.5%磷酸二氢钾、0.3%七水硫酸镁、1%牛肉膏、0.3%酵母膏、0.4%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于400mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述人参培养基的制备方法为：
将长白山人参清洗，烘干，粉碎至200目，得到人参粉；
将3重量份人参粉、97重量份去离子水加入发酵罐中，在75℃浸泡3h，再加入8重量份葡萄糖、2重量份酵母膏、3重量份牛肉膏、1重量份蛋白胨，以105℃灭菌40min，冷却至30℃。
所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入HP-20大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以4倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为70ml/min，再用4柱体积的60wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为50ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述混合液、去离子水、HP-20大孔吸附树脂重量比为1：5：0.4。
对比例1
对比例1与实施例1不同之处在于，对比例1不含有步骤S3、S4，其他都相同。
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为12%，在35℃发酵10d，过滤，滤液即为蛹虫草人参发酵产物滤液。
所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌（BNCC190531 蛹虫草菌）接种于固体培养基中，进行活化培养9d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养9d，得到蛹虫草菌菌液。
所述固体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、1.2%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述液体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述人参培养基的制备方法为：
将长白山人参清洗，烘干，粉碎至200目，得到人参粉；
将4重量份人参粉、96重量份去离子水加入发酵罐中，在80℃浸泡4h，再加入12重量份葡萄糖、3重量份酵母膏、4重量份牛肉膏、2重量份蛋白胨，以112℃灭菌30min，冷却至28℃。
对比例2
对比例2与实施例1不同之处在于，对比例2不含有步骤S3，即在本对比例中，没有将蛹虫草菌体破碎与发酵产物滤液混合，其他都相同。
一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为12%，在35℃发酵10d，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将发酵产物滤液经大孔树脂处理，90℃下灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液。
所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌（BNCC190531 蛹虫草菌）接种于固体培养基中，进行活化培养9d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养9d，得到蛹虫草菌菌液。
所述固体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、1.2%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述液体培养基配方按重量百分比：3%葡萄糖、0.8%磷酸二氢钾、0.5%七水硫酸镁、0.8%牛肉膏、0.4%酵母膏、0.5%乙酸钠、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于500mL水中煮沸40min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
所述人参培养基的制备方法为：
将长白山人参清洗，烘干，粉碎至200目，得到人参粉；
将4重量份人参粉、96重量份去离子水加入发酵罐中，在80℃浸泡4h，再加入12重量份葡萄糖、3重量份酵母膏、4重量份牛肉膏、2重量份蛋白胨，以112℃灭菌30min，冷却至28℃。
所述S4中发酵产物滤液经大孔树脂处理具体为：
将发酵产物滤液加入到去离子水中，再加入HP-20大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以4倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为80ml/min，再用4柱体积的70wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为50ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述发酵产物滤液、去离子水、HP-20大孔吸附树脂重量比为1：4：0.5。
对比例3
对比例3与实施例1不同之处在于，对比例3中S4不同于实施例1，即对比例3所述S4中混合液经大孔树脂处理具体步骤不同，其他都相同。
在本比例中，采用AB-8大孔吸附树脂，且洗脱条件也不同。
本对比例中先采用70wt%乙醇溶液洗脱，再采用正己烷洗脱。
所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入AB-8大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以4倍柱体积的70wt%乙醇溶液进行洗脱，洗脱速度为80ml/min，再用4柱体积的正己烷洗脱，洗脱速度为50ml/min，收集正己烷洗脱液；
所述混合液、去离子水、AB-8大孔吸附树脂重量比为1：4：0.5。
为了进一步证明本发明的效果，提供了以下测试方法：
1.抗菌性能检测：根据标准WST650—2019抗菌和抑菌效果评价方法中的5.1.1悬液定量抑菌试验，试验浓度为1％，测试菌种为大肠杆菌（8099），菌悬液浓度为1×106CFU/ml，测试结果见表1。
2.抗氧化性能检测：将1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)配制成65μM无水乙醇溶液。精密称取供试样品分别溶解于无水乙醇当中备用。
移取50μL供试样品加入到3mL 65μM DPPH溶液中，空白对照用等量无水乙醇，混匀，室温下放置30min后于比色皿中，测定样品和DPPH的混合溶液在517nm处吸光值。每一吸光度平行测3次，取其平均值，计算系列浓度的清除率，得出IC50值，测试结果见表1。清除率(Y)按下式计算：Y＝[l一(Ai一Aj)/Ao]× 100％
式中：Ao DPPH乙醇溶液在517nm处吸光值；Ai DPPH乙醇溶液与试样混合液在517nm处吸光值；Aj乙醇与试样混合液在517nm处吸光值。
表1
从表1中可看出，本发明所制备得到的蛹虫草人参发酵产物滤液具有良好的抗氧化、抗菌性能。
对比实施例1~3可知，经过配方以及制备参数的优化能够提高所述蛹虫草人参发酵产物滤液的抗氧化、抗菌性能，其中实施例1为最佳实施例，具有最佳的抗氧化、抗菌性能。
对比实施例1与对比例1可知，若不含有步骤S3、S4，即不将蛹虫草菌体破碎与发酵产物滤液混合，再进行大孔吸附，抗氧化、抗菌性能会显著下降。
对比实施例1与对比例2可知，若即不将蛹虫草菌体破碎与发酵产物滤液混合，而直接将发酵产物滤液进行大孔吸附，抗氧化、抗菌性能会显著下降。
对比实施例1与对比例3可知，大孔树脂处理具体步骤不同（洗脱溶液和大孔树脂的选取），能够显著影响到抗氧化、抗菌性能，采用不同于本发明所述的洗脱溶液和大孔树脂，能够显著提高抗氧化、抗菌性能，采用其他的洗脱溶液和大孔树脂（不同于本发明）甚至会将具有抗氧化、抗菌作用的成分洗脱掉，从而降低抗氧化、抗菌性能。
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
Claims (8)
1.一种蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备蛹虫草菌菌液、人参培养基；
S2、将蛹虫草菌菌液接种于人参培养基，接种量为8~15%，发酵，过滤，得到发酵产物滤液与蛹虫草菌体；
S3、将蛹虫草菌体破碎，过滤，得到蛹虫草溶胞物；
S4、将蛹虫草溶胞物加入到发酵产物滤液中，得到混合液，混合液经大孔树脂处理，灭菌，即得蛹虫草人参发酵产物滤液；
所述S4中混合液经大孔树脂处理具体为：
将混合液加入到去离子水中，再加入大孔吸附树脂，拌匀，装入到层析柱内，以2~5倍柱体积的去离子水进行洗脱，洗脱速度为60~100ml/min，再用2~5柱体积的60~80wt%乙醇溶液洗脱，洗脱速度为40~80ml/min，收集乙醇溶液洗脱液；
所述混合液、去离子水、大孔吸附树脂重量比为1：3~6：0.4~0.6；
所述大孔吸附树脂为HP-20大孔吸附树脂。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述蛹虫草菌菌液的制备方法为：
蛹虫草菌接种于固体培养基中，进行活化培养8~10d，将活化后的蛹虫草菌接种于液体培养基中培养8~10d，得到蛹虫草菌菌液。
3.根据权利要求2所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述固体培养基配方按重量百分比：1~5%葡萄糖、0.4~1%磷酸二氢钾、0.2~0.6%七水硫酸镁、0.5~1.2%牛肉膏、0.2~0.5%酵母膏、0.2~0.6%乙酸钠、1~2.5%琼脂、余量马铃薯煮液；
所述马铃薯煮液的制备方法为：将100g马铃薯置于300~600mL水中煮沸30~50min，过滤，滤液即为马铃薯煮液。
4.根据权利要求2所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述液体培养基配方按重量百分比：1~5%葡萄糖、0.4~1%磷酸二氢钾、0.2~0.6%七水硫酸镁、0.5~1.2%牛肉膏、0.2~0.5%酵母膏、0.2~0.6%乙酸钠、余量马铃薯煮液。
5.根据权利要求1所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述人参培养基的制备方法为：
将人参清洗，烘干，粉碎至100~300目，得到人参粉；
将3~5重量份人参粉、95~99重量份去离子水加入发酵罐中，在70~85℃浸泡2~5h，再加入8~15重量份葡萄糖、2~4重量份酵母膏、3~5重量份牛肉膏、1~4重量份蛋白胨，以105℃~121℃灭菌20~50min，冷却至25~40℃。
6.根据权利要求1所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述S2中发酵温度为25~40℃，发酵时间为8~10d。
7.根据权利要求1所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述S3中破碎采用超高压均质机破碎，所述超高压均质机的破碎压力为1800~2500bar。
8.根据权利要求1所述的蛹虫草人参发酵产物滤液的制备方法，其特征在于，所述S4中灭菌温度为80~100℃。
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