CN113398184A - 一种中药复方有效部位的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种中药复方有效部位的制备方法，其中中药复方有效部位的原料包括：枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子。本发明中的药物组合优选乙醇比例为50‑75%洗脱液得到的部位，通过实验表明本发明中药物组合具有延缓动脉粥样硬化斑块的作用，且可有效减少动脉血管中的斑块面积，有效预防和治疗动脉粥样硬化，本发明制备的药物可通过载体或赋形剂给予全身或局部给药，进一步的在使用时可经鼻、经口、透皮、非肠道、静脉或肌肉注射给药，方便不同患者选择合适的用药方式，本发明药物组合的使用方式更加灵活多样，且原料简单易得，制备方式操作简单，为临床提供一种新的药物，具有较大的使用价值。

Description

一种中药复方有效部位的制备方法
技术领域
本发明属于中药制药技术领域，具体为一种中药复方有效部位的制备方法。
背景技术
动脉粥样硬化是一种由脂质蓄积引起的中动脉和大动脉内膜下斑片状增厚为特征的病变，其特点是受累动脉内膜内有脂质沉着和复合糖类积聚，继而纤维组织增生和钙化，并伴随动脉中层病变。随着机体的老化，不饱和脂肪酸形成的脂质过氧化物积聚，血浆胆固醇（cholesterol，TC）浓度升高，同时伴随衰老导致的血管内皮细胞功能紊乱，内皮下低密度脂蛋白（Low density lipoprotein，LDL）积聚导致氧化修饰的LDL（oxidized-LDL，ox-LDL）增多，它携带的TC不能被巨噬细胞彻底清除进而形成泡沫细胞是AS早期病变的重要特征。中医认为AS在病机上以“痰、瘀”为标、“肾虚精血不足”为本，有研究报道，补肾中药可通过调节自噬、脂质代谢紊乱、减轻炎症反应、抗氧化应激、抑制血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell，VSMC）增殖、稳定AS斑块等环节多靶点、多途径地发挥抗AS作用。前期研究表明：补肾中药可降低AS患者脉搏波传导速度和颈动脉内中膜厚度；可改善颈AS患者脂质代谢紊乱，有效治疗颈AS；可显著降低小鼠外周血总胆固醇含量、减小AS斑块面积；可显著减少AS斑块处衰老细胞数量及衰老相关蛋白的表达；并通过调节与氧化应激、炎症及细胞衰老等相关信号通路参与AS的防治，基于以上理论研究一种中药复方有效部位的制备方法有一定的必要性。
发明内容
（一）解决的技术问题
本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计一种中药复方有效部位的制备方法。
（二）技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种中药复方有效部位的制备方法，所述中药复方有效部位的原料包括：枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子。
所述中药复方有效部位的原料组份包括：枸杞子5-15克、菟丝子5-15克、沙苑子5-15克、女贞子5-15克、黑大豆5-15克和覆盆子5-15克。
所述中药复方有效部位的原料组份包括：枸杞子10克、菟丝子10克、沙苑子10克、女贞子10克、黑大豆10和覆盆子10克。
本发明中药组方中枸杞子滋肾益精、菟丝子补肾固精，沙苑子补肾助阳、女贞子补肾滋阴、覆盆子益肾固精，诸药合用，共奏补肾益精、降脂利脉之功效。
现代药理学研究发现，枸杞子可有效延缓衰老、降血脂、调节免疫等作用；沙苑子具有降低血清胆固醇、甘油三酯、改善血流状态的功效；女贞子具有降低血清胆固醇、延缓衰老的作用，并可有效预防和减轻AS的发展；覆盆子具有抗氧化、保护心肌和肝脏等作用；黑大豆具有调节脂质代谢、抗氧化应激、舒张血管作用。因此，本发明以中药枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆、覆盆子为基础，在此基础上，通过分离提纯，制备出更有效的部位。
一种中药复方有效部位的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子各10克，并将上述原料使用热水提取或含不高于50%的甲醇或乙醇水溶液提取，得到提取溶液；
S2、将提取溶液进行中和处理，乙醇沉淀，随后进行减压蒸馏，蒸去乙醇后，经高分子填料固定相的色谱柱进行分离；
S3、再分别用多种比例的洗脱液进行洗脱，得到需要收集的各个部位的洗脱液。
作为本发明的进一步方案：所述热水提取为温度高于80摄氏度的水浸泡或沸水煎煮，所述热水可以是普通水或含氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、二甲胺、二乙胺的碱性水溶液，或含盐酸、硫酸、磷酸、乙酸或甲酸的酸性水溶液，所述甲醇或乙醇水溶液，可以是含氢氧化钠、氢氧化钾或氨水的碱性水溶液，或含盐酸、硫酸、磷酸、乙酸或甲酸的酸性水溶液。
作为本发明的进一步方案：所述高分子填料包括但不限于大孔吸附树脂、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂、聚酰胺树脂或葡聚糖凝胶其中的一种。
作为本发明的进一步方案：所述洗脱液可为含甲醇或乙醇的水溶液，选用乙醇水溶液为洗脱液，所含乙醇的比例从0到95%，首选乙醇比例为50-75%的部位的洗脱液，乙醇水溶液的用量为整个色谱柱体积的3-6倍。
一种中药复方药物或药物组合或药物的有效部位的应用，所述药物可用载体或赋形剂给予全身或局部给药。
一种中药复方药物或药物组合或药物的有效部位的用法，所述药物可经鼻、经口、透皮、非肠道、静脉或肌肉注射给药。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明中的药物组合优选乙醇比例为50-75%洗脱液得到的部位，通过实验表明本发明中药物组合具有延缓动脉粥样硬化斑块的作用，且可有效减少动脉血管中的斑块面积，有效预防和治疗动脉粥样硬化，本发明制备的药物可通过载体或赋形剂给予全身或局部给药，进一步的在使用时可经鼻、经口、透皮、非肠道、静脉或肌肉注射给药，方便不同患者选择合适的用药方式，本发明药物组合的使用方式更加灵活多样，且原料简单易得，制备方式操作简单，为临床提供一种新的药物，具有较大的使用价值。
附图说明
图1为本发明中使用Image pro-plus6.0软件测量斑块面积和左心室流出道面积对比图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1、有效部位的提取和分离方法：
一种中药复方有效部位的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子各60克，加15倍量蒸馏水浸没，放置一小时后，煮沸一小时，过滤，滤渣再放入10倍量蒸馏水，继续煮沸一小时，过滤，合并滤液，浓缩至小体积，得到提取溶液；
S2、将提取溶液进行中和处理，加95%乙醇沉淀，放置过夜，过滤，滤液减压浓缩，蒸去乙醇，上大孔吸附树脂色谱柱；
S3、再用分别用35%、50%、75%的乙醇水溶液洗脱，乙醇水溶液的用量为整个色谱柱体积的4倍，得到3个不同乙醇浓度的部位，分别为部位1、部位2和部位3。
实施例2、药理实验结果：
1.实验动物：10周龄apoe-/-小鼠，每组3只实验动物。
2.实验方法：10周龄apoe-/-小鼠分别给予普饲、高脂饲料（含20%的脂肪和1.5%的胆固醇）喂养，普饲喂养的作为动脉粥样硬化对照小鼠，高脂饲料喂养的作为动脉粥样硬化模型小鼠。给予高脂饲料的同时给予本方(整方，未经分离)（BSJZF）、本方的部位1（BSJZF-1）、本方的部位2（BSJZF-2）、本方的部位3（BSJZF-3）（各0.2 ml）灌胃，每天一次，共3个月。使用2%的戊巴比妥钠0.2 ml对小鼠腹腔注射麻醉，左心室0.9%的生理盐水左心室灌流后使用100 ml 4%多聚甲醛灌注，取心脏和主动脉，置于4%多聚甲醛中后固定24小时，石蜡包埋切片（定位于左心室流出道），切片行HE染色，观察左心室流出道斑块面积。使用Image pro-plus6.0软件测量斑块面积和左心室流出道面积，使用斑块面积除左心室流出道面积得出的数值作为衡量斑块大小的方法，进行组间比较。
3.实验结果：依据上述测量斑块面积的方法，我们计算了对照组（apoe-/-普饲）（control）、模型组（apoe-/-高脂）（model）、本方组（apoe-/-高脂+本方）（BSJZF）、本方部位1组（apoe-/-高脂+本方部位1）（BSJZF-1）、本方部位2组（apoe-/-高脂+本方部位2）（BSJZF-2）、本方部位3组（apoe-/-高脂+本方部位3）（BSJZF-3）的斑块面积除以左心室流出道面积，并将给药组与模型组之间进行了比较。结果显示，与模型组相比，未经分离纯化的原方（BSJZF）及分离后的三个部位组（BSJZF-1、BSJZF-2、BSJZF-3）都有减少斑块的作用，其中，分离后的三个部位均好于原方，而BSJZF-2组及BSJZF-3组的对斑块面积的减少尤其显著，表明BSJZF-2和BSJZF-3均具有很好的延缓动脉粥样硬化的作用，BSJZF-3的效果最好，优于原方及其他各个部位。
4.结论：综上所述，本发明中中药复方有效部位可有效治疗和预防动脉粥样硬化，且可有效减少动脉血管中的斑块。
最后应说明的几点是：虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明的基础上，以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (9)

1.一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于，所述中药复方有效部位的原料包括：枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子。
2.根据权利要求1所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于，所述中药复方有效部位的原料组份包括：枸杞子5-15克、菟丝子5-15克、沙苑子5-15克、女贞子5-15克、黑大豆5-15克和覆盆子5-15克。
3.根据权利要求1所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于，所述中药复方有效部位的原料组份包括：枸杞子10克、菟丝子10克、沙苑子10克、女贞子10克、黑大豆10克和覆盆子10克。
4.根据权利要求2或3所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、称取枸杞子、菟丝子、沙苑子、女贞子、黑大豆和覆盆子各10克，并将上述原料使用热水提取或含不高于50%的甲醇或乙醇水溶液提取，得到提取溶液；
S2、将提取溶液进行中和处理，乙醇沉淀，随后进行减压蒸馏，蒸去乙醇后，经高分子填料固定相的色谱柱进行分离；
S3、再分别用多种比例的洗脱液进行洗脱，得到需要收集的各个部位的洗脱液。
5.根据权利要求4所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于：所述热水提取为温度高于80摄氏度的水浸泡或沸水煎煮，所述热水可以是普通水或含氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、二甲胺、二乙胺的碱性水溶液，或含盐酸、硫酸、磷酸、乙酸或甲酸的酸性水溶液，所述甲醇或乙醇水溶液，可以是含氢氧化钠、氢氧化钾或氨水的碱性水溶液，或含盐酸、硫酸、磷酸、乙酸或甲酸的酸性水溶液。
6.根据权利要求4所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于：所述高分子填料包括但不限于大孔吸附树脂、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂、聚酰胺树脂或葡聚糖凝胶其中的一种。
7.根据权利要求4所述的一种中药复方有效部位的制备方法，其特征在于：所述洗脱液可为含甲醇或乙醇的水溶液，选用乙醇水溶液为洗脱液，所含乙醇的比例从0到95%，收集乙醇比例为50-75%的部位的洗脱液，乙醇水溶液的用量为整个色谱柱体积的3-6倍。
8.根据权利要求1-7所述的任意一项一种中药复方药物或药物组合或药物的有效部位的应用，其特征在于：所述药物可用载体或赋形剂给予全身或局部给药。
9.根据权利要求1-7所述的任意一项一种中药复方药物或药物组合或药物的有效部位的用法，其特征在于：所述药物可经鼻、经口、透皮、非肠道、静脉或肌肉注射给药。
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