CN113358870B - Orm2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用 - Google Patents

Orm2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。本发明发现，ORM2蛋白对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景；ORM2蛋白联合前列腺特异性抗原(PSA)对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，二者联合诊断效果显著优于前列腺特异性抗原单独区分前列腺癌和良性前列腺增生的诊断效果，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景。

Description

ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂 盒中的应用
技术领域
本发明属于疾病检测诊断领域，涉及生物标志物在疾病诊断方面的应用，具体涉及ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
背景技术
前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是男性最常见的恶性肿瘤。近年来，随着人口老龄化和生活方式的改变，我国前列腺癌的发病率呈持续增长趋势。由于前列腺癌发病早期症状不明显，我国多数前列腺癌患者确诊时已发生局部进展或远处转移，导致预后较差。尽管前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)已经广泛应用于前列腺癌的早期诊断，但是非肿瘤状态如良性前列腺增生(benignprostatic hyperplasia,BPH)患者也会出现血浆PSA水平的升高。PSA因其特异性欠佳，常导致过度诊断，难以满足临床需求。因此，寻找其他理想的生物标志物结合PSA进行联合诊断，提高PSA在前列腺癌与良性前列腺增生中的鉴别能力，是促进实现前列腺癌精准筛检工作的关键。
血浆中富含多种蛋白质，广泛地参与机体免疫、凝血、生长信号以及营养等多个生物学过程。许多疾病可导致血浆蛋白表达数量和结构的改变，该变化对于疾病的诊断具有重要的意义。近年来，随着蛋白质组学的迅速发展，揭示了多个血浆蛋白可作为肿瘤诊断的潜在标志物，成为寻找疾病诊断标志物的重要途径。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
ORM2蛋白联合前列腺特异性抗原(PSA)在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
一种诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒，含有检测ORM2蛋白的试剂。
一种诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒，含有检测ORM2蛋白和前列腺特异性抗原(PSA)的试剂。
有益效果：
1、本发明发现，ORM2蛋白对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景；
2、本发明发现，ORM2蛋白联合PSA对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，二者联合的诊断效果显著优于PSA单独区分前列腺癌和良性前列腺增生的诊断效果，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景。
附图说明
图1为血浆ORM2蛋白在前列腺癌与良性前列腺增生患者中的表达差异；
图2为验证集1构建ORM2及其与PSA联合诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的ROC曲线和诊断阈值(cutoff)；
图3为验证集2验证ORM2及其与PSA联合诊断分前列腺癌与良性前列腺增生患者的准确率。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
实施例1：对前列腺癌和良性前列腺增生的诊断区分效能
一、实验样本
测试集样本包括38例前列腺癌患者与41例前列腺增生患者(来自常州市第一人民医院)。验证集样本包括两个中心的样本，其中：验证集1来自宜兴市人民医院，包括12例前列腺癌患者与30例前列腺增生患者；验证集2来自常州市第一人民医院，包括183例前列腺癌患者与235例前列腺增生患者。
入组标准：前列腺癌患者为经病理组织确诊且未经放疗或化疗的前列腺癌病例；前列腺增生患者为经穿刺活检证实为良性病变的前列腺增生病例。
排除标准：①不符合前列腺癌与良性前列腺增生的相关诊断标准；②伴有其他前列腺疾病，如前列腺炎；③患者合并有其他严重肝、肾、心肺以及造血系统等疾病者。
二、实验方法
1、血浆样本的采集和储存
使用真空抗凝(EDTA)采血管收集研究对象外周静脉血5mL，静置2小时后，4,000rpm离心20分钟，使血细胞和血浆分离。然后置于2mL Eppendorf管，血浆置于-80℃长期储存。
2、ORM2蛋白的含量测定
采用应用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测ORM2蛋白在前列腺癌与良性前列腺增生患者血浆中含量。ELISA试剂盒购自CLOUD-CLONECORP.WUHAN(No.SEB780Hu)。根据试剂盒说明书操作流程测定血浆ORM2的含量。具体的实验步骤如下：将标准品或样品加入96孔微孔板中，37℃温育1h，其中的ORM2与包被在微孔中的ORM2抗体结合；弃去液体，加入生物素化的ORM2抗体，37℃温育1h；弃去液体，并用洗涤液洗涤3次，洗去未结合的生物素化抗体；加入HRP(过氧化酶)标记的亲和素，37℃温育30min，使亲和素与生物素完全结合；弃去液体，洗涤液洗涤5次；加入TMB底物于37℃避光显色10-20min，TMB在HRP的催化下显蓝色；于450nm波长下测定吸光度，吸光度与ORM2蛋白含量成正比。
3、前列腺特异性抗原(PSA)的含量测定
严格按照PSA检测试剂盒流程操作检测PSA的含量。
4、数据处理方法
目标蛋白的表达量水平使用均数±标准差表示，并采用Student’s t-test检验比较不同组别之间的蛋白含量差异。通过绘制receiver operating characteristic(ROC)曲线，并计算曲线下面积(AUC)及其95％可信区间(confidence interval,CI)，评价ORM2蛋白对前列腺癌的诊断价值。AUC为0.5时，表示诊断无意义；AUC在0.5-0.7时，表示诊断准确性较低；AUC在0.7-0.9时，表示诊断准确性中等；AUC大于0.9时，表示有较高的诊断准确性。采用DeLong’stest比较不同模型的AUC是否有差异，以综合性地评价血浆ORM2作为前列腺癌诊断生物标志物的应用价值。
诊断评价指标的计算如下：
Figure BDA0003093993520000031
灵敏度也称为真阳性率，即实际有病且被诊断试验正确地判为有病的概率，灵敏度＝[a/(a+c)]×100％；
特异度也称为真阴性率，即实际无病，诊断试验正确地判为无病的概率，特异度＝[d/(b+d)]×100％。
三、实验结果
1、ORM2蛋白在不同疾病患者中的含量水平差异
在测试集中，与前列腺增生患者相比，前列腺癌患者血浆中的ORM2蛋白含量显著上调，测定结果如下表和图1所示。
Figure BDA0003093993520000041
2、ORM2蛋白单独诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的ROC曲线分析
在验证集1中，测定各患者血浆中ORM2蛋白的含量，绘制ROC曲线并计算曲线下面积(AUC)及其95％CI，评价ORM2蛋白对前列腺癌的诊断价值。ROC分析结果显示，在验证集1中，血浆ORM2诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的AUC值高达0.806(灵敏度为0.750，特异度为0.793)，最佳cutoff值为0.284，见图2。
3、ORM2蛋白联合PSA诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生
在验证集1中，测定各患者血浆中ORM2蛋白和PSA的含量，绘制ROC曲线，并计算AUC及其95％CI，评价ORM2蛋白联合PSA对前列腺癌的诊断价值。如图2所示，ROC分析结果表明在验证集1中，血浆ORM2蛋白联合PSA诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的AUC值高达0.922(灵敏度为0.875，特异度为0.897)，最佳cutoff值为0.310。采用DeLong’s test比较不同模型的AUC是否有差异，结果显示ORM2+PSA联合诊断AUC值高于PSA单独诊断(AUC＝0.871)。
4、验证ORM2蛋白单独诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的准确率
在验证集2中，测定各患者血浆中ORM2蛋白的含量，以验证集1得到的cutoff值0.284为诊断阈值，低于该阈值的预测为良性前列腺增生，高于该阈值的预测为前列腺癌。以预测正确的样本数量除以总样本数，即为目标蛋白区分前列腺癌与良性前列腺增生的准确率。如图3所示，验证集2中血浆ORM2蛋白诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的准确率为78.16％。血浆ORM2诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的AUC值高达0.863。
5、验证ORM2蛋白联合PSA诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的准确率
在验证集2中，测定各患者血浆中ORM2蛋白和PSA的含量，以验证集1得到的cutoff值0.310为诊断阈值，低于该阈值的预测为良性前列腺增生，高于该阈值的预测为前列腺癌。以预测正确的样本数量除以总样本数，即为目标蛋白联合PSA区分前列腺癌与良性前列腺增生的准确率。如图3所示，验证集2中血浆ORM2蛋白联合PSA诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的准确率为78.95％。血浆ORM2蛋白联合PSA诊断区分前列腺癌与良性前列腺增生患者的AUC值高达0.874。采用DeLong’s test比较不同模型的AUC是否有差异，结果显示ORM2+PSA联合诊断显著优于PSA单独诊断(AUC＝0.681)，差异有统计学意义(P＝1.73E-11)。
上述实验结果表明，ORM2蛋白对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景；ORM2蛋白联合PSA对区分前列腺癌和良性前列腺增生具有较高的诊断价值，诊断区分的准确率高，二者联合诊断效果显著优于PSA单独区分前列腺癌和良性前列腺增生的诊断效果，具有开发成诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒的前景。
实施例2：前列腺癌和前列腺增生的诊断区分试剂盒
一种诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒，含有检测ORM2蛋白的试剂。
一种诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒，含有检测ORM2蛋白和前列腺特异性抗原的试剂。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

Claims (2)

1.ORM2蛋白在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
2.ORM2蛋白联合前列腺特异性抗原在制备诊断区分前列腺癌和良性前列腺增生的试剂盒中的应用。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1703523A (zh) * 2002-09-30 2005-11-30 肿瘤疗法科学股份有限公司 诊断前列腺癌的方法
CN1958611A (zh) * 2005-10-31 2007-05-09 中资汉脉（北京）生物技术有限公司 血清类粘蛋白抗体及其用途
KR101738951B1 (ko) * 2015-12-09 2017-05-23 경북대학교 산학협력단 Orm2를 포함하는 신경염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물
CN110161235A (zh) * 2019-06-26 2019-08-23 江苏省中医院 三种血清蛋白联合用于强直性脊柱炎诊断的用途

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20190119636A1 (en) * 2017-10-23 2019-04-25 Poseida Therapeutics, Inc. Modified stem cell memory t cells, methods of making and methods of using same

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1703523A (zh) * 2002-09-30 2005-11-30 肿瘤疗法科学股份有限公司 诊断前列腺癌的方法
CN1958611A (zh) * 2005-10-31 2007-05-09 中资汉脉（北京）生物技术有限公司 血清类粘蛋白抗体及其用途
KR101738951B1 (ko) * 2015-12-09 2017-05-23 경북대학교 산학협력단 Orm2를 포함하는 신경염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물
CN110161235A (zh) * 2019-06-26 2019-08-23 江苏省中医院 三种血清蛋白联合用于强直性脊柱炎诊断的用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Abstract B41: Tumor endothelial cells as a targetable gateway that modulates access of drugs to cancer cells;Michael J. Greene等;《Cancer Research》;20180531;第78卷(第10期);全文 *

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