CN115025033A - 一种桑叶发酵组合物、制备方法、应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及化妆品领域,具体公开了一种桑叶发酵组合物、制备方法、应用,所述桑叶发酵组合物是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到。本发明提供的桑叶发酵组合物可以直接作为化妆品使用,通过酿酒酵母菌和植物乳杆菌的发酵作用可以提高桑叶中活性成分的功效,并且增强了终产品的功效,提高了桑叶中的活性成分的提取效率,环境友好无刺激,解决了现有技术中基于桑叶的化妆品大部分存在桑叶中有效成分提取效率低的问题。而且,本发明实施例提供的制备方法简单,制备的桑叶发酵组合物具有抑菌、抗氧化、美白等功效,具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域,具体是一种桑叶发酵组合物、制备方法、应用。
背景技术
爱美之心,人皆有之。随着社会的不断发展,人们对化妆品的需求量也在不断提高。其中,桑叶作为一种药食两用物质,具有疏风、润肺、清肝明目等功效。现代研究表明,桑叶中含有生物碱、黄酮和多糖,在降糖、降压、抗氧化、抗菌、抗病毒和抑制癌细胞增殖等方面具有一定功效。因此,目前市场上已出现基于桑叶的保健饮品和化妆品。
目前,对于桑叶在化妆品中的开发利用,大多是简单通过溶剂提取法来进行获得桑叶中生物碱、黄酮和多糖,从而作为有效成分进行制备化妆品。但是,以上技术方案在实际使用时存在以下不足:现有技术中基于桑叶的化妆品大部分存在提取效率低的问题。因此,亟需一种提取效率高,生产成本低,操作简便,条件温和,环境友好的提取方式。
发明内容
本发明的目的在于提供一种桑叶发酵组合物,以解决上述背景技术中提出的现有技术中基于桑叶的化妆品大部分存在桑叶中有效成分提取效率低的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种桑叶发酵组合物,其是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水。
需要说明的是,溶剂提取法是获得桑叶中生物碱、黄酮和多糖的常用方法,常用溶剂为水和乙醇,该法操作简单,大规模操作较为容易实现,生产过程成本相对较低,但由于所用溶剂一般采用精馏回收,因此如何降低过程能耗是一个重要问题。采用辅助手段如超声波、微波、酶解等,小试实验结果比较理想,均可在较为温和的条件下获得良好的提取效果,但在规模应用方面的报道很少,辅助设备的投资成本较高可能是一个制约因素。超临界流体萃取也存在规模化应用时投资成本高的问题,而且最常用的超临界CO2流体在没有携带剂存在时,提取效果并不理想;采用超临界CO2流体以外的其他超临界流体萃取桑叶中活性成分的报道很少,如果能够选择一种无毒害的物质,且在不外加携带剂情况下,直接桑叶中生物活性物质带出并分离,将是一种有价值的方法。
在本发明实施例中,通过以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到所述桑叶发酵组合物,通过酿酒酵母菌和植物乳杆菌的发酵作用可以提高桑叶中活性成分的功效,并且在终产品中引入酿酒酵母和植物乳杆菌的发酵产生的活性成分,从而增强终产品的功效,提高了桑叶中的活性成分的提取效率,并且在提取过程中不添加有机试剂,环境友好并且终产品无刺激。
本发明实施例的另一目的在于提供一种所述桑叶发酵组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
按照比例称取桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;
将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌进行有氧发酵,灭菌后接入植物乳杆菌进行无氧发酵,灭菌后进行离心除去沉淀,然后在65℃-100℃进行加热20min-60min,静置冷却,得到所述桑叶发酵组合物。
本发明实施例的另一目的在于提供一种采用上述的桑叶发酵组合物的制备方法制备得到的桑叶发酵组合物。
本发明实施例的另一目的在于提供一种上述的桑叶发酵组合物在制备化妆品和/或护肤品中的应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明提供的桑叶发酵组合物可以直接作为化妆品使用,通过以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到所述桑叶发酵组合物,其中,桑叶发酵培养基中的桑叶粉为主要活性物来源,燕麦麸皮为化妆品的肤感、粘度等的来源,葡萄糖和大豆肽分别为酿酒酵母菌和植物乳杆菌的生长提供碳源和氮源,通过酿酒酵母菌和植物乳杆菌的发酵作用可以提高桑叶中活性成分的功效,并且增强了终产品的功效,提高了桑叶中的活性成分的提取效率,环境友好无刺激,解决了现有技术中基于桑叶的化妆品大部分存在桑叶中有效成分提取效率低的问题。而且,本发明实施例提供的制备方法简单,制备的桑叶发酵组合物具有抑菌、抗氧化、美白等功效,具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明一实施例提供的DPPH自由基清除实验结果图。
图2为本发明一实施例提供的桑叶发酵组合物对酪氨酸酶的抑制率结果图。
具体实施方式
下面结合具体实施例和附图对本发明作进一步详细地说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明,但不以任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
本发明实施例提供的一种桑叶发酵组合物,所述桑叶发酵组合物是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水。
作为本发明的另一优选实施例,所述桑叶发酵培养基是通过桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖组成的复合物质加水灭菌所得。
作为本发明的另一优选实施例,所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过40-200目筛得到的粉状物。
作为本发明的另一优选实施例,所述酿酒酵母菌包括啤酒酵母、黄酒酵母、清酒酵母等酵母菌中的任意一种或多种。
作为本发明的另一优选实施例,所述两次发酵为先利用酿酒酵母菌进行有氧发酵,再利用植物乳杆菌进行无氧发酵。
在本发明实施例中,通过利用酿酒酵母和植物乳杆菌对桑叶发酵培养基进行两次发酵,得到具有一定肤感和粘度的桑叶发酵组合物,可以直接作为化妆品使用;其中,桑叶粉为最终的桑叶发酵组合物的主要活性物来源,燕麦麸皮为化妆品的肤感、粘度等的来源,葡萄糖和大豆肽分别为酿酒酵母菌和植物乳杆菌的生长提供碳源和氮源。
作为本发明的另一优选实施例,所述桑叶发酵培养基包括以下按照重量份的原料:桑叶粉1-5份、燕麦麸皮1-10份、大豆肽0.1-2份、葡萄糖0.4-2.4份、水80-120份。
作为本发明的另一优选实施例,所述桑叶发酵培养基包括以下按照重量份的原料:桑叶粉1.8-2.2份、燕麦麸皮1-5份、大豆肽0.1-1份、葡萄糖0.5-2份、水95-105份。
优选的,所述桑叶发酵培养基中的桑叶粉:燕麦麸皮:大豆肽:葡萄糖:水的质量比是2g:(1-5)g:(0.1-1)g:(0.5-2)g:100g。
本发明实施例还提供一种所述桑叶发酵组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
按照比例称取桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;
将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌进行有氧发酵,灭菌后接入植物乳杆菌进行无氧发酵,灭菌后进行离心除去沉淀,然后在65℃-100℃进行加热20min-60min,静置冷却,得到所述桑叶发酵组合物。
作为本发明的另一优选实施例,在所述的桑叶发酵组合物的制备方法中,还包括在加热并静置冷却后加入防腐剂进行混合均匀的步骤。所述防腐剂可以是现有技术中的可用于化妆品的防腐剂,具体根据需求进行选择,这里并不作赘述。优选的,是加入0.5wt%的己二醇和0.5wt%的对羟基苯乙酮作为防腐剂。
作为本发明的另一优选实施例,在所述的桑叶发酵组合物的制备方法中,所述灭菌均是进行高温灭菌,具体的灭菌温度为105-125℃,灭菌时间为10min-60min。
作为本发明的另一优选实施例,所述将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌进行有氧发酵时的接菌量是0.2wt%-4wt%,即在桑叶发酵培养基中接入0.2wt%-4wt%的桑叶发酵培养基重量的酿酒酵母菌。
作为本发明的另一优选实施例,所述接入植物乳杆菌进行无氧发酵时的接菌量是0.1wt%-2wt%。
作为本发明的另一优选实施例,所述有氧发酵是在24℃-35℃进行恒温震荡并发酵24-96h。
作为本发明的另一优选实施例,所述恒温震荡的转速是100r/min-250r/min,具体的,所述有氧发酵是在24℃-35℃条件下,于100r/min-250r/min恒温震荡培养箱中发酵24-96h。
作为本发明的另一优选实施例,所述无氧发酵是在35℃-45℃进行发酵8-24h。具体是在35℃-45℃恒温培养箱中发酵8-24h。
作为本发明的另一优选实施例,在所述的桑叶发酵组合物的制备方法中,所述离心的转速是2000r/min-10000r/min,离心的时间是5min-60min。
本发明实施例还提供一种采用上述的桑叶发酵组合物的制备方法制备得到的桑叶发酵组合物。
本发明实施例还提供一种上述的桑叶发酵组合物在制备化妆品和/或护肤品中的应用。
以下通过列举具体实施例对本发明的桑叶发酵组合物的技术效果做进一步的说明。
实施例1
一种桑叶发酵化妆品,其制备方法具体包括以下步骤:
将桑叶进行干燥磨粉,过100目筛,得到的桑叶粉,将得到的桑叶粉按照桑叶粉:燕麦麸皮:大豆肽:葡萄糖:水=2g:1g:0.5g:1g:100g的比例混合,混合后均匀分装到500毫升的三角瓶中,进行高温灭菌,灭菌温度为121℃,灭菌时间为20min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶发酵培养基。在得到的桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌,接菌质量比为1wt%,在30℃、200r/min恒温震荡培养箱中发酵72h。发酵完成后,进行高温灭菌,灭菌温度为105℃,灭菌时间为40min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶-酵母发酵培养基。在得到的桑叶-酵母发酵培养基中接入植物乳杆菌,接菌质量比为2wt%,在45℃恒温培养箱中发酵15h。发酵完成后,进行高温灭菌,灭菌温度为110℃,灭菌时间为30min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶-酵母-乳酸菌发酵液。将得到的桑叶-酵母-乳酸菌发酵液在5000r/min条件下,离心30min,弃掉沉淀,所得上清在80℃水浴锅中加热40min,静置冷却,得到桑叶-酵母-乳酸菌发酵上清液。在得到的桑叶-酵母-乳酸菌发酵上清液中,加入0.5wt%的己二醇和0.5wt%的对羟基苯乙酮,即为桑叶发酵化妆品。
实施例2
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉2千克、燕麦麸皮3千克、大豆肽0.5千克、葡萄糖1.2千克、水100千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过100目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是啤酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
称取上述的桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;
将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌(接菌量是2wt%),在30℃条件下,于200r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵55h,灭菌后接入植物乳杆菌(接菌量是1wt%)在40℃恒温培养箱中进行无氧发酵16h,灭菌后进行离心除去沉淀,离心的转速是5000r/min,离心的时间是30min,所得上清在80℃进行加热40min,静置冷却,加入0.5wt%的己二醇和0.5wt%的对羟基苯乙酮作为防腐剂进行混合均匀,得到所述桑叶发酵组合物。
在本发明实施例中,所述灭菌均是进行高温灭菌,具体的灭菌温度为115℃,灭菌时间为45min。
实施例3
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉2千克、燕麦麸皮1千克、大豆肽0.1千克、葡萄糖0.5千克、水100千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过40目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是啤酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法与实施例2相同。
实施例4
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉2千克、燕麦麸皮5千克、大豆肽1千克、葡萄糖2千克、水100千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过200目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是啤酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法与实施例2相同。
实施例5
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉1千克、燕麦麸皮1千克、大豆肽0.1千克、葡萄糖0.4千克、水80千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过40目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是啤酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
称取上述的桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;
将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌(接菌量是0.2wt%),在24℃条件下,于100r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵24,灭菌后接入植物乳杆菌(接菌量是0.1wt%)在35℃恒温培养箱中进行无氧发酵8h,灭菌后进行离心除去沉淀,离心的转速是2000r/min,离心的时间是60min,所得上清在65℃进行加热20min,静置冷却,加入防腐剂进行混合均匀,得到所述桑叶发酵组合物。
在本发明实施例中,所述灭菌均是进行高温灭菌,具体的灭菌温度为105℃,灭菌时间为60min。
实施例6
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉5千克、燕麦麸皮10千克、大豆肽2千克、葡萄糖2.4千克、水120千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过200目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是啤酒酵母、黄酒酵母、清酒酵母等重量混合后进行使用。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
称取上述的桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;
将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌(接菌量是4wt%),在35℃条件下,于250r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵96h,灭菌后接入植物乳杆菌(接菌量是2wt%)在45℃恒温培养箱中进行无氧发酵24h,灭菌后进行离心除去沉淀,离心的转速是10000r/min,离心的时间是5min,所得上清在100℃进行加热60min,静置冷却,加入防腐剂进行混合均匀,得到所述桑叶发酵组合物。
在本发明实施例中,所述灭菌均是进行高温灭菌,具体的灭菌温度为125℃,灭菌时间为10min。
实施例7
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉1.8千克、燕麦麸皮1千克、大豆肽0.1千克、葡萄糖0.5千克、水95千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过200目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是黄酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法与实施例2相同。
实施例8
一种桑叶发酵组合物,是以桑叶发酵培养基为原料,通过利用酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉2.2千克、燕麦麸皮5千克、大豆肽1千克、葡萄糖2千克、水105千克。所述桑叶粉是将桑叶进行干燥磨粉,然后过200目筛得到的粉状物。所述酿酒酵母菌是清酒酵母。
在本发明实施例中,所述桑叶发酵组合物的制备方法与实施例2相同。
实施例9
与实施例2相比,除了酿酒酵母菌的接菌量是0.6wt%,植物乳杆菌的接菌量是0.8wt%外,其他与实施例2相同。
实施例10
与实施例2相比,除了酿酒酵母菌的接菌量是2.5wt%,植物乳杆菌的接菌量是1.2wt%外,其他与实施例2相同。
实施例11
与实施例2相比,除了酿酒酵母菌的接菌量是3.5wt%,植物乳杆菌的接菌量是0.6wt%外,其他与实施例2相同。
实施例12
与实施例2相比,除了是在28℃条件下,于150r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵36h外,其他与实施例2相同。
实施例13
与实施例2相比,除了是在32℃条件下,于220r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵48h外,其他与实施例2相同。
实施例14
与实施例2相比,除了是在35℃条件下,于250r/min恒温震荡培养箱中进行有氧发酵80h外,其他与实施例2相同。
实施例15
与实施例2相比,除了是在38℃恒温培养箱中进行无氧发酵10h外,其他与实施例2相同。
实施例16
与实施例2相比,除了是在42℃恒温培养箱中进行无氧发酵16h外,其他与实施例2相同。
实施例17
与实施例2相比,除了是在45℃恒温培养箱中进行无氧发酵22h外,其他与实施例2相同。
实施例18
一种桑叶发酵化妆品,其制备方法具体包括以下步骤:
(1)将桑叶进行干燥磨粉,过40-200目筛,得到的桑叶粉,将得到的桑叶粉按照桑叶粉:燕麦麸皮:大豆肽:葡萄糖:水=2g:(1-5)g:(0.1-1)g:(0.5-2)g:100g的比例混合,混合后均匀分装到500毫升的三角瓶中,进行高温灭菌,灭菌温度为105-125℃,灭菌时间为10min-60min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶发酵培养基。
(2)在步骤(1)中得到的桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌,接菌质量比为0.2%-4%,在24℃-35℃、100r/min-250r/min恒温震荡培养箱中发酵24-96h。发酵完成后,进行高温灭菌,灭菌温度为105-125℃,灭菌时间为10min-60min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶-酵母发酵培养基。
(3)在步骤(2)中得到的桑叶-酵母发酵培养基中接入植物乳杆菌,接菌质量比为0.1%-2%,在35℃-45℃恒温培养箱中发酵8-24h。发酵完成后,进行高温灭菌,灭菌温度为105-125℃,灭菌时间为10min-60min。灭菌完成后,静置冷却,得到桑叶-酵母-乳酸菌发酵液。
(4)将步骤(3)中得到的桑叶-酵母-乳酸菌发酵液在2000r/min-10000r/min条件下,离心5min-60min,弃掉沉淀,所得上清在65℃-100℃水浴锅中加热20min-60min,静置冷却,得到桑叶-酵母-乳酸菌发酵上清液。
(5)在步骤(4)中得到的桑叶-酵母-乳酸菌发酵上清液中,加入防腐剂,即为桑叶发酵化妆品。
一:抑菌性能检测
1、实验菌株
痤疮丙酸杆菌菌株CGMCC1.5085:购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。
2、培养基
脑心浸液培养基:小牛脑浸粉12.5g/L;牛心浸粉5g/L;磷酸氢二钠2.5g/L;葡萄糖2g/L;氯化钠5g/L;蛋白胨10g;pH值7.4±0.1。购自北奥博星生物技术有限公司。
3、实验方法
分别称量适量营养琼脂加入不同三角瓶中,各加入少量蒸馏水加热溶解,备用;用接种环挑取各试管斜面的菌种分别置于带含无菌水的试管中,用振荡器将试管中的细胞分散,制得菌悬液,浓度为108个/mL。用移液器吸取0.5mL菌悬液分别注入不同培养皿中;向各培养皿内注入15mL-20mL的熔化状的培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀待其冷却;将牛津杯垂直放入培养基,轻轻压入,后向杯内加满测试样品水溶液(约240微升),盖上培养皿盖子置于37℃厌氧培养箱中,培养24小时,观察牛津杯周围抑菌圈的有无及大小。由于牛津杯所吸附的测试样品慢慢向四周扩散,因此在牛津杯的周围就出现清晰的抑菌圈。抑菌圈的大小代表测试样品抗菌力的高低。抑菌圈直径越大表明防腐体系的防腐效能越强。
4、实验结果
表1桑叶发酵组合物对痤疮丙酸杆菌抑制效果
通过表中实验结果可以得出,由实施例1制得的桑叶发酵组合物具有一定的抑菌效果。
二:桑叶发酵组合物的抗氧化性能检测
DPPH是一种早期合成的有机自由基,常用来评估抗氧化物的供氢能力,它在有机溶剂中非常稳定,呈紫色,而且在517nm处有一个特征吸收峰,当遇到自由基清除剂时,DPPH的孤对电子被配对而使其退色,也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此,可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。
取不同量的实施例1制备得到的桑叶发酵组合物溶于去离子水中,制得体积百分浓度为10%、20%、30%、40%、50%、60%的一系列待测液,以维生素C为阳性对照。
DPPH自由基清除实验的具体实验步骤为:
(1)取等体积(3mL)的待测液与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A1管);
(2)取等体积(3mL)的无水乙醇(待测物溶剂)与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A2管);
(3)取等体积(3mL)的无水乙醇与待测液混匀(A3管);
(4)反应30min后,在517nm下测A1管、A2管、A3管吸光度值。
清除率计算公式为:清除率(%)=[(A2+A3)-A1]/A2 (1)
以待测液的体积百分浓度为横坐标,清除率为纵坐标,制作DPPH自由基清除作用曲线,其中,A:不同浓度的桑叶发酵组合物,B:维生素C(1mg/mL)。
由图1可知,实施例1所得桑叶发酵组合物的清除DPPH自由基的IC50为30.23%,说明桑叶发酵组合物具有很强的抗氧化能力。
三:桑叶发酵组合物的美白功效分析
取对数生长期状态良好的B16细胞计数并接种于T25培养瓶中,置于培养箱37℃,5%CO2环境中培养过夜;更换培养基,分别加入实施例1中制得的桑叶发酵组合物(质量分数为10%),并以33mM熊果苷为阴性对照组,未作处理的空白样为空白对照组,培养48h后吸弃培养基,使用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤后加入裂解液,刮取细胞并收集于离心管中;80℃水浴30min;振荡混匀,吸取至96孔板于475nm读取吸光度值。黑色素含量变化=(测定孔OD值-空白对照OD值)/(细胞对照组OD值-空白对照OD值)。
如图2所示为实施例1所制备的桑叶发酵组合物在10%体积浓度下对B16细胞内黑色素含量影响的结果示意图,其中,A:空白对照,B:33mM熊果苷,C:10%桑叶发酵组合物。实验证明10%桑叶发酵组合物作用下相对黑色素含量为61.8%,33mM的熊果苷作用下相对黑色素含量为75.4%,以上数据结果表明,实施例1中得到的10%桑叶发酵组合物抑制黑色素生成的能力大于33mM的熊果苷,说明实施例1中得到的桑叶发酵组合物具有较强的美白作用。
需要说明的是,发酵提取法是近年来对于植物中活性物质提取利用的一个常用方法,利用微生物在发酵过程中释放的酶等物质,对植物中的活性物质进行作用,不仅可以提高植物活性物的提取率,还可以提高植物活性物的生物活性。微生物的生长过程中还可以在提取液中释放微生物中的活性物质,从而能够进一步提高植物提取液的活性。本发明利用酿酒酵母和植物乳杆菌对桑叶发酵培养基进行发酵,将得到的发酵液经过物理分离之后,直接作为化妆品使用,具有以下优点:
(1)提高了桑叶中的活性成分的提取效率,并且在提取过程中不添加有机试剂,环境友好并且终产品无刺激。
(2)酿酒酵母和植物乳杆菌的发酵作用可以提高桑叶中活性成分的功效,并且在终产品中引入酿酒酵母和植物乳杆菌的发酵产生的活性成分,从而增强终产品的功效。
(3)在桑叶培养基中添加燕麦麸皮不仅可以为菌的生长提供营养物质,还可以利用燕麦麸皮中的葡聚糖,蛋白等物质为终产品提供功效以及化妆品应有的肤感和粘度。
(4)先进行酿酒酵母发酵再进行植物乳杆菌发酵,不仅可以增大发酵效率,还可以改善最终发酵液的味道。
(5)桑叶发酵化妆品具有抑菌、抗氧化、美白等功效。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施方式,在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种桑叶发酵组合物,其特征在于,所述桑叶发酵组合物是以桑叶发酵培养基为原料,通过酿酒酵母菌和植物乳杆菌对所述桑叶发酵培养基进行两次发酵得到;其中,所述桑叶发酵培养基包括以下的原料:桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水。
2.根据权利要求1所述的桑叶发酵组合物,其特征在于,所述酿酒酵母菌包括啤酒酵母、黄酒酵母、清酒酵母中的任意一种或多种。
3.根据权利要求1所述的桑叶发酵组合物,其特征在于,所述两次发酵为先利用酿酒酵母菌进行有氧发酵,再利用植物乳杆菌进行无氧发酵。
4.根据权利要求1所述的桑叶发酵组合物,其特征在于,所述桑叶发酵培养基包括以下按照重量份的原料:桑叶粉1-5份、燕麦麸皮1-10份、大豆肽0.1-2份、葡萄糖0.4-2.4份、水80-120份。
5.根据权利要求1所述的桑叶发酵组合物,其特征在于,所述桑叶发酵培养基包括以下按照重量份的原料:桑叶粉1.8-2.2份、燕麦麸皮1-5份、大豆肽0.1-1份、葡萄糖0.5-2份、水95-105份。
6.一种如权利要求1-5任一所述的桑叶发酵组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:按照比例称取桑叶粉、燕麦麸皮、大豆肽、葡萄糖、水进行混合均匀,灭菌,得到桑叶发酵培养基;然后将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌进行有氧发酵,灭菌后接入植物乳杆菌进行无氧发酵,再进行灭菌后通过离心除去沉淀,然后在65℃-100℃进行加热20min-60min,静置冷却,得到所述桑叶发酵组合物。
7.根据权利要求6所述的桑叶发酵组合物的制备方法,其特征在于,所述将所述桑叶发酵培养基中接入酿酒酵母菌进行有氧发酵时的接菌量是0.2wt%-4wt%;所述接入植物乳杆菌进行无氧发酵时的接菌量是0.1wt%-2wt%。
8.根据权利要求6所述的桑叶发酵组合物的制备方法,其特征在于,所述有氧发酵是在24℃-35℃进行恒温震荡并发酵24-96h;所述无氧发酵是在35℃-45℃进行发酵8-24h。
9.一种采用权利要求6或7或8所述的桑叶发酵组合物的制备方法制备得到的桑叶发酵组合物。
10.一种如权利要求1或2或3或4或5或9所述的桑叶发酵组合物在制备化妆品和/或护肤品中的应用。
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CN115804417A (zh) * | 2022-12-05 | 2023-03-17 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 桑叶茶及其制备方法 |
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2021
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