CN113444282A - 一种高回弹丝素蛋白气凝胶 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高回弹丝素蛋白气凝胶,通过如下步骤制备得到:将丝素蛋白水溶液和糖类小分子物质的水溶液混合得到混合溶液,将所述混合溶液进行剪切后冷冻干燥,得到所述高回弹丝素蛋白气凝胶。本发明中制备得到的丝素蛋白气凝胶具有三维气泡结构,内部含有大量封闭空气,不与外界连通,在压缩率为50%时的压缩回弹率高达50%~75%。此外,该气凝胶还具有低密度、高孔隙率、良好的生物相容性以及可降解性等特点,可用于医用敷料、组织修复等方面,可以为细胞生长、粘附和增殖提供良好的生物环境,该气凝胶也可用作组织培养支架。
Description
本申请是申请日为2019年1月31日、申请号为2019101001362、发明名称为“高回弹丝素蛋白气凝胶及其制备方法”的发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及丝素蛋白气凝胶技术领域,具体涉及一种具有三维气泡结构的高回弹丝素蛋白气凝胶。
背景技术
气凝胶材料是一种用气体代替凝胶中液体且具有稳定三维网络结构的特殊凝胶。气凝胶的密度约为0.003~0.5g/cm3,密度最低可至0.001g/cm3,是目前世界上最轻的固体材料,有“固体烟雾”之称。气凝胶内部的纳米空洞结构赋予其低热导率、低电阻率、低折射系数等优点,使气凝胶在吸附材料、隔热保温材料、高性能电容器方面有广阔的应用前景。
按照原料来源通常将气凝胶分为无机气凝胶、有机聚合物气凝胶和纤维素气凝胶三类。无机气凝胶和有机聚合物气凝胶一直受到关注,其制备方法不断更新,使用原料也不断优化,得到了广泛的应用。但上述无机气凝胶和有机聚合物气凝胶难以生物降解,生物相容性较差,限制了其应用推广。另一方面,由于纤维素气凝胶具有资源丰富且无毒可再生的优点,近几年来研究热度持续升温。
目前纤维素气凝胶的制备方法主要是分以下两步进行:首先是水凝胶的制备,然后通过超临界干燥或冷冻干燥等方法将凝胶中的水置换出来得到气凝胶。但这种方法得到的气凝胶存在强度不高、易坍塌等问题,因此亟需研究一种高强度的气凝胶材料。
丝素蛋白是从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白,含量约占蚕丝70%~80%,含有18种氨基酸。丝素本身具有良好的机械性能和理化性质,如良好生物相容性和可降解性、低免疫原性、缓释性等,而且经过不同处理可以得到不同的形态,如纤维、溶液、粉、膜以及凝胶,在生物材料领域得到广泛的应用。
目前丝素气凝胶的研究相对较少,有如中国专利申请号201610199399.X,名称为“一种复合天然高分子凝胶类材料”的发明专利中公开了以利用采用环糊精/反应性高分子的超分子包合物作为交联剂,使凝胶形成部分化学交联,并经超临界干燥得到高强度的气凝胶,但是该气凝胶制作过程繁琐,且引入的交联剂对人体和环境有害。又如中国专利申请号201610526187.8,名称为“一种丝素蛋白气凝胶的制备方法”的发明专利中制备得到的气凝胶压缩时易破裂、回弹性差,大大限制了丝素蛋白气凝胶的应用范围。
发明内容
有鉴于此,为了克服现有技术的缺陷,本发明的目的是提供一种高回弹丝素蛋白气凝胶。
为达到上述目的,本发明采用以下的技术方案:
一种高回弹丝素蛋白气凝胶的制备方法,以家蚕茧壳为原料,包括以下步骤:向丝素蛋白水溶液中加入糖类小分子物质,混匀后制成混合溶液;将所述混合溶液倒入容器后,用搅拌器对所述混合溶液进行高速剪切,所述混合溶液转变为泡沫状,将所述泡沫状的混合溶液倒入模具中进行冷冻干燥,获得丝素蛋白气凝胶。
在一些实施例中,具体包括以下步骤:
(1)将蚕茧放入微沸(100℃)的0.01MpH=9.5的碳酸氢钠/碳酸钠缓冲溶液中保持30min后,取出茧丝并用去离子水清洗干净,重复以上试验三次,以脱去茧壳中的丝胶,并经溴化锂溶解、透析后获得纯丝素蛋白溶液,将所述纯丝素蛋白溶液用去离子水稀释成所述丝素蛋白水溶液;所述丝素蛋白水溶液的浓度为30mg/mL~60mg/mL;
(2)配置100mg/mL的糖类小分子物质的水溶液,向所述丝素蛋白水溶液中加入糖类小分子物质的水溶液制得混合溶液,所述混合溶液中的糖类小分子物质的浓度为4mg/mL~15mg/mL,所述混合溶液中丝素的浓度为30mg/mL~65mg/mL;
(3)将所述混合溶液加热到20-30℃,然后将所述混合溶液倒入容器中,在20-30℃的温度下用搅拌器对所述混合溶液进行高速剪切,使所述混合溶液在容器内部形成大量气泡,所述混合溶液转变为泡沫状;在一些实施例中,搅拌温度优选为25℃;
(4)将泡沫状的所述混合溶液倒入模具中冷冻干燥,获得所述高回弹丝素蛋白气凝胶。
根据本发明的一些优选方面,所述糖类小分子物质为葡萄糖、木糖或者果糖。
根据本发明的一些优选方面,所述容器为半球形容器或碗状容器。
根据本发明的一些优选方面,所述搅拌器至少包括一根下部尺寸大于上部尺寸的锥形搅拌棒。
优选地,所述锥形搅拌棒包括位于中间的转动棒以及连接在所述转动棒上的若干个搅拌桨,若干个所述搅拌桨的外边缘位于同一个虚拟的圆锥面上。在一些实施例中,搅拌桨呈类似三角形的形式,多个三角形形状的搅拌桨组成一个虚拟的圆锥面,搅拌桨的侧边位于虚拟圆锥面的侧面上,搅拌桨的底边位于虚拟圆锥面的底面上,转动棒连接在圆锥面的顶点上。
根据本发明的一些优选方面,步骤(3)中所述高速剪切的剪切速度为500r/min~1500r/min,剪切时间为20min~60min。
根据本发明的一些优选方面,步骤(4)中所述冷冻干燥的条件为在-40℃~-80℃环境中冷冻4~8h后逐渐升温并进行真空干燥。
本发明还提供了一种采用如上所述的制备方法制备得到的高回弹丝素蛋白气凝胶,所述高回弹丝素蛋白气凝胶的表观密度为0.02g/cm3~0.04g/cm3,压缩率为50%时所述高回弹丝素蛋白气凝胶的压缩回弹率为50%~75%。
本发明的原理是:丝素蛋白在搅拌时能够形成大量的气泡,但单纯的气泡在搅拌完成之后,由于表面张力的作用,小气泡会自发地聚集成大气泡,使冷冻干燥后获得的气凝胶气泡直径过大,导致材料在压缩过程中由于部分气泡结构被破坏而无法恢复。而糖类小分子物质可以与丝素蛋白产生相容的共混体系,从而增加气泡的表面张力,这样在高速剪切形成的小气泡不会轻易聚集成大气泡,从而提高气凝胶的储能能力。另外葡萄糖、木糖或者果糖与丝素蛋白间形成大量的氢键,提高了混合溶液的粘度,从而使气体能够在气凝胶中稳定存在而不容易破裂。在搅拌前期气泡容易破裂,采用半球形容器或碗状容器可以使使破裂后的气泡残液更好地聚集在容器底部,形成更多的小气泡以提高气凝胶的压缩强度。而锥形搅拌棒的形状为上部小下部大,可以让底部未形成气泡的液体剪切更充分,从而获得高回弹丝素蛋白气凝胶。
由于采用了以上的技术方案,本发明与现有技术相比具有如下的有益之处:
(1)本发明通过对丝素蛋白与糖类小分子所形成的混合溶液进行剪切处理,冷冻干燥后得到的气凝胶具有独特的三维气泡结构和低密度、高孔隙率;
(2)本发明所制备的丝素蛋白气凝胶在压缩过程中不会破裂,具有卓越的储能能力;
(3)本发明所制备的基于丝素蛋白制备的气凝胶具有良好的生物相容性以及可降解性等优势,可用于医用敷料、组织修复等方面,可以为细胞生长、粘附和增殖提供良好的生物环境,该气凝胶也可用作组织培养支架;
(4)相比于纯丝素气凝胶,本发明所制备的气凝胶在压缩率为50%时的压缩回弹率高达50%~75%,具有很好的压缩回弹性能。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明优选实施例2中制备的高回弹丝素蛋白气凝胶的实物照片;
图2为本发明优选实施例2中高回弹丝素蛋白气凝胶的结构示意图;
图3为本发明优选实施例2中搅拌棒示意图;
图4为本发明优选实施例2中碗状容器示意图;
附图中,高回弹丝素蛋白气凝胶-1,封闭空气-2,自由空气-3,锥形搅拌棒-4,转动棒-5,搅拌桨-6,容器-7。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明的技术方案,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
实施例1丝素蛋白水溶液的制备
用精密天平称取80g家蚕茧壳,配置质量分数为0.01M,pH=9.5的碳酸氢钠/碳酸钠水溶液4000mL,用电磁炉加热至沸腾后加入茧壳,调节电磁炉功率保持水溶液继续微沸30min,取出茧丝并用去离子水清洗干净。
重复以上试验三次以脱去丝胶,然后取出茧丝置于60℃的烘箱中烘干得到纯丝素蛋白纤维。将纯丝素蛋白纤维按浴比20:150溶解于浓度为9.3mol/L的溴化锂溶液中,在恒温磁力搅拌器中以60±2℃溶解约1h。冷却后取出装入透析袋中密封,置于去离子水中透析3-4d,用脱脂棉过滤得到纯丝素蛋白溶液,通过干燥称重计算得到纯丝素蛋白溶液的质量分数,放置于4℃冰箱中备用。
实施例2高回弹丝素蛋白气凝胶的制备
(1)用去离子水调节实施例1中的纯丝素蛋白溶液的浓度为35mg/mL,得到丝素蛋白水溶液。
(2)配置100mg/mL的葡萄糖水溶液,取调配好的丝素蛋白水溶液200mL,向丝素蛋白水溶液中加入葡萄糖水溶液制得混合溶液,使混合溶液中葡萄糖的浓度为4mg/mL。
(3)将混合溶液加热到25℃,然后将混合溶液倒入容器7中,在25℃的温度下用搅拌器对混合溶液进行40min高速剪切,搅拌转速为1200r/min,使混合溶液在容器7内部形成大量气泡,混合溶液转变为泡沫状。
本实施例中的容器7为半球形容器或碗状容器,碗状容器如图4所示,可以使破裂后的气泡残液更好地聚集在容器7底部。
本实施例中的搅拌器包括两根锥形搅拌棒4,且锥形搅拌棒4的形状为上部小下部大,如图3所示,本实施例中的锥形搅拌棒4包括位于中间的转动棒5以及连接在转动棒5上的若干个三角形的搅拌桨6,多个三角形的搅拌桨6的外边缘位于虚拟的圆锥面上。具体的,搅拌桨6呈类似三角形的形式,多个三角形形状的搅拌桨6组成一个虚拟的圆锥面,搅拌桨6的侧边位于虚拟圆锥面的侧面上,搅拌桨6的底边位于虚拟圆锥面的底面上,转动棒5连接在虚拟圆锥面的顶点上,即本实施例中的搅拌棒为由最底端向上尺寸逐渐减小。通过这样下大上小形状的锥形搅拌棒4,可以让底部未形成气泡的液体剪切更充分,从而获得高回弹丝素蛋白气凝胶。
(4)将泡沫状的混合溶液倒入模具中冷冻干燥,获得丝素蛋白气凝胶,如图1-2所示。高回弹丝素蛋白气凝胶1中具有封闭气体2和自由气体3的三维气泡结构,三维气泡结构指的就是将很多小气泡密封在固体材料中形成的结构。
本实施例中冷冻干燥的条件为在-45℃环境中冷冻6h后逐渐升温并进行真空干燥。
实施例3高回弹丝素蛋白气凝胶的制备
(1)用去离子水调节实施例1中的纯丝素蛋白溶液的浓度为45mg/mL,得到丝素蛋白水溶液。
(2)配置100mg/mL的木糖水溶液,取调配好的丝素蛋白水溶液100mL,向丝素蛋白水溶液中加入木糖水溶液制得混合溶液,使混合溶液中木糖的浓度为9mg/mL。
(3)将混合溶液加热到28℃,然后将混合溶液倒入容器7中,在25℃的温度下用搅拌器对混合溶液进行25min高速剪切,搅拌转速为1000r/min,使混合溶液在容器7内部形成大量气泡,混合溶液转变为泡沫状。
本实施例中的容器7和搅拌器同实施例2。
(4)将泡沫状的混合溶液倒入模具中冷冻干燥,获得丝素蛋白气凝胶,如图1-2所示。高回弹丝素蛋白气凝胶1中具有封闭气体2和自由气体3的三维气泡结构,三维气泡结构指的就是将很多小气泡密封在固体材料中形成的结构。
本实施例中冷冻干燥的条件为在-60℃环境中冷冻5h后逐渐升温并进行真空干燥。
实施例4高回弹丝素蛋白气凝胶的制备
(1)用去离子水调节实施例1中的纯丝素蛋白溶液的浓度为60mg/mL,得到丝素蛋白水溶液。
(2)配置100mg/mL的果糖水溶液,取调配好的丝素蛋白水溶液200mL,向丝素蛋白水溶液中加入果糖水溶液制得混合溶液,使混合溶液中果糖的浓度为15mg/mL。
(3)将混合溶液加热到23℃,然后将混合溶液倒入容器7中,在25℃的温度下用搅拌器对混合溶液进行60min高速剪切,搅拌转速为800r/min,使混合溶液在容器7内部形成大量气泡,混合溶液转变为泡沫状。
本实施例中的容器7和搅拌器同实施例2。
(4)将泡沫状的混合溶液倒入模具中冷冻干燥,获得丝素蛋白气凝胶,如图1-2所示。高回弹丝素蛋白气凝胶1中具有封闭气体2和自由气体3的三维气泡结构,三维气泡结构指的就是将很多小气泡密封在固体材料中形成的结构。
本实施例中冷冻干燥的条件为在-70℃环境中冷冻6h后逐渐升温并进行真空干燥。
实施例5高回弹丝素蛋白气凝胶的制备
(1)用去离子水调节实施例1中的纯丝素蛋白溶液的浓度为50mg/mL,得到丝素蛋白水溶液。
(2)配置100mg/mL的葡萄糖水溶液,取调配好的丝素蛋白水溶液200mL,向丝素蛋白水溶液中加入葡萄糖水溶液制得混合溶液,使混合溶液中葡萄糖的浓度为10mg/mL。
(3)将混合溶液加热到26℃,然后将混合溶液倒入容器7中,在25℃的温度下用搅拌器对混合溶液进行50min高速剪切,搅拌转速为1300r/min,使混合溶液在容器7内部形成大量气泡,混合溶液转变为泡沫状。
本实施例中的容器7和搅拌器同实施例2。
(4)将泡沫状的混合溶液倒入模具中冷冻干燥,获得丝素蛋白气凝胶,如图1-2所示。高回弹丝素蛋白气凝胶1中具有封闭气体2和自由气体3的三维气泡结构,三维气泡结构指的就是将很多小气泡密封在固体材料中形成的结构。
本实施例中冷冻干燥的条件为在-50℃环境中冷冻8h后逐渐升温并进行真空干燥。
对比例1纯丝素蛋白气凝胶
本对比例在制备纯丝素蛋白气凝胶时不添加糖类物质。具体的制备过程可参见中国专利申请号201610526187.8,名称为“一种丝素蛋白气凝胶的制备方法”的发明专利中的制备过程。
实施例6测试与分析
对实施例2-5和对比例1制备得到的丝素蛋白气凝胶测试表观密度、压缩强度和压缩回弹率,结果见表1。
表1测试结果
从表1可以看出实施例2-5制备得到的丝素蛋白气凝胶与对比例1的纯丝素气凝胶相比,实施例2-5中加入糖类物质改性后的气凝胶在保持较低密度和良好的压缩强度的前提下,压缩回弹率有了明显提高。
本发明中制备得到的丝素蛋白气凝胶具有三维气泡结构,内部含有大量封闭空气,不与外界连通,在压缩率为50%时的压缩回弹率高达50%~75%。此外,该气凝胶还具有低密度、高孔隙率、良好的生物相容性以及可降解性等特点,可用于医用敷料、组织修复等方面,可以为细胞生长、粘附和增殖提供良好的生物环境,该气凝胶也可用作组织培养支架。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围,凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,通过如下步骤制备得到:将丝素蛋白水溶液和糖类小分子物质的水溶液混合得到混合溶液,将所述混合溶液进行剪切后冷冻干燥,得到所述高回弹丝素蛋白气凝胶。
2.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述混合溶液中所述糖类小分子与所述丝素蛋白的质量比为1:3~9。
3.根据权利要求2所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述混合溶液中所述糖类小分子与所述丝素蛋白的质量比为1:3.4、1:4.5、1:4.55或1:8.4。
4.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述糖类小分子物质为葡萄糖、木糖或者果糖。
5.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述高回弹丝素蛋白气凝胶的表观密度为0.02g/cm3~0.04g/cm3。
6.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,压缩率为50%时所述高回弹丝素蛋白气凝胶的压缩回弹率为50%~75%。
7.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,压缩率为50%时所述高回弹丝素蛋白气凝胶的强度为45~55kPa。
8.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述剪切时的剪切速度为500r/min~1500r/min,剪切时间为20min~60min。
9.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述剪切时采用的容器为半球形容器或碗状容器。
10.根据权利要求1所述的高回弹丝素蛋白气凝胶,其特征在于,所述剪切时采用的搅拌器至少包括一根下部尺寸大于上部尺寸的锥形搅拌棒。
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