CN113383917A - 一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 - Google Patents
一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113383917A CN113383917A CN202110719698.2A CN202110719698A CN113383917A CN 113383917 A CN113383917 A CN 113383917A CN 202110719698 A CN202110719698 A CN 202110719698A CN 113383917 A CN113383917 A CN 113383917A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus
- solution
- laver
- fermentation
- algae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 68
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 title claims abstract description 63
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 title claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims abstract description 40
- 241000206607 Porphyra umbilicalis Species 0.000 claims abstract description 35
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 28
- 102000019280 Pancreatic lipases Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108050006759 Pancreatic lipases Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 229940116369 pancreatic lipase Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims abstract description 15
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 claims abstract description 14
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 14
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 8
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241001052560 Thallis Species 0.000 claims abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 26
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 18
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 6
- 235000010855 food raising agent Nutrition 0.000 claims description 6
- 241000206572 Rhodophyta Species 0.000 abstract description 19
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 8
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 abstract description 6
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 abstract description 6
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 abstract description 6
- 241001474374 Blennius Species 0.000 abstract description 5
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 71
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 9
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 9
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 8
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 8
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 8
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 7
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 7
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 7
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 4
- AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N orlistat Chemical compound CCCCCCCCCCC[C@H](OC(=O)[C@H](CC(C)C)NC=O)C[C@@H]1OC(=O)[C@H]1CCCCCC AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N 0.000 description 4
- 229960001243 orlistat Drugs 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 241000168525 Haematococcus Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M (3-methylphenyl)methyl-triphenylphosphanium;chloride Chemical compound [Cl-].CC1=CC=CC(C[P+](C=2C=CC=CC=2)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1 BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L Endothal-disodium Chemical compound [Na+].[Na+].C1CC2C(C([O-])=O)C(C(=O)[O-])C1O2 XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- HDPISCIDKUMRDI-UHFFFAOYSA-M N(=O)[O-].[Na+].[N+](=O)([O-])[O-].[Al+3] Chemical compound N(=O)[O-].[Na+].[N+](=O)([O-])[O-].[Al+3] HDPISCIDKUMRDI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010067035 Pancrelipase Proteins 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005577 familial hyperlipidemia Diseases 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- LVZSQWIWCANHPF-UHFFFAOYSA-N p-nitrophenyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 LVZSQWIWCANHPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940045258 pancrelipase Drugs 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L17/00—Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L17/60—Edible seaweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/137—Delbrueckii
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种抑制胰脂肪酶活性的红藻‑乳杆菌发酵液的制备方法,其包括:将红毛藻和紫菜分别与纯净水以1:100~3:100的比例混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液;在红毛藻溶液和紫菜溶液中加入2%~5%的葡萄糖,于60℃~65℃下灭菌30min后,降温至37℃以下;之后,向红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加2%~5%的德氏乳杆菌或植物乳杆菌,发酵24~72h后,得到四种发酵液;将四种发酵液离心、过滤,去除藻渣和乳杆菌菌体,得到四种发酵上清液,分析四种发酵上清液对脂肪酶酶活力的抑制率。该方法可获得最佳的脂肪酶抑制效果的海洋红藻‑乳杆菌组合,开发具有辅助降血脂活性的海藻健康食品,促进海藻深加工产品的多元化和加工技术的多层次化。
Description
技术领域
本发明涉及食品发酵技术领域,具体涉及一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法。
背景技术
研究发现,食物中的脂肪在肠道中被胰脂肪酶分解成甘油单酯和脂肪酸后才能被小肠吸收利用,或重新组成人体脂肪。因此,胰脂肪酶是影响脂肪分解、吸收和代谢的关键酶之一。抑制肠道中胰脂肪酶的酶活性有助于控制食物脂肪的分解、吸收和利用,从而起到减肥降脂的功效。近年来,半合成的胰脂肪酶抑制剂Orlistat虽然已经在临床中广泛使用,但患者服用后容易产生头痛、腹泻、胀气等副作用,并且其他现有的减肥降脂药物或方法大都存在毒副作用大、易反弹等缺点。因此,研究一种天然的胰脂肪酶抑制剂在辅助降血脂和控制肥胖方面具有重要意义。
目前,红毛藻加工行业存在原料昂贵、产品种类单一、附加值低和竞争力弱的问题,开发利用程度较低,影响红毛藻增养殖产业的发展。
目前,我国紫菜加工业整体处于加工品种单一,开发利用程度较低,市售主要为干制品,产品附加值低等问题。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提出一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法,该方法提高海洋红藻原有的生物活性与营养价值,明确加工技术,探明具有最佳的脂肪酶抑制效果的海洋红藻-乳杆菌组合,开发具有辅助降血脂活性的海藻健康食品,促进海藻深加工产品的多元化和加工技术的多层次化,推动我国海藻精深产业的快速发展。
为了实现上述目的,本发明的实施例在一方面提出了一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法,其包括:
(1)挑选新鲜红毛藻和紫菜洗净,干燥至恒重;
(2)将所述红毛藻和所述紫菜分别与纯净水以1:100~3:100的比例混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液;
(3)在所述红毛藻溶液和所述紫菜溶液中加入2%~5%的葡萄糖,于60℃~65℃下灭菌30min后,降温至37℃以下;
(4)向步骤(3)处理后的红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加2%~5%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,发酵24~72h后,得到红毛藻-徳氏乳杆菌发酵液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵液、红毛藻-植物乳杆菌发酵液和紫菜-植物乳杆菌发酵液;
(5)将步骤(4)的四种发酵液离心、过滤,去除藻渣和乳杆菌菌体,得到四种发酵上清液,分析四种发酵上清液对脂肪酶酶活力的抑制率。
根据本发明实施例的一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法,该方法获得的四种红藻-乳杆菌发酵液均对胰脂肪酶酶活具有较高的抑制活性,其中徳氏乳杆菌发酵红毛藻后获得的发酵液对胰脂肪酶的抑制效果最好,对胰脂肪酶的抑制率高达93.6%,最具有降脂活性;从而可提高海洋红藻原有的生物活性与营养价值,明确加工技术,探明具有最佳的脂肪酶抑制效果的海洋红藻-乳杆菌组合,开发具有辅助降血脂活性的海藻健康食品,促进海藻深加工产品的多元化和加工技术的多层次化,推动我国海藻精深产业的快速发展。
根据本发明实施例提出的一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法,还包括以下特征:
可选地,步骤(4)中,德氏乳杆菌菌液和植物乳杆菌菌液的活菌数为1×106~3×1010CFU/g。
可选地,步骤(5)中,四种红藻-乳杆菌发酵上清液组合中对脂肪酶酶活力抑制效果最好的是红毛藻-德氏乳杆菌发酵液,其次为紫菜-植物乳杆菌发酵液。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1为根据本发明实施例的红毛藻-乳杆菌发酵期间多酚含量的变化;
图2为根据本发明实施例的紫菜-乳杆菌发酵期间多酚含量的变化;
图3为根据本发明实施例的红毛藻-乳杆菌发酵期间黄酮含量的变化;
图4为根据本发明实施例的紫菜-乳杆菌发酵期间黄酮含量的变化;
图5为根据本发明实施例的红藻-乳杆菌发酵液对胰脂肪酶的抑制率;
图6为根据本发明实施例的两种红藻自然发酵作为对照组在不同浓度情况下对脂肪酶的抑制率;
图7为根据本发明实施例的德氏乳杆菌发酵两种红藻作为对照在不同浓度情况下对脂肪酶的抑制率;
图8为根据本发明实施例的植物乳杆菌发酵两种红藻作为对照在不同浓度情况下对脂肪酶的抑制率。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的技术方案。应理解,本发明提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤;还应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。而且,除非另有说明,各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具,而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围,其相对关系的改变或调整,在无实质变更技术内容的情况下,当亦视为本发明可实施的范畴。
为了更好的理解上述技术方案,下面更详细地描述本发明的示例性实施例。虽然显示了本发明的示例性实施例,然而应当理解,可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反,提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明,并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。
本发明采用的试材皆为普通市售品,皆可于市场购得。
胰脂肪酶(20000U/mg,源于猪胰腺,西格玛奥德里奇(上海)有限公司);对硝基苯酚(PNP,分析纯,国药集团化学试剂有限公司);4-硝基苯棕榈酸酯(PNPP,BR,西格玛奥德里奇(上海)有限公司);其余化学试剂均为分析纯。
下面参考具体实施例,对本发明进行描述,需要说明的是,这些实施例仅仅是描述性的,而不以任何方式限制本发明。
实施例1
挑选新鲜红毛藻和紫菜将其洗净后分别放入烘箱,60℃下干燥至恒重;将处理好的红毛藻和紫菜分别与纯净水以1:100的料液比(g/mL)混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液。
分别在红毛藻溶液和紫菜溶液中加入2%(葡萄糖与水的比例为2:100)的葡萄糖,然后升温到65℃保持30min进行灭菌;之后,将红藻悬浊溶液和紫菜溶液降温至37℃以下,再向红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加5%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,在37℃下静止发酵72h;得到四种红藻-乳杆菌发酵溶液:红毛藻-徳氏乳杆菌发酵溶液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵溶液、红毛藻-植物乳杆菌发酵溶液和紫菜-植物乳杆菌发酵溶液。
将四种红藻-乳杆菌发酵溶液在4000rpm转速下离心20min后,去除藻渣和乳杆菌菌体,经2μm膜过滤,获得四种红藻-乳杆菌发酵上清液。
实施例2
挑选新鲜红毛藻和紫菜将其洗净后分别放入烘箱,60℃下干燥至恒重;将处理好的红毛藻和紫菜分别与纯净水以2:100的料液比(g/mL)混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液。
分别在红毛藻溶液和紫菜溶液中加入4%的葡萄糖,然后升温到60℃保持30min进行灭菌;之后,将红藻悬浊溶液和紫菜溶液降温至37℃以下,再向红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加3%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,在37℃下静止发酵48h;得到四种红藻-乳杆菌发酵溶液:红毛藻-徳氏乳杆菌发酵溶液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵溶液、红毛藻-植物乳杆菌发酵溶液和紫菜-植物乳杆菌发酵溶液。
将四种红藻-乳杆菌发酵溶液在4000rpm转速下离心20min后,去除藻渣和乳杆菌菌体,经2μm膜过滤,获得四种红藻-乳杆菌发酵上清液。
实施例3
挑选新鲜红毛藻和紫菜将其洗净后分别放入烘箱,60℃下干燥至恒重;将处理好的红毛藻和紫菜分别与纯净水以3:100的料液比(g/mL)混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液。
分别在红毛藻溶液和紫菜溶液中加入5%的葡萄糖,然后升温到65℃保持30min进行灭菌;之后,将红藻悬浊溶液和紫菜溶液降温至37℃以下,再向红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加5%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,在37℃下静止发酵48h;得到四种红藻-乳杆菌发酵溶液:红毛藻-徳氏乳杆菌发酵溶液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵溶液、红毛藻-植物乳杆菌发酵溶液和紫菜-植物乳杆菌发酵溶液。
将四种红藻-乳杆菌发酵溶液在4000rpm转速下离心20min后,去除藻渣和乳杆菌菌体,经2μm膜过滤,获得四种红藻-乳杆菌发酵上清液。
实施例4
挑选新鲜红毛藻和紫菜将其洗净后分别放入烘箱,60℃下干燥至恒重;将处理好的红毛藻和紫菜分别与纯净水以1:100的料液比(g/mL)混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液。
分别在红毛藻溶液和紫菜溶液中加入2%的葡萄糖,然后升温到60℃保持30min进行灭菌;之后,将红藻悬浊溶液和紫菜溶液降温至37℃以下,再向红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加5%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,在37℃下静止发酵48h;得到四种红藻-乳杆菌发酵溶液:红毛藻-徳氏乳杆菌发酵溶液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵溶液、红毛藻-植物乳杆菌发酵溶液和紫菜-植物乳杆菌发酵溶液。
将四种红藻-乳杆菌发酵溶液在4000rpm转速下离心20min后,去除藻渣和乳杆菌菌体,经2μm膜过滤,获得四种红藻-乳杆菌发酵上清液。
试验例
为了使实验结果更具有说服力,该试验例还使用两种红藻的未发酵溶液(UNFER)、德氏乳杆菌菌液(LD)及植物乳杆菌菌液(LP)进行实验,排除藻本身及菌本身的影响。
1、多酚含量测定
采用Folin-Ciocalteu测定样品中的总多酚含量。将准确称取的0.1g没食子酸用蒸馏水定容至100mL,得浓度1000μg/mL的没食子母液,分别取母液0、1、2、3、4、5mL于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,配制质量浓度为0、10、20、30、40、50μg/mL的系列标准溶液。取1mL标准液于10mL容量瓶,加入福林酚显色剂1mL及7.5%Na2CO33mL后,用蒸馏水定至10mL,混匀,避光反应2h,波长765nm处测定吸光度。分别以没食子酸质量浓度和吸光度为横纵坐标,制作标准曲线:Y=0.1042X+0.0589,R2=0.9998,其中Y值为吸光度,X值为没食子酸标准溶液浓度(μg/mL)。每个样品平行测定3次,总多酚含量表示为每毫升发酵上清液相当于没食子酸的毫克数。
结果如图1和图2所示,其中,UNFER表示未发酵组,LDFER表示德氏乳杆菌发酵组,LPFER表示植物乳杆菌发酵组。实施例1中四种红藻-乳杆菌组合发酵后多酚含量显著提升。其中红毛藻-徳氏乳杆菌上清液中多酚含量最为丰富。多酚不仅有强抗氧化能力,还可以有效地预防高脂食物在人体内产生的衍生物对人体产生不利的影响,所以富含多酚的四种红藻-乳杆菌发酵上清液可供患有肥胖症、高血脂或高血糖以及脂质代谢障碍等人群服用。也为后续开发红藻功能性食品提供参考。
2、黄酮含量测定
采用亚硝酸钠-硝酸铝法测定样品中的总黄酮含量。称取芦丁10.0mg,用无乙醇定容至50mL,获得0.1mg/mL芦丁母液,分别取0、1、2、3、4、5mL芦丁母液依次加入25mL比色管中,用蒸馏水稀释体积至10mL,摇匀加入1mL 5%的亚硝酸钠,摇匀后静置6min;加入1mL10%的硝酸铝,摇匀后静置6min,再加入5mL1 mol/mL的氢氧化钠,无水乙醇定容至25mL,振荡摇匀于510nm下测定吸光值。分别以芦丁溶液浓度和吸光度为横纵坐标,吸光为纵坐标,制作标准曲线:Y=0.0056X+0.0483,R2=0.9996,其中Y值为吸光度,X值为芦丁标准溶液浓度(μg/mL)。所有样品都平行测定3次,黄酮含量表示为每毫升发酵上清液相当于芦丁的毫克数。
结果如图3和图4所示,四种红藻-乳杆菌组合发酵后黄酮含量显著提升。黄酮可以改善血液循环,降胆固醇、降血糖等功效,这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率,也可改善心脑血管疾病的症状。四种红藻-乳杆菌组合中黄酮的提高更有利于患有高血脂或高血糖以及脂质代谢障碍等人群服用。
3、胰脂肪酶抑制活性
红藻-乳杆菌发酵产物上清液:从实施例2四种红藻-乳杆菌发酵上清液中,精密吸取1mL的发酵液在Tris-HCl缓冲液中进行对半稀释,反应体系中乳杆菌发酵红藻溶液的终浓度为0%、0.125%、0.25%、0.5%、1%。
各取50μL样品和胰脂肪酶液混合,置于37℃水浴锅中温育10min,再向其中添加100μL底物溶液起始反应,在37℃下反应10min后,于405nm波长下测定其吸光度值。以奥利司他(Orlistat)作为阳性对照,以同样体积Tris-HCl代替发酵液作为空白对照,每组实验体系设定3个平行实验。实验体系如下表1:
结果如图5所示,实施例2中四种红藻-乳杆菌组合均对胰脂肪酶有抑制活性。其中抑制效果最好的是红毛藻-徳氏乳杆菌组合,对胰脂肪酶的抑制率高达95.3%,其次是紫菜-植物乳杆菌组合,对胰脂肪酶的抑制率高达90.8%。阳性对照组奥利司他半抑制浓度IC50为1.31ug/mL。
结合图6-图8,随着样品浓度的增大,实施例2中四种红藻-乳杆菌(组合对胰脂肪酶抑制率逐渐增大,呈现出明显的剂量依赖性。胰脂肪酶被认为是脂肪分解代谢关键酶,能够催化甘油三酯水解为2-单酰甘油和脂肪酸。食物中的脂肪通常只有被胰脂酶水解后才能进一步被机体吸收。适当抑制胰脂肪酶活性,可以阻碍脂肪的消化吸收,从而达到预防或辅助治疗高血脂、高血糖或肥胖症的目的。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不应理解为必须针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例进行接合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (3)
1.一种抑制胰脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法,其特征在于,包括:
(1)挑选新鲜红毛藻和紫菜洗净,干燥至恒重;
(2)将所述红毛藻和所述紫菜分别与纯净水以1:100~3:100的比例混合得到红毛藻溶液和紫菜溶液;
(3)在所述红毛藻溶液和所述紫菜溶液中加入2%~5%的葡萄糖,于60℃~65℃下灭菌30min后,降温至37℃以下;
(4)向步骤(3)处理后的红毛藻溶液和紫菜溶液中分别添加2%~5%的德氏乳杆菌菌液或植物乳杆菌菌液作为发酵剂,发酵24~72h后,得到红毛藻-徳氏乳杆菌发酵液、紫菜-徳氏乳杆菌发酵液、红毛藻-植物乳杆菌发酵液和紫菜-植物乳杆菌发酵液;
(5)将步骤(4)的四种发酵液离心、过滤,去除藻渣和乳杆菌菌体,得到四种发酵上清液,分析四种发酵上清液对脂肪酶酶活力的抑制率。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)中,德氏乳杆菌菌液和植物乳杆菌菌液的活菌数为1×106~3×1010CFU/g。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,四种红藻-乳杆菌发酵上清液组合中对脂肪酶酶活力抑制效果最好的是红毛藻-德氏乳杆菌发酵液,其次为紫菜-植物乳杆菌发酵液。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110719698.2A CN113383917A (zh) | 2021-06-28 | 2021-06-28 | 一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110719698.2A CN113383917A (zh) | 2021-06-28 | 2021-06-28 | 一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113383917A true CN113383917A (zh) | 2021-09-14 |
Family
ID=77624212
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110719698.2A Pending CN113383917A (zh) | 2021-06-28 | 2021-06-28 | 一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113383917A (zh) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003000201A (ja) * | 2001-06-25 | 2003-01-07 | Fisheries Research Agency | 海藻発酵食品およびその製造方法 |
CN107200785A (zh) * | 2017-07-19 | 2017-09-26 | 集美大学 | 一种调血脂活性多糖的制备方法 |
CN109221878A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-01-18 | 青岛海思达生物科技有限公司 | 一种紫菜发酵物及其在制备抗氧化剂中的应用 |
CN111743150A (zh) * | 2020-07-21 | 2020-10-09 | 集美大学 | 一种海带酵素及其制备方法 |
CN111772182A (zh) * | 2020-07-21 | 2020-10-16 | 集美大学 | 一种海藻酵素及其制备方法 |
-
2021
- 2021-06-28 CN CN202110719698.2A patent/CN113383917A/zh active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003000201A (ja) * | 2001-06-25 | 2003-01-07 | Fisheries Research Agency | 海藻発酵食品およびその製造方法 |
CN107200785A (zh) * | 2017-07-19 | 2017-09-26 | 集美大学 | 一种调血脂活性多糖的制备方法 |
CN109221878A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-01-18 | 青岛海思达生物科技有限公司 | 一种紫菜发酵物及其在制备抗氧化剂中的应用 |
CN111743150A (zh) * | 2020-07-21 | 2020-10-09 | 集美大学 | 一种海带酵素及其制备方法 |
CN111772182A (zh) * | 2020-07-21 | 2020-10-16 | 集美大学 | 一种海藻酵素及其制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
时瑞等: "海藻乳酸菌发酵的研究进展", 食品工业科技, pages 1 - 10 * |
杨会成等: "海藻中多酚类化学成分及其生物活性研究进展", 中国海洋药物, vol. 26, no. 5, pages 53 - 59 * |
董玉婷等: "乳杆菌发酵提高坛紫菜(Porphyra haitanensis)的抗氧化和抑制糖脂代谢关键酶活性", 食品科学, pages 1 - 20 * |
詹慧等: "基于酶活力模型和细胞模型分析红毛藻多糖降血脂活性", 《食品科学》, vol. 1, pages 112 - 12 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109105752B (zh) | 一种豆瓣甜瓣子分阶段快速发酵的方法 | |
CN112457999B (zh) | 一种富硒酿酒酵母菌株及其应用 | |
CN109288014B (zh) | 一种白果冠突散囊菌液态发酵的方法及其制备的产品和应用 | |
CN108410745B (zh) | 一株酿酒酵母及其在葡萄酒酿造中的应用 | |
CN114052153B (zh) | 一种多功能发酵饮料及其制备方法 | |
CN109568518B (zh) | 中药混合菌固体发酵的方法和所得到的发酵中药及其应用 | |
CN112245343B (zh) | 灵芝发酵牛蒡根的方法、复合发酵牛蒡根的方法及发酵产品和应用 | |
CN113383917A (zh) | 一种抑制脂肪酶活性的红藻-乳杆菌发酵液的制备方法 | |
CN109609393B (zh) | 一种饲用异常威克汉姆酵母及其应用 | |
CN111388515A (zh) | 红曲霉液态发酵人参的方法及人参发酵产物和用途 | |
CN113604385B (zh) | 具有降解黄油能力的德氏乳杆菌及其应用 | |
CN113367230A (zh) | 一种高消化率乳酸片球菌发酵湿豆粕及其制备方法 | |
CN113025508B (zh) | 一种布拉迪酵母及其在降解呕吐毒素方面的应用 | |
CN111264646A (zh) | 一种普洱茶发酵技术 | |
CN115058305B (zh) | 一种益生菌米酒曲的制备方法及其应用 | |
CN117223808B (zh) | 一种高产γ-氨基丁酸的二联活菌发酵饮料 | |
CN116004742B (zh) | 一种乳酸菌固态发酵提高大麦麸皮β-葡聚糖、多酚含量的方法、及发酵产物的应用 | |
CN114365809B (zh) | 一种富含皂苷的人参发酵饮料及其制备方法 | |
CN114651983B (zh) | 一种源于虾酱的具有降尿酸及抗氧化能力的凝结芽孢杆菌、方法及应用 | |
CN117448178B (zh) | 一种紫红曲霉cewl18及其在制备护肝产品中的应用 | |
CN114875104B (zh) | 一种桑叶酵素原液及其制备方法和应用 | |
CN110643532B (zh) | 油脂降解的副干酪乳杆菌及其应用 | |
CN116144543A (zh) | 益生菌gr-5及其在生产低嘌呤啤酒中的应用 | |
CN117448175A (zh) | 一种根霉菌及其制备铁皮石斛米酒的方法 | |
CN117264780A (zh) | 一种复合菌剂及其在生产中草药米酒中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |