CN113576971A - 一种纤连蛋白冻干粉制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种纤连蛋白冻干粉制剂及其制备方法,涉及化妆品技术领域,该纤连蛋白冻干粉制剂包括纤连蛋白冻干粉和酶液;其中,纤连蛋白冻干粉包括:纤连蛋白、甘露糖醇、褐藻提取物、三角褐指藻提取物、pH调节剂、缓冲剂和水。冻干粉制剂具有高营养高活性能够集中修护,采用生物透皮吸收技术,能够使皮肤吸收效率达到20倍以上,能够有效提高皮肤含水量与细胞活性。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,具体涉及一种纤连蛋白冻干粉制剂及其制备方法。
背景技术
冻干粉是在无菌环境下将药液冷冻成固态,抽成真空将水分升华干燥而成的无菌粉注射剂,由于其能够很好地保留活性成分并兼具深层恨透、吸收快等功效,因此被广泛地应用于医药和化妆品领域。在过去EGF由于较强的修复能力而常被添加于冻干粉中,但在EGF不得作为化妆品原料使用后,如何寻找合适的替代品成为当前较为关注的问题。纤连蛋白存在于多种动物细胞表面的大分子细胞外膜蛋白,是细胞外基质和基底膜中的主要非胶原性糖蛋白,其在细胞黏附中起中心作用,可调节细胞极性、分化和生长,经局限性蛋白酶解可切割为几个结构域,可与血纤蛋白、肝素、胶原、DNA以及细胞表面受体等结合,是EGF生长因子的接力棒。相比于其他组分如SOD以及胶原蛋白而言,SOD的功效是对肌肤的自由基进行清除从而达到缓解衰老作用,而纤连蛋白的功效是刺激肌肤新生细胞,从而达到新细胞种换衰老的细胞,因此FN除缓解衰老,还对红血丝等具有修护作用。胶原蛋白仅具有填充供能非自身产生,通过补充形式恢复肌肤弹性,纤连蛋白则是刺激自身肌肤细胞产生胶原蛋白从而恢复肌肤弹性。
专利CN201911255762.5公开了一种海参肠卵精华提取物冻干粉及其制备方法,原料包括:甘露糖醇、乙酰基六肽-8、海藻糖、海参肠卵提取物、纤连蛋白、透明质酸钠、腺苷、富勒烯、黄原胶和水。采用自然提取物能够有效清除皮肤中自由基、延缓皮肤衰老、无副作用、使用方便。但该发明对于上述冻干粉的效果并未做细化研究,因此也无法得知其在提高细胞活性方面的作用,同时,原料中的海参肠卵提取物的价格也相对较为高昂。专利CN201910800660.0公开了一种透皮纤连蛋白冻干粉的制备方法及由该方法制备的透皮纤连蛋白冻干粉,该冻干粉的原料包括柠檬酸钠、甘露醇和海藻糖,具有抗敏舒缓、营养细胞以及激活皮肤免疫系统的效果。但该发明重点研究的是冻干粉对于动物皮肤表皮角质层恢复方面的影响,并未细化至细胞方面。专利CN201910841974.5则公开了一种纤连蛋白稳定剂及添加相应稳定剂的纤连蛋白制剂,该发明中的稳定剂包括海藻酸钠和胶原水解物,纤连蛋白制剂则包括纤连蛋白和藻酸钠。但该发明研究重点在于如何提高纤连蛋白水溶液的稳定性,并未对其效果进行进一步的相关研究。
现有技术中有关含有纤连蛋白冻干粉及相关制剂的研究目前较少,而绝大多数也未进一步分析其对于细胞活性方面的功效以及应用时的其他诸如含水量方便的效果。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题,提供了一种纤连蛋白冻干粉制剂及其制备方法,冻干粉制剂具有高营养高活性能够集中修护,采用生物透皮吸收技术,能够使皮肤吸收效率达到20倍以上,保湿性能更强。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
本发明提供了一种纤连蛋白冻干粉制剂,包括纤连蛋白冻干粉和酶液;
所述纤连蛋白冻干粉包括:纤连蛋白、甘露糖醇、褐藻提取物、三角褐指藻提取物、pH调节剂、缓冲剂和水。
进一步地,所述酶液包括:羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物、保湿剂、螯合剂和水。
进一步地,所述pH调节剂为磷酸氢二钠,所述缓冲剂为磷酸二氢钠。
进一步地,所述保湿剂为乙酰基四肽-2,所述螯合剂为辛酰羟肟酸。
优选地,所述纤连蛋白冻干粉按重量份数计,包括:28-36份纤连蛋白、4-7份甘露糖醇、0.5-1.5份褐藻提取物、0.5-2份三角褐指藻提取物、0.3-0.6份pH调节剂、0.1-0.2份缓冲剂和55.6-63.7份水。
进一步优选地,所述纤连蛋白冻干粉按重量份数计,包括:34份纤连蛋白、6份甘露糖醇、1份褐藻提取物、1份三角褐指藻提取物、0.44份pH调节剂、0.13份缓冲剂和57.43份水。
优选地,所述酶液按重量份数计,包括:0.5-1.5份羧甲基脱乙酰壳多糖、3-7份芍药提取物、6-8.5份小球藻提取物、2-4份保湿剂、0.1-0.15份螯合剂和80.9-86.35份水。
进一步优选地,所述酶液按重量份数计,包括:1份羧甲基脱乙酰壳多糖、5份芍药提取物、7份小球藻提取物、3份保湿剂、0.1份螯合剂和83.9份水。
进一步地,所述纤连蛋白冻干粉和酶液的重量比为1-3:1-2,优选为1:1。
进一步地,所述羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物的重量比为0.5-1.5:3-7:6-8.5。
进一步地,所述纤连蛋白冻干粉的制备方法包括以下步骤:
(1)将水、纤连蛋白和缓冲剂依次加入并搅拌均匀分散完全后,加入褐藻提取物和三角褐指藻提取物,确保溶解完全;
(2)加热并加入甘露糖醇和pH调节剂,搅拌均匀;
(3)过滤出料,密封后抽干水分,即得。
进一步地,步骤(2)中所述加热的温度为90℃。
进一步地,所述酶液的制备方法包括以下步骤:
S1:将羧甲基脱乙酰壳多糖和水搅拌至均匀分散完全、均匀,搅拌并升温,确保溶解完全;
S2:加入芍药提取物和螯合剂,保温搅拌;
S3:降温后加入保湿剂,匀速搅拌;
S4:加入小球藻提取物,搅拌均匀,继续降温,搅拌,即得。
进一步地,步骤S1中所述升温的温度为70-85℃,步骤S3中所述降温的温度为40-45℃,步骤S4中所述继续降温的温度为40℃以下。
本发明所取得的技术效果是:
1.本发明中的冻干粉制剂含有纤连蛋白,该原料具有以下功能:(1)其为专研高活性“再生因子”,具有医美级修护能力;(2)能够促进胶原蛋白合成,深入老化肌底重建立体撑力,提升弹力纤维合成,提升紧塑面部轮廓;(3)能够加速细胞代谢再生,具体表现为a.促进细胞黏连生长,促进细胞与细胞、细胞与基质之间相互附着;促进细胞凝集和细胞壁铺展;缩短细胞汇合时间,维持细胞形态结构良好、增强细胞代谢,显著提高DNA,RNA,蛋白质合成速度;b.促进细胞运动,加速细胞铺展和迁移;c.促进细胞融合,提高细胞融合效率,保证融合后的细胞状态和生物活性;d.促进细胞分化,FN在细胞分化和发育中,能使细胞间附着力显著增加,细胞排列更紧密,促进体节形成,对各种器官形态发送具有显著影响;e.纤连蛋白作为细胞培养的基质,可提高多种细胞的贴壁率、汇合率,缩短细胞汇合时间,使细胞形态结构良好,代谢率增强,DNA、RNA及蛋白质合成速度显著提高。
2.本发明通过各个原料直接的复合作用,将纤连蛋白褐藻提取物、三角褐指藻提取物进行有机的结合,可以达到较优的效果。此外,本发明中的纤连蛋白冻干粉和酶液之间具有一一对应的关系,即有且仅有将二者进行结合使用时能够达到较优效果,具体表现为本发明的冻干粉制剂具有高营养高活性能够集中修护,采用生物透皮吸收技术,能够使皮肤吸收效率达到20倍以上,但当二者之间任一项替换为其他酶液或冻干粉时,整体效果将降低。另外,酶液中的羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物也能促进混合制剂对于细胞活性的提高同时也保证施用时使皮肤保持一定的含水量。
具体实施方式
值得说明的是,本发明中使用的褐藻提取物、三角褐指藻提取物、芍药提取物、小球藻提取物、红藻提取物和芦荟提取物均购自广州市茗荟精细化工有限公司,其余原料均为普通市售产品,因此对其来源不做具体限定。
实施例1
一种纤连蛋白冻干粉制剂,包括纤连蛋白冻干粉和酶液;
其中,纤连蛋白冻干粉按重量份数计,包括:28份纤连蛋白、4份甘露糖醇、1.5份褐藻提取物、2份三角褐指藻提取物、0.6份pH调节剂、0.2份缓冲剂和63.7份水。
酶液按重量份数计,包括:0.5份羧甲基脱乙酰壳多糖、3份芍药提取物、6份小球藻提取物、4份保湿剂、0.15份螯合剂和86.35份水。
上述纤连蛋白冻干粉的制备方法包括以下步骤:
(1)消毒并清洗干净搅拌锅然后将准备好的原料依次加入纤连蛋白、缓冲剂和水,搅拌均匀分散完全后,加入褐藻提取物和三角褐指藻提取物,搅拌均匀确保溶解完全;
(2)加热并加入甘露糖醇和pH调节剂,搅拌均匀;
(3)取料检验,合格后过滤出料,出料后灌装进专用的医用西林瓶密封,放入冻干机抽干水份。
上述酶液的制备方法包括以下步骤:
S1:清洗干净乳化锅加入羧甲基脱乙酰壳多糖和水搅拌至均匀分散完全、均匀,搅拌并升温至70℃,确保溶解完全;
S2:加入芍药提取物和螯合剂,保温20min后搅拌;
S3:降温至40℃后加入保湿剂,匀速搅拌20min;
S4:加入小球藻提取物,搅拌均匀,继续降温至40℃以下,搅拌,合格后过滤出料。使用时将纤连蛋白冻干粉和酶液按照1:1的重量比调和,在脸部肌肤轻拍至完全吸收即可。
试验1:将人成纤维细胞接种于96孔板,待细胞单层贴壁后,弃去培养液,加入200μLPBS缓冲溶液后,空白对照组使用铝箔纸遮住,其余各组使用UVA照射(30J/cm2),每天2h,共照射4天时间。随机分为空白对照组和试验组,其中,试验组分别给予实施例1-3以及对比例1-3中的纤连蛋白冻干粉和酶液按照1:1的重量比调和的制剂,空白对照组注入等量生理盐水。2天后,每孔加入20μL浓度为5mg/mL的MTT,培养4h后弃去上清液,每孔再加入150μL二甲基亚砜,室温条件下震荡10min,结晶溶解后检测各孔的光密度(492nm),计算细胞活力(细胞活力=试验组光密度/空白组对照组光密度×100%)。
同时通过动物致敏性试验发现,该冻干粉制剂并不致敏;
试验2:再将上述冻干粉与酶液按照1:1的重量比混合后,找35名肤质接近的志愿者,随机分为7组,每组5人,清洁脸部皮肤后,其中一组作为空白对照组,不涂抹任何制剂,分别使用实施例1-3以及对比例1-3中的冻干粉和酶液调和制剂,在正常空调房间26℃-27℃温度条件下静待2小时,在涂抹后0h、1h以及2h分别测试皮肤含水量,计算平均值,得到以表1-6结果:
表1
实施例2
一种纤连蛋白冻干粉制剂,包括纤连蛋白冻干粉和酶液;
其中,纤连蛋白冻干粉重量份数计,包括:36份纤连蛋白、7份甘露糖醇、0.5份褐藻提取物、0.5份三角褐指藻提取物、0.3份pH调节剂、0.1份缓冲剂和55.6份水。
酶液按重量份数计,包括:1.5份羧甲基脱乙酰壳多糖、7份芍药提取物、8.5份小球藻提取物、2份保湿剂、0.1份螯合剂和80.9份水。
上述纤连蛋白冻干粉的制备方法包括以下步骤:
(1)消毒并清洗干净搅拌锅然后将准备好的原料依次加入纤连蛋白、缓冲剂和水,搅拌均匀分散完全后,加入褐藻提取物和三角褐指藻提取物,搅拌均匀确保溶解完全;
(2)加热并加入甘露糖醇和pH调节剂,搅拌均匀;
(3)取料检验,合格后过滤出料,出料后灌装进专用的医用西林瓶密封,放入冻干机抽干水份。
上述酶液的制备方法包括以下步骤:
S1:清洗干净乳化锅加入羧甲基脱乙酰壳多糖和水搅拌至均匀分散完全、均匀,搅拌并升温至85℃,确保溶解完全;
S2:加入芍药提取物和螯合剂,保温20min后搅拌;
S3:降温至45℃后加入保湿剂,匀速搅拌15min;
S4:加入小球藻提取物,搅拌均匀,继续降温至40℃以下,搅拌,合格后过滤出料。使用时将纤连蛋白冻干粉和酶液按照1:1的重量比调和,在脸部肌肤轻拍至完全吸收即可。
试验1-2方法详见实施例1,实施例2的结果如表2所示:
表2
实施例3
一种纤连蛋白冻干粉制剂,包括纤连蛋白冻干粉和酶液;
其中,纤连蛋白冻干粉按重量份数计,包括:34份纤连蛋白、6份甘露糖醇、1份褐藻提取物、1份三角褐指藻提取物、0.44份pH调节剂、0.13份缓冲剂和57.43份水。
酶液按重量份数计,包括:1份羧甲基脱乙酰壳多糖、5份芍药提取物、7份小球藻提取物、3份保湿剂、0.1份螯合剂和83.9份水。
上述纤连蛋白冻干粉的制备方法包括以下步骤:
(1)消毒并清洗干净搅拌锅然后将准备好的原料依次加入纤连蛋白、缓冲剂和水,搅拌均匀分散完全后,加入褐藻提取物和三角褐指藻提取物,搅拌均匀确保溶解完全;
(2)加热并加入甘露糖醇和pH调节剂,搅拌均匀;
(3)取料检验,合格后过滤出料,出料后灌装进专用的医用西林瓶密封,放入冻干机抽干水份。
上述酶液的制备方法包括以下步骤:
S1:清洗干净乳化锅加入羧甲基脱乙酰壳多糖和水搅拌至均匀分散完全、均匀,搅拌并升温至80℃,确保溶解完全;
S2:加入芍药提取物和螯合剂,保温20min后搅拌;
S3:降温至42℃后加入保湿剂,匀速搅拌18min;
S4:加入小球藻提取物,搅拌均匀,继续降温至40℃以下,搅拌,合格后过滤出料。使用时将纤连蛋白冻干粉和酶液按照1:1的重量比调和,在脸部肌肤轻拍至完全吸收即可。
试验1-2方法详见实施例1,实施例3的结果如表3所示:
表3
对比例1
与实施例3的区别仅在于,将实施例3中的酶液替换为专利CN201910800660.0中实施例3的冻干粉。
试验1-2方法详见实施例1,对比例1的结果如表4所示:
表4
由表4内容与表3内容进行比较分析可知,本发明中的冻干粉与酶液实则为一一对应关系,当冻干粉进行替换为其他冻干粉时,整体效果不佳。
对比例2
与实施例3的区别仅在于,将三角褐指藻提取物替换为等量的红藻提取物,将芍药提取物替换为等量的芦荟提取物。
试验1-2方法详见实施例1,对比例2的结果如表5所示:
表5
由表5与表3比较可知,可知,本发明中的三角褐指藻与芍药提取物在提升细胞活力和提高含水量方面的效果明显优于其他作用相近似的提取物。
对比例3
与实施例3的区别仅在于,酶液中羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物的重量比为0.4:8:4.6(三者的总重量与实施例3一致)。
试验1-2方法详见实施例1,对比例3的结果如表6所示:
表6
由表6与表3比较可知,酶液中的羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物的在特定范围比例内时能够促进细胞再生,在将酶液与冻干粉混合后将产生极佳的效果同时使得混合后的制剂在施用后能保持皮肤中较高的含水量。
卫生化学指标及微生物指标
本发明中各实施例的卫生化学指标及微生物指标的检验方法详见表7。
表7检验方法
经上表中所载方法检测,本发明中实施例1-3中产品的卫生化学指标和微生物指标均满足表8-9所示。
表8卫生化学指标
检测项目 | 指标 |
汞 | ≤1mg/kg |
铅 | ≤10mg/kg |
砷 | ≤2mg/kg |
镉 | ≤5mg/kg |
表9微生物指标
检测项目 | 指标 |
菌落总数 | ≤1000CFU/g |
霉菌和酵母菌总数 | ≤100CFU/g |
耐热大肠菌群 | 不得检出/g |
铜绿假单胞菌 | 不得检出/g |
由表8-9可知,本发明中制备得到的纤连蛋白冻干粉制剂的卫生化学指标和微生物指标满足标准要求。
最后应当说明的是,以上内容仅用以说明本发明的技术方案,而非对本发明保护范围的限制,本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换,均不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:包括纤连蛋白冻干粉和酶液;
所述纤连蛋白冻干粉包括:纤连蛋白、甘露糖醇、褐藻提取物、三角褐指藻提取物、pH调节剂、缓冲剂和水。
2.根据权利要求1所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述酶液包括:羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物、保湿剂、螯合剂和水。
3.根据权利要求1所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述pH调节剂为磷酸氢二钠,所述缓冲剂为磷酸二氢钠。
4.根据权利要求2所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述保湿剂为乙酰基四肽-2,所述螯合剂为辛酰羟肟酸。
5.根据权利要求1所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述纤连蛋白冻干粉按重量份数计包括:28-36份纤连蛋白、4-7份甘露糖醇、0.5-1.5份褐藻提取物、0.5-2份三角褐指藻提取物、0.3-0.6份pH调节剂、0.1-0.2份缓冲剂和55.6-63.7份水。
6.根据权利要求1所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述酶液按重量份数计包括:0.5-1.5份羧甲基脱乙酰壳多糖、3-7份芍药提取物、6-8.5份小球藻提取物、2-4份保湿剂、0.1-0.15份螯合剂和80.9-86.35份水。
7.根据权利要求1所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述纤连蛋白冻干粉和酶液的重量比为1-3:1-2。
8.根据权利要求2所述的纤连蛋白冻干粉制剂,其特征在于:所述羧甲基脱乙酰壳多糖、芍药提取物、小球藻提取物的重量比为0.5-1.5:3-7:6-8.5。
9.如权利要求1-8任一项所述的纤连蛋白冻干粉制剂的制备方法,其特征在于:所述纤连蛋白冻干粉的制备方法包括以下步骤:
(1)将水、纤连蛋白和缓冲剂依次加入并搅拌均匀分散完全后,加入褐藻提取物和三角褐指藻提取物,确保溶解完全;
(2)加热并加入甘露糖醇和pH调节剂,搅拌均匀;
(3)过滤出料,密封后抽干水分,即得。
10.如权利要求1-8任一项所述的纤连蛋白冻干粉制剂的制备方法,其特征在于:所述酶液的制备方法包括以下步骤:
S1:将羧甲基脱乙酰壳多糖和水搅拌至均匀分散完全、均匀,搅拌并升温,确保溶解完全;
S2:加入芍药提取物和螯合剂,保温搅拌;
S3:降温后加入保湿剂,匀速搅拌;
S4:加入小球藻提取物,搅拌均匀,继续降温,搅拌,即得。
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CN202110911697.8A CN113576971B (zh) | 2021-08-10 | 2021-08-10 | 一种纤连蛋白冻干粉制剂及其制备方法 |
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