CN113527428A - 海参肽及其应用和产品 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种海参肽及其应用和产品,涉及生物技术领域。本发明提供了一种海参肽,来源于刺参,其氨基酸序列为WDGVGSGR,经发明人研究发现,该海参肽活性高、生物相容性好、安全无毒副作用,对于酪氨酸酶活性和黑色素合成具有抑制作用,能够用于制备美白产品中。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是涉及一种海参肽及其应用和产品。
背景技术
随着人民生活水平的提高,越来越多的女性朋友关注皮肤保养。中国有句俗语“一白遮百丑”。白皙的皮肤被当成美丽的标配。黑色素的在体内的存在是人体肤色差异的主要因素。而要使肤色变白主要是阻止黑色素的产生。黑色素是酚类物质在酶的作用下形成的高分子色素的总称,是碱性难溶性黑色素和碱性易溶性的褐黑色素的复合体。其生成机理为酪氨酸酶的催化下,酪氨酸作为底物氧化为多巴,进一步氧化为多巴醌,多巴醌一部分转化为多巴色素、二羟基吲哚等中间体逐步生成黑色素;另一部分可以在谷胱甘肽或者半胱氨酸作用下形成褐色素。阻断或者减少黑色素生成可以使肤色明显变浅,故要达到美白功效的方法通过抑制酪氨酸酶活性、螯合铜离子、清除自由基、加速表皮代谢、抑制黑色素转移。
维生素C是人们比较熟悉的美白物质,维生素C能抑制酪氨酸酶的活性,阻断黑色素生成,将已经形成的黑色素还原成无色的黑色素前质,从而改善皮肤暗沉达到美白的效果,但维生素C是水溶性维生素,无法在体内蓄积,多余的会通过肾脏以草酸盐形式代谢出去,摄入过多或会引发肾结石或尿路结石。所以说开发新的美白化妆品成为重中之重。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种海参肽,该海参肽具有酪氨酸酶抑制作用和黑色素合成抑制作用,能够用于美白产品中,以解决上述问题中的至少一种。
本发明的第二目的在于提供上述海参肽在制备抑制酪氨酸酶活性产品、抑制黑色素合成产品和化妆品中的应用。
本发明的第三目的在于提供一种化妆品,包括上述海参肽。
本发明的第四目的在于提供一种海参肽精华液。
本发明的第五目的在于提供一种海参肽爽肤水。
本发明的第六目的在于提供一种海参肽润肤乳。
本发明的第七目的在于提供上述海参肽润肤乳的制备方法。
第一方面,本发明提供了一种海参肽,所述海参肽的氨基酸序列为WDGVGSGR。
第二方面,本发明提供了一种海参肽在制备抑制酪氨酸酶活性产品中的应用。
本发明提供了一种海参肽在制备抑制黑色素合成产品中的应用。
本发明提供了一种海参肽在制备化妆品中的应用。
作为进一步技术方案,所述化妆品包括精华液、爽肤水或润肤乳。
第三方面,本发明提供了一种化妆品,包括海参肽;
所述化妆品包括精华液、爽肤水或润肤乳。
第四方面,本发明提供了一种海参肽精华液,包括按质量份数计的如下组分:海参肽0.9~1.1份、海藻糖3~4份、防腐剂0.36~0.44份和水90~110份。
第五方面,本发明提供了一种海参肽爽肤水,包括按质量份数计的如下组分:海参肽0.2~0.4份、维生素原B5 1~2份、天然保湿因子1.5~2.5份、防腐剂0.4~0.6份和水90~110份。
第六方面,本发明提供了一种海参肽润肤乳,包括油相、水相和添加成分;
按质量份数计,所述油相包括橄榄乳化蜡6.3~7.7份、霍霍巴油5.4~6.6份、葡萄籽油3.6~4.4份和油溶维生素E 2.7~3.3份,所述水相为蒸馏水90~110份,所述添加成分包括海参肽3.6~4.4份、氨基酸保湿剂2~3份、天然保湿因子2.7~3.3份和防腐剂0.4~0.6份。
第七方面,本发明提供了一种海参肽润肤乳的制备方法,包括如下步骤:将油相混合加热至75~85℃融化,然后倒入温度为75~85℃的水相混合,再将温度降低至35~45℃后加入添加成分,混合后制备得到海参肽润肤乳。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明提供了一种海参肽,来源于刺参,其氨基酸序列为WDGVGSGR,经发明人研究发现,该海参肽活性高、生物相容性好、安全无毒副作用,对于酪氨酸酶活性和黑色素合成具有抑制作用,能够用于制备美白产品中。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例2提供的不同浓度海参肽溶液对B16细胞的影响;
图2为本发明实施例2提供的海参肽溶液对黑色素合成的抑制率。
具体实施方式
下面将结合实施方式和实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施方式和实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明提供了一种海参肽,所述海参肽的氨基酸序列为WDGVGSGR(SEQ ID NO.1)。
经发明人研究发现,浓度为0.2mg/mL的海参肽对于酪氨酸酶活性的抑制率高达40.98%,对黑素色合成的抑制率高达41.56%,该海参肽活性高、生物相容性好、安全无毒副作用,对于酪氨酸酶活性和黑色素合成具有抑制作用,能够用于制备抑制酪氨酸酶活性产品、抑制黑色素合成产品和化妆品中。
在实际生产中,海参肽可制备成颗粒状、粉末状或溶于水的液体。
本发明提供了一种化妆品,包括海参肽;
所述化妆品包括精华液、爽肤水或润肤乳。
由于该化妆品包含本发明的海参肽,因此具有该海参肽的全部有益效果。
本发明提供了一种海参肽精华液,包括按质量份数计的如下组分:海参肽0.9~1.1份、海藻糖3~4份、防腐剂0.36~0.44份和水90~110份。
本发明的海参肽精华液中,海参肽的质量份数例如可以为,但不限于0.9份、0.95份、1份、1.05份或1.1份;海藻糖的质量份数例如可以为,但不限于3份、3.2份、3.4份、3.6份、3.8份或4份;防腐剂的质量份数例如可以为,但不限于0.36份、0.38份、0.4份、0.42份或0.44份;水的质量份数例如可以为,但不限于90份、94份、98份、102份、106份或110份。
本发明提供了一种海参肽爽肤水,包括按质量份数计的如下组分:海参肽0.2~0.4份、维生素原B5 1~2份、天然保湿因子1.5~2.5份、防腐剂0.4~0.6份和水90~110份。
本发明的海参肽爽肤水中,海参肽的质量份数例如可以为,但不限于0.2份、0.24份、0.28份、0.32份、0.36份0.4份;维生素原B5的质量份数例如可以为,但不限于1份、1.2份、1.4份、1.6份、1.8份或2份;天然保湿因子的质量份数例如可以为,但不限于1.5份、1.7份、1.9份、2.1份、2.3份或2.5份;防腐剂的质量份数例如可以为,但不限于0.4份、0.44份、0.48份、0.52份、0.56份或0.6份;水的质量份数例如可以为,但不限于90份、94份、98份、102份、106份或110份。
本发明提供了一种海参肽润肤乳,包括油相、水相和添加成分;
按质量份数计,所述油相包括橄榄乳化蜡6.3~7.7份、霍霍巴油5.4~6.6份、葡萄籽油3.6~4.4份和油溶维生素E 2.7~3.3份,所述水相为蒸馏水90~110份,所述添加成分包括海参肽3.6~4.4份、氨基酸保湿剂2~3份、天然保湿因子2.7~3.3份和防腐剂0.4~0.6份。
本发明的海参肽润肤乳中,橄榄乳化蜡的质量份数例如可以为,但不限于6.3份、6.5份、6.7份、6.9份、7.1份、7.3份、7.5份或7.7份;霍霍巴油的质量份数例如可以为,但不限于5.4份、5.6份、5.8份、6份、6.2份、6.4份或6.6份;葡萄籽油的质量份数例如可以为,但不限于3.6份、3.8份、4份、4.2份或4.4份;油溶维生素E的质量份数例如可以为,但不限于2.7份、2.9份、3.1份或3.3份;蒸馏水的质量份数例如可以为,但不限于90份、94份、98份、102份、106份或110份;海参肽的质量份数例如可以为,但不限于0.36份、0.38份、0.4份、0.42份或0.44份;氨基酸保湿剂的质量份数例如可以为,但不限于2份、2.2份、2.4份、2.6份、2.8份或3份;天然保湿因子的质量份数例如可以为,但不限于2.7份、2.9份、3.1份或3.3份;防腐剂的质量份数例如可以为,但不限于0.4份、0.44份、0.48份、0.52份、0.56份或0.6份。
其中,氨基酸保湿剂,化学名为三甲基甘氨酸,是一种天然结构物质两性离子型保湿成分,在个人护理产品的应用中,能迅速改善肌肤和头发的水份保持力、激发细胞活力,具有保持肌肤滋润,光滑,防止干燥和发暗的效果。
天然保湿因子:在皮肤角质层中存在的一种具有保水作用的吸附性水溶性物质被称为天然保湿因子NMF。其主要成分有各种氨基酸40%、吡咯烷酮羧酸12%、乳酸盐12%、尿素7%等。NMF的这些成分与蛋白质结合,存在于角质细胞中,阻止了天然保温因子的流失,并对水分挥发起着一定的控制作用,从而维持了角质层一定的含水量。
本发明提供的海参肽精华液、海参肽爽肤水和海参肽润肤乳中,防腐剂采用本领域技术人员所熟知的即可,优选为杰马BP。
本发明提供了一种海参肽润肤乳的制备方法,包括如下步骤:将油相混合加热至75~85℃融化,然后倒入温度为75~85℃的水相混合,再将温度降低至35~45℃后加入添加成分,混合后制备得到海参肽润肤乳。
本发明提供的海参肽润肤乳的制备方法简单方便,产品稳定。
下面通过具体的实施例和对比例进一步说明本发明,但是,应当理解为,这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用,而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
实施例1:酪氨酸酶抑制活性检测
(1)不同浓度的海参肽溶液对酶的活性抑制作用
L-Dopa(L-多巴)溶液的配制:精密称取25mg L-Dopa,用PBS(pH6.83)配制成质量分数为0.05%的L-Dopa溶液:即称取25mg L-Dopa加入水得到50mL的溶液。因为吸光度值太小无法测量,将L-Dopa溶液浓度提高40倍即称取1.0g L-Dopa加入双蒸水稀释至50mL。
将本发明的海参肽样品配制五个不同浓度梯度的溶液(0.2,0.1,0.5,0.25,0.125mg/mL)。按如下要求精确向A、B、C、D试管中分别加入PBS、酪氨酸酶溶液或样品液。先置25℃恒温水浴10 min后,立刻添入L-Dopa溶液1 mL,混匀。在25℃恒温水浴5 min后,立刻于475 nm处测吸光度。各组重复一次,实验结果如表1所示。
A:2 mL PBS+1 mL酪氨酸酶溶液;
B:3 mLPBS;
C:1 mL样品溶液+1 mL PBS+1 mL酪氨酸酶溶液;
D:1 mL样品溶液+2 mL PBS;
酪氨酸酶活性抑制率(%)=((A-B)-(C-D))/(A-B)×100%;
A为不加样品的加酶混合液;B为未加样品和酶的提取液;C为加样品和酶的混合液;D加样品而未加酶的混合液。
表1 海参肽溶液对酪氨酸酶的活性抑制率(n=3)
表1的数据结果表明,海参肽具有较好的酪氨酸酶抑制作用,且其抑制作用与肽的浓度有关。实验中,海参肽对酶的抑制作用随着其自身浓度的下降而下降,其抑制率由40.98%降低至2.58%,在0.0125mg/ml时,抑制活性基本丧失。
(2)不同含量的维生素C溶液对酶的活性抑制作用
实验方法与(1)相同,区别在于将海参肽样品替换为了维生素C,实验结果如表2所示。
表2 维生素C溶液对酪氨酸酶的活性抑制率(n=3)
从表2中可以看出,维生素C对酪氨酸酶具有很好的抑制作用。浓度为0.20mg/mL的维生素C抑制率高达98.8%。以0.1000mg/ml的维生素C溶液为阳性对照,实验组中海参肽最高达到了40.98%,说明了海参肽具有较好酪氨酸酶抑制作用。
海参肽能够高效抑制酪氨酸酶的活性,因此可作为美白功能成分用于化妆品中,具有良好的应用前景。
实施案例2:抑制黑色素的合成
1. MTT法检测海参肽对B16细胞的毒性
(1)细胞培养:细胞密度为105/mL,每孔100uL细胞悬液,边缘孔100uL的PBS。
(2)加药处理:分别加入海参肽使其终浓度为12.5,25,50,100,200μg/ml,设置5个复孔,并设置一组空白对照。
(3)MTT法:避光条件下,每孔10uL MTT。培养箱培养四小时后,吸净培养液,每孔加入100uLDMSO。酶标仪570nm处测量OD值,计算细胞存活率。
(4)结果如图1所示,在测试浓度0-400ug/mL范围内,海参肽在24h内对B16细胞没有毒性。
2. NaOH裂解法测定B16黑色素瘤细胞内的黑色素含量
(1)细胞培养:用含有10%(v/v)胎牛血清的1640培养基培养B16细胞,将细胞密度为5×105/mL,处于对数生长期的B16细胞接种于6孔板中,37℃、5%CO2培养。
(2)加药:实验分组:空白组,Vc阳性对照组,给药组(海参肽溶液200,100,50,25,12.5μg/mL)。细胞培养12h后弃掉培养基,空白组正常更换培养基,阳性对照组加入Vc使其终浓度为100μg/mL,给药组分别加入海参肽溶液使其终浓度为200,100,50,25,12.5μg/mL,培养72h。
(3)取样:72h后,弃上清液,PBS洗涤,每孔加入0.25%胰酶0.5mL消化细胞1.5min,加2mL含0.4%FBS的维持液终止消化,分别计数每组细胞。细胞悬液离心弃上清,沉淀中加入1mol/L NaOH溶液,80℃加热30min。
(4)检测:分光光度计检测475nm的吸光度。
黑色素合成量=药物孔(或对照孔)吸光度值/药物孔细胞数*100%。
如图2所示,以0.10mg/mL的维生素c溶液为阳性对照,实验组中海参肽对于黑色素合成的抑制率最高达到了41.56%,说明了海参肽具有较好抑制黑素色合成的作用。
实施案例3:配制海参肽的精华液
按照表3中配方混合,搅拌使配方中物料溶解均匀,装瓶即得。
表3 海参肽精华液配方
实施案例4:配制海参肽溶液的爽肤水
按照表4中配方混合,搅拌使配方中物料溶解均匀,装瓶即得。
表4 海参肽爽肤水配方
实施案例5:配制海参肽润肤乳
按照表5中配方,首先将油相水浴加热至80℃,搅拌使物料完全融化,待用。同样将水相加热至80℃待用。
趁热将油相倒入水相,不停搅拌出现乳状,直至温度降到40℃。
分次把添加成分多次加入已经搅拌乳化的试样,每加一次都要搅拌均匀充分乳化,直至加完。待温度降至室温后,静置,装瓶即得。
表5 海参肽润肤乳配方
经过研究发现,实施例3-5的产品具有良好的美白效果。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 渤海水产育苗(山东)有限公司、山东大学威海工业技术研究院
<120> 海参肽及其应用和产品
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 8
<212> PRT
<213> 刺参
<400> 1
Trp Asp Gly Val Gly Ser Gly Arg
1 5
Claims (9)
1.一种海参肽,其特征在于,所述海参肽的氨基酸序列为WDGVGSGR。
2.权利要求1所述的海参肽在制备抑制酪氨酸酶活性产品中的应用。
3.权利要求1所述的海参肽在制备抑制黑色素合成产品中的应用。
4.权利要求1所述的海参肽在制备化妆品中的应用;
所述化妆品包括精华液、爽肤水或润肤乳。
5.一种化妆品,其特征在于,包括权利要求1所述的海参肽;
所述化妆品包括精华液、爽肤水或润肤乳。
6.一种海参肽精华液,其特征在于,包括按质量份数计的如下组分:权利要求1所述的海参肽0.9~1.1份、海藻糖3~4份、杰马BP 0.36~0.44份和水90~110份。
7.一种海参肽爽肤水,其特征在于,包括按质量份数计的如下组分:权利要求1所述的海参肽0.2~0.4份、维生素原B5 1~2份、天然保湿因子1.5~2.5份、杰马BP 0.4~0.6份和水90~110份。
8.一种海参肽润肤乳,其特征在于,包括油相、水相和添加成分;
按质量份数计,所述油相包括橄榄乳化蜡6.3~7.7份、霍霍巴油5.4~6.6份、葡萄籽油3.6~4.4份和油溶维生素E 2.7~3.3份,所述水相为蒸馏水90~110份,所述添加成分包括权利要求1所述的海参肽3.6~4.4份、氨基酸保湿剂2~3份、天然保湿因子2.7~3.3份和杰马BP0.4~0.6份。
9.权利要求8所述的海参肽润肤乳的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将油相混合加热至75~85℃融化,然后倒入温度为75~85℃的水相混合,再将温度降低至35~45℃后加入添加成分,混合后制备得到海参肽润肤乳。
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