CN113512527A - 一种间充质干细胞培养基及其应用 - Google Patents

一种间充质干细胞培养基及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种间充质干细胞培养基及其应用，属于医学制造技术领域。其中间充质干细胞培养基，以重量份计，包括以下组分：DMEM培养液：100mL‑120mL，谷胱甘肽：10mg‑15mg，纳他霉素：4mg‑8mg，FGF‑2：0.5mg‑1.0mg，D‑色氨酸：0.8mg‑1.2mg，葡醛内酯：0.5mg‑0.8mg，胰岛素：0.5mg‑0.8mg；其中间充质干细胞培养基的制备方法如下：制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF‑2、D‑色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。本发明涉及的间充质干细胞培养基，能够间接提升间充质干细胞的转化率，保持其更高的存活率与更好的分化的能力。

Description

一种间充质干细胞培养基及其应用
技术领域
本发明属于医学制造技术领域，具体地说，涉及一种间充质干细胞培养基及其应用。
背景技术
间充质干细胞是一类具有自我复制更新和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于胎儿和成人各组织中。除自我更新外，间充质干细胞具有独特的免疫调节和组织再生功能。一方面，间充质干细胞通过与免疫细胞间的相互作用以及旁分泌可溶性因子对免疫细胞进行调控，介导免疫反应平衡，帮助机体形成有利于病损组织细胞修复或再生的微环境。间充质干细胞的免疫调控包括抑制T淋巴细胞活化、降低B细胞活化增殖及抗体分泌、抑制自然杀伤细胞增殖和抑制树突状细胞成熟及抗原呈递。另一方面，间充质干细胞可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝实质细胞、肌细胞以及神经元等多种功能细胞，参与损伤组织器官的重建。随着间充质干细胞作为重要种子细胞在基础医学、再生医学、临床医学、组织工程等领域的广泛应用，符合产业转化和临床应用要求、能较好维持间充质干细胞免疫调节功能和多向分化潜能的高效体外扩增体系是支持间充质干细胞产业转化、推进间充质干细胞新药研发的关键因素。
发明内容
1、要解决的问题
针对上述现有技术存在的问题，本发明提供一种间充质干细胞培养基及其应用，工艺简单，提升间充质干细胞的转化率，保持其更高的存活率与更好的分化的能力。
2、技术方案
为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。
一种间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 100mL-120mL，
谷胱甘肽 10mg-15mg，
纳他霉素 4mg-8mg，
FGF-2 0.5mg-1.0mg，
D-色氨酸 0.8mg-1.2mg，
葡醛内酯 0.5mg-0.8mg，
胰岛素 0.5mg-0.8mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL-120mL，
谷胱甘肽 12mg-15mg，
纳他霉素 4mg-6mg，
FGF-2 0.5mg-0.8mg，
D-色氨酸 0.8mg-1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg-0.8mg，
胰岛素 0.5mg-0.8mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
一种间充质干细胞培养基的应用，利用上述间充质干细胞培养基用于培养间充质干细胞。
3、有益效果
相比于现有技术，本发明的有益效果为：
本发明基于传统的DMEM培养液，协同D-色氨酸、葡醛内酯、纳他霉素及谷胱甘肽，刺激间充质干细胞定向脂肪细胞分化，使转化生长因子不需要外源添加，并。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。
其中间充质干细胞为小鼠滑膜间充质干细胞，其货号为货号：CP-M236，并采购自武汉普诺赛生命科技有限公司。
实施例1
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 100mL，
谷胱甘肽 15mg，
纳他霉素 4mg，
FGF-2 1.0mg，
D-色氨酸 0.8mg，
葡醛内酯 0.8mg，
胰岛素 0.5mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
实施例2
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 120mL，
谷胱甘肽 10mg，
纳他霉素 8mg，
FGF-2 0.5mg，
D-色氨酸 1.2mg，
葡醛内酯 0.5mg，
胰岛素 0.8mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
实施例3
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 15mg，
纳他霉素 4mg，
FGF-2 0.8mg，
D-色氨酸 0.8mg，
葡醛内酯 0.8mg，
胰岛素 0.5mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
实施例4
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 120mL，
谷胱甘肽 12mg，
纳他霉素 6mg，
FGF-2 0.5mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.8mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
实施例5
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
对比例1
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、葡醛内酯、胰岛素，即可。
对比例2
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、胰岛素，即可。
对比例3
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
对比例4
本实施例的间充质干细胞培养基，
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
上述所述的间充质干细胞培养基中，
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
测试方案如下：
参考方法-[1]郭振宇, 郑芹, 雷俊霞. 不同品系小鼠骨髓间质干细胞扩增能力及细胞表型差异的比较[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008, 12(47):9257-9260.
研究间充质干细胞转化成脂细胞的成功率，结果如下：
实施例1：72.4%；
实施例2：72.5%；
实施例3：72.4%；
实施例4：72.6%；
实施例5：73.1%；
对比例1：40.3%；
对比例2：48.9%；
对比例3：65.7%；
对比例4：68.0%。
以上内容是结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明，不能认定本发明具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的构思的前提下，还可以做出若干简单的推演或替换，都应当视为属于本发明所提交的权利要求书确定的保护范围。

Claims (10)

1.一种间充质干细胞培养基，其特征在于：
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 100mL-120mL，
谷胱甘肽 10mg-15mg，
纳他霉素 4mg-8mg，
FGF-2 0.5mg-1.0mg，
D-色氨酸 0.8mg-1.2mg，
葡醛内酯 0.5mg-0.8mg，
胰岛素 0.5mg-0.8mg。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL-120mL，
谷胱甘肽 12mg-15mg，
纳他霉素 4mg-6mg，
FGF-2 0.5mg-0.8mg，
D-色氨酸 0.8mg-1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg-0.8mg，
胰岛素 0.5mg-0.8mg。
3.根据权利要求2所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
以重量份计，包括以下组分：
DMEM培养液 110mL，
谷胱甘肽 14mg，
纳他霉素 5mg，
FGF-2 0.6mg，
D-色氨酸 1.0mg，
葡醛内酯 0.7mg，
胰岛素 0.6mg。
4.根据权利要求3所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的DMEM培养液采购自武汉普诺赛生命科技有限公司，其货号为PM150210B。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的谷胱甘肽、所述的D-色氨酸及所述的葡醛内酯均采购自国药集团化学试剂有限公司。
6.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的纳他霉素采购自广州佳途科技股份有限公司。
7.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的FGF-2采购自武汉艾美捷科技有限公司。
8.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的胰岛素采购自生工生物工程（上海）股份有限公司。
9.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养基，其特征在于：
所述的间充质干细胞培养基的制备方法如下：
制作DMEM培养液，加入过滤除菌后的谷胱甘肽、纳他霉素、FGF-2、D-色氨酸、葡醛内酯、胰岛素，即可。
10.一种间充质干细胞培养基的应用，其特征在于：
利用权利要求1的间充质干细胞培养基用于培养间充质干细胞。
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赵勤鹏: "定向诱导分化环境下骨髓间充质干细胞向成骨及成脂细胞的分化", 《中国组织工程研究》 *

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