CN111388515A - 红曲霉液态发酵人参的方法及人参发酵产物和用途 - Google Patents

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CN111388515A CN202010192169.7A CN202010192169A CN111388515A CN 111388515 A CN111388515 A CN 111388515A CN 202010192169 A CN202010192169 A CN 202010192169A CN 111388515 A CN111388515 A CN 111388515A
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Abstract

本发明公开了一种红曲霉液态发酵人参的方法及人参发酵产物和用途。该红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.25～2.5wt％；(2)将所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为140～190rmp，发酵时间为5～7d，得到人参发酵产物；其中，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的2～5vol％。本发明的发酵工艺简单，且可以大大提高洛伐他汀的产量。

Description

红曲霉液态发酵人参的方法及人参发酵产物和用途
技术领域
本发明涉及一种红曲霉液态发酵人参的方法及人参发酵产物和用途。
背景技术
人参为五加科多年生草本植物，2012年卫生部批准人参(5年及5年以下人工种植的人参)作为新资源食品。现代医学证明人参具有广泛的药理作用，如抗肿瘤，降血脂，改善心血管疾病等。
红曲霉属药食两用真菌，因能产生丰富的色素在我国发酵食品行业应用已有千年历史。由红曲霉发酵而来的中药红曲，具有活血化瘀、消食降脂的功效。红曲霉发酵可产生多种次级代谢产物，如红曲色素、莫纳可林K(又称洛伐他汀)等，其中洛伐他汀是胆固醇合成途径中羟甲基戊二酰单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶的抑制剂，可有效抑制血浆胆固醇的合成。
双向发酵技术是一种新型发酵手段，即利用有益药用真菌发酵具有活性成分的中药材(称为药性基质)，具有增效、扩用、解毒、持效等作用。
CN102319278A公开了一种能调压、调脂，改善动脉硬化、冠心病、脑栓塞的红曲复方制剂，是用下述工艺制备的产品，具体工艺步骤如下：(1)制备人参、银杏液态发酵液：制备工艺步骤为：将人参、银杏叶按1:8-16的重量份数加入自来水，常温浸泡0.5-2小时，然后加热至70-100℃，保温1-3小时，之后，过滤；将滤出的液体投入发酵罐中，采取流加发酵方法，得出人参、银杏叶液态发酵液；(2)菌种的培养：16-20g红曲霉9901菌或9906菌株液态培养种子，用步骤(1)所得的人参发酵液45-48g、银杏叶发酵液45-48g及谷物原料大米16-20g加等量水制成固态培养基，接入8-10％菌株液态培养种子后，在25-32℃，60-90％的湿度的条件下，经过2-3周时间固态发酵，初步得出红曲霉菌种；(3)菌种制备：将80-100ml 3-10°Be的麦芽汁或土豆汁，1-5g糖和1-3g琼脂混匀，分装于5-10个培养皿中，在121℃下灭菌30分钟，制成平板，然后划线接种步骤(2)所得的红曲霉菌种，在20-35℃温度下培养4-10天，得纯红曲霉菌种，4℃以下保存备用；(4)菌种扩大培养：菌种扩大培养液由160-200ml 2-5°Be的麦芽汁或土豆汁、2-5g葡萄糖、6-8g牛肉膏、0.2-0.5gNH4NO3、0.2-0.5gMgSO4、1-4g蛋白胨、搅匀后在121℃下灭菌30分钟，冷却至室温，转移接种1-2个步骤(3)制得的平板上的纯红曲霉菌种，20-37℃温度下摇床培养2-5天；(5)制备固体发酵营养液：营养液由80-100ml1-10°Be的麦芽汁或土豆汁、4-10g葡萄糖，2-10g酵母粉，2-6g蛋白胨，2-6g牛肉膏、1-10mg硒、0.1-0.4g克KH2PO4组成；(6)固体发酵：取45-50g人参发酵液、45-50g银杏叶发酵液、16-20g普通谷物大米，加入10-24ml步骤(5)制得的上述固体发酵营养液，在121℃下灭菌60分钟，接种15-30ml步骤(4)制得的扩大培养的菌种，20-35℃下培养6-8天；(7)终止固体发酵：将发酵后的固体培养物，经121℃蒸汽灭菌、烘干、粉碎、混匀，得到红曲细粉；(8)制剂制备：将步骤(7)制得的红曲细粉按相应的制剂制备工艺制成胶囊、片剂、粉剂或软胶囊。每100g制剂中至少含洛伐他汀2000mg。上述专利文献首先制备人参、银杏液态发酵液，然后采用红曲霉对人参、银杏液态发酵液进行固体发酵，发酵需经过液态发酵与固体发酵，导致发酵工艺繁琐。
发明内容
有鉴于此，本发明的一个目的在于提供一种红曲霉液态发酵人参的方法，该发酵工艺简单，且可以大大提高洛伐他汀的产量。
本发明的另一个目的在于提供上述方法得到的人参发酵产物，其洛伐他汀含量高，还可以与胆酸盐结合以达到良好的降血脂效果。
本发明的再一个目的在于提供上述人参发酵产物用于制备治疗高血脂药物中的用途。
本发明的又一个目的在于提供上述人参发酵产物用于制备降低胆酸盐药物中的用途。
本发明采用如下技术方案实现上述目的。
一方面，本发明提供一种红曲霉液态发酵人参的方法，该方法包括如下步骤：
(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.25～2.5wt％；
(2)将所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为140～190rmp，发酵时间为5～7d，得到人参发酵产物；其中，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的2～5vol％。
根据本发明的方法，优选地，所述人参匀浆中人参添加量为1.5～2.5wt％。
根据本发明的方法，优选地，所述发酵温度为28～32℃。
根据本发明的方法，优选地，所述摇床转速为160～180rmp。
根据本发明的方法，优选地，所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液。
根据本发明的方法，优选地，所述人参匀浆中人参添加量为2wt％，所述发酵温度为30℃，所述摇床转速为160rmp。
根据本发明的方法，优选地，发酵时间为6～6.5d。
另一方面，本发明提供一种人参发酵产物，其采用如上所述的方法制备得到。
再一方面，本发明提供上述人参发酵产物在用于制备治疗高血脂药物中的用途。
又一方面，本发明提供上述人参发酵产物在用于制备降低胆酸盐药物中的用途。
本发明的红曲霉液态发酵人参的方法，发酵工艺简单，且可以大大提高洛伐他汀的产量。本发明的人参发酵产物与胆酸盐结合率高，从而达到降血脂和降低胆酸盐的目的。
附图说明
图1为人参发酵清液、考来烯胺分别与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合率。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
本发明利用红曲霉直接液态发酵人参得到人参发酵产物，该发酵工艺简单，且可以大大提高洛伐他汀的产量；该人参发酵产物不仅可以大大提高洛伐他汀的产量，还可以用于与胆酸盐结合以达到良好的降血脂和降低胆酸盐的效果。
<红曲霉液态发酵人参的方法>
本发明的红曲霉液态发酵人参的方法，包括如下步骤：(1)人参灭菌液的制备步骤；(2)发酵步骤。
在步骤(1)中，将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.25～2.5wt％。人参优选为3～5年干人参。人参匀浆可以采用如下方法制得：将人参干品浸泡1～2h，将浸泡后的人参干品切成2cm×2cm左右的小块，加水后采用匀浆机制备得到。人参匀浆中人参添加量优选为1.5～2.5wt％，更优选为1.8～2wt％。制备人参匀浆的水优选为去离子水。灭菌优选用高压蒸汽法进行灭菌。灭菌条件优选为：温度为110～130℃，时间为10～30min；更优选为：温度为115～125℃，时间为15～25min。
在步骤(2)中，所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为140～190rmp，发酵时间为5～7d，得到人参发酵产物。发酵时间优选为5.5～6.5d，更优选为6～6.5d。发酵温度优选为28℃～32℃，更优选为30～31℃。摇床转速优选为160～180rmp，更优选为160～165rmp。红曲霉种子液的接种量可以为人参灭菌液的体积的2～5vol％；优选为人参灭菌液的体积的3～4vol％；更优选为人参灭菌液的体积的3～3.5vol％。
红曲霉(Monascus ruber)可以购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC 3.4450，保藏日期：1983年1月12日，保藏地点：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。红曲霉种子液优选为采用PDA液体培养基(马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基)制备得到。在某些实施方式中，将PDA琼脂平板上活化好的红曲霉菌体接种于PDA液体培养基中，在摇床上培养4～6d，得到红曲霉种子液；摇床的转数为150～160rmp，培养温度为28～30℃。PDA液体培养基可以为市售的PDA液体培养基。在某些实施方式中，PDA液体培养基由2～2.6wt％的马铃薯葡萄糖粉末、1.2～1.5wt％的蛋白胨、0.2～0.3wt％的KH2PO4、0.1～0.15wt％的MgSO4、含量为7～10mg/L的维生素B1和余量的水组成。
根据本发明的红曲霉液态发酵人参的方法，优选地，红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.25～2.5wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为140～190rmp，发酵时间为5～7d，得到人参发酵产物；其中，所述红曲霉(Monascus ruber)保藏编号为：CGMCC 3.4450；所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液；红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的2～5vol％。上述利用红曲霉直接液态发酵人参的方法，不仅发酵工艺简单，且可以大大提高洛伐他汀的产量。
根据本发明的红曲霉液态发酵人参的方法，更优选地，红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.5～2.5wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在28～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为160～180rmp，发酵时间为6～6.5d，得到人参发酵产物；其中，所述红曲霉(Monascus ruber)，保藏编号为：CGMCC 3.4450；所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液；红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3～4vol％。上述利用红曲霉直接液态发酵人参的方法，不仅发酵工艺简单，且可以更有效地大大提高洛伐他汀的产量。
根据本发明优选的实施方式，红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.8～2wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在30～31℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为160～165rmp，发酵时间为6～6.2d，得到人参发酵产物；其中，所述红曲霉(Monascus ruber)，保藏编号为：CGMCC 3.4450；所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液；红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3～3.2vol％。上述利用红曲霉直接液态发酵人参的方法，不仅发酵工艺简单，且可以更有效地大大提高洛伐他汀的产量。
根据本发明的一个具体实施方式，红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为2wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在30℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为6d，得到人参发酵产物；其中，所述红曲霉(Monascusruber)，保藏编号为：CGMCC 3.4450；所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液；红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3vol％。上述利用红曲霉直接液态发酵人参的方法，不仅发酵工艺简单，且可以更有效地大大提高洛伐他汀的产量。
<人参发酵产物>
本发明的人参发酵产物是以人参作为底物，以红曲霉作为菌种发酵得到的。具体地，本发明的人参发酵产物是通过上述红曲霉液态发酵人参的方法制备得到的。本发明的人参发酵产物中洛伐他汀的含量为10～110μg/g，优选为25～105μg/g，更优选为90～100μg/g。本发明的人参发酵产物不仅可以大大提高洛伐他汀的产量，还可以用于分别与胆酸盐结合以达到良好的降血脂效果。
<人参发酵产物的用途>
本发明提供了上述人参发酵产物在用于制备治疗高血脂药物中的用途。本发明还提供了上述人参发酵产物在用于制备降低胆酸盐药物中的用途。
本发明的人参发酵产物通过与胆酸盐结合从而达到降低血脂和胆酸盐的效果。本发明中所述的胆酸盐包括但不限于牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠。优选为牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠。
本发明的人参发酵产物与牛磺胆酸钠的结合率可以为75％以上，优选为77％以上。人参发酵产物与脱氧胆酸钠的结合率可以为70％以上，优选为71％以上。人参发酵产物与胆酸钠的结合率可以为22％以上，优选为26％以上。根据本发明的一个具体实施方式，人参发酵产物与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合率分别为77.86％、71.32％和26.01％。人参发酵产物与牛磺胆酸钠的结合效果比人参发酵产物与胆酸钠的结合效果更好。人参发酵产物与脱氧胆酸钠的结合效果比人参发酵产物与胆酸钠的结合效果更好。人参发酵产物与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠均具有较好的结合效果，人参发酵产物具有良好的降脂效果。
以下实施例与实验例采用的实验试剂、仪器以及检测指标如下：
人参为5年生干人参。
红曲霉(Monascus ruber)购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号为CGMCC3.4450，保藏日期：1983年1月12日，保藏地点：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液。
胃蛋白酶的盐酸溶液：采用浓度为0.01mol/L的盐酸配制胃蛋白酶的盐酸溶液。
胰蛋白酶的磷酸缓冲溶液：采用pH为6.3、浓度为0.1mol/L的磷酸缓冲液配制胰蛋白酶的磷酸缓冲溶液。
0.3mmol/L的牛磺胆酸钠溶液：采用pH为6.3的0.1mol/L磷酸缓冲液加牛磺胆酸钠配制成0.3mmol/L的牛磺胆酸钠溶液。
0.3mmol/L的脱氧胆酸钠溶液：采用pH为6.3的0.1mol/L磷酸缓冲液加脱氧胆酸钠配制成0.3mmol/L的脱氧胆酸钠溶液。
0.3mmol/L的胆酸钠溶液：采用pH为6.3的0.1mol/L磷酸缓冲液加胆酸钠配制成0.3mmol/L的胆酸钠溶液。
高压蒸汽法灭菌设备为立式压力蒸汽灭菌器BXM-30R，购自上海博讯实业有限公司。
制备例1红曲霉种子液的制备
红曲霉种子液的制备方法包括如下步骤：将马铃薯葡萄糖粉末、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4、维生素B1(VB1)加去离子水溶解，121℃高温高压灭菌20min，得到PDA液体培养基，PDA液体培养基中马铃薯葡萄糖粉末含量为2.6wt％、蛋白胨含量为1.5wt％、KH2PO4含量为0.3wt％、MgSO4含量为0.15wt％、维生素B含量为10mg/L；取大小为1×1cm PDA琼脂平板上活化好的红曲霉菌体，接种于PDA液体培养基中，置于温度28℃，转数160rpm的摇床上培养6d，得到红曲霉种子液。
实施例1
红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参干品用水浸泡2h，将浸泡后的人参干品切成2cm×2cm左右的小块，加水后采用匀浆机制备得到人参匀浆。用高压蒸汽法对人参匀浆进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.88wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3vol％，在30℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为6d，得到人参发酵产物。
实施例2
红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参干品用水浸泡2h，将浸泡后的人参干品切成2cm×2cm左右的小块，加水后采用匀浆机制备得到人参匀浆。用高压蒸汽法对人参匀浆进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为2.5wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3vol％，在32℃下进行摇床发酵，摇床转速为180rmp，发酵时间为6d，得到人参发酵产物。
实施例3
红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参干品用水浸泡2h，将浸泡后的人参干品切成2cm×2cm左右的小块，加水后采用匀浆机制备得到人参匀浆。用高压蒸汽法对人参匀浆进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.5wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3vol％，在28℃下进行摇床发酵，摇床转速为140rmp，发酵时间为6d，得到人参发酵产物。
实施例4
红曲霉液态发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参干品用水浸泡2h，将浸泡后的人参干品切成2cm×2cm左右的小块，加水后采用匀浆机制备得到人参匀浆。用高压蒸汽法对人参匀浆进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为2wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的3vol％，在30℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为6d，得到人参发酵产物。
实施例5-8
实施例5-8除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。
实施例5-8的实验条件参见表1。
表1实施例5-8的实验条件
实施例编号 发酵温度/℃ 摇床转速/rmp
5 28 180
6 28 140
7 32 180
8 32 140
实施例9-12
实施例9-12除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。
实施例9-12的实验条件参见表2。
表2实施例9-12的实验条件
实施例编号 人参添加量/％ 摇床转速/rmp
9 2.5 140
10 2.5 180
11 1.25 140
12 1.25 180
实施例13-16
实施例13-16除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。实施例13-16的实验条件参见表3。
表3实施例13-16的实验条件
实施例编号 人参添加量/％ 发酵温度/℃
13 2.5 28
14 2.5 32
15 1.25 28
16 1.25 32
实验例1人参发酵产物的洛伐他汀含量测定
分别测定实施例1～16的人参发酵产物的洛伐他汀含量。实施例1～16的人参发酵产物的洛伐他汀含量参见表4。
表4人参发酵产物的洛伐他汀含量
实施例编号 人参发酵产物的洛伐他汀含量/(μg/g)
1 98.53
2 42.32
3 34.18
4 99.75
5 25.46
6 35.53
7 34.22
8 40.23
9 33.9
10 46.01
11 24.44
12 34.96
13 27.17
14 39.22
15 11.46
16 12.06
实验例2人参发酵产物对胆酸盐的结合作用
(1)胆酸盐标准曲线的制备
配制浓度为0.03mol/L、0.06mol/L、0.12mol/L、0.18mol/L、0.24mol/L、0.3mol/L、0.36mol/L的牛磺胆酸钠溶液；配制浓度为0.03mol/L、0.06mol/L、0.12mol/L、0.18mol/L、0.24mol/L、0.3mol/L、0.36mol/L的脱氧胆酸钠溶液；配制浓度为0.03mol/L、0.06mol/L、0.12mol/L、0.18mol/L、0.24mol/L、0.3mol/L、0.36mol/L的胆酸钠溶液。分别取1mL上述各浓度的牛磺胆酸钠溶液、上述各浓度的脱氧胆酸钠溶液、上述各浓度的胆酸钠溶液置于具塞试管中，分别加入3mL质量浓度为60％的硫酸，分别于70℃水浴20min，分别取出冰浴5min，在387nm处测定吸光度。以浓度X为横坐标，吸光度A为纵坐标，得回归方程为：牛磺胆酸钠Y1＝1.3613X+0.0685，R2＝0.9867；脱氧胆酸钠Y2＝1.4111X+0.0521，R2＝0.9985；胆酸钠Y3＝1.6244X+0.0561，R2＝0.9932。
(2)人参发酵产物对胆酸盐的结合作用
将实施例1的人参发酵产物离心，取上清后浓缩4倍，得到人参发酵清液。设置人参发酵清液为样品组。取3份1mL人参发酵清液(即3个样品)，分别加入1mL浓度为10mg/ml的胃蛋白酶的盐酸溶液，置于37℃180rpm的摇床中震荡1h；以0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH为6.3，随后分别加入4mL浓度为10mg/mL的胰蛋白酶的磷酸缓冲溶液，3个样品中分别加入4mL的0.3mmol/L的牛磺胆酸钠溶液、4mL的0.3mmol/L的脱氧胆酸钠溶液、4mL的0.3mmol/L的胆酸钠溶液。设置空白组中加入等体积的pH为6.3的0.1mol/L磷酸缓冲液。设置1mg/mL考来烯胺为阳性对照组。取3份1mg/mL考来烯胺(即3个阳性对照组)，分别加入1mL浓度为10mg/ml的胃蛋白酶的盐酸溶液，置于37℃180rpm的摇床中震荡1h；以0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH为6.3，随后分别加入4mL浓度为10mg/mL的胰蛋白酶的磷酸缓冲溶液，3个阳性对照组中分别加入4mL的0.3mmol/L的牛磺胆酸钠溶液、4mL的0.3mmol/L的脱氧胆酸钠溶液、4mL的0.3mmol/L的胆酸钠溶液。上述3个样品(人参发酵清液)、空白组、3个阳性对照组(考来烯胺)均在37℃、180rpm下恒温振荡2h；混合物分别转入离心管，4000rpm离心20min，分别取1mL上清，显色方法同上，分别在387nm处测定上清液中的胆酸盐含量。样品吸光度记为Aa，空白组吸光度标记为Ab，样品实际吸光度为A1＝Aa-Ab。根据公式计算吸附率，公式如下：
吸附率＝(C0-C1)/C0×100％
式中，C0为样品中原始胆酸盐的浓度(0.12mol/L)，C1为结合后胆酸盐浓度(即A1对应的浓度)。
人参发酵清液、考来烯胺分别与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合率参见图1。
由图1可知，人参发酵清液与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合率分别为77.86％、71.32％和26.01％。人参发酵清液与牛磺胆酸钠的结合效果比人参发酵清液与胆酸钠的结合效果更好。人参发酵清液与脱氧胆酸钠的结合效果比人参发酵清液与胆酸钠的结合效果更好。可见，人参发酵清液与牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠和胆酸钠均具有较好的结合效果，由此，人参发酵产物具有良好的降脂效果。
人参添加量对洛伐他汀产量的影响
除了人参匀浆中人参添加量之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量分别为0.71wt％、0.83wt％、1wt％、1.25wt％、1.67wt％、2.50wt％时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量，参见表9。
表9人参发酵产物的洛伐他汀含量
人参匀浆中人参添加量/wt％ 人参发酵产物的洛伐他汀含量/(μg/g)
0.71wt％ 5.05
0.83wt％ 5.20
1wt％ 7.59
1.25wt％ 17.83
1.67wt％ 33.17
2.50wt％ 19.30
发酵温度对洛伐他汀产量的影响
除了发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵温度分别为24℃、26℃、28℃、32℃时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量，参见表10。
表10人参发酵产物的洛伐他汀含量
发酵温度/℃ 人参发酵产物的洛伐他汀含量/(μg/g)
24 6.57
26 12.17
28 11.83
32 20.70
摇床转数对洛伐他汀产量的影响
除了摇床转数之外，其余条件与实施例1完全相同；摇床转数分别为100rmp、120rmp、140rmp、180rmp时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量，参见表11。
表11人参发酵产物的洛伐他汀含量
摇床转数/rmp 人参发酵产物的洛伐他汀含量/(μg/g)
100 43.20
120 46.84
140 38.24
180 59.77
人参添加量、发酵温度对洛伐他汀产量的影响
除了人参匀浆中人参添加量、发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量为1wt％、发酵温度为24℃，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量为6.3mg/g。
摇床转数、发酵温度对洛伐他汀产量的影响
除了摇床转数、发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；摇床转数为100rmp、发酵温度为24℃，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量为6.7mg/g。
人参添加量、摇床转数对洛伐他汀产量的影响
除了人参匀浆中人参添加量、摇床转数之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量为1wt％、摇床转数为100rmp，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的洛伐他汀含量为6.5mg/g。
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。

Claims (10)

1.一种红曲霉液态发酵人参的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将人参干品加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为1.25～2.5wt％；
(2)将所述人参灭菌液冷却后接种红曲霉种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为140～190rmp，发酵时间为5～7d，得到人参发酵产物；其中，红曲霉种子液的接种量为人参灭菌液的体积的2～5vol％。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人参匀浆中人参添加量为1.5～2.5wt％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵温度为28～32℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述摇床转速为160～180rmp。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述红曲霉种子液为采用PDA液体培养基制备的红曲霉种子液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人参匀浆中人参添加量为2wt％，所述发酵温度为30℃，所述摇床转速为160rmp。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵时间为6～6.5d。
8.一种人参发酵产物，其特征在于，采用如权利要求1～7任一项所述的红曲霉液态发酵人参的方法制备得到。
9.一种权利要求8所述的人参发酵产物在用于制备治疗高血脂药物中的用途。
10.一种权利要求8所述的人参发酵产物在用于制备降低胆酸盐药物中的用途。
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