CN113533611A - 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 - Google Patents
一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113533611A CN113533611A CN202110789851.9A CN202110789851A CN113533611A CN 113533611 A CN113533611 A CN 113533611A CN 202110789851 A CN202110789851 A CN 202110789851A CN 113533611 A CN113533611 A CN 113533611A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- layer chromatography
- thin
- powder
- filtering
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
- G01N30/94—Development
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
- G01N30/95—Detectors specially adapted therefor; Signal analysis
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属于民族药药物分析领域，提供了一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法，其特征是增加了以胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6‑姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱为对照品，鉴别对象分别指向“藿香万应散”组方主要药材白胡椒、苍术、大枣、干姜、吴茱萸的薄层色谱定性鉴别指标。与“藿香万应散”现行药品标准相比，本发明克服了“藿香万应散”现行标准对组方药材鉴别质量控制点偏少的技术缺点，提供的鉴别项目指标更全面、专属性强，操作简便快速、判断直观明确、结论客观可靠，为完善和提高民族药“藿香万应散”药品质量标准，更好地控制药品质量提供了技术方法。
Description
技术领域
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法。
背景技术
民族药“藿香万应散”处方组成药材有皱叶香薷、厚朴、陈皮、苍术、广藿香、大枣、砂仁、吴茱萸、丁香、干姜、白胡椒共11味，功能主治为解表散寒，理气化湿，和胃止痛。用于外感风寒，内伤湿滞所致的头痛鼻塞，恶心呕吐，胃脘胀痛等症。
“藿香万应散”药品标准WS-10166（ZD-0166）-2002-2012Z定性鉴别仅有以苍术药材、橙皮苷、厚朴酚和丁香酚为对照品的4项薄层色谱鉴别，鉴别目标分别指向组方药材苍术、陈皮、厚朴和丁香，其余7味药材没有对应鉴别方法。
中药质量控制是保障药品安全的重要措施，用现代药物分析技术建立客观、多维、可靠的质量控制点是提升中药质量管理水平的重要途径。本品处方组成有11味药材，现行药品标准只有指向4味药材的定性鉴别项目，与中药质量控制的实际需求有较大差距。
发明内容
本发明的目的在于提供一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法。
本发明的目的是这样实现的：
一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法，包括了对“藿香万应散”处方主要药味所含有的代表性化学成分胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别，按以下步骤进行：
(1) 胡椒碱的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散5g，加入50ml溶剂超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取胡椒碱对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液3μL，对照品溶液1μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(2)苍术素的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散300.0g，置烧瓶中，加水1800g与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管；并在挥发油测定器中加入3mL环己烷，置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将所得的水和环己烷混合溶液置分液漏斗中，静置1小时，保留环己烷层溶液，加入适量无水硫酸钠，干燥过夜，过滤得挥发油，作为供试品溶液；
取苍术素对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60℃-90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别置日光和紫外光灯（254nm）下检视，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(3) 齐墩果酸薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取齐墩果酸对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各4μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)6-姜辣素薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取6-姜辣素对照品1.0 mg，加甲醇1 mL溶解，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5) 吴茱萸碱和吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品各1.0mg，分别溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取对照品溶液、供试品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
溶剂为水、75%乙醇和甲醇。
溶剂为甲醇。
薄层色谱板为硅胶G板。
展开剂甲苯-乙酸乙酯-丙酮的体积比为7:2:1。
展开剂甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸的体积比为14:4:0.5。
展开剂石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯的体积比为2:1:1。
展开剂以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺的体积比为7:3:0.1。
本发明优点：
与现有技术比较，本发明的优点在于：
（1）本发明所提供的“藿香万应散”薄层色谱鉴别方法，与现行“藿香万应散”药品标准比较，建立了组方主要药材的代表性化学成分胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的薄层鉴别方法，进一步完善和提高了民族药“藿香万应散”的质量检测方法。
（2）样品前处理采用超声处理样品以提取各组方药材的代表性化学成分，被检测成分溶出比较充分，简化了实验操作步骤，缩短了供试溶液制备时间，排除了其它物质的干扰。
（3）筛选的展开剂系统对相应的被检测成分分离效果好，薄层色谱斑点清晰，结果判断明确，能客观、高效的鉴别民族药“藿香万应散”主要组方药材中的代表性成分。
（4）增加了胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱等薄层色谱鉴别检测指标，能更准确的检测“藿香万应散”中上述化学成分的存在情况，并能专属地对应到相应的组方药材，有利于更好的控制药品质量。
附图说明
图1：胡椒碱的薄层鉴别
图为三个批号散剂的甲醇溶液，胡椒碱对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的日光图；展开剂：甲苯-乙酸乙酯-丙酮（7：2：1）；显色剂：10%硫酸-乙醇溶液。
图2：胡椒碱的薄层鉴别
图为三个批号散剂的甲醇溶液，胡椒碱对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的365nm下的荧光图；展开剂：甲苯-乙酸乙酯-丙酮（7：2：1）；显色剂：10%硫酸-乙醇溶液。
图3：苍术素薄层鉴别
图为三个批号散剂的挥发油溶液、苍术素对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的日光图；展开剂：石油醚（60℃-90℃）；显色剂：10%硫酸-乙醇溶液。
图4：苍术素薄层鉴别
图为三个批号散剂的挥发油溶液、苍术素对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的254nm下的荧光图；展开剂：石油醚（60℃-90℃）；显色剂：10%硫酸-乙醇溶液。
图5：齐墩果酸薄层鉴别
图为三个批号散剂的甲醇溶液、齐墩果酸对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的日光图；展开剂：甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（14：4：0.5）；显色剂：10%硫酸-乙醇溶液。
图6：6-姜辣素薄层鉴别
图为三个批号散剂的乙酸乙酯溶液、6-姜辣素对照品溶液和阴性对照品溶液的对比的日光图；展开剂：石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯（2：1：1）；显色剂：5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液。
图7：吴茱萸碱薄层鉴别
为三个批号散剂的甲醇溶液、吴茱萸碱对照品溶液和阴性对照品溶液对比254nm下的荧光图；展开剂：石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺（7:3:0.1）；显色剂：5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液。
图8：吴茱萸次碱薄层鉴别
为三个批号散剂的甲醇溶液、吴茱萸次碱对照品溶液和阴性对照品溶液对比254nm下的荧光图；展开剂：石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺（7:3:0.1）；显色剂：5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点能够更加清晰明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。此处描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明保护内容。
一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法，包括了对“藿香万应散”处方主要药味所含有的代表性化学成分胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别，按以下步骤进行：
(1) 胡椒碱的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散5g，加入50ml溶剂超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取胡椒碱对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液3μL，对照品溶液1μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(2)苍术素的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散300.0g，置烧瓶中，加水1800g与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管；并在挥发油测定器中加入3mL环己烷，置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将所得的水和环己烷混合溶液置分液漏斗中，静置1小时，保留环己烷层溶液，加入适量无水硫酸钠，干燥过夜，过滤得挥发油，作为供试品溶液；
取苍术素对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60℃-90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别置日光和紫外光灯（254nm）下检视，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(3) 齐墩果酸薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取齐墩果酸对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各4μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)6-姜辣素薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取6-姜辣素对照品1.0 mg，加甲醇1 mL溶解，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5) 吴茱萸碱和吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品各1.0mg，分别溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取对照品溶液、供试品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
溶剂为水、75%乙醇和甲醇。
溶剂为甲醇。
薄层色谱板为硅胶G板。
展开剂甲苯-乙酸乙酯-丙酮的体积比为7:2:1。
展开剂甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸的体积比为14:4:0.5。
展开剂石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯的体积比为2:1:1。
展开剂以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺的体积比为7:3:0.1。
本发明克服了民族药“藿香万应散”现行药品标准对组方药材鉴别的质量控制点偏少的技术缺点，提供一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法，该方法旨在增加更全面的定性分析指标来鉴别更多的组方药材，完善和提升“藿香万应散”药品质量标准。
其技术路线是以“藿香万应散”处方药材含有的代表性成分为对照品研究组方药材的专属性鉴别方法，增加组方药材的可鉴别数量。提供的方法增加了以胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱为对照品的薄层色谱定性鉴别项目，分别指向“藿香万应散”组方主要药材白胡椒、苍术、大枣、干姜和吴茱萸在制剂中的存在检测。
提供的薄层色谱鉴别方法在样品前处理方面能有效排除其它物质干扰，薄层色谱分离度佳、操作简便、重现性好。鉴别方法对照更全面、专属性强，判断直观明确、结论客观可靠。
实施例1
对照品：均由成都埃法生物科技有限公司（成都，中国）提供，纯度大于98％。
薄层色谱板：青岛海洋化工的硅胶G 板。
TLC鉴别：薄层板中前3个点为三个批次的散剂供试品溶液，批号分别为：20180401、20190301、20200301，第4个点为对照品，第5个点为散剂阴性溶液
1白胡椒
1.1 供试品溶液的制备
按处方和工艺制成散剂，取散剂5g，加甲醇 50ml，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
1.2 对照药材溶液的制备
取胡椒碱对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。
1.3 阴性溶液的制备
按处方和工艺，不加白胡椒制作散剂，同1法制备，作为阴性溶液。
1.4 薄层分析
照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版通则 0502）试验，吸取供试品溶液和阴性对照品溶液各3μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮（7：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点。结果分别见图1和图2。
2 苍术
2.1 供试品溶液的制备
取藿香万应散300.0g，置烧瓶中，加水1800g与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。并在挥发油测定器中加入3mL环己烷，置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将所得的水和环己烷混合溶液置分液漏斗中，静置1小时，保留环己烷层溶液，加入适量无水硫酸钠，干燥过夜，过滤得挥发油，作为供试品溶液。
2.2 对照药材溶液的制备
取苍术素对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。
2.3 阴性溶液的制备
按处方和工艺，不加苍术制作散剂，同1法提取挥发油，作为阴性溶液。
2.4 薄层分析
照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版通则 0502）试验，吸取以上三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃-90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别置日光和紫外光灯（254nm）下检视，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点。结果分别见图3和图4。
3 大枣
3.1 供试品溶液的制备
按处方和工艺制成散剂，取散剂5g，加甲醇 50ml，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
3.2 对照药材溶液的制备
取齐墩果酸对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。
3.3 阴性溶液的制备
按处方和工艺，不加大枣制作散剂，同1法制备，作为阴性溶液。
3.4 薄层分析
照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版通则 0502）试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（14：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图5。
4 干姜
4.1 供试品溶液的制备
按处方和工艺制成散剂，取散剂5g，加乙酸乙酯 50ml，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
4.2 对照药材溶液的制备
取6-姜辣素对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。
4.3 阴性溶液的制备
按处方和工艺，不加干姜制作散剂，同1法制备，作为阴性溶液。
4.4 薄层分析
照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版通则 0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯（2：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图6。
5 吴茱萸
5.1 供试品溶液的制备
按处方和工艺制成散剂，取散剂5g，加甲醇 50ml，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
5.2 对照药材溶液的制备
取吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品各1.0mg，分别溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。
5.3 阴性溶液的制备
按处方和工艺，不加吴茱萸制作散剂，同1法制备，作为阴性溶液。
5.4 薄层分析
照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版通则 0502）试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯-三乙胺（7:3:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果分别见图7和图8。
Claims (8)
1.一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法，其特征在于包括了对“藿香万应散”处方主要药味所含有的代表性化学成分胡椒碱、苍术素、齐墩果酸、6-姜辣素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别，按以下步骤进行：
(1) 胡椒碱的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散5g，加入50ml溶剂超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取胡椒碱对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液3μL，对照品溶液1μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(2)苍术素的薄层色谱鉴别：
取藿香万应散300.0g，置烧瓶中，加水1800g与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管；并在挥发油测定器中加入3mL环己烷，置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将所得的水和环己烷混合溶液置分液漏斗中，静置1小时，保留环己烷层溶液，加入适量无水硫酸钠，干燥过夜，过滤得挥发油，作为供试品溶液；
取苍术素对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
分别吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60℃-90℃）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别置日光和紫外光灯（254nm）下检视，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光点；
(3) 齐墩果酸薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取齐墩果酸对照品1.0mg，溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各4μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸-乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)6-姜辣素薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取6-姜辣素对照品1.0 mg，加甲醇1 mL溶解，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5) 吴茱萸碱和吴茱萸次碱的薄层色谱鉴别
取藿香万应散5g，加溶剂50mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；
取吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品各1.0mg，分别溶解于1mL甲醇中，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液；
吸取对照品溶液、供试品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛-硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：所述的溶剂为水、75%乙醇和甲醇。
3.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：所述的溶剂为甲醇。
4.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：所述薄层色谱板为硅胶G板。
5.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的展开剂甲苯-乙酸乙酯-丙酮的体积比为7:2:1。
6.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：步骤(3)中，所述的展开剂甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸的体积比为14:4:0.5。
7.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：步骤(4)中，所述的展开剂石油醚（60-90℃）-三氯甲烷-乙酸乙酯的体积比为2:1:1。
8.根据权利要求1所述的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：步骤(5)中，所述的展开剂以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-三乙胺的体积比为7:3:0.1。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110789851.9A CN113533611A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
| CN202211569501.2A CN115825319A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110789851.9A CN113533611A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211569501.2A Division CN115825319A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113533611A true CN113533611A (zh) | 2021-10-22 |
Family
ID=78127657
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110789851.9A Pending CN113533611A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
| CN202211569501.2A Withdrawn CN115825319A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211569501.2A Withdrawn CN115825319A (zh) | 2021-07-13 | 2021-07-13 | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN113533611A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117269403A (zh) * | 2023-09-26 | 2023-12-22 | 湖南易能生物医药有限公司 | 一种包含花椒的中药组合物中的药材花椒的薄层鉴别方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111487361A (zh) * | 2020-04-20 | 2020-08-04 | 浙江金大康动物保健品有限公司 | 一种苍术药材的梯度全信息薄层鉴别方法 |
-
2021
- 2021-07-13 CN CN202110789851.9A patent/CN113533611A/zh active Pending
- 2021-07-13 CN CN202211569501.2A patent/CN115825319A/zh not_active Withdrawn
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111487361A (zh) * | 2020-04-20 | 2020-08-04 | 浙江金大康动物保健品有限公司 | 一种苍术药材的梯度全信息薄层鉴别方法 |
Non-Patent Citations (11)
| Title |
|---|
| 国家药典委员会 编: "《中华人民共和国药典2015年版一部》", 30 June 2015, 中国医药科技出版社 * |
| 张波等: "三种内生真菌对茅苍术组培苗的生长及主要挥发油成分的影响", 《生态学杂志》 * |
| 彭小冰 等: "HPLC法测定不同产地吴茱萸药材中的活性成分", 《贵阳中医学院学报》 * |
| 梁汉明 等: "苍术超临界CO2萃取物的质量标准研究", 《广东药学院学报》 * |
| 樊敏等: "β-环糊精对苍术挥发油的包合", 《科技展望》 * |
| 王启迪等: "北苍术中苍术素的含量测定", 《黑龙江医药》 * |
| 王宇等: "茅苍术挥发油对三种内生真菌及七种外源真菌的抑菌活性", 《应用生态学报》 * |
| 甄攀 等: "吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取条件研究", 《中国药学杂志》 * |
| 罗君 等: "贵州余庆栽培吴茱萸的质量对比研究", 《时珍国医国药》 * |
| 谢妍龙 等: "响应面分析法优化吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的超声提取工艺", 《生物化工》 * |
| 陈祥胜等: "苍术麸炒前后的专属性HPLC特征指纹图谱", 《中国实验方剂学杂志》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117269403A (zh) * | 2023-09-26 | 2023-12-22 | 湖南易能生物医药有限公司 | 一种包含花椒的中药组合物中的药材花椒的薄层鉴别方法 |
| CN117269403B (zh) * | 2023-09-26 | 2024-04-26 | 湖南易能生物医药有限公司 | 一种包含花椒的中药组合物中的药材花椒的薄层鉴别方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115825319A (zh) | 2023-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106501442B (zh) | 一种芩黄清肺散的质量检测方法 | |
| CN105181847B (zh) | 一种半枝莲药材及其水提取物的多信息梯度薄层鉴别方法 | |
| CN113533611A (zh) | 一种藿香万应散的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN101703611A (zh) | 当归益血口服液的质量检测方法 | |
| CN109239225B (zh) | 一种浓缩活心丸的质量检测方法 | |
| CN101632741A (zh) | 健儿清解液的质量控制方法 | |
| CN113759065B (zh) | 一种同时鉴定黄连和黄柏成分的方法及其应用 | |
| CN1709900A (zh) | 苦瓜皂甙和苦瓜多糖的综合提取方法 | |
| CN106198810A (zh) | 一种具有治疗肿瘤放化疗骨髓抑制的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN109142588A (zh) | 一种莲芝消炎胶囊hplc特征图谱及其构建方法和应用 | |
| CN103822888B (zh) | 赶黄草的质量检测方法 | |
| CN103145775B (zh) | 高纯度棒柄花苷a的制备及其质量控制方法 | |
| CN110927322A (zh) | 一种藿香正气合剂的检测方法 | |
| CN101703610A (zh) | 清脑降压片质量检测方法 | |
| CN112730724B (zh) | 一种白前配方颗粒的薄层鉴别方法 | |
| CN109085258A (zh) | 一种琴叶榕的质量检测方法 | |
| CN115728404B (zh) | 蓝芩口服液对照提取物及其制备方法和应用 | |
| CN109655572A (zh) | 一种快速鉴别玉屏风颗粒成分的薄层色谱分析方法 | |
| CN104897811A (zh) | 一种麝香心痛宁制剂的检测方法 | |
| CN101474274A (zh) | 一种参苏中药制剂的质量控制方法 | |
| CN107843683B (zh) | 凌霄花药材的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN112697950A (zh) | 光石韦的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN102879502B (zh) | 细毡毛忍冬正品药材的检测方法 | |
| CN109709256A (zh) | 一种复方金银花颗粒中黄芩苷和绿原酸薄层鉴别检测方法 | |
| CN1235602C (zh) | 一种抗病毒口服液的质量检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20211022 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |